غشای پوسته تخم مرغ هیپراوریسمی را با افزایش دفع اورات در موش های صحرایی تزریق شده با پتاسیم اکسونات بهبود می بخشد.

edmund.chen@wecistanche.com

خلاصه:هیپراوریسمی علت اصلی آرتریت نقرسی و سایر اختلالات متابولیک است. غشای پوسته تخم مرغ (EM) یک مکمل موثر و ایمن برای درمان درد و سفتی مرتبط با آرتروز است. با این حال، اثر EM بر هیپراوریسمی نامشخص است. این مطالعه به تعیین اثرات EM بر هیپراوریسمی تزریقی اکسونات پتاسیم می پردازد. غلظت اسید اوریک، کراتینین، نیتروژن اوره خون در سرم و فعالیت گزانتین اکسیداز در کبد اندازه گیری می شود. سطح پروتئین ازکلیه ناقل اورات 1 (URAT1)، ناقل آنیون آلی 1 (OAT1)، ناقل گلوکز 9 (GLUT9) و ناقل کاست اتصال دهنده ATP G2 (ABCG2) درکلیهبا تعیین می شوندکلیههیستوپاتولوژی نتایج نشان می‌دهد که EM باعث کاهش سطح اسید اوریک سرم و افزایش سطح اسید اوریک ادرار در موش‌های هیپراوریسمیک می‌شود. علاوه بر این، EM کاهش می یابدکلیهبیان پروتئین URAT1، OAT1 و ABCG2 را افزایش می دهد، اما بیان GLUT9 را تغییر نمی دهد. علاوه بر این، EM فعالیت گزانتین اکسیداز را در کبد یا سرم تغییر نمی دهد. EM همچنین جذب اسید اوریک به تخمک های بیان کننده hURAT1 را کاهش می دهد. در نهایت، EM به طور قابل توجهی کاهش می یابدکلیهالتهاب و سطوح سرمی اینترلوکین{0}} این یافته ها نشان می دهد که EM با ترویج اثرات ضد هیپراوریسمیک را نشان می دهد کلیهدفع اورات و تنظیم کنندهکلیهانتقال دهنده های اورات بنابراین، EM ممکن است در پیشگیری و درمان نقرس و هیپراوریسمی مفید باشد.

کلید واژه ها:کلیه؛ کلیه نقرس؛ انتقال دهنده اورات 1; اسید اوریک؛ اکسونات پتاسیم

سیستانچ دیالیز کلیه/کلیه را بهبود می بخشد

مقدمه

غشای پوسته تخم مرغ (EM) لایه ای است که به داخل پوسته تخم مرغ چسبیده است و یکی از اجزای تخم مرغ است که غذای اصلی برای سلامت انسان است. اجازه نفوذ اکسیژن را می دهد و از تهاجم میکروارگانیسم ها جلوگیری می کند. EM از مواد آلی (70 درصد)، مواد غیر آلی (10 درصد) و آب (20 درصد) تشکیل شده است که 80 درصد مواد آلی از پروتئین تشکیل شده است. علاوه بر این، از 2.3 درصد چربی و 3.4 درصد کربوهیدرات تشکیل شده است [1،2]. در میان اجزای تشکیل دهنده تخم مرغ، زرده و سفیده تخم مرغ به عنوان مواد اولیه غذا و پوسته تخم مرغ ماده اولیه مکمل های کلسیم برای تشکیل و حفظ دندان ها و استخوان ها می باشد [3]. با این حال، EM به عنوان زباله طبقه بندی می شود و اغلب مورد استفاده قرار نمی گیرد. اثرات ضد آرتریت EM اخیراً در یک مدل حیوانی ناشی از لیپوپلی ساکارید و در مطالعات بالینی انسانی گزارش شده است [4،5]. EM همچنین التهاب را در موش‌های مبتلا به آرتریت روماتوئید ناشی از کلاژن بهبود بخشیده است [6]. علاوه بر این، EM فعالیت ضد آرتریت را در موش‌های صحرایی استئوآرتریت ناشی از یون سدیم یدواستات نشان داده است [7]. مونوسدیم یودواستات محرک آرتریت نقرس است و تجمع کریستال های اورات مونوسدیم در مفاصل می تواند منجر به التهاب شود و منجر به آرتریت نقرسی شود. هایپراوریسمی می تواند باعث تشکیل کریستال های اسید اوریک (یا اورات) شود و رسوب این کریستال ها در مفاصل باعث نقرس می شود، نوعی آرتریت که می تواند بسیار دردناک باشد. EM منبعی از کلاژن، کندرویتین سولفات، گلوکزامین، اسید هیالورونیک و کلسیم است که همگی برای درمان استئوآرتریت به طور گسترده مورد بررسی قرار گرفته‌اند [8]. نتایج این مطالعات سودمندی بالقوه EM را برای پیشگیری و درمان نقرس و هیپراوریسمی نشان می دهد.

