اثربخشی درمان ترکیبی عصاره Laminaria Japonica و Cistanche Tubulosa در رشد مو

مخاطب: emily.li@wecistanche.com

کیونگها شین1# و همکاران

از آنجایی که اخیراً ریزش موی سر حتی در افراد جوان نیز افزایش یافته است و کیفیت زندگی افراد را به طور جدی تحت تاثیر قرار داده استرشد مواثرات محرک عصاره Laminaria japonica (LJE) وCistanche tubulosaعصاره (CTE) مورد بررسی قرار گرفت. پس از تایید فاز آناژن فولیکول‌ها در زیر اصلاح، موش‌های نر C57BL/6 به صورت پوستی با ماینوکسیدیل 3 درصد یا خوراکی با ترکیب LJE و CTE استفاده شدند.Cistanche tubulosaاستخراج کردن)به مدت 21 روز ماینوکسیدیل باعث رشد مجدد مو و افزایش فعالیت های گلوتامیل ترانس پپتیداز (-GTP) و آلکالین فسفاتاز (ALP) شد. علاوه بر این، ماینوکسیدیل فاکتور رشد اپیدرمی (EGF) و فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (VEGF) را تنظیم می کند. مدیریت مشترک LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)در 54 mg/kg LJE به اضافه 162 mg/kg، CTE (Cistanche tubulosaاستخراج کردن)اثرات تقویت کننده هم افزایی بر روی رشد مجدد مو، قابل مقایسه با 3 درصد ماینوکسیدیل. LJE ترجیحاً فعالیت ALP را افزایش داد، در حالی که CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)فعالیت های -GTP و ALP و همچنین عبارات EGF و VEGF را افزایش داد. مدل التهاب کیسه هوا در داخل بدن، ترشح عروقی ناشی از کاراگینان، و افزایش غلظت اکسید نیتریک و پروستاگلاندین E2 در اگزودا با تجویز همزمان LJE و CTE به طور هم افزایی سرکوب شد.（Cistanche tubulosaاستخراج کردن). علاوه بر این، نفوذ سلول های التهابی به طور قابل ملاحظه ای با درمان ترکیبی مهار شد. نتایج نشان می دهد که درمان ترکیبی خوراکی با LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)دوزها و نسبت‌های نامناسب از ریزش مو جلوگیری می‌کند و آلوپسی را بهبود می‌بخشد، که ممکن است تا حدی به واسطه فعالیت‌های ضد التهابی آنها باشد.

کلید واژه ها رشد موالتهاب، Laminaria japonica،Cistanche tubulosa، درمان ترکیبی

Cistanche tubulosaعصاره عملکردهای زیادی دارد

اخیراً ریزش موی سر حتی در افراد جوان نیز افزایش یافته است و به طور جدی بر کیفیت زندگی افراد تأثیر می گذارد. اگرچه طاسی یکی از مشکلات سلامتی نیست، اما ممکن است باعث استرس اجتماعی شدید روانی و ناراحت کننده شود. بنابراین، توسعه مواد پیشگیرانه و/یا درمانی جدید برای ریزش و رشد مجدد مو بسیار جالب است. علیرغم بازار میلیارد دلاری، چند محصول در حال حاضر موثر موجود است [1].
فولیکول های مو در طول دوره های چرخه رشد (آناژن)، پسرفت (کاتاژن)، استراحت (تلوژن)، و ریزش (اگزوژن) خود را بازسازی می کنند [2]. در طول کاتاژن، تعداد زیادی از سلول های فولیکولی تحت مرگ سلولی برنامه ریزی شده (آپوپتوز) [3] قرار می گیرند و با ورود فولیکول ها به تلوژن، اندازه فولیکول کاهش می یابد. فعال سازی سلول های بنیادی اپیتلیال که به ندرت در حال چرخش هستند واقع در ناحیه برآمدگی فولیکول ها باعث بازسازی فولیکولی در شروع فاز بعدی آناژن می شود [4]. نتاج سلول های بنیادی یک ماتریکس فولیکولی جدید را در طول آناژن اولیه تشکیل می دهند و ساقه مو و غلاف ریشه داخلی از این سلول های ماتریکس نسبتاً تمایز نیافته مشتق می شوند [5]. به خوبی شناخته شده است که اندازه فولیکول مو و مدت زمان فاز آناژن به ترتیب بر اندازه (قطر) و طول ساقه مو تأثیر می گذارد. این رشد چرخه ای مو توسط عوامل رشد متنوع تنظیم می شود.

ماینوکسیدیل، فیناستراید و پروپشیا به صورت تجاری برای کاهش ریزش مو و تسهیل رشد مجدد مو در دسترس هستند. ماینوکسیدیل یک گشادکننده عروق است که یک اثر جانبی برای تسهیل ایجاد می کندرشد مو[6] که ممکن است به دلیل فعالیت های تامین مواد مغذی و باز کردن کانال پتاسیم باشد [7،8]. ماینوکسیدیل برای آلوپسی آندروژنیک در میان سایر درمان‌های طاسی مؤثر است، اگرچه اثربخشی آن ظرف چند ماه پس از قطع درمان از بین می‌رود. در مقایسه، فیناستراید و پروپشیا، درمان هایپرپلازی خوش خیم پروستات و سرطان پروستات، در بسیاری از کشورها برای آلوپسی آندروژنتیک (طاسی با الگوی مردانه) ثبت شده اند. فیناستراید و پروپشیا آنتی‌آندروژن‌های مصنوعی هستند، آنزیمی که تستوسترون را به دی‌هیدروتستوسترون (DHT) در سلول‌های پاپیلا در پایین فولیکول‌های مو، مهار می‌کنند.

