Cistanche ترکیب شیمیایی و تجزیه و تحلیل اجزای بدن در طب چینی Ⅱ

مخفف

سیستانچاز زمان های قدیم به عنوان یک داروی سنتی و گرانبهای چینی قوی و مغذی در نظر گرفته شده است. معروف به "جینسینگ صحرا". اولین بار در " ثبت شد "Materia Medica شن نونگ"و به عنوان درجه برتر فهرست شده است. عملکردهای آن را داردیانگ کلیه مغذی,پر کردن جوهر و خون, مرطوب کردن روده هاو مدفوع کردن، وبه تعویق انداختن پیری. اغلب برای درمان ناتوانی جنسی مردان، ناباروری زنان، سرماخوردگی و اسهال، سردرد در ناحیه کمر و زانو، خشکی خون و یبوست استفاده می شود. سیستانچ ثبت شده در قسمت 1 "فارماکوپه چینی (نسخه 2015)" ساقه های گوشتی خشک شده با برگ های فلس دار است.Cistanche deserticola YCMaوCistanche tubulosa (شنک) R. موجود زنده. با توجه به سردرگمی مواد دارویی سیستانچ که در حال حاضر در بازار در حال گردش است، بیشتر کنترل کیفیت سیستانچ فقط بر روی گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید متمرکز است. برای ارزیابی بهتر کیفیتسیستانچو اطمینان از اثربخشی مواد و فرآورده‌های دارویی، این مقاله به بررسی پیشرفت تحقیقات تجزیه و تحلیل ترکیب شیمیایی و تجزیه و تحلیل ترکیبات in vivo سیستانچ می‌پردازد تا یک روش تجزیه و تحلیل جامع‌تر و مؤثرتر برای جبران آنالیز کیفی فعلی و کاستی‌های in vivo ایجاد کند. مطالعات.

مکمل سیستانچ

بخش 1 پیشرفت تحقیق در تجزیه و تحلیل اجزای شیمیاییطب سنتی چینی سیستانچ

محیط طبیعی و شرایط منطقه ای به طور مستقیم بر کیفیت مواد یا فرآورده های دارویی چینی تأثیر می گذارد و کیفیت مواد یا فرآورده های دارویی چینی ارتباط نزدیکی با ایمنی داروی بالینی دارد. بنابراین، برای بهبود سطح کنترل کیفی مواد یا فرآورده‌های دارویی سیستانچ، ایجاد روش‌های تعیین دقیق، قابل اعتماد و سریع از اهمیت ویژه‌ای برخوردار است. در سال های اخیر محققان داخلی و خارجی کارهای زیادی بر روی آنالیز اجزای شیمیایی سیستانچ انجام داده اند و روش های مختلفی از جمله انگشت نگاری، رنگ سنجی، HPLC-DAD، HPLC-ELSD، LC-MS، را امتحان کرده اند. و GC-MS. ، FT-IR و 2D-IR و غیره

1. الگوی اثر انگشت

روش اثر انگشت با مفهوم "یکپارچگی" در طب سنتی چین سازگار است. این یک روش کنترل کیفیت عملی برای شناسایی اصالت طب سنتی چینی و ارزیابی ثبات کیفیت آن است. در جامعه بین المللی بسیار شناخته شده است.

زو نایلیانگ و همکاران! از UPLC برای ایجاد اثر انگشت مواد دارویی بیابانی Cistanche و Cistanche tubulosa استفاده کرد، 15 قله رایج را کالیبره کرد و 5 قله مشترک را شناسایی کرد که نشان می‌دهد اثر انگشت دو سیستانچ جمع‌آوری‌شده در فارماکوپه تفاوت قابل‌توجهی دارد. این روش ساده و قابل تکرار است و می توان از آن برای تشخیص مواد دارویی سیستانچه بیابانی و سیستانچ توبولوزا و ارزیابی کیفیت مواد دارویی استفاده کرد. Zhu Xujiang و همکاران 12 از HPLC برای ایجاد اثر انگشت 10 دسته از Lanzhou Cistanche برای مطالعه تفاوت کیفیت ذاتی بین Lanzhou Cistanche و Cistanche deserticola استفاده کردند.

نتایج نشان می‌دهد که در مقایسه با سیستانچ، سیستانچ لانژو دارای بسیاری از قله‌های مشخصه مفقود شده، به‌ویژه عدم وجود پیک‌های مشخصه اکیناسید است: و شباهت بین مواد دارویی کنترل لانژو سیستانچ و سیستانچ تنها حدود {{0}}} است.04 ، نشان می دهد که سیستانچ لانژو با سیستانچ واقعی متفاوت است. یک تفاوت بزرگ وجود دارد. ما ژیگو و همکاران از HPLC برای ایجاد اثر انگشت از 10 دسته از قطعات جوشانده Sha Rong استفاده کرد و 7 پیک معمولی را کالیبره کرد. نتایج ارزیابی شباهت همگی بیشتر از 0.92 بود که نشان می‌دهد اثر انگشت قطعات جوشانده Sha Rong خاص است و می‌تواند سطح خاصی از کنترل کیفیت را برای قطعات جوشانده Sha Rong فراهم کند. ارجاع. Xiong Yuanjun و همکاران. از کروماتوگرافی HPLC استفاده کرد و از 6 گلیکوزید فنیل اتانوئیدی به عنوان مرجع برای ایجاد اثر انگشت و روش های تجزیه و تحلیل برای سیستانچ از 9 منشاء مختلف در منطقه خودمختار سین کیانگ استفاده کرد. نتایج نشان داد که روش پایدار، قابل اعتماد و قابل تکرار است. خواص خوبی دارد و می توان از آن برای ارزیابی کیفیت سیستانچ استفاده کرد.