هایپراوریسمی یک عامل خطر اصلی برای پیشرفت مقاومت به انسولین، دیابت، چاقی، فشار خون بالا، تصلب شرایین و بیماری های قلبی عروقی و همچنین آرتریت نقرسی است [9-11]. کنترل مناسب هیپراوریسمی به پیشگیری و درمان این بیماری ها کمک می کند. هیپراوریسمی با افزایش تولید اسید اوریک یا اختلال در دفع اسید اوریک رخ می دهد [12]. با کاهش تولید و افزایش دفع اسید اوریک، درمان کاهنده اورات می تواند نقش مهمی در کنترل هیپراوریسمی و اختلالات مرتبط با هیپراوریسمی ایفا کند [13]. داروهایی که معمولاً برای کاهش اورات استفاده می شوند مانند آلوپورینول و فبوکسوستات، یک مهارکننده سنتز اسید اوریک، به طور گسترده برای مراقبت از نقرس استفاده می شوند. با این حال، این مهارکننده‌های گزانتین اکسیداز (XO) می‌توانند واکنش‌های جانبی شدیدی مانند سندرم حساسیت به آلوپورینول داشته باشند [14-16]. بنزبرومارون یک داروی اوریکوزوریک است که در 30 سال گذشته برای کنترل نقرس استفاده شده است، اما به دلیل عوارض شدید سمیت کبدی، از بازار اروپا خارج شد [17]. بنابراین، نیاز به توسعه داروهای مشتق شده از محصولات طبیعی بدون سمیت وجود دارد که برای پیشگیری و درمان طولانی مدت اختلالات مرتبط با هیپراوریسمی مؤثرتر باشند. بنابراین، این مطالعه بررسی می کند که آیا EM در برابر هیپراوریسمی محافظت می کند یا خیر. این مطالعه فعالیت ضد هیپراوریسمیک EM را در موش‌های مبتلا به هیپراوریسمی ناشی از اگزونات پتاسیم (PO) ارزیابی می‌کند. PO یک مهارکننده اوریکاز رقابتی انتخابی است که به طور گسترده برای مهار اثر اوریکاز کبدی که منجر به هیپراوریسمی می شود استفاده می شود [18،19]. بنابراین، موش های تحت درمان با PO یک مدل حیوانی عملی نه تنها برای بررسی آسیب شناسی هیپراوریسمی بلکه برای ارزیابی داروهای بالقوه [20] هستند. برای بررسی فعالیت و مکانیسم های زمینه ای EM در هیپراوریسمی، مکانیسم های دوگانه EM از طریق مهار تولید اسید اوریک و افزایش دفع اسید اوریک در حیوانات هیپراوریسمیک مورد بررسی قرار می گیرد.

CISTANCHE نارسایی کلیه/کلیه را بهبود می بخشد

2. مواد و روشها

2.1. حیواناتموش های نر هفت هفته ای Sprague Dawley از Orient Bio (Seongnam، کره) خریداری شدند. آنها در اتاق حیوانات دارای تهویه مطبوع در دمای 1 ± 22 درجه سانتیگراد با رطوبت 10 ± 50 درصد سازگار شدند. موش ها به طور آزاد به رژیم غذایی استاندارد و آب دسترسی پیدا کردند. مطالعات حیوانی توسط کمیته مراقبت و استفاده از حیوانات موسسه موسسه پزشکی شرقی کره تایید شد و آزمایش‌ها مطابق با دستورالعمل‌های کمیته (کد تایید. 19-024) انجام شد.

