مقایسه اثرات کنترلی باکتری های خاک ریزوسفر بر بیماری های منتقله از خاک گیاه سیستانش کویر

خلاصه: برای غربالگری باکتری‌های ریزوسفری که اثرات کنترلی بر بیماری‌های منتقله از خاک دارند، از سال‌های کاشت مختلف Cistanche deserticola در زیر جنگل‌های پهن برگ در شهرستان Tonghua استفاده شد. روش رقت گرادیان، و باکتری های آنتاگونیست با استفاده از روش مقابله با صفحه غربال شدند. نتایج حاکی از آن است که از ریزوسفر Cistanche deserticola 37 سویه باکتریایی از خاک جدا شد و 8 سویه اثر مهاری بر بیماری پژمردگی Cistanche deserticola داشتند. در میان آنها، سویه های کد شده 5-2، 11-6 و 11-7 فعالیت ضد باکتریایی نشان دادند. 9 سویه دارای اثرات مهاری بر روی سوختگی ساقه سیستانش دسرتیکولا هستند و در مقایسه با CK، اثرات بازدارندگی دو سویه باکتریایی 15-6 و 11-1 در سطح {{{0}}}.01. تفاوت بسیار معنی داری در قطر باکتری وجود دارد، با سه سویه باکتری، 11-1، 15-6، و 15-5 که تفاوت معنی داری را در سطح 0.05 نشان می دهد. 9 سویه اثر بازدارندگی خاصی بر پوسیدگی ریشه سیستانش دسرتیکولا دارد، اما هیچکدام از آنها قابل توجه نیستند و سویه های 11-7 بیشترین قطر ضد باکتریایی را دارند. باکتری‌های 5-2، 11-1، 11-7سویه‌های 15-5 و 15-6 را می‌توان بیشتر شناسایی و مطالعه کرد.

Cistanche deserticola

برای مشاهده محصولات چای سیستانچ دسرتیکولا اینجا کلیک کنید

【بیشتر بخواهید】 ایمیل:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

کلید واژه ها:Cistanche deserticola; جنگل پهن برگ؛ کنترل بیولوژیکی؛ روش مقابله با صفحه

Cistanche deserticola [1] عمدتاً در منطقه کوه های Changbai کشت می شود و منطقه اصلی تولید Cistanche deserticola در چین است که 85 درصد از تولید کشور و 52 درصد از تولید جهان را تشکیل می دهد. Cistanche deserticola حاوی اجزای مختلف زیست فعال مانند ساپونین ها و پلی ساکاریدها است که در زمینه هایی مانند ضد تومور، ایمونولوژی و تغذیه تاثیرات خاصی دارند. کیفیت و عملکرد گیاه Cistanche deserticola به دلیل بیماری های منتقله از طریق خاک Cistanche deserticola [3] محدود می شود، به این معنی که عوامل بیماری زا در خاک می توانند به ریشه و ساقه محصولات آسیب برسانند و باعث بیماری شوند. بیماری های منتقله از خاک گیاه Cistanche deserticola شامل پوسیدگی ریشه، کپک خاکستری، پوسیدگی ساقه، پژمردگی و مرگ ناگهانی است. بیماری پژمردگی سیستانچ توسط Fusarium oxysporum ایجاد می‌شود که می‌تواند باعث ایجاد لکه‌های بیماری در ساقه‌ها و برگ‌ها شود که در نهایت منجر به سکونت و مرگ سیستانچ می‌شود. باکتری های بیماری زا بیماری پژمردگی Cistanche deserticola بیشتر Rhizoctonia solani هستند [6]. محل آلوده لکه های بیماری ایجاد می کند، به مناطق اطراف گسترش می یابد و در نهایت کل گیاه پژمرده می شود و می میرد. بیماری پوسیدگی ریشه Cistanche deserticola توسط Fusarium oxysporum [7] ایجاد می شود که می تواند تعداد زیادی هاگ برای انتشار و تکثیر تولید کند که منجر به تغییرات پاتولوژیک در ریشه Cistanche deserticola، عدم توانایی در جذب مواد غذایی به طور طبیعی از خاک و در نهایت، ریشه Cistanche deserticola می پوسد و می میرد.

گل سیستانچ بیابانی

استفاده از میکروارگانیسم ها برای پیشگیری و کنترل بیماری ها یک وسیله موثر سبز و بدون آلودگی برای کنترل بیولوژیکی است. اگرچه کنترل شیمیایی اثرات قابل توجه و سریع دارد و می تواند در کوتاه مدت بیماری ها را به طور موثر کنترل کند، اما آسیب آن به محیط زیست و خاک اغلب غیر قابل برگشت است. این مطالعه با هدف غربالگری باکتری‌های ریزوسفر گیاه Cistanche deserticola که دارای اثرات ضدباکتریایی بر بیماری‌های منتقله از خاک هستند و مرجعی برای تولید عوامل میکروبی ارائه می‌کند.