Xie Jieina و همکاران [از ستون کروماتوگرافی Agilent Zorbax Extend-C8 (150mmx4.6، 5μm) استفاده کردند، با استفاده از محلول آبی اسید فسفریک 0.095%-0.095% فسفر محلول اسید استونیتریل به عنوان فاز متحرک گرادیان خطی، گرادیان شستشو 0~18 دقیقه، 96% A-4% B بود. 18~40 دقیقه، 88%A-12%B; 40~65 دقیقه، 85% A-15% B; 65 ~ 75 دقیقه، 85% A-15% B; 75 ~ 90 دقیقه، 80 %A-20%B; 90 ~ 100 دقیقه، 80%A-20%B; 100 دقیقه، 96%A-4%B، طول موج تشخیص 330 نانومتر. جریان حجمی: 1 میلی لیتر در دقیقه؛ دما 30 درجه است اثر انگشت HPLC از 16 دسته سیستانچ بیابانی با منشاء مختلف ایجاد شد. نتایج نشان داد که کیفیت ذاتی مواد دارویی سیستانچ بیابانی از منابع مختلف بسیار متفاوت است. از این روش می توان برای ارزیابی کیفیت مواد دارویی سیستانچ بیابانی استفاده کرد. تو پنگفی و همکاران (از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا فاز معکوس برای مطالعه گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید موجود در 4 ماده دارویی تولید داخل و 1 نوع و 25 ماده دارویی تجاری سیستانچ استفاده کرد و طیف HPLC آنها را تجزیه و تحلیل کرد. نتایج نشان داد که این مواد اولیه دارویی همگی حاوی بسیاری از انواع گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی، از جمله گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید موجود در سیستانش، سیستانچ هالوفیلا، سیستانچ آلبا و سیستانچس توبولوزا، دارای گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی مشابه هستند، در حالی که سیستانچ کاملاً متفاوت از سایر گونه ها است یانگ هانچون و همکارانش از ورباسکوزید به عنوان یک ماده مرجع و یک ستون کروماتوگرافی VP-ODS (150 میلی متر در 4.6 میلی متر، 5 میکرومتر) برای ایجاد یک روش تجزیه و تحلیل اثر انگشت برای 22 دسته از سیستانچ بیابان استفاده کردند پیک‌های مواد دارویی سیستانچ کالیبره شدند. نتایج ارزیابی شباهت نشان داد که شباهت تعداد کمی از نمونه ها زیاد نیست. یانگ جیان هوا و همکاران 8 RP-HPLC را برای تعیین اثر انگشت گلیکوزیدهای فنیل اتانول در سیستانچ انتخاب کرد و اثر انگشت محصولات کشت شده را با محصولات وحشی، مراحل مختلف رشد و بخش‌های دارویی مختلف مقایسه کرد. این مطالعه 19 پیک کروماتوگرافی رایج را کالیبره کرد و نشان داد که اثر انگشت هاله کشت شده و وحشی Cistanche بسیار مشابه است.

انواع و محتویات نسبی اجزای شیمیایی پایدار است. اثر انگشت در مراحل مختلف رشد یا قسمت‌های مختلف نیز قوام خوبی دارد، اما تفاوت‌های آشکاری در محتوای قله‌های مشخصه وجود دارد. این روش قابلیت تکرارپذیری خوبی دارد و می تواند کیفیت ذاتی اجزای مشخصه سیستانش سالینا را بهتر منعکس کند. شی و همکاران 9 اثر انگشت HPLC و اثر انگشت ژن ISSR (تکرار توالی بین ساده) Cistanche، Cistanche tubulosa، Salted Cistanche و Cistanches را مقایسه کرد و دریافت که هر دو اثر انگشت برای مواد دارویی Cistanche مفید هستند. تمایز و کنترل کیفیت را انجام دهید و نویسنده معتقد است که به دلیل محتوای کم اکیناسه در سیستانچ، سیستانچ نمی تواند جایگزین سیستانچ یا سیستانچ توبولوزا در داروسازی شود. جیانگ و همکاران (101 یک روش HPLC-DAD-MS برای انجام تجزیه و تحلیل اثر انگشت بر روی 36 ماده دارویی خمیر گوشتی با منشاء مختلف (شامل 14 خمیر گوشت صحرایی، 14 سیستانچ لوله‌ای، 2 سیستانچ نمک‌زده و 6 عدد آمارانتوس) ایجاد کرد. تجزیه و تحلیل و شناسایی 18 ترکیب گلیکوزید فنیل اتانول نتایج نشان داد که Cistanches tubularis، Cistanche halophylla و Cistanche بیشترین شباهت را دارند، در حالی که شباهت Cistanche کمتر است، فقط 0.053.