2.2. القای هیپراوریسمی و تجویز EMEM مورد استفاده در این مطالعه به عنوان پودر خشک شده توسط JU-HWAN BIO CELL Co., Ltd. (Cheonan، کره) ارائه شد. برای القای هیپراوریسمی، 150 میلی‌گرم بر کیلوگرم PO (یک مهارکننده اوریکاز) به صورت داخل صفاقی به حیوانات تزریق شد. از داروهای کنترل مثبت زیر استفاده شد: آلوپورینول (سیگما، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا) و بنزبرومارون (TCI، توکیو، ژاپن). قبل از تزریق، PO در 0.5 درصد کربوکسی متیل سلولز (CMC، سیگما، ایالات متحده آمریکا) و 0}.1 مولار استات سدیم (سیگما، ایالات متحده آمریکا) حل شد. برای بررسی فعالیت های ضد هیپراوریسمیک EM (آزمایش 1، مطالعه حاد اولیه)، موش ها به پنج گروه (5 حیوان در هر گروه) تقسیم شدند: یک گروه نرمال. یک گروه هیپراوریسمی تزریق شده با PO (PO)؛ یک گروه PO به اضافه 10 میلی گرم بر کیلوگرم آلوپورینول. یک گروه PO به علاوه 100 میلی گرم بر کیلوگرم EM-administrated; و یک گروه PO به علاوه 200 میلی گرم بر کیلوگرم EM-administrated. در آزمایش 1، نمونه ها در CMC حل شده و به صورت خوراکی (یک بار) به موش ها 1 ساعت پس از تزریق PO به مدت 1 روز تجویز شد. برای بررسی فعالیت‌های وابسته به دوز و مکانیسم‌های مولکولی EM (آزمایش 2)، موش‌ها به 7 گروه (هر کدام=5) تقسیم شدند: یک گروه نرمال (N). یک گروه هیپراوریسمی تزریق شده با PO; یک گروه PO به اضافه 10 میلی گرم بر کیلوگرم آلوپورینول. یک گروه PO به اضافه 50 میلی گرم بر کیلوگرم بنزبرومارون. یک گروه PO به علاوه 50 میلی گرم بر کیلوگرم EM-administrated. یک گروه PO به علاوه 100 میلی گرم بر کیلوگرم EM-administrated; و یک گروه PO به علاوه 200 میلی گرم بر کیلوگرم EM-administrated. نمونه ها در محلول 0.5 درصد CMC حل شده و به صورت خوراکی (هر روز) به موش ها 1 ساعت پس از تزریق PO به مدت 5 روز داده شد.

2.3. جمع آوری نمونه های خون، ادرار و بافتخون 2 ساعت پس از تجویز دارو، و ادرار نیز پس از 2 ساعت، با استفاده از قفس متابولیک پس از درمان نمونه جمع آوری شد. پس از جمع آوری خون و ادرار، بافت(کلیهو کبد) نمونه ها با دقت تقسیم شدند و برای سنجش بیشتر در دمای 80 درجه سانتیگراد نگهداری شدند. سرم با سانتریفیوژ (2000 × گرم، 15 دقیقه، 4 ◦C) جدا شد. سپس نمونه‌های سرم و ادرار برای آنالیز بیوشیمیایی مورد استفاده قرار گرفتند.

2.4. تجزیه و تحلیل غلظت اسید اوریک در سرم و ادرارغلظت اسید اوریک از سرم و ادرار با استفاده از کیت تجاری سنجش اسید اوریک (Biovision، Milpitas، CA، USA) طبق دستورالعمل های ارائه شده توسط سازنده تعیین شد.

2.5. اندازه گیری سطوح سیتوکین های التهابی در سرمغلظت سرمی اینترلوکین (IL){0}} با استفاده از کیت سنجش ایمونوسوربنت (ELISA) متصل به آنزیم IL موش اندازه گیری شد (R&D Systems، Minneapolis، MN، USA).

