پروفایل شیمیایی، فعالیت سیتو سمی و کاهش استرس اکسیداتیو عصاره های مختلف سرنگا ولگاریس L. قسمت 1

لطفا تماس بگیریدoscar.xiao@wecstanche.comبرای کسب اطلاعات بیشتر

چکيده:Syringa vulgaris L. (یاس بنفش مشترک)یکی از محبوب ترین گونه های طبیعی است، اما همچنین یک منبع امیدوار کننده نه به طور جامع مورد مطالعه ترکیبات زیست فعال با پتانسیل درمانی مهم است. مطالعه حاضر با هدف مشخص کردن ترکيب شيميايی و بررسی خواص آنتی اکسيدانی و سيتوتوکسی عصاره های اتانولي حاصل از گل، برگ، پوست و ميوه S.vulgaris L طراحی شده است. پروفایل شیمیایی عصاره های قوم شناسی با استفاده از روش های کروماتوگرافی (HPLC-DAD-ESI+، GC-MS) و طیفی (UV-Vis، FT-IR) مورد بررسی قرار گرفت، در حالی که اثر حفاظتی علیه رادیکال های آزاد در محیط آزمایشگاهی با سنجش های شیمیایی مختلف (DPPH، FRAP، CUPRAC) مورد ارزیابی قرار گرفت. فعالیت سیتوتوکسیک بر روی دو خط سلولی توموری به نام های HeLa, B16F10 با استفاده از آزمون MTT مورد آزمایش قرار گرفت. مقادیر قابل توجهی از اجزای شیمیایی آزاد یا گلیکوسیل شده متعلق به کلاس های ساختاری مختلف از نظر درمانی مهم، مانند فنل پروپانوئیدها (سرینگین، استونید، اکیناکوزید)،فلاونوئیدها(مشتقات کوئرستین، کایمفرول)، و secoiridoids (secologanoside، oleuropein، 10 هیدروکسی oleuropein، demethyloleuropein، سیرینگالکتون A، نوژنید، lingstroside)، به ترتیب برای عصاره گل، برگ و پوست به دست آمد. علاوه بر این، آزمایش های MTT به پتانسیل سیتوتوکسی قابل توجهی اشاره کرد که به شیوه ای غیر وابسته به دوز نسبت به خطوط توموری بیان شده است. روش های انجام شده نشان داد که عصاره S.vulgaris، به ویژه متعلق به گل و برگ، نشان دهنده منابع ارزشمند ترکیبات با پتانسیل آنتی اکسیدانی و ضد توموری است.

کليدواژه:Syringa vulgaris L. گل; پوست کندن؛ برگ؛ میوه؛پلی فنول های اولاسه;secoiridoids;آنتی اکسیدان;سیتو توکسیک

لطفا برای دانستن اطلاعات بیشتر اینجا را کلیک کنید

1. مقدمه

Oleaceae یک خانواده مهم در میان گیاهان گل دار، شامل 25 ژنرا، با بیش از 600 گونه است که در سراسر جهان در طیف گسترده ای از زیستگاه ها گسترش یافته است، به خصوص در آب و هوای معتدل و زیر استوایی[1،2]. شناخته شده ترین ژنر متعلق به این خانواده اولا، فورسیتیا، Fraxinus, Syringa, Jasminum, and Ligustrum, including species that have economic importance, food and oil plants, perfumed plants, or ornamental species [2]Among these genera, in the European flora few species can be found, especially belonging to the genera Fraxinus(e.g., Fraxinus excelsior L.), Ligustrum (e., Ligustrum vulgare L.), Syringa (مانند, Syringa vulgaris L.) و Forsythia [1]. جنس سرنگا یکی از شناخته شده ترین در میان این جنس است که در بخش غربی و شرقی اوراسیا گسترش یافته و شامل دو گونه به نام های Syringa vulgaris Land Suringa josikaea I. Jacg.ex Rchb است. این دو گونه در طول قاره اروپا به طور متفاوتی گسترش یافته اند: S.vulgaris را می توان در شبه جزیره بالکان و در بخش جنوبی کارپات ها، S. josikaea در بخش های شمالی کارپاتیان یافت، و هر دو گونه را می توان در بخش های غربی این قاره یافت [3]. این جنس بیش از ۴۰ گونه توزیع شده در سراسر اروپا و آسیا را شامل می شود. بیشتر این گونه ها درختچه ها و درختان شیری هستند [۴].

