تعیین داروهای تقویت کننده جنسی که به طور غیرقانونی در محصولات مراقبت های بهداشتی توسط TLC-NIｒS Technology اضافه شده است

چکیده:برای ایجاد مدل تشخیصداروهای تقویت کننده سکسبه طور غیرقانونی توسط کروماتوگرافی لایه نازک (TLC) و طیف سنجی مادون قرمز نزدیک (NIｒS) ترکیبی ، برای تجزیه و تحلیل سریع کیفی و کمی از داروهای غیرقانونی که به طور غیرقانونی اضافه شده اندمحصولات مراقبت های بهداشتی． با هفتممحتوای داروهای شیمیاییدر مراقبت های بهداشتی محصولات با روش HPLC به عنوان یک مقدار مرجع تعیین می شود TLC در مطالعه استفاده شد تری کلرومتان-متیل هیدروکسید الکل-آمونیوم (1 0 ∶ 1 ∶ 0}． 1) به عنوان حلال در حال توسعه استفاده شد و صفحه تحت یک لامپ ماوراء بنفش． تشخیص داده شد. طیف NIｒ از لکه های مؤلفه شیمیایی در TLC توسط niｒs جمع آوری شد مدل کیفی و کمی سریع داروهای شیمیایی با استفاده از تجزیه و تحلیل رگرسیون حداقل مربعات جزئی (PLS) همراه با روش اعتبار سنجی متقابل ایجاد شد. و برای مدل تأیید شده است روش تجزیه و تحلیل HPLC را با درجه جداسازی بهتر و دامنه خطی گسترده ایجاد کرد مدل های تجزیه و تحلیل TLC-NIｒS از سیلدنافیل و نوراستیلدنافیل با دامنه خطی گسترده را تأسیس کرد و نتایج پایدار و پیش بینی شده بهتر ضریب همبستگی (ｒ2) ، میانگین خطای مربع اعتبار سنجی کالیبراسیون (ｒMSECV) و میانگین خطای مربع ریشه پیش بینی (ｒmsep) {1 {12 {12}}}}}． بود 984 ، {14}}． {16}} 85 و {18}}． 081 ؛ 0 982،0 098 و 0 087 ، به ترتیب با استفاده از مدل TLC-NIｒS ، 9 دسته از 10 دسته از محصولات تقویت کننده جنسی به سیلدنافیل اضافه شد و میزان غیرقابل قبول 90 ٪ ، میانگین انحراف نسبی محتوای سیلدنافیل و نوراستیلدیلنافیل پیش بینی شده 1． بود 86 ٪ ، 1． به ترتیب 96 ٪ نتایج نشان داد که از مدل های تجزیه و تحلیل TLC-NIｒS می توان برای تعیین سریع اجزای شیمیایی فوق در محصولات تقویت کننده جنس استفاده کرد روش با خاص و ساده که ایده هایی را برای تعیین سریع داروهای غیرقانونی اضافه شده در محصولات مراقبت های بهداشتی فراهم کرده است

 

مکمل های گیاهی طبیعی Cistanche برای عملکرد جنسی

 

کلمات کلیدی: محصولات مراقبت های بهداشتی؛ به طور غیرقانونی اضافه شد tlc-niｒs ؛ HPLC ؛ محصول تقویت کننده سکس

 

