پیشرفت تحقیق و کاربرد در فناوری اثر انگشت در چینی Materia Medica Ⅱ

1.2 اثر انگشت الکتروشیمیایی

الکتروشیمی یک روش تحلیلی ساده بر اساس خواص الکتروشیمیایی و اصول ماده مورد آزمایش است که کم هزینه، بسیار حساس است و به مواد مصرفی کمی نیاز دارد [19]. با این حال، این روش دارای محدودیت‌های خاصی است و در حال حاضر عمدتاً برای تجزیه و تحلیل داروهای چینی که حاوی اجزای شیمیایی مانند ترپن‌ها (مانند گلپر سیننسیس)، فلاونوئیدها (مانند Scutellaria baicalensis)، آلکالوئیدها (مانند Aconite) و آنتراکینون‌ها هستند، کاربرد دارد. مانند ریواس) که می توانند تحت واکنش های الکتروشیمیایی قرار گیرند.

وو دی و همکاران [20] از اثر انگشت الکتروشیمیایی برای ایجاد فرآیند استخراج بهینه Scutellaria baicalensis Georgi استفاده کرد و روش خوبی برای استفاده منطقی از مواد دارویی چینی ارائه کرد. شی هویهوی و همکاران [21] از فناوری نوسان شیمیایی واکنش Belousov-Chabotinsky (BZ) برای بررسی اثرات دما، سرعت چرخش، و تعداد مواد دارویی اضافه شده به نتایج تجربی و ایجاد شرایط تجربی معقول برای به دست آوردن اثر انگشت الکتروشیمیایی Magnolia biondii Pamp استفاده کرد. ارائه روشی جدید برای کنترل کیفی ماگنولیا بیوندی. Zou Guihua و همکاران. [22] اثر انگشت الکتروشیمیایی غیرخطی Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf را ایجاد کرد. و جنتیانا ماکروفیلا پال. اثر انگشت الکتروشیمیایی این دو ماده دارویی از نظر بصری متفاوت است که می تواند به عنوان یک روش ساده و موثر برای تشخیص Codonopsis pilosula از Gentiana macrophylla استفاده شود. دای هونگشیا و همکاران [23] یک آنالیز الکتروشیمیایی بر روی 20 دسته گلپر سیننسیس (Oliv.) Diels با دوره رشد 1، 2 و 3 سال انجام داد. همراه با تجزیه و تحلیل اجزای اصلی، مشخص شد که اثر انگشت الکتروشیمیایی و پارامترهای نوسان (شامل زمان القای نوسان، حداکثر پتانسیل، عمر نوسان، حداکثر دامنه، پتانسیل توقف و تعداد چرخه ها) گلپر سیننسیس در دوره های مختلف رشد به طور قابل توجهی متفاوت است. که می تواند به عنوان مبنایی برای شناسایی گلپر سیننسیس در دوره های مختلف مورد استفاده قرار گیرد.