Laminaria japonica، Undaria pinnatifida، و Cladosiphon okamuranus که به طور گسترده در بسیاری از کشورها توزیع شده اند، برای مدت طولانی به عنوان درمان در طب شرقی مورد استفاده قرار گرفته اند. در مطالعات قبلی، فوکویدان، یک کمپلکس پلی ساکارید سولفات، از جلبک‌های دریایی استخراج و شناسایی شده بود و دارای فعالیت‌های ضد اکسیداتیو، ضد انعقاد، ضد سرطان و ضد التهابی است [10،11]. پس از آن، اثرات مفید فوکوئیدان بر بیماری های التهابی، ایسکمی، اختلال عملکرد ایمنی و تومورها نشان داده شده است [12،13]. از سوی دیگر،Cistanche tubulosaعصاره (CTE) نیز به طور گسترده ای برای داروهای سنتی در چین استفاده شده است. CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)جریان خون را با کاهش سطح کلسترول خون بهبود می بخشد [14]. اخیراً گزارش شده است که CTE باعث کاهش تولید فاکتور نکروز تومور (TNF-) و اینترلوکین{4}} (IL{5}}) می شود که از عوامل اصلی تولید نیتریک اکسید (NO) در مسیر التهابی هستند. [15]. ما همچنین نشان دادیم که fucoidan از عصاره Laminaria japonica (LJE) و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)التهاب در شرایط in vitro و in vivo به طور هم افزایی کاهش می یابد [16]. به طور قابل توجهی، نشان داده شده است که ارتباط نزدیکی بین التهاب پوست (به ویژه غده اشکی) با آلوپسی وجود دارد [17]. بنابراین، جنبه های ضد التهابی درمان آلوپسی در حال ظهور است [18].
بر اساس فعالیت های بهبود جریان خون و التهاب، ما اثر ترکیبی LJE و CTE را بررسی می کنیم.（Cistanche tubulosa استخراج کردن)بررشد موو مکانیسم(های) زیربنایی، در مقایسه با 3 درصد ماینوکسیدیل (داروسازی هیوندای، سئول، کره)، یک داروی معروفرشد موتقویت کننده

Cistanche tubulosaعصاره برایرشد مو

مواد و روش ها

مواد

LJE و CTE (Cistanche tubulosaاستخراج کردن)از Misuba RTech Co., Ltd. (آسان، کره) به دست آمد. پودر خشک شده Laminaria japonica در آب تصفیه شده در دمای 6 درجه سانتیگراد به مدت 24 ساعت استخراج شد، از طریق غشای 0.45 میکرومتر فیلتر شد، ضد عفونی شد و با اسپری خشک شد.Cistanche tubulosaاستخراج در اتانول 80 درصد، ضد عفونی، تغلیظ و خشک شد. LJE و CTE (Cistanche tubulosaاستخراج کردن)قبل از استفاده در دمای 4 درجه سانتیگراد، مخلوط (1:3) و حل شده در آب تصفیه شده و به صورت خوراکی در حجم 5 میلی لیتر بر کیلوگرم تجویز شدند.
حیوانات
موش نر C57BL/6 برایرشد موموش های مورد مطالعه و ICR نر برای مطالعه التهاب از Daehan Biolink (Eumseong، کره) خریداری شدند و در اتاقی با شرایط محیطی ثابت (23±2ºC؛ 45-65 درصد رطوبت نسبی، 12- ساعت نور) قرار گرفتند. -چرخه تاریکی؛ 150-300 روشنایی لوکس). خوراک پلت و آب تصفیه شده به صورت آزاد در دسترس بود. تمام آزمایش‌های حیوانی توسط کمیته مراقبت و استفاده از حیوانات سازمانی (IACUC) دانشگاه ملی Chungbuk (CBNU)، کره تأیید شد و طبق رویه‌های عملیات استاندارد (SOP) مرکز تحقیقات حیوانات آزمایشگاهی، CBNU انجام شد.

درمان رشد مو

پس از تایید فاز آناژن با مشاهده رنگ پوست صورتی همگن در پوست پشت موش C57BL/6 (6 هفته، n=8/گروه) پس از بریدن در فاز تلوژن، موها تراشیده شدند [1،19] ، 20]. از روز بعد موش های بدون خراش قابل مشاهده انتخاب و به صورت خوراکی انتخاب شدند
تحت درمان با LJE (18 یا 54 میلی گرم بر کیلوگرم)، CTE (54 یا 162 میلی گرم بر کیلوگرم)، یا مخلوط آنها (18 به علاوه 54 یا 54 به علاوه 162 میلی گرم بر کیلوگرم) یک بار در روز به مدت 21 روز. دوزهای پایین LJE (18 mg/kg) و CTE (54 mg/kg) از دوزهای تخمینی انسانی 100 mg/body (70 kg) و 300 mg/body پس از ترجمه سطحی وزن بدن (Km{14}) بود. } برای انسان/کیلومتر=3 برای ماوس)، به ترتیب. دوزهای بالای LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)برای ارزیابی حداکثر اثرات هم افزایی در 3 برابر، به تنهایی یا ترکیبی تنظیم شدند [16]. ماینوکسیدیل (3 درصد، 0.2 میلی لیتر) به صورت موضعی یک بار در روز بر روی پوست تراشیده شده در همان برنامه درمانی با LJE/CTE استفاده شد.