با افزایش آگاهی عمومی از مراقبت های بهداشتی ، تقاضا برای محصولات بهداشتی در حال رشد است ، به ویژه محصولات بهداشتی که به عنوان طب سنتی چینی شناخته می شوند. محصولات بهداشتی یک اصطلاح محبوب برای غذاهای بهداشتی است که به آنها مکمل های غذایی در خارج از کشور گفته می شود. آنها دارویی نیستند و عملکردی در تنظیم عملکردهای انسانی دارند. آنها توسط گروه های خاصی از افراد مورد استفاده قرار می گیرند ، اما برای درمان بیماری ها در نظر گرفته نشده اند [1]. در مواجهه با وسوسه سود بالا ، فروشندگان غیرقانونی دوزهای بیش از حد مواد اولیه شیمیایی ارزان قیمت را با عوارض جانبی آشکار به محصولات بهداشتی اضافه می کنند تا اثربخشی محصولات را افزایش دهند. این امر به شدت بازار محصولات بهداشتی کشور من را مختل کرده و تهدیدی جدی برای سلامت مردم ایجاد کرده است. به عنوان مثال ، در سال 2009 ، محصول سلامت کمکی Hypoglycemic منطقه Xinjiang "کپسول Tangzhining" دوزهای بیش از حد داروهای شیمیایی ممنوعه گلیبنکلامید را اضافه کرده و باعث مرگ و میر زیادی می شود. در سال 2014 ، "کپسول کاهش وزن Xianxian" در استان شانشی به داروهای شیمیایی ممنوعه اضافه شده و سیلدنافیل اضافه کرد و باعث شد بسیاری از افراد دارای عوارض جانبی باشند یا حتی بمیرند. در سالهای اخیر ، در بازرسی تصادفی و ارزیابی محصولات بهداشتی ، مشخص شد که تولید کنندگان غیرقانونی دوز بیش از حد سیلدنافیل را به محصولات بهداشتی جنسی و آماده سازی سلامت سنتی طب چینی برای فریب مصرف کنندگان اضافه می کنند ، و به طور جدی سلامت مصرف کنندگان را به خطر می اندازند [2،3] ؛ پدیده های مشابهی مانند دوزهای بیش از حد داروهای شیمیایی ممنوع مانند فنوفیل ، بیگوانیدها ، فوروزمید و فنل فتالین در سلامت جنسی ، محصولات بهداشتی هیپوگلیسمی و کاهش وزن در یک جریان بی پایان پدید آمده اند و پنهان شدن علاوه بر این به طور فزاینده ای بیشتر می شود [4،5] ؛ چنین پدیده هایی نیز اغلب در خارج از کشور رخ می دهند [6]. این اقدامات غیرقانونی با تأثیر گسترده و آسیب های زیاد مستلزم توجه عمیق مقامات تنظیم کننده مواد مخدر است ، و توسعه روش های نمونه برداری سریع و تشخیص بازار از اهمیت ویژه ای برخوردار است.

در حال حاضر ، روش های تشخیصی که برای افزودن غیرقانونی داروهای شیمیایی در داروهای سنتی چینی و محصولات بهداشتی مورد استفاده قرار می گیرند ، عمدتاً شامل کروماتوگرافی لایه نازک (TLC) [7] ، کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) [8] ، طیف سنجی کروماتوگرافی مایع (LC-MS) [9] ، طیف سنجی کروماتوگرافی-ماس (طیف سنجی) (GC-MS) [10] ، ition ition).
در میان روشهای مختلف تشخیص گزارش شده ، LC-MS ، GC-MS و IMS بیشتر مورد مطالعه قرار گرفته است ، اما به دلیل قیمت بالای ابزارها و عملکرد پیچیده ، ترویج آنها آسان نیست و محبوبیت در مناطق شهری و کوهستانی با توسعه اقتصادی نسبتاً عقب مانده دشوار است. TLC یکی از چهار روش سنتی برای شناسایی دارو است. سریع ، ساده است و اثرات جدایی خوبی دارد. این ماده به طور گسترده در شناسایی کیفی و کمی داروها استفاده می شود. با این حال ، نقطه ضعف آن این است که باید دارای مواد مرجع مربوطه یا مواد دارویی مرجع باشد [12 ، 13]. طیف سنجی مادون قرمز نزدیک (NIRS) در سالهای اخیر توسعه یافته است. این اطلاعات ارتعاش و جذب چرخش از گروه های CH ، OH ، SH ، NH ، NH ، C {8} C و C {{9} O را از ماده تشخیص داده شده در طیف مادون قرمز نزدیک برای تجزیه و تحلیل کیفی و کمی از مواد جمع آوری می کند. این ماده به طور گسترده در کشاورزی ، نفت ، صنایع شیمیایی ، دخانیات و مواد غذایی استفاده می شود. در حال حاضر ، به تدریج در صنایع نظارت دارویی و دارویی اعمال شده است. این پتانسیل توسعه بسیار خوبی در تشخیص سریع و کمی کیفی و تجزیه و تحلیل داروها دارد [14 ، 15].

