تاثیر شبیه سازی هضم انسان در آزمایشگاهی بر محتویات فنولیس و فعالیت های بیولوژیکی عصاره های آبی از گونه های سیست ترک قسمت اول

لطفا تماس بگیریدoscar.xiao@wecistanche.comبرای کسب اطلاعات بیشتر

چکيده:استرس اکسیداتیو یکی از پیش سازهای قابل توجه بیماری های متابولیک مختلف مانند دیابت، پارکینسون، بیماری های قلبی عروقی، سرطان و غیره است. گزارش های مختلف علمی حاکی از آن است که متابليت های گياه ثانويه نقش مهمی در جلوگيری از استرس اکسيداتيو و اثرات مضر آن دارند. از این لحاظ این مطالعه با هدف بررسی پروفایل فنلی و پتانسیل های آنتی اکسیدانی و ضد دیابت عصاره های آبی از گونه های سیست ترکیه ای با استفاده از روش های آزمایشگاهی برنامه ریزی شده است. روش شبیه سازی هضم آزمایشگاهی به تمام عصاره ها برای تخمین در دسترس بودن زیستی محتویات فنلی آنها اعمال شد. برای تمام فازهای هضم، محتوای فنلی، فلاونوئید، فنلیک اسید و پروتوسیانیدین تعیین شد. علاوه بر این، تغییرات در کمیت فلاونوئیدهای نشانگر اختصاص داده شده (سالیدروساید، هایپرساید، و کوئرسیترین) با تجزیه و تحلیل کروماتوگرافی لایه نازک با کارایی بالا (TLC) نظارت شد. پتانسیل فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره ها با روش های مختلف مورد مطالعه قرار گرفت تا پروفایل های فعالیت دقیق آنها آشکار شود. از سوی دیگر، آنزیم های آمیلاز و آ گلوکوزیداز آزمایشگاهی و محصول انتهایی پیشرفته گلیکاسیون(AGE)، فعالیت های مهاری عصاره ها برای ارزیابی پتانسیل های ضد دیابت عصاره ها تعیین شد. نتایج نشان داد که عصاره های آبی به دست آمده از بخش های هوایی گونه های سیست ترکیه دارای محتویات فنلی غنی و فعالیت های آنتی اکسیدانی و ضد دیابت قوی هستند؛ با این حال، پروفایل های زیست فعالی آنها و غلظت فلاونوئید نشانگر ممکن است به طور قابل توجهی تحت تاثیر هضم انسان قرار گیرد. نتایج نشان داد که کل محتویات فنلی، فعالیت های آنتی اکسیدانی و مهار آنزیم های مرتبط با دیابت نمونه های در دسترس زیستی کمتر از نمونه های غیر هضم شده در تمام عصاره ها بود.

کليدواژه:گونه سیستوس ترکی؛cistanche tubulosa beneficios;فعالیت آنتی اکسیدانی؛سیستانچه คือ;شبیه سازی هضم انسان؛ HPTLC; دیابت

1. مقدمه

خانواده Cistaceae از درختچه ها تشکیل شده است، و گیاهان هرز سالانه یا چند ساله و جنس سیستوس یکی از اعضای گسترده توزیع شده این خانواده است. بیش از ۵۰ گونه سیستوس در سراسر جهان توزیع می شوند، و معمولاً آن ها را «راکروز» می نامند[۱]. بررسی های قبلی در آزمایشگاهی و زنده نشان داد که گونه های سیستوس دارای فعالیت های ضد ویروسی، ضد دیابت، آنتی اکسیدانی، ضد میکروبی، و ضد التهابی [23] هستند. ترکیبات فنلی مختلف (اسیدهای فنلی، فلاونوئیدها، پروانتوسیانیدین ها) و ترپن ها از گونه های سیستوس جدا شدند و مزایای درمانی آن ها به طور کلی به این اجزا نسبت داده می شود[۴٬۵].

در ترکیه پنج گونه سیستوس به طور طبیعی رشد می کنند، به عنوانie، C. salvifolius L.، C. paroiflorus Lam، C.monspeliensis L.، C.laurifolius L.و C.creticus L.[6]. در سوابق قوم شناسی پزشکی فولکلور ترکیه، اندام های مختلفی از گونه های سیستوس به طور مکرر به عنوان یک درمان مستند شده اند. تزریق آماده شده از شاخه های C. laurifolius، C. salviifolius، و C. کریتیکوس به صورت دهانی علیه دیابت در منطقه Edremit (Balkesir) بلعیده [7]. Decoctions تهیه شده از گل های C.creticus و C. salviifolius به صورت داخلی در برابر زخم پپتیک در Marmaris (Mugla) [8] استفاده می شود، در حالی که یک decoction از جوانه های گل باز نشده C. laurifolius برای همان هدف استفاده می شود. در آناتولی غربی، از بین رفتگی برگ های C. laurifolius به صورت داخلی در برابر تب و درد معده و به صورت خارجی، از طریق حمام کردن، در برابر درد روماتیمیک [9] استفاده می شود.

