تأثیر سیستانچ بر تغییرات ATPase در میتوکندری کبدی موش های صحرایی سپتی سمی

تماس: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ایمیل:audrey.hu@wecistanche.com

وانگ ژیچیانگ یین باند

چکیده: هدف:برای مطالعه تغییرفعالیت ATPase میتوکندری کبد در سپسیسو اثرسیستانچبر روی آن.مواد و روش ها:40 موش SD به طور تصادفی به گروه عملیات شم، 12-گروه کنترل ساعت، 12-گروه تجویز ساعت، 16-گروه کنترل ساعت، و 16-گروه تجویز ساعت تقسیم شدند. اینسپسیسمدل با بستن سکوم و سوراخ کردن (C LP) تکرار و مقایسه شد. میزان بقای گروه، فشار متوسط ​​شریانی (MAP)، کبدمیتوکندری ATPaseفعالیت تغییر می کندنتایج:پس از اینکه موش‌ها مدل سپسیس را تکرار کردندATPaseفعالیت کبدمیتوکندریکاهش یافت و میزان بقای ساعت 24-به طور قابل توجهی کاهش یافت. اینATPaseفعالیت میتوکندری کبد پس از تجویزسیستانچدر مقایسه با گروه کنترل به طور قابل توجهی بهبود یافته بود (P<0.05), which="" was="" significantly="" positively="" correlated="" with="" the="" reduction="" of="" rat="" mortality.="">نتیجه:کاهش میتوکندریفعالیت ATPase در سپسیس، اضافه بار کلسیم سلولی و ادم و نکروز علل مستقیم مرگ و میر هستندموش های سپتیک. سیستانچ فعالیت ATPase را افزایش می دهدمکانیسم مهمی برای درمان استسپسیس.

کلید واژه ها: سیستانچ، سیستانچ سپسیس میتوکندری آنزیم ATP

سپسیسیک بیماری بالینی بحرانی است. اگرچه آنتی بیوتیک ها در 30 سال گذشته به روز شده اند، اما میزان مرگ و میر ناشی از سپسیس به طور قابل توجهی کاهش نیافته است و هنوز به 50 درصد می رسد [1]. درمان ضد باکتری غربی "از بین بردن شر" به تنهایی پیش آگهی بیماری را بهبود نمی بخشدسپسیسدر پاتوژنز TCM، سپسیس متعلق به «حق نقص و شر» است، درمان باید بر اساس اصل «تقویت بدن» و «رفع شر» باشد. طب سنتی چینی پتانسیل زیادی در درمان سپسیس نشان داده است.سپسیسعارضه نارسایی اندام های متعدد علت اصلی نرخ بالای مرگ و میر است و آسیب ساختار سلولی اساس پاتولوژیک میکروسکوپی نارسایی اندام های متعدد است [2]. سیستانچ یک داروی سنتی چینی برای مقوی است، مطالعات فارماکولوژیک مدرن نشان داده استسیستانچدارای اثر مقاومت در برابر پراکسیداسیون استر غشایی و محافظت از عملکرد سلولی است [3]. عملکرد ازانرژی میتوکندریمتابولیسم یکی از عملکردهای اساسی سلول ها و فعالیت آن استATPaseیک شاخص مهم برای اندازه گیری عملکرد استانرژی میتوکندریمتابولیسم در این آزمایش تغییرات را مشاهده کردیمATPaseفعالیت سلول های کبدی درموش های سپتیکو رابطه بین اثراتسیستانچدر مورد آن و مرگ و میر موش ها و با هدف ارائه یک مبنای نظری و کاوش موثر برای درمان "تقویت کننده" بالینیسپسیس

سیستانچ

1. مواد و روش ها

1.1 معرف ها

سیستانچاز سین کیانگ (که توسط پروفسور تان دفو از دانشکده پزشکی دانشگاه Three Gorges شناسایی شد) خریداری شد. 200 گرم سیستانچ خشک گرفته شد و دو بار در آب مقطر جوشانده شد. فیلتر تبخیر و به غلظت 1 گرم در میلی لیتر تغلیظ شد. سدیم پنتوباربیتال (001104)، گروه دارویی ملی چین شانگهای شیمیاییمعرفشرکت؛معرف ATPase(20030108)، موسسه تحقیقاتی مهندسی زیستی نانجینگ جیانچنگ.

1.2 مدل حیوانات آزمایشی و گروه بندی

40 موش صحرایی نر SD (خریداری شده از مرکز حیوانات تجربی کالج پزشکی Tongji، دانشگاه علم و فناوری Huazhong)، به طور تصادفی به 5 گروه تقسیم شدند: گروه عمل شم (n=8)، 12-ساعت کنترل گروه (n=8)، 12-گروه مدیریت ساعت (n=8)، 16-گروه کنترل ساعت (n=8)، 16-ساعت گروه مدیریت (n{10}}). به گروه عمل شم و گروه کنترل نرمال سالین با گاواژ داده شد و به گروه تجویز با 1 گرم در میلی لیتر سیستانچ دو بار در روز تا 15 روز گاواژ داده شد. اینمدل سپسیسبا بستن سکوم و سوراخ شدن تکثیر شد [4]. قبل از عمل، حیوانات برای نوشیدن آب آزاد بودند و 12 ساعت ناشتا بودند.