گونه S. Vulgaris، یاس بنفش مشترک، به طور گسترده ترین گسترش از این دو گونه است، که به عنوان یک گونه زیورالو در سراسر قاره اروپا کشت [1] و برای صنعت عطر [5]. علاوه بر این، گونه ها استفاده های مختلفی را به ویژه در طب سنتی شناخته اند. محصول دارویی بیشتر استفاده می شود توسط آذین نشان داده شده است. در یونان از تزریق گل آذین ها به صورت داخلی برای درمان دردسرهای گوارشی (نفخ) و به صورت خارجی به عنوان ماساژ برای درمان نبوت و روماتیسم استفاده می شود [۶]. استفاده خارجی مشابه در طب سنتی صربستان برای این محصول دارویی در ترکیب با میوه Aesculus hippocastanum ذکر شده است, برای درمان واریس و روماتیسم [7]. گل های گونه ها نیز به عنوان ضد پیرتیک و پیش غذا به عنوان یک اتساع در بلغارستان توصیه می شوند، در حالی که طب سنتی ایتالیایی استفاده از پوست، میوه، و برگ را نیز به عنوان یک decoction برای اثر بینی و ضد پیرتیک خود توصیف می کند [8]. برگ گونه ها در اتنو فارماکولوژی مجارستان برای درمان زخم های خونریزی، درد مفاصل و عضلانی توصیه می شود [9]. گونه های مشابه متعلق به جنس مشابه (مانند، S.oblata Lindl.، S.pinnatifolia Hemsl.، S.reticulata (Blume)H. Hara var. amurensis(Rupr.) I.S.Pringle, S.pubescens Turcz. and S.pubescens subsp. patula (Palib) M. C. Chang & X. L. Chen.) ثابت کرد که استفاده های سنتی مشابه. به این ترتیب، منابع چینی به استفاده سنتی از تمام این محصولات دارویی گیاهی(گل، برگ، پوست) استناد می کنند، بلکه ریشه ها، شاخه ها، و میوه ها، به ویژه برای درمان اختلالات گوارشی، التهابات مفصلی، عفونت ها، یا آسم [5].

