عصاره گیاه سیستانچ بیابان می تواند با خاصیت ایمنی مخالفت کند و طول عمر را در موش های مستعد پیری 8 (SAM-P8) افزایش دهد.

که ژانگ، شو ما، ونجون هه، هایکسیا لی، شویان هان، یونگ جیانگ، هونان وو، لی هان، توموهیرو اوهنو، نوبوئو اوتسو، کوهجی یاماگوچی، ژیژونگ ما و پنگفی تو

1 گروه داروهای طبیعی، دانشکده علوم دارویی، دانشگاه پکن، شماره 38 جاده Xueyuan، Beijing 100191، چین

2 مرکز تحلیلی پزشکی و سالم، دانشگاه پکن، شماره 38 جاده Xueyuan، Beijing 100191، چین

3 دانشکده تحقیقات بنیادی، موسسه تحقیقاتی Fancl، شرکت FANCL، 12-13 Kamishinano، Totsuka-Ku، Yokohama، Kanagawa 244-0806، ژاپن

4 گروه ادغام طب سنتی چینی و غربی، دانشکده علوم پایه پزشکی، دانشگاه پکن، شماره 38 جاده Xueyuan، Beijing 100191، چین

مخاطب:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساپ: 008618081934791

8 زیرسویه موش مستعد پیری (SAM-P8) که به طور گسترده به عنوان یک مدل حیوانی برای مطالعه داروهای پیری و ضد پیری پذیرفته شده است، برای بررسی اثرات مکمل های غذایی با عصاره ها استفاده شد.سیستانچدسرتیکولا(ECD) که به طور گسترده در طب سنتی چینی به دلیل توانایی درک شده در ارتقاء عملکرد سیستم ایمنی در سالمندان استفاده شده است. موش‌های نر 8 ماهه SAM-P8 به مدت 4 هفته با ECD تحت درمان خوراکی روزانه قرار گرفتند. نتایج نشان داد که مکمل‌های غذایی 150 میلی‌گرم بر کیلوگرم و 450 میلی‌گرم بر کیلوگرم ECD می‌تواند طول عمر اندازه‌گیری شده با تجزیه و تحلیل بقای Kaplan-Meier را به صورت وابسته به دوز افزایش دهد. نشان داده شد که مکمل‌های غذایی موش‌های SAM-P8 به مدت 4 هفته با 100، 500 و 2500 میلی‌گرم بر کیلوگرم ECD منجر به افزایش قابل‌توجهی در سلول‌های T ساده و طبیعی در جمعیت سلول‌های خون و طحال می‌شود. در مقابل، سلول‌های T حافظه محیطی و سیتوکین پیش‌التهابی، IL{15}} در سرم، در موش‌هایی که روزانه 100 و 500 میلی‌گرم بر کیلوگرم ECD مصرف می‌کردند، به‌طور چشمگیری کاهش یافت. علاوه بر این، سلول‌های Sca{18} مثبت، پیش‌سازهای شناخته‌شده سلول‌های T ساده محیطی، به‌طور موازی بازسازی شدند. نتایج ما پشتیبانی تجربی واضحی را برای مطالعات مشاهدات بالینی طولانی مدت ارائه می دهد که نشان می دهدسیستانچدسرتیکولادارای اثرات قابل توجهی در افزایش طول عمر است و نشان می دهد که این امر از طریق تضاد با ایمونوسانس به دست می آید.