اثر انگشت CISTANCHE HPLC گیاه پزشکی چینی

1.3 اثر انگشت کروماتوگرافی

1.3.1 کروماتوگرافی لایه نازک

کروماتوگرافی لایه نازک یک روش کروماتوگرافی است که با تکیه بر ظرفیت های مختلف جذب یک جاذب برای اجزای شیمیایی مختلف، جداسازی را به دست می آورد. این رایج ترین روش مورد استفاده برای شناسایی داروهای سنتی چینی است، با مزایای استفاده آسان، تجهیزات ساده، حساسیت خوب، مقایسه بالا، ویژگی قوی و توسعه رنگ آسان. اصالت مواد دارویی را می توان با وجود یا عدم وجود لکه در صفحه لایه نازک تعیین کرد. عمق و اندازه رنگ لکه ها می تواند کیفیت مواد دارویی را تا حدی منعکس کند[24]. در حال حاضر، کروماتوگرافی لایه نازک با کارایی بالا(HPTLC) اغلب برای جایگزینی کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) برای شناسایی کیفی و کمی محصولات طب سنتی چینی به دلیل سادگی، دقت، هزینه کم، کارایی بالا و سرعت استفاده می شود. اثر انگشت HPTLC وضوح بهتری دارد و می‌تواند به طور منطقی و دقیق مواد فعال دارو را در زمان کوتاه‌تری تخمین بزند[25]. با این حال، به دلیل تعداد زیاد عوامل تأثیرگذار (رطوبت، دما و غیره)، تکرارپذیری نتایج در مقایسه با HPLC ضعیف است. لوشر و همکاران [26] از HPLC و HPTLC برای تجزیه و تحلیل عصاره Calendula officinalis استفاده کرد و دریافت که HPLC برای تجزیه و تحلیل کمی مناسب تر از HPTLC است.

در پاسخ به این اثر، لی شیانگجون و همکاران. [27] مجموعه‌ای از راه‌حل‌های متناظر از جمله انجام آزمایش توسعه در یک یخچال یا یک دستگاه کنترل‌شده با درجه حرارت مهر و موم شده برای کاهش تأثیر دما و افزودن نسبت‌های مختلف اسید سولفوریک در یک انتهای سیلندر توسعه برای کنترل رطوبت ایجاد کرد.

CHINESE MATERIAL MEDICAL HERB CISTANCHE HPLC LABLE

پاتیل و همکاران [28] اثر انگشت HPTLC از عصاره نفتی اتر Catsia tora Linn را ایجاد کرد. نتایج نشان داد که برگ، دانه و گل به ترتیب دارای 10، 7 و 11 نوع ماده تشکیل دهنده بودند. از این روش می توان برای تشخیص اصالت Catsia tora Linn استفاده کرد. شیائو هونگهوا و همکاران [29] از کروماتوگرافی لایه نازک همراه با طیف سنجی جرمی برای ایجاد اثر انگشت کروماتوگرافی لایه نازک از کرومون ها، اسیدهای آلی و ساپونین های تری ترپنوئید در Cimicifuga foetida L. استفاده کرد و تجزیه و تحلیل شباهت، آنالیز خوشه ای و تجزیه و تحلیل اجزای اصلی را بر روی 16 دسته انجام داد. نمونه‌های Cimicifuga از پنج منبع، پایه‌ای برای کنترل کیفیت Cimicifuga فراهم می‌کند.

گوزلمریک و همکاران [30] از اتیل استات-اسید فرمیک-اسید استیک-آب (30:1.5:1.5:3) به عنوان حلال در حال توسعه برای ایجاد اثر انگشت HPTLC از apigenin{10}}گلوکوزید، یک نشانگر فعال Matricaria chamomilla L.، استفاده کرد. که می تواند به عنوان یک راهنمای اصلی برای ارزیابی کیفیت بابونه استفاده شود. بازیلکو و همکاران [31] اثر انگشت HPTLC از پنج ترکیب فلاونوئیدی، یعنی تاگتوئیدها، کورستین، فلاونوئیدها، کافئیک اسید و اسید کلروژنیک را از Galinsoga parviflora Cav ایجاد کرد. از این روش می توان برای شناسایی Galinsoga parviflora استفاده کرد. اتانولیک و همکاران [32] اثر انگشت عصاره اتانولی Acacia catechu (L.f.) Willd را تعیین کرد. با استفاده از HPTLC ارزیابی کمی ساده و سریع روتین و کوئرستین در عصاره انجام شد. آگاتونوویچ-کوسترین و همکاران. [33] از HPTLC برای تجزیه و تحلیل کمی آپیژنین، ماتریکاریا و بیزابولول در عصاره برگ و گل Pyrethrum parthenium (L.) Smith، Matricaria chamomilla L. و Calendula officinalis L. استفاده کرد و آن را با روش DPPH برای مقایسه آنتی اکسیدان ترکیب کرد. ظرفیت این قطعات این روش ساده، سریع، قابل اعتماد و ارزان است و همچنین می تواند برای غربالگری فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره های گیاهی استفاده شود.

