چگونه عصاره آبی سیستانچ باعث تقویت پریستالسیس روده و بهبود یبوست می شود؟

شوآی یان، 1،2 یین زی یو، 1 شیائو پنگ وانگ، 1 هونگ لی دونگ، 1 شو گوانگ ژن، 1 بن شنگ وو، 1 و های هوآ کیان3

طب سنتی چینی اثرات خوبی در درمان یبوست عملکردی گزارش شده است. در این کار تلاش شد تا اثرات عصاره آبی گیاه هربا اثبات شودسیستانچ(AEHC) در درمان STC و تعیین مکانیسم های ممکن توسط یک مدل یبوست حمل و نقل آهسته (STC) ناشی از لوپرامید. HPLC برای شناسایی و تایید اجزای زیست فعال در AEHC انجام شد. مشخص شد که AEHC بر اساس افزایش کمیت مدفوع، محتوای رطوبت، و سرعت انتقال روده، و همچنین سطوح سرمی GAS، MTL، SS و CGRP، پاسخ‌های STC را کاهش می‌دهد. سطح پروتئین و mRNA کیت c، برچسب‌گذاری سلول‌های بینابینی کژال (ICC)، نیز افزایش یافت. در همین حال، تنها سطح پروتئین SCF، لیگاند کیکت، افزایش یافت. تجزیه و تحلیل داده‌های ما نشان داد که AEHC به وضوح می‌تواند عملکرد ICC را از طریق یک مسیر سیگنالینگ شامل PI3K، SCF، و c-kit بهبود بخشد و شاخص‌های تحرک کولون مانند GAS، MTL، SS و CGRP را افزایش دهد. جالب است بدانید که به نظر می رسد AEHC روی یبوست موثر است، بنابراین آزمایش های بیشتری برای روشن شدن مکانیسم های دقیق درگیر ضروری است.

برای اطلاعات بیشتر لطفا تماس بگیرید:Joanna.jia@wecistanche.com

اکتئوزید موجود در سیستانچ اثرات خوبی بر آنتی اکسیدان دارد

1. مقدمه

یبوست یک بیماری شایع عملکردی دستگاه گوارش و مشکل بهداشت عمومی است که با دفع مداوم مشکل، نادر یا ناقص مشخص می شود [1]. شیوع یبوست از 0.7 درصد تا 81 درصد در سراسر جهان، به ویژه در افراد مسن، متغیر است [2، 3]. یبوست انتقال آهسته (STC) یک شکایت شایع گوارشی در بین 13 تا 37 درصد از بیماران مبتلا به یبوست مزمن مقاوم به درمان است [4، 5]. داده های اپیدمیولوژیک نشان دهنده بروز بالاتر STC در بین زنان جوان نسبت به مردان است [6]. STC باعث یبوست غیرقابل درمان می شود، پاسخ کمی به درمان محافظه کارانه و تمایل به اختلال نورودژنراتیو نشان می دهد. نه به سادگی یک بیماری عملکردی، بلکه نیازمند درمان تهاجمی و تهاجمی است [7].

تعدادی از داروهای شیمیایی فعلی مانند ملین های اسمزی یا ترشحی و عوامل حجیم کننده به طور جهانی برای

درمان یبوست [8]، اگرچه کاربرد آنها به دلیل هزینه های زیاد و عوارض جانبی شکمی مانند درد، گرفتگی عضلات و نفخ محدود است [9]. در حال حاضر، تنظیم دستگاه گوارش تمرکز اصلی درمان های یبوست است. سیزاپراید ابتدا به عنوان یک عامل تحریک کننده برای درمان بیماری های معده تولید شد، اما بعداً به دلیل خطر آریتمی قلبی کنار گذاشته شد [10].

Tegaserod یک آنتاگونیست انتخابی گیرنده {0}هیدروکسی تریپتامین است که می تواند پریستالسیس و ترشح روده را تحریک کند [11، 12]. پروکالوپراید یک مشتق جدید دی هیدرو بنزوفوران کربوکسامید و آگونیست گیرنده HT با گزینش پذیری و ویژگی بالا است که می تواند حرکت معده، روده کوچک و روده بزرگ را افزایش دهد و در پویایی سریعتر عمل کند [13-15]. به عنوان یک مشتق پروستاگلاندین E1، لوبی پروستون می تواند به طور انتخابی کانال CIC را برای ترویج ترشح گوارشی و افزایش اثرات انتقال روده ای فعال کند [16].

تحرک در یبوست یک مشکل گسترده است، اما علت آن هنوز مشخص نیست. با این وجود، شواهد قانع‌کننده نقش سلول‌های بینابینی کژال (ICC) را در پاتوژنز یبوست نشان داده‌اند [17]. ICC بین پایانه های عصبی و سلول های ماهیچه صاف در دستگاه گوارش یافت می شود. ICC به طور کلی به عنوان سلول های ضربان ساز برای فعالیت های گوارشی و به عنوان واسطه های انتقال عصبی-عضلانی شناخته می شود [18]. مطالعات نشان داده اند که تراکم ICC در کولون بیماران مبتلا به یبوست آهسته در مقایسه با بیماران عادی به طور قابل ملاحظه ای کمتر است [19]. بر این اساس، کاهش تعداد ICC ممکن است منجر به کمبود فعالیت موج آهسته شود، بنابراین بر پاسخ انقباضی تأثیر می‌گذارد و باعث ایجاد تأخیر در ترانزیت در بیماران یبوست می‌شود. برای این نکته، بهبود ICC با استفاده از داروها ممکن است برای درمان یبوست آهسته حمل و نقل ضروری باشد.

داروهای گیاهی مختلف و فرمول سنتی چینی Mula اخیراً توجه را به عنوان درمان های جدید برای درمان یبوست مزمن در نتیجه بهبود تولید مدفوع جلب کرده اند [20، 21]. هرباسیستانچیک داروی گیاهی سنتی است که در درمان بیماری‌های مزمن کلیوی، ناباروری زنان، منوراژی فراوان و ناتوانی جنسی استفاده می‌شود [22، 23]. هرباسیستانچبا بیان عوامل مرتبط با آپوپتوز و عوامل نوروتروفیک در سلول های MES23.5 از آپوپتوز نورون مغز جلوگیری می کند [24]. Herba Cistanche همچنین پتانسیل دارویی در درمان سندرم کمبود کلیه Yang-Qi-Yang نشان داده است. یک مطالعه اخیر نشان داده است که هرباسیستانچتنفس میتوکندری و وضعیت آنتی اکسیدانی گلوتاتیون را در کاردیومیوسیت های H9c2 افزایش می دهد [25].

