پیش بینی مکانیسم و تأیید صحرای Cistanche در درمان بیماری التهابی روده
Nov 15, 2024
| نام مرکب (چینی) | شناسه TCMSP | وزن مولکولی | فراوچه سازی دهانی |
|---|---|---|---|
| -Sitosterol (植物甾醇) | mol000358 | 36.91 | 0.75 |
| آنچیدونولول (安诺炼) | mol005320 | 45.57 | 0.20 |
| چنینیلینولول (苏沟酚) | mol005384 | 57.52 | 0.56 |
| یانگامبول (杨安补) | mol007563 | 57.53 | 0.81 |
| Quercitrin (槲皮素) | mol000098 | 46.43 | 0.28 |
| Myricetin (桑椹素) | mol001454 | 37.05 | 0.68 |
| استوسید (毛蕨花酷) | mol003333 | 2.94 | 0.62 |
| اکدی استروئید (脱皮激素) | mol003734 | 3.14 | 0.38 |
| پولیوموزید (金合欢苷) | سد | سد | سد |
| Cistanoside A (肥皂树 A) | mol008856 | 3.62 | 0.36 |
| Cistanoside B (肥皂树 B) | mol008872 | 4.27 | 0.35 |
| سیستانوزید C (肥皂树 C) | سد | سد | سد |
| Cistanoside D (肥皂树 D) | mol00882 | 5.19 | 0.69 |
| توبولوزید A (管花草 A) | سد | سد | سد |
| توبولوزید B (管花草 B) | سد | سد | سد |
| ایزوآکرئوسید (异亮芨芨草) | mol107795 | 1.52 | 0.66 |
| 2- acetylacteoside (乙酰柠檬晶) | سد | سد | سد |
| L-arabinose (L- 阿拉伯糖) | mol010200 | 54.12 | 0.03 |
| گالاکتوزید (半乳糖) | mol010203 | 10.22 | 0.55 |
| Dulciol (半乳醇) | سد | سد | سد |
| اسید D-glucaric (D- 葡萄糖酸) | mol012957 | 60.80 | 0.06 |
| مانیتول (甘露醇) | mol000003 | 17.73 | 0.03 |
| فروکتوز (果糖) | mol000053 | 1.68 | 0.03 |
| زایلوز (木糖) | mol000731 | 58.74 | 0.03 |
| گلوکز (葡萄糖) | mol000734 | 24.44 | 0.03 |
| Rhamnose (鼠李糖) | mol004690 | 40.73 | 0.03 |
| ساکارز (蔗糖) | mol000842 | 7.17 | 0.23 |
| مانوز (甘露糖) | mol000951 | 1.76 | 0.03 |
در اینجا جدول ترجمه شده به انگلیسی است:
| نام مرکب (چینی) | شناسه TCMSP | وزن مولکولی | فراوچه سازی دهانی |
|---|---|---|---|
| فروکتوز (果糖) | mol000053 | 1.68 | 0.03 |
| زایلوز (木糖) | mol000731 | 58.74 | 0.03 |
| گلوکز (葡萄糖) | mol000734 | 24.44 | 0.03 |
| Rhamnose (鼠李糖) | mol004690 | 40.73 | 0.03 |
| ساکارز (蔗糖) | mol000842 | 7.17 | 0.23 |
| مانوز (甘露糖) | mol000951 | 1.76 | 0.03 |
| سیستانین (肉桂素) | mol008855 | 71.78 | 0.06 |
| Cistachlorin (肉桂苷素) | سد | سد | سد |
| Kankanosid A (甘菊苷 A) | سد | سد | سد |
| Kankanosid B (甘菊苷 B) | سد | سد | سد |
| 8- اسید epiloganic (8- 表乙酸) | mol003203 | 98.51 | 0.09 |
| گلوکوزید (榈苷) | سد | سد | سد |
| لیریودندران (鹤掌枫脂素) | mol007927 | 5.19 | 0.29 |
| مرکبات A (柑橘素 A) | mol013438 | 25.04 | 0.73 |
| اسید پالمیتیک (棕榈酸) | mol000069 | 19.30 | 0.10 |
| نیاسین (烟酸) | mol000421 | 47.65 | 0.02 |
شکل 1 شبکه تعامل "-هدف اصلی مواد مخدر"
3.1.4 GO و تجزیه و تحلیل غنی سازی KEGG
همانطور که در شکل 3 و 4 نشان داده شده است ، فرایند بیولوژیکی Cistanche Desericola در درمان IBD عمدتاً مربوط به فسفوریلاسیون پروتئین ، تنظیم منفی آپوپتوز ، پاسخ به محرکهای اگزوژن و غیره است ، که عمدتا شامل مسیرهای سیگنالینگ مانند PI3K/AKT و مقاومت مهار کننده مهار کننده EGFRIRIOSINE KINASE است.