2.6. فعالیت In vitro گزانتین اکسیداز از کبد و سرمفعالیت XO در بافت کبد و سرم با استفاده از کیت سنجش فعالیت XO طبق پروتکل های سازنده (سیگما، ایالات متحده آمریکا) تعیین شد. فعالیت XO توسط یک میکروپلیت خوان Spectra Max M3 (Molecular Devices, San Jose, CA, USA) با استفاده از پروتکل های منتشر شده قبلی اندازه گیری شد [21]. واکنش آنزیمی با افزودن 0.5 میلی مولار گزانتین به عنوان سوبسترا آغاز شد و غلظت اسید اوریک هر دقیقه به مدت 5 دقیقه اندازه‌گیری شد. آلوپورینول مهارکننده XO به عنوان مرجع استفاده شد. فعالیت XO کبدی با سطح پروتئین کل نرمال شد.

سیستانچ عفونت کلیه/کلیه را بهبود می بخشد

2.7. معاینه هیستوپاتولوژیک کلیهبافت کلیه برداشته شد، بلافاصله به مدت 1 روز در فرمالین تثبیت شد و سپس در پارافین جاسازی شد. هر نمونه به ضخامت 6 میکرومتر برش داده شد و برش ها با هماتوکسیلین و معرف ائوزین رنگ آمیزی شدند. سپس مقاطع رنگ آمیزی شده در زیر میکروسکوپ مشاهده شدند.

2.8. تجزیه و تحلیل وسترن بلاتکلیهبافت ها در محلول استخراج پیش آماده سازی (اینترون، سئول، کره) همگن شدند و سپس به مدت 15 دقیقه (13،{2}}× گرم، 4◦C) سانتریفیوژ شدند. مایع رویی برای تجزیه و تحلیل وسترن بلات پروتئین های مورد نظر استفاده شد. سطح پروتئین کل توسط یک سنجش پروتئین DC با آلبومین سرم گاوی (Bio-Rad، Hercules، CA، USA) تعیین شد. آنتی بادی های اولیه شامل -اکتین (سانتا کروز، دالاس، TX، ایالات متحده)، ناقل گلوکز 9 (GLUT9، MyBioSource، San Diego، CA، USA)، ناقل اورات 1 (URAT1؛ MyBioSource، San Diego، CA، USA) و انتقال دهنده آنیون آلی 1 (OAT1؛ MyBioSource، San Diego، CA، USA). نوارهای غشاء توسط معرف تشخیص ECL با استفاده از ImageQuant LAS 4000 (GE Healthcare Life Sciences، سئول، کره) مشاهده شدند. چگالی تصاویر به دست آمده با استفاده از نرم افزار Image J1.49 NIH (Bethesda, MD, USA) تعیین شد. سطح پروتئین هدف تجسم شده به -اکتین نرمال شد. عبارات ناقل کاست اتصال دهنده G2 (ABCG2) با استفاده از کیت الایزای ABCG2 موش (MyBioSource) بدست آمد و با سطح پروتئین کل نرمال شد.

2.9. اندازه گیری جذب اورات با استفاده از UART{2}}بیان تخمکتخمک های بیان کننده hURAT{{0}}از Xenopus همانطور که قبلاً توضیح داده شد ساخته شدند [20]. مهارکننده URAT1 بنزبرومارون (TCI، توکیو، ژاپن) به عنوان یک مرجع در نظر گرفته شد. تخمک ها در یک بافر واکنش با سالین بافر فسفات Dulbecco (DPBS؛ Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) و محلول ND (pH 7.4؛ 5 میلی مولار 4-(2-) انکوبه شدند. هیدروکسی اتیل)) بافر اتان سولفونیک اسید پیپرازین، 2 میلی‌مولار KCl، 1 میلی‌مولار کلرید منیزیم، 1.8 میلی‌مولار کلرید کلسیم، و 96 میلی‌مولار کلرید سدیم، با 1 میلی‌مولار پیرازین کربوکسیلیک اسید (Sigma-Ald) , MO, USA) در 37 ◦C. تخمک ها بیشتر در محلولی حاوی غلظت های مختلف EM (1، 10 و 100 میکروگرم بر میلی لیتر) با 50 میکرومولار [14C] اسید اوریک (Moravek Biochemicals، Brea، CA، USA) در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه شدند. پس از 60 دقیقه، جذب اسید اوریک با مکمل DPBS سرد متوقف شد. پس از توقف، تخمک ها در محلول 1/0 نیتروژن هیدروکسید سدیم و 10 درصد سدیم دودسیل سولفات حل شدند و رادیواکتیویته با سوسوزن مایع شمارش شد.