1.3.2 روش HPLC HPLC یک روش تحلیلی جهانی برای تشخیص اجزای شیمیایی مختلف در طب سنتی چین است.

به دلیل مزایای فشار بالا، حساسیت بالا، راندمان بالا و اتوماسیون به طور گسترده ای در تشخیص اجزای شیمیایی در طب سنتی چینی استفاده می شود [34]. آشکارساز UV، آشکارساز آرایه دیود (DAD)، آشکارساز الکتروشیمیایی، آشکارساز نور تبخیری و ... که قابلیت اتصال به آن را دارند همگی برتری بی بدیل خود را نشان می دهند.

کیائو و همکاران [35] از کروماتوگرافی مایع دو بعدی جامع فاز معکوس × فاز معکوس (RP × RP 2DLC) برای جداسازی ترکیبات فنلی بدست آمده از استخراج اتیل استات شیرین بیان Glycyrrhiza uralensis Fisch استفاده کرد.

311 ترکیب در مدت 40 دقیقه شناسایی شد و ساختار 21 ترکیب ناشناخته ابتدا با طیف سنجی جرمی مشخص شد و 8 مورد از آنها برای اولین بار در شیرین بیان یافت شد. نتایج نشان داد که سیستم RP×RP2DLC/MS تأثیر خوبی بر جداسازی عصاره های پیچیده طب سنتی چینی و تجزیه و تحلیل کیفی محصولات طبیعی دارد. پنگ لیانگ و همکاران [36] اجزای فلاونوئیدی 10 دسته از Gynostemma pentaphyllum را تجزیه و تحلیل کرد (Thunb.) Makino اثر انگشت HPLC Gynostemma pentaphyllum را ایجاد کرد و 11 قله مشخصه مشترک را کالیبره کرد. نتایج تجزیه و تحلیل شباهت نشان داد که بیشترین شباهت 10 دسته اثر انگشت Gynostemma pentaphyllum نسبت به طیف مرجع 0.989 و کمترین آن 0.128 بود که نشان می‌دهد اجزای فلاونوئیدی Gynostemma pentaphyllum از منشأهای مختلف مشابه هستند. نوع اما از نظر محتوا تفاوت معنی داری داشتند. سان و همکاران [37] از روش HPLC-DAD برای تجزیه و تحلیل شباهت اجزای شیمیایی Bupleurum chinense DC استفاده کرد. و B. scorzonerifolium Willd. برای اولین بار، و متوجه شد که این دو به ترتیب دارای 12 پیک فلاونوئید مشترک و 4 پیک ساپونین بودند و در همان زمان، هر کدام به ترتیب دارای 6 قله فلاونوئید منحصر به فرد و 5 پیک ساپونین بودند. نتایج نشان داد که این روش می‌تواند به طور منطقی و مؤثر تفاوت در اجزای شیمیایی بین Bupleurum و Bupleurum chinense را منعکس کند. همبستگی بین این دو ضعیف است. بنابراین، بوپلوروم چیننس باید با احتیاط در عمل بالینی استفاده شود. او و همکاران [38] 10 نوع اسید گالیک فعال زیست فعال، اسید کلروژنیک، کافئین و کاتچین موجود در 10 دسته چای سبز Ziyang را به صورت کمی تجزیه و تحلیل کرد. اثر انگشت HPLC توسعه یافته ساده و قابل اعتماد بود. لی و همکاران [39] اثر انگشت HPLC پوست انار را ایجاد کرد. آنها 15 پیک مشخصه را انتخاب کردند و شباهت 10 دسته پوست انار را 968/0 ارزیابی کردند. آنها همچنین پونیکالاگین، گالیک اسید، کاتچین، اسید کلروژنیک، کافئیک اسید، اپی کاتچین، روتین و اسید الاژیک موجود در آن را جدا و تجزیه و تحلیل کردند و روشی مطمئن و موثر برای شناسایی اصالت و کنترل کیفیت پوست انار ارائه کردند. سوماتی و همکاران [1] از HPLC ترکیب شده با HPTLC و کروماتوگرافی گازی- طیف سنجی جرمی (GC-MS) برای تعیین ترکیب شیمیایی عصاره متانولی Ixora chinensis Lam استفاده کرد. تجزیه و تحلیل HPLC حضور بیوشین A، میریستین، کورستین، روتین، دایدزین، و فورمونونتین را نشان داد. اسید اورسولیک در اثر انگشت HPTLC یافت شد. 24 جزء فیتوشیمیایی توسط GC-MS پیدا شد. این روش ترکیبی کیفی و کمی به راحتی می تواند کیفیت و پایداری Ixora chinensis Lam را ارزیابی کند. Ge و همکاران [40] اثر انگشت UHPLC-DAD Radix Angelicae Pubescentis را ایجاد کرد، کومارین‌ها و اسیدهای فنولیک موجود در Radix Angelicae Pubescentis را به‌صورت کمی تجزیه و تحلیل کرد، و به‌طور کیفی مواد فعال آن را با استفاده از طیف‌سنجی جرمی پرواز چهارقطبی (Q-TOF-MS) شناسایی کرد. آنها 9 اسید فنولیک، 30 کومارین و 41 ترکیب مر و آدنوزین پیدا کردند. آنها روش تجزیه و تحلیل متمایز را برای تشخیص موثر و سریع 32 دسته از Radix Angelicae Pubescentis از استان های مختلف ترکیب کردند. این روش ایده جدیدی برای کنترل کیفیت Radix Angelicae Pubescentis ارائه می دهد.

