اثرات بارگیری پروتئین خوراکی زیاد قبل از عمل بر پیامدهای کوتاه مدت و بلندمدت کلیوی پس از جراحی قلب: یک مطالعه کوهورت

چکیده زمینه:آسیب حاد کلیه پس از جراحی قلب (AKI) با افزایش مرگ و میر همراه است. یک وعده غذایی با پروتئین بالا جریان خون کلیوی را افزایش می دهد ونرخ فیلتراسیون گلومرولی(GFR) و ممکن است از کلیه ها در برابر حملات حاد ایسکمیک محافظت کند. از این رو، ما تأثیر یک بار پروتئین خوراکی بالای قبل از عمل را بر عملکرد کلیه پس از جراحی قلب ارزیابی کردیم و از مدل‌های تجربی برای روشن کردن مکانیسم‌هایی استفاده کردیم که توسط آن پروتئین ممکن است اثرات تولیدی کلیه را تحریک کند.

مواد و روش ها:آینده نگر "پیش‌بینی‌های ذخیره عملکردی کلیه قبل از عملخطر ابتلا به AKI پس از عمل قلب" پیگیری مطالعه تا 12 ماه بعد از عمل برای 109 بیمار تمدید شد. از روش تطبیق امتیاز تمایل نسبت 1:2 برای شناسایی گروه کنترل (n=214) برای ارزیابی مقایسه ای اثرات استفاده شد. از بار پروتئین قبل از عمل و مراقبت استاندارد. نقطه پایانی اولیه توسعه AKI و کاهش تخمینی GFR (eGFR) بعد از عمل در 3 و 12 ماه بود. ما همچنین ترشح مهارکننده‌های بافتی متالوپروتئازها را ارزیابی کردیم (TIMP{9} }) و پروتئین متصل شونده به فاکتور رشد شبه انسولین 7 (IGFBP7)، نشانگرهای زیستی دخیل در واسطهمکانیسم های محافظ کلیهکه درکلیه انسانسلول های لوله ای که در معرض غلظت های مختلف پروتئین قرار گرفتند.

نتایج:میزان AKI بین گروه‌های بارگیری پروتئین و کنترل تفاوتی نداشت (6/13 در مقابل 3/12 درصد؛ p{4}}.5). با این حال، میانگین از دست دادن eGFR در اولی بعد از 3 ماه کمتر بود ({7}}.1 [95% CI-1.4، -1.7] در مقابل 3.3- [95% CI-4.4، 2.2-] میلی لیتر در دقیقه/ 1.73 متر مربع) و 12 ماه (2.7- [95٪ CI-4.2، -1.2] در مقابل -10.2 [95٪ CI-11.3، 9.1-] میلی لیتر در دقیقه / 1.73 متر مربع؛ p<0.001 for both). On stratification based on AKI development, the eGFR loss after 12 months was also found to be lower in the former (−8.0 [95% CI−14.1,−1.9] vs.−18.6 [95% CI−23.3,−14.0] ml/min/1.73 m2; p=0.008). A dose–response analysis of the protein treatment of the primary human proximal and distal tubule epithelial cells in culture showed significantly increased IGFBP7 and TIMP-2 expression. 

نتیجه گیری:بار پروتئین خوراکی بالا قبل از عمل باعث کاهش رشد AKI نشد اما با حفظ عملکرد کلیوی بیشتر در بیماران با و بدون AKI در 12 ماه پس از جراحی قلب همراه بود. مکانیسم‌های بالقوه عمل که توسط آن بارگیری پروتئین ممکن است باعث ایجاد پاسخ محافظ کلیه شود، ممکن است شامل مهار چرخه سلولی باشد.سلول های اپیتلیال لوله های کلیوی. ثبت کارآزمایی بالینی ClinicalTrials.gov: NCT03102541 (به صورت گذشته نگر در 5 آوریل 2017 ثبت شد) و آزمایشات بالینی. gov: NCT03092947 (به صورت گذشته در 28 مارس 2017 ثبت شد).