1 مواد و روش ها

1.1 مواد

در ژوئیه 2020، از روش‌های مرسوم برای جمع‌آوری نمونه‌های خاک از پایگاه Cistanche deserticola در زیر جنگل پهن برگ در شهرستان Shihu، شهرستان Tonghua، با سال‌های کاشت 2، 5، 8، 11، و 15 سال و همچنین خاک استفاده شد. از مناطق بدون کاشت گیاه سیستانچ کویر. نمونه ها در یخچال در دمای 4 درجه در آزمایشگاه نگهداری و برای استفاده بعدی شماره گذاری شدند. از محیط PDA برای کشت قارچ و از محیط پپتون عصاره گوشت گاو برای کشت باکتری استفاده کنید.

سیستانچ زندگی بیابانی

سه باکتری بیماری زا، Fusarium sp.، Rhizoc tonia solani و Fusarium solani، همگی توسط آزمایشگاه میکروبیولوژی دانشگاه Tonghua Normal ارائه شدند.

1.2 روش های تجربی

روش رقت گرادیان برای جداسازی سویه‌های میکروبی در خاک ریزوسفر Cistanche deserticola [10] و روش مقابله با صفحه برای غربال کردن باکتری‌های ریزوسفر با اثرات آنتاگونیستی استفاده شد. ابتدا سه نوع باکتری بیماری زا را در محیط PDA فعال کنید [11] و سپس یک کیک باکتریایی با کلنی به سمت پایین درست کنید. آن را در مرکز محیط PDA تلقیح کنید، و از یک حلقه تلقیح برای تلقیح باکتری های ریزوسفر تا فاصله 23 میلی متری از لبه ظرف استفاده کنید، بدون اینکه باکتری به عنوان شاهد خالی تلقیح شود. برای هر تیمار 3 تکرار انجام دهید، در دمای 30 درجه به مدت 4-7 روز انکوبه کنید، وجود دایره های ضد باکتری را مشاهده کنید [12] و قطر آنتی باکتریال را اندازه گیری کنید.

داده ها با استفاده از نرم افزار Excel 2016 برای آمار داده ها و نرم افزار DPS برای تجزیه و تحلیل داده ها مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.

2 نتایج و تجزیه و تحلیل

جداسازی و خالص سازی باکتری ها در خاک ریزوسفری Panax ginseng در جنگل های پهن برگ

همانطور که در جدول 1 نشان داده شده است، 37 سویه باکتریایی از خاک جینسنگ در زیر جنگل های پهن برگ و خاک ریزوسفر جینسنگ در سال های مختلف کاشت جدا شد.

جدول 1 تعداد و شماره باکتری های جدا شده از خاک ریزوسفر جینسنگ

توجه: در جدول، سن کاشت گیاه سیستانچه بیابان 0 است که به خاک منطقه ای که سیستانش کویر کاشته نشده است اشاره دارد. رقم اول نشان دهنده سن کاشت Cistanche deserticola و رقم آخر نشان دهنده تعداد سویه است.

2.2 غربالگری باکتری های کنترل زیستی در خاک ریزوسفر Cistanche deserticola در جنگل های پهن برگ

از طریق آزمایشات، 8 سویه باکتری با اثرات متضاد بر بیماری پژمردگی سیستانچ، 9 سویه باکتری با اثرات متضاد بر بیماری پژمردگی سیستانچ و 10 سویه باکتری با اثرات متضاد بر بیماری پوسیدگی ریشه جینسنگ غربالگری شدند.

2.2.1 اثر آنتاگونیستی باکتری های کنترل زیستی بر بیماری پژمردگی سیستانش

از بین 37 سویه باکتری جدا شده از خاک ریزوسفر سیستانش دسرتیکولا، 8 سویه اثر مهاری بر روی قارچ Fusarium oxysporum داشتند، در حالی که 29 سویه اثر بازدارندگی نداشتند. با توجه به آزمایش رویارویی صفحه تخت، قطر ناحیه بازدارنده هر یک از باکتری های ضد باکتری در برابر پاتوژن بیماری پژمردگی Cistanche deserticola اندازه گیری شد [13]. سه داده آزمایشی مکرر وارد اکسل شد و تجزیه و تحلیل معنی‌داری تفاوت بر روی داده‌ها با استفاده از نرم‌افزار DPS انجام شد. نتایج در جدول 2 نشان داده شده است.