TCM معتقد است که یبوست رابطه نزدیکی با کلیه ها دارد. کلیه که در ناحیه تناسلی خارجی و مقعد باز می شود، ادرار و مدفوع را کنترل می کند. حمل و نقل زباله به ارتقاء چی کلیه و تغذیه یین کلیه متکی است. اگر یانگ کلیه کمبود داشته باشد یا آتش دروازه حیات خاموش شود، احتقان سرد روده بزرگ منجر به راکد شدن مواد زائد می شود. یبوست نیز به دلیل حرکت خشک روده ایجاد می شود زیرا کمبود جوهر کلیه نمی تواند مایع کافی تولید کند [26].

هرباسیستانچیک گیاه متحد کننده رایج است که طعم شیرین و شور و طبیعت گرم دارد. منسوب به روده بزرگ و مریدین های کلیه، می تواند یانگ کلیه را تقویت کند و روده را مرطوب کند تا یبوست را از بین ببرد. این گیاه و فرآورده های دارویی چینی آن به طور گسترده ای برای درمان یبوست با اثربخشی قابل توجهی استفاده شده است [27].

در چین، اثرات هرباسیستانچریشه های مربوط به یبوست ثبت شده است [28، 29] و در Materia Medica چینی Shen Nong به عنوان "ساقه های آبدار خشک شده ازسیستانچگونه» [30]؛ با این حال، اثبات علمی بر تأثیر هرباسیستانچریشه های یبوست تاکنون وجود نداشته است، دوز موثر بالینی 20 گرم در روز در فارماکوپه چینی است و اثر بالینی با دوز افزایش نمی یابد.

از آنجایی که هرباسیستانچبسیار کمیاب است [31]، استاندارد کردن دوز بالینی آن برای درمان STC توسط مطالعه تجربی نه تنها از درمان ناموفق به دلیل دوز ناکافی جلوگیری می کند، بلکه بیماران را از ضررهای اقتصادی و حتی مشکلات دارویی ناشی از استفاده بیش از حد دور نگه می دارد. ما امیدواریم

نتایج می تواند یک پایه علمی برای داروهای جدید برای یبوست ایجاد کند. بنابراین، بررسی هربا آبی مهم استسیستانچعملکرد ارتقای روده و اثر آن بر ICC در مطالعه حاضر.

2. مواد و روشها

2.1. تهیه عصاره آبی گیاه سیستانش.

همه هرباسیستانچاز Nanjing Haichang China Medicine Group Co., Ltd. (نانجینگ، چین) خریداری شد که طبق روش‌های استاندارد گیاه‌شناسی قومی از مزارع در منطقه سینکیانگ چین برداشت، جمع‌آوری و پردازش شد. هویت این گیاه از نظر مورفولوژیکی توسط پروفسور تو لین لو از دانشگاه پزشکی چینی نانجینگ، نانجینگ، چین مشخص شد. یک نمونه کوپن (NUCMCHS-2015628) در کالج علوم بهداشت، دانشگاه پزشکی چینی نانجینگ، نانجینگ، چین سپرده شد.

برش های هرباسیستانچبا وزن 500 گرم با استفاده از مخلوط کن برقی پودر شده و در 5000 میلی لیتر آب مقطر استخراج شد و سپس عصاره آبی در دمای 100 درجه سانتیگراد به مدت 2 ساعت با استفاده از دستگاه استخراج گردشی خالص شد.

منافذ غشایی (Millipore, Billerica, MA, USA) و بقایای به‌دست‌آمده از عصاره‌ها در 4000 میلی‌لیتر آب حل شدند. پس از استخراج رفلاکس، عصاره ها جمع آوری و تبخیر شدند تا محصول نمونه نهایی به دست آید. عصاره های آبی به گلوله های خشک (1 گرم در میلی لیتر) با استفاده از a

برای استفاده بعدی نمونه‌های جامد در آب مقطر بازسازی شدند تا دوزهای مورد نیاز 10، 20 و 40 میلی‌گرم بر کیلوگرم وزن بدن را برای آزمایش به دست آورند.

2.2. حیوانات.

پروتکل آزمایشی مورد استفاده در این مطالعه بر اساس رویه‌های اخلاقی و مراقبت‌های علمی توسط کمیته مراقبت و استفاده از حیوانات طب سنتی سوژو، سوژو، چین (SHTCM-IACUC؛ شماره تأیید: PNU{2}) بررسی و تأیید شد. }). تمام موش‌های نر (سویه Sprague Dawley) با ag از مرکز تحقیقات حیوانات آزمایشگاهی شانگهای مطابق با دستورالعمل‌های مؤسسه ملی بهداشت خریداری شدند. حیوانات به رژیم غذایی استاندارد (AIN-93 M) و آب لوله کشی آزادانه دسترسی داشتند و به صورت جداگانه در رطوبت نسبی درصد فولاد ضد زنگ قرار گرفتند و روزانه در معرض 12 ساعت نور طبیعی و 12 ساعت تاریکی قرار گرفتند.

2.3 طراحی تجربی.

طبق مطالعات قبلی از لوپرامید برای القای یبوست در موش‌ها استفاده شد [32، 33]. در مجموع 60 موش به طور تصادفی به 5 گروه (در هر گروه) تقسیم شدند: A: گروه نرمال (NG)، B: گروه مدل (گروه تحت درمان با لوپ به علاوه وسیله نقلیه)، C: گروهی از موش های صحرایی یبوست تحت درمان با عصاره آبی کم Herba Cistanche (گروه تحت درمان با Lop به علاوه LAEHC)، D: گروهی از موش های صحرایی یبوست تحت درمان با عصاره آبی متوسط ​​Herba Cistanche (گروه تحت درمان با Lop + MAEHC) و E: گروهی از موش های صحرایی یبوست تحت درمان با عصاره آبی بالا Herba سیستانچ (گروه تحت درمان با لوپ به علاوه HAEHC). گروه A با نرمال سالین (10 میلی لیتر بر کیلوگرم) تیمار شد. گروه B با لوپرامید تحت درمان قرار گرفت

(4 میلی گرم بر کیلوگرم)؛ گروه C با لوپرامید (4 میلی گرم بر کیلوگرم) و عصاره آبی کم گیاه هربا سیستانش (1 گرم بر کیلوگرم) تیمار شد. گروه D با لوپرامید (4 میلی گرم بر کیلوگرم) و عصاره آبی متوسط ​​هربا سیستانش (2 گرم بر کیلوگرم) و گروه E با لوپرامید (4 میلی گرم بر کیلوگرم) و عصاره آبی بالا هربا سیستانش (4 گرم در کیلوگرم) تیمار شدند. کیلوگرم). به همه موش‌ها از گروه نرمال 0.9 درصد کلرید سدیم تزریق شد، در حالی که به سایر موش‌ها لوپرامید در 0}} درصد کلرید سدیم دو بار در روز به مدت 3 روز متوالی برای ایجاد یبوست تزریق شد. عصاره آبی هربا سیستانچ در آب معلق شد و از روز چهارم تا روز 18 به صورت خوراکی در گروه C، گروه D و گروه E به صورت خوراکی تجویز شد، در حالی که گروه های A و B حجم ثابتی از آب را از طریق گاواژ دریافت کردند.