2.10. آمارتمام داده ها به صورت میانگین ± خطای استاندارد میانگین بیان شد. تفاوت‌های معنی‌دار با استفاده از تحلیل واریانس یک‌طرفه و سپس آزمون دانت برای تحلیل تعقیبی با استفاده از نرم‌افزار GraphPad Prism 7 مورد ارزیابی آماری قرار گرفتند.{4}}5. زمانی که p-value کمتر از 0.05 بود، تفاوت از نظر آماری معنی دار در نظر گرفته شد.

3. نتایج

3.1. تأثیر غشای پوسته تخم مرغ بر ترشح اسید اوریک سرمیک تزریق PO به مدت 1 روز به طور قابل توجهی سطح اسید اوریک سرم را در موش های هیپراوریسمیک تزریق شده با PO در مقایسه با موش های سالم افزایش داد (شکل 1). در همین حال، EM در mg/kg 100 و 200 و آلوپورینول (کنترل مثبت) به طور موثری اسید اوریک سرم را در موش‌های هیپراوریسمیک تزریق شده با PO کاهش داد. بنابراین، مطالعات بعدی برای شناسایی فعالیت‌ها و مکانیسم‌های وابسته به دوز EM انجام شد.

3.2. تاثیر غشای پوسته تخم مرغ بر سطح اسید اوریک سرم و ادرارتزریق APO به مدت 5 روز به طور قابل توجهی سطح اسید اوریک سرم را در گروه PO در مقایسه با گروه نرمال افزایش داد (شکل 2a). درمان EM با دوز 100 و 200 میلی گرم بر کیلوگرم و همچنین آلوپورینول و بنزبرومارون به طور قابل توجهی سطح اسید اوریک سرم را در گروه PO کاهش داد. علاوه بر این، برای ارزیابیعملکرد کلیهغلظت کراتینین و نیتروژن اوره خون (BUN) اندازه گیری شد. غلظت کراتینین سرم در بین گروه ها متفاوت نبود (شکل 2b). غلظت سرمی BUN در گروه PO افزایش یافت، اما این سطوح در گروه EM 200 mg/kg و گروه کنترل مثبت (آلوپورینول و بنزبرومارون) کاهش یافت (شکل 2c).

برای ارزیابی اثر EM بر دفع اسید اوریک، سطح اسید اوریک ادرار مورد بررسی قرار گرفت. گروه PO به طور قابل توجهی سطوح اسید اوریک ادرار را کاهش داد که با تجویز EM (100 و 200 میلی گرم بر کیلوگرم) و بنزبرومارون (شکل 2d) افزایش یافت. این داده‌ها نشان داد که EM ممکن است استخراج اورات کلیه را برای کاهش سطح اسید اوریک سرم در موش‌های هیپراوریسمیک افزایش دهد.

3.3. اثرات غشای پوسته تخم مرغ بر التهاب کلیهاتساع خفیف لوله، دژنراسیون واکوئلی سلول اپیتلیال لوله، تورم، و نفوذ سلول های التهابی در مشاهده شد.کلیهموش های هیپراوریسمیک تزریق شده با PO (شکل 3a). با این حال، EM به طور موثر این موارد را بهبود بخشیدکلیهتغییرات هیستوپاتولوژیک در موشهای صحرایی هیپراوریسمیک علاوه بر این، موش‌های هیپراوریسمیک سطوح سرمی سیتوکین پیش التهابی IL{0}} را نشان دادند (شکل 3b). EM در تمام غلظت‌ها به طور قابل‌توجهی سطوح سرمی را در موش‌های هیپراوریسمیک کاهش داد. تجویز بنزبرومارون سطوح سرمی IL را بیشتر از موش‌های هیپراوریسمیک تزریق شده با PO افزایش داد، البته نه به‌طور معنی‌داری و احتمالاً از عوارض این دارو است. این نتایج نشان می دهد که EM به طور موثر بهبود یافته استکلیهالتهاب و عملکرد در موش‌های هیپراوریسمیک

