بررسی پتانسیل Nannochloropsis Sp. عصاره برای کاربردهای آرایشی و بهداشتی

کلید واژه ها:نانوکلروپسیس; آنتی اکسیدان; ضد ملانوژن؛ مرطوب کننده پوست؛ محافظت در برابر اشعه فرا بنفش؛ضد پیری

برای دریافت اطلاعات بیشتر درباره Cistanche For Anti-aging اینجا را کلیک کنید

1. معرفی

پوست بزرگترین اندام است که تمام بدن انسان را می پوشاند و یک جسم فیزیکی را فراهم می کندسدی برای محافظت از بافت های داخلی در برابر محرک های خارجی مانند اشعه ماوراء بنفش (UV)تابش - تشعشع، مواد شیمیایی، پاتوژن ها و استرس های فیزیکی [1,2]. علاوه بر این، از نظر فیزیولوژیکی نیز داردنقش مهمی در کمک به حفظ موجودات، از جمله حفظآب، عملکردهای ایمنی، ادراک حسی و تنظیم دمای بدن [3,4]. پوست از سه لایه تشکیل شده است: اپیدرم، درم و هیپودرم. دراپیدرم، کراتینوسیت ها، لانگرهانس، ملانوسیت ها و غدد چربی ضروری هستندنقش در ترمیم آسیب های پوستی، تعیین رنگ پوست، محافظت از پوست در برابر اشعه ماوراء بنفشتابش، ایجاد ایمنی، و روان کننده پوست. در درم، واقع در زیراپیدرم، سلول های فیبروبلاست غالب، کلاژن و الیاف الاستیک تولید می کنند. کلاژناستحکام کششی و چقرمگی را برای مقاومت در برابر تغییر شکل فراهم می کند، در حالی که الاستین آن را فراهم می کندخاصیت ارتجاعی و انعطاف پذیری، به بافت ها اجازه می دهد تا به شکل اولیه خود پس از برداشتن برگردندنیروی تغییر شکل کلاژن و الاستین به صورت متقاطع به هم متصل می شوند تا حمایت ساختاری را فراهم کنندپوست [4–7]. اسید هیالورونیک (HA)، یک گلیکوزآمینوگلیکان، یکی از اجزای اصلی آن استماتریکس خارج سلولی (ECM). HA یک مولکول کلیدی برای حفظ رطوبت پوست استتوانایی آن برای اتصال و حفظ مولکول های آب تا 1000 برابر وزن خود [8,9]. HAبا جذب آب یک ژل تشکیل می دهد و بافت ها را در برابر فشار مقاومت می کند. اینهیپودرم که عمدتاً از چربی و بافت همبند شل تشکیل شده است، انرژی را ذخیره می کندو عایق بدن را فراهم می کند [5,6]. 