لیست مشخصات CISTANCHE

یانگ و همکاران [41] از آشکارساز کروماتوگرافی مایع با کارایی فوق العاده بالا (UPLC)-DAD و فناوری ESI-MS برای به دست آوردن اثر انگشت HPLC و اثر انگشت طیف سنجی جرمی قرص Xiaoyanlidan به ترتیب استفاده کرد. آنها 113 نمونه از قرص Xiaoyanlidan را تجزیه و تحلیل کردند و 39 پیک را به دست آوردند که 26 مورد از Quassia، 9 مورد از Andrographis paniculata و 4 مورد از Rhizoma Cynoglossi بود. با استفاده از روش‌های شیمی‌سنجی شباهت و PCA، آنها تعیین کردند که پنج جزء مهم عبارتند از 4-متوکسی-5-هیدروکسی فروسفالوستومون، آندروگرافولید، دهیدروآندروگرافولید، نئوآندروگرافولید و اسید رزمارینیک. آنها یک اثر انگشت سیستماتیک و جامع برای بهبود و ارزیابی کیفیت قرص Xiaoyanlidan ایجاد کردند. فن و همکاران [42] اثر انگشت HPLC و UPLC از گلیکوزیدهای فلاونوئید را در Lophatherum gracile Brongn.، و یک فلاونوئید C-گلیکوزید لوتئولین جدید 6-C- -D-glucuronic acid-(1→2) را جدا کرد{19 }}D-pyranoglucoside برای اولین بار. آنها همچنین ایزومرهای نوری دو ترکیب فلاونوئید فلاونوئید و فلاونوئید هیدروکسی فلاونوئید را برای اولین بار کشف کردند. آنها از تشدید مغناطیسی هسته ای یک بعدی و دو بعدی و طیف سنجی جرمی برای تشخیص و تعیین ساختار آنها استفاده کردند و روش جدیدی برای کنترل کیفیت Lophatherum gracile Brongn ارائه کردند. تشیبانگو و همکاران [43] از HPLC-DAD ترکیب شده با کروماتوگرافی لایه نازک، رزونانس مغناطیسی هسته ای و طیف سنجی جرمی برای جداسازی موثر ترکیبات دو فلاونوئیدی GB1، GB2، GB{27}} و فلاونوئیدها از Garcinia kola Linn استفاده کرد و ساختار آنها را تأیید کرد. ، که می تواند به عنوان یک روش تجزیه و تحلیل معمول برای آماده سازی های دارویی استفاده شود. ژائو و همکاران [44] اثر انگشت HPLC-UV-MS Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees را ایجاد کرد، آندروگرافولید و دهیدروآندروگرافولید موجود در Andrographis paniculata را به صورت کمی تعیین کرد و تفاوت‌های 10 دسته از Andrographis paniculata را با ترکیب آنالیز و PCA ارزیابی کرد. این روش مبنایی برای کنترل کیفیت Andrographis paniculata فراهم می کند.