لطفا برای دانستن اطلاعات بیشتر اینجا را کلیک کنید

این یک واقعیت به خوبی اثبات شده است که تجمع بالا از گونه های اکسیژن واکنشی (ROS)باعث استرس اکسیداتیو, که یکی از پیش سازهای قابل توجهی از اختلالات متابولیک مختلف مانند سرطان, دیابت, مشکلات قلبی عروقی, آلزایمر, و غیره [10]بنابراین, استفاده از آنتی اکسیدان تبدیل شده است یک رویکرد جامع رایج برای جلوگیری و یا درمان چنین شرایطی در عمل علمی فعلی. فعالیت های آنتی اکسیدانی عصاره گیاه توسط تعداد فوق العاده ای از محققان گزارش شده است[11-14]. به عنوان یک رویکرد رایج، پتانسیل آنتی اکسیدانی عصاره های گیاهی به طور کلی به محتویات فنلی آنها اختصاص داده شده است. بدنه بزرگی از شواهد در ادبیات علمی موجود است که گونه های سیستوس نیز سرشار از پروفایل های فنلی هستند و در نهایت درجه قابل توجهی از فعالیت آنتی اکسیدانی دارند. با این حال مفهوم در دسترس بودن زیستی این فیتوشیمیایی ها در بدن در بیشتر این مطالعات مورد توجه قرار ن گرفته است.

این یک واقعیت شناخته شده است که شرایط دستگاه گوارش بر ترکیبات فنلی به دلیل شرایط مختلف pH، اعمال آنزیم، و میکروبیوتا تاثیر می گذارد. از سوی دیگر ساختارهای شیمیایی ترکیبات فنلی و ماتریس گیاه نیز از عوامل مهمی هستند که بر در دسترس بودن زیستی آن ها تأثیر می گذارد [15]. بنابراین در بررسی حاضر، روش شبیه سازی هضم آزمایشگاهی بر روی تمام عصاره ها برای برآورد تنوع زیستی محتویات فنلی به کار گرفته شد. به منظور نظارت بر انتقالات، محتوای فنلی، فلاونوئید، فنلیک اسید و پرو آنتوسیانیدین در تمام فازهای هضم تعیین شد. همچنین فعالیت های آنتی اکسیدانی عصاره ها با روش های طیف سنجی متفاوت مکانیستی مورد مطالعه قرار گرفت تا پروفایل های فعالیت جامع آنها آشکار شود. پتانسیل های آنتی اکسیدانی تمام نمونه های به دست آمده توسط فرایند هضم با DPPH و DMPD (روگرفت رادیکال آزاد)، FRAP و CUPRAC (پتانسیل کاهش دهنده فلز)، و TOAC (ظرفیت آنتی اکسیدانی کل) مورد بررسی قرار گرفت. پیش از این سالیدروساید، هایپروئید و کوئرسیترین به عنوان فلاونوئیدهای نشانگر گونه های سیستوس توسط گوزلمری و همکاران تعیین شده بودند[16]، بنابراین تعیین کیفی و کمی این گلیکوسایدهای فلاونول با سیستم کروماتوگرافی لایه نازک با کارایی بالا انجام شد و شاخص های در دسترس بودن زیستی آن ها تخمین زده شد.