پیری پوست یک فرآیند بیولوژیکی پیچیده است که توسط عوامل درونی و بیرونی ایجاد می شود [10,11]. پیری ذاتی یک فرآیند اجتناب ناپذیر است که توسط فیزیولوژیکی و ژنتیکی ایجاد می شودبا گذشت زمان تغییر می کند و در نتیجه چین و چروک های ظریف، آتروفی تدریجی پوست وپوست نازک و خشک [10,12,13]. پیری بیرونی با قرار گرفتن در معرض تجمعی ایجاد می شودعوامل محیطی از جمله اشعه ماوراء بنفش، سیگار کشیدن و آلودگی هوا. این محیط زیستعواملی برای تقویت تغییرات فیزیولوژیکی و مورفولوژیکی پوست شناخته شده است،در نتیجه پیری زودرس پوست [12–14]. از جمله عوامل محیطی، قرار گرفتن در معرضاشعه ماوراء بنفش دلیل اصلی پیری بیرونی پوست است و به آن پیری نوری می‌گویند [14–16]. متفاوت از پوستی که به طور ذاتی پیر می شود، معمولاً پوستی که زود پیر می شوددرشتی، رنگدانه های نامنظم، خالدار، اپیدرم ضخیم، چین و چروک های عمیق را نشان می دهد.سستی و زبری [5,10,17]. حتی با وجود پیری درونی پوست و پیری پوست بیرونیتوسط عوامل مختلف القا می شوند، هر دو مکانیسم های مولکولی مشابهی دارند. به خصوص،گونه‌های فعال اکسیژن (ROS) توسط متابولیسم سلولی اکسیداتیو تولید می‌شوندنقش کلیدی در هر دو فرآیند [18]. ROS باعث فعال شدن پروتئین فعال شده با میتوژن می شودکینازها (MAPK) و فاکتورهای هسته ای متعاقب آنκB (NF-κب) و فعال کننده فاکتور رونویسیپروتئین-1 (AP-1)، که منجر به تنظیم مثبت متالوپروتئینازها می‌شود (MMPs: MMP-1،MMP-3 و MMP-9) و کاهش پروکلاژن-1، که منجر به کاهشمحتوای کلاژن در پوست پیر [2,19]. ROS همچنین می تواند نوتروفیل های خون را برای نفوذ فعال کندپوست و ترشح الاستاز، که فیبرهای الاستیک را تخریب می کند و خاصیت ارتجاعی پوست را از دست می دهد.20]. پوستافزایش سن نیز به شدت با از دست دادن رطوبت پوست مرتبط است. گزارش شده است که الفکاهش قابل توجه HA در اپیدرم در نتیجه پیری پوست منجر به از بین رفتن آن می شودرطوبت پوست [8,21]. HA توسط سنتازهای هیالورونان (HAS; HAS{0}}، -2، -3،) درکراتینوسیت های اپیدرمی و فیبروبلاست های پوستی [8]. ملانین از طریق تبدیل تولید می شوداز L-تیروزین به L-دی هیدروکسی فنیل آلانین (L-DOPA)، که توسط تیروزیناز کاتالیز می شود.ملانین مسئول رنگ پوست است و نقش مهمی در محافظت از پوست داردآسیب ناشی از قرار گرفتن در معرض نور خورشید با این حال، تجمع ROS باعث افزایش فعالیت می شودتیروزیناز، که منجر به هایپرپیگمانتاسیون مانند لکه های ناشی از افزایش سن و ملاسما می شود.تولید ملانین بنابراین، هیپرپیگمانتاسیون را می توان با رادیکال های آزاد کاهش دادروبنده ها و مهارکننده های تیروزیناز [22,23].

در دهه‌های گذشته، به دلیل افزایش، استراتژی‌های پیری سالم اجباری شده استامید به زندگی. علاوه بر این، علاقه فزاینده ای به حفظ جوانی و زیبایی وجود داردظاهر، زیرا سلامت و زیبایی پوست به عنوان عوامل بیولوژیکی مهم تلقی می شوندنشان دهنده رفاه انسان همچنین ظاهری جوان و زیبا در نظر گرفته می شودممکن است تأثیر مثبتی بر رفتار اجتماعی داشته باشد [10,13]. بنابراین میلیون ها مصرف کننده استفاده می کنندمحصولات مراقبت از پوست آرایشی روزانه، و بازار جهانی محصولات آرایشی پیش بینی شده استتا سال 2023 با نرخ رشد 7.14 درصدی در سال از سال 2018 به 805 میلیارد دلار برسد.تا 2023 [24,25]. با توجه به عوارض جانبی نامطلوب محصولات آرایشی و بهداشتی مصنوعی، وجود داردتقاضای رو به رشد برای استفاده از محصولات طبیعی، از جمله مولکول های گیاهان، حیوانات،و موجودات دریایی لوازم آرایشی و بهداشتی از لوازم آرایشی و بهداشتی و دارویی مشتق می شوند،که به محصولات آرایشی و بهداشتی حاوی مواد فعال زیستی با عملکرد UV اشاره داردمحافظت، سفید کردن پوست، ضد چروک و ضد پیری [26]. در صنعت آرایشی و بهداشتی،محصولات آرایشی و بهداشتی سریعترین بخش در حال رشد هستند و محصولات طبیعی به عنوان یک رمان در حال ظهور هستندمنبع مواد فعال زیستی بالقوه برای کاربردهای آرایشی و بهداشتی [25]. 