کلید واژه ها: آسیب حاد کلیه, بیماری مزمن کلیوی,تست استرس کلیه, بهبود کلیه

برای دریافت عصاره طبیعی سیستانچ ارگانیک با 25% اکیناکوزید و 9% آکتئوزید برای عملکرد کلیه اینجا را کلیک کنید

زمینه

آسیب حاد کلیه(AKI) شایع ترین عارضه عمده جراحی قلب است و به طور مستقل با افزایش عوارض کوتاه مدت و بلندمدت و مرگ و میر مرتبط است [1، 2]. اگرچه بسیاری از بیماران در عرض چند روز تا چند هفته پس از ایجاد AKI معکوس می‌شوند، داده‌ها نشان می‌دهند که ارتباط قوی بین AKI و بیماری مزمن کلیوی بعدی (CKD) وجود دارد [3، 4]. از این رو، رویکردهای موثر برای جلوگیری از توسعه AKI برای کاهش بار CKD حیاتی است. پاتوفیزیولوژی AKI پس از جراحی قلب احتمالاً با درگیری مسیرهای آسیب متعدد به درجات مختلف در بیماران قبل از عمل، حین عمل و بعد از عمل مشخص می شود [5]. در میان مکانیسم های پیشنهادی، تغییرات در پرفیوژن کلیه در طی بای پس قلبی ریوی و آسیب ایسکمیک کلیه پس از عمل مهم است.مشارکت کنندگان در AKI [6].

در انسان‌های سالم و بزرگسالانی که قرار است تحت عمل جراحی قلب قرار بگیرند، بار پروتئینی بالا، نرخ فیلتراسیون گلومرولی (GFR) را از طریق افزایش کلی در جریان خون کلیوی به دلیل اتساع شریانی آوران و کاهش مقاومت عروق کلیوی که منجر به هایپرفیلتراسیون گلومرولی می‌شود، افزایش می‌دهد [7]. ]. این احتمالاً از طریق مدولاسیون مکانیسم بازخورد توبولوگلومرولی و تغییرات در سطوح ترکیبات وازواکتیو [8، 9] اتفاق می‌افتد. در مقابل، محدودیت پروتئین با کاهش جریان خون کلیوی همراه است وGFR ( GFR )[10]. مدل‌های حیوانی نشان داده‌اند که اسیدهای آمینه می‌توانند از کلیه‌ها در برابر توهین‌های ایسکمیک حاد محافظت کنند، احتمالاً با حفظ جریان خون کلیوی و در نتیجه بهبود آسیب‌های ایسکمیک و التهابی که می‌تواند به AKI کمک کند [11].

با این حال، مداخلاتی که جریان خون کلیوی را افزایش می‌دهند (مثلاً استفاده از دوپامین) به طور یکنواخت در پیشگیری یا درمان AKI بی‌اثر بوده‌اند. یک دلیل احتمالی این است که بار پروتئین ممکن است به کلیه‌ها فشار وارد کند، به همان روشی که پیش‌شرطی‌سازی ایسکمیک مستقیم یا از راه دور (RIPC) ممکن است [12، 13]. این «استرس» زیر آسیب‌رسان ممکن است مکانیسم‌های محافظتی را در کلیه‌ها ایجاد کند. به نظر می‌رسد انتشار مهارکننده‌های بافتی متالوپروتئازها (TIMP{4}}) و پروتئین متصل شونده به فاکتور رشد شبه انسولین 7 (IGFBP7) که باعث توقف چرخه سلولی می‌شود، نشانگر این پاسخ محافظتی باشد. 12، 13].

ما قبلاً مقدار ذخیره عملکردی کلیه (RFR) را که بر اساس بار پروتئین دهانی بالای قبل از عمل اندازه‌گیری می‌شود، برای پیش‌بینی AKI در بیمارانی که تحت عمل جراحی انتخابی قلب قرار می‌دهند، گزارش کرده‌ایم [14]. در مطالعه حاضر، ما به دنبال بررسی این موضوع بودیم که آیا بارگیری پروتئین خود ممکن است بر توسعه AKI و عملکرد طولانی مدت کلیوی پس از جراحی قلب در مقایسه با گروه کنترل همسان با پروفایل های جمعیت شناختی، خطر و جراحی مشابه که مراقبت های استاندارد قبل از عمل را دریافت کرده بودند، تأثیر بگذارد یا خیر. علاوه بر این، ما از مدل‌های کشت سلولی آزمایشگاهی شامل سلول‌های توبول پروگزیمال و دیستال کلیه انسان برای روشن کردن مکانیسم بالقوه‌ای که پروتئین ممکن است اثرات محافظتی کلیه را مستقیماً در سطح لوله‌ای تحریک کند، استفاده کردیم.