2.4. شرایط کروماتوگرافی

پروفیل HPLC در سیستم کروماتوگرافی مایع Shimadzu (توکیو، ژاپن) انجام شد که شامل یک پمپ LC-20AT و یک

فاز متحرک ایزوکراتیک متانول 0.1 درصد اسید فرمیک (80:20، V/V) و با سرعت جریان 1.0 میلی‌لیتر بر دقیقه اجرا شد. . جداسازی کروماتوگرافی بود

اندازه ذرات 5 متر، Beijing Dikma Science and Technology Co., Ltd., Beijing, China).

2.5. تجزیه و تحلیل ورزش، مصرف غذا، مصرف آب، بدن

صمغ قابل کشت (سوسپانسیون آبی 20 درصد زغال چوب و 10 درصد صمغ قابل کشت) به صورت خوراکی در حجم 25 میلی لیتر بر کیلوگرم از هر حیوان تجویز شد. پس از 30 دقیقه، حیوانات به صورت انسانی قربانی دررفتگی دهانه رحم شدند و تشریح شدند. روده کوچک از پیلور تا سکوم طی شد و مسافت طی شده توسط پودر زغال چوب و طول کل روده کوچک اندازه گیری شد. برای یک موش صحرایی، درصد عبور روده به عنوان درصد مسافت طی شده توسط غذای زغال چوب نسبت به طول کل روده کوچک محاسبه شد. معادله زیر نرخ عبور روده ای (درصد) را محاسبه می کند: مسافت طی شده توسط زغال چوب/فاصله پیلور تا سکوم 100 درصد.

2.6. نمونه خون و جمع آوری بافت. در پایان دوره آزمایشی، موش‌ها 12 ساعت ناشتا بودند اما اجازه دسترسی آزاد به آب را داشتند. سپس تمام موش‌ها 30 دقیقه بعد با تزریق داخل صفاقی پنتوباربیتال سدیم (50 میلی‌گرم بر کیلوگرم) بیهوش شدند و روی میز تنظیم‌شده دما قرار گرفتند. نمونه های خون جمع آوری و با سرعت 3500 دور در دقیقه به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شد تا سرم بدست آید. کولون بلافاصله تقسیم شد و با نرمال سالین در دمای 4 درجه سانتیگراد شستشو داده شد و سپس به دو قسمت تقسیم شد. یک قطعه در فرمالین 10 درصد تثبیت شد و در پارافین تقسیم شده برای تجزیه و تحلیل ایمونوهیستوشیمی بعدی (IHC) پردازش شد، در حالی که دیگری وزن و مو بود. تغییر در ورزش، مصرف غذا، آب

در دمای 80 درجه سانتیگراد نگهداری می شوند تا زمانی که مورد سنجش قرار گیرند. مصرف، وزن بدن و مو روزانه در طول دوره آزمایشی مشاهده و ثبت شد. ما "تغییرات در تمرین" را به دنبال مراحل خاص مشاهده کردیم: جعبه خودساخته (60 سانتی متر ارتفاع، 50 سانتی متر طول و 80 سانتی متر عرض با دیواره محیطی تیره) برای آزمایش میدان باز استفاده می شود. زمین سفید با خط سیاه در اتاقی تاریک و ساکت به الماس (12 سانتی متر) تقسیم شد. یک لامپ 100 واتی 1 متر بالاتر از مرکز جعبه آویزان شده است. موش ها در روزهای چهارم، ششم، دوازدهم و هجدهم مدل سازی در مرکز جعبه قرار گرفتند. تعداد مربع هایی که موش ها در مدت 5 دقیقه از آنها عبور کردند به عنوان امتیاز حرکت افقی و زمان عمودی موش ها در عرض 5 دقیقه به عنوان امتیاز حرکت عمودی استفاده شد. نمرات افقی و حرکتی به اضافه نمرات حرکت عمودی میزان ورزش موش ها را نشان می دهد. هر موش یک بار اندازه گیری شد [34، 35].

2.7. اندازه گیری پارامتر مدفوع

در روز آخر مصرف خوراکی، گلوله های مدفوع تازه از هر موش SD به مدت 6 ساعت در لوله های ته گرد جمع آوری شد و وزن کل هر گروه ثبت شد. برای تعیین میزان رطوبت مدفوع، از تعادل الکتریکی برای خشک کردن گلوله های مدفوع تا رسیدن به وزن ثابت استفاده کردیم و وزن خشک را اندازه گیری کردیم. میزان رطوبت

2.8. ارزیابی GAS، MTL، SS، و CGRP.

غلظت گاسترین (GAS)، موتیلین (MTL)، سوماتوستاتین (SS) و پپتید مرتبط با ژن کلسی تونین (CGRP) در سرم با استفاده از کیت های تجاری موجود توسط ELISA برآورد شد.

2.9. تجزیه و تحلیل بافت شناسی.

کولون های عرضی جمع آوری شده از موش های صحرایی SD با فرمالین 10 درصد به مدت 12 ساعت تثبیت شدند.

برش های ضخیم متر که با هماتوکسیلین و ائوزین رنگ آمیزی شدند (H&E, Sigma- Aldrich, MO, USA). ویژگی‌های مورفولوژیکی این مقاطع در زیر میکروسکوپ نوری مشاهده شد و پس از آن طول پرز، ضخامت کریپت و ضخامت ماهیچه با استفاده از Leica Application Suite (Leica Microsystems, Switzerland) اندازه‌گیری شد.

2.10. آنالیز ایمونوهیستوشیمی

ما از روش های زو و همکاران پیروی کردیم. (2016) [36]; مقاطع 5 متری بدون رنگ بود

با خرگوش آنتی سی کیت (1: 100) در دمای 4 درجه یک شبه رنگ آمیزی شد. آنتی بادی ثانویه و روش کمپلکس آویدین بیوتین پراکسیداز طبق دستورالعمل سازنده استفاده شد. یک کنترل ایمونوگلوبولین منفی برای از بین بردن اتصال غیر اختصاصی استفاده شد. سطوح بیان c-kit

2.11. تجزیه و تحلیل نرخ انتقال روده.