سیستانچ میکروارگانیسم های فتوسنتزی پروکاریوتی یا یوکاریوتی هستند که می توانندبه سرعت رشد می کنند و در شرایط محیطی شدید زنده می مانند (مانند تغییرات دما،بی هوازی، شوری، فوتواکسیداسیون، فشار اسمزی و اشعه ماوراء بنفش) [27]. سیستانچهمچنین به دلیل بهره وری بالا، تنوع فصلی محدود، نسبت به گیاهان خشکی برتری دارند.استخراج آسان تر و مواد خام فراوان [27]. Cistanche به طور مداوم در معرضبه تنش های محیطی بنابراین، آنها برای توسعه استراتژی های مختلفی مانند ulتغییرات ساختاری، فیزیولوژیکی و بیوشیمیایی [28]. محصولات طبیعی مشتق شدهاز سیستانچ با پتانسیل برای اهداف آرایشی یا آرایشی شامل فتوسنتز می شودرنگدانه ها، لیپیدها، ترکیبات فنلی، اسیدهای آمینه، پپتیدها، کربوهیدرات ها،و ویتامین ها [25]. در میان محصولات طبیعی، کاروتنوئیدها که به عنوان قوی شناخته می شوندآنتی اکسیدان ها و پاک کننده های رادیکال آزاد، می توانند برای ضد پیری و محافظت از نور استفاده شونداهداف [29]. در میان کاروتنوئیدها، آستاگزانتین، که فعالیت آنتی اکسیدانی بالاتری را نشان می دهدنسبت به. تا -کاروتن و اسید اسکوربیک، عملکرد جالبی برای رنگ‌زدایی دارد که می‌تواندبا کاهش 40 درصدی سنتز ملانین از پوست در برابر لکه های پیری محافظت کنید.30,31]. زآگزانتین وسایر کاروتنوئیدها نیز فعالیت های جذب UV و مهار تیروزیناز را نشان می دهند.32]. سیستانچاغلب حاوی محتوای چربی بالا از جمله اسیدهای چرب غیراشباع چندگانه (PUFAs) است.PUFA ها نقش مهمی در محافظت از نور، حفظ سیالیت غشا وجلوگیری از تشکیل کریستال یخ درون سلولی، که امکان بقا در محیط شدید را فراهم می کندشرایطی مانند شدت نور بالا، تابش UV و دمای پایین [33,34]. اسیدهای چرب امگا-3 مانند دوکوزاهگزانوئیک اسید (DHA) و ایکوزاپنتانوئیک اسید (EPA)دارای اثرات مثبت در کاهش پیری پوست با سرکوب متالوپروتئینازهای ناشی از اشعه ماوراء بنفش(MMPs) و فعالیت های ضد التهابی [35]. نیز گزارش شده استکه لینولنیک اسید دارای برخی اثرات آرایشی مانند احیای پوست و کندی پوست استفرآیند پیری، و اسید لینولئیک برای درمان هیپرپلازی پوست استفاده می شود.36]. ترکیبات فنلی از سیستانچ شناخته شده است که فعالیت های مختلفی از جملهعملکردهای آنتی اکسیدانی، ضد حساسیت، ضد التهابی و محافظت در برابر اشعه ماوراء بنفش [2,37].