بنابراین ، در این مقاله از ابزارهای محبوب و روشهای آزمایشی موجود برای ایجاد فناوری ترکیبی TLC-NIR استفاده می شود. با استفاده از محصولات بهداشت جنسی به عنوان نمونه ، یک مدل تشخیص کیفی و کمی جهانی برای افزودن غیرقانونی داروهای شیمیایی ممنوع سلامت جنسی ایجاد شده است. می توان از آن به صورت مؤثر ، سریع و به سادگی برای غربالگری و تشخیص افزودن داروهای شیمیایی ممنوع در محصولات بهداشتی بازار استفاده کرد و از این طریق هزینه تشخیص را کاهش می دهد.

1 ابزار و داروهای آزمایش

1.1 ابزار

Fourier Transform Tensor 37 Niｒ Spectrument (Bruker ، آلمان) ، Opus 5. نرم افزار تجزیه و تحلیل {2}} ؛ LC -20 در کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (Shimadzu ، ژاپن) ، ایستگاه کاری کروماتوگرافی راه حل LC ؛ تعادل تحلیلی الکترونیکی BS224S (سارتوریوس ، آلمان) ؛ ژل سیلیس GF254 صفحه لایه نازک (شرکت بیوشیمیایی اقیانوس Qingdao ، Ltd.).

 

1.2 داروهای آزمایشی

Sildenafil (510068-201401 ، 99.9 ٪) و Narodenafil ({3 {}} ، 96.5 ٪) از موسسه تحقیقات مواد غذایی چین خریداری شدند ، و ساختارها در شکل 1 نشان داده شده است. نمونه های بهداشتی نمونه های بازار بودند.

 

شکل 1 ساختار داروهای شیمیایی تقویت کننده جنسی

 

2 روش و نتیجه

2. 1 تهیه محلول مرجع و محلول نمونه

تهیه محلول مرجع: تقریباً 25 میلی گرم سیلدنافیل و نارندنافیل را به ترتیب مصرف کنید ، آنها را به طور دقیق وزن کنید ، آنها را در یک فلاسک حجمی 5 میلی لیتری قرار دهید و آنها را در متانول حل کنید تا یک محلول مرجع مخلوط تقریباً 5 میلی گرم در میلی لیتر تهیه شود. سپس تقریباً 5 میلی گرم سیلدنافیل و نارندنافیل را به ترتیب مصرف کنید ، آنها را به طور دقیق وزن کنید ، آنها را در یک فلاسک حجمی 5 میلی لیتری قرار دهید و آنها را در متانول حل کنید تا یک محلول مرجع شناسایی واحد تقریباً 1 میلی گرم در میلی لیتر تهیه شود.

تهیه محلول نمونه: دوز این محصول را یک بار مصرف کنید ، آن را در یک فلاسک حجمی 5 میلی لیتری قرار دهید ، متانول و اولتراسونیک را برای 3 {6}}} دقیقه (100 W ، 56 کیلوهرتز) اضافه کنید ، آن را خنک کنید ، متانول را به علامت اضافه کنید و فیلتر کنید تا فیلتر را بدست آورید. هنگام تعیین محتوا ، 1 میلی لیتر از هر محلول نمونه را به طور دقیق اندازه گیری کنید ، آن را در فاز متحرک تا 25 میلی لیتر حل کنید و آن را با یک غشای فیلتر 0.45 میکرومتر فیلتر کنید. از آنجا که غلظت جرم اجزای شناسایی شده در نمونه های مثبت (محصولات بهداشتی با داروهای شیمیایی ممنوعه اضافه شده) بسیار متفاوت است ، می توان حجم نمونه برداری را به طور مناسب افزایش داد یا محلول نمونه را می توان به طور مناسب رقیق کرد تا غلظت جرم نهایی آن در محدوده خطی باشد.
تهیه محلول نمونه مثبت: از آنجا که هیچ نمونه مثبتی برای naringenfil ، یک نمونه خالی (کپسول Huangjingbajitian ، Luoyang Kangti Biology ، نتیجه آزمایش منفی بود) یک بار گرفته شد ، و یک محلول مرجع رقیق شده رقیق شده اضافه شد. محلول نمونه مثبت با توجه به روش آماده سازی تحت محلول نمونه تهیه شد ، به طوری که غلظت جرم نارینگنفیل در محلول نمونه مثبت به ترتیب 5 ، 7.5 و 10 میلی گرم در میلی لیتر و 4 ، 3 و 3 نسخه از هر غلظت جرم به طور موازی تهیه شد.