مشاهده کامل رشد مو

در روزها در فواصل 3-روز بعد از اصلاح و در طول درمان، موش‌ها به آرامی با دی اتیل اتر بیهوش شدند و عکس‌ها از پشت آنها گرفته شد. نسبت رشد مجدد مو (منطقه رشد مجدد / ناحیه تراشیده شده) روی عکس ها با استفاده از یک سیستم تجزیه و تحلیل تصویر کامپیوتری (Imageinside، Daejeon، کره) تجزیه و تحلیل شد.

بررسی میکروسکوپی فولیکول های مو

در روزهای 14 و 21، موش ها با بیهوشی عمیق با دی اتیل اتر قربانی شدند و پوست پشتی آنها برداشته شد [1]. پوست پشتی به دو قسمت بریده شد. مقاطع بافتی ثابت شده با پارافین (قطر 5 میکرومتر) از یک قسمت با هماتوکسیلین-ائوزین رنگ آمیزی شد تا تعداد فولیکول های مو و یافته های بافت شناسی بررسی شود. قسمت دیگر بافت در نیتروژن مایع برای سنجش آنزیمی و ایمونواسی منجمد شد.

سنجش فعالیت آنزیم

بافت پوست در 4 حجم بافر فسفات (pH 7.4) همگن شد. هموژن در 3،{4}} دور در دقیقه به مدت 20 دقیقه سانتریفیوژ شد و مایع رویی برای سنجش فعالیت -گلوتامیل ترانس پپتیداز (-GTP) و آلکالین فسفاتاز (ALP) با استفاده از p-نیتروفنیل فسفات (PNPP)-DEAV به عنوان مورد استفاده قرار گرفت. بستر [1،21].

Cistanche tubulosa

تعیین کمیت عوامل رشد

فاکتور رشد اپیدرمی (EGF) و فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (VEGF) با استفاده از کیت های سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) (R&D Systems، مینیاپولیس، ایالات متحده آمریکا) طبق دستورالعمل سازنده اندازه گیری شد [1،22].

درمان التهاب

موش های ICR (7 هفته، n=8/گروه) به صورت خوراکی با LJE (18 یا 54 میلی گرم بر کیلوگرم)، CTE تحت درمان قرار گرفتند.（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)(54 یا 162 میلی گرم بر کیلوگرم)، یا مخلوط آنها (18 به علاوه 54 یا 54 به علاوه 162 میلی گرم بر کیلوگرم) یک بار در روز به مدت 7 روز [16]. در روز اول LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)در درمان، 10 میلی لیتر هوای استریل به موش ها به صورت زیر جلدی به پشت تزریق شد تا کیسه ای تشکیل شود [16،23،24]. پس از 2 و 5 روز، کیسه مجدداً با 5 میلی لیتر هوا تزریق شد. یک ساعت پس از LJE و CTE نهایی（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)درمان، 1 میلی لیتر کاراگینان (1 درصد در سالین؛ سیگما آلدریچ، سنت لوئیس، ایالات متحده) یا وسیله نقلیه آن (سالین) به کیسه تزریق شد.

تجزیه و تحلیل ترشحات

کیسه هوا با 1 میلی لیتر نمک سرد 6 ساعت پس از تزریق کاراگینان شسته شد و حجم خالص مایع لاواژ ثبت شد [16]. تعداد کل سلول‌های التهابی شامل نوتروفیل‌ها، مونوسیت‌ها و لنفوسیت‌ها با استفاده از کولتر اندازه‌گیری شد.

غلظت NO و پروستاگلاندین E2 (PGE2) به ترتیب با استفاده از معرف گریس (سیگما-آلدریچ) و ایمونواسی آنزیمی (EIA) با استفاده از کیت Correlate-EIA (Assay Designs، Ann Arbor، USA) تعیین شد [16].

تحلیل آماری

داده ها به صورت میانگین± خطای استاندارد ارائه می شوند. معنی‌داری آماری با استفاده از آنالیز واریانس یک‌طرفه و به‌دنبال آن آزمون مقایسه چندگانه توکی پس از مرگ تعیین شد. مقادیر P<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

نتایج

استفاده از ماینوکسیدیل (3 درصد)، یک ماده مرجع، به طور قابل توجهی این امر را تسهیل کردرشد مواز موش‌های C57BL/6، پوشش تقریباً کامل (92.4 درصد) از ناحیه تراشیده شده (شکل 1، 2B) را در مقایسه با 29.2 درصد در رشد طبیعی (شکل 1، 2A) در روز 21 نشان می‌دهند. اگرچه مؤثرتر از کاربرد ماینوکسیدیل است. ، درمان خوراکی LJE نیز تسهیل کننده استرشد موکه منجر به پوشش 33.5 و 69.1 درصدی به ترتیب 18 و 54 میلی گرم بر کیلوگرم می شود (شکل های 1، 2C، 2D). CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)در تقویت نیز موثر بودرشد موبه ترتیب به 73.6 و 80.4 درصد پوشش در mg/kg 54 و 162 رسید (شکل های 1، 2E، 2F). قابل توجه، درمان ترکیبی با دوزهای بالای LJE (54 میلی گرم بر کیلوگرم) و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)(162 میلی گرم بر کیلوگرم) به طور قابل ملاحظه ای افزایش یافترشد مواز روز 12، قابل مقایسه با اثر ماینوکسیدیل (شکل 1، 2H)، اگرچه دوزهای پایین LJE (18 میلی گرم بر کیلوگرم) و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)(54 میلی گرم/کیلوگرم) فقط در مرحله اولیه اثر هم افزایی دارند (شکل 1، 2G).

