یک 13-یک هفته مطالعه سمیت تحت مزمن 2-(l-menthoxy) اتانول در موش‌های صحرایی F344

معرفی

2-(1-منتوکسی)اتانول (شماره CAS 38618-23-4) مایعی شفاف و بی رنگ با بوی مشخص است و به طور گسترده به عنوان طعم دهنده استفاده می شود. کمیته مشترک FAO/WHO در مورد افزودنی های غذایی (JECFA) 2-(ال متوکسیاتانول به عنوان یک طعم دهنده، به عنوان موادی که از نظر ساختاری با منتول مرتبط هستند طبقه بندی می شوند.1. بر اساس کلاس ساختاری عوامل طعم دهنده، 2-(ال متوکسی)اتانول به کلاس I اختصاص داده شد. در ایالات متحده و اروپا، سطوح دریافتی 2-(ال متوکسی)اتانول توسط انسان به ترتیب 12 میکروگرم در فرد در روز و 0}.01 میکروگرم در فرد در روز، هر دو زیر آستانه کلاس I یعنی 1800 میکروگرم در هر فرد در روز برآورد شد. بر اساس این برآوردها، در نظر گرفته می شود که 2-(1-منتوکسیاتانول ممکن است در طول استفاده معمول به عنوان یک عامل طعم دهنده، نگرانی های ایمنی ایجاد نکند.

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

As part of the risk assessment, it has been revealed that 2-(1-menthoxy)ethanol was not mutagenic in the Ames test, and the only in vivo study performed to date was an oral acute toxicity study in male and female rats (LD50: >2، 000 میلی‌گرم بر کیلوگرم وزن بدن [BW]) ۱. علیرغم استفاده از 2-(1-منتوکسی) اتانول به عنوان یک عامل طعم دهنده، اطلاعات محدودی در مورد سمیت دوز مکرر این ترکیب در دسترس است. آزمایشگاه ما سمیت چندین افزودنی غذایی، از جمله عوامل طعم‌دهنده نماینده هر دسته را در مدل‌های 2-7 جوندگان بررسی کرده است. برای شفاف‌سازی مشخصات سم‌شناسی و ایجاد یک سطح بدون مشاهده اثر نامطلوب (NOAEL)، ما یک مطالعه سمیت تحت مزمن هفته‌ای 2-(1-منتوکسی) اتانول را انجام دادیم. به صورت خوراکی به موش های F344 توسط گاواژ تجویز شد.

مواد و روش ها

آزمایش شیمیایی

2-(1-منتوکسی)اتانول (Lot No. 5I0002، خلوص 99.9%) تولید شده توسط Takasago Int. Corp. (توکیو، ژاپن) توسط بخش استانداردها و ارزیابی، بخش ایمنی مواد غذایی، وزارت بهداشت، کار و رفاه، ژاپن، با حمایت انجمن مواد طعم و عطر ژاپن (توکیو، ژاپن) ارائه شد. اگرچه ماده آزمایشی به‌عنوان مخلوطی از ایزومرهای نوری (شماره CAS 38618-23-4) ارائه شد، اما به‌عنوان L-انانتیومر (CAS شماره 75443-64-0) ​​توسط سازنده تأیید شد. گاواژ خوراکی با روغن ذرت (Wako Pure Chemical Industries، اوزاکا، ژاپن) به عنوان وسیله نقلیه به دلیل نامحلول بودن آبی و فرار بودن 2-({1-منتوکسی)اتانول به عنوان مسیر تجویز انتخاب شد. محلول‌های 2-(1-منتوکسی)اتانول روزانه بلافاصله قبل از تجویز تهیه می‌شد. پس از نگهداری به مدت 2 ساعت در دمای اتاق، نسبت‌های باقی‌مانده اتانول 2-(1-منتوکسی) در محلول‌های 4، 40 و 400 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر 96.8٪، 99.8٪ و 96.5٪ تأیید شد. به ترتیب توسط کروماتوگرافی گازی (انجمن بازرسی ژاپن از محیط زیست صنایع غذایی و غذایی، توکیو، ژاپن).