نسبت حمل و نقل روده ای طبق پروتکل های گزارش شده قبلی انجام شد [36]. به طور خلاصه، پس از 14 روز درمان، همه موش‌های SD در معرض 12 ساعت ناشتا بودند اما اجازه دسترسی آزاد به آب را داشتند.

واکنش زنجیره ای پلیمراز در زمان واقعی سطوح بیان ژن c-kit، SCF، و mRNA های PI3K در کولون با استفاده از کیت استخراج RNA کل (TIANGEN Biotech،

پکن، چین) طبق پروتکل های سازنده. Real-time PCR با ABI StepOnePlus Real-Time PCR System (ABI) انجام شد. SYBR Green I Real-Time PCR Master Mix (QPK201، Toyobo، Japan) برای شناسایی محصولات PCR استفاده شد. واکنش ها در سه تکرار انجام شد. پس از آن، بافت کولون تازه موش با وزن 0.5 گرم همولوگ شد.

l) طبق دستورالعمل سازنده با استفاده از معرف TRIZol (Invitrogen، ایالات متحده آمریکا) استخراج شد. یک کیت رونویسی-PCR معکوس (Takara Biotechnology Co., Inc.) برای سنتز اولین رشته cDNA مطابق با پروتکل سازنده استفاده شد. تمام پارامترهای مورد نظر در جدول 1 نشان داده شده است. پروتکل دوچرخه سواری تحت شرایط زیر بود: 95 درجه سانتیگراد برای 5 دقیقه (دناتوره شدن DNA)، به دنبال آن 40 چرخه 95 درجه سانتیگراد برای 15 ثانیه، 60 درجه سانتیگراد برای 20 ثانیه و 72 درجه سانتیگراد برای 40 ثانیه تجزیه و تحلیل منحنی ذوب در پایان چرخه های تقویت انجام شد.

2.12. تجزیه و تحلیل وسترن بلات.

محتوای پروتئین c-kit و SCF در نمونه های هموژن کولون با وسترن بلات ارزیابی شد. به طور خلاصه، کل پروتئین های هموژن با استفاده از روش اسید بیسینکونیک (Pierce Biotechnology, Rockford, IL, USA) تعیین شد. ژل سدیم دودسیل سولفات-پلی آکریل آمید (SDS-PAGE) برای جداسازی پروتین ها در سیستم الکتروفورز BioRad (BioRad Laboratories, Hercules, CA, USA) استفاده شد. سپس پروتئین ها به غشاهای پلی وینیلیدین دی فلوراید (PVDF) منتقل شدند. پس از 2 ساعت تیمار با بافر مسدود کننده در TBS حاوی 5 درصد شیر بدون چربی در دمای اتاق، غشاهای PVDF یک شبه با کیت آنتی سی رقیق 1:1000 (سانتا کروز، کالیفرنیا، ایالات متحده)، 1:500 ضد رقیق شده انکوبه شدند. SCF (سیگما، MO،

ایالات متحده آمریکا)، و به ترتیب 1: 8000 آنتی بادی رقیق شده ضد اکتین (Kangchen، شانگهای، چین). اتصال آنتی بادی اولیه با استفاده از آنتی بادی ثانویه کونژوگه مربوط به HRP (بیوتیم، جیانگ سو، چین) شناسایی شد. یک کیت شیمی‌تابی پیشرفته (Pierce Biotechnology Inc.، Rockford، IL، USA) و سیستم تصویربرداری مادون قرمز Odyssey (شرکت ژن، هنگ کنگ) برای تشخیص نورتابی شیمیایی مورد استفاده قرار گرفت. پرولاکتین خانه داری به عنوان کنترل بار استفاده شد. میزان بیان پروتئین نسبت به سطوح اکتین ارائه می شود.

2.13. تحلیل آماری.

داده های اندازه گیری به عنوان میانگین خطای استاندارد میانگین (SEM) گزارش و با استفاده از نرم افزار SPSS مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.

16. 0 نرم افزار (SPSS، Chicago، IL، USA). برای تعیین تفاوت معنی دار در تمامی پارامترها از آنالیز واریانس یک طرفه (ANOVA) و به دنبال آن آزمون های چند دامنه ای دانکن استفاده شد. مقادیر از نظر آماری معنی دار در نظر گرفته شد

3. نتایج

3.1. ترکیب و اجزای عملکردی گیاه هربا سیستانش.

همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است، ریشه هربا سیستانچ حاوی غلظت بالایی از چندین جزء فعال زیستی مرتبط با اثرات ملین است. غلظت کل اکیناکوزیدها و کل ورباکوزیدها به ترتیب 0.64 mg/g و 0.16 mg/g بود. دو قله نشان دهنده سطوح بالای اکیناکوزید و ورباسکوزید در LP در زمان ماند مناسب توسط کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) شناسایی شد.

3.2. مشاهده عمومی.

موش های SP در طول دوره آزمایش نمردند، که نشان دهنده امنیت و عملکرد بهتر مدل حیوانی است. در مقایسه با گروه A، موش‌های گروه مدل دارای خز کرکی، سستی، مدفوع خشک و

با افزایش زمان مدل سازی بدتر شد.

3.3. تأثیر AEHC بر تعداد مدفوع و محتوای رطوبت در موش‌های صحرایی یبوست ناشی از لوپرامید.

در مقایسه با مدفوع طبیعی، مدفوع در گروه های B، C، D و E خشک، کوچک و سفت بود و قبل از درمان بدون سوزش بود.

پس از همه، موش ها با لوپرامید تزریق شدند (درمان با دارو علائم را به عنوان بدن کاهش داد و 3(b)).

وزن در بین تمام گروه‌های آزمایشی تفاوت معنی‌داری نداشت، اگرچه گروه E وزن بدن کمی پایین‌تر از سایر گروه‌ها نشان داد (شکل 2(a)). علاوه بر این، موش های SD مبتلا به یبوست به طور قابل توجهی غذای کمتری نسبت به گروه A ( ) خوردند، در حالی که تفاوت بین گروه های B، C، D و E (شکل 2(b)) معنی دار نبود. مصرف آب نیز بین گروه A و گروه B تغییری نکرد و افزایش معنی داری در مصرف آب مشاهده نشد

که درمان با AEHC هیچ تغییری ایجاد نکرد. اگرچه نرخ عبور روده ای در گروه های C، D و همچنین به طور قابل توجهی بالاتر بود، گروه های C، D و E نسبت به طور قابل توجهی پایین تر از گروه A بودند.