سیستانچه می تواند ایمنی را بهبود بخشد

دیابت قندی یک اختلال متابولیک شایع است و با کاهش ترشح انسولین توسط لوزالمعده β سلول یا عدم پاسخ بدن به انسولین توصیف می شود. دو نوع DM وجود دارد: وابسته به انسولین (نوع اول) و غیر وابسته به انسولین(نوع دوم) [17]. （چقدر سیستانچه را) یکی از استراتژی های درمانی برای نوع دوم. DM کنترل هیپرگلیسمی پس از مصرف است که به عنوان "افزایش قابل توجهی از غلظت قند خون در جریان خون پس از یک وعده غذایی" تعریف شده است. مهار آنزیم های گوارشی کلیدی از جمله آ آآمیلاز و او گلوکوزیداز برای کنترل هیپرگلیسمی پس از آن ضروری است. (سیستانچه توبولوسا به زبان چینی) در دستگاه گوارش، اوآميلاز نشاسته را به قندهای کاهش دهنده مانند سيکلودسکسترين، لاکتوز، و مالتوز هضم می کند و α-گلوکوسيداز اين قندها را به گلوکز می شکند. بنابراین، مهار آنزیم های گوارشی به عنوان یک حالت ممکن از عمل برای درمان هیپرگلیسمی پس از عمل در نظر گرفته شده است [18]از سوی دیگر، سطح قند خون بالا ممکن است باعث تشکیل AGEs که به عنوان "ترکیبات تشکیل شده در نتیجه واکنش گلیکاسیون آنزیمی (Maillard)بین کاهش قندها و پروتئین ها، اسیدهای هسته ای و چربی ها". تجمع بالای AGEs در بدن ممکن است بسیاری از عوارض دیابتی از جمله نفروپاتی، نوروپاتی، رتینوپاتی و غیره را القا کند[19]. آمینوگوانیدین، تصور و متفورمین نمونه هایی از مهارکننده های مصنوعی برای AGEs است، و آکاربوز، میگلیتول، و وگلیکوز مهارکننده مصنوعی برای آنزیم های گوارشی هستند و در دهه های گذشته در حال استفاده بوده اند [۲۰٬۲۱]. با این حال، کارآزمایی های بالینی و در آزمایش های زنده، عوارض جانبی این مهارکننده های مصنوعی مانند هپاتوتوکسیسیته، اتساط شکمی، مسطح شدن، شهاب سنگ، کم خونی، استفراغ، نارسایی قلبی و غیره را نشان دادند [۲۱٬۲۲]. با توجه به چنین اثرات مضر، مطالعات متعدد پتانسیل های مهاری عصاره گیاه بر روی AGEs [23-25] را درگیر کرده است. گزارش شده است که فیتوشیمیایی ها، به ویژه ترکیبات فنلی مانند اسیدهای فنلی، فلاونوئیدها، و پرو آنتوسیانیدین ها، به طور قابل توجهی مانع تشکیل AGEs و اعمال آنزیم مرتبط، به عنوان معنی دار، ایکس آتیلاز و α-گلوکوزیداز [26-28] شدند.

از آنجا که استخراج آب (تزریق یا decoction) تکنیک آماده سازی رایج در طب سنتی است، این مطالعه بر روی عصاره های آبی از گونه های سیستوس ترکیه قبل و بعد از شبیه سازی هضم گوارش آزمایشگاهی انجام شد. از این لحاظ پروفایل های فنلی و پتانسیل های آنتی اکسیدانی و ضد دیابت عصاره های آبی و متابلیت های هضم آنها به طور مقایسه ای مورد بررسی قرار گرفت. بر اساس بررسی مرجع، فعالیت های مهاری عصاره های سیستوس بر روی AGEs برای اولین بار در این مطالعه مورد مطالعه قرار گرفت. علاوه بر این، تجزیه و تحلیل کمی فلاونوئیدهای نشانگر نیز با تجزیه و تحلیل HPTLC انجام شد. روش شبیه سازی هضم آزمایشگاهی به تمام عصاره ها برای نظارت بر تغییرات در غلظت ها و پروفایل های فعالیت بیولوژیکی ترکیبات فنلی در شرایط گوارشی اعمال شد.

2. نتایج

2.1.برآورد محتویات فنلی نمونه ها

با توجه به نتایج نشان داده شده در جدول 1، عصاره آبی C. saloifolius دارای محتوای فلاونوئید کل، فنلیک و فنلیک اسید بالاتر از سایر گونه های مورد مطالعه بود، در حالی که نمونه های ND (غیر هضم شده) C.creticus و C.laurifolius دارای بالاترین محتویات پروانتوسیانیدین بودند. معنی دارترین کاهش در کل محتوای پروانتوسیانیدین ها در تمام عصاره ها تشخیص داده شد. مقادیر پروانتوسیانیدین نمونه های IN (در دسترس زیستی) در تمام عصاره های آبی غیرقابل کشف بود. در نتیجه محتویات فنلی عصاره های آبی تحت تأثیر روش شبیه سازی هضم انسان در آزمایشگاهی قرار گرفت.

مخفف نمونه ها ND: غیر هضم شده؛ PG: Postgastri; IN: Bioavailable; BAvI: شاخص در دسترس بودن زیستی; BResults به عنوان میانگین سه ± انحراف استاندارد (S.D.) و به عنوان معادل میلی گرم گالیک اسید (GAE)در نمونه 1 گرم بیان شد؛ نتایج به عنوان میانگین سه قلوها ± انحراف استاندارد (S.D.) و به عنوان معادل میلی گرم کوئرستین (QE) در نمونه 1 گرم بیان شد؛ نتایج D به عنوان میانگین سه ± انحراف استاندارد (S.D.) و به عنوان معادل میلی گرم کافئیک اسید (CAE) در نمونه 1گرم بیان شد؛ " نتایج به عنوان میانگین سه 士 انحراف استاندارد (S.D.) و به عنوان معادل میلی گرم کاتچین (CE) در نمونه l g بیان شد؛ * مخفف عصاره های آبی∶CCA برای C. کرتیکوس، CLA برای C. laurifolius، CMA برای C.monspeliensis، CPA برای C.parviflorus، CSA برای C.salviifolius.حروف مختلف در همان ردیف نشان دهنده اهمیت (05/0p<>