احمد و همکاران [45] از HPLC برای به دست آوردن اثر انگشت رزین Commiphora wightii (Arn.) Bhandari استفاده کرد و ترانس و سیس استرولون موجود در آن را تجزیه و تحلیل کمی کرد. در عین حال، این روش می تواند به طور موثر 22 دسته رزین Commiphora wightii و 9 دسته رزین تقلبی را تشخیص دهد که می تواند به عنوان روشی برای تشخیص اصالت رزین Commiphora wightii استفاده شود.

2 اثر انگشت بیولوژیکی

اثر انگشت بیولوژیکی استفاده از روش های تجزیه و تحلیل توالی ژن در سطح مولکولی برای تشخیص و طبقه بندی توزیع جغرافیایی و تغییرات در مواد دارویی چینی، از جمله اثر انگشت ژنومی، اثر انگشت پروتئومی [60] و اثر انگشت DNA [61] است. در حال حاضر مطالعات کمتری در مورد اثر انگشت بیولوژیکی داروهای چینی نسبت به اثر انگشت شیمیایی انجام شده است. متداول‌ترین روش‌های مورد استفاده عبارتند از: الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید (PAGE)، فناوری نشانگر مولکولی DNA چندشکلی تقویت‌شده تصادفی (RAPD)، واکنش زنجیره‌ای پلیمراز.

(PCR) و روش های دیگر.

لیو لی و همکاران.[62] از نشانگرهای RAPD، همراه با PCR و تجزیه و تحلیل خوشه ای، برای شناسایی موثر Panax notoginseng (Burk.) f استفاده کرد. H. Chen، Panax ginseng CA Mey.، و جینسنگ آمریکایی Panaxquinquefolium L. Fan Wei و همکاران. [63] برای اولین بار اثر انگشت پروتئین SDS-PAGE Eupolyphaga sinensis Walker، Bombyx mori Linnaeus و Scolopendra mutilans L. Koch را ایجاد کرد و روشی مطمئن و مؤثر برای شناسایی این سه ماده دارویی ارائه کرد. وی ییکونگ و همکاران [64] پرایمرهای اختصاصی دو سایت را طراحی کرد و یک PCR مالتی پلکس ساخت. شناسایی سریع دو ماده دارویی، Houttuynia cordata Thunb. و Gymnotheca chinensis Decne.، می تواند به طور همزمان دو گونه را به طور مثبت شناسایی کند و تعیین کند که آیا آنها مخلوط هستند یا خیر. وانگ فو و همکاران [65] از توالی ITS2 (فضاساز رونویسی شده داخلی 2) به عنوان بارکد DNA برای شناسایی دقیق طب چینی، Zanthoxylumbungeanum Maxim استفاده کرد. و ادویه آن Zanthoxylumbungeanum Maxim.، که مبنایی برای شناسایی داروی چینی Zanthoxylumbungeanum و ادویه آن Zanthoxylumbungeanum فراهم می‌کند.