3.34. اثرات غشای پوسته تخم مرغ بر فعالیت XO

XO در کبد باعث تولید اسید اوریک می شود. بنابراین، برای تعریف مکانیسم اثر مهاری EM بر هیپراوریسمی، فعالیت XO در سرم و کبد مورد ارزیابی قرار گرفت، فعالیت XO کبدی به طور قابل توجهی در گروه PO افزایش یافت (شکل 4a,b). مهارکننده XO، آلوپورینول، به طور قابل توجهی فعالیت XO را در سرم و کبد کاهش داد. با این حال، EM در تمام دوزها فعالیت XO را تغییر نداد، این داده ها نشان می دهد که EM فعالیت XO را مهار نمی کند و تولید اسید اوریک را کاهش نمی دهد.

3.5. اثرات غشای پوسته تخم مرغ بر دفع اوراتبرای ارزیابی اثر EM بر دفع اورات، بیان چندینناقل کلیهمورد بررسی قرار گرفت. EM در 100 و 200 میکروگرم در میلی لیتر و بنزبرومارون به طور قابل توجهی سطح پروتئین URAT1 را در بدن کاهش داد.کلیه(شکل 5 الف، ب). با این حال، EM سطوح پروتئین GLUT9 را تغییر نداد (شکل 5c). EM در 200 میکروگرم بر میلی لیتر سطوح پروتئین OAT1 را افزایش داد و تجویز EM در تمام غلظت ها باعث افزایش سطح ABCG2 شد (شکل 5d,e).

3.6. اثر EM بر جذب In vitro URAT1 در تخمکعلاوه بر این، اثر EM بر سیستم جذب اورات در شرایط آزمایشگاهی تایید شد. تیمار EM در 1، 10 و 100 میکروگرم بر میلی‌لیتر، مهار جذب اسید اوریک در شرایط آزمایشگاهی را نشان داد که تخمک‌های بیش از حد بیان می‌کنند (شکل 6). این داده ها نشان می دهد که EM بیان ناقل اورات را برای افزایش دفع اورات تنظیم می کند.

بحث

در انسان، کلیه ها نقش مهمی در هموستاز اسید اوریک ایفا می کنند، زیرا بیش از 70 درصد دفع اورات است.کلیه،در حالی که 30 درصد باقی مانده از طریق مدفوع از روده دفع می شود [22،23]. با این حال، دفع اورات ممکن است مختل شودکلیهاختلالاتی که منجر به هیپراوریسمی می شود. دفع اسید اوریک به پروتئین های ناقل در لوله های پروگزیمال بستگی داردکلیهبرای کنترل ترشح اسید اوریک در خون و فیلتر کردن [24].کلیویناقل اورات URAT1، واقع در غشای مجرا، و GLUT9/ در غشای آپیکالکلیهلوله های پروگزیمال، مسیر اولیه بازجذب اورات را تشکیل می دهندکلیه[25،26]. OAT1، واقع در غشای قاعده‌ای جانبی توبول پروگزیمال، و ABCG2، واقع در غشای آپیکال، عمدتاً مسئول ترشح اورات از خون به سلول‌های اپیتلیال هستند [27]. تنظیم این ناقل اورات یک هدف اصلی درمانی برای هیپراوریسمی در نظر گرفته می شود. در این مطالعه، EM به طور موثر کاهش یافتکلیهسطوح URAT1 در موش‌های هیپراورمیک تزریق شده با PO، اگرچه بیان پروتئین GLUT9 تغییری نکرد. علاوه بر این، بیان پروتئین OAT1 و ABCG2 در تنظیم مثبت شدکلیهپس از درمان EM، در نتیجه نمایش اثر اوریکوزوریک. این مطالعه فعالیت مهاری EM را بر جذب اورات توسط URAT1 در تخمک‌هایی که بیش از حد بیان می‌کنند URAT تأیید کرد و این اثر برای معکوس کردن جذب اورات تحریک‌شده با URATl مؤثر بود. در مجموع 90 درصد بازجذب اورات از طریق به دست می آیدکلیهURAT1 [28]. کنترل اینهاکلیهانتقال‌دهنده‌های اورات توسط درمان EM ممکن است به ارتقاء کمک کنندکلیهدفع اسید اوریک در موش های صحرایی هیپراوریسمی کراتینین و نیتروژن اوره بیومارکرهای غیر طبیعی هستندکلیهتابع، نشان دهنده تواناییکلیهبرای دفع متابولیت های پروتئینی [24]. نتایج نشان داد که PO باعث افزایش غلظت اسید اوریک و BUN سرم می شودکلیهاختلال عملکرد با این حال، 200 میلی گرم بر کیلوگرم EM این افزایش را با بهبود معکوس کردعملکرد کلیه. آنزیم XO اکسیداسیون هیپوگزانتین یا گزانتین را به اسید اوریک کاتالیز می کند [28]. مهارکننده‌های XO، مانند آلوپورینول، غلظت اسید اوریک سرم و تولید بیش از حد گونه‌های فعال اکسیژن را که عمدتاً با فعالیت بیش از حد XO مرتبط است، کاهش می‌دهند، که اغلب باعث آسیب سلول‌های التهابی به اندوتلیوم عروقی می‌شود و به ایجاد سندرم متابولیک و اختلالات قلبی عروقی کمک می‌کند [29]. ]. بنابراین، مهار بیش فعال سازی XO ممکن است یک هدف درمانی برای کنترل اثرات مضر اسید اوریک اضافی باشد. با این حال، مطالعه ما نشان داد که EM فعالیت XO سرم و کبد را در موش‌های مبتلا به هیپراوریسمی ناشی از PO معکوس نکرد.