3.1.5 تأیید اتصال مولکولی
نتایج تأیید اتصال مولکولی (جدول 2) نشان می دهد که انرژی اتصال هدف اصلی و اجزای هسته همه کمتر از {1}}} 7 kJ/mol است ، نشان می دهد که مولکول های لیگاند می توانند به خوبی به پروتئین گیرنده متصل شوند. در میان آنها ، انرژی اتصال دهنده Akt1 و -Sitosterol بهترین ترکیب است.
مکمل خوراکی New Herb Cistanche برای یبوست
خدمات حمایتی Wecistanche- بزرگترین صادر کننده Cistanche در چین:
ایمیل: wallence.suen@wecistanche.com
WhatsApp/TEL: +86 15292862950
3.2 نتایج آزمایش حیوانات
3.2.1 تأثیر CE بر وزن بدن موش
در مقایسه با گروه کنترل خالی ، وزن بدن موش ها در گروه مدل به طور قابل توجهی کاهش یافته است (P ＜ {{0}}. 0 1) ؛ در مقایسه با گروه مدل ، وزن بدن موش ها در گروه کنترل مثبت و گروه های دوز CE به طور قابل توجهی افزایش یافته است (05/0 ＜ P یا 01/0 ＜ P). نتایج در جدول 3 نشان داده شده است.
شکل 4 تجزیه و تحلیل مسیر KEGG از اهداف بالقوه Cistanche Deserticola در درمان IBD
جدول 2 نتایج اتصال از اجزای اصلی و پروتئین های هدف اصلی (KJ/MOL)
| ترکیب | تیاناف | ارباب | stat3 | EGFR | SRC |
|---|---|---|---|---|---|
| اسید | -6.2 | -10.0 | -7.9 | -7.6 | -8.6 |
| اسید اورسولیک | -5.2 | -10.0 | -8.0 | -7.7 | -8.0 |
| اسید گلیسیررتینیک | -6.4 | -11.3 | -8.0 | -9.2 | -8.3 |
| 18 - اسید گلیسیرریتینیک | -4.8 | -6.8 | -5.2 | -4.8 | -5.5 |
جدول 3 وزن بدن ، DAI ، طول روده بزرگ و نمره پاتولوژیک موش ها در هر گروه (X ± S)
| گروه | n | وزن (G) | طول بدن (سانتی متر) | دای (٪) | نمره آسیب شناختی |
|---|---|---|---|---|---|
| کنترل کردن | 8 | 20.84 ± 0.61 | 7.48 ± 0.18 | 0 | 0.13 ± 0.22 |
| مدل | 7 | 14.24 ± 0.92a | 5.77 ± 0.35* | 3.30 ± 0.50* | 2.85 ± 0.61* |
| دوز کم | 7 | 17.59 ± 0.75b | 7.47 ± 0.70b | 1.99 ± 0.45b | 0.93 ± 0.36b |
| دوز کم | 7 | 16.23 ± 0.99b | 7.27 ± 0.42b | 2.66 ± 0.48b | 2.22 ± 0.60b |
| دوز میانی | 8 | 17.07 ± 0.67b | 7.37 ± 0.34b | 2.06 ± 0.31b | 1.51 ± 0.29b |
| دوز بالا | 8 | 17.37 ± 0.41b | 7.43 ± 0.62b | 1.85 ± 0.43b | 1.13 ± 0.77b |
پاسخ: در مقایسه با گروه کنترل ، P<0.01; b: Compared to the model group, P<0.01; c: Compared to the model group, P<0.05.
3.2.2 تأثیر CE بر روی ماوس دای و روده بزرگ
در مقایسه با گروه کنترل خالی ، DAI موش در گروه مدل به طور قابل توجهی افزایش یافته و طول روده بزرگ به طور قابل توجهی کوتاه شد (P<0.01); compared with the model group, the DAI of rats in the positive control group and CE groups at each dose was significantly reduced, and the colon length was significantly shortened (P<0.01). All increased significantly (P＜0.05 or P＜0.01). The results are shown in Table 3 and Figure 5.
