اثر اکیناکوزید بر موشهای ایسکمی مغزی

خلاصه: هدف بررسی اثراکینوزید(ECH) بر روی انتقال‌دهنده‌های عصبی مونوآمین در مایع خارج سلولی جسم مخطط در موش‌های مبتلا به ایسکمی کانونی مغزی و کشف مکانیسم احتمالی اثر محافظت عصبی ECH بر روی مغز. روش‌ها موش‌های SD به طور تصادفی به گروه کنترل، گروه مدل، گروه دوز بالا و پایین ECH و گروه لیگوسترازین (CXQ) تقسیم شدند. به موش‌های هر گروه داروهای مربوطه یا سالین فیزیولوژیک به صورت داخل صفاقی یک بار در روز به مدت 7 روز داده شد. در روز سوم تجویز، آستین پروب در مخطط مغز جاسازی شد. یک ساعت پس از آخرین تجویز، مدل موش ایسکمی کانونی مغزی (MCAO) ساخته شد. پس از ساخت مدل، میکرودیالیز بلافاصله انجام شد. دیالیز به آشکارساز کروماتوگرافی مایع - الکتروشیمیایی با کارایی بالا (HPLC-ECD) برای تعیین محتوای نوراپی نفرین (NE)، دوپامین (DA)، 5-هیدروکسی تریپتامین (5-HT)، 3 تزریق شد. ،4-دی هیدروکسی فنیل استیک اسید (DOPAC)، اسید هومووانیلیک (HVA)، 5-هیدروکسی ایندول استیک اسید (HIAA) در مایع خارج سلولی جسم مخطط هر گروه. نتایج در مقایسه با گروه کنترل، سطوح NE، DA و 5-HT در گروه مدل افزایش یافت و متابولیت‌های اسیدی DOPAC، HVA و HIAA نیز افزایش یافت. در مقایسه با گروه مدل، محتوای شش ماده در گروه‌های دوز بالا و پایین ECH (30، 15 میلی‌گرم · کیلوگرم - 1} · d - 1) و گروه CXQ کاهش یافت. نتیجه‌گیری اثر محافظتی عصبی ECH ممکن است با افزایش انتقال‌دهنده‌های عصبی مونوآمین پس از ایسکمی مغزی مرتبط باشد.

پودر سیستانچ

کلید واژه ها: اکینوزید; ایسکمی مغزی؛ مخطط؛ HPLC-ECD; انتقال دهنده های عصبی مونوآمین و متابولیت ها

اکیناسئوزید(ECH) یک جزء مؤثر از گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی است که از آن جدا و خالص شده استCistanche deserticola, یک کارخانه ویژه در سین کیانگ. مطالعات نشان داده اند که ECH دارای اثرات محافظت کننده عصبی مانند آنتی اکسیداسیون [1-2]، محافظت از اعصاب [3-4]، ضد پیری [5] و بهبود یادگیری و حافظه [6-8] است. نتایج چن هونگ و همکاران. تایید کرد که ECH اثر محافظتی بر نورون های DA در بیماری پارکینسون دارد [9]. انتقال دهنده های عصبی مونوآمین نوعی مواد مهم هستند که فعالیت های فیزیولوژیکی بدن را تنظیم می کنند.محتوای موجود در بافت می‌تواند منعکس‌کننده فرآیندهای بیوسنتز، آزادسازی، جذب و غیرفعال‌سازی ناقل عصبی [10-11] باشد. در حال حاضر گزارش مرتبطی در مورد اثر ECH بر فرستنده های مونوآمین در مغز موش های صحرایی مبتلا به ایسکمی مغزی وجود ندارد. در این مطالعه، اثر ECH بر محتوای انتقال‌دهنده‌های عصبی مونوآمین در مایع خارج سلولی جسم مخطط موش‌های مبتلا به ایسکمی مغزی با استفاده از فناوری میکرودیالیز مغزی بررسی شد و مکانیسم احتمالی ECH بر محافظت عصبی مغز به طور مقدماتی مورد بررسی قرار گرفت.

پودر عصاره سیستانچ توبولوزا

1.مواد

1.1 حیوانات آزمایشی

موش SD، ♂، توده بدن 250 ~ 300 گرم (خرید شده از مرکز حیوانات آزمایشی سین کیانگ، شماره مجوز: 2009-0053).