سیستانچه می تواند ایمنی را بهبود بخشد

داده های علمی در مورد گونه ها از استفاده هایی که در طب سنتی مورد استناد قرار می گیرد، متصل شدن به آنتی اکسیدان[۱۰٬۱۱]، ضد میکروبی [۱۲]، ضد التهاب[۱۳٬۱۴]، و خواص ضد پیرتیک[۴٬۵ و اثرات مهاری بر استاز خون[۱۵] حمایت می کند. مطالعات بر روی گونه های مشابه متعلق به جنس سرینگا، به عنوان S.pinnatifolia[12،16]، اما اکثریت قریب به اتفاق بر روی گونه S.vulgaris انجام شد[1,10,11,13-15]. ترکیباتی که مسئول این فعالیت ها هستند sesquiterpenes[12]، مشتقات هیدروکسی سینامویل و سیکویریدوئیدها یا گلیکوزیدهای secoiridoid[1,13], ترکیبات فنلی [10,11,14,15], lignans [14,16], phenylpropanoids و iridoids [14]. با توجه به محصولات دارویی گیاهی که مورد آزمایش قرار گرفتند، آنها با گل [10,13,15], پوست [11,14,16, ساقه[12], میوه [10], برگ[11] و یا همه این [1]. با این وجود، اطلاعات مربوط به این گونه، در مورد استفاده های دارویی آن، و بر روی ترکیباتی که مسئول این استفاده ها هستند، کمیاب باقی می مانند [۱]. با در نظر گرفتن همه این ها، گونه های جنس سرینگا به نظر می رسد منابع مهمی از ترکیبات هستند که در عین حال استفاده های دارویی مهمی را اثبات می کنند. این گونه ها نیاز به بررسی بیشتر، به منظور آوردن شواهد بیشتر برای معرفی خود را در درمان و برای بررسی مواد زیست فعال خود و مکانیسم های عمل زمینه ای اثرات فارماکولوژیک آنها نشان می دهند، به عنوان این داده ها کمیاب باقی می ماند 1،4]. بنابراین تازگی و اصالت این مطالعه دقیقاً بر اساس هدف اصلی آن نشان داده می شود که با ارزیابی ترکیب شیمیایی و آزمایش فعالیت های آنتی اکسیدانی و سیتو سمی عصاره های متعلق به بخش های مختلف گونه: گل، برگ، پوست، و میوه نشان داده می شود. همچنین هدف از این مطالعه انجام مقایسه ای بین این عصاره ها با توجه به ترکیب و فعالیت های زیستی آنها با هدف نهایی برجسته کردن پتانسیل گل ها است که ممکن است نشان دهنده یک دارویی مهم باشد

محصولی که پتانسیل ضد تکثیری دارد و ممکن است در درمان اشکال مختلف سرطان مورد استفاده قرار گیرد.

2. نتایج و بحث

2.1.HPLC - پدر - ESI + تجزیه و تحلیل

نتایج بدست آمده برای تجزیه و تحلیل HPLC-DAD-ESI+ ترکیبات فنلی را می توان در جدول 1 یافت.

تجزیه و تحلیل انجام شده به وضوح تفاوت معنی داری در مورد تعداد ترکیبات شیمیایی در عصاره S. Vulgaris به دست آمده از برگ، پوست، میوه، و گل نشان داد. مقادیر مهمی از اجزای شیمیایی آزاد یا گلیکوسیل شده متعلق به کلاس های مختلف ساختاری از نظر درمانی مهم، مانند فنل پروپانوئیدها (سرنگین، acteoside, echinacoside), flavonoids(quercetin and kaempferol derivatives),secoiridoids (secologanoside, oleuropein, 10-hydroxy oleuropein, demethyloleuropein, syringalactone A, nuzhenide, lingstroside)and p-coumaroyl-glycolic acid were obtained. 12 ترکیب از 14 ترکیب شناسایی شده در تمام عصاره های آزمایش شده شناسایی و کمی شدند، در حالی که استونید و اولوکوپین در عصاره میوه یافت نشد (جدول 1). علاوه بر این، مقادیر قابل توجهی بالا از برخی از ترکیبات شناسایی شده، یعنی p-coumaroyl-glycolic acid (6748.16 μg/g), secologanoside (27,663.00 μg/g), acetonide (9408.78 μg/g), quercetin-rutinoside (7642.07 7642.07 07 μg/g), quercetin-rutinosideug/g), dimethyl oleuropein (35,729.89 μg/g), kaempferol-glucoside (3814.93 ug/g), nuzhenide(15,893.68 ug/g) در مورد عصاره گل (جدول 1) مشاهده شد. نوجنید یک ترکیب سیکوئیریدوئیدیک با فعالیت آنتی اکسیدانی قوی، شبیه به اولوکوپین و مشتقات آن [۴٬۱۰] است.