حیوانات آزمایشی

در مجموع، 40 موش صحرایی نر و 40 موش ماده بدون پاتوژن خاص (F344/DuCrlCrlj، 5 هفته) از آزمایشگاه رودخانه چارلز ژاپن (یوکوهاما، ژاپن) خریداری و پس از سازگاری به مدت یک هفته مورد استفاده قرار گرفتند. در طول این مطالعه، حیوانات در قفس‌های پلی کربنات با بستر تراشه‌ای نرم، در اتاقی با یک سیستم مانع برای کنترل چرخه نور/تاریکی (12 ساعت)، تهویه (نرخ تبادل هوا 18 بار در ساعت)، دما نگهداری شدند. 1±24 درجه) و رطوبت نسبی (5±55%). قفس و بستر چیپس هفته ای دو بار تعویض می شد. هر حیوانی دسترسی رایگان به آب لوله کشی و رژیم غذایی پایه داشت (CRF{12}}؛ مخمر شرقی، توکیو، ژاپن). در ابتدای آزمایش، حیوانات به طور تصادفی به چهار گروه 10 تایی موش صحرایی نر و ماده بر اساس وزن بدن اندازه‌گیری شده بلافاصله قبل از شروع درمان با ماده شیمیایی آزمایشی تقسیم شدند.

طراحی مطالعه

در یک مطالعه اولیه {0}}روزانه ارزیابی 2-(1-منتوکسی) اتانول در دوزهای 0، 200، 400 و 800 میلی‌گرم بر کیلوگرم وزن بدن روز، وزن مطلق و نسبی کبد به طور قابل توجهی در تمام گروه های درمان شده از هر دو جنس افزایش یافت (داده ها نشان داده نشده است). بر اساس این نتایج، ما دوزهای 2-(1-منتوکسی) اتانول 0، 15، 60 و 250 میلی‌گرم بر کیلوگرم وزن بدن در روز را برای تجویز به موش‌های نر و ماده در حال حاضر انتخاب کردیم. 13}} هفته مطالعه سمیت.

شرایط عمومی و مرگ و میر روزانه مورد ارزیابی قرار گرفت. وزن بدن، و همچنین مقدار جیره عرضه شده و باقیمانده، یک بار در هفته در طول دوره آزمایش اندازه گیری شد. تمام موش‌ها پس از اتمام درمان، یک شبه ناشتا بودند و نمونه‌های خون برای هماتولوژی و بیوشیمی سرم از آئورت شکمی تحت بی‌هوشی استنشاقی عمیق با استفاده از ایزوفلوران جمع‌آوری شد. طرح مطالعه توسط دستورالعمل تعیین افزودنی های غذایی و تجدید نظر در استانداردهای استفاده از افزودنی های غذایی ژاپن (1996) و توسط کمیته مراقبت از حیوانات و استفاده از موسسه ملی علوم بهداشت ژاپن تایید شده است.

هماتولوژی و بیوشیمی سرم

پارامترهای هماتولوژیک زیر با استفاده از آنالایزرهای هماتولوژی خودکار ProCyte Dx (IDEXX Laboratories, Westbrook, ME, USA) آنالیز شدند: تعداد گلبول های سفید (WBC)، تعداد گلبول های قرمز (RBC)، غلظت هموگلوبین (HGB)، هماتوکریت (HCT) میانگین حجم بدنی (MCV)، میانگین هموگلوبین بدنی (MCH)، میانگین غلظت هموگلوبین بدنی (MCHC)، تعداد پلاکت ها (PLT) و سلول های لکوسیتی افتراقی، از جمله نوتروفیل ها (Neut)، لنفوسیت ها (لنف)، مونوسیت ها (مونو)، ائوزینوفیل ها (ائوزینو) و بازوفیل ها (Baso). آنالیز بیوشیمیایی سرم توسط مخمر شرقی برای پارامترهای زیر انجام شد: پروتئین تام (TP)، آلبومین (Alb)، نسبت آلبومین به گلوبولین (A/G)، بیلی روبین تام (Bil)، گلوکز، کلسترول تام (T-Chol)، تری گلیسیرید (TG)، نیتروژن اوره (BUN)، کراتینین (Cre)، کلسیم (Ca)، فسفر معدنی (IP)، سدیم (Na)، پتاسیم (K)، کلر (Cl)، آسپارتات آمینوترانسفراز (AST)، آلانین آمینوترانسفراز (ALT)، آلکالین فسفاتاز (ALP)، و گلوتامیل ترانس پپتیداز (-GTP).