شکل 1. دوره زمانی رشد مجدد مو در موش های تحت درمان با ماینوکسیدیل یا عصاره Laminaria japonica (LJE) و/یاCistanche tubulosaاستخراج (CTE). ،

○ عادی؛ ●، ماینوکسیدیل (3 درصد) کاربرد; △، 18 میلی گرم بر کیلوگرم LJE؛ ▼، 54 میلی گرم بر کیلوگرم LJE؛ □، 54 میلی گرم بر کیلوگرم CTE؛ ■، 162 mg/kg CTE; ◇، 18 mg/kg LJE به علاوه 54 mg/kg CTE. ◆، 54 mg/kg LJE به اضافه 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن).

شکل 2. یافته های ناخالص نشان دهنده رشد مجدد مو در موش های تحت درمان با ماینوکسیدیل یا عصاره Laminaria japonica (LJE) و/یاCistanche tubulosaاستخراج (CTE) در روز 21.

الف، عادی؛ ب، ماینوکسیدیل (3 درصد) کاربرد; C، 18 میلی گرم / کیلوگرم LJE; D، 54 mg/kg LJE; E، 54 میلی گرم بر کیلوگرم CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن); F، 162 میلی گرم بر کیلوگرم CTE; G، 18 mg/kg LJE به اضافه 54 mg/kg CTE. H، 54 mg/kg LJE به اضافه 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن).

در مقایسه با فولیکول های طبیعی مو (شکل 3A)، کاربرد ماینوکسیدیل یکپارچگی فولیکول های مو را بهبود بخشید و فولیکول های بزرگتر و ساقه های مو ضخیم تر را نشان داد (شکل 3B). چنین اثراتی در پوست موش‌هایی که با LJE و/یا CTE درمان شده‌اند نیز مشاهده شد（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)(شکل 3C-3H). به ویژه، اثربخشی تقویت فولیکول مو درمان ترکیبی LJE و CTE (Cistanche tubulosaاستخراج کردن)قابل مقایسه با ماینوکسیدیل بود.

شکل 3. یافته های میکروسکوپی نشان دهنده رشد مجدد مو در موش های تحت درمان با ماینوکسیدیل یا عصاره Laminaria japonica (LJE) و/یاCistanche tubulosaاستخراج (CTE) در روز 21.

الف، عادی؛ ب، ماینوکسیدیل (3 درصد) کاربرد; C، 18 میلی گرم / کیلوگرم LJE; D، 54 mg/kg LJE; E، 54 میلی گرم بر کیلوگرم CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن); F، 162 میلی گرم بر کیلوگرم CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن); G، 18 mg/kg LJE به اضافه 54 mg/kg CTE. H، 54 mg/kg LJE به اضافه 162 mg/kg CTE

مصرف ماینوکسیدیل فعالیت -GTP را که فولیکول‌های مو را به فاز آناژن القا می‌کند، در روزهای 14 و 21 در مقایسه با سطح پوست نرمال، 90-120 درصد افزایش داد (شکل 4). LJE (54 میلی گرم بر کیلوگرم) نیز فعالیت آنزیم را افزایش داد، اگرچه تغییرات زیادی وجود داشت. CTE اثرات مشابهی اعمال کرد و به طور قابل توجهی فعالیت -GTP را در روز 14 افزایش داد. جالب توجه است که درمان ترکیبی LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)فعالیت آنزیم را بیشتر از زمانی که عصاره ها به تنهایی استفاده می شدند افزایش داد.
فعالیت ALP، نشانگر رشد و رگ زایی استخوان، در روزهای 14 و 21 پس از مصرف موضعی ماینوکسیدیل به طور قابل توجهی در پوست افزایش یافت (شکل 5). LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)همچنین فعالیت ALP را پس از مصرف خوراکی به صورت وابسته به دوز افزایش داد. قابل توجه، فعالیت آنزیم به طور هم افزایی با درمان ترکیبی با LJE و CTE افزایش یافت.

شکل 4. اثرات ماینوکسیدیل (MXD، 3 درصد)، یا عصاره Laminaria japonica (LJE) و/یاCistanche tubulosaعصاره (CTE) (به میلی گرم بر کیلوگرم) بر روی فعالیت گلوتامیل ترانس پپتیداز (-GTP) در روزهای 14 (A) و 21 (B) درمان.

*به طور قابل توجهی با کنترل عادی (Nor) متفاوت است (P<>

شکل 5. اثرات ماینوکسیدیل (MXD، 3 درصد)، یا عصاره Laminaria japonica (LJE) و/یاCistanche tubulosaعصاره (CTE) (به میلی گرم بر کیلوگرم) بر فعالیت آلکالین فسفاتاز (ALP) در روزهای 14 (A) و 21 (B) درمان.

*به طور قابل توجهی با کنترل عادی (Nor) متفاوت است (P<>

در تجزیه و تحلیل EGF، به خوبی شناخته شده استرشد موفاکتور، کاربرد ماینوکسیدیل سطح EGF را 3.5 برابر کنترل طبیعی در هر دو روز 14 و 21 افزایش داد (شکل 6). LJE (18 mg/kg) EGF را فقط در روز 21 افزایش داد، در حالی که CTE (162 mg/kg) تولید آن را در روزهای 14 و 21 بسیار افزایش داد. توجه به این نکته جالب است که درمان ترکیبی LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)حتی در دوزهای پایین اثرات هم افزایی مشخصی از خود نشان داد.