سیستانچمی توانضد پیریوسفید کردن پوست

مقدمه

سیستانچدسرتیکولایکی از محبوب‌ترین داروهای گیاهی/محصولات بهداشتی سنتی چینی است که در تعدادی از داروخانه‌های تاریخی گیاهی چینی دارای خواص ضد پیری توصیف شده است. در نتیجه، در چین به طور گسترده برای درمان اختلالات مرتبط با افزایش سن از جمله زوال عقل پیری، ناتوانی جنسی، ناباروری، عفونت مزمن و اختلالات خونساز در سالمندان استفاده شده است [1]. رویکردهای شیمیایی مدرن اجازه داده است که دو نوع اصلی از ترکیبات، گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی و الیگوساکاریدها به عنوان مواد اصلی فعال جدا شوند.سیستانچدسرتیکولا[1]. در دهه اخیر،سیستانچدسرتیکولاو عصاره‌های آن به شدت مورد مطالعه قرار گرفته‌اند و نشان داده‌اند که قادر به محافظت از نورون‌ها از آسیب ناشی از نوروتوکسین‌ها [2]، مهار سمیت کبدی ناشی از تتراکلرید کربن [2]، و ارتقای بازیابی سلول‌های مغز استخوان از آسیب تشعشعات ناشی از Co60 هستند [3] . همچنین نشان داده شده است که دارای اثرات ضد التهابی، آنتی اکسیدانی و ضد پیری است [4]. با این حال، اینکه آیا Cistanche deserticola می تواند طول عمر را افزایش دهد و مکانیسم های مولکولی زیربنایی [3] مرتبط با خواص ضد پیری آن چیست، به طور دقیق آزمایش نشده است.

ایمونوسنسانس، یعنی تغییر سیستم ایمنی با افزایش سن، زمینه ای را ایجاد می کند که بر اساس آن افزایش حساسیت به عفونت ها، سرطان، بیماری های عصبی و بیماری های خود ایمنی در سالمندان مشاهده شده است [5]. مداخلات درمانی، مانند محدودیت کالری [6] و مکمل ویتامین E، در به تاخیر انداختن پیشرفت ایمنی و در نتیجه کاهش عوارض برخی از بیماری‌های مرتبط با افزایش سن و همچنین افزایش طول عمر انسان و جوندگان موثر گزارش شده است. [7، 8]. با این حال، مطالعات در این زمینه به دلیل این واقعیت پیچیده است که پیری با پارادوکس نقص ایمنی همزمان و التهاب مزمن همراه است [9]. این بدان معناست که تحریک ساده تکثیر لنفوسیت ها یا ضد التهاب نشان دهنده مداخلات درمانی ایده آل در مقابله با پیری و شرایط مرتبط با افزایش سن نیست [10]. در نتیجه در جستجوی مداخلات پزشکی که قادر به پیشگیری یا تسکین شرایط مرتبط با افزایش سن از جمله عفونت‌ها، سرطان، بیماری‌های خودایمنی، تصلب شرایین و بیماری‌های نورودژنراتیو هستند که از علل اصلی مرگ و میر و ناتوانی هستند و ترمیم نقایص سیستم ایمنی باید با مهار بیماری همراه باشد. پاسخ های التهابی

موش تسریع شده پیری [11] یک مدل موش همخون، مشتق شده از سویه AKR/J است که به طور گسترده در مطالعات پیری استفاده می شود. زیرشاخه P8 (SAM-P8) این موش‌ها در مقایسه با زیرشاخه R1 (SAM-R1) طول عمر قابل توجهی کوتاه‌تر دارد که همچنین روند پیری کندتر را نشان می‌دهد [12]. موازی با پیری زودرس، موش‌های SAM-P8 پیری عصبی، ایمن‌سازی و نقایص خون‌ساز مرتبط با سن را نیز افزایش می‌دهند که از نزدیک ویژگی‌های پیری معمولی انسان را تقلید می‌کنند [13، 14]. تجزیه و تحلیل مکانیسم های زمینه ای مسئول فرآیند پیری تسریع شده و اختلالات مرتبط با افزایش سن نشان می دهد که به نظر می رسد اختلال عملکرد میتوکندری [15]، استرس اکسیداتیو و افزایش نرخ جهش DNA جسمی همگی دخیل هستند [16، 17]. بنابراین، این سیستم موش، با پس زمینه ژنتیکی همگن خود، یک مدل تجربی عالی برای مطالعه درمان های پیری و ضد پیری ارائه می دهد [12]. این مطالعه بر روی بررسی این موضوع متمرکز شده است که آیا عصاره گیاه سیستانچ کویر قادر به افزایش طول عمر موش های SAM-P8 و معکوس کردن وضعیت ایمنی آنها است.