1.3 تعیین فشار متوسط ​​شریانی

ورید ژوگولار با سوزن پوست سر وارد شد، هپارین برای ضد انعقاد استفاده شد، شریان کاروتید مشترک چپ به قوس آئورت کانول شد و کاتتر خود ساخته به ابزار بیولوژیکی چند کاناله متصل شد و میانگینفشار شریانی(MAP) ثبت شد. پس از تثبیت MAP آزمایش کنید.

1.4 تعیین فعالیت ATPase میتوکندری

6 گرم جگر موش صحرایی را بردارید و سریع آن را در محیط جداسازی 0 درجه [250 میلی مول ساکارز، 2 میلی مول اتوکسی اتیل پیپرازین 2-اتیل سولفونیک اسید، 0.1 میلی مول اتیلن دی آمین تترا استیک اسید قرار دهید. pH7.4]، آن را باز کنید و ناخالصی ها را بشویید، سوسپانسیون متوسط ​​را جدا کنید (1:10)، با هموژنایزر الکتریکی تفلون (1200r/min) همگن کنید، 10 دقیقه با سرعت 2000r/min سانتریفیوژ کنید، مایع رویی را نگه دارید، در دمای 10000r سانتریفیوژ کنید. / دقیقه به مدت 15 دقیقه، مایع رویی را دور بیندازید، رسوب را بردارید و در 2 میلی لیتر محیط جداسازی معلق کنید تا یکتعلیق میتوکندری. کل فرآیند در دمای 0 تا 4 درجه انجام می‌شود. برای اندازه گیری از روش تعیین فسفر [5] استفاده شدفعالیت ATPase(کیت از موسسه مهندسی بیولوژیکی نانجینگ جیانچنگ خریداری شده است).

1.5 پردازش آماری

داده های تجربی همگی به صورت میانگین±انحراف استاندارد (X±S) بیان می شوند و نرم افزار SPSS آنالیز واریانس و تحلیل همبستگی یک طرفه را انجام می دهد.

عصاره سیستانچ

2. نتایج

2.1 اثر سیستانچ بر میانگین فشار شریانی و مرگ و میر 24- ساعتی موش صحرایی

فشار خون گروه کنترل در 12 ساعت پس از بستن و سوراخ شدن سکوم به طور معنی داری کاهش یافت و در ساعت 16 آشکارتر شد. در مقایسه با گروه عملیات شم، تفاوت معنی داری وجود داشت. فشار خون ازدرمان سیستانشگروه بهبود یافت. میزان مرگ و میر گروه کنترل به طور معنی داری بیشتر از گروه عمل شم و میزان مرگ و میر گروه تجویز به طور معنی داری کمتر از گروه کنترل مربوطه بود.

2.2 اثر سیستانچ بر فعالیت ATPase میتوکندریایی

فعالیت هایATPase سدیم پتاسیم، ATPase کلسیم، ATPase منیزیم و ATPase کلسیم منیزیمدر گروه تجویز به طور قابل توجهی بالاتر از گروه کنترل مربوطه بودند و به سطح گروه عملیات شم رسیدند که با کاهش همبستگی مثبت معنی‌داری داشت.مرگ و میر موش (r=0.834) ).

سیستانچ

3. بحث

Na به علاوه -K به علاوه -ATPaseکه به پمپ سدیم پتاسیم نیز معروف است، نقش فیزیولوژیکی مهمی در حفظ فعالیت های فیزیولوژیکی سلول، دمای بدن و متابولیسم طبیعی و تنظیم تعادل یون ها در داخل و خارج سلول دارد.در سپسیس، اختلال شدید پمپ سدیم در غشای داخلی میتوکندری وجود دارد که باعثمیتوکندریادم اینNa plus -K به علاوه -ATPآنزیم آسیب دیده است، عدم تعادلمیتوکندریغلظت یون افزایش می یابد، فعالیت آنزیم متابولیسم انرژی مهار می شود، تامین انرژی سلولی کاهش می یابد و ادم سیتوتوکسیک ایجاد می شود. در عین حال، نفوذپذیری غشاء افزایش می یابد که در نهایت منجر به مرگ سلولی می شود. در آزمایش متوجه شدیم که میتوکندریNa به علاوه -K به علاوه -ATPaseفعالیت سلول های کبدی سپتیک به طور قابل توجهی کاهش یافت (P<0.01), indicating="" that="" the="" liver="" tissue="" is="" seriously="" damaged.="" after="" administration="" of="" cistanche,="" the="">Na به علاوه -K به علاوه -ATPaseفعالیت ازمیتوکندری کبدبه طور قابل توجهی افزایش یافت (P<0.05), and="" the="" mortality="" of="">موش های سپتیکبه میزان قابل توجهی کاهش یافت. نتایج تجربی نشان می دهد که کاهشفعالیت Na به علاوه -K به علاوه -ATPaseبه طور قابل توجهی با توسعه همبستگی مثبت داردسپسیس در موش ها. مهار ازفعالیت Na به علاوه -K به علاوه -ATPase، ادم سلولی و مرگ منجر به نارسایی اندام های متعدد ممکن است توسعه سریع سپسیس باشد. یکی از مکانیسم های مهم. در سال های اخیر گزارش های زیادی در موردNa به علاوه -K به علاوه -ATPaseو بسیاری از بیماری ها که توجه کارکنان بالینی و پایه را به خود جلب کرده است. مطالعه قانون تغییرات در فعالیت از اهمیت زیادی برخوردار استNa به علاوه -K به علاوه -ATPaseو مقررات آن [6]. اطلاعات کمی در مورد مکانیسم خاص آن وجود داردNa به علاوه -K به علاوه -ATPaseدر توسعه و نتیجهسپسیس،و تحقیقات بیشتری مورد نیاز است.

پایداری کلسیم و منیزیم درون سلولی پایه مادی لازم برای حفظ پاسخ رهاسازی درون سلولی و انتقال اطلاعات است [7]. در آزمایش، کاهش ازفعالیت Ca2 به علاوه -ATPaseدر گروه کنترل به طور مستقیم بر فعالیت پمپ کلسیم تأثیر می گذارد و کاهش فعالیت پمپ کلسیم نقش را تضعیف می کند.میتوکندریپمپ کلسیم برای دفع Ca2 پلاس از سلول و اضافه بار Ca2 به داخلمیتوکندری. اضافه بار کلسیم در میتوکندری یک علت مهم استمیتوکندریاختلال فسفوریلاسیون اکسیداتیو، آسیب ساختاری و نکروز سلولی [8، 9]. اضافه بار Ca2 به اضافه پتانسیل غشای میتوکندری و محتوای ATP بافت [10] را کاهش می دهد و استفاده از انرژی سلول های بافتی مختل می شود. Ca2 پلاس می تواند فسفولیپاز را در میتوکندری فعال کند و باعث آسیب به میتوکندری شودغشای میتوکندری، عملکرد طبیعی سنتز ATP میتوکندری را از بین می برد و مانع تولید انرژی میتوکندری می شود [11]. اختلالاتمتابولیسم کلسیم میتوکندریمی تواند مستقیماً تأثیر بگذاردعملکرد تنفسی میتوکندری، باعث می شوداکسیژن میتوکندریاختلالات جذب و اکسیداسیون پروتون در زنجیره انتقال الکترون [12]. در عین حال، افزایش Ca2 پلاس می تواند آسیب پراکسیداسیون استر به میتوکندری را تشدید کند [13]. همه اینها به طور مستقیم یا غیرمستقیم منجر به از کار افتادن تامین انرژی سلولی و مرگ بافت‌ها و اندام‌ها و تسریع ایجاد تغییرات پاتولوژیک در سپسیس می‌شوند. در آزمایش، ما همچنین دریافتیم که فعالیت هایMg2 به علاوه -ATPase و Ca2 به علاوه -M g2 به علاوه -ATPase در موشهای سپتیکنیز به میزان قابل توجهی کاهش یافتند.Mg2 plus -ATPase و Ca2 plus -M g2 plus -ATPaseمواد مهمی برای حفظ تعادل کلسیم و منیزیم درون سلولی هستند. ویدنر گزارش داد که کاهش یونهای منیزیم داخل سلولی عامل القای آسیب غیرقابل برگشت سلولی است و نسبت Mg 2 به علاوه /Ca2 plus یک شاخص مهم منعکس کننده آسیب برگشت ناپذیر سلول ها است [14]. اینMg2 plus -ATPase و Ca2 plus -M g2 plus -ATPaseفعالیت هایسیستانچگروه تجویز شده افزایش یافت، A TPase یک سولفیدریلاز است، وسیستانچدارای اثر پراکسیداسیون استر ضد غشایی است که ممکن است به دلیل تقویت آن باشدATPaseفعالیت توسط Cistanche اساس شیمی و پایه فارماکولوژی [15].

در سپسیس، میتوکندریاختلال متابولیسم انرژی، کاهش یافته استفعالیت آنزیم ATPادم میتوکندری، اضافه بار کلسیم داخل سلولی و اختلال تعادل کلسیم-منیزیم علل مستقیم مرگ سلولی سپسیس و نارسایی اندام های متعدد هستند.سیستانچبا پراکسیداسیون استرهای غشایی مخالفت می کند، فعالیت ATPase را افزایش می دهد، هموستاز کلسیم و منیزیم درون سلولی را حفظ می کند و از عملکرد طبیعی عملکرد سلول محافظت می کند.سیستانچمکانیسم مهمی برای کاهش مرگ و میر استموش های سپتیک. این چشم انداز خوب را نشان می دهدسیستانچ در درمان سپسیس