3.2.3 تأثیر CE بر مورفولوژی بافت شناسی روده بزرگ
مخاط روده بزرگ موش ها در گروه کنترل خالی از نظر ساختار کامل و واضح بود و هیچ نفوذ سلول التهابی و زخم یافت نشد. مخاط روده بزرگ موش در گروه مدل ناقص بود ، بیشتر غدد از بین رفتند ، برخی از سلولهای اجباری ناپدید شدند و ساختار رمزنگاری از بین رفت. در مقایسه با مدل مقایسه گروه ها ، آسیب بافت روده بزرگ موش ها در گروه کنترل مثبت و گروه های CE بهبود یافته ، نفوذ سلول التهابی و تخریب غده در بافت روده بزرگ به طور قابل توجهی کاهش می یابد ، درجه التهاب به طور قابل توجهی کاهش می یابد ، و نمره هجوم روده بزرگ به طور قابل توجهی کاهش می یابد (P {{0 {{{{05 یا P<0.01). The results are shown in Figure 6 and Table 3.
3.2.4 تأثیر CE بر سطح عوامل التهابی در بافت روده بزرگ موش
در مقایسه با گروه کنترل خالی ، سطح il {{0} ، il -1 ، mpo و tnf- در بافت روده بزرگ موش در گروه مدل به طور قابل توجهی افزایش یافته است (p ＜ {5}}. سطح IL {7}} به طور قابل توجهی کاهش یافته است. (P <0.01) ؛ در مقایسه با گروه مدل ، سطح IL {10}} ، il {11}} ، MPO و TNF- در بافت روده بزرگ موش در گروه کنترل مثبت و گروه های CE به طور قابل توجهی کاهش یافته است (P <0.05 یا P <0.01) ، IL {17 {}}}
سطح به طور قابل توجهی افزایش یافته است (P ＜ {0}}. 01). نتایج در جدول 4 نشان داده شده است.
3.2.5 سطح بیان پروتئین های هدف اصلی در بافت روده بزرگ موش
در مقایسه با گروه کنترل خالی ، سطح بیان پروتئین PI3K ، P-PI3K ، EGFR ، TNF- ، STAT3 ، P-STAT3 ، AKT1 ، P-AKT1 و SRC در بافت روده بزرگ موش در گروه مدل به طور قابل توجهی افزایش یافته است (P< 0.05 or P＜0.01); compared with the model group, the expression levels of the above proteins in the colon tissue of mice in the positive control group and CE groups were significantly reduced (P＜0.05 or P＜0.01).
نتایج در شکل 7 و جدول 5 نشان داده شده است.
جدول 4 مقایسه سطح فاکتور التهابی در بافت روده بزرگ موش (X ± S)
| گروه | n | il -10 (pg/ml) | il -6 (pg/ml) | il -1 (pg/ml) | TNF- (pg/ml) | MPO (U / L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| کنترل کردن | 8 | 47.0 ± 4.70 | 17.35 ± 0.64 | 291.27 ± 72.33 | 387.71 ± 116.76 | 23.06 ± 7.26 |
| مدل | 7 | 3.68 ± 0.32a | 145.08 ± 23.86a | 338.94 ± 95.11a | 635.27 ± 135.15a | 97.06 ± 28.07a |
| دوز کم | 7 | 44.74 ± 8.34b | 23.23 ± 4.64b | 300.52 ± 84.71b | 448.21 ± 123.28b | 38.60 ± 16.78b |
| دوز کم | 7 | 12.87 ± 3.26b | 81.12 ± 18.95b | 331.24 ± 95.80b | 510.81 ± 110.63b | 51.61 ± 11.62b |
| دوز میانی | 8 | 21.80 ± 4.12b | 50.75 ± 22.16b | 323.62 ± 79.21b | 508.68 ± 146.97b | 45.53 ± 15.21b |
| دوز بالا | 8 | 31.10 ± 7.40b | 27.55 ± 41.22b | 294.13 ± 86.05b | 461.42 ± 140.30b | 44.26 ± 13.58b |
پاسخ: در مقایسه با گروه کنترل ، P<0.01; b: Compared to the model group, P<0.01.
پاسخ: گروه کنترل خالی ؛ ب: گروه مدل ؛ ج: گروه کنترل مثبت ؛ D: CE گروه با دوز بالا ؛ E: گروه با دوز متوسط ؛ F: CE گروه با دوز کم.