جدول 2 تعیین اثر کنترلی باکتری های مختلف ضد باکتریایی بر بیماری پژمردگی سیستانش دسرتیکولا

نتایج تجزیه و تحلیل نشان داد که تنها قطرهای بازدارندگی {{0}} با کنترل تفاوت معنی‌داری داشتند، در حالی که قطرهای بازداری 5-2، 11-6 و 11-7 دارای اختلاف معنی‌داری بودند. تفاوت قابل توجهی با کنترل دارد. در بین تیمارها، تفاوتی در سطح 01/0 0 وجود نداشت. در سطح 05/0، بین باکتری‌های 11-7 و 11-1، 15-5 و 15-6 تفاوت معنی‌داری وجود داشت، در حالی که بین باکتری‌ها تفاوت معنی‌داری وجود نداشت 11-7 و 5-2، 11-4، 11-5، و 11-6. باکتری‌های 5-2، 11-6 و 11-7 را می‌توان برای تحقیقات بیشتر در مورد اثرات ضد باکتریایی آنها در این زمینه در نظر گرفت.

2.2.2 اثر آنتاگونیستی باکتری های کنترل زیستی بر سوختگی ساقه گیاه Cistanche deserticola

از 37 سویه باکتری جدا شده از ریزوسفر خاک Cistanche deserticola، 9 سویه اثر مهاری بر روی Fusarium oxysporum داشتند، در حالی که 28 سویه اثر بازدارندگی نداشتند. نتایج تجزیه و تحلیل آماری در جدول 3 نشان داده شده است.

جدول 3 تعیین اثر کنترلی باکتری های مختلف ضد باکتریایی بر بیماری پژمردگی سیستانچ کویر

از نتایج تجزیه و تحلیل در جدول 3، می توان دریافت که در مقایسه با CK، تفاوت بسیار قابل توجهی در قطر ضد باکتری دو سویه باکتریایی 15-6 و 11-1 در 0 وجود دارد. .0سطح 1 و در سطح 0.05 تفاوت بسیار معنی داری در قطر ضد باکتری سه سویه باکتری 15-6، 11-1 و 15-5 وجود دارد. بین سایر عوامل و CK تفاوت معنی داری وجود نداشت. تفاوت معنی داری در قطر ضد باکتری بین سه سویه باکتری 11-1، 15-5 و 15-6 در بین تیمارهای مختلف وجود نداشت. در قطر آنتی باکتریال بین 15-6 و سایر باکتری ها تفاوت معنی داری وجود داشت و بین 5-2، 11-1، 11-3، 11-4 تفاوت معنی داری وجود نداشت، 11-7، و 15-5، اما در مقایسه با 0-3 و 15-4 قابل توجه بود. 15-6، 11-4، و 15-5 بهترین اثرات کنترل باکتریایی را دارند و می‌توان آنها را بیشتر برای اثربخشی آزمایش کرد.

2.2.3 اثر آنتاگونیستی باکتری های کنترل زیستی بر پوسیدگی ریشه گیاه Cistanche deserticola

جدول 4 تعیین اثر کنترلی باکتری های ضد باکتری مختلف بر پوسیدگی ریشه گیاه Cistanche deserticola

نتایج جدول 4 نشان می دهد که باکتری 11-7 اثر مهاری خاصی بر پژمردگی جینسنگ دارد، اما این اثر معنی دار نیست. این 10 گروه از باکتری ها در مقایسه با گروه کنترل اثر مهاری قابل توجهی بر روی باکتری های بیماری زا ندارند.

3 خلاصه و بحث

در این آزمایش، در مجموع 37 سویه باکتری از خاک ریزوسفر جینسینگ که به مدت 2، 5، 8، 11 و 15 سال بدون جینسنگ در زیر جنگل های پهن برگ کاشته شده بود، جدا شد. هشت سویه باکتری با اثرات بازدارنده بر بیماری پژمردگی جینسینگ غربالگری شدند که سویه‌های 5-2، 11-6 و 11-7 دارای بیشترین اثرات ضد باکتریایی بودند. 9 سویه دارای اثرات مهاری بر بیماری پژمردگی جینسنگ هستند. در مقایسه با CK، تفاوت بسیار قابل توجهی در قطر ضد باکتری دو سویه باکتری {{10}} و 11-1 در سطح 0.01 وجود دارد. در سطح 0.05، تفاوت بسیار معنی داری در قطر ضد باکتری سه سویه باکتری 11-1، 15-6 و 15-5 وجود دارد. 9 سویه دارای اثرات بازدارنده خاصی بر پوسیدگی ریشه جینسنگ هستند، اما هیچ یک از آنها قابل توجه نیستند و سویه‌های 11-7 بیشترین قطر بازدارندگی را دارند.