تیمار ماینوکسیدیل همچنین سطح VEGF را 50-80 درصد بالاتر از مقدار کنترل افزایش داد (شکل 7). اگرچه LJE بی اثر بود، CTE (Cistanche tubulosaاستخراج کردن)اثرات تقویتی قابل توجهی را اعمال کرد. علاوه بر این، درمان ترکیبی LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)یک فعالیت هم افزایی در مرحله اولیه در روز 14 نشان داد.

شکل 6. اثرات ماینوکسیدیل (MXD، 3 درصد)، یا عصاره Laminaria japonica (LJE) و/یاCistanche tubulosaعصاره (CTE) (به میلی گرم بر کیلوگرم) بر روی محتوای فاکتور رشد اپیدرمی (EGF) در روزهای 14 (A) و 21 (B) درمان.

*به طور قابل توجهی با کنترل عادی (نه) متفاوت است (P<>

شکل 7. اثرات ماینوکسیدیل (MXD، 3 درصد)، یا عصاره Laminaria japonica (LJE) و/یاCistanche tubulosaعصاره (CTE) (به میلی گرم بر کیلوگرم) بر محتوای فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (VEGF) در روزهای 14 (A) و 21 (B) درمان.

*به طور قابل توجهی با کنترل عادی (Nor) متفاوت است (P<>

تزریق کاراگینان به کیسه هوای ICR موش باعث افزایش حجم اگزودا در داخل کیسه 6 برابر سطح کنترل شد (جدول 1). چنین افزایش ترشح به طور قابل توجهی با درمان با LJE (18 و 54 میلی گرم بر کیلوگرم) یا CTE کاهش یافت.（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)(54 و 162 mg/kg). قابل ذکر است، درمان ترکیبی با LJE و CTE باعث کاهش بیشتر حجم اگزودا در مقایسه با اثرات فردی شد. تعداد سلول های التهابی با تزریق کاراگینان به شدت افزایش یافت: سطوح کنترل نوتروفیل ها، مونوسیت ها و لنفوسیت ها به ترتیب 34.6، 4.2 و 24.9 برابر بود (جدول 1). با این حال، LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)به طور قابل توجهی سلول های التهابی را در روش های وابسته به دوز کاهش داد، که در آن LJE تا حدودی نسبت به CTE برتر بود.（Cistanche tubulosaاستخراج کردن). انتظار می رود، اثرات هم افزایی در انفیلتراسیون سلول های التهابی با تجویز همزمان LJE و CTE به دست آمد.（Cistanche tubulosaاستخراج کردن).
به موازات نفوذ سلول های التهابی در کیسه، محتویات NO و PGE2 در کیسه نیز پس از تزریق کاراگینان به شدت افزایش یافت (جدول 1). در مقایسه با اثر خفیف LJE، CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)به طور قابل توجهی غلظت NO را کاهش داد. درمان ترکیبی LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)بیشتر سطح NO را به صورت وابسته به دوز کاهش داد. به روشی مشابه، افزایش سطح PGE2 به طور هم افزایی توسط درمان ترکیبی LJE و CTE سرکوب شد (جدول 1).

بحث

سر انسان به طور متوسط ​​100،000 فولیکول مو دارد. در طول زندگی، هر فولیکول حدود 20 بار رشد می کند و ریزش می کند و روزانه 100 رشته ریزش مو را نشان می دهد [25]. ریزش مو از جمله آلوپسی و طاسی یک وضعیت ناراحت کننده برای مردان و زنان است، به ویژه در جامعه مدرن. بنابراین، توسعه روش های درمانی جدید که از ریزش مو جلوگیری می کند و رشد مجدد مو را افزایش می دهد، از اهمیت بالایی برخوردار است. در این راستا، طب جایگزین توجه محققین را به خود جلب کرده است.