وزن اندام ها و ارزیابی هیستوپاتولوژیک

کالبدگشایی کامل برای همه حیوانات انجام شد و مغز، تیموس، ریه ها، قلب، طحال، کبد، غدد فوق کلیوی، کلیه ها، بیضه ها و تخمدان ها وزن شدند. این اندام ها و همچنین بافت های نخاع، عصب سه قلو، غده هیپوفیز، حفره بینی، غدد بزاقی، زبان، مری، نای، آئورت، غده تیروئید، غده پاراتیروئید، پانکراس، معده، روده های کوچک و بزرگ، زیر فکی و مزانتریک غدد لنفاوی، واژن، رحم، مثانه، غده پروستات، وزیکول‌های منی، اپیدیدیم، استخوان ران و جناغ جناغی با مغز استخوان، مهره‌ها، ماهیچه‌های اسکلتی، عصب سیاتیک، پوست و غده پستانی در فرملین بافر خنثی 10 درصد تثبیت شدند. سپس مقاطع پارافینی تهیه و برای بررسی هیستوپاتولوژیک با هماتوکسیلین و ائوزین رنگ آمیزی شدند. بیضه ها و چشم های دارای غدد هاردرین به ترتیب در فیکساتور Bouin و محلول Davidson ثابت شدند. بافت های استخوانی شامل حفره بینی، مهره ها، جناغ سینه و استخوان ران با استفاده از مخلوطی از اسید فرمیک 10 درصد و فرمالین بافر 10 درصد به مدت حداکثر 2 هفته کلسیم زدایی شدند. ارزیابی هیستوپاتولوژیک برای تمام بافت های به دست آمده از حیوانات در گروه کنترل انجام شد و گروه بالاترین دوز را تجویز کرد مگر اینکه ضایعات مربوط به درمان مشاهده شود.

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای بهبود ایمنی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ایمونوهیستوشیمی برای 2u-گلوبولین

در موش‌های صحرایی نر، تجمع ۲u-گلوبولین در کلیه با آنالیز ایمونوهیستوشیمی بخش‌های تعبیه‌شده در پارافین مورد بررسی قرار گرفت. برای بازیابی آنتی ژن، بخش های به دست آمده از 5 موش در هر گروه با پروتئیناز K (DAKO، Glostrup، دانمارک) به مدت 1 دقیقه در دمای اتاق انکوبه شدند. تمام مقاطع در محلول 3% H2O2/ متانول به مدت 10 دقیقه در دمای اتاق غوطه ور شدند تا فعالیت آندوژن پراکسیداز غیر فعال شود. پس از مسدود کردن واکنش‌های غیراختصاصی با 10 درصد سرم خرگوش نرمال، بخش‌ها با یک آنتی‌بادی اولیه برای 2uglobulin (رقیق‌شده 1:400؛ آنتی‌بادی ضد موش 2u-گلوبولین؛ R&D Systems، Minneapolis، MN، USA) یک شبه در دمای 4 درجه 8 انکوبه شدند. تجسم اتصال آنتی بادی با استفاده از کیت ABC VectaStain Elite (Vector Laboratories، Burlingame، CA، USA) و 3،3'-diaminobenzidine انجام شد. تمام مقاطع با هماتوکسیلین ضد رنگ آمیزی شدند.

تحلیل آماری

واریانس در مقادیر داده ها برای وزن بدن در طول دوره آزمایش، و همچنین برای هماتولوژی، بیوشیمی سرم، و وزن اندام، برای همگنی با استفاده از آزمون بارتلت ارزیابی شد. برای داده های همگن و ناهمگن به ترتیب از تحلیل واریانس یک طرفه و آزمون کروسکال والیس استفاده شد. برای تعیین تفاوت های آماری معنی دار، از آزمون مقایسه چندگانه دانت برای مقایسه گروه های کنترل و تیمار استفاده شد. مقایسه‌های بروز و درجات هیستوپاتولوژیک به ترتیب با استفاده از آزمون احتمال دقیق فیشر و آزمون U Mann-Whitney مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. مقادیر P از<0.05 were considered statistically significant.