2. اسپکتروفتومتری جذب اتمی

با درک جامع مردم از مواد موثره طب سنتی چینی، عناصر معدنی توجه روزافزونی را به خود جلب کرده اند. به خصوص در سال‌های اخیر، برخی از اثرات طب سنتی چینی که با تئوری طب سنتی چین قابل توضیح نیست، با اثرات فیزیولوژیکی عناصر کمیاب قابل توضیح است. بنابراین، مطالعه عناصر ردیابی و کلان در سیستانچ و روش های کالیبراسیون المان متناظر و روش های تشخیص استاندارد شده آنها برای ایجاد و بهبود سیستم کنترل کیفیت و ارزیابی ایمنی سیستانچ اهمیت زیادی دارد. اسپکتروفتومتری جذب اتمی به دلیل حساسیت بالا، دقت بالا، دامنه کاربرد وسیع، حجم نمونه کوچک و عملکرد آسان ابزار، به تدریج به روش اصلی برای تشخیص عناصر معدنی تبدیل شده است. چن ویجون و همکاران (از روش مرطوب برای هضم مستقیم پودر سیستانچ استفاده کرد و از طیف سنجی جذب اتمی شعله (FAAS) برای اندازه گیری مستقیم سرب، کادمیوم و مس در آن استفاده کرد. نتایج نشان داد که سیستانچ از سه منطقه اصلی تولید در سین کیانگ از حد مجاز فراتر نمی رود. محدوده و برای استفاده بالینی ایمن بود (121 از روش جذب اتمی شعله و روش کوره گرافیتی برای تعیین اینکه سیستانچ بیابانی حاوی عناصر کمیاب ضروری برای بدن انسان است استفاده کردند. به مقدار کم، کلسیم، آهن، منیزیم، مس، روی، سرب و قلع است و دارای محتوای بالای منیزیم، کلسیم، آهن و روی است که دارای عملکردهای فیزیولوژیکی مهم، اثرات تغذیه‌ای و اهمیت تشخیص و درمان بالینی است و همکاران (3) از اسپکتروفتومتر جذب اتمی شعله ای برای تعیین عناصر کمیاب منگنز و عناصر کمیاب در سیستانچی استفاده کردند. نتایج نشان داد که نه هضم خشک و نه هضم مرطوب بر نتایج اندازه گیری تأثیر نمی گذارد. خو فانگ و همکاران 4) با استفاده از یک طیف‌سنج انتشار پلاسمای جفت شده القایی (ICP-AES) محتویات ده عنصر کمیاب را در سیستانچ وحشی، از جمله لی، منگنز، آهن، مس، روی، Se، Sr، Mo، [و Ca] اندازه‌گیری کرد.

3. کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا

کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا به طور گسترده در تعیین استفاده می شودگلیکوزیدهای فنیل اتانولدر گوشت چرخ کرده به دلیل مزایای آن از حساسیت بالا و دامنه خطی گسترده. دانگ و همکاران 15 یک روش فاز مایع با کارایی بالا ایجاد کردند که از ضریب جذب به جای ارتفاع پیک یا سطح پیک استفاده می‌کند و به طور مداوم 7 گلیکوزید فنیل اتانول را در Cistanche tubulosa و Cistanche از طریق نسبت ضرایب جذب اکیناسید و سایر موارد تعیین می‌کند. ترکیبات. محتویات شامل اکیناسه ساید، سارکوباسین A، ورباسکوزید، ورباسکوزید، 2'استیل ورباسکوزید، 6'-استیل ورباسکوزید و سیستانکئوزید C. نتایج این روش با روش استاندارد خارجی مطابقت دارد و نتایج نشان می دهد که دقت و صحت دارد. قابل اعتماد. Song Qingqing و همکاران 16 یک حلال تحت فشار آنلاین کروماتوگرافی میکرو استخراج-جریان آشفته- کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا-سیستم پشت سر هم (PLME-TFC-HPLC آنلاین) ایجاد کردند. پودر نمونه ردیابی در مخزن استخراج قرار گرفت و سپس در یک آستین پیش ستون بارگذاری شد. خط لوله اتر کتون (PEEK) به انتهای آستین پیش ستون متصل می شود و فاز آبی با سرعت جریان بالا از طریق خط لوله PEEK جریان می یابد تا فشار بالایی ایجاد کند تا به استخراج آنلاین با حلال تحت فشار سیستانچ برسد. در همان زمان، دو شیر الکترونیکی شش طرفه برای تکمیل کل تجزیه و تحلیل معرفی شده است. این فرآیند به یک مرحله استخراج و یک مرحله شستشو تقسیم می شود تا به تعیین همزمان محتویات سه گلیکوزید فنیل اتانوئید در Cistanche tubulosa برسد: اکیناکوزید، ورباسکوزید و ایزوموراباستوزید. Guo Xiongfei و همکاران!! 7 از روش HPLC-UV برای مقایسه محتویات گلیکوزیدهای کل اکیناسید، ورباسکوزید و فنیل اتانول در بخش‌های مختلف سیستانچ از منشأهای مختلف در هوتان، سین کیانگ استفاده کرد. نتایج نشان داد که بیشترین تفاوت در محتوای گلیکوزیدهای اکیناسید، ورباسکوزید و کل فنیل اتانول گلیکوزید در ریشه و رویه همان گیاه سیستانچ به ترتیب 22.4 برابر، 16.7 برابر و 8.7 برابر بود. مواد موثره سیستانچ عمدتاً در ریشه پخش می شود. ما ژیگو و همکاران 118 از یک روش فاز مایع با کارایی بالا با فاز معکوس برای تعیین همزمان سه گلیکوزید فنیل اتانوئید (ورباسکوزید، کریزوفیت و 2'-استیل کریزوفیت) در Amaranthus aurantiacus استفاده کرد. نتایج نشان داد که میزان کریزوفیت در A بیشترین مقدار را داشت. مقدار ورباسکوزید کمترین مقدار را دارد و کیفیت تاج خروس ولگاریس خریداری شده از داروخانه های مختلف بسیار متفاوت است. Zhao Kuijun و همکاران 119 از روش HPLC-ELSD برای تجزیه و تحلیل گالاکتیتول در 20 دسته Cistanche و Cistanches tubulosa استفاده کردند.