عصاره پوست دارای بیشترین غلظت در سرنگین (74,535.30 ug/g), sy-ringalactone A(17,161.82 میکروگرم در گرم), 10-هیدروکسی oleuropein (8943.89 ug/g), echinacoside (38,299.52 ug/g), ligstroside (24,820.71 ug/g), oleuropein (9139.07 ug/g), oleuropein-aglycone(42,796.39 ug/g)(جدول 1). این نتایج تحت خط پوست عصاره محتوای غنی در اکیناکوزید, گلیکوزید فنل پروپانوئید به رسمیت شناخته شده برای خواص ایمنی و تی اکسیدان, و سرنگین, پلی پروپانوئید گلیکوزید با ایمونوستیمولاتوری, آنتی اکسیدان, و خواص ضد دیابت [17]. همچنین حضور سرنگین پوست نیز در سایر بخش های مورد تجزیه و تحلیل گیاه (98/653 میکروگرم بر گرم برای عصاره گل 97/9245 میکروگرم در گرم برای عصاره برگ) برجسته شد.

به طور کلی عصاره گل ها بیشترین و متعادل ترین محتوای ترکیبات فنل پروپانوئید، فلاونوئید و سیکوئیریدوئید را نشان داد، در حالی که عصاره میوه کمترین محتوای این ترکیبات فعال را ارائه کرد.

اگرچه ادبیات اطلاعات دقیقی را در مورد پروفایل شیمیایی عصاره های اتانولیک مستند نمی کند، اما ترکیب پلی فنولیک در مورد عصاره های به دست آمده از گل یاس بنفش [10,15]، میوه [10]، پوست[11,14]، و برگ [11,15,18] ارزیابی شد. تجزیه و تحلیل HPLC-DAD-ESI-MS عصاره های متانولی به دست آمده از گل یاس بنفش و میوه و نشان دهنده 34 ترکیب شامل 18secoiridoids، هفت فنیل پروپانوئید، چهار فلاونوئید، و پنج فنل با وزن مولکولی پایین بود. گل ها حاوی مقادیر قابل توجهی از فنیل پروپانوییدها (استونید، 2.48٪; echinacoside, 0.75٪) و oleuropein (0.95٪), در حالی که متابلیت های ثانویه عمده میوه به عنوان secoiridoids oleuropein (1.09٪)و nuzhenide (0.42٪)[10]. مطالعه دیگری به یک پروفایل پیچیده متابولیت و پتانسیل آنتی اکسیدانی در مورد پوست سرینگا ولگاریس و عصاره های متانولی برگ اشاره کرد. در مجموع 33 ترکیب (15 secoiridoids، 6 فنل پروپانویید، 3 فلاونوئید، 3 lignans، و 6 فنل با وزن مولکولی پایین) توسط HPLC-DAD-ESI-TOF و HPLC-DAD-ESI-MS/MS شناسایی شدند. ترکیبات فنلی اصلی در پوست و برگ به ترتیب با سرنگین (52/2 درصد) و روتین (13/1 درصد) نشان داده شدند [11]فیلیپک و همکارانش شناسایی 22 ترکیب را گزارش کردند: پنج ترکیب فنلی ساده، چهار lignans، سه فنیلتانوئید، یک فنیلتانوئید استری با اولئوسید و هشت secoiridoids و iridoids. از میان این ترکیبات، سرنگین، استونید، نوجنید، اکیناکوساید، اولوکوپین، و لیگستروساید مهم ترین [۱۴] بودند.

با در نظر گرفتن همه این ها، مطالعه حاضر تازگی و اصالت، بودن، به بهترین دانش ما، تنها مقایسه چهار عصاره مختلف (به دست آمده از گل، برگ، پوست و میوه)، گزارش مقادیر زیادی از ترکیبات زیست فعال در ترکیب خود و نشان دادن بنابراین که گل نشان دهنده مهم ترین منبع اصول فعال است.

2.2.طیف ارتعاشی IR از سرنگا ولگاریس L., پوست و عصاره میوه

طیف سنجی مادون قرمز یک روش تحلیلی مؤثر و غیر هدفمند است که می تواند به طور غیر مخرب و مقرون به صرفه کیفیت ذاتی گیاهان مختلف را تشخیص دهد [19,20]. بر اساس نتایج F-IR می توان فهرستی از قله ها را برجسته کرد که می توان آن ها را به یک کلاس بیوشیمیایی متفاوت از ترکیبات اختصاص داد که می تواند منجر به همبستگی بهتری بین ساختار شیمیایی و ویژگی های طیف سنجی گیاهان شود [۲۱]. بنابراین، این تکنیک همچنین واگذاری دقیقی از گروه های عملکردی، انواع پیوند، و انطباق های مولکولی درون بافت گیاهی و سلول ها را فراهم می کند [20].