1.2 داروها و معرف ها

ECH توسط پروفسور Tu Pengfei، دانشکده داروسازی، دانشگاه پکن اهدا شده است (خلوص بالای 95٪). نوراپی نفرین (NE)، دوپامین (DA)، 5-هیدروکسی تریپتامین (5-HT)، 3،{4}}دی هیدروکسی فنیل استیک اسید (DOPAC)، اسید هومووانیلیک (HVA)

5-هیدروکسی ایندول استیک اسید (HIAA) سیگما است. تترا متیل پیرازین هیدروکلراید تزریقی (CXQ، شرکت داروسازی هاربین سانلیان، آموزشی ویبولیتین)؛ سیمان فسفات روی (محصول Shanghai Medical Instruments Co., Ltd.، متشکل از مایع و پودر، مخلوط با زمان)؛ سدیم 1-آلکیل سولفات (DIKMA); هیدرات اسید سیتریک (موسسه تحقیقات شیمی خوب تیانجین جینک)؛ تری سدیم سیترات (Acros)؛ دی سدیم اتیلن دی آمین تترا استیک اسید (JTTakerChemicalco); متانول (DIKMA)؛ استونیتریل (DIKMA)؛ مایع پرفیوژن میکرودیالیز مغزی ترکیبی از کلرید سدیم تزریقی است (Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.). تمام آب مصرفی آب بخار مجدد است.

1.3 ابزار

دستگاه استریوتاکتیک مغز موش BAS4100 آمریکایی; پروب CMA/12 و آستین پروب؛ دستگاه حیوانات هوشیار CMA/120; میکرو پمپ CMA/402; کلکتور اتوماتیک نمونه دمای پایین CMA/150. پمپ تزریق Esa 5600A; پمپ تزریق Esa 5600A; دستگاه تزریق نمونه اتوماتیک Esa 542; آشکارساز الکتروشیمیایی CoulArray Esa; الکترود کار کربن شیشه ای و الکترود مرجع Ag/AgCl. ستون C18 (DIKMA، ODS5 μm، 150mm × 4.6mm)؛ ایستگاه کاری کروماتوگرافی CoulArraywin (شرکت Esa); میکسر گرداب (نوع QL-861); تستر اسیدیته رومیزی (HANNA-211); سانتریفیوژ پرسرعت رومیزی (نوع XYJ-2).

2.روش

سیستمکمل anche در نزدیکی من-Imحافظه را ثابت کند

برای مشاهده محصولات Cistanche Improve Memory اینجا را کلیک کنید

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

2.1 گروه بندی و اداره حیوانات

30 موش صحرایی به طور تصادفی به پنج گروه تقسیم شدند: ① گروه کنترل: 1 میلی لیتر · کیلوگرم-1 · d-1 نرمال سالین. ② گروه مدل: نرمال سالین 1ml · kg-1 · d-1; ③ Model+ligustrazine (CXQ) 30mg · kg-1 · d-1; ④ - ⑤ گروه‌های با دوز بالا و پایین مدل+ECH (ECHB، ECHS): 30، 15 میلی‌گرم · کیلوگرم-1 · d-1؛ همه حیوانات در هر گروه به مدت 7 روز به صورت داخل صفاقی تزریق شدند.

2.2 روش مدل سازی و میکرودیالیز

هر موش در روز سوم تجویز با یک کانول دفن شد: موش‌ها با 10٪ هیدرات کلرال (3.5 میلی‌لیتر · کیلوگرم{3}}) بیهوش شدند، روی دستگاه استریوتاکتیک مغز BAS4100 ثابت شدند، و کاتتر پروب در جسم مخطط چپ (مختصات AP:+0.2mm؛ ML: - 3.0mm؛ DV: - 3.5mm) در مورد "نقشه استریوتاکتیک مغز موش" جورج پکسینوس کاشته شد. پس از آخرین تزریق، موش‌ها 1 ساعت بعد بیهوش شدند و با استفاده از روش بخیه لونگا یانگ زانژانگ [12] یک مدل ایسکمی مغزی کانونی (مدل MCAO) برای موش‌ها ساخته شد. خط ماهی در گروه کنترل فقط 10 میلی متر وارد شد و سایر مراحل همانند گروه عملیات بود. پس از مدل سازی، پروب میکرودیالیز را در حالت حرکت آگاهانه و آزاد قرار دهید و از محلول رینگر برای μ استفاده کنید. میکرودیالیز مغزی در دمای 4 درجه و یک لوله دیالیز در 20 دقیقه جمع آوری شد. پس از جمع آوری هر لوله دیالیز، باید فوراً در یخچال درجه - 20 نگهداری شود و پس از دیالیز به یخچال درجه - 70 منتقل شود. سرعت بازیابی پروب قبل از استفاده اندازه گیری شد، که برای تبدیل غلظت انتقال دهنده های عصبی مونوآمین در دیالیز مورد استفاده قرار گرفت.

cistanche tubulosa چه کاری انجام می دهد - حافظه را بهبود می بخشد

2.3 تجزیه و تحلیل HPLC-ECD

پیکربندی فاز متحرک: فاز متحرک حاوی 829 میلی‌لیتر 0.15mol · L-1 بافر اسید سیتریک-سدیم سیترات در هر لیتر است. 0.1mol · L-1 دی سدیم EDTA 1ml; متانول 150 میلی لیتر؛ سدیم {{1{13}}}}آلکیل سولفات 0.283 گرم. سرعت جریان فاز متحرک را روی 0.7 میلی لیتر · دقیقه-1 و دمای کوره ستونی را 28 درجه تنظیم کنید. ولتاژ کار آشکارساز الکتروشیمیایی 200mV، 400mV، و 600mV به ترتیب با 2، 3 و 4 کانال است. بهره 2nA است. حجم تزریق 25 میکرولیتر است. منحنی استاندارد با 0.025، 0.05، 0.1، 0.2، 0.5mg · L{35}} گرادیان محلول استاندارد مخلوط شده رسم شده است.