4. LC-MS

کروماتوگرافی مایع - طیف سنجی جرمی (LC-MS) دارای مزایای سرعت سریع، گزینش پذیری قوی، حد تشخیص کم و قابلیت های کیفی و کمی قوی است. این یک ابزار ایده آل برای تجزیه و تحلیل اجزای شیمیایی طب سنتی چینی است و عمدتا برای تعیین کیفی اجزای شیمیایی گوشت چرخ کرده استفاده می شود. و تحقیقات کمی

سونگ و همکاران 20] از فناوری HPLC-Qtrap-MS برای ایجاد روشی برای تشخیص کمی گروه های ترکیبی Cistanches tubularis (CT) و Cistanche (CD) استفاده کرد. کل جریان کار به سه بخش تقسیم می شود: اول، از طریق اسکن کامل پیشرفته (EMS)، اسکن خنثی (NL)، اسکن یون پیش ساز (Prec) و اسکن یون محصول پیشرفته (EPI)، همراه با کنترل مواد استاندارد، طیف سنجی جرمی ثانویه اطلاعات و اطلاعات مرتبط گزارش شده در پایگاه های داده موجود برای غربالگری جامع ترکیبات موجود در گوشت چرخ کرده استفاده شد. در مرحله دوم، روش HPLC-SMRM برای انجام کمی نسبی 513 ترکیبی که غربال شده بودند استفاده شد. در نهایت، یک روش تجزیه و تحلیل آماری چند متغیره همراه با داده های کمی برای تشخیص گروه ترکیب شیمیایی CT و CD استفاده شد. نتایج نشان داد که بتائین، واسطه های چرخه تری اسید، گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید و ایریدوئیدها نشانگرهایی برای تشخیص ترکیبات CT و CD هستند. لو و همکاران 1 مورد از آشکارساز کروماتوگرافی مایع-دیودی با کارایی بالا- طیف سنجی جرمی با وضوح بالا (HPLC-DAD-HRMS) برای شناسایی 4 گونه و مجموعا 36 دسته سیستانچ (شامل 14 دسته سیستانچ بیابانی، 10 دسته سیستانچ لوله ای و 12 دسته) استفاده کرد. دسته های سیستانچ). ) و محتویات این 10 ترکیب را اندازه گیری کرد. دو روش کمومتری، تجزیه و تحلیل خوشه‌بندی سلسله مراتبی، و تجزیه و تحلیل مؤلفه‌های اصلی، برای تشخیص واضح چهار نوع سیستانش مورد استفاده قرار گرفت. ژو یه و همکاران! 221 از HPLC-ESI-MS برای تشخیص محتویات هفت ماده فعال در طب سنتی چینی سیستانچ از پنج منشاء مختلف، از جمله سارکوزید بیابانی A، اکیناسید، ورباسکوزید، ایزوله‌باسکوزید، 2'- استیل ورباسکوزید، سیستانچ نازید C و توبولین B استفاده کرد. در همان زمان، طیف‌سنجی فروسرخ تبدیل فوریه برای ایجاد اثر انگشت پنج نوع سیستانش استفاده شد و نرخ پیک مشترک و نرخ پیک تغییرات آنها محاسبه شد. نتایج نشان داد که نتایج ارزیابی مواد دارویی با دو روش یکسان است. Song و همکاران 123] یک روش استخراج آنلاین تحت فشار با حلال - کروماتوگرافی جریان آشفته - کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (آنلاین PLE-TFC-HPLC) را ایجاد کردند. با در نظر گرفتن سیستانش بیابانی به عنوان مثال، آنها به تعیین محتویات هشت گلیکوزید فنیل اتانول در سیستانش بیابانی دست یافتند. به طور همزمان اندازه گیری می شود. در همان زمان، از روش HPLC-DAD-IT-TOF-MS برای شناسایی 91 ترکیب موجود در عصاره آنلاین سیستانچ بیابانی استفاده شد و نمودارهای پیک پایه عصاره آنلاین و استخراج اولتراسونیک با هم مقایسه شدند که نشان دهنده کارایی استخراج است. مطابق با روش استخراج اولتراسونیک بود. Wang Yiming و همکاران 124) از روش LC/ESI-MS/MS برای مطالعه 7 گلیکوزید فنیل اتانول در سیستانچ بیابانی، سیستانچ نمک و سیستانچ لوله ای استفاده کردند. در نتیجه 7 گونه در سیستانش بیابانی و سیستانش خام نمکی شناسایی شد. 6 گونه یافت شد و گونه Cistanche تنها حاوی 5 گونه بود. کائو ژنجی و همکاران (25) از روش LC-MS برای بررسی محتوای گلیکوزیدهای فنیل اتانول در سیستانچ بیابانی در فصول مختلف برداشت استفاده کردند. نتایج نشان داد که محتویات اکیناکوزید، سیستانچ A، و 2-استیل ورباسکوزید با فصول برداشت متفاوت است. تفاوت بزرگ