گیاه سوپرمن سیستانچ

در این میان، سویه‌های باکتریایی 5-2، 11-1، 11-7، 15-5، و 15-6 می‌توانند به عنوان باکتری‌های ضدباکتری عالی برای کشت و تکثیر مورد استفاده قرار گیرند. اثرات ضد باکتریایی در زمینه اثر مهاری بر سایر باکتری های بیماری زا بیماری های جینسینگ نیاز به بررسی بیشتر دارد.

جینسینگ صحرا

استفاده از میکروارگانیسم ها برای کنترل بیماری های گیاهی تأثیر کمی بر محیط زیست و انسان دارد که نشان دهنده مفهوم توسعه پایدار [14] است و چشم انداز وسیعی برای توسعه دارد. قرار دادن عوامل بیولوژیکی در تولید و عمومیت نیز آگاهی مردم را از حفاظت از محیط زیست بهبود می بخشد. استفاده از عوامل باکتریواستاتیک مناسب برای این زمینه، مزایای بلند مدت و مزایای زیست محیطی پایدار را به همراه خواهد داشت.

ارجاع

[1] چن هونگیو، کائو یانگ، یانگ هواپینگ. تجزیه و تحلیل ارزش کاربردی مشارکت لین شیاشان در کشت جینسنگ [J]. مقدمه ای بر طب سنتی چینی، 2019، 25 (06): 67-68 به علاوه 81

[2] Zhang Lianxue، Chen Changbao، Wang Yingping، و همکاران. تحقیق در مورد کشت مداوم جینسینگ و راه حل های آن [J] Journal of Jilin Agricultural University, 2008,30 (4): 481-485491

[3] پارک جینگ پی، دای یوکیانگ، ژو شیائومی. پیشرفت تحقیقات در کنترل بیولوژیکی بیماری های جینسینگ [J]. Journal of Jilin Normal University (Natural Science Edition), 2021,42 (04): 103-107

[4] مطالعه مقدماتی در مورد غربالگری، شناسایی، و ارزیابی اثربخشی ضد باکتریایی 7 سویه ضد باکتریایی بیماری های جینسینگ توسط شائو تیانوی [D]. کالج پزشکی اتحادیه پکن، 2017

[5] دنگ نیش. تحقیق در مورد بیماری پژمردگی جینسنگ [J]. مجله بیماری شناسی گیاهی، 1368، (02): 122

[6] گائو وی. روش های جامع پیشگیری و کنترل بیماری پژمردگی جینسنگ [J]. دوستان ثروت کشاورزان، 2018، (19): 29

[7] چن دده. تجزیه و تحلیل پاتوژن های پوسیدگی ریشه جینسینگ و پوسیدگی زنگ و غربالگری و شناسایی آنتاگونیست ها [D]. دانشگاه کشاورزی جیلین، 2019

[8] لی هائویو. جداسازی و شناسایی میکروارگانیسم های آنتاگونیست در خاک ریزوسفر سیب زمینی و بررسی اولیه اثرات ضد باکتریایی آنها [D]. دانشگاه کشاورزی مغولستان داخلی، 2020

[9] شائو تیانوی، دینگ وانلونگ، لی یونگ. غربالگری و شناسایی سویه های آنتاگونیست باکتری های بیماری زا جینسنگ [J]. طب مدرن چینی، 2017، 19 (05): 693-697

[10] Zhang Jiejing، Chen Dede، Gao Jixuan، و همکاران. غربالگری و شناسایی باکتری های ضد باکتری در برابر بیماری پوسیدگی زنگ جینسینگ و تاثیر آنها بر تنوع میکروبی در خاک ریزوسفر [J]. مجله دانشگاه کشاورزی جیلین، 2020، 42 (05): 526-532

[11] سان وی. روش برای فعال سازی باکتری [J]. راهنمای ایمنی مواد غذایی، 2020، (35): 78

[12] جیانگ ژو. کنترل بیولوژیکی بیماری های قارچی ناشی از خاک در جینسینگ [D]. دانشگاه هیلونگجیانگ، 2010

[13] وی چوانهائو، وانگ میکین. اثر مهاری باکتری ضد باکتری GHt-q6 بر پاتوژن پژمردگی خیار [J]. Shanxi Agricultural Science, 2021,49 (04): 494-498

[14] سونگ جینکیو، تیان کانشی. کنترل بیولوژیکی اندوفیت های گیاهی در بیماری های گیاهی [J]. مکانیزاسیون کشاورزی هوبی، 2020، (04): 69-70