2.4 پردازش آماری

داده‌های تجربی در میدان x ± s بیان می‌شوند و داده‌های اندازه‌گیری مکرر با استفاده از نرم‌افزار آماری SPSS13 تجزیه و تحلیل می‌شوند.{1}}.

شکل 1-6 تغییرات در سطوح NE، DA، DOPAC، HIAA، HVA، و 5-HT را در مایع خارج سلولی مخطط موش نشان می‌دهد. از شکل می توان دریافت که پس از ایسکمی مغزی، انتقال دهنده های عصبی مونوآمین در مایع خارج سلولی جسم مخطط دارای اختلال متابولیک هستند و محتوای هر انتقال دهنده عصبی افزایش یافته است. در یک محدوده مشخص، افزایش با طولانی شدن زمان ایسکمی آشکارتر است. در 90 دقیقه ایسکمی، غلظت DA و NE در مایع خارج سلولی جسم مخطط بیش از سه برابر سطح گروه کنترل بود. سطوح NE، DA، DOPAC، HIAA، HVA و 5-HT در گروه کنترل از زیاد به پایین کاهش یافت که ممکن است مربوط به ایسکمی موقتی مغز چپ پس از بستن شریان کاروتید مشترک چپ باشد. و آسیب ناشی از قرار دادن پروب. از منحنی تغییر، ECH و CXQ می توانند غلظت اوج DA، DOPAC، HIAA، HVA و 5-HT را پس از ایسکمی مغزی کاهش دهند و CXQ و ECH با دوز بالا آشکارتر هستند. تغییر رو به پایین منحنی مسیر زمانی هر انتقال دهنده عصبی نشان می دهد که ECH می تواند از افزایش انتقال دهنده های عصبی و متابولیت های آنها در مغز موش های مبتلا به ایسکمی مغزی جلوگیری کند.

                                                                           شکل 2 اثر اکینوزید بر سطح خارج سلولی DA در جسم مخطط موش صحرایی

شکل 3 اثر اکینوزید بر سطح خارج سلولی DOPAC در جسم مخطط موش .

Fig5 اثر اکینوزید بر سطح خارج سلولی HVA در جسم مخطط موش‌ها

4.بحث

سیستانچ سوپرمنگیاه دارویی-تبدیلحافظه

【بیشتر بخواهید】 ایمیل:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

مکانیسم آسیب مغزی ناشی از ایسکمی مغزی پیچیده است. در مورد ایسکمی مغزی، انتقال دهنده های عصبی مونوآمین در مغز دچار اختلال می شوند و محتوای NE، DA و 5-HT به طور قابل توجهی کاهش می یابد. هر چه ایسکمی مغزی شدیدتر باشد، محتوای NE، DA و 5-HT در بافت مغز کمتر است [13]. روش میکرودیالیز داخل مغزی ثابت کرد که محتوای انتقال‌دهنده‌های عصبی مونوآمین در مایع خارج سلولی در طول ایسکمی مغزی افزایش می‌یابد، برای کل دوره ایسکمیک ادامه می‌یابد و با طولانی شدن زمان ایسکمیک بیشتر می‌شود. نتایج تجربی با گزارش [14] مطابقت داشت.اکینوزیدیک جزء موثر از گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی است که از گیاه Cistanche deserticola، یک گیاه ویژه در سین کیانگ، جدا و خالص شده است. اثرات محافظت کننده عصبی زیادی مانند ضد پیری، بهبود یادگیری و حافظه و ضد آپوپتوز عصبی دارد.. در این مطالعه، میکرودیالیز مغز پیشرفته داخلی همراه با فناوری تشخیص HPLC-ECD برای بررسی اولیه اثراکینوزیدبر روی انتقال دهنده های عصبی مونوآمین و متابولیت های آنها در مایع خارج سلولی جسم مخطط موش های آزمایشگاهی مبتلا به ایسکمی مغزی - سایپرز، باشگاه دانش نتایج نشان داد که ECH می‌تواند افزایش انتقال‌دهنده‌های عصبی مونوآمین را در مایع خارج سلولی جسم مخطط ناشی از ایسکمی مغزی کاهش دهد و تأثیر بهتری در بهبود آسیب بافت ایسکمیک مغزی دارد.