جنبه‌های مورفولوژیکی، هیستوشیمیایی و بیوشیمیایی مرتبط با پیری طاسی با الگوی مردانه توسط یک سری مطالعات بر روی ماکاک‌های دم کنده آشکار شده است. در طاسی با الگوی مردانه، فاز تلوژن طولانی شد، در حالی که فاز آناژن کوتاه شد. بنابراین، در نظر گرفته می شود که برای بهبود ریزش مو، حفظ کشیدگی فولیکول مو که از اوایل آناژن تا آناژن اواسط رخ می دهد بسیار مهم است [26]. در مطالعه حاضر ما نشان دادیمرشد موفعالیت تسهیل کننده یک درمان ترکیبی LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن). مهم‌تر از همه، تجویز ترکیبی LJE (54 میلی‌گرم بر کیلوگرم) و CTE (162 میلی‌گرم بر کیلوگرم) علی‌رغم تجویز خوراکی عصاره‌ها، یک فعالیت عالی برای رشد مجدد مو از خود نشان داد. قابل توجه است که اثر درمان ترکیبی با استفاده از پوست با غلظت بالا (3 درصد) از ترکیب خالص شده ماینوکسیدیل قابل مقایسه بود، اگرچه غلظت مواد فعال LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)در پوست پس از مصرف خوراکی تایید نشد.
در پوست دوچرخه سواری موش، فعالیت -GTP در طول آناژن تلفظ می شود اما در طول تلوژن بسیار کاهش می یابد [27]. در پوست، آنزیم منحصراً در غلاف ریشه خارجی و داخلی فولیکول‌های مو در زیر سطح غدد چربی وجود دارد که GTP در آنها وجود ندارد [27]. در مقایسه، ALP به طور برجسته در واحدهای پیلوسباسه بیان می شود و فعالیت در ناحیه رشد مجدد مو افزایش می یابد. ALP به عنوان یک عامل رگ زایی، تغذیه پاپیلاهای پوستی را بهبود می بخشد و در نتیجه باعث ایجاد ضخامت در طول آناژن می شود [28]. با این حال، تایید شد که فعالیت ALP در پوست آلوپسی کاهش یافته است [21]. در مطالعه مکانیکی، ترکیب مرجع ماینوکسیدیل به طور قابل توجهی فعالیت -GTP و ALP را افزایش داد، به این معنی که ماینوکسیدیل تسهیل می کند.رشد مونه تنها با القای فولیکول های مو
به فاز آناژن، بلکه با بهبود جریان خون از طریق رگزایی. از آنجایی که LJE فعالیت ALP را افزایش داد، پیشنهاد می شود که LJE اثر مفیدی بر روی آن نشان دهدرشد مواز طریق پتانسیل رگ زایی آن، همانطور که از مطالعه قبلی استنباط شد که فوکویدان، یک ماده فعال LJE، دارای فعالیت بهبود جریان خون است [29]. در مقایسه، CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)هر دو فعالیت -GTP و ALP را افزایش داد، که نشان دهنده اثرات آن بر القای فاز آناژن و همچنین بهبود جریان خون است. با توجه به اقدامات هم افزایی بر روی آنزیم های -GTP و ALP، اعتقاد بر این است که با مصرف همزمان LJE و CTE، رشد مجدد موی بالاتری حاصل می شود.（Cistanche tubulosaاستخراج کردن).
به خوبی شناخته شده است که سیتوکین ها و فاکتورهای رشد متنوعی از جمله EGF و VEGF در تنظیم مورفوژنز و رشد مو نقش دارند [30،31]. نکته جالب توجه این است که عوامل مشتق شده از سلول های پاپیلای پوستی فعالیت های کموتاکتیکی روی سلول های اطراف دارند که به نوبه خود منجر به ارتقاءرشد مو[32]. EGF در ارتباط با رشد فولیکول های مو بیان می شود [33،34]. اگرچه بیان هر دو EGF و گیرنده آن (EGFR) در غلاف بیرونی ریشه با تکمیل رشد فولیکولی کاهش می یابد، بیان آنها زمانی که سلول های فولیکولی وارد فاز آناژن می شوند بهبود می یابد. VEGF نقش مهمی در رگزایی در طی واکنش التهابی و توسعه تومور ایفا می کند [35]. به خصوص، شبکه عروقی ارتباط نزدیکی با چرخه رشد مو دارد [36-38]. بنابراین، تایید شد که بیان ژن VEGF با توجه به چرخه موی انسان متفاوت است [39].

از نتایج مطالعه حاضر توضیح داده می شود کهرشد مواثر تقویتی ماینوکسیدیل ممکن است به دلیل افزایش بالقوه EGF و VEGF آن باشد که رشد فولیکول و همچنین رگ زایی را تسهیل می کند. اگرچه LJE بر بیان VEGF تأثیری نداشت، پس از تجویز خوراکی باعث افزایش محتوای EGF در پوست شد. در مقایسه، CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)در بیان هر دو EGF و VEGF موثر بود. قابل توجه LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)اثرات افزایشی بر بیان فاکتورهای رشد اعمال کرد.

علاوه بر طویل شدن موها، یکپارچگی فولیکول های مو به طور قابل توجهی پس از درمان با ماینوکسیدیل، LJE، و/یا CTE بهبود یافت.（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)در معاینه میکروسکوپی در مرحله اولیه ریزش مو و طاسی در بیماران انسانی و مدل های حیوانی، یکپارچگی فولیکول ها مختل شده و ضخامت ساقه مو کاهش می یابد، در حالی که یکپارچگی فولیکولی و ضخامت ساقه در موهای بازسازی شده بهبود می یابد. جالب توجه است، چنین اثرات مثبتی بر روی یکپارچگی و رشد مجدد اجزای مو با تجویز خوراکی LJE به علاوه CTE به دست آمد.（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)که در آن اثر با استفاده موضعی غلظت بالای ماینوکسیدیل قابل مقایسه بود. بنابراین، انتظار می رود که ترکیبی برای مصرف خوراکی LJE به علاوه CTE باشد（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)می تواند نسخه ای نسبتا راحت در مقایسه با استفاده پوستی از ماینوکسیدیل باشد.
در مدل آلوپسی موش، نفوذ لنفوسیت حساس به استروئید در اطراف فولیکول‌های مو رایج است، که الگویی مشابه با ایمونوتراپی آلوپسی انسانی با التهاب غدد اشکی نشان می‌دهد [17،40]. در مطالعه حاضر، التهاب پوستی ناشی از کاراگینان به طور قابل توجهی توسط LJE و CTE کاهش یافت.（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)رفتار؛ به عنوان مثال، ترشح عروقی و ارتشاح سلول های التهابی به طور هم افزایی سرکوب شد. در تجزیه و تحلیل کمی، واسطه های التهابی اصلی NO و PGE 2 به طور قابل توجهی به دنبال مصرف همزمان خوراکی LJE و CTE کنترل شدند.Cistanche tubulosaاستخراج کردن). جالب توجه است، از آنجایی که LJE فعالیت ضد التهابی بالاتری نسبت به فوکویدان نیمه خالص نشان داد [16]، فرض بر این است که ممکن است یک ماده (ها) فعال اضافی، علاوه بر فوکویدان، در LJE وجود داشته باشد.