3.4. تأثیر AEHC بر میزان انتقال روده کوچک در موش‌های صحرایی یبوست ناشی از لوپرامید.

همانطور که از شکل 4 مشاهده می شود، هیچ تفاوتی در زمان انتقال اولیه روده کوچک در بین پنج گروه مشاهده نشد. گروه B نسبت پیشرانه پودر زغال چوب به طور آشکار کمتری در مقایسه با گروه A دارد (𝑃 < 0.01).="" اگرچه="" میزان="" انتقال="" روده="" در="" گروه‌های="" c،="" d="" و="" e="" نیز="" به="" طور="" قابل‌توجهی="" بالاتر="" از="" گروه="" b="" بود="" (05/0="" ❑)،="" گروه‌های="" c،="" d="" و="" e="" نسبت‌های="" کمتری="" نسبت="" به="" گروه="" a="">

3.5. مداخله با AEHC تا حدی عملکرد شاخص حرکتی کولون را افزایش می دهد.

سطوح سرمی GAS و MTL به‌دست‌آمده از موش‌های گروه B در مقایسه با موش‌های گروه A به طور قابل‌توجهی کاهش یافت (𝑃 < {{0}}.01،="" به="" عبارت="" دیگر).="" از="" سوی="" دیگر،="" گروه‌های="" c،="" d،="" و="" e="" (𝑃="">< 0.{9}}5،="" به‌طور="" مؤثر)="" سطوح="" بالاتری="" از="" gas="" و="" mtl="" ناشی="" از="" تجویز="" عصاره‌های="" گیاه="" هربا="" سیستانچ="" در="" مقایسه="" با="" گروه="" b="" دارند.="" مقادیر="" ss="" در="" موش‌های="" گروه="" b="" در="" مقایسه="" با="" گروه="" a="" بیشتر="" بود="" (❑="">< 0.01).="" گروه‌های="" c،="" d="" و="" e="" سطوح="" ss="" را="" کاهش="" داده‌اند="" (❑="">< 0.05)="" (شکل="" 5).="" در="" مقایسه="" با="" موش‌های="" یبوست،="" سطح="" cgrp="" در="" موش‌های="" نرمال="" گروه="" a="" (❑="">< 0.01)="" و="" در="" گروه‌های="" c،="" d="" و="" e="" تحت="" درمان="" با="" herba="" cistanche="" ثابت="" بود="" (❑=""> 0.05).

3.6. تغییرات بافتی کولون

برای بررسی اینکه آیا درمان AEHC می‌تواند باعث ایجاد تغییر ساختاری در بافت کولون شود، طول پرز، ضخامت لایه کریپت و ضخامت عضله در کولون‌های عرضی موش‌ها در پنج گروه به دنبال رنگ‌آمیزی H&E اندازه‌گیری شد. با مقایسه آسیب شناسی روده بزرگ موش های صحرایی در هر گروه، مخاط کولون صاف و دارای شریان های کوچک و سیاهرگ های کوچک در زیر مخاط و تعداد زیادی سلول چربی بود. علاوه بر این، لایه عضلانی شامل سلول های عضلانی صاف و ساب سروزا کامل بود. میانگین طول پرز در گروه B به طور قابل توجهی کوتاهتر از گروه A بود (𝑃 < {{0}}.01).="" با="" این="" حال،="" میانگین="" طول="" پرز="" در="" گروه="" c="" در="" مقایسه="" با="" گروه="" b="" (شکل="" های="" 6="" و="" 7)="" به="" میزان="" زیادی="" بیش="" از="" 30="" درصد="" افزایش="" یافته="" است="" (❑="">< 0.05).="" در="" همین="" حال،="" میانگین="" طول="" پرز="" در="" گروه="" های="" d="" و="" e="" در="" مقایسه="" با="" گروه="" b="" بسیار="" افزایش="" می="" یابد="" (شکل="" 6(a)="" و="" 6(b))="" (❑="">< 0.01).="" علاوه="" بر="" این،="" تغییر="" ضخامت="" عضله="" بسیار="" شبیه="" به="" طول="" پرز="" بود.="" در="" گروه="" b،="" ضخامت="">

در مقایسه با گروه A به طور چشمگیری نازک تر بود. با این حال، سطح ضخامت عضله در گروه های C، D و E 30 تا 35 درصد نسبت به گروه B افزایش یافت (شکل 6 و 7). به طور کلی، این یافته ها نشان می دهد که AEHC ممکن است طول پرز و ضخامت عضله را در کولون موش های یبوست افزایش دهد.

3.7. تجویز AHEC باعث افزایش بیان پروتئین c-kit و SCF شد.

رنگپذیری آن در کولون تشخیص داده شد زیرا سلولهای همه گروهها برای c-kit مثبت بودند. همانطور که در شکل 8 نشان داده شده است، سطح بیان c-kit در گروه B کمتر از گروه A بود (𝑃 < 0.05).="" سطح="" بیان="" c-kit="" در="" گروه="" c="" بالاتر="" از="" آن="" در="" گروه="" b="" بود="" (𝑃="">< 0.{{20}}5)،="" در="" حالی="" که="" c-kit="" بیشتری="" در="" گروه="" d="" و="" e="" نسبت="" به="" گروه="" b="" (𝑃="">< 0.05).="" پس="" از="" تیمار="" با="" غلظت="" های="" مختلف="" عصاره="" آبی="" گیاه="" هربا="" سیستانش="" به="" مدت="" 2="" هفته،="" سطح="" بیان="" پروتئین="" c-kit="" و="" scf="" با="" آنالیز="" وسترن="" بلات="" شناسایی="" شد.="" تجزیه="" و="" تحلیل="" وسترن="" بلات="" نشان="" داد="" که="" سطح="" بیان="" c-kit="" و="" scf="" پس="" از="" درمان="" با="" لوپرامید="" در="" کولون="" موش="" ها="" به="" طور="" قابل="" ملاحظه="" ای="" کمتر="" بود="" (شکل="" 9).="" شکل="" 8(e)="" نشان="" می="" دهد="" که="" کاهش="" c-kit="" در="" موش="" های="" صحرایی="" یبوست="" به="" طور="" قابل="" توجهی="" 31.2="" درصد="" پس="" از="" درمان="" موش="" ها="" با="" 500="" گرم="" در="" میلی="" لیتر="" aehc="" (❑="">< 0.05)="" افزایش="" یافت.="" علاوه="" بر="" این،="" درمان="" با="" 100="" و="" 200="" گرم="" در="" میلی="" لیتر="" aehc="" سطح="" بیان="" پروتئین="" c-kit="" را="" افزایش="" داد.="" بیان="" پروتئین="" scf="" در="" تیمار="" با="" 100،="" 200="" و="" 500="" گرم="" در="" میلی="" لیتر="" aehc="" به="" ترتیب="" به="" میزان="" 20.1،="" 24.7="" و="" 8.4="" درصد="" افزایش="" یافت="" (شکل="" 9).="" 3.8.="" اثر="" aehc="" بر="" بیان="" mrna="" c-kit،="" scf="" و="" pi3k.="" برای="" بررسی="" اینکه="" آیا="" درمان="" aehc="" می‌تواند="" بر="" تنظیم="" mrna="" مربوط="" به="" انقباض="" عضلانی="" تأثیر="" بگذارد،="" تغییرات="" در="" سطوح="" بیان="" c-kit،="" scf="" و="" pi3k="" در="" کولون="" موش‌های="" یبوست="" با="" استفاده="" از="" پرایمرهای="" خاص="" مشاهده="" شد.="" نتایج="" نشان="" داد="" که="" سطوح="" mrna="" c-kit="" در="" گروه="" b="" در="" مقایسه="" با="" گروه="" a="" (❑="">< 0.05)="" به="" طور="" معنی‌داری="" کمتر="" بود،="" در="" حالی="" که="" سطوح="" mrna="" در="" گروه‌های="" c،="" d="" و="" e="" بالاتر="" از="" گروه="" b="" بود="" (❑=""><0.05). (شکل="" 10).="" mrna="" را="" نیز="" بررسی="">