روش ها طراحی مطالعه و شرکت کنندگان

این مطالعه کوهورت تک مرکزی، غیر کور، شامل بیمارانی بود که در مطالعه آینده نگر "RFR قبل از عمل خطر AKI را پس از عمل قلب پیش بینی می کند" ثبت نام کردند [14]. این مطالعه شامل 110 بزرگسال با مقادیر eGFR [15] بزرگتر یا مساوی 60 میلی لیتر در دقیقه/1.73 متر مربع بود که قرار بود تحت عمل جراحی انتخابی قلب (بای پس عروق کرونر، تعویض دریچه، ترکیبی از این دو، یا سایر جراحی‌های قلبی ریوی قرار گیرند. بای پس) بین نوامبر 2014 و اکتبر 2015 در بخش جراحی قلب، بیمارستان سن بورتولو، ویچنزا، ایتالیا. روش های دقیق از جمله مراقبت های جراحی در فایل اضافی 1 توضیح داده شده است. به ویژه، بیمارانی که درمان با مسدود کننده های سیستم رنین آنژیوتانسین (بخشی از روش استاندارد در بخش جراحی قلب در ویچنزا) را در حداقل 48 ساعت قبل از آن قطع نکردند. پذیرش حذف شدند.

پروتکل مطالعه به تفصیل در جای دیگری توضیح داده شده است [14]. به طور خلاصه، بیماران یک بار پروتئین خوراکی بالا (1.2 گرم به ازای هر کیلوگرم وزن بدن پروتئین گوشت قرمز پخته شده بدون مواد افزودنی) را برای ارزیابی RFR خود یک روز قبل از عمل علاوه بر مراقبت های استاندارد قبل از عمل [14] و در 3 ماه پس از جراحی دریافت کردند. در محیط سرپایی [16]. تقریباً یک هفته قبل از ارزیابی RFR، به شرکت‌کنندگان دستورالعمل‌های دقیقی درباره دارو (بدون داروهای ضد التهابی غیر استروئیدی، بدون مسدودکننده‌های سیستم رنین-آنژیوتانسین) داده شد که در صبح معاینه مجاز بود. برآورد اثر بالقوه و واریانس دریافت پروتئین بر GFR از انتشارات قبلی به دست آمد [17، 18]. علاوه بر این، بار پروتئین خوراکی بالا با توجه به آزمایش دوز اخیر تعریف شد، که یک اثر سقفی با حد بالایی حداکثر GFR قابل حصول را به دنبال دریافت پروتئین خوراکی بالا بیشتر از یا مساوی 1 گرم بر کیلوگرم وزن بدن پیشنهاد می‌کند [19] ]. نتایج تجزیه و تحلیل برداری بیوایمپدانس در گروه بارگیری پروتئین در فایل اضافی 1 ارائه شده است: جدول S1. گروه کنترل از طریق تجزیه و تحلیل امتیاز تمایل انجام شده بر روی متغیرهای کمکی سن، جنس، نژاد، بیماری قلبی، و eGFR پایه که تحت روش‌های مشابه در طول دوره‌ای که گروه RFR تحت عمل جراحی قرار گرفته بودند (محدوده: 0-3) شناسایی شد. ماه) با استفاده از روش تطبیق نسبت 1:2 (برای سایر معیارهای واجد شرایط بودن به فایل اضافی 1 مراجعه کنید). بیماران کنترل مراقبت های قبل از عمل استاندارد را دریافت کردند که به صورت عملی تعریف شد. این مطالعه توسط کمیته اخلاق محلی (79/16F) تایید شد و با اصول اعلامیه هلسینکی مطابقت داشت. بیماران برای ثبت نام در طول مشاوره پذیرش با آنها تماس گرفته شد و رضایت آگاهانه کتبی ارائه شد.