نتایج

پارامترهای درون زندگی، هماتولوژی و بیوشیمی سرم

هیچ علائم بالینی قابل توجهی در طول دوره آزمایشی مشاهده نشد و همه حیوانات تا زمان کالبدگشایی برنامه ریزی شده زنده ماندند. علاوه بر این، هیچ تفاوت معنی‌داری در وزن بدن و دریافت غذای روزانه در موش‌های صحرایی نر و ماده مشاهده نشد (شکل 1A و B).

داده های هماتولوژی و بیوشیمی سرم به ترتیب در جداول 1 و 2 نشان داده شده است. آنالیزهای هماتولوژیک نشان داد که HGB، HCT، MCV، و MCH به طور قابل توجهی کاهش یافته و PLT در موش های صحرایی نر که 250 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن در روز 2-(1-منتوکسی) اتانول تجویز شده بودند، افزایش یافته است (جدول 1). در بیوشیمی سرم، افزایش قابل توجهی در TP، T-Chol و Ca و کاهش Bil و ALP در مردان گروه mg/kg 250 مشاهده شد (جدول 2). افزایش معنی داری در Cre و کاهش A/G در مردان گروه های 60 و 250 میلی گرم بر کیلوگرم مشاهده شد. در زنان، افزایش قابل توجهی در Ca و کاهش ALP در گروه های 60 و 250 میلی گرم بر کیلوگرم ثبت شد، در حالی که افزایش T-Chol و کاهش A/G، Bil، TG، AST و ALT در 250 میلی گرم مشاهده شد. گروه / کیلوگرم اگر چه افزایش قابل توجهی در TG و کاهش کلر در مردانی که mg/kg 60 تجویز شده بودند مشاهده شد، فقدان رابطه دوز نشان داد که این تفاوت‌ها با قرار گرفتن در معرض ماده آزمایشی مرتبط نبودند.

وزن اندام ها

داده های مربوط به وزن اندام ها در جدول 3 خلاصه شده است. وزن مطلق و نسبی کبد به طور قابل توجهی در هر دو جنس از گروه mg/kg 250 افزایش یافت (جدول 3). افزایش قابل توجهی در وزن نسبی کبد در مردان گروه mg/kg 60 مشاهده شد. در مردان، وزن مطلق و نسبی کلیه در گروه‌های 60 و 250 میلی‌گرم بر کیلوگرم افزایش معنی‌داری داشت. در گروه مردان 250 میلی گرم بر کیلوگرم، افزایش معنی داری در وزن مطلق و نسبی غدد فوق کلیوی و وزن نسبی طحال و بیضه مشاهده شد.

هیستوپاتولوژی و ایمونوهیستوشیمی

داده های مربوط به یافته های هیستوپاتولوژیک و ایمونوهیستوشیمی به ترتیب در جداول 4 و 5 خلاصه شده است. یافته‌های هیستوپاتولوژیک نشان داد که فراوانی تجمع گرانول‌های ائوزینوفیلیک (شکل 2A-D)، توبول‌های بازوفیل، و گچ هیالین، و همچنین التهاب بینابینی کانونی در کلیه، در گروه‌های درمانی تماماً مرد در مقایسه با گروه کنترل به طور قابل‌توجهی افزایش یافته است. گروه (جدول 4). بر اساس آنالیزهای ایمونوهیستوشیمی، موش‌های نر تحت درمان با ماده آزمایشی، افزایش واکنش‌پذیری 2u-گلوبولین را در سلول‌های اپیتلیال لوله‌های پروگزیمال نشان دادند که وابستگی واضح به دوز را نشان داد (شکل 2E-H) (جدول 5).

در کالبدگشایی، یک موش صحرایی نر در گروه 250 میلی‌گرم بر کیلوگرم به دلیل یک نفروبلاستوما مشخصه بافت‌شناسی، بزرگی شدید کلیه راست را نشان داد. اگرچه نفروبلاستوما در اکثر سویه های موش غیر معمول است، این مورد تصادفی در نظر گرفته شد، زیرا هیچ حیوان دیگری ضایعات مشابهی را نشان نداد. علاوه بر این، در مطالعات سرطان‌زایی دهان، میزان بروز نفروبلاستوما خود به خود در موش‌های صحرایی نر F344/DuCrlCrlj بین 0-2.0%10 بود. اگرچه چندین ضایعات به صورت پراکنده در سایر اندام ها شناسایی شدند، هیچ تغییر قابل توجهی وابسته به درمان در بروز این ضایعات آشکار نشد.