طیف FTI-IR عصاره های S. Vulgaris تجزیه و تحلیل شده برخی از تغییرات طیفی را نشان داد (شکل 1). همچنین همانطور که می توان در جداول 1 و 2 مشاهده کرد، گروه های اصلی عملکردی اکیناکوزید(یک فنیل پروپانوئید)، روتین(یک فلاونوئید)، و ایریدوئیدها در طیف FT-IR عصاره های S.vulgaris نشان داده شدند. به این ترتیب قله های بین 814 تا 816 سانتی متر تا 1515-1513 سانتی متر، ویژگی سیگنال های مرتبط با فنل پروپانوئید اکیناکوزید [21,22] بودند. در محدوده مشابهی، ارتعاشات کششی مرتبط با ترپن C=O از سال ۱۶۹۴ تا ۱۷۰۲ سانتی متر-I[۲۳] به گروه کمک کرده بود. یکی دیگر از قله های مرتبط با ترپن در محدوده ۲۹۰۱ تا ۲۹۰۹ سانتی متر-۱ مشاهده شد و ناشی از لرزش کششی C-H [۲۰٬۲۳-۲۵] بود. علاوه بر این، قله های یافت شده بین ۸۸۵ تا ۸۹۰ سانتی متر- Iand ۲۹۲۵-۲۹۳۳ سانتی متر با حضور CH، گروه عملکردی همراه بودند، در حالی که قله بین ۱۲۵۶ تا ۱۲۶۸ سانتی متر-۱ را می توان به لرزش کششی C-O از هر دو ترپن و ایریدوئید نسبت داد [۲۳]. قله قوی در محدوده 1076-1079 cm-1was ناشی از iridoids کشش لرزش C-OH [24-26]. وجود فلاونول ها در عصاره های مورد تجزیه و تحلیل S.vulgaris نیز می تواند تایید شود. بنابراین، اوج رخ داده در محدوده 1596-1608 سانتی متر- I را می توان به ارتعاشات کششی C=C از ساختار هر دو فلاونول و ایریدوئیدها نسبت داد [24,26-28]. به طور مشابه، در طیف FT-IR عصاره های مورد تجزیه و تحلیل S.vulgaris، فلاونول ها دارای C-O-C، C=Cand CH؛ گروه های عملکردی که قله های بین 924-930 سانتی متر-1,1159-1162 سانتی متر- Iand 1385-1404 cm-1 به ترتیب [20,23,27-29](جداول2 و 3.

مشاهده دیگر این است که باندهای منطقه ۱۰ تا ۱۸۰۰ سانتی متر در مقایسه با باندهای زیر ۱۰ سانتی متر شدت بسیار بالاتری دارند. علاوه بر این، در همان منطقه، می توان مشاهده کرد که برخی از باندها به تعداد موج های پایین تر یا بالاتر تغییر مکان داده می شوند.

2.3.کمی سازی کل پلی فنولیک (TPC)، فلاکونوئیدها (TFC) و محتوای اسیدهای فنلی (TPA)

کل پلی فنول ها، فلاونوئیدها و محتوای اسیدهای فنلی عصاره های آزمایش شده S.vulgaris مقادیر قابل توجهی از تمام این ترکیبات را نشان داد که می توانند با نتایج به دست آمده برای ارزیابی فعالیت های زیستی تأیید شوند (جدول 4).