سیستانچاکیناکوزیدمی توانضد پیری

نتایج

3.1. تجزیه و تحلیل اجزای فعال بالقوه در عصاره گیاه Cistanche deserticola (ECD). همانطور که در جدول 1 نشان داده شده است، ECD عمدتا از دو نوع ترکیب، گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید و الیگوساکاریدها تشکیل شده است. در گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید، اکیناکوزید، آکتئوزید و اسید اپیلوگانیک 8- شناسایی شده‌اند، در حالی که در الیگوساکاریدها، تنها گالاکتیتول شناسایی شده است.

3.2. تأثیر عصاره گیاه سیستانچ کویر بر میانگین طول عمر موش های SAM-P8. برای این کار و مطالعات بعدی، موش‌های نر 8 ماهه SAM-P8 به 4 گروه تقسیم شدند. در میان آنها، یک گروه از موش ها با رژیم غذایی معمولی بدون ECD تغذیه شدند، 3 گروه دیگر به طور جداگانه رژیم های غذایی حاوی نسبت های مختلف ECD را مصرف کردند. موش‌های زیر سویه SAM-R1 که روند پیری و طول عمر طبیعی دارند، به عنوان گروه کنترل در همه آزمایش‌ها مورد استفاده قرار گرفتند.

در مقایسه با گروه کنترل SAM-R1، میانگین طول عمر موش های SAM-P8 به طور قابل توجهی کوتاه شد (شکل 1(a)؛ 𝑃 < 0.001).="" اگرچه="" مکمل="" رژیم="" غذایی="" با="" دوز="" پایین="" (50="" میلی="" گرم="" بر="" کیلوگرم)="" ecd="" نتوانست="" افزایش="" قابل="" توجهی="" در="" طول="" عمر="" موش="" های="" sam-p8="" ایجاد="" کند،="" اما="" در="" مکمل="" های="" متوسط="" ​​(150="" میلی="" گرم="" بر="" کیلوگرم)="" و="" بالا="" (450="" میلی="" گرم="" بر="" میلی="" لیتر)="" دوزها="" یک="" افزایش="" وابسته="" به="" دوز="" در="" طول="" عمر="" وجود="" داشت="" (شکل="" 1(a)="" و="" 1(b)؛="" ❑=""><0.05-0.01) که="" توسط="" تجزیه="" و="" تحلیل="" بقای="" kaplan-meier="" تایید="" شد،="" که="" شامل="" استفاده="" از="" هر="" دو="" رتبه="" log="" بود="" (="" تست="" های="" mantel-cox)="" و="">

3.3. معکوس شدن ایمنی در موش های SAM-P8 توسط عصاره گیاه سیستانچ کویر (ECD). کاهش لنفوسیت‌های T ساده محیطی و افزایش همزمان لنفوسیت‌های T حافظه محیطی از ویژگی‌های برجسته ایمونوسانس هستند که به طور گسترده به عنوان دلایل اصلی ناهنجاری‌های ایمنی مرتبط با سن در نظر گرفته می‌شوند. این ایمن سازی در SAM-P8 نسبت به حیوانات SAM-R1 به وضوح مشهود بود زمانی که تجزیه و تحلیل FACS برای شمارش لنفوسیت های (CD3 به علاوه CD44low CD45RBhigh) به عنوان شاخص سلول های T ساده و لنفوسیت های (CD3 به علاوه CD44 بالا CD45BRlow) به عنوان شاخص حافظه استفاده شد. سلول ها. بنابراین، هم در خون محیطی (شکل 2) و هم در سلول های طحال (شکل 3) در موش های SAM-P8، سطح سلول های T ساده و بی تکلف کاهش یافت و سطح سلول های T حافظه افزایش یافت. مشخص شد که مکمل رژیم غذایی موش‌های SAM-P8 با ECD می‌تواند این شاخص‌های ایمنی را به روشی وابسته به دوز در جمعیت‌های خون محیطی (شکل 2) و سلول‌های طحال (شکل 3) معکوس کند. به عنوان یک شاخص اضافی از معکوس شدن ایمنی با مکمل ECD رژیم غذایی، سطح سلول های کشنده طبیعی [18]، یک نشانگر سلولی اصلی سیستم ایمنی ذاتی، تجزیه و تحلیل شد. این نشان داد که مکمل رژیم غذایی ECD منجر به افزایش وابسته به دوز در سلول های NK (CD3 به علاوه CD49 به علاوه) در هر دو جمعیت لنفوسیتی خون محیطی (شکل 4) و سلول طحال (شکل 5) شد.