بحث

تا به امروز، 24 عامل طعم‌دهنده، از جمله اتانول 2-(1-منتوکسی) توسط JECFA به‌عنوان موادی که ساختاری مرتبط با منتول دارند ارزیابی شده‌اند و همه آنها در سطوح تخمینی فعلی به‌عنوان "بدون نگرانی ایمنی" فهرست شده‌اند. از دریافت 1، 11. 2-(1-منتوکسی) اتانول در زیر گروهی از الکل‌ها یا اترهای آلی‌حلقه‌ای طبقه‌بندی می‌شود و عمدتاً با اسید گلوکورونیک و به دنبال آن دفع ادراری کونژوگه می‌شود. اگرچه مقادیر LD50 خوراکی این مواد در جوندگان نسبتاً بالا است، داده‌های حاصل از مطالعات سمیت با دوز مکرر محدود است. یک مطالعه مسمومیت با دوز مکرر در هفته نشان داد که منتیل پیرولیدون کربوکسیلات (CAS No. 68127-22-0)، ترکیبی که از نظر ساختاری با منتول مرتبط است، می‌تواند با افزایش وزن نسبی کبد و کلیه در مردان و زنان مرتبط باشد. موش های ویستار تجمع 2u-گلوبولین در لوله های پروگزیمال موش های نر نیز با دوز 1111 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن در روز مشاهده شد و NOAEL 109 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن در روز 1 تعیین شد.

در مطالعه 13-هفته‌ای سمیت تحت مزمن 2-(1-منتوکسی)اتانول، هیچ تغییر سم‌شناسی در وضعیت عمومی، وزن بدن و مصرف غذا مشاهده نشد. پس از ارزیابی هماتولوژیک، کاهش HGB (96.6٪ نسبت به مقادیر میانگین کنترل)، HCT (96.3٪)، MCV (98.4٪)، و MCH (98.2٪) و افزایش PLT (111٪) در مردان مشاهده شد. گروه 250 میلی گرم بر کیلوگرم، که به عنوان تأثیرات سمی درمان 2-(1-منتوکسی) اتانول در نظر گرفته شد. وزن کبد هر دو مطلق (115 درصد در هر دو جنس) و نسبی (119 درصد در مردان و 111 درصد در زنان) در گروه‌های mg/kg 250 به طور معنی‌داری در هر دو جنس افزایش یافت. اگرچه هیچ تغییر هیستوپاتولوژیک در کبد وجود نداشت، سطوح سرمی T-Chol (110٪ در مردان و 121٪ در زنان) و TP (105٪ در مردان) و کاهش TG (60.1٪ در زنان) در 250 مورد افزایش یافت. گروه های mg/kg نشان دهنده تغییرات سمی مرتبط با متابولیسم لیپید و سنتز پروتئین در کبد است. کاهش HGB و MCH و افزایش PLT، T-Chol و TP در مردان و کاهش TG و افزایش وزن مطلق و نسبی کبد در هر دو جنس نیز با اهمیت آماری در مطالعه اولیه 28-روزه (داده‌ها نشان داده نشده است) شناسایی شد. ، تأیید می کند که این پارامترهای بیوشیمیایی خونی و سرمی تغییر یافته، و همچنین وزن کبد، اثرات تصادفی نبوده بلکه اثرات مربوط به ماده آزمایشی است. در مقابل، افزایش قابل توجه وزن نسبی کبد در گروه مردان 60 میلی گرم بر کیلوگرم در مطالعه حاضر با افزایش وزن مطلق یا تغییر در پارامترهای بیوشیمیایی مرتبط همراه نبود که نشان می دهد این افزایش یک تغییر تطبیقی ​​بود.