بیان SCF، لیگاند کیت. بیان mRNA ژن SCF در موش های گروه B به طور قابل توجهی کمتر از گروه A بود، در حالی که درمان با AEHC در گروه های C، D و E بیان mRNA SCF را افزایش داد (شکل 1{4}}). علاوه بر این، ما اثر AEHC را بر بیان ژن PI3K بررسی کردیم. در روز 14، سطح بیان ژن PI3K در گروه‌های C، D و E به‌طور معنی‌داری بالاتر از گروه B بود (05/0 <>

4. بحث

یبوست یک اختلال بسیار شایع است که با حرکات ضعیف روده مشخص می شود. این امر کیفیت زندگی را تا حد زیادی کاهش می دهد و بار اقتصادی زیادی را هم بر بیماران و هم بر بیمه سلامت ملی وارد می کند [32]. محصولات طبیعی و مواد غذایی دارویی در حال حاضر به دلیل پتانسیل تبدیل شدن به داروهای جدید مورد استفاده برای درمان یبوست توجه روزافزونی را به خود جلب می کنند [37، 38]. بنابراین، ما اثرات درمانی AEHC را بر روی موش های صحرایی یبوست ناشی از لوپرامید مطالعه کردیم. لوپرامید، آتروپین-دیفنوکسیلات و مورفین به طور گسترده برای ایجاد یبوست در حیوانات آزمایشگاهی استفاده می شوند. در میان این سه دارو، لوپرامید باعث طولانی شدن مدت تخلیه مدفوع و تاخیر در انتقال مجرای روده می شود، زیرا هم ترشح آب و هم حرکت صاف در دیواره روده را مهار می کند [39]. تجزیه و تحلیل وزن بدن در این مطالعه هیچ تفاوتی در هر گروه پیدا نکرد. پس از آزمایش نیز هیچ تفاوتی مشاهده نشد. گروه با دوز پایین AEHC همچنان کمترین وزن بدن را داشتند، با این حال گروه مدل و گروه نرمال شاهد بالاترین وزن بدن بودند. یبوست به طور کلی یک بیماری عملکردی است. یبوست انتقال آهسته ناشی از این مطالعه بر جذب مواد مغذی موش‌ها و وزن بدن آنها در طول آزمایش تأثیری نداشت. تفاوت در مقدار مدفوع موش ها و میزان رطوبت آنها بین گروه ها قبل از مدل سازی وجود نداشت. با این حال، هر دو پس از مدل‌سازی به طور قابل‌توجهی کاهش یافتند و میزان رطوبت مدفوع پس از استفاده از AEHC در دوزهای مختلف افزایش یافت. پس از مطالعه میزان پیشرانه پودر کربن کولون.

از موش‌ها، گروه مدل کاهش آشکاری از میزان را مشاهده کرد، در حالی که در گروه‌های با دوز کم، دوز متوسط ​​و دوز بالا AEHC طبیعی باقی ماند. نتایج نشان داد که یبوست مزمن ترانزیت ناشی از لوپرامید درمان شده با دوزهای مختلف هربا سیستانش می تواند عملکرد پیشرانه روده بزرگ را به درجات مختلف بازیابی کند. هورمون‌های گوارشی مواد فعال زیستی با کارایی بالا هستند که توسط سلول‌های غدد درون ریز مخاط دستگاه گوارش و پانکراس ترشح می‌شوند و دارای اثرات هیجانی و مهاری برای تنظیم عملکرد حرکتی دستگاه گوارش هستند [40، 41]، که GAS، MTL، و SS اثرات عمده‌ای دارند. دو هورمون اول ترشح شیره گوارشی را تحریک می‌کنند، ماهیچه صاف دستگاه گوارش را منقبض می‌کنند، حرکت محتویات گوارشی را تقویت می‌کنند و حرکت گازهای روده‌ای را تحریک می‌کنند. برعکس، SS ترشح شیره گوارشی، انقباض ماهیچه صاف دستگاه گوارش و تخلیه دستگاه گوارش را مهار می کند [42]. سطوح GAS و MTL در بافت روده بزرگ گروه مدل کمترین میزان را نشان می‌دهد، که نشان می‌دهد روش مدل‌سازی مطمئناً غلظت GAS و MTL را در بافت کولون کاهش می‌دهد. به عنوان هورمون‌های اصلی گوارشی تحرک کولون، غلظت GAS و MTL با دوزهای مختلف AEHC افزایش یافت و در نتیجه تحرک کولون را افزایش داد. در مقابل، سطح SS در بافت روده بزرگ گروه مدل بالاترین بود، که نشان می‌دهد روش مدل‌سازی می‌تواند غلظت SS را در بافت کولون افزایش دهد. CGRP یکی از قوی‌ترین گشادکننده‌های عروق است و اثر آرامش‌بخش آن 10-برابر قوی‌تر از اثر انقباض است. به عنوان یک انتقال دهنده عصبی یا تعدیل کننده عصبی مهم که عملکردهای گوارشی را تنظیم می کند، CGRP می تواند اکثر حرکات دستگاه گوارش و ترشح شیره های گوارشی مختلف را مهار کند [43]. غلظت CGRP در گروه مدل بالاتر از گروه A بود که نشان می‌دهد روش مدل‌سازی می‌تواند غلظت CGRP را در بافت روده بزرگ افزایش دهد که ممکن است یکی از عوامل کاهش پریستالسیس کولون باشد که منجر به یبوست می‌شود. غلظت CGRP در بافت روده بزرگ گروه‌های AEHC کمتر از گروه مدل بود، که نشان می‌دهد AEHC اثر بازدارندگی نسبتاً ضعیفی بر حرکت کولون دارد. c-Kit یک پروتئین گذرنده است. فاکتور سلول های بنیادی (SCF) لیگاند آن توسط سلول های عصبی و سلول های ماهیچه صاف تولید می شود. این باعث توسعه و تمایز ICC می شود و عملکرد فیزیولوژیکی طبیعی آن را حفظ می کند. برچسب گذاری c-Kit به طور غیرمستقیم کمیت و چگالی ICC را منعکس می کند [44، 45]. علاوه بر این، سلول ICC نقش کلیدی در تنظیم حرکت دستگاه گوارش دارد و به عنوان ضربان ساز حرکت دستگاه گوارش عمل می کند. بنابراین، برخی از اختلالات تحرک گازی روده ای ممکن است باعث کاهش در کمیت و عملکرد سلول های ICC شود. بر اساس مطالعات قبلی، تعداد سلول ها در روده بزرگ بیماران مبتلا به یبوست مزمن حمل و نقل کاهش یافته است. از این رو، مطالعه حاضر با استفاده از روش‌های بیان خاص و ایمونوهیستوشیمی، سلول‌های کولون موش‌ها را مشاهده کرد. در مقایسه با گروه نرمال، تعداد سلول ها در گروه مدل به طور قابل توجهی کاهش یافت اما پس از درمان افزایش یافت. این مطالعه نشان داد که سلول‌های ICC و فاکتورهای سلول بنیادی (SCF) ارتباط نزدیکی با مسیر سیگنال c-kit/SCF دارند. SCF لیگاند طبیعی c-kit است که در بافت‌های مختلف بدن، اما عمدتاً بیان می‌شود