روش ها و اندازه گیری ها ارزیابی عملکرد کلیه

AKI بر اساس معیارهای گروه کاری KDIGO به عنوان افزایش SCr به میزان بیشتر یا مساوی 3/0 میلی گرم در دسی لیتر در 48 ساعت یا بیشتر یا مساوی 1.5 برابر مقدار پایه در 7 ساعت تعریف شد. روز یا خروجی ادرار < 0.5 میلی‌لیتر/کیلوگرم در ساعت برای 6 ساعت [20]. SCr پایه بر اساس تمام مقادیر SCr موجود از سوابق پزشکی بیمارستانی و سرپایی در 90 روز گذشته تعیین شد. برای کسانی که اطلاعات سطح پایه SCr آنها در دسترس نبود، معیارهای غربالگری را به افزایش یا کاهش SCr به میزان 0.3 میلی گرم در دسی لیتر در طول اقامت در بیمارستان گسترش دادیم. تعادل مایع مثبت و همودیلوشن در تشخیص و مرحله بندی AKI با استفاده از فرمول زیر در نظر گرفته می شود [21]:

سطح SCr تنظیم شده=SCr × ضریب تصحیح

جایی که ضریب تصحیح{{0}}(وزن (کیلوگرم) هنگام پذیرش در بیمارستان×0.6+Σ (تعادل تجمعی مایعات روزانه (لیتر)))/وزن بستری در بیمارستان×0.6

معکوس AKI به عنوان عدم وجود هر مرحله از AKI در هنگام ترخیص از بیمارستان تعریف شد [22]. همه موارد بر اساس مورد به مورد برای تایید هر تشخیص AKI و AKI برگشتی توسط کمیته قضاوت کور متشکل از سه نفرولوژیست خبره که نسبت به داده‌های بالینی کور شده بودند، بررسی شدند. اگر دو بازبین با هم موافق نبودند، یک بازبین سوم ورودی ارائه کرد و اجماع ایجاد شد. ادرار نقطه ای برای آلبومینوری قبل از عمل جراحی و در 3 و 12 ماه پیگیری جمع آوری شد. آلبومینوری به غلظت کراتینین ادرار نرمال شد تا رقت ادرار را در نظر بگیرد. اطلاعات مربوط به جمع آوری نمونه و روش های آزمایشگاهی در فایل تکمیلی 1 ارائه شده است.

پیگیری و نقاط پایانی

Clinical outcomes were evaluated for 1  year after discharge. Changes in medication for clinical reasons were permitted. At 3 and 12  months of follow-up, analyses were conducted at the Outpatient Nephrology Department, and patients were contacted via the telephone 1  week before the follow-up analyses and advised to maintain their usual dietary habits and avoid high dietary protein intake (>0.8 گرم بر کیلوگرم وزن بدن در روز). رژیم غذایی با پروتئین خوراکی بالا در طول دوره پیگیری طبق پروتکل مطالعه در نظر گرفته نشده بود. مجدداً به بیماران توصیه شد که مسدودکننده‌های سیستم رنین-آنژیوتانسین و داروهای التهابی غیر استروئیدی را حداقل 48 ساعت قبل از مراجعه سرپایی متوقف کنند. نقطه پایانی اولیه AKI طی 7 روز پس از جراحی قلب بود. اقدامات اضافی شامل تفاوت در eGFR در 3 و 12 ماه پس از جراحی در مقایسه با مقادیر قبل از عمل بود (افزونه 1: شکل S2). استفاده از هر گونه داروی بالقوه نفروتوکسیک در طول اقامت در بیمارستان ثبت شد.