کمی سازی TPC، TFC، و TPA به این ترتیب برای اولین بار در ادبیات علمی برای گونه های S.vulgaris گزارش شده است، که نشان دهنده دلیل دیگری است که اصالت این مطالعه را حفظ می کند و استدلال های مهمی را به منظور حمایت از فعالیت های زیستی که مورد آزمایش قرار می گیرند، ارائه می دهد.

2.4. GC - MS تجزیه و تحلیل

نتایج به دست آمده برای تجزیه و تحلیل GC-MS عصاره های مختلف S.vulgaris را می توان در جداول 5-8 یافت می شود.

تجزیه و تحلیل GC-MS مجاز به شناسایی ترکیبات اصلی فرار در S، عصاره گل ولگاریس است که دو استریویسمر الکل یاس بنفش، الکل یاس بنفش C و الکل یاس بنفش D. همراه با این، ترکیبات معطر دیگر، فنل ها و اسیدها، اسیدهای چرب را می توان در ترکیب گل شناسایی (جدول 5).

بیست ترکیب شناسایی شدند و در این میان، ترکیباتی که در بیشترین مقادیر یافت شدند، الکل های یاس بنفش و الکل بنزیل هستند که عوامل تطبیقی بالاتر از ۸۰ دارند. مشتقات فوران نیز به مقادیر بالا شناسایی شدند که مربوط به الکل های یاس بنفش بود. ترکیبات خاص، الکل یاس بنفش، به عنوان الکل فوران، بیش از ۴۰٪ از ترکیبات شناسایی شده را نشان می دادند. این دو ترکیب دو استریو سومر مختلف با طیف MS مشابه (Figure2) هستند که با داده های استاندارد از PubChem مطابقت دارند. آنها یک سیگنال عمده در m/z از 55 و دیگر سیگنال های مهم در m/z از 67،93 و 111.

همراه با الکل های یاس بنفش، یکی دیگر از ترکیبات مهم که مسئول بوی معطر گل یاس بنفش است، الکل بنزیل است که در مقادیر بالا یافت می شود ۱٫۷۷٪ از ترکیبات شناسایی شده مشتقات فوران هستند، ترکیباتی که مربوط به الکل های یاس بنفش هستند.

یکی دیگر از ترکیباتی که به مقدار قابل توجهی شناسایی شد متیل یوژنول، یک ترکیب فنل پروپانوئیدها با فعالیت آنتی اکسیدانی مهم است. درصد ترکیبات فنلی در 74/1 درصد است و در حال نشان دادن هستند، ضمن اینکه متیل اوژنول، توسط استر استرها اسید چرب p-هیدروکسی سینمیک و اسیدهای چرب آزاد نیز شناسایی شدند که نشان دهنده 52/4 درصد ترکیبات شناسایی شده است.

برای سایر عصاره های آزمایش شده، تجزیه و تحلیل GC-MS در شرایط مشابه انجام شد و ترکیبات مختلف شناسایی شدند (جداول 6-8). ترکیب مشترک شناسایی شده در تمام این عصاره ها، اسید n-هگلادکانوئیک، یک اسید چرب اشباع شده است که اسید پالمیرتیک نیز نام دارد. عصاره میوه غنی از اسیدهای چرب است، اصلی ترنس-۱۳-اکتادکانوئیک اسید است. عصاره برگ حاوی مشتقات بنزوئیک اسید و همچنین فلندرین است. عصاره پوست حاوی کاروتن: آستاکسانتین و psi-carotene به ترتیب بیش از 12٪ترانس سینافیل الکل.

تجزیه و تحلیل GC-MS این عصاره ها برای اولین بار به این صورت گزارش می شود که نشان دهنده ابزار مهمی برای شناسایی ترکیبات اصلی یافت شده در ترکیب عصاره های مختلف به دست آمده از بخش های مختلف گونه است که مسئول فعالیت های زیستی هستند.

این از مولکول های ۲۰۲۱، ۲۶، ۳۱۰۴ استخراج می شود. https://doi.org/10.3390/molecules26113104 https://www.mdpi.com/journal/molecules