نانوکلروپسیسگونه ها، جلبک های کوچک تک سلولی eustigmatophycean، شناخته شده اندبه دلیل محتوای چربی بالا و بهره وری بالای زیست توده فوتواتوتروفیک، و همچنینبرای کشت موفق آنها در مقیاس بزرگ [38]. نانوکلروپسیسمورد بهره برداری قرار گرفته استبه عنوان منبعی از اسیدهای چرب غیر اشباع (از جمله EPA) برای رژیم غذایی پرورش یافته از آبزیانبی مهرگان دریایی آنها همچنین حاوی ترکیبات فنلی، ویتامین ها و انواع مختلف هستندرنگدانه هایی با فعالیت آنتی اکسیدانی [39]. علاوه بر این، آنها سموم تولید نمی کنند وایمنی سم شناسی آنها با استفاده طولانی مدت آنها به عنوان غذا برای ماهی های دریایی ثابت شده استو لارو صدف [40]. اگرچه آنها دارای ترکیبات زیست فعال ارزشمند متنوعی هستند،گزارش های کمی در مورد کاربرد وجود داردنانوکلروپسیسبرای لوازم آرایشی و بهداشتیاهداف [41]. با توجه به اینکه ترکیب بیوشیمیایی گیاه سیستانچ بر روی آرایشی و بهداشتی تاثیر می گذارداثرات می تواند حتی در بین جدایه های یک گونه متفاوت باشد [42]، بررسی بیشتراز این گونه ریزجلبکی برای برآوردن تقاضای فزاینده برای طبیعی ومحصولات آرایشی ایمن در این مطالعه، پتانسیل آرایشی و بهداشتی را بررسی کردیماستخراج ازنانوکلروپسیسsp. G{0}} (NG15) از جنوب دریای غربی جدا شده استجمهوری کره ما فعالیت های بیولوژیکی مختلف آن، از جمله ضد ملانوژنی آن را تجزیه و تحلیل کردیمآنتی اکسیدان، مرطوب کننده پوست، ضد التهاب، ضد چروک و UVتوابع حفاظتی ما بیشتر محتوای بیوشیمیایی و ترکیب آن را تجزیه و تحلیل کردیماسیدهای چرب، کاروتنوئیدها و ترکیبات فنلی.

2. نتایج

2.1. جداسازی Nannochloropsis sp. G1-5 و تجزیه و تحلیل ترکیب بیوشیمیایی

در این مطالعه یک کلنی با رنگ قهوه ای که نشان دهنده وجود آن بود جدا کردیمرنگدانه های کاروتنوئیدها و پلی فنول ها که از پخش آب دریا به دست می آیدنمونه بر روی صفحات F/2 آگار. ما جدایه را با استفاده از 18S rDNA PCR شناسایی کردیمبا توالی و نامگذاری آن به عنواننانوکلروپسیسsp. G{0}} (NG15). پس از کشتNG15 و استخراج با استفاده از اتانول، ترکیب و محتوای متیل استرهای اسید چرب(FAMEs)، کاروتنوئیدها، و ترکیبات فنلی در عصاره NG15 تعیین شد.محتویات کل اسیدهای چرب، کاروتنوئیدها، فنول ها وفلاونوئیدهادر نفت خامعصاره به ترتیب 58.2 درصد، 1.6 درصد، 7.7 درصد و 2.{7}} درصد بود (جدول1–3). به طور خاص، نفت خامعصاره حاوی PUFA های مختلف در محتوای چربی مانند -لینولنیک، لینولئیک اسید وEPA، که دارای فعالیت های ضد پیری، محافظت از نور و ضد التهاب هستند (جدول1). آی تیهمچنین دارای ترکیبات کاروتنوئیدی مختلف از جمله آستاگزانتین، -کاروتن، زآگزانتین،کانتاگزانتین و ویولاکسانتین (جدول2، شکل S1، جدول S1)، که شناخته شده بودنددارای عملکردهای آنتی اکسیدانی، محافظت کننده از نور و ضد ملانوژنیک هستند. علاوه بر این، کلمحتویات فنولیک و فلاونوئید در عصاره خام NG15 (جدول3) نسبتا بودنددر مقایسه با سایر سیستانچی های گزارش شده قبلی [43–45].