بار پروتئین و ترشح بیومارکر در سلول های لوله کلیه انسان

ترشح بیومارکرهای AKI IGFBP7 و TIMP{1}} پس از بارگیری پروتئین با استفاده از سیستم‌های مدل آزمایشگاهی ایجاد شده سلول‌های توبول پروگزیمال و دیستال انسان مورد ارزیابی قرار گرفت [23]. سلول های توبول پروگزیمال و دیستال جدا شده از Immunoafnity در محل تلاقی روی پایه های نفوذپذیر Transwell در محیط های بدون سرم تعریف شده هورمونی برای تشکیل تک لایه های اپیتلیال کشت داده شدند. سپس سلول ها در سمت آپیکال با افزایش غلظت ({4}}، 2.5، 5، 10، 20، و 50 میکرومولار) پروتئین تیمار شدند (Life Extension، Wellness Code® Whey Protein Concentrate؛ مشخصات اسید آمینه ارائه شده در موارد اضافی فایل 1) به مدت 6 ساعت در دمای 37 درجه در 5٪ CO2. محیط‌های شرطی‌شده آپیکال تحت آنالیز SDS-PAGE و ایمونوبلات قرار گرفتند تا IGFBP7 و TIMP{18} ترشح شده با استفاده از آنتی‌بادی‌های پلی کلونال بز ارائه‌شده توسط Astute Medical Inc. سیگنال‌های ایمونوبلات خام به غلظت لیزات نرمال‌سازی شدند، و سیگنال حاصل از آب پنیر سلول های تیمار شده با سلول های تیمار نشده مقایسه شد و نمودارهایی تولید شد. از چهار جدایه دهنده جداگانه برای ارزیابی IGFBP7 و سه جدایه جداگانه برای ارزیابی TIMP استفاده شد. میانگین غلظت میکرومولار پروتئین آب پنیر بر اساس وزن مولکولی -لاکتوگلوبولین بود.

تحلیل آماری

متغیرهای توصیفی به عنوان میانه (محدوده بین ربعی) یا میانگین [فاصله اطمینان 95٪] برای متغیرهای پیوسته و n (٪) برای متغیرهای طبقه بندی بیان شدند. تفاوت در توزیع بین گروه‌ها با استفاده از آزمون‌های Mann-Whitney U برای متغیرهای عددی و آزمون‌های مجذور کای برای متغیرهای طبقه‌ای مورد آزمایش قرار گرفت. تغییرات در eGFR و SCr در بیماران به عنوان تفاوت در مقادیر در پیگیری و 1 روز قبل از عمل (قبل از بارگیری پروتئین) محاسبه شد. آنالیزها برای سن، جنس، شاخص توده بدنی، فشار خون بالا و دیابت تنظیم شدند. توزیع شرطی متغیرهای پاسخ تقریب به اندازه کافی خوب به توزیع نرمال نشان داد، همانطور که با استفاده از نمودارهای چندک - چندک نرمال ارزیابی شد. داده ها با استفاده از R 3.6.{6}} (R Center for Statistical Computing, Vienna, Aus tria) [24] تجزیه و تحلیل شدند. مقادیر p دو دنباله < 0.05 برای نشان دادن معناداری آماری در نظر گرفته شد. تخمین حجم نمونه بر اساس یک مطالعه مشاهده‌ای اخیر در یک جمعیت بیمار مشابه [25] و بر روی نقطه پایانی اولیه (یعنی توسعه AKI طی 7 روز پس از جراحی قلب) بود. با استفاده از تست دقیق فیشر، ما محاسبه کردیم که 339 بیمار (226 بیمار در گروه کنترل و 113 بیمار در گروه بارگیری پروتئین) باید 80% قدرت در خطای نوع 1 5% برای تشخیص ارائه کنند. نسبت AKI 0.2 و 0.05 و وزن گروهی به ترتیب 2:1. نزدیکترین همسایه تطبیق با فاصله کولیس امتیاز گرایش 0.1 برای انتخاب بیماران تحت درمان با مراقبت استاندارد به کار گرفته شد تا در گروه کنترل قرار گیرند. از روش تطبیق نسبت 1:2 استفاده شد. تطابق کیفیت بهینه به‌عنوان تفاوت میانگین استاندارد شده (SMD) کمتر یا مساوی 0.1 در هر متغیر تطبیق بین بیماران در گروه‌های مطالعه و کنترل تعریف شد. دوره زمانی مقادیر eGFR نسبت به مقادیر قبل از عمل با یک مدل مخلوط خطی با استفاده از لگاریتم مقادیر نسبی eGFR تجزیه و تحلیل شد. تفاوت در متغیرهای طبقه بندی بین گروه ها با استفاده از آزمون دقیق فیشر تجزیه و تحلیل شد. برای مطالعات آزمایشگاهی، فیلم‌های immunoblot با استفاده از ImageJ و تابع t-test زوجی GraphPad Prism 8.0 (نرم‌افزار GraphPad، La Jolla، CA) تصویربرداری و کمی‌سازی شدند.