5. طیف سنجی مادون قرمز

طیف سنجی مادون قرمز یک روش طیف سنجی است که از طیف پیوسته امواج الکترومغناطیسی در ناحیه مادون قرمز به عنوان منبع تابش برای تابش نمونه و ثبت منحنی جذب نمونه استفاده می کند. این یک روش پرکاربرد در تجزیه و تحلیل ترکیبات آلی است. کاربرد آن در گوشت چرخ کرده عمدتاً برای تشخیص قسمت های مختلف گوشت چرخ کرده است. خو رونگ و همکاران (261 با استفاده از فناوری FT-IR به بررسی تفاوت‌های ترکیبی قسمت‌های مختلف بذر سیستانچ پس از تیمار طبقه‌بندی شدند. نتایج نشان داد که کربوهیدرات‌ها، پروتئین‌ها، لیپیدها، پکتین و مواد معطر در بذر سیستانچ وجود دارد. لایه‌برداری پس از تیمار، حداکثر جذب می‌شود. لیپیدها در هسته بذر به طور قابل توجهی تضعیف شدند و پروتئین های محلول و اجزای قند افزایش یافتند و پایه مواد مستقیم تری را برای جوانه زدن بذر فراهم کردند طیف مشتق و فناوری 2D-IR برای مطالعه عصاره های اتانولی با غلظت های مختلف (10٪، 20٪، 30٪)، 40٪، 50٪، 70٪، 80٪، 90٪ از سیستانچ بیابانی و بقایای دارویی مربوطه نشان می دهد که مواد فعال مانند گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید در گوشت چرخ کرده استخراج شده با اتانول در طیف مادون قرمز منعکس می شود و مشخص شد که عصاره اتانولی 70 درصد دارای بالاترین محتوای گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی است. از این روش می توان برای تجزیه و تحلیل اجزای مایعات دارویی و باقیمانده های دارویی و تشخیص تفاوت های ظریف در اجزای عصاره ها و باقی مانده های دارویی با غلظت های مختلف استفاده کرد. همچنین می تواند اجزای عصاره ها و باقی مانده های دارویی را با غلظت های مختلف ترکیب کند تا اطلاعات کلی در مورد مواد دارویی خمیر گوشت ارائه دهد. چن جون و همکاران ( 28 ] از فناوری FT-IR ترکیب شده با فناوری 2D-IR برای شناسایی بیابان Cistanche و محصول مخدوش آن Cynomorium cynomolgus استفاده کرد. مشخص شد که طیف IR این سه تفاوت های خاصی را نشان می دهد و تفاوت در طیف های مشتق مرتبه دوم حتی واضح تر از این است که طیف های IR نه تنها متفاوت هستند، بلکه می توانند شناسایی سریع و دقیق Cistanche و محصولات مخدوش کننده آن را به همراه داشته باشند تفاوت های ماکروسکوپی خمیر گوشت بیابانی در روش های مختلف فرآوری، آنالیز و 180 نمونه سیستانچ صحرایی فرآوری شده در 3 روش فرآوری کامل کارخانه و 5 روش مختلف فرآوری برش مورد ارزیابی قرار گرفت و تجزیه خوشه ای با استفاده از نرم افزار Assure ID انجام شد. نتایج نشان داد که نمونه‌ها با روش‌های مختلف پردازش تفاوت معنی‌داری داشتند. این روش می تواند به سرعت و به طور موثر روش های مختلف پردازش را شناسایی کند. نمونه سیستانچ خو رونگ و همکاران [30] از تکنیک‌های FT-IR و 2D-IR برای تجزیه و تحلیل و ارزیابی پوست، قسمت‌های میانی و مغزی سیستانچ صحرا و همچنین عصاره الکلی و عصاره آب آن استفاده کرد. این روش می تواند به سرعت و به طور جامع تفاوت های ظریف در قسمت های مختلف یک ماده دارویی را شناسایی کند. Xu Rong و همکاران 31 از روش FT-IR برای مطالعه قسمت‌های مختلف بذر سیستانچ بیابانی و ویژگی‌های طیفی و تفاوت‌های ترکیبی آن‌ها پس از درمان کپک یا دمای بالا استفاده کردند. این مطالعه نشان داد که ترکیب پوسته دانه و هسته دانه به طور قابل توجهی متفاوت است. همچنین مشخص شد که پروتئین و مقداری قند موجود در دانه‌ها که ارتباط نزدیکی با سرزندگی دارند، پس از کپک زدن یا تیمار در دمای بالا به میزان قابل توجهی کاهش یافت. خو رونگ و همکاران 32 همچنین تجزیه و تحلیل طیف را بر روی سیستانچ بیابانی، سیستانچ لوله ای و سیستانچ نمک انجام داد. نتایج نشان داد که الگوهای IR سیستانچ بیابانی و سیستانچ لوله‌ای تفاوت معنی‌داری داشتند و طیف مشتقات مرتبه دوم سیستانچ بیابانی و سیستانچ نمکی مشهود بود. تفاوت ها، طیف 2D-IR به طور مستقیم تفاوت های بین این سه را منعکس می کند. لیو یوگانگ و همکاران 133 از فناوری FT-IR برای تجزیه و تحلیل محتوای گلیکوزیدهای فنیل اتانول در سیستانچ بیابانی، سیستانچ توبولوزا و عصاره اتانولی 95 درصد آنها استفاده کردند. نتایج نشان داد که محتوای گلیکوزیدهای فنیل اتانول در سیستانچ توبولی فلورا به طور معنی داری بیشتر از سیستانچ بیابانی بود. مشخص شد که گلیکوزیدهای فنیل اتانول به طور موثر در عصاره الکل غنی شده بودند.