تولید شده توسط سلول های استرومایی در مغز استخوان. هر مونومر c-kit با یک SCF از طریق حوزه های خارج سلولی 1-3 ترکیب می شود. پس از دیمریزاسیون SCF، ساختار مونومر c-kit تغییر می کند و همودایمریزاسیون را ایجاد می کند که سپس منجر به اتوفسفوریلاسیون باقی مانده اسید آمینه در غشای سلولی می شود و مولکول های سیگنال دوم مختلف را برای تنظیم عملکرد سلولی ICC تحریک می کند. دومین مولکول سیگنال فسفاتیدیل‌لینوزیتول 3-کیناز (PI3K)، آپولیپوپروتئینی است که 4،5- دی فسفوئینوزیتید را از طریق ترکیب با تیروزین 721 کیت به 3،4،{10}}تری فسفوئینوزیتید تبدیل می‌کند. تحقیقات قبلی نشان داد که مهارکننده‌های PI3K Wortmannin و LY294002 با مسدود کردن سیگنال منجر به توسعه غیرطبیعی ICC شدند [46]. آزمایش ما نشان داد که بیان c-kit و پروتئین SCF و mRNA در گروه مدل ابتدا کاهش یافت اما سپس در گروه‌های AEHC با دوزهای مختلف افزایش یافت، البته در سطوح پایین‌تر از نرمال. بیان mRNA PI3K به طور قابل توجهی افزایش یافت. بنابراین، SCF/c-kit ممکن است از طریق PI3K اعمال شود. نتایج نشان داد که AEHC می تواند ماهیچه صاف دستگاه گوارش را با افزایش تعداد سلول های ICC تنظیم کند. دوز پایین AEHC اثر قابل توجهی بر یبوست نداشت، در حالی که دوز متوسط ​​و دوز بالای آن باعث کوتاه شدن زمان اجابت مزاج اول موش‌ها، افزایش رطوبت مدفوع، بهبود سرعت پیشرانه روده بزرگ، پالایش مقدار مدفوع، افزایش GAS شد. سطوح MTL و CCK و تقویت انقباض کولون. دوز موثر AEHC در ابتدا 20 گرم در روز پس از تبدیل است که معادل دوز متوسط ​​و دوز بالا در این مطالعه است.

5. نتیجه گیری ها

AEHC با بهبود عملکرد ICC و تنظیم انتقال دهنده های عصبی در این مطالعه، تحرک روده را تقویت می کند، که ثابت کرد AEHC پتانسیل درمان و پیشگیری از یبوست را دارد. عصاره ها تولید موج آهسته روده بزرگ را بهبود بخشید و ریتم فعالیت انقباضی SCF mRNA کمیت PI3K mRNA مقدار mRNA c-Kit 12 طب مکمل و جایگزین مبتنی بر شواهد عضله صاف را با افزایش مقدار ICC از طریق PI3K/SCF/ تنظیم کرد. مسیر سیگنال c-kit. با این حال، مطالعات تجربی دقیق تر ممکن است درک سایر مسیرهای مولکولی AEHC را در درمان STC بهبود بخشد و به راهنمایی مطالعات بالینی آینده نگر برای ارزیابی اثرات و ایمنی آن کمک کند.

تضاد علاقه

نویسندگان اعلام می کنند که هیچ تضاد منافع وجود ندارد.

مشارکت نویسندگان

Shuai Yan و Yin-Zi Yue به طور مساوی به این کار کمک کردند. همه نویسندگان مقاله نهایی را تایید کرده اند.

قدردانی

این کار با کمک مالی از بنیاد ملی علوم طبیعی چین (NSFC) و توسط دولت چین (81573979) حمایت شد. این مطالعه همچنین توسط پروژه فناوری اداره استان جیانگسو طب سنتی چینی، چین (شماره YB2017061)، برنامه توسعه علمی و فناوری سوژو، چین (شماره SYSD2015172)، پروژه نوآوری فناوری صنعتی سوژو، چین ( شماره SYSD2016136، شماره SYS201775، و شماره SYS201776، و پروژه کالج بیمارستان طب سنتی چینی سوژو، چین (YQN2015007). نویسندگان با قدردانی از حمایت مالی پروژه ای که توسط بنیاد علوم پسا دکتری چین (2017M620220) تامین شده است، قدردانی می کنند.