در مجموع، نتایج نشان می دهد که درمان ترکیبی خوراکی با LJE و CTE（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)ریزش مو را با تنظیم فاکتورهای رشد و فعالیت های آنزیمی مرتبط و تا حدی از طریق پتانسیل ضد التهابی بهبود می بخشد. بنابراین پیشنهاد می شود ترکیبی شامل LJE و CTE باشد（Cistanche tubulosaاستخراج کردن)دوزها و نسبت های بالینی نامناسب می تواند یک دستور العمل کاندید برای بیماران ریزش مو باشد.

Cistanche tubulosaاستخراج محصولات

قدردانی

این تحقیق توسط توسعه صنعت پیشرو برای منطقه اقتصادی دفتر صنعت پیشرو Chungcheong، موسسه پیشرفت فناوری کره (KIAT) و وزارت اقتصاد دانش (MKE) و تا حدی توسط برنامه توسعه فناوری غذایی با ارزش افزوده بالا حمایت مالی شد. ، وزارت زراعت، غذا و امور روستایی (MAFRA؛ شماره کمک هزینه 113034-3).

تضاد منافع

نویسندگان اعلام می کنند که هیچ تضاد منافع مالی برای انتشار این نتایج وجود ندارد.

از: "اثربخشی درمان ترکیبی عصاره Laminaria japonica و Cistanche tubulosa در رشد مو" توسطکیونگها شین1# و همکاران

--- Lab Anim Res 2015: 31(1)، 24-32http://dx.doi.org/10.5625/lar.2015.31.1.24

منابع

1. Kim JS، Kang BS، Park HJ، Kim DY، Hwang SY، Nam SY، Yun YW، Lee BJ. تقویت اثر مخلوط عصاره های گیاهی بر رشد مجدد مو در موش های C3H/HeJ. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.
2. Paus R، Cotsarelis G. بیولوژی فولیکول های مو. N Engl J Med 1999; 341 (7); 491-497.
3. Cotsarelis G. فولیکول مو: مرگ برای توجه. Am J Pathol 1997; 151(6): 1505-1509.
4. Cotsarelis G، Sun TT، Lavker RM. سلول های نگهدارنده برچسب در ناحیه برآمدگی واحد پیلوسباسه قرار دارند: پیامدهایی برای سلول های بنیادی فولیکولی، چرخه مو و سرطان زایی پوست. سلول 1990; 61(7): 1329-1337.
5. Oshima H، Rochat A، Kedzia C، Kobayashi K، Barrandon Y. مورفوژنز و تجدید فولیکول های مو از سلول های بنیادی چند توان بالغ. سلول 2001; 104(2): 233-245.
6. Burton JL، Marshall A. هیپرتریکوزیس ناشی از ماینوکسیدیل. Br J Dermatol 1979; 101(5): 593-595.
7. Meisheri KD، Cipkus LA، Taylor CJ. مکانیسم اثر اتساع عروق ناشی از ماینوکسیدیل سولفات: نقشی در افزایش نفوذپذیری K به علاوه J Pharmacol Exp Ther 1988; 245(3): 751-760.
8. Buhl AE، Waldon DJ، Baker CA، Johnson GA. ماینوکسیدیل سولفات متابولیت فعالی است که فولیکول های مو را تحریک می کند. J Invest Dermatol 1990; 95(5): 553-557.
9. Kaufman KD, Dawber RP. فیناستراید، یک مهارکننده آلفا ردوکتاز نوع 2 5، در درمان مردان مبتلا به آلوپسی آندروژنتیک. نظر متخصصین در مورد مواد مخدر 1999; 8 (4): 403-415.
10. Feldman SC، Reynaldi S، Stortz CA، Cerezo AS، Damont EB. خواص ضد ویروسی فراکسیون های فوکویدان از Leathesia difformis. فیتومدیسین 1999; 6(5): 335-340.
11. Wang J، Zhang Q، Zhang Z، Song H، Li P. ظرفیت آنتی اکسیدانی و ضد انعقادی بالقوه فراکسیون های فوکویدان با وزن مولکولی پایین استخراج شده از Laminaria japonica. Int J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.
12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan جریان خون کلیوی را در مراحل اولیه آسیب ایسکمی کلیوی/آسیب خونرسانی مجدد در موش صحرایی بهبود می بخشد. J Physiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.
13. Li N، Zhang Q، Song J. ارزیابی سم‌شناسی فوکویدان استخراج‌شده از Laminaria japonica در موش‌های صحرایی ویستار. Food Chem Toxicol 2005; 43(3): 421-426.
14. Shimoda H، Tanaka J، Takahara Y، Takemoto K، Shan SJ، Su MH. اثرات هیپوکلسترولمی عصاره Cistanche tubulosa، یک داروی خام سنتی چینی، در موش ام جی چین مد 2009; 37(6): 1125-1138.
15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. اثر مهاری اکتئوزید جدا شده از Cistanche tubulosa بر آزادسازی واسطه شیمیایی و تولید سیتوکین های التهابی توسط سلول های RBL-2H3 و KU812. Planta Med 2010; 76(14): 1512-1518.
16. کیونگ جی، کیم دی، پارک دی، یانگ ی اچ، چوی ای کی، لی اس پی، کیم تی اس، لی وای بی، کیم وای بی. اثرات ضد التهابی هم افزایی عصاره Laminaria japonica fucoidan و Cistanche tubulosa. Lab Anim Res 2012; 28(2): 91-97.
17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. ارتباط التهاب غده اشکی با آلوپسی آره آتا. Orbit 2015; 34(1): 45-50.
18. Brzezinska-Wcislo L، Bergler-Czop B، Wcislo-Dziadecka D، LisSwiety A. جنبه های جدید درمان آلوپسی آره آتا. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.
19. Hattori M، Ogawa H. تجزیه و تحلیل بیوشیمیایی ازرشد مواز جنبه های پیری و فعالیت های آنزیمی. جی درماتول 1983; 10(1): 45-54.
20. لی SH، لی اچ جی، باک آی جی، یون جی ام، نام سی، لی بی جی، یون یو.و.، کیم وای بی، هوانگ سی، هونگ جی تی. تاثیر لوسیون پوست سر DREAMMO رویرشد موارتقاء در مدل آلوپسی موش C57BL/6. Lab Anim Res 2006; 22(1): 91-96.
21. Handjiski BK، Eichmüller S، Hofmann U، Czarnetzki BM، Paus R. فعالیت آلکالین فسفاتاز و محلی سازی در طول چرخه موی موش. Br J Dermatol 1994; 131(3): 303-310.
22. Cross MJ، Dixelius J، Matsumoto T، Claesson-Welsh L. انتقال سیگنال گیرنده VEGF. Trends Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.
23. Shin S، Jeon JH، Park D، Jang JY، Joo SS، Hwang BY، Choe SY، Kim YB. اثرات ضد التهابی عصاره اتانولی گلپر گلپر در مدل التهاب کیسه هوای کاراگینان. Exp Anim 2009; 58 (4): 431-436.
24. کیم دی، پارک دی، کیونگ جی، یانگ ی اچ، چوی ای کی، لی وای بی، کیم هک، هوانگ بی، کیم وای بی. اثرات ضد التهابی عصاره فوق بحرانی Houttuynia cordata در مدل التهاب کیسه هوای کاراگینان. Lab Anim Res 2012; 28(2): 137-140.
25. Rebora A. پاتوژنز آلوپسی آندروژنتیک. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.
26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, ترکیبی جدید برایرشد موارتقاء مدل های موش in vitro و in vivo. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 213-218.
27. Kawabe TT، Kubicek MF، Johnson GA، Buhl AE. استفاده از فعالیت گاما گلوتامیل ترانس پپتیداز به عنوان نشانگر چرخه مو و القای آناژن در فولیکول های موی موش. J Invest Dermatol 1994; 103(1): 122-126.
28. Hamada K، سوزوکی K. ارزیابی شاخص های بیوشیمیایی به عنوان یک نشانگر چرخه مو در موش C3H. Exp Anim 1996; 45(3): 251-256.
29. Park SJ، Lee KW، Lim DS، Lee S. پلی ساکارید سولفاته فوکویدان تمایز استخوانی سلول های بنیادی مشتق شده از چربی انسانی را تحریک می کند. سلول های بنیادی Dev 2012; 21(12): 2204-2211.

30. Danilenko DM، Ring BD، Pierce GF. عوامل رشد و سیتوکین ها در رشد و چرخه فولیکول مو: بینش های اخیر از مدل های حیوانی و پتانسیل های درمان بالینی مول مد امروز 1996; 2 (11): 460-467.
31. Ozeki M، Tabata Y. In vivo رشد فولیکول های موی موش ها را با آزادسازی کنترل شده فاکتورهای رشد ترویج کردند. بیومتریال 2003; 24(13): 2387-2394.
32. Fujie T، Katoh S، Oura H، Urano Y، Arase S. اثر کموتاکتیکی یک فاکتور مشتق از سلول پاپیلای پوستی بر روی سلول های غلاف ریشه خارجی. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 206-212.
33. Stenn KS، Paus R. کنترل چرخه فولیکول مو. Physiol Rev 2001; 81(1): 449-494.
34. چاپمن RE، هاردی MH اثرات فاکتور رشد اپیدرمی موش تزریقی و موضعی روی رشد پشم، پوست و فولیکول های پشم گوسفند مرینو. Aust J Biol Sci 1988; 41(2): 261-268.
35. Dvorak HF، Brown LF، Detmar M، Dvorak AM. فاکتور نفوذپذیری عروقی / فاکتور رشد اندوتلیال عروقی، نفوذپذیری میکروواسکولار، و رگزایی. Am J Pathol 1995; 146(5): 1029-1039.
36. Ellis RA، Moretti G. الگوهای عروقی مرتبط با فولیکول های موی کاتاژن در پوست سر انسان. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448-457.
37. Stenn KS، Fernandez LA، Tirrell SJ. خواص رگ زایی فولیکول مو ویبریسا موش با پیاز مرتبط است. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.
38. Yano K، براون LF، Detmar M. کنترلرشد موو اندازه فولیکول توسط رگزایی با واسطه VEGF. J Clin Invest 2001; 107(4): 409-417.
39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. توزیع مراحل فولیکول مو بی تفاوت mRNA VEGF توسط هیبریداسیون فلورسانس درجا همراه با میکروسکوپ لیزر کانفوکال. در: تحقیقات مو برای هزاره بعدی (Van Neste DJJ, ed), Elsevier, Amsterdam, 1996; صفحه 407-12.
40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Haple R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. درمان موفقیت آمیز ریزش موی شبه آلوپسی آره آتا با حساس کننده تماسی اسید اسکوریک دی بوتیل استر (SADBE) در موش C3H/HeJ . J Invest Dermatol 1999; 113(1): 61-68.