2. 2 شرایط کروماتوگرافی و طیفی

2. 2. 1 شرایط کروماتوگرافی HPLC

Phenomenex ODS C18 (25 {7}} mm mm × 4. 6 میلی متر ، 5μm) از ستون کروماتوگرافی استفاده شد. 45 ٪ متانول (A) {6}} ٪ 0. 3 ٪ محلول آبی اسید فسفریک (B) به عنوان فاز متحرک برای شستشو به مدت 30 دقیقه استفاده شد. سرعت جریان 1 میلی لیتر در دقیقه ، طول موج تشخیص 290 نانومتر بود. دمای ستون 40 درجه بود. حجم تزریق 10 میکرولیتر بود.

 

2. 2. 2 شرایط کروماتوگرافی TLC

ژل سیلیس ژل GF254 از صفحه کروماتوگرافی لایه نازک استفاده شد ، و آمونیاک کلروفرم-متانول (1 {4}}}: 1: 0) به عنوان حلال در حال توسعه برای توسعه و تبخیر استفاده شد. پس از خشک شدن در خشک کن به مدت 1 ساعت ، این علامت تحت یک لامپ ماوراء بنفش 254 نانومتری مورد بازرسی قرار گرفت (شکل 2 را ببینید).

 

2. 2. 3 شرایط کسب NIRS

پروب فیبر جامد Bruker NIRS برای اندازه گیری مورد استفاده قرار گرفت ، با دامنه شماره موج 12 ، 000 تا 4 ، {{3} cm {4}} ، 64 اسکن ، وضوح 16 سانتی متر -1 ، دمای 10 تا 30 درجه و رطوبت 35 ٪ 5 ٪. یک صفحه لایه نازک ژل سیلیس GF254 به عنوان مرجع استفاده شد و طیف پس از تفریق پس زمینه جمع آوری شد. هر نقطه جزء شیمیایی به طور موازی 5 بار اندازه گیری شد و اطلاعات NIRS ذخیره شد.

 

2.3 ایجاد روش تعیین محتوای HPLC

2.3.1 بررسی رابطه خطی

0 ml از محلول مرجع مخلوط (Sildenafil 5.25 mg/ml ؛ narcolepsy 5.15 mg/ml) به طور دقیق آسپیراسیون شد و به 1 {{7} ml با متانول ، و سپس {{{}}}}}}. 25 ، {{11 0 ، 1.5 ، 2. 7. 13. {58}} ، 14. {{6 0}} ، 15. 2 0. 0 ، 21. 26. 0 ، 27. 0 ، 28. 36.0 ، 37.0 ، 38.0 ، 39.0 ، 40.0 ، 41.0 ، 42.0 ، 43.0 ، 44.0 ، 5 میلی لیتر ، به ترتیب در فاز تلفن همراه حل شده و به ترتیب 5 میلی لیتر ایجاد کنید ، خوب تکان دهید.
با توجه به شرایط کروماتوگرافی تحت "2.2.1" ، تجزیه و تحلیل نمونه انجام شد ، منطقه اوج تعیین شد ، و معادله خط رگرسیون با منطقه اوج هر مؤلفه به عنوان مرتبه (y) و غلظت جرم ماده مرجع به عنوان abscissa (x): Sildenafil y {3}}}}}}} 8 {8 {8 {8} {8=0. 9989 ، محدوده خطی {18}}. 0525 ~ 1.05 ug ؛ naphthol y {12}}} × 106x -3 184. 4 ، r=0. 9999 ، محدوده خطی 0.0515 ~ 1.03 ug. نتایج نشان داد که مواد مرجع فوق خطی خوبی در محدوده خطی مربوطه دارند.