6. GC-MS

کروماتوگرافی گازی-طیف‌سنجی جرمی (GC-MS) از بمباران الکترونی یا یونیزاسیون شیمیایی به عنوان رابط استفاده می‌کند، همراه با یک پایگاه داده طیف‌سنجی جرمی تجاری نسبتاً جامع، که قابلیت‌های تحلیلی طیف‌سنجی جرمی را تا حد زیادی بهبود می‌بخشد و از مزایای حساسیت بالا و تکرارپذیری خوب برخوردار است. به طور عمده برای تحقیقات در مورد مواد سخت فرار و مواد ناپایدار حرارتی استفاده می شود. ژو یوبی و همکاران 141 از کروماتوگرافی ستونی برای تقسیم اجزای محلول در چربی سیستانچ بیابانی به سه قسمت غیرقطبی، ضعیف قطبی و قطبی استفاده کردند. آنها این سه بخش را با استفاده از روش GC-MS تجزیه و تحلیل کردند و در مجموع 73 ترکیب را شناسایی کردند. تجزیه و تحلیل جامع از اجزای محلول در چربی خمیر گوشت صحرا انجام شد. کیائو هایلی و همکاران [35] از روش جذب کیسه‌ای پویا به همراه فناوری GC-MS برای مطالعه اجزای فرار گل‌آذین سیستانچ بیابانی از مرحله جوانه‌زنی تا مرحله گل‌دهی کامل استفاده کرد. در نتیجه 40 ترکیب فرار از گل آذین سیستانش شناسایی شد. عمده‌ترین آنها در مرحله جوانه‌زنی هیدروکربن‌ها و فرارهای برگ سبز بودند و با باز شدن گل‌ها روی گل آذین، انواع و محتویات نسبی آن تغییر می‌کند. اجزای فرار در مراحل اولیه و کامل گل، عمدتاً استرهای معطر و ترکیبات حلقه بنزن هستند و محتوای نسبی آن به طور قابل توجهی بیشتر از مرحله جوانه زدن است. افزایش دادن.