3.4. عصاره گیاه سیستانچ صحرا، شدت فلورسانس نسبی سلول های مثبت Sca{2}} را در موش های SAM-P8 تقویت می کند. آنتی ژن سلول های بنیادی{5}} (Sca-1) یکی از برجسته ترین نشانگرهای زیستی سلول های بنیادی خونساز (HSC) در جمعیت های سلولی مغز استخوان است. سلول‌های مثبت Sca{7}} نیز نشان دهنده پیش سازهای لنفوسیتی هستند که به تازگی از مغز استخوان به خون محیطی صادر شده‌اند و در آنجا تحت تمایز بیشتری به انواع مختلف لنفوسیت‌های بالغ قرار می‌گیرند. در نتیجه، این سلول‌های Sca{8} مثبت منبع اصلی لنفوسیت‌های T ساده در خون محیطی هستند. شکل 6 نشان می دهد که در مقایسه با موش های کنترل SAM-R1، شدت فلورسانس نسبی سلول های مثبت Sca{12}} در موش های SAM-P8 به طور قابل ملاحظه ای کمتر بود. نشان داده شد که مکمل رژیم غذایی موش های SAM-P8 با سه دوز مختلف ECD به طور قابل توجهی شدت فلورسانس نسبی سلول های Sca{17} مثبت را افزایش می دهد (شکل 6).

3.5. عصاره Cistanche deserticola (ECD) باعث ترویج آپوپتوز و مهار نکروز لنفوسیت ها در موش SAM-P8 می شود. سطوح نکروز و آپوپتوز در جمعیت های لنفوسیت خون با رنگ آمیزی مضاعف با Annexin V-FITC V/PI مورد بررسی قرار گرفت. این نشان داد که نسبت لنفوسیت های نکروزه در موش های SAM-P8 به طور قابل توجهی بیشتر از حیوانات کنترل SAM-R1 بود، در حالی که نسبت لنفوسیت های آپوپتوز کمتر بود (شکل 7). مکمل رژیم غذایی موش های SAM-P8 با سه دوز مختلف ECD قادر به مهار سطوح نکروز مشاهده شده در جمعیت لنفوسیت های محیطی بود، در حالی که تنها دو سطح بالاتر مکمل ECD تغییر قابل توجهی در سطح لنفوسیت های آپوپتوز ایجاد کرد (شکل 7).

سیستانچمی توانضد اکسیداسیون

3.6. عصاره سیستانش دسرتیکولا (ECD) سیتوکین پیش التهابی IL-6 را در موش های SAM-P8 کاهش می دهد. به عنوان یک شاخص دیگر از ظرفیت ECD برای تأثیرگذاری بر تغییرات مرتبط با سن در سیستم ایمنی، تأثیر مکمل رژیم غذایی ECD بر سطح تعدادی از سیتوکین ها (IFN-𝛾، TNF- 𝛼، IL-2، IL{ {9}}، IL{{10}}، GM-CSF، و IL-3) با استفاده از آنالیز آرایه مهره‌ای سیتومتریک (CBA) که شامل رنگ‌آمیزی با آنتی‌بادی‌های نشاندار شده با رنگ فلورسنت است، تجزیه و تحلیل شد. با مهره های سیتومتریک گرفتن. نتایج (شکل 8) نشان داد که سیتوکین التهابی IL{16}} در موش های SAM-P8 {17} ماهه در مقایسه با موش های کنترل SAM-R1 در همان سن افزایش پیدا نکرد، اما زمانی که در مقایسه با 6-موش SAM-R1 ماهه (نتایج نشان داده نشده است). با این حال، مکمل‌های غذایی با دوزهای بالا و متوسط ​​ECD قادر به کاهش معنی‌دار آماری در سطوح IL پلاسما بود (شکل‌های 8(a) و 8(b)، 𝑃 <0.05). سطوح="" پلاسمایی="" سایر="" سایتوکاین‌های="" مورد="" بررسی="" (ifn-𝛾،="" tnf-𝛼،="" il{33}}،="" ​​il{34}}،="" gm-csf،="" و="" il{36}})="" هیچ="" گونه="" تفاوت="" معنی‌داری="" بین="" sam-="" نشان="" نداد.="" گروه‌های="" موش‌های="" تحت="" درمان="" با="" p8،="" sam-r1="" و="" ecd="" (داده‌ها="" نشان="" داده="" نشده="">