شکل 7 الکتروفورز بیان پروتئین هسته در بافت روده بزرگ موش در هر گروه
4 بحث
در این مطالعه ، نتایج آزمایشات متصل به مولکولی نشان داد که اجزای اصلی کوئرستین ، سوزیلید ، -سایتواسترول و گلیکوزید H توانایی اتصال قوی به اهداف اصلی TNF ، AKT1 ، STAT3 ، EGFR و SRC را نشان دادند. این نشان دهنده ویژگی های هم افزایی چند مؤلفه و چند هدف Cistanche Deserticola است.
مطالعات نشان داده اند که کوئرستین می تواند به طور قابل توجهی ترشح و آزاد سازی عوامل التهابی و واسطه های التهابی را مهار کند و اثرات ضد التهابی خوبی دارد [17]. سوزیلید می تواند به طور موثری ترشح گاما-ایرترفرون را توسط سلولهای ایمنی بدن ترویج کند و تأثیر افزایش نشاط سلولهای ایمنی و کاهش زنده ماندن سلولهای تومور را دارد. سوزیلید و کوئرستین نیز تأثیر ترویج ترشح گاما-ایرترفرون توسط سلولهای ایمنی را دارند. هم افزایی [18].
-Sitosterol می تواند پیشرفت کولیت را با پایین آمدن سطح عوامل التهابی مانند IL {1}} ، il -1 و TNF- [19] کاهش دهد. Cistancheside H می تواند استرس اکسیداتیو و پاسخهای التهابی را از طریق مسیرهای سیگنالینگ مانند متابولیسم گلیسیر فسفولیپید و متابولیسم اسید آراشیدونیک تنظیم کند [20].
مشاهده می شود که کوئرستین ، سوزیلید ، -سیتوسترول و Cistanche Glycoside H ممکن است مبنای مادی Cistanche Deserticola در درمان IBD باشد.
تجزیه و تحلیل مسیر KEGG نشان داد که Cistanche Deserticola یک اثر درمانی در IBD به طور عمده از طریق تنظیم مسیرهای سیگنالینگ مانند PI3K/AKT و EGFR مقاومت مهارکننده تیروزین کیناز بازی می کند. مطالعات اشاره کرده اند که فعال شدن مسیر سیگنالینگ PI3K/AKT می تواند باعث آزاد شدن عوامل التهابی شود و باعث آسیب التهابی شود [21].
SRC مولکول سیگنالینگ بالادست از مسیر سیگنالینگ PI3K/AKT است. DSS که وارد سلولهای می شوند می توانند به سرعت مسیر سیگنالینگ SRC/PI3K/AKT را فعال کرده و جذب سلولهای ایمنی ذاتی مانند ماکروفاژها و نوتروفیل ها را به بافتهای آسیب دیده التهابی ترویج کنند و از این طریق باعث انتشار فاکتورهای التهابی پاسخ التهابی بدن می شود [22].
EGFR را می توان با اتصال به پروتئین های مرتبط با بالادست فسفریله کرد ، مسیر سیگنالینگ PI3K/AKT را فعال کرد و سپس با مسیر سیگنالینگ WNT همکاری کرد تا واسطه پاسخهای التهابی باشد [23]. AKT1 می تواند فاکتور هسته ای κB را فعال کند ، در نتیجه ترویج سنتز و آزادسازی عوامل التهابی و تسریع در پاسخ التهابی [24].
STAT3 پروتئین هدف اصلی مسیر سیگنالینگ JAK/STAT است. هنگامی که STAT3 به سرعت فعال می شود ، می تواند باعث آزاد شدن فاکتورهای التهابی مانند IL -6 و il {3}} شود و منجر به افزایش نفوذ التهابی شود [25]
بشر TNF- اولین سیتوکین است که در پاسخ ایمنی آزاد می شود ، می تواند التهاب روده را از طریق مکانیسم های مختلف واسطه کند ، و همچنین می تواند به طور مستقیم آپوپتوز سلول اپیتلیال روده را القا کند [26].
مشاهده می شود که TNF- ، AKT1 ، STAT3 ، EGFR و SRC ممکن است اهداف اصلی Cistanche Deserticola در درمان IBD باشد. آزمایشات بیشتر حیوانات نشان داد که CE می تواند سطح بیان پروتئین های فوق را کاهش دهد و صحت پیش بینی هدف فارماکولوژی شبکه را نشان می دهد.
به طور خلاصه ، این مطالعه به طور سیستماتیک تأثیر Cistanche Deserticola در درمان IBD از طریق فارماکولوژی شبکه و آزمایش حیوانات را تأیید کرد. مکانیسم خاص عمل آن ممکن است مربوط به تنظیم مسیر سیگنالینگ SRC/EGFR/PI3K/AKT باشد.