7. دیگران

زیرا گروه فنلی گلیکوزیدهای فنیل اتانول می توانند با نیترات آلومینیوم و نمک های دیازونیم رنگ ایجاد کنند. دو نیانسنگ و همکاران 136] از روش رنگ سنجی نیترات آلومینیوم برای تعیین محتوای گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید کل در سیستانچ بیابانی استفاده کرد. نتایج نشان می‌دهد که این روش ساده، حساس و دقیق است و میانگین نرخ بازیابی 100.7% (n=5) و ضریب تغییرات (cv) 1.09% دارد. لی و همکاران 1371 محتوای گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی در سیستانچ بیابانی را از طریق روش رنگ سنجی نمک دیازونیوم تجزیه و تحلیل کردند. نتایج نشان داد که محتوای فنیل اتانول گلیکوزید در نمونه 1.275٪، میانگین نرخ بازیابی 101.3٪ و RSD 3.7٪ (n =4) بود. گونگ لیدونگ و همکاران 38) از یک سیستم تشخیص الکتروفورز-الکتروشیمیایی مویرگی (CE-ED) برای مطالعه ترکیب مونوساکارید سیستانچ (سیستانچ صحرایی تولید شده در مغولستان داخلی، سیستانچ گل لوله ای سین کیانگ و سیستانچ گل لوله ای کشت مصنوعی) پلی ساکاریدها و تعیین محتوای مونوساکارید استفاده کرد. لی یوکسیا و همکاران! 39 از یک تحلیلگر اسید آمینه برای تجزیه و تحلیل ترکیب اسیدهای آمینه مختلف در سیستانچ در صحرای سین کیانگ استفاده کرد. این مطالعه نشان داد که نمونه سیستانچ در مجموع حاوی 17 نوع اسید آمینه پس از عملیات هیدرولیز اسیدی، با کسر جرمی اسید آمینه کل 7.87٪ و پروتئین 16.38٪ است. در میان آنها، بدن انسان هفت اسید آمینه ضروری به نسبت معقول، E/T=38.5%, E/N=62.6%. لی بین و همکاران [40] از یک اسپکتروفتومتر مرئی فرابنفش (UV) ترکیب شده با معرف نش برای تعیین حداکثر طول موج جذب مانیتول به عنوان 413 نانومتر استفاده کرد و محتوای مانیتول را در 6 دسته سیستانچ نمکی اندازه‌گیری کرد. Ma Xizhong [4] از فناوری استخراج سیال فوق بحرانی (SFE) برای استخراج اجزای فرار از طب سنتی چینی Rouhuanrong و ترکیبی از کروماتوگرافی گازی مویرگی (CGC) و کروماتوگرافی گازی / طیف سنجی جرمی (GC/MS) برای تعیین محتوای آنها استفاده کرد.

بخش 2 پیشرفت تحقیق در مورد تجزیه و تحلیل اجزاء در طب سنتی چینی سیستانچ

ترکیبات موجود در طب سنتی چینی بسیار پیچیده هستند و اثرات نظارتی چند جزئی، چند مسیری، چند هدفی و یکپارچه آنها در صنعت به یک اجماع تبدیل شده است. این امر چالش های بزرگی را برای روشن شدن مواد فعال و مکانیسم عمل طب سنتی چینی به همراه داشته است. با معرفی و بهبود سرم نظریه شیمی دارویی طب سنتی چین توسط محقق داخلی پروفسور وانگ شیجون، محققان به تدریج دریافتند که پس از تجویز طب سنتی چینی از مسیرهای مناسب، جذب، متابولیسم و ​​سایر فرآیندها در بدن انجام می شود. و آنچه در نهایت جذب خون می شود اغلب پلی مونومرها است. گروه ماده فعال توسط مواد تشکیل شده است، ساختار آن می تواند یک ماده اولیه، یک متابولیت مونومر ماده، یا یک ماده شیمیایی جدید باشد که از تعامل بین اجزای مونومر در طب سنتی چینی تشکیل شده است، یا می تواند توسط بدن تحت تأثیر داروهای مواد فعال فیزیولوژیکی درون زا.

1. تجزیه و تحلیل ترکیب In vivo از اجزای اصلی شیمیایی سیستانچ

سیستانچ یک مقوی شناخته شده در طب سنتی چینی است. اگرچه به طور گسترده در کاربردهای بالینی استفاده می شود، اما تحقیقات در مورد متابولیسم آن در بدن بیشتر بر مطالعه چندین ماده فعال منفرد مانند اکیناسید، ورباسکوزید و کریزوفیلین متمرکز شده است. در حال حاضر، ترکیب بدن سیستانچ گزارش شده در ادبیات، روش‌های اصلی تحلیلی HPLC-UV و LC-MS است.