4. بحث

دفاع ایمنی در برابر میکروارگانیسم‌های تازه مهاجم یا سلول‌های تومور درون‌زا به تنوع مجموعه سلول‌های T بستگی دارد که به نوبه خود به تولید و نگهداری سلول‌های T ساده و ساده وابسته است [19]. در طول فرآیند پیری، نشان داده شده است که تنوع مجموعه سلول‌های T به دلیل کاهش تدریجی سلول‌های T ساده در مخزن ذخیره محیطی، به‌طور چشمگیری کاهش می‌یابد. تصور می‌شود که این کمبود سلول‌های T ساده پاسخ‌دهنده مسئول حساسیت افراد مسن به عفونت، سرطان و پیامدهای ضعیف پس از واکسیناسیون است [20]. مداخلات مختلف، از جمله محدودیت کالری [7]، ورزش [21] و مکمل ویتامین E [8]، همگی برای بازسازی موفقیت آمیز سلول های T ساده و در نتیجه افزایش طول عمر و کاهش شروع عفونت و سرطان در میان سالمندان مورد استفاده قرار گرفته اند. در این مطالعه، ما نشان دادیم که ECD قادر به افزایش سطح سلول‌های T ساده در حوضچه محیطی است و همزمان با افزایش طول عمر و کاهش فراوانی تشکیل تومور در موش‌های با تسریع پیری (گروه درمانی ECD در مقابل SAM-P8، 0 در مقابل 1/6). بنابراین، منطقی به نظر می رسد که نتیجه گیری کنیم که ظرفیت ECD برای معکوس کردن تخلیه سلول های T ساده محیطی وابسته به سن ممکن است به اثرات شناخته شده آن در کاهش بیماری های مرتبط با سن که از مشاهدات بالینی طولانی مدت ناشی می شود، کمک کند.

سیستانچاکتئوزیدمی توانضد پیری

منابع

[1] Y. Jiang و P.-F. تو، "تجزیه و تحلیل ترکیبات شیمیایی در گونه های سیستانش"، مجله کروماتوگرافی A، جلد. 1216، شماره 11، صفحات 1970-1979، 2009.

[2] Q. Xiong، K. Hase، Y. Tezuka، T. Tani، T. Namba، و S. Kadota، "فعالیت محافظت کبدی فنیل اتانوئیدها از Cistanche deserticola"، Planta Medica، جلد. 64، شماره 2، صص 120-125، 1998.

[3] "ایمونولوژی و پیری در اروپا. مجموعه مقالات دومین کنفرانس زیست شناسی پایه و تاثیر بالینی ایمنی ایمنی. مارس 22-26، 2001، کوردوبا، اسپانیا،" Experimental Gerontology، vol. 37، شماره 2-3، صفحات 183-473، 2002.

[4] G.-D. ژوان و سی.-کیو. لیو، "تحقیق در مورد اثر گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی (PEG) گیاه سیستانچ کویر بر ضد پیری در موش های مسن ناشی از دی گالاکتوز، مجله مواد دارویی چینی، جلد. 31، شماره 9، صص 1385–1388، 2008.