نتایج ویژگی های پایه

از 540 بیمار غربالگری شده برای مطالعه، 324 نفر وارد مطالعه شدند و در تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. 110 بیمار بارگیری پروتئین خوراکی بالا قبل از عمل را به عنوان بخشی از مطالعه RFR دریافت کردند، در حالی که 214 بیمار با گروه بارگیری پروتئین مطابقت داده شدند (پرونده اضافی 1: شکل S1). کیفیت تطبیق عالی در نظر گرفته شد، همانطور که توسط SMD کمتر یا مساوی 0.1 برای همه متغیرهای تطبیق منعکس می شود. مشخصات پایه و داده های جراحی بین هر دو گروه مشابه بود (جدول 1). مقادیر eGFR در بستری در بیمارستان در هر دو گروه بارگیری پروتئین و کنترل مشابه بود (به ترتیب 90 [95% فاصله اطمینان (CI) 87-92] در مقابل 90 میلی لیتر در دقیقه/1.73 متر مربع [95% فاصله اطمینان (CI 88-92]). p{22}}.914).

نرخ AKI نرخ AKI بین بارگیری پروتئین و گروه کنترل تفاوتی نداشت (15/11{17}} [13.6%] در مقابل 26/214 [12.1%]، p{8}}.5؛ با استفاده از AKI کامل مرحله بندی: p{10}}.945؛ جدول 2). تمام بیمارانی که AKI ایجاد کردند تنها یک قسمت مشخص از AKI را در طول مدت اقامت در بیمارستان تجربه کردند. تصحیح SCr برای تعادل مایع تاثیری بر تشخیص و مرحله بندی AKI نداشت. همه 15 بیمار در گروه بارگیری پروتئین AKI را بر اساس معیارهای SCr ایجاد کردند و هیچکدام معیارهای خروجی ادرار را نداشتند. در مقابل، در گروه کنترل، مرحله بندی بر اساس معیارهای SCr و برون ده ادرار به ترتیب در 19 (9.0%) و 4 (1.9%) بیمار انجام شد. 3 بیمار (1.4%) هر دو معیار را برآورده کردند (110/0=0). قابل ذکر است، دو بیمار در گروه کنترل نیاز به درمان جایگزینی کلیه پس از عمل داشتند، در حالی که هیچ یک از گروه بارگیری پروتئین نیاز به چنین درمانی نداشتند. همه 15 بیمار در گروه بارگیری پروتئین که دچار AKI شدند، قبل از ترخیص از بیمارستان، AKI برگشتی نشان دادند، اما تنها 21 بیمار از 26 بیمار در گروه کنترل که AKI را قبل از ترخیص از بیمارستان تجربه کردند، برگشت AKI را نشان دادند (100٪ در مقابل 80.8٪؛ p{34). }}.139). خلاصه آمار همه بیماران طبقه بندی شده توسط AKI در فایل اضافی 1 گزارش شده است: جدول S2. آنهایی که AKI داشتند بیشتر از آنهایی که AKI نداشتند مسن تر بودند. شاخص توده بدنی بالاتری دارند؛ فشار خون بالا، دیابت شیرین، واسکولوپاتی محیطی و دیس لیپیدمی دارند. و در هنگام پذیرش مقادیر eGFR کمتری دارند.

خدمات حمایتی Wecistanche - بزرگترین صادرکننده سیستانچ در چین:

ایمیل:wallence.suen@wecistanche.com

واتساپ/تلفن:+86 15292862950

خرید برای جزئیات بیشتر مشخصات:

https٪3a٪2f٪2fwww.xjcistanche.com٪2fcistanche-shop

برای دریافت عصاره طبیعی سیستانچ ارگانیک با 25% اکیناکوزید و 9% آکتئوزید برای عملکرد کلیه اینجا را کلیک کنید