همانطور که در جدول 2 ارائه شد، محتویات سالیدروساید و هایپروئید در عصاره آبی C. salviifolius نسبتا بیشتر از گونه های دیگر بود، در حالی که کوئرسیترین یافت نشد. از سوی دیگر کوئرکیترین در بیشترین غلظت در تمام نمونه های شبیه سازی عصاره آبی از C. creticus یافت شد، اما غلظت آن در نمونه های در دسترس زیستی به طور قابل توجهی کاهش یافت. علاوه بر این، کروماتوگرام HPTLC و طیف فرابنفش روکش مراجع و نقاط مربوطه در آهنگ تمام عصاره ها در شکل 1 ارائه شد.

شکل 1. (A) روکش طیف UV سالیدروساید و نقاط مربوطه در آهنگ از تمام عصاره. (ب) روکش طیف UV از hyperoside و نقاط مربوطه در آهنگ از تمام عصاره. (ج) روکش طیف UV از quercitrin و نقاط مربوطه در آهنگ از تمام عصاره. (د) HPTLC chromatograms of:1. AND,2. CCA PG,3. قابیل،4. CLA ND,5.CLA PG,6.CLAIN,7.Tiliroside(Rf ≈0.65),8.Hyperoside(Bf ≈0.35),9.Quercitrin(Rf ×0.45),10. CMA ND,11.CMAPG,12.CHAIN,13.AND,14. CPA PG,15.CPA IN,16.CSAND,17.CSAPG,18.CSA IN. فاز تلفن همراه:EtOAc/CHCh/CHCOOH/HCOOH/H2O(100:25:10:10:10:10:11);D erivatization: NPR reagent. تجسم: 366 nm.

2.2.برآورد فعالیت آنتی اکسیدانی نمونه ها

همانطور که در جدول 3 ارائه شد، نمونه های در دسترس زیستی عصاره سیستوس فعالیت آنتی اکسیدانی روبان رادیکال ضعیف تری نسبت به همتایان غیر هضم شده و پس از معده خود به نمایش گذاشتند. نمونه های ND و PG تمام عصاره های آبی فعالیت روبنده DPPHradical قابل توجهی را نشان دادند و مقادیر ECso پایین تری نسبت به ترکیب مرجع BHT (ارزش ECso:5.83±0.2 میکروگرم در میلی میلی ل) را در اختیار داشت. با این حال، تمام عصاره ها یک فعالیت روبنده رادیکال DMPD ضعیف تر از ترکیب مرجع Trolox (5.82±0.37 ug/mL) را به نمایش گذاشت. نمونه های ND، PG و IN CPA در مقایسه با نمونه های عصاره های دیگر دارای فعالیت DMPD بهتری بودند.

مشابه روش های فعالیت روبان رادیکال، نمونه های در دسترس زیستی عصاره های سیستوس نیز فعالیت های ضعیف تر کاهش دهنده فلز و کل آنتی اکسیدانی را نسبت به نمونه های غیر هضم شده و پس از معده نشان دادند. تمام نمونه های ND عصاره ها فعالیت آنتی اکسیدانی کاهش دهنده فریک قابل توجهی را به نمایش گذاشت که قوی تر از ترکیب مرجع BHT (معادل 4.06±0.42mM FeSO4) بود. در بین نمونه های PG، تنها CSA (معادل 44±0.16mM FeSO4) فعالیت بهتری نسبت به BHT داشت. در آزمون CUPRAC، نمونه های ND و PG CSA قوی ترین نمونه ها در میان نمونه های دیگر گونه ها شناسایی شدند. به طور گسسته، در نمونه CCA فعالیت CUPRAC بهتری نسبت به نمونه های در دسترس زیستی سایر عصاره های آبی داشت.

2.3.فعالیت مهار آنزیم مرتبط با دیابت

همانطور که در جدول 4 مشخص شد، فعاليت مهاری آنزيم وابسته به غلظت در تمام عصاره های آبی ديده شد(گیاهان سوپرمن سیستانچهدر حالی که نمونه های ND CPA و CSA(89/75٪±0.62,80.34٪±0.19) تا حدودی بالاتر از فعالیت مهارکننده α-آتیلاز نسبت به آکاربوز (80/75٪±0/02) در غلظت 1 میلی گرم بر میلی ليتر به نمایش گذاشتند؛ تنها نمونه ND CSA فعالیت مهاری α گلوکوسیداز بالاتری نسبت به کوئرستین ترکیب مرجع در هر دو غلظت به نمایش گذاشته است.

برای جمع بندی، عصاره آبی C. saloifolius فعالیت مهاری آنزیم گوارشی بهتری نسبت به عصاره های گونه های دیگر به نمایش گذاشته است. علاوه بر