2.2. سمیت سلولی در شرایط آزمایشگاهی عصاره NG15

تاثیر عصاره NG15 بر زنده ماندن B16F10، CCD{3}}sk، هو نرمالفیبروبلاست پوستی مرد (NHDF) و NF-κB لوسیفراز گزارشگر سلول های NIH3T3 پایدار بودبا استفاده از روش MTT در غلظت 100-1500 تعیین می شودµگرم در میلی لیتر درمان باعصاره NG15 به طور قابل توجهی زنده ماندن سلولی همه رده های سلولی آزمایش شده را کاهش نداد.غلظت 1000µگرم در میلی لیتر، اما در 1500 کمی کاهش یافتµگرم در میلی لیتر (شکل1a–d). 

2.3. فعالیت ضد ملانوژنیک عصاره NG15

برای ارزیابی اینکه آیا عصاره NG15 دارای اثر سفید کنندگی پوست است، ما آن را تجزیه و تحلیل کردیم.تاثیر بر فعالیت تیروزیناز و سنتز ملانین داخل سلولی. از مهار تیروزینازدر روش سنجش، مشاهده کردیم که فعالیت تیروزیناز با درمان با NG15 کاهش یافتبه روشی وابسته به دوز استخراج کنید. فعالیت های مهاری تیروزیناز بود7.84 ± 2.54, 19.68 ± 2.64, 26.24 ± 1.21, 40.16 ± 0.55 و 59.2± 0.48 درصد پس از درمان با NG15عصاره در غلظت های 100، 250، 500، 750 و1000 µگرم در میلی لیتر، به ترتیب، در حالی که آربوتین(300 µM) که به عنوان یک کنترل مثبت استفاده می شود، فعالیت مهاری تیروزیناز را نشان داد47.52 ± 3.09 درصد(شکل2آ). فعالیت مهاری تیروزیناز عصاره NG15 در1000 µگرم در میلی لیتربالاتر بوداز آربوتین (300µم). برای تعیین فعالیت ضد ملانوژنیک NG15عصاره، سلول های B16F10 با تحریک شدند -هورمون محرک ملانوسیت ( -MSH،100 نانومولار) و محتوای ملانین در سلول های B16F10 تیمار شده با عصاره NG15 یا آربوتیناندازه گیری شدند. عصاره NG15 اثر مهاری قابل توجهی بر ملانین نشان دادسنتز به روشی وابسته به دوز در مقایسه با سلول های درمان نشده، محتویات ملانینپس از درمان عصاره شدند212.53 ± 4.72, 171.06 ± 3.57 و128.60 ± 3.67 درصددرغلظت 250، 500 و1000 µگرم در میلی لیتر، به ترتیب. محتوای ملانین B16F10سلول های تحت درمان تنها با -MSH (100 نانومولار) 247.65 را نشان داد± 4.15 درصد این نتیجه نشان دهندهاین واقعیت که عصاره NG15 محتوای ملانین را کاهش داد سلول های B16F10 تیمار شده با MSH بالابه 48 درصد کنترل مثبت، آربوتین (300µM)، 88.27 را نشان داد± 1.5 درصد محتوای ملانیندر مقایسه با سلول‌های تیمار نشده، که مربوط به کاهش 64 درصدی محتوای ملانین است سلول های B16F10 تیمار شده با MSH (شکل2b). 

شکل 1. اثر عصاره NG15 (0-1500 ug/mL) بر زنده ماندن (a) B16F1{{10}}، (ب) NHDF، (C) NF-KB لوسیفراز گزارشگرNIH3T3 سلول های پایدار، و (د) سلول های CCD-986sk. کنترل به معنای زنده ماندن سلولی سلول های بدون عصاره NG15 است. * نشان دهنده مقدار ap < 0.05، n=3، آزمون F دانشجویی است. ** نشان دهنده مقدار ap < 0.01، n=3، آزمون t Student است.