منابع

[1] JY Chang، GR Locke، MA McNally، و همکاران، "تأثیر اختلالات عملکردی دستگاه گوارش بر بقا در جامعه"، مجله آمریکایی گوارش، جلد. 105، شماره 4، صفحات 822- 832، 2010. [2] SM Mugie, M. A Bennington, and C. Di Lorenzo, "اپیدمیولوژی یبوست در کودکان و بزرگسالان: مروری سیستماتیک"، بهترین عمل و تحقیقات کلینیکال گوارش، جلد. 25، شماره 1، ص. 18، 2011. [3] NC Suares و AC Ford، "شیوع و عوامل خطر برای یبوست مزمن ایدیوپاتیک در جامعه: مرور سیستماتیک و متاآنالیز"، مجله آمریکایی گوارش، جلد. 106، شماره 9، صفحات 1582-1591، 2011. [4] A. Lembo و M. Camilleri، "یبوست مزمن"، مجله پزشکی نیوانگلند، جلد. 349، شماره 14، صفحات 1360-1368، 2003. [5] S. Singh, S. Heady, E. Coss-Adame, and SSC Rao, "Clinical utility of مانومتری کولون در یبوست آهسته ترانزیت" Neurogastroenterology & Motility, vol. 25، شماره 6، صفحات 487-495، 2013. [6] DM Preston و JE Lennard-Jones، "یبوست مزمن شدید زنان جوان: "یبوست آهسته انتقالی ایدیوپاتیک"، Gut، جلد. 27، شماره 1، صفحات 41-48، 1986. [7] P. Kashyap، PJ Gomez-Pinilla، MJ Pozo، و همکاران، "Immunoreactivity برای Ano1 کاهش سلول های بینابینی کیت مثبت Cajal را در بیماران مبتلا به یبوست آهسته ترانزیت تشخیص می دهد. "Neurogastroenterology & Motility، جلد. 23، شماره 8، صفحات 760-765، 2011. [8] JD Belsey، M. Geraint، و TA Dixon، "بررسی سیستماتیک و متاآنالیز: پلی اتیلن گلیکول در بزرگسالان مبتلا به یبوست غیر ارگانیک"، مجله بین المللی تمرین بالینی، جلد . 64، شماره 7، صفحات 944-955، 2010. [9] AC Ford و NC Suares، "اثر ملین ها و درمان های دارویی در یبوست مزمن ایدیوپاتیک: مرور سیستماتیک و متاآنالیز"، Gut، جلد. 60، شماره 2، صفحات 209-218، 2011. [10] OM Aboumarzouk, T. Agarwal, R. Antakia, U. Shariff, and RL Nelson, "Cisapride for intestinal constipation," Cochrane Database of Systematic Reviews, vol. 19، شماره 1، ص. CD007780، 2011. [11] MA Kamm، S. Muller-Lissner، NJ Talley، و همکاران، "Tegaserod برای درمان یبوست مزمن: یک مطالعه چندملیتی تصادفی، دوسوکور، کنترل شده با دارونما"، مجله آمریکایی گوارش، ج. 100، شماره 2, pp. 362-372, 2005. [12] A. Shin, M. Camilleri, G. Kolar, P. Erwin, CP West, and MH Murad, "Systemmatic review with meta-analysis: Highly Selective {{80} آگونیست های HT4 (پروکالوپراید، ولوستراگ یا ناروناپراید) در یبوست مزمن، "Alimentary Pharmacology & Therapeutics, vol. 39، شماره 3، صفحات 239-253، 2014. [13] J.-H. Chen, Q. Zhang, Y. Yu et al., "Neurogenic and Myogenic Properties of Pan-Colonic Motor Patterns and their Spatiotemporal Organisation in Rats" PLoS ONE, vol. 8، نه 4، شناسه مقاله e60474، 2013. [14] VL Serebruany, ME Mouelhi, H.-J. Pfannkuche, K. Rose, M. Marro, and DJ Angiolillo, "Investigations on 5-بیان گیرنده HT4 و اثرات تگاسرود بر تجمع پلاکتی انسان در شرایط آزمایشگاهی," American Journal of Therapeutics, vol. 17، شماره 6، صفحات 543-552، 2010. [15] HS Winter، C. Di Lorenzo، MA Benninga، و همکاران، "پروکالوپراید خوراکی در کودکان مبتلا به یبوست عملکردی"، مجله گاستروانترولوژی و تغذیه کودکان، جلد. 57، شماره 2، صفحات 197-203، 2013. [16] A. Bove, F. Puccini, M. Bellini, et al., "اظهار اجماع AIGO/SICCR: تشخیص و درمان یبوست مزمن و انسداد مدفوع (بخش اول: تشخیص مجله جهانی گوارش، جلد. 18، شماره 14، صفحات 1555-1564، 2012. [17] GL Lyford، C.-L. او، E. Soffer، و همکاران، "کاهش پان کولون در سلول های بینابینی کژال در بیماران مبتلا به یبوست آهسته ترانزیت"، Gut، جلد. 51، شماره 4، صفحات 496-501، 2002. [18] J.-P. وانگ، G.-F. دینگ و Q.-Z. وانگ، "سلول های بینابینی کژال واسطه انتقال عصبی سمپاتیک تحریکی در پروستات خوکچه هندی" Cell and Tissue Research، جلد. 352، شماره 3، صفحات 479-486، 2013. [19] W.-D. تانگ، بی.-اچ. لیو، L.-Y. ژانگ، S.-B. Zhang و Y. Lie، "کاهش سلولهای بینابینی کژال در کولون سیگموئید بیماران مبتلا به یبوست آهسته ترانزیت"، مجله بین المللی بیماری کولورکتال، جلد. 19، شماره 5، صفحات 467-473، 2004. [20] D. Wu، X. Wang، J. Zhou، و همکاران، "فرمول سنتی چینی، قرص روان کننده روده، یبوست موش ناشی از لوپرامید را بهبود می بخشد که در افزایش کلر دخیل است. ترشح در سراسر اپیتلیوم کولون دیستال، مجله Ethnopharmacology، جلد. 130، شماره 2، ص 347-353، 2010. [21] D.-Y. او و S.-M. دای، "اثرات ضد التهابی و تعدیل کننده ایمنی Paeonia lactiflora Pall.، یک داروی گیاهی سنتی چینی" Frontiers in Pharmacology، جلد. 2، مقاله 10، 2011. [22] Z. Li، H. Lin، L. Gu، J. Gao و C.-M. Tzeng، "Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): یکی از بهترین هدایای دارویی طب سنتی چینی، Frontiers in Pharmacology، vol. 7، ماده 41، 2016.