 

2.3 2 دقت ، پایداری ، تکرارپذیری و تست بازیابی

محلول مرجع مختلط را در زیر "2.3.1" و نمونه خالی (Huangjingbajitian Capsule ، Luoyang Kangti بیولوژیکی ، نتیجه آزمایش منفی است) و 6 محلول نمونه حاوی سیلدنافیل و نارنافیل را به موازات مطابق با روش تحت "2.1" تهیه کنید. با توجه به شرایط کروماتوگرافی تحت "2.2.1" ، محلول مرجع مختلط 6 بار به طور مداوم برای دقت تزریق شد. یکی از راه حل های نمونه در {10}} ، 3 ، 6 ، 9 ، 12 و 24 ساعت تزریق شد. 6 محلول نمونه به طور موازی برای تکرار و بازیابی تهیه شد و هر نمونه یک بار تزریق شد. مناطق اوج سیلدنافیل و نارنافیل مشخص شد و بازیابی و مقدار RSD آن محاسبه شد. نتایج میانگین بازیابی سیلدنافیل و نارنافیل 100. 16 ٪ ، 100. 49 ٪ بود. مقادیر RSD کمتر از 3 ٪ (N {22}}) بود ، نشان می دهد که ابزار دقت خوبی دارد ، محلول نمونه در 24 ساعت پایدار بود و روش بهبود و تکرار خوبی داشت.

 

2.3.3 تعیین محتوا

با دقت آسپیراسیون هر محلول نمونه ، تزریق و تجزیه و تحلیل مطابق با شرایط کروماتوگرافی تحت "2.2.1" ، 3 بار برای هر دسته اندازه گیری کنید ، منطقه اوج را ثبت کنید و محتوا را محاسبه کنید. نتایج نشان می دهد که در بین 10 دسته از نمونه های سلامت جنسی ، 9 دسته حاوی داروی شیمیایی ممنوعه سیلدنافیل بود و دوز اضافه شده بسیار متفاوت بود. میزان تشخیص 90 ٪ بود. نتایج در جدول 1 و شکل 3 نشان داده شده است.

 

جدول 1 نتایج تعیین کننده مواد به طور غیرقانونی در 10 محصول تقویت کننده جنسی اضافه شده است (N {3}})

 

نمونه	سازنده	وزن نمونه	محتوا (میلی گرم در زمان)
عصاره گل طلایی	دانشگاه کشاورزی چین غربی	1 × 0.88 g	58.79 ± 1.03
دافع حشرات	دانشگاه علوم و فناوری هنگ کنگ	2 × 0.50 g	73.62 ± 0.21
بابونه	بیولوژیکی	2 × 0.50 g	22.47 ± 0.23
شبنم صبح زود	دانشگاه علوم و فناوری هنگ کنگ	2 × 0.50 g	8.90 ± 0.03
چوب کرم	زیستگاه ایالات متحده	2 × 0.50 g	61.83 ± 0.48
A. نیجر	دانشگاه کشاورزی چین غربی	2 × 0.50 g	45.20 ± 0.04
نخ طلا	دانشگاه علوم و فناوری هنگ کنگ	2 × 0.50 g	تشخیص داده نشده است

 

شکل 3 HPLC از 10 محصول تقویت جنسی

 

2.4 ایجاد مدل کیفی TLC-NIRS برای داروهای شیمیایی سلامت جنسی

2.4.1 جمع آوری اطلاعات طیفی

با توجه به شرایط تحت "2.2.3" ، NIR های نقاط مرجع مشخص شده پس از توسعه در صفحه لایه نازک TLC جمع آوری شد. حجم نقطه محلول مرجع مختلط 1 ، 2 ، 5 ، 10 ، 15 ، 20 ، 25 ، 30 ، 35 ، 40 ، 45 و 50 میکرولیتر و حجم نقطه محلول نمونه به ترتیب 2 ، 5 و 10 میکرولیتر بود. هر نقطه مرجع مرجع و نمونه با حجم نقطه مختلف 5 بار جمع آوری شد ، و نمودار روکش NIRS در شکل 4 نشان داده شده است. در آزمایش ، طیف مرجع مختلط با حجم نقطه مختلف به عنوان مجموعه کالیبراسیون انتخاب شد و طیف نمونه ها با حجم نقطه مختلف به عنوان مجموعه اطلاعاتی از طیف وسیعی از مجموعه ها انتخاب شد.

شکل 4 طیف اصلی Niｒ داروهای شیمیایی