2.4. فعالیت های آنتی اکسیدانی، ضد التهابی و محافظت در برابر اشعه ماوراء بنفش NG15

استخراج از روش DPPH برای ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره NG15 استفاده شد. فعالیت مهار رادیکال DPPH عصاره NG15 به روشی وابسته به دوز در محدوده غلظت 100-1000 ug/mL افزایش یافت. به طور خاص، فعالیت‌های مهار رادیکال DPPH 8.71 × 1.38، 2 0.12 土 1.38، 51.65  1.88، 54.95 土 2.38، و 57 بود.{{2{53}}}. 52 درصد پس از تیمار با 100، 250، 500، 750 و 1000 میکروگرم در میلی لیتر عصاره NG15، به ترتیب، در حالی که اسید اسکوربیک (5 میکروگرم در میلی لیتر) 54.{30}} 土 0.31 درصد از فعالیت مهار رادیکال DPPH را نشان داد. فعالیت مهار رادیکال DPPH در 1000 میکروگرم در میلی لیتر عصاره NG15 کمی بیشتر از اسید اسکوربیک (5 میکروگرم بر میلی لیتر) بود (شکل 3a). برای بررسی فعالیت ضد التهابی عصاره NG15، ما اثر عصاره را بر فعال‌سازی NF-B ناشی از TNF-a با روش گزارشگر لوسیفراز وابسته به NF-kB تجزیه و تحلیل کردیم. هنگامی که سلول های NIH3T3 پایدار گزارشگر لوسیفراز NF-kB با غلظت های مختلف عصاره NG15 تیمار شدند، فعالیت لوسیفراز ناشی از TNF-a به صورت وابسته به دوز تا 15.40 به علاوه 0.38 درصد در 1000 میکروگرم در میلی لیتر در مقایسه با سلول های تیمار شده با تنها کاهش یافت. TNF-a (شکل 3b). برای تعیین اثر محافظتی عصاره NG15 بر روی سلول های پوست پس از قرار گرفتن در معرض UVB، زنده ماندنسلول‌های CCD-986اسک با روش MTT اندازه‌گیری شد. قابلیت زنده ماندن سلول های CCD-986sk بعد ازقرار گرفتن در معرض 30 mJ/cm2 UVB به 79.01 کاهش یافت± 2.57 درصد از سلول های کنترل. با این حال،درمان با عصاره NG15 به طور قابل توجهی مرگ سلولی ناشی از UVB را کاهش دادروش وابسته به دوز زنده ماندن سلولی CCD-986sk تیمار شده با عصاره NG15 بود87.49 ± 7.49, 89.00 ± 2.89, 97.17 ± 7.19, 100.45 ± 5.62 و 109.48± 8.25 درصد پس از درمانبا 100، 250، 500، 750 و 1000µگرم در میلی لیتر عصاره NG15 به ترتیب در مقایسه با شاهدسلول ها (شکل3c). 

شکل 2. اثر ضد ملانوژنیک عصاره NG15. (الف) فعالیت مهاری تیروزیناز در شرایط آزمایشگاهی عصاره NG15 در برابر تیروزیناز قارچ.** نشان دهنده یک مقدار p <0 است.01 در مقابل یک گروه معمولی (درمان نشده). # نشان دهنده مقدار ap < 0.01 در مقابل سلول های تیمار شده با ساربوتین است. n=3: آزمون f دانش‌آموز. (ب) اثر عصاره NC15 بر محتویات ملانین در سلول های B16F10 تحریک شده با هورمون محرک ملانوسیت (MSH). ## و ** مقدار ap < 0.01 در مقابل سلولهای تحت درمان با c-MSH-only; n=3; آزمون دانشجویی از آربوتین (300 میکرومولار) به عنوان کنترل مثبت استفاده شد.