جیا و همکاران [{0}}] یک روش HPLC-UV را برای مطالعه فارماکوکینتیک و متابولیسم اکیناسید در داخل بدن ایجاد کرد و متابولیت ها را استخراج، جدا کرد و از نظر اثربخشی غربال کرد. وانگ و همکاران I44 از فناوری LC/MS-IT-TOF همراه با استراتژی‌های مؤثر کشف متابولیت برای انجام غربالگری هولوگرافیک و شناسایی متابولیت‌های in vivo اکیناسه استفاده کرد. کوی و همکاران 145] از فناوری UPLC-ESI-Q-TOF-MS برای مطالعه ترکیب شیمیایی in vivo اکیناسید و ورباسکوزید، مواد فعال سیستانچ، استفاده کرد و در نهایت 29 ترکیب از پلاسما، ادرار، مدفوع و صفرا را شناسایی کرد. یک متابولیت دنگ و همکاران 146 از فناوری HPLC/Q-TOF-MS برای تجزیه و تحلیل سیستماتیک متابولیت ها و مسیرهای متابولیک کریزوفیلین در بدن استفاده کردند و 66 متابولیت را از مدفوع موش غربال و شناسایی کردند. این مطالعه نشان داد که کریزوفیلین به راحتی به ایزوکریزوزید تبدیل می شود و به راحتی به محصولات تجزیه هیدرولیز می شود. مسیرهای متابولیکی اصلی کلروفیلین عبارتند از هیدرولیز، هیدروکسیلاسیون، استیلاسیون، سولفوناسیون، کاهش، هیدروژن زدایی و واکنش های دی متیلاسیون. Qi و همکاران 147 از UPLC/ESI-QTOF-MS ترکیب شده با فناوری MSE برای تجزیه و تحلیل اجزای شیمیایی verbascoside در داخل بدن استفاده کردند و 35 متابولیت را از ادرار موش شناسایی کردند که شامل 19 متابولیت داروی اصلی و 16 متابولیت محصول تجزیه می‌شود. چیزها این روش سریع و قابل اعتماد است، اطلاعات قابل اعتمادی در مورد متابولیسم ورباسکوزید ارائه می دهد و می تواند به طور گسترده در مطالعه متابولیت های محصول طبیعی استفاده شود. یانگ و همکاران 48] از LC-MS/MS برای مطالعه فرآیند فارماکوکینتیک in vivo اکیناسه استفاده کردند. وو و همکاران 149] از فناوری LC-MS/MS همراه با روش استخراج فاز جامد ساده (SPE) برای تعیین محتوای ورباسکوزید در پلاسما و هموژنه‌های بافت و مطالعه توزیع آن در مغز و فرآیندهای فارماکوکینتیک در داخل بدن استفاده کرد. یانگ و همکاران (0) با موفقیت از فناوری LC-MS/MS برای مطالعه فارماکوکینتیک in vivo گانگلیوزید B از طریق تجویز داخل وریدی استفاده کرد.

2. تجزیه و تحلیل اجزای درون تنی عصاره سیستانچ

در حال حاضر، هنوز تحقیقات سیستماتیک در مورد اجزای عصاره سیستانش وجود ندارد. روش های اصلی تجزیه و تحلیل HPLC و UPLC-Q-TOF-MS هستند.

ژو و همکاران [51] از روش HPLC، با استفاده از میکروامولسیون به عنوان فاز متحرک، برای جداسازی و شناسایی چهار گلیکوزید فنیل اتانوئید (اکیناکوزید، آنتوسیانوزید B، ورباسکوزید و ایزورباسکوزید) در اجزای خون جرب آمارانتوس استفاده کردند. این روش مراحل پیچیده پیش تصفیه نمونه های بیولوژیکی را حذف می کند و آنالیز مستقیم نمونه های بیولوژیکی را تنها پس از رقیق شدن با فاز متحرک میکروامولسیون امکان پذیر می کند. لی ونلان و همکاران 152-53] از فناوری کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا- طیف‌سنجی جرمی زمان پرواز چهارقطبی (HPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS) برای مطالعه ترکیب شیمیایی موش‌ها پس از تجویز خوراکی سیستانچ بیابانی استفاده کرد. با مقایسه گروه کنترل و بر اساس کروماتوگرام گروه دوز، در مجموع 24 ترکیب در ادرار و سرم موش شناسایی شد که شامل 9 جزء نمونه اولیه و 15 متابولیت بود. در همان زمان، مسیرهای متابولیکی اصلی سیستانچ در بدن (در مجموع 9 نوع) استنباط شد، از جمله واکنش متیلاسیون، واکنش دی متیلاسیون، واکنش هیدرولیز، واکنش هیدروکسیلاسیون، واکنش استیلاسیون، واکنش گلوکورونیداسیون، واکنش هیدروژناسیون، سولفوناسیون و واکنش های استریفیکاسیون. . لی و همکاران! 54 نفر از فناوری UPLC-Q-TOF-MS همراه با روش تجزیه و تحلیل حداقل مربعات جزئی متعامد (OPLS-DA) برای غربالگری سریع پلاسما، ادرار و مدفوع موش‌ها پس از تجویز خوراکی سیستانچ توبروز و سیستانش صحرا استفاده کردند. نمونه های اولیه و متابولیت ها یافته‌ها: 71 جزء شیمیایی از سیستانچ بیابانی شامل 25 نمونه اولیه و 46 متابولیت شناسایی شد. 45 جزء شیمیایی از Cistanche tubulosa، شامل 18 نمونه اولیه و 27 متابولیت شناسایی شد. این مطالعه نشان داد که مواد گلیکوزید فنیل اتانوئید عمدتاً به ترکیبات مولکولی کوچک در دستگاه گوارش موش‌ها تجزیه می‌شوند. Cistancheside B، Cistancheoside C، Cistancheside D و Cistancheoside E فقط در سیستانچ بیابانی وجود دارند و به راحتی به هیدروکسی تیروزول متیله متابولیزه می شوند. متابولیت های Cistanche و Cistanche را می توان تشخیص داد.