هیپراوریسمی ممکن است یک عنصر خطر برایکلیهاختلال عملکرد [23]. در مطالعه حاضر،کلیهاختلال عملکرد با افزایش BUN سرم و سطوح سیتوکین التهابی IL{0}}p وکلیهالتهاب در موشهای صحرایی هیپراوریسمیک اینهاکلیهاختلالات با درمان EM کاهش یافت، که نشان دهنده بهبود التهاب کلیه است. با این حال، داروی بنزبرومارون سطوح IL{0}}p سرم را در موش‌های هیپراوریسمیک افزایش داد و آسیب کلیوی به عنوان یک اثر نامطلوب اولیه داروهای اوریکوزوریک، از جمله بنزبرومارون و پروبنسید گزارش شد [30]. EM حاوی گلوکزامین طبیعی، کندرویتین سولفات، اسید هیالورونیک، کلاژن، پپتیدها و سایر اسیدهای آمینه حاوی گوگرد است [8]. مطالعات قبلی گزارش کردند که گلوکزامین و کندرویتین اثرات ضد التهابی و ضد آرتروز را نشان داده اند [31،32]. اسید هیالورونیک اثرات ضد التهابی و ضد هیپراوریسمیک را در مدل های حیوانی ناشی از کریستال اورات مونوسدیم برای آرتریت حاد نقرسی و هیپراوریسمی نشان داد [33]. نتایج این مطالعات نشان دهنده سودمندی بالقوه این اجزا برای پیشگیری و درمان هیپراوریسمی است. با این حال، مطالعه ما نشان نداد که کدام اجزای EM باعث افزایش دفع اسید اوریک می شود. اثرات اجزای زیست فعال مشتق شده از EM باید بیشتر مورد بررسی قرار گیرد. در این مطالعه، ما نشان دادیم که هیپراوریسمی ناشی از PO والتهاب کلیهبا درمان EM مهار شد. بنابراین، EM می تواند یک عامل ضد هیپراوریسمیک امیدوارکننده باشد. فرض کنید دوز موثر EM در موش 100 میلی گرم بر کیلوگرم (حداکثر دوز؛ 200 میلی گرم بر کیلوگرم) باشد. بر اساس سطح بدن، دوز معادل EM برای انسان 16.2 میلی گرم بر کیلوگرم (972 میلی گرم در روز در بزرگسالان) است. از این مطالعات in vivo، دوز توصیه شده روزانه EM در شرایط خفیف 486 میلی گرم یا 972 میلی گرم در روز است و حداکثر دوز روزانه 1944 میلی گرم برای شرایط شدید است. با این حال، دوز ممکن است بسته به مدت درمان و سن متفاوت باشد. بر اساس این نتایج، یک مطالعه بالینی انسانی EM در آینده نزدیک انجام خواهد شد.