[5] D. Aw, AB Silva, and DB Palmer, "Immunosenescence: در حال ظهور چالش ها برای جمعیت سالخورده" Immunology, vol. 120، شماره 4، صفحات 435-446، 2007.

[6] M. Alizadeh, H. Pohla, A. Rehbein, and G. Pawelec, "کشت طولانی مدت لنفوسیت های T مونوکلونال انسانی: مدل هایی برای ایمن سازی؟" سازوکارهای پیری و توسعه، ج. 83، شماره 3، صص 171-183، 1995.

[7] EH Greeley، E. Spitznagel، DF Lawler، RD Kealy، و M. Segre، "مدولاسیون ایمنی سگ ها توسط محدودیت کالری مادام العمر"، ایمونولوژی دامپزشکی و آسیب شناسی ایمنی، جلد. 111، صفحات 287-299، 2006.

[8] SN Meydani، SN Han و D. Wu، "ویتامین E و پاسخ ایمنی در افراد مسن: مکانیسم‌های مولکولی و پیامدهای بالینی"، بررسی‌های ایمونولوژیک، جلد. 205، صفحات 269-284، 2005.

[9] SG Deeks، "عفونت HIV، التهاب، ایمنی، و پیری"، Annual Review of Medicine، جلد. 62، صفحات 141-155، 2011.

[10] M. Capri، D. Monti، S. Salvioli و همکاران، "پیچیدگی استراتژی های ضد ایمنی در انسان"، Artificial Organs، جلد. 30، شماره 10، صفحات 730-742، 2006.

[11] S. Antonaci، AR Garofalo، C. Chicco و همکاران، "زوال عقل پیری، نوع آلزایمر: موجودیت متمایز در حس ایمنی؟" مجله تحلیل آزمایشگاهی بالینی، ش. 4، نه 1، صفحات 16-21، 1990.

[12] R. Takahashi، "مطالعات ضد پیری روی سویه‌های موش تسریع شده با پیری (SAM)، یاکوگاکو زاشی، جلد. 130، شماره 1، صفحات 11-18، 2010.

[13] S. Llor´ens، RMM-F. De Mera, A. Pascual et al., "The senescence-cecelerated mouse (SAM-P8) به عنوان مدلی برای مطالعه تغییرات عملکردی عروق در طول پیری" Biogerontology, vol. 8، نه 6، صفحات 663-672، 2007.

[14] تی تاکدا، "موش با شتاب پیری (SAM) با ارجاع ویژه به مدل‌های تخریب عصبی، موش‌های SAMP8 و SAMP10، Neurochemical Research، جلد. 34، شماره 4، صفحات 639-659، 2009.

[15] H. Nakahara, T. Kanno, Y. Inai et al., "اختلال میتوکندری در موش با سرعت پیری (SAM)،" Free Radical Biology and Medicine, vol. 24، شماره 1، صفحات 85-92، 1998.

[16] J. Mizutani، T. Chiba، M. Tanaka، K. Higuchi، و M. Mori، "جهش های منحصر به فرد در DNA میتوکندریایی سویه های موش با سرعت پیری (SAM)،" Journal of Heredity، جلد. 92، شماره 4، صص 352-355، 2001.

[17] A. Mori، K. Utsumi، J. Liu، و M. Hosokawa، "آسیب اکسیداتیو در موش با سرعت پیری"، Annals of the New York Academy of Sciences, vol. 854، صفحات 239-250، 1998.

[18] WB Ershler، WH Sun، N. Binkley و همکاران، "اینترلوکین-6 و پیری: سطوح خون و تولید سلول‌های تک هسته‌ای با افزایش سن افزایش می‌یابد و تولید در شرایط آزمایشگاهی با محدودیت رژیم غذایی قابل تغییر است، لنفوکین و سیتوکین تحقیق، ج. 12، شماره 4، صص 225-230، 1993.

[19] AN Vallejo، "بازسازی سیستم ایمنی: درس هایی از تغییرات رپر توایر در طول پیری زمانی و در بیماری های ناشی از ایمنی"، Trends in Molecular Medicine، جلد. 13، شماره 3، صص 94-102، 2007.