2.5. فعالیت های مرطوب کننده و ضد چروک پوست عصاره NG15

برای ارزیابی فعالیت هیدراتاسیون پوست عصاره NG15، بیاندارد-2 (ژن مرتبط با مرطوب کننده) در سلول های NHDF با استفاده از qPCR مورد بررسی قرار گرفت. ایندارد-2بیان mRNA به طور قابل توجهی با درمان با عصاره NG15 در a افزایش یافتروش وابسته به دوز سطح بیان mRNA نسبی ازدارد-2در مقایسه با درمان نشدهسلول 199.88 بود± 10.63, 263.91 ± 2.47 و 274.58± 1.37 درصد، پس از درمان با250، 500 و 1000µگرم در میلی لیتر از عصاره NG15 به ترتیب برای 24 ساعت، در حالی کهدارد-2mRNAسطح بیان سلول های NHDF تیمار شده با رتینوئیک اسید (50 نانومولار) 316.31 بود.± 8.89 درصد(شکل4آ). برای تعیین اثر عصاره NG15 بر تخریب کلاژن وسنتز، بیانMMP-1وCol1A1با استفاده از qPCR آنالیز شد. اینMMP-1بیان mRNA سلول های NHDF با تیمار با عصاره NG15 کاهش یافتبه صورت وابسته به دوز، تا 26.71 درصد در 1000µگرم در میلی لیتر، در مقایسه با تیمار نشدهکنترل (شکل4ب). اینCol1A1بیان mRNA سلول های NHDF تیمار شده باعصاره NG15 در دوزهای زیر 500 تفاوت آماری معنی داری نشان ندادµگرم در میلی لیتر،اما 15.53 افزایش یافت± 2.75 درصد در 1000µگرم در میلی لیتر، در مقایسه با شاهد تیمار نشده(شکل4c). ما همچنین اثر عصاره NG15 را بر مهار الاستاز بررسی کردیمفعالیت. عصاره NG15 فعالیت مهاری الاستاز را به صورت وابسته به دوز نشان داد.تا 24.88± 0.80 درصد در 1000µگرم در میلی لیتر، در مقایسه با شاهد تیمار نشده (شکل 1).4d)

شکل 3. فعالیت های آنتی اکسیدانی، ضد التهابی و محافظت در برابر اشعه ماوراء بنفش عصاره NG15. (الف) فعالیت مهار رادیکال آزاد DPPH عصاره NG15. اسید ال اسکوربیک (5 میکروگرم در میلی لیتر) به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. ** یک مقدار p < 0 را نشان می دهد.01 در مقابل گروه عادی (درمان نشده). n {{1{{30}}}}; آزمون تی دانشجویی. (ب) اثر عصاره NG15 بر فعالیت TNF-a-induceduciferase وابسته به NF-xB در سلول های پایدار NlH313 گزارشگر لوسیفراز NF-B. ** نشان‌دهنده ap alue < 0.01 در مقابل سلول‌های تنها تیمار شده با TNF-a است. n=3; آزمون تی دانشجویی. (C) اثر محافظتی عصاره NG15 بر زنده ماندن سلول‌های CCD{27} sk پس از قرار گرفتن در معرض UVB (30 متر) بر سانتی‌متر'). ## نشان دهنده مقدار p<0.01 در مقابل یک گروه معمولی (درمان نشده و در معرض UVB) است. ** نشان دهنده مقدار ap < 0.01 در مقابل گروه تحت درمان فقط با UVB است. n=3; آزمون f دانش آموزی.

شکل 4. فعالیت های مرطوب کننده و ضد چروک پوست عصاره NG15. سطح بیان mRNA (a) HAS-2b) MMP-1، و (C) Col1A1. (د) فعالیت مهاری الاستاز در شرایط آزمایشگاهی عصاره NG15 در برابر الاستاز سلول‌های NHDF نشان‌دهنده مقدار p <0 است.05 در مقابل یک گروه عادی (درمان نشده). نشان دهنده مقدار ap < 0.01 در مقابل یک گروه معمولی (درمان نشده)=3; آزمون تی دانشجویی رتینوئیک اسید (50 نانومولار)، TCF{15}} (5 نانوگرم در میلی‌لیتر، و نمک فسفرامیدون دی سدیم (10 میکرومولار) به ترتیب به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. سطح بیان mRNA هر ژن به سطح B نرمال شد. -ژن اکتین