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

افزایش قابل توجه وزن مطلق (120٪) و نسبی (118٪) وزن غدد فوق کلیوی در گروه 250 میلی گرم بر کیلوگرم مرد با ماده شیمیایی آزمایش مرتبط در نظر گرفته شد. علاوه بر این، افزایش وزن مطلق و نسبی غدد آدرنال در هر دو جنس، وابستگی به دوز واضحی را در مطالعه مقدماتی 28-روزه نشان داد (داده‌ها نشان داده نشده است)، که نشان دهنده ارتباط با درمان شیمیایی آزمایشی است. اگرچه هیپرتروفی آدرنال می‌تواند ناشی از استرس باشد، اما هیچ یافته‌ای حاکی از استرس، مانند کاهش افزایش وزن بدن یا آتروفی تیموس و سایر اندام‌های لنفاوی، هم در مطالعات حاضر و هم در مطالعات اولیه وجود نداشت. از آنجایی که ممکن است تغییرات هیستوپاتولوژیک در غده آدرنال حتی با اختلال در تولید گلوکوکورتیکوئید در موارد مهار آنزیم های مربوط به استروئیدوژنز وجود نداشته باشد، این احتمال که افزایش وزن غده آدرنال یک یافته سمی باشد را نمی توان رد کرد. در مقابل، افزایش وزن نسبی طحال و بیضه در گروه 250 میلی گرم بر کیلوگرم مرد، که در مطالعه اولیه مشاهده نشد، از نظر سم شناسی به دلیل عدم وجود ضایعات هیستوپاتولوژیک یا افزایش قابل توجه وزن مطلق در نظر گرفته شد. به طور مشابه، بیوشیمی سرم کاهش A/G و افزایش کلسیم را در هر دو جنس نشان داد، که در نظر گرفته شد که هیچ اهمیت سم شناسی ندارد، با توجه به اینکه هیچ ناهنجاری در پارامترهای مرتبط مشاهده نشد. علاوه بر این، کاهش سطوح Bil و ALP در هر دو جنس و کاهش AST و ALT در زنان برخلاف اثرات سمی مورد انتظار بود و معنی دار تلقی نشد.

نفروپاتی مزمن با توبول های بازوفیل، گچ هیالین و التهاب بینابینی کانونی با اهمیت آماری در مردان همه گروه های تحت درمان مشاهده شد. علاوه بر این، افزایش Cre سرم و وزن مطلق و نسبی کلیه در گروه مردان 60 و 250 میلی گرم بر کیلوگرم مشاهده شد. این تغییرات در گروه های درمانی زن مشاهده نشد. در این موارد، میزان تجمع گرانول‌های ائوزینوفیلیک در سلول‌های اپیتلیال لوله پروگزیمال به صورت آشکار وابسته به دوز افزایش یافت. این گرانول ها به عنوان 2u-گلوبولین توسط ایمونوهیستوشیمی تایید شدند که نشان دهنده وقوع نفروپاتی 2u-گلوبولین است. 2u-گلوبولین های متصل به مواد شیمیایی خاص، مانند d-limonene، در لیزوزوم ها تجمع می یابند و در لوله های پروگزیمال به صورت گرانول ائوزینوفیلیک یا هیالین مشاهده می شوند. این تجمع می تواند به سلول های اپیتلیال آسیب برساند و منجر به نفروپاتی پیشرونده مزمن و در نتیجه تشکیل تومور شود. بنابراین، اگرچه NOAEL برای 2-(1-منتوکسی) اتانول مرتبط با نفروپاتی 2u-گلوبولین در کلیه موش‌های صحرایی نر شناسایی نشد، این نوع نفروپاتی طبق گزارش‌ها مختص موش‌های صحرایی نر است و بنابراین مربوط به انسان نیست. ارزیابی ریسک 13. افزایش خطر نارسایی کلیه با واسطه مکانیسم های مربوط به تجمع 2u-گلوبولین بسیار غیرممکن است، زیرا این پروتئین در انسان وجود ندارد. بنابراین، منطقی تلقی شد که تغییرات مرتبط با نفروپاتی مزمن مشاهده شده در مردان از تعیین NOAEL حذف شود.

در نتیجه، مطالعه سمیت مزمن تحت مزمن 13-هفته‌ای نشان داد که تیمار اتانول 250 میلی‌گرم بر کیلوگرم وزن بدن در روز 2-(1-منتوکسی) باعث تغییرات سمی در هماتولوژی، بیوشیمی سرم و وزن اندام‌ها می‌شود. در موش های صحرایی نر و ماده F344. بر اساس نتایج مشاهده شده، NOAEL 2-(1-منتوکسی)اتانولبرای هر دو جنس 60 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن در روز ارزیابی شد.

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%