تأثیر کل گلیکوزیدهای سیستانچ بر یادگیری و حافظه موش های صحرایی دمانس عروقی و مکانیسم آن

گائو کونگ 1، وانگ چوانشه 2،3، وو گوانژونگ 1، هو می 1، تو پنگفی 2،4

(1. گروه فارماکولوژی، دانشگاه داروسازی چین، نانجینگ 210009، جیانگ سو؛ 2. مرکز تحقیقات مدرن طب سنتی چینی، دانشگاه پکن، پکن 100083؛ 3. دانشکده پزشکی پایه، دانشگاه پکن، پکن 100083؛ 4. دانشکده داروسازی ، دانشگاه پکن، پکن 100083)

پیری جمعیت، جستجو برای داروهای ایمن و موثر برای پیشگیری و درمان را باعث شده استبیماری آلزایمرنقطه داغ در تحقیقات دارویی در سال های اخیر پیشرفت های زیادی در درمان بیماری آلزایمر با روش مقوی سازی کلیه و مغز و همچنین قلب و طحال صورت گرفته است.Cistanche deserticola در اصل در Shennong's Classic of Materia Medica منتشر شد و دارای اثرات تقویت کننده یانگ کلیه، سودمند شدن جوهر خون، مرطوب کردن روده ها و رفع یبوست است. امروزه به طور گسترده برای درمان زوال عقل پیری، ناتوانی جنسی، یبوست معمولی و سایر بیماری ها استفاده می شود. [1,2]. مطالعات نشان داده است که دارای اثرات ضد زوال عقل، ضد اکسیداسیون، ضد هیپوکسی، ضد تشعشع و تقویت عملکرد سیستم ایمنی است و ترکیبات اصلی آن گلیکوزیدهای فنیل اتانول هستند. [3-6].

Cistanche deserticola ma - ضد بیماری آلزایمر

کل گلیکوزیدهایCistanche deserticola maاز ساقه های گوشتی خشک Cistanche deserticola (Schrenk) R. Wight استخراج و تصفیه می شود که حاوی 90.7 درصد گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی شامل 44.3 درصد از جزء اصلی است.اکیناکوزید. در این آزمایش، اثرات گلیکوزیدهای کل سیستانچ بر اختلال یادگیری و حافظه در موش‌های مبتلا به دمانس عروقی و ترومبوز و تجمع پلاکتی در موش‌های سالم مورد بررسی قرار گرفت تا شواهدی مبنی بر توسعه آن به‌عنوان دارویی جدید برای ارتقای هوش و پیشگیری ودرمان بیماری آلزایمر.

سیستانچ چه می کند - Aبیماری ضد آلزایمر

1. مواد

1.1 حیوانات:

موش های SD، نر، با وزن 470 ~ 570 گرم، توسط Shanghai Xipuma-Bikai Experimental Animal Co., Ltd.، با گواهی شماره HDQZ شماره 152 ارائه شدند.

1.2 داروها و معرف ها:

کل گلیکوزیدهایCistanche deserticola, Cپودر عصاره استانچهحاوی 90.7 درصد از کل گلیکوزیدهای فنیل اتانول، 44.3 درصد از کلاکیناکوزیدو پودر قهوه ای تیره، که توسط دفتر شیمی مرکز تحقیقات مدرن طب سنتی چینی دانشگاه پکن، با شماره دسته 980601 ارائه شده است. قرص پیراستام، تولید کارخانه داروسازی Yixing، شماره دسته 980521. آسپرین با پوشش روده ای قرص های تولید شده توسط کارخانه داروسازی نانجینگ شماره 2 به شماره دسته 000402. هر دارو با آب مقطر تهیه می شود. هپارین سدیم، محصول شرکت معرف شیمیایی شانگهای، شرکت دارویی چین (گروه)، شماره دسته F000128. سدیم پنتوباربیتال، وارد شده توسط شرکت دارویی چین (گروه) Shanghai Chemical Reagent Co., Ltd.، بسته بندی فرعی با شماره دسته ای 971104 است. آدنوزین دی سدیم دی استات (ADP)، محصول شرکت فناوری بیوشیمیایی دانگ فنگ، با مسئولیت محدود، موسسه شانگهای بیوشیمی، آکادمی علوم چین، با شماره دسته 9305122، قبل از استفاده در محلول ذخیره 1 میلی گرم در میلی لیتر تهیه و در یخچال نگهداری شد. هنگام استفاده، 3 بار با بافر فسفات رقیق شد.

سیستانچ 200 میلی گرم - Aبیماری ضد آلزایمر

1.3 ابزار:

MG{0}} پیچ و خم الکتریکی نوع Y، تولید شده توسط کارخانه آموزشی و تجربی Zhangjiagang. جمع کننده پلاکت چند منظوره SPA{2}}، تولید شده توسط کارخانه ابزار آزمایش شانگهای Keda.

2. روش

2.1 مدل دمانس عروقی ناشی از ایسکمی-خونرسانی مجدد مغزی کانونی در موش صحرایی

آماده سازی و تشخیص

2.1.1 گروه بندی و مدیریت:

موش‌ها بر اساس وزن بدنشان به‌طور تصادفی به 6 گروه تقسیم شدند که شامل یک گروه جراحی شم، گروه مدل، گروه کنترل مثبت (پیراستام 300mg/kg) و دوزهای بالا، متوسط ​​و پایین (200100، 50 میلی گرم بر کیلوگرم) از کل گلیکوزیدهای سیستانچ. به هر گروه 0.5 میلی لیتر / 100 گرم IG یک بار در روز داده شد. به گروه عملیات شم و گروه مدل، حجم مساوی آب مقطر به مدت 30 روز داده شد.

2.1.2 آماده سازی مدل[7]:

در روز شانزدهم تجویز، موش‌ها با کلرال هیدرات 36{2}}mg/kg IP بیهوش شدند. پوست گردن را از وسط ببرید، عضله گردن راست را جدا کنید، شریان کاروتید مشترک و شریان کاروتید خارجی را آزاد کنید و شاخه های شریان کاروتید خارجی را بسته و قطع کنید. شریان کاروتید داخلی را جدا کنید تا زمانی که شریان فرآیند pterygopalatine آشکار شود. شریان کاروتید مشترک را از این طرف با گیره شریان ببندید، شریان کاروتید خارجی را برش دهید، یک خط ماهیگیری کربن بلانت به قطر 0.28 میلی متر از شریان کاروتید خارجی موش را وارد شریان کاروتید داخلی کنید و وارد داخل جمجمه کنید تا یک مقاومت خفیف وجود دارد و سپس تمام جریان خون شریان مغزی میانی مسدود می شود. پس از 40 دقیقه ایسکمی، نخ ماهیگیری کشیده شد، شریان کاروتید خارجی بسته شد، شریان کاروتید مشترک باز شد، ضد عفونی و بخیه شد و برای جلوگیری از عفونت از ایم پنی سیلین استفاده شد. در گروه عمل شم فقط شریان کاروتید خارجی جدا و بسته شد و شریان کاروتید مشترک بریده نشد.

2.1.3 آزمون یادگیری و حافظه [8]:

در روز هفتم پس از عمل، از ماز الکتریکی نوع Y برای یادگیری و آموزش حافظه و تست استفاده شد. آزمایش در محیطی ساکت و تاریک انجام شد. موش ها در یک بازو (ناحیه شروع ثابت) قرار گرفتند، به مدت 2 دقیقه با نور سازگار شدند و سپس شوک الکتریکی دریافت کردند. یک سیگنال نور در بازوی چپ تنظیم می شود که یک منطقه امن است و بازوی راست یک منطقه خطرناک با جریان و بدون نور است. شدت شوک الکتریکی به توانایی موش ها برای دویدن پس از شوک الکتریکی بستگی دارد و ولتاژ آن 50-60V است. فرار موش ها پس از شوک به منطقه امن صحیح است و فرار به منطقه خطرناک اشتباه است. پس از هر تمرین، آنها در منطقه امن برای دهه 30 می مانند تا حافظه خود را تثبیت کنند. هنگام تمرین مجدد، 10 ثانیه زیر نور ناحیه شروع استراحت کنید، 10 بار تکرار کنید، زمان های صحیح و اشتباه را ثبت کنید و میزان پاسخ صحیح را محاسبه کنید. هر تمرین 1 ساعت پس از تجویز انجام شد و به مدت 4 روز به طور مداوم اندازه گیری شد. سپس بازوی چپ و راست را به طور متناوب به عنوان منطقه ایمنی برای 4 روز دیگر بگیرید، زمان های صحیح و اشتباه را ثبت کنید و سرعت واکنش صحیح را محاسبه کنید.

سرعت واکنش صحیح تعداد واکنش های صحیح/زمان تمرین

2.2 ترومبوز بای پس شریانی وریدی موش صحرایی و تشخیص[8]:

موش‌ها بر اساس وزن بدنشان به‌طور تصادفی به 5 گروه تقسیم شدند، یعنی گروه مدل، گروه کنترل مثبت (آسپرین 100 میلی‌گرم/کیلوگرم)، دوزهای بالا، متوسط ​​و پایین گلیکوزید کل سیستانچ. گروه های 200، 100، 50 میلی گرم بر کیلوگرم). به هر گروه 0.5 میلی لیتر در (100 گرم) داده شد و به گروه مدل همان حجم آب مقطر به مدت 7 روز داده شد. پس از آخرین تجویز، پنتوباربیتال سدیم 45 میلی‌گرم بر کیلوگرم بی‌حسی، تثبیت وضعیت به پشت، شریان کاروتید مشترک راست و جداسازی ورید ژوگولار خارجی چپ. یک نخ ابریشم جراحی شماره 4 به طول 7 سانتی متر را وزن کنید و آن را در وسط لوله پلی اتیلن قطعه 3- قرار دهید تا طول نخ ابریشم در تماس با خون 6 سانتی متر باشد و کل لوله پلی اتیلن را با 50U پر کنید. / میلی لیتر سالین فیزیولوژیک هپارین. پس از وارد کردن انتهای وریدی در ورید ژوگولار خارجی سمت چپ، 50U/kg هپارین سالین را برای ضد انعقاد از انتهای شریانی به دقت تزریق کنید و سپس انتهای شریانی را در شریان کاروتید مشترک راست قرار دهید. بای پس شریانی وریدی 1 ساعت پس از تجویز باز شد و جریان خون 15 دقیقه پس از باز شدن قطع شد. نخ ابریشم را به سرعت بیرون آوردند و روی کاغذ توزین گذاشتند. جرم مرطوب با ترازوی تحلیلی الکترونیکی وزن شد و نرخ مهار ترومبوز محاسبه شد.

نرخ مهار ترومبوز=(توده ترومبوز در گروه مدل - توده ترومبوز در گروه تجویز)/توده ترومبوز در گروه مدل × 100 درصد

2.3 تشخیص تجمع پلاکتی موش در شرایط آزمایشگاهی [8]:

موش ها بر اساس وزن بدن به طور تصادفی به 5 گروه تقسیم شدند که گروه کنترل نرمال، گروه کنترل مثبت (آسپرین 100 میلی گرم بر کیلوگرم) و کل گلیکوزیدهای گروه سیستانچ (دوز مشابه بالا بود). روش اجرا مانند مورد 2.2 است. 12 ساعت ناشتا قبل از آخرین تزریق، 1 ساعت پس از آخرین تزریق، خون از آئورت شکمی گرفته شد، با سیترات سدیم 3.8 درصد ضد انعقاد (1:9)، به آرامی مخلوط، سانتریفیوژ با سرعت 1000 دور در دقیقه به مدت 3 دقیقه و لایه بالایی پلاسمای غنی از پلاکت (PRP) مکیده شد. خون باقی مانده با سرعت 3000 r/min به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ شد و مایع رویی پلاسمای صفحه کوچک کم خون (PPP) بود. 200 را به لوله کدورت سنجی μ LPRP اضافه کنید، نقطه صفر را با PPP تنظیم کنید، به مدت 5 دقیقه پیش گرم کنید و سپس 50 μ تجمع پلاکتی ناشی از محلول LADP، شدت تجمع پلاکتی اندازه گیری شده و نرخ مهار تجمع پلاکتی محاسبه شده را اضافه کنید.

نرخ بازداری تجمع=(حداکثر نرخ تجمع گروه نرمال - حداکثر نرخ تجمع گروه تجویز)/حداکثر نرخ تجمع گروه نرمال × 100 درصد

2.4 پردازش آماری:

نتایج در x ± s بیان شد و داده ها با آزمون t-test مقایسه بین گروهی پردازش آماری شدند.

3. نتایج

3.1 تأثیر بر یادگیری و عملکرد حافظه موش‌های مدل دمانس عروقی ناشی از ایسکمی-خونرسانی مجدد مغزی کانونی:

مکمل سیستانچ در نزدیکی من - Aبیماری ضد آلزایمر

برای مشاهده محصولات تقویت کننده حافظه و پیشگیری از بیماری آلزایمر Cistanche اینجا را کلیک کنید

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

نتایج در جدول 1 نشان داده شده است. میانگین میزان پاسخ صحیح هر گروه روز به روز در 4 روز اول آزمون افزایش می یابد و میانگین میزان پاسخ صحیح هر گروه در روز چهارم به بیش از 90 درصد رسیده است. میانگین میزان پاسخ صحیح هر گروه دوز و گروه مثبت گلیکوزید کل سیستانچ به طور معنی‌داری بیشتر از گروه مدل در سه روز اول بود (P<0.05, 0.01), indicating that the administration of total glycosides of cistanche at 50, 100, and 200 mg/kg could significantly improve the correct response rate of maze training in rats with vascular dementia caused by focal cerebral ischemia-reperfusion, that is, total glycosides of cistanche had a significant protective effect on the learning and memory dysfunction caused by the model. There was no significant difference in the average correct response rate of each group on the 4th day, and the average correct response rate of each group decreased significantly after using the left and right arm alternately as the safety zone on the 5th day, but there was no significant difference between the groups. Then the average correct response rate of each group gradually increased, but there was no significant difference between the groups. نتایج نشان داد که گلیکوزیدهای کل"جین سینگ صحرا" cistanche deserticolaتنها می تواندعملکرد یادگیری و حافظه موش های مبتلا به آسیب مغزی را تا حدودی بازیابی می کند و تغییر سبک یادگیری تأثیری بر توانایی یادگیری و حافظه اکتسابی ندارد.

جدول 1 اثر گلیکوزیدهای سیستانچیس بر عملکرد یادگیری و حافظه موش های صحرایی زوال عقل عروقی ناشی از شیمی کانونی مغزی است.-خونرسانی مجدد

*P<0.05 ** P<0.01 در مقابلگروه مدل

3.2 تأثیر بر ترومبوز بای پس شریانی وریدی موش:

نتایج در جدول 2 نشان داده شده است. در مقایسه با گروه مدل، کل گلیکوزیدهای Cistanche deserticola 200 و 100 میلی گرم بر کیلوگرم می توانند به طور قابل توجهی از تشکیل ترومبوز بای پس شریانی وریدی در موش صحرایی جلوگیری کنند، اما اثرات آنها به طور قابل توجهی ضعیف تر از آسپرین 100 میلی گرم بر کیلوگرم بود. کیلوگرم. گلیکوزیدهای کل گیاه سیستانش دسرتیکولا 50 میلی گرم بر کیلوگرم تأثیری بر تشکیل ترومبوز بای پس شریانی وریدی در موش ها نداشت. این نشان می دهد که کل گلیکوزیدهای گیاه سیستانش دسرتیکولا می توانند از تشکیل ترومبوز بای پس شریانی وریدی در کل حیوانات جلوگیری کنند.

جدول 2 اثر گلیکوزیدهای سیستانچیس بر ترومبوز شانت شریانی وریدی موش صحرایی(n=10)

*P<0.05 ** P<0.01در مقابلگروه مدل

3.3 تأثیر بر تجمع پلاکتی موش صحرایی ناشی از ADP در شرایط آزمایشگاهی:

نتایج در جدول 3 نشان داده شده است. در مقایسه با گروه نرمال، کل گلیکوزیدهای Cistanche deserticola 200، 100 و 50 میلی گرم بر کیلوگرم می توانند به طور قابل توجهی از تجمع پلاکتی ناشی از ADP در شرایط آزمایشگاهی و نرخ مهار 200 میلی گرم بر کیلوگرم جلوگیری کنند. این گروه با 59.48 درصد بالاترین میزان را به خود اختصاص داد.

جدول 3 اثر گلیکوزیدهای سیستانچیس بر تجمع پلاکتیدرونکشتگاهیناشی از ADP

*P<0.05 ** P<0.01 در مقابلگروه عادی

4. بحث

بیماری آلزایمر را می توان به طور کلی به چهار نوع تقسیم کرد: بیماری آلزایمر (AD)، زوال عقل عروقی (VD)، زوال عقل مختلط (دو مورد قبلی با هم وجود دارند) و زوال عقل پیری ناشی از بیماری های سیستمیک.. بررسی اپیدمیولوژیک نشان می دهد که میزان بروز AD در کشورهای غربی بیشتر از VD است، اما در چین متفاوت است. طبق بررسی کلی 11 شهر، شیوع VD بیشتر از AD است [9]. VD نام عمومی سندرم زوال عقل ناشی از آسیب بافت مغز ناشی از عوامل عروقی مغز است. طب سنتی چینی معتقد است که این بیماری بیشتر به دلیل کمبود اسانس و زیاده روی در اسانس است. با افزایش سن، ذات کلیه بدن به تدریج تحلیل می رود، دریای مغز به تدریج تحلیل می رود، عملکرد احشاء به تدریج ضعیف می شود و نارسایی احشایی منجر به اختلال در توزیع آب و خون در بدن می شود. بدن، حرکت چی و خون و سپس تجمع محصولات پاتولوژیک مانند خلط و سکون خون در بدن، تداخل خلط و سکون خون منجر به آسیب جانبی مغز، عدم نفوذ چی می شود. و خون، طلوع و سقوط نامطلوب روزنه ها و لوازم، اختلال قدرت الهی. بنابراین ویژگی این بیماری این است که ناشی از کمبود و آمیخته به کمبود و زیاده است. کمبود کلیه علت اساسی بروز و توسعه بیماری آلزایمر است. رکود بلغم و سکون خون و از بین بردن وثیقه ها حلقه های پاتولوژیک اساسی در پاتوژنز این بیماری است.

Cistanche deserticola یک مقوی سنتی و مقوی قوای جنسی است که عملکردهای تقویت کننده کلیه، پر کردن اسانس و مرطوب کننده روده ها را دارد. Classic of Materia Medica آن را داروی ضروری برای تقویت جوهر خون و تغذیه کلیه می نامد. در علائم خستگی، فراموشی، کم شنوایی و شب ادراری ناشی از کمبود کلیه تأثیر خوبی دارد. Zhu Zhiming و دیگران ترکیب دارویی 46 ترکیب را برای درمان بیماری آلزایمر تجزیه و تحلیل کردند و دریافتند که Cistanche deserticola یکی از رایج ترین داروهای مورد استفاده است. [1].

Cistanche deserticola - ضد بیماری آلزایمر

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

در این آزمایش، در روز شانزدهم تجویز ig، موش‌ها با مدل VD ناشی از ایسکمی-خونرسانی مجدد کانونی مغزی آماده شدند و در روز هفتم تجویز مداوم، آموزش و آزمایش یادگیری و حافظه انجام شدند. در سه روز اول آزمایش، میانگین میزان پاسخ صحیح گروه مدل به طور قابل‌توجهی کمتر از گروهی بود که تحت عمل جراحی قرار گرفتند، که نشان می‌دهد آسیب ایسکمی-پرفیوژن مجدد مغزی باعث اختلال یادگیری و حافظه در موش‌های مدل می‌شود. میانگین میزان پاسخ صحیح موش‌ها در هر گروه دوز گلیکوزید سیستانش به‌طور معنی‌داری بیشتر از گروه مدل بود که معادل سطح موش‌های گروه عمل شم بود، که نشان می‌دهد سیستانچ دسرتیکولا اثر پیشگیرانه و درمانی بر یادگیری دارد. و اختلال حافظه در موشهای صحرایی VD، و گلیکوزیدهای سیستانش جزء موثر ضد زوال عقل آن بودند. علت و پاتوژنز VD کاملاً پیچیده است و در حال حاضر چندان روشن نیست. مطالعات اخیر نشان داده است که عوامل خطر VD شامل عوامل مرتبط با سکته مغزی و غیرمرتبط با سکته است که به طور خلاصه به عنوان فشار خون، بیماری قلبی، چربی خون، دیابت، نسبت حجم خون، سطح تحصیلات، سن، جنسیت و غیره خلاصه می شود. پاتوژنز مربوط به انفارکتات متعدد، انفارکتات منفرد در قسمت های مهم، ایسکمی ماده سفید مغز و غیره است [10،11]. در این آزمایش، توده مرطوب ترومبوز بای پس شریانی وریدی در موش‌هایی که گلیکوزید کل سیستانش دسرتیکولا به مدت 7 روز دریافت کردند، به طور قابل‌توجهی کمتر از گروه مدل بود، یعنی کل گلیکوزیدهای سیستانش دسرتیکولا می‌توانند به طور قابل توجهی ترومبوز را در کل حیوان مهار کنند. بدن؛همچنین نتایج نشان داد که گلیکوزیدهای کلCistanche deserticolaمی تواند به طور قابل توجهی از تجمع پلاکتی ناشی از ADP در شرایط آزمایشگاهی جلوگیری کند. ترکیب دو نتیجه تجربی،می توان دریافت که مکانیسم پیشگیری و درمان VD توسط گلیکوزیدهای کل سیستانچ ممکن است با مهار تجمع پلاکتی مرتبط باشد.

منابع:

[1] Zhu ZM، Zh ou YS، Ouyang J H. ysis مقعدی 46 چین سنتی و ترکیب پزشکی و یا درمان انیل ادمانتی [J]. Hunan J Tradit Chin Med, 2001, 17( 1): 60-61.

[2] Yu F. پیشرفت های تحقیقاتی cistanch e در کاربردهای بالینی در [J]. Inner Mon gholia Med J , 2003, 35 ( 6): 535-536.

[3] Liang MH، Sun PY، Cao Y. اثر ycosides gl از cist anche بر پراکسیداسیون لیپیدی در خون‌رسانی مجدد اموراژیک در خرگوش‌های هیئت منصفه [J]. J Ch in Microcir c , 2000, 4( 4): 230-231.

[4] Sh ang XY، Wang XW، Wang XF، و همکاران. اثر محافظتی ycosid gl از cist anche بر روی عملکرد سیستم ایمنی 60 موش پرتودهی شده با اشعه Co [J]. Ch in Trad it Herb Dru gs , 2001, 32( 2): 139-142.

[5] Wu LY، Wang XW، Zao R M. اثر محافظتی یوکوزیدهای gl سیستانچ e بر کم اکسیژنی مغزی در موش [J]. J Xinjiang Med Uni v , 2003, 26 ( 6): 561-562.

[6] Mut eli efu G، Liu MJ، Lu J F. اثر ترکیبات آنوزید سیست بر استرس اکسیداتیو و ایمنی [J]. J Ch in Pharm Sci, 2001, 10( 3): 157-160.

[7] Longa EZ، Weinstein PR، Carls on S، و همکاران. انسداد برگشت پذیر شریان مغزی میانی بدون جمجمه در موش صحرایی [J]. S troke, 1989, 20( 1): 84-91.

[8] Xu SY، Bi an RL، Chen X. روش‌شناسی در آزمایش آزمایشی فارم [M]. ویرایش 3 پکن: انتشارات پزشکی مردمی، 2002.

[9] Wu F Q. Cerebrovascu lar demen tia [J]. Adv Card iovasc Dis , 1993, 14( 2): 90-92.

[10] Skoon I. وضعیت خطر فعل یا بیماری عروقی [J]. Neu roep idem iolo gy, 1998, 17( 1): 2-6.

[11] Loeb C. بدتر شدن وضعیت مربوط به انفارکتوس لکونار [J]. Hea rt Dis Stroke، 1994، 23: 75-81.