Cistanche Deserticola Polyysaccharides با تأثیرگذاری بر فلور روده و مهار مسیر سیگنالینگ 4/فاکتور هسته ای فاکتور هسته ای ، نفروپاتی دیابتی را در موش ها کاهش می دهد.
Nov 05, 2024
چکیده: هدف از این مطالعه بررسی اثر بهبودی ومکانیسم بالقوه پلی ساکاریدهای Cistanche Deserticola (CDP)درنفروپاتی دیابتی (DN)در موش ها مدل موش DN با تغذیه رژیم غذایی چربی بالا (HFD) که همراه با تزریق داخل صفاقی استرپتوزوتوسین (STZ) ایجاد شده است. سی و شش موش C57BL/6N مرد به طور تصادفی به شش گروه تقسیم شدند (N {3}} هر کدام). همه گروه ها به صورت خوراکی با آب مقطر (کنترل و مدل) ، داپاگلیفلوزین یا CDP به مدت 4 هفته تجویز شدند. تغییر در شاخص های فیزیولوژیکی ، عملکرد کلیه ،عوامل التهابیو میکروبیوتای روده مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که CDP ها به طور قابل توجهی وضعیت کلی را بهبود بخشیده و ضعیف می کنندتغییرات بافت شناسی کلیویوتسطح قند خون را کاهش داد, پروتئین ادراریوتعوامل التهابیدر موش DN. علاوه بر این ، CDP ها بر تعادل میکروبیوتای روده ، فراوانی باکتری های مفید و کاهش باکتری های پتانسیل بیماری زا ، که به نوبه خود عملکرد سد روده را بهبود می بخشد ، تأثیر می گذارد. CDP ها همچنین فعال شدن مسیر سیگنالینگ گیرنده 4/فاکتور هسته ای-κB (TLR4/NF-κB) را مهار می کنند و باعث کاهش آزاد شدن لیپوپلی ساکارید (LPS) می شوند. در نتیجه ، CDP ها با تأثیرگذاری بر میکروبیوتای روده و مهار مسیرهای سیگنالینگ التهابی ، تأثیر بهبودی بر DN در موش ها نشان می دهند. این یافته بینش جدیدی در مورد درمان DN ارائه می دهد.
واژههای کلیدی: پلی ساکاریدهای Cistanche Deserticola;نفروپاتی دیابتی؛ سد روده ؛ فلور روده ؛ گیرنده Toll-مانند 4 ؛ فاکتور هسته ای-κB
عصاره Cistanche Deserticola با مواد اولیه با کیفیت بالا
برای به دست آوردن جزئیات بیشتر کلیک کنید
نفروپاتی دیابت (DN)علت اصلی بیماری کلیوی مرحله نهایی است و زندگی و سلامت بیماران را به طور جدی تهدید می کند [1]. مطالعات تأیید کرده اند که عدم تعادل گیاهان روده نقش مهمی در روند دیابت در حال توسعه به DN [2-3] ایفا می کند. نظریه "محور روده-کیدنی" معتقد است که تغییر در ریز محیط زیست روده می تواند با تنظیم مستقیم متابولیت های فلور روده بر پیشرفت بیماری مزمن کلیه تأثیر بگذارد [4 {4}]. فلور روده نقش مهمی در تنظیم عملکرد کلیه در مدل های DN Mouse دارد [5 {5}}]. تحقیقات عمیق در مورد "محور روده-کیدنی" به روشن شدن پاتوژنز DN کمک می کند و اهداف جدیدی را برای پیشگیری و درمان کشف می کند.
Cistanche Deserticola یک گیاه دارویی و خوراکی سنتی است که همچنین به عنوان Cistanche Deserticola ، Dijing ، Jinsun و غیره شناخته می شود و معمولاً به عنوان Seyun شناخته می شود و شهرت "جینسنگ بیابانی" را دارد [6]. به گفته فارماکوپه جمهوری خلق چین ، Cistanche Deserticola ساقه گوشتی خشک شده با برگهای پوسته پوسته Cistanche Deserticola YC Ma یا C. Tubulosa (Schenk) Wight ، گیاهی از جنس Cistanche در خانواده Orobanchaceae است.
در میان آنها ، Cistanche Deserticola سابقه طولانی در استفاده از آن به عنوان دارو و غذا دارد. Cistanche Deserticola از نظر طبیعت شیرین ، شور و گرم است و وارد کلیه و نصف النهار روده بزرگ می شود. این اثرات تنگی یانگ کلیه ، بهره مندی از ذات و خون و مرطوب کردن روده ها و تسکین یبوست [7-8] است. پلی ساکاریدها یکی از اصلی ترین ترکیبات فعال Cistanche Deserticola هستند. محتوای پلی ساکاریدها در عصاره آب Cistanche Deserticola نسبتاً زیاد است. این ماده عمدتاً از مونوساکاریدها مانند گلوکز ، گالاکتوز ، رامنوز ، آربینوز و فروکتوز تشکیل شده است. این اثرات دارویی بسیاری از قبیل تنظیم فعالیت ایمنی ، ضد پیری ، بهبود یادگیری و حافظه ، محافظت از اعصاب ، مقاومت در برابر آسیب کبد ، ضد ویروس و ضد تومور [{4 4}] دارد. مطالعات قبلی توسط گروه تحقیقاتی نشان داده است که عصاره آب Cistanche Deserticola دارای اثر درمانی بالقوه بر DN است [13]. بر این اساس ، این آزمایش فلور روده و پاسخ التهابی را به عنوان نقطه شروع برای بررسی تأثیر پلی ساکاریدهای Cistanche Deserticola (CDPs) بر بهبود DN در موش ها و بازگرداندن عملکرد کلیه ، به منظور فراهم کردن مبنای علمی برای نقش CDP ها در درمان DN گرفت.
1 ماده و روش
1.1 حیوان ، مواد و معرفها
36 6-} هفته ای موشهای مردانه C57BL/6J از مرکز آزمایش حیوانات دانشگاه پزشکی Xinjiang ، مجوز تولید حیوانات خریداری شد: SCXK (Xin) {4}} ؛ وضوح اخلاق شماره: IACUC {5}.
CDP های صحرا (کسر جرم پلی ساکارید 80 ٪ ، ، تعداد دسته ای: 2306019) شرکت Shaanxi Xintianyu ؛ Dapagliflozin (DAPA ؛ تعداد دسته ای: 2108119) شرکت داروسازی Astrazeneca ، Ltd. ؛ پروتئین کل ادرار (پروتئین کل ادرار ، UTP ؛ شماره دسته ای: C 035-2-1) ، اوره نیتروژن (نیتروژن اوره خون ، Bun ؛ شماره دسته ای: C {{4}) ، کراتینین (کراتینین ، شماره ؛ شماره ؛ C 011-2-1}) ، 6 {uic ؛ انستیتوی مهندسی مهندسی نانجینگ جیانچنگ ؛ lipopolysaccharide (lps ؛ شماره دسته: yx {{7} m) ، interleukin -6 (il {9}} ؛ تعداد دسته ای: yx-e20012) ، il {12}} (شماره دسته ای: تعداد دسته ای: yx-e205533) ، رشد فاکتور (رشد: YX-E20217) ، فاکتور نکروز تومور- (TNF- ؛ شماره دسته ای: YX-E20220) کیت شرکت بیولوژیکی Shanghai Youxuan ، Ltd. ؛ شرکت پیشرفته Chemiluminescene (ECL) کیت پکن Pulilai Gene Technology Co. ، Ltd. ؛ Streptozotocin (STZ ؛ تعداد دسته ای: 20230503) ، رژیم غذایی پرچرب (نسبت 6 60 ٪ رژیم غذایی با چربی بالا نوع خالص ، شماره مواد: Boaigang12492m) شرکت بیوتکنولوژی Beijing Baiigang ، Ltd.
خوراک اصلی (حاوی 22 ٪ آرد ذرت ، 12 ٪ سبوس ، 18 ٪ باقیمانده روغن ، 8 ٪ وعده غذایی ماهی ، 12 ٪ وعده غذایی سویا ، {{5}. 17 ٪ نمک ، {7}. 25 ٪ ویتامین ها ، {9}. 25 ٪ عناصر ردیابی ، {{{11} inderiation} 33 ٪ Liver Liver Liver Liver Live دانشگاه پزشکی سین کیانگ.
1.2 ابزار و تجهیزات
تعادل تحلیلی AE240 ، شرکت ابزار Mettler-Toledo ، آموزشی ویبولیتین ، سوئیس ؛ DHG -9053 یک اجاق گاز ضد انفجار الکتریکی ، شرکت ابزار علمی Shanghai Yiheng ، Ltd. ؛ DK-S22 حمام آب دمای ثابت ، شرکت ابزار آزمایشی شانگهای Jinghong ، با مسئولیت محدود ؛ 3-18 ks سانتریفیوژ با دمای پایین با سرعت بالا ، سیگماالدریچ ، ایالات متحده ؛ BS -380 آنالایزر بیوشیمیایی کاملاً اتوماتیک ، شرکت الکترونیک Biomedical Shenzhen Mindray ، Ltd. ؛ EM KMR3 Slicer ، HI1220 Slicer ، میکروسکوپ دیجیتال Leitz Optilux ، Leica ، آلمان ؛ سیستم تصویربرداری Fluorchem E Chemiluminescence ، Proteinsimple ، ایالات متحده.
1.3 روش
1.3.1 آزمایش حیوانات
36 C57BL/6J موشهای نر در آزمایشگاه SPF دانشگاه پزشکی سین کیانگ تغذیه شدند و آزادانه تغذیه شدند. این آزمایش پس از 7 روز تغذیه تطبیقی انجام شد. شش موش به طور تصادفی به عنوان گروه عادی (کنترل) انتخاب شدند و یک رژیم غذایی اساسی داده شد. بقیه گروههای آزمایشی از رژیم غذایی پرچرب تغذیه می شدند و در قفس های جداگانه نگهداری می شدند. وزن بدن هفته ای یک بار آزمایش می شد. موش ها برای خوردن و نوشیدن آب آزاد بودند. پس از 6 هفته تغذیه رژیم غذایی پرچرب ، موشهای گروه آزمایشی با STZ 4 {33} mg mg/کیلوگرم به صورت داخل صفاقی به مدت 5 روز متوالی علاوه بر رژیم غذایی بدون چربی بالا هر روز تزریق شدند. قند خون ناشتا پس از مدل سازی 11.1 میلی مول در لیتر بود که یک مدل موفق دیابت در نظر گرفته شد. سی موش با مدل سازی موفق به طور تصادفی به پنج گروه تقسیم شد ، با شش موش در هر گروه ، یعنی مدل (آب مقطر + رژیم غذایی با چربی بالا) گروه ، گروه DAPA (DAPA 4 میلی گرم/کیلوگرم ، رژیم غذایی با چربی بالا) ، گروه CDPS (50 میلی گرم/کیلوگرم + رژیم غذایی با چربی بالا ، CDPS/CDPS-L) گروه CDPS-L) CDPS-L). و گروه CDPS با دوز بالا (200 میلی گرم بر کیلوگرم + رژیم غذایی پرچرب ، CDPS-H) گروه. به گروه کنترل (آب مقطر + رژیم غذایی طبیعی) مقدار مساوی از آب مقطر داده شد. هر موش در 0.1 میلی لیتر در 10 گرم ، یک بار در روز در همان زمان ، به مدت 4 هفته گاو می شد. وزن بدن و تغییرات قند خون موش ها به صورت هفتگی ثبت شد.
1.3.2 تعیین شاخص
پس از 4 هفته تجویز گاواژ ، نمونه ادرار (24 ساعت) و مدفوع تازه از طریق قفس متابولیک در پایان هفته 4 جمع آوری و به ترتیب در درجه {3}} و درجه {4}} ذخیره شد. موش ها روزه گرفتند اما به مدت 12 ساعت سیراب نشدند. روز بعد ، وزن بدن ناشتا موشها اندازه گیری شد. موشها با تزریق داخل صفاقی 3 میلی لیتر در کیلوگرم از محلول هیدرات کلر 10 ٪ بیهوش شدند. خون از مدارها جمع آوری و در یک سانتریفیوژ (4 درجه ، {9}} R/min) به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شد. این مایع رویی برای استفاده بعدی در یخچال {11}}} ذخیره شده بود. سرم برای Bun ، cre ، ua ، il -6 ، il {13}} ، tgf- ، tnf- و lps مطابق کیت اندازه گیری شد. ادرار به مدت 24 ساعت با توجه به کیت اندازه گیری شد.
1.3.3 مشاهده مورفولوژیکی و آسیب شناختی کلیه و روده
1.3.3.1 تعیین ضریب کلیه
پس از جمع آوری خون ، موش ها با مصرف بیش از حد به مرگ بیهوش شدند و کلیه ها و کلون ها به طور کامل برداشته شدند و بلافاصله با نمکی از پیش خنک شده شستشو داده شدند ، روی کاغذ فیلتر تخلیه شدند و وزن شدند. ضریب کلیه با توجه به فرمول زیر محاسبه شد: ضریب کلیه/٪ {1}} × 100 m1m ، جایی که M1 وزن مرطوب کلیه/g است. M وزن بدن موش/گرم است.
1.3.3.2 مشاهده پاتولوژیک کلیه
کلیه های موش در 4 ٪ پارفرمالدئید تثبیت کننده ، کم آبی توسط شیب محلول اتانول ، شفاف سازی توسط زایلن ، و توسط زایلن ، بریده شده ، برش خورده (ضخامت 2 میکرومتر) ، با استفاده از زایلن ، و هیدراته شده توسط شیب محلول اتانول ، و سپس با هماتوکسیلین (HASON-SSON-SSON) رنگ آمیزی شد. مهر و موم شده ، و تصاویر در زیر میکروسکوپ جمع آوری و مشاهده شد.
1.3.3.3 مشاهده پاتولوژیک روده
روده موش با 4 ٪ پارفورمالید فیکسیک ، کم آبی با شیب محلول اتانول ، شفاف سازی با زایلن ، تعبیه شده در پارافین ، برش خورده (ضخامت 2 میکرومتر) ، و هیدراته با شیب اتانول ، پس از آن با رنگ آمیزی با H&E و Alcian Blue (AB) -pas -pas-رنگ آمیزی شد.
1.3.4 تجزیه و تحلیل ترکیب گیاهان روده
محتوای روده بزرگ موش در گروه کنترل ، گروه مدل و گروه CDPS-H توسط توالی توان بالا ژن RRNA 16S تشخیص داده شد. استخراج DNA و ساخت کتابخانه و توالی میکروارگانیسم ها در محتوای روده بزرگ توسط شرکت بیوتکنولوژی Lianchuan ، Ltd. به پایان رسید و داده های به دست آمده بر روی سکوی ابری Lianchuan مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.
1.3.5 تشخیص بیان پروتئین مربوط به کلیه و روده بزرگ
پروتئین های کلیه موش و بافت روده بزرگ استخراج شدند و پروتئین با روش کمیت پروتئین اسید بیسینکونیک اندازه گیری شد. پس از دناتوراسیون پروتئین ، پروتئین در یخچال درجه {0}} ذخیره شد. 10 ٪ الکتروفورز ژل سدیم دودسیل سولفات پلی آکریل آمید ، انتقال غشای پلی وینیلیدن دیفلوئورید ، غشای در یک سالین بافر تریس با مخزن انکوباسیون Tween {3} (TBST) قرار داده شد و در دمای اتاق مسدود شد. تشخیص
آنتی بادی های اصلی به گیرنده های Toll مانند (TLR) 4 ، فاکتور رونویسی هسته ای (NF) -κB P65 ، P-NF-κBP65 و -actin در بافت کلیه (آنتی بادی رقیق 1: 2 000 (V/V) با محلول TBST) و Occludin and Occludens {Occludens (Zo -1) در بافت روده بزرگ (آنتی بادی رقیق 1: {13}}} (V/V) با محلول TBST) در 4 درجه یک شب انکوبه شدند. رقت TBST ، آنتی بادی ثانویه (آنتی بادی
رقیق شده با محلول TBST 1∶ {1}} (V/V)) ، در دمای اتاق به مدت 1 ساعت انکوبه می شود ، با 3 بار با TBST شسته می شود و سپس با اضافه کردن معرف Luminescent و تصویربرداری ژل برای تشخیص بیان پروتئین استفاده شد. -actin به عنوان یک مرجع داخلی مورد استفاده قرار گرفت و مقدار خاکستری پروتئین توسط نرم افزار ImageJ مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. بیان پروتئین هر گروه به عنوان مقدار نسبی مقدار خاکستری گروه کنترل بیان شد.
1.4 آمار داده
تمام نتایج داده ها به صورت ± S بیان شد ، و SPSS 21. {1} برای تجزیه و تحلیل آماری استفاده شد. برای داده های مداوم ، اگر آنها از توزیع عادی پیروی کنند ، از آنالیز واریانس یک طرفه برای مقایسه بین گروه استفاده شد. اگر تفاوت بین گروه ها از نظر آماری معنی دار بود ، از روش ترکیه برای مقایسه زوج بیشتر استفاده می شد. اگر داده ها از توزیع عادی پیروی کنند ، از آزمون Kruskal-Wallis H برای مقایسه بین گروه استفاده می شد. هنگامی که تفاوت آماری بین گروه ها وجود داشت ، کمترین تفاوت معنی داری دوربین برای مقایسه های متعدد استفاده شد. p <{6}}. 05 نشان داد که تفاوت از نظر آماری معنی دار است.
2 نتیجه و تجزیه و تحلیل
2.1 تأثیر CDP ها بر قند خون ، وزن بدن و ضریب کلیه C57BL/6J
همانطور که از جداول 1 تا 3 مشاهده می شود ، در مقایسه با گروه کنترل ، قند خون ناشتا موش ها در گروه مدل به طور قابل توجهی افزایش یافته است (P<0.01), and the kidney coefficient was significantly increased (P<0.01); compared with the Model group, CDPs- The body weight of mice in group H increased significantly after 4 weeks of administration (P＜0.05), and blood sugar began to decrease after 3 weeks of administration (P＜0.05). The kidney coefficient of mice in each intervention group decreased, and the CDPs-H group was the lowest (P<0.01); the body weight of mice in the Control group was larger than that of each group, indicating that CDPs can slow down the swelling of the kidneys of DN mice, thereby Reduce the kidney coefficient.
جدول 1 اثرات CDP ها بر قند خون موش ها (N {1}})
| گروه | زمان/هفته | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | |
| کنترل کردن | 7.98±0.55 | 7.32±0.40 | 7.58±0.50 | 7.38±0.87 | 7.28±0.34 |
| مدل | 10.62±2.79# | 20.32±2.69# | 24.47±4.18# | 24.92±3.98# | 20.33±2.96# |
| cdps-l | 16.03±2.97 | 21.83±4.81 | 20.13±6.97 | 23.30±3.77 | 21.25±1.65 |
| cdps-m | 13.17±3.59 | 22.6±5.88 | 19.35±4.45 | 22.6±4.87 | 18.38±1.20 |
| cdps-h | 11.07±1.74 | 21.53±3.71 | 21.57±6.19 | 17.43±2.05** | 15.87±0.90** |
| DAPA | 10.28±4.75 | 21.12±4.96 | 17.72±2.00** | 17.35±2.00** | 14.55±1.06** |
واحد: mmol/l
جدول 2 تأثیر CDP ها بر شاخص کلیه موشها (N {1}})
| گروه | کنترل کردن | مدل | cdps-l | cdps-m | cdps-h | DAPA |
|---|---|---|---|---|---|---|
| وزن کلیه/بدن ٪ | 0.98±0.04 | 1.69±0.17## | 1.42±0.12 | 1.37±0.10* | 1.28±0.10** | 1.18±0.10** |
جدول 3 اثرات CDP ها بر روی توده بدن موش ها (N {1}})
| گروه | زمان/هفته | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | |
| کنترل کردن | 28.57±0.82 | 28.75±0.97 | 28.70±0.79 | 29.10±1.24 | 29.32±1.35 |
| مدل | 24.53±1.25## | 24.92±1.20## | 24.35±1.39## | 24.82±1.22## | 24.73±1.56## |
| cdps-l | 25.75±0.69 | 24.77±0.91 | 24.83±0.99 | 25.10±0.83 | 25.42±0.97 |
| cdps-m | 25.10±0.56 | 25.00±0.54 | 24.68±0.48 | 25.13±0.62 | 25.25±0.58 |
| cdps-h | 25.38±0.28 | 25.43±0.49 | 25.52±0.62 | 25.73±0.50 | 26.08±0.34* |
| DAPA | 25.13±1.02 | 25.52±0.98 | 25.97±1.00* | 26.25±0.63* | 26.63±0.78* |
2.2 تأثیر CDP ها بر عملکرد کلیه موشهای C57BL/6J
همانطور که در جدول 4 نشان داده شده است ، در مقایسه با گروه کنترل ، غلظت BUN ، CRE و UA در سرم و غلظت جرم 24 ساعته در ادرار موش ها در گروه مدل به طور قابل توجهی افزایش یافته است (P<0.01); compared with the Model group, CDPs-M and CDPs-H can significantly reduce the concentrations of BUN, Cre, and UA in serum and the 24-hour UTP mass concentration in urine (P＜0.05, P＜0.01). CDPs-L can significantly reduce the concentrations of BUN and UA in mouse serum. and 24 h UTP mass concentration in urine (P＜0.05, P＜0.01).
جدول 4 اثرات CDP ها بر روی Bun ، cre ، ua و 24 ساعت در موش DN (n=6)
| گروه | غلظت Bun (MMOL/L) | غلظت CRE (μMol/L) | غلظت محتوای 24H UTP (میلی گرم در میلی لیتر) | غلظت UA (μmmol/l) |
|---|---|---|---|---|
| کنترل کردن | 47.51±7.32 | 12.80±1.36 | 1.32±0.12 | 103.9±18.59 |
| مدل | 157.97±30.57## | 44.85±4.36## | 2.38±0.37## | 500.43±81.06## |
| cdps-l | 112.70±16.76* | 40.72±3.62 | 1.37±0.12** | 264.07±14.85** |
| cdps-m | 82.31±14.68** | 35.37±6.21* | 1.06±0.17** | 247.62±11.22** |
| cdps-h | 64.58±8.64** | 30.00±2.87** | 0.65±0.17** | 222.71±37.52** |
| DAPA | 76.98±10.47** | 28.82±3.72** | 0.37±0.10** | 129.87±17.69** |
2.3 تأثیر CDP بر فاکتورهای التهابی و غلظت جرم LPS در سرم موش C57BL/6J
همانطور که در جدول 5 نشان داده شده است ، در مقایسه با گروه کنترل ، سطح سرمی TNF- ، IL {{2} ، il {3}} ، TGF- و LPS در موش در گروه مدل به طور قابل توجهی افزایش یافته است (P<0.01); compared with the Model group, Each dose of CDPs can reduce the levels of TNF-α, IL-1β, IL-6, TGF-β and LPS in serum, CDPs-M
تأثیر گروه CDPS-H معنی دار بود (P ＜ {1}}. 0 5 یا P ＜ {6}. 01) ، و تأثیر گروه CDPS-H معنی دار بود (0.01 P P).
جدول 5 اثرات CDP ها بر فاکتورهای التهابی و LPS در موش ها (N {1}})
| گروه | غلظت جرم (pg/ml) | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| tnf- | il -1 | il -6 | tgf- | الپیاس | |
| کنترل کردن | 111.23±5.47 | 125.85±11.41 | 112.27±10.28 | 152.25±7.28 | 116.17±15.07 |
| مدل | 167.90±16.91## | 184.53±21.03## | 195.57±31.88## | 209.36±16.17## | 173.51±15.72## |
| cdps-l | 144.57±10.15* | 160.46±11.84* | 169.10±20.32 | 189.03±8.02* | 151.41±9.40* |
| cdps-m | 133.62±13.24** | 154.30±17.39* | 150.47±19.28* | 171.25±14.35** | 135.33±23.92** |
| cdps-h | 119.30±7.31** | 140.54±16.11** | 127.12±10.94** | 169.47±10.57** | 124.98±16.38** |
| DAPA | 114.79±10.48** | 135.17±14.37** | 120.90±9.32** | 159.11±10.92** |
113.34±13.14**
|
2.4 تأثیر CDP ها بر آسیب شناسی کلیه موشهای C57BL/6J
همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است ، پس از رنگ آمیزی H&E ، مشخص شد که ساختار گلومرولی و مورفولوژی موش ها در گروه کنترل طبیعی و واضح است ، غشای زیرزمین صاف بود ، مورفولوژی گلومرولی منظم بود ، بینابینی کلیوی طبیعی بود ، لوله های کلیوی به طور مرتب مرتب شده بودند ، و هیچ لفظی هلیمر هلیکل وجود نداشت. در مقایسه با گروه کنترل ، حجم گلومرولی موش در گروه مدل بزرگ شد ، غشای زیرزمین ضخیم شد ، سلولهای التهابی در اطراف آن نفوذ کردند و لوله های کلیوی بی نظم و گشاد شدند. در مقایسه با گروه مدل ، گروه های تجویز CDPS درجه های متفاوتی از بهبود در کلیه های موش داشتند. حجم گلومرولی موشها در گروههای CDPS-M و CDPS-H به طور قابل توجهی کاهش یافت ، ضخامت غشای زیرزمین کاهش می یابد ، تنها مقدار کمی از سلولهای التهابی نفوذ می کنند ، و لوله های کلیوی به طور قابل توجهی بهبود یافتند و محکم تنظیم شدند. پس از 4 هفته مداخله CDPS ، شرایط پاتولوژیک فوق همه به درجه های مختلف بازگردانده شد.
رنگ آمیزی ماسون نشان داد که لوله های کلیوی موش در گروه کنترل به طور عادی چیده شده و گلومرول ها به شکل طبیعی هستند ، هیچ تکثیر فیبر کلاژن مشاهده نشده است ، و غشای زیرزمین لوله ای قابل مشاهده است. مقدار زیادی از کلاژن رنگ آمیزی در بافت بینابینی کلیه موشها در گروه مدل مشاهده شد ، و بافت فیبری بینابینی بسته بندی شده و به طور خاص تکثیر می شود. حجم گلومرولی موش ها در گروه CDPS-M کاهش یافت و علائم تکثیر بافت فیبر کاهش یافت. لوله های کلیوی موش ها در گروه CDPS-H به طور منظم ترتیب داده شد و مقدار کمی از تکثیر فیبر کلاژن مشاهده شد.
نتایج رنگ آمیزی PAS نشان داد که گلومرول های موش در گروه کنترل از نظر حجم طبیعی و در ساختار دست نخورده بودند. موشهای موجود در گروه مدل آسیب کلیه داشتند ، حجم گلومرولی از حد معمول بزرگتر و شکل نامنظم بود و ماتریس مزانژیال رسوب شد. در مقایسه با گروه مدل ، آسیب کلیه موش ها در هر گروه تحت درمان با دارو کاهش یافته و با افزایش دوز ، شکل و اندازه گلومرولی طبیعی است و درجه رسوب ماتریس مزانژیال کاهش می یابد. نتایج حاکی از آن است که CDP ها می توانند آسیب بافت کلیه را در موش DN کاهش دهند.
شکل 1 تأثیر CDP ها بر تغییرات هیستوپاتولوژیک کلیوی در موش DN که توسط H&E ، Masson و PAS رنگ آمیزی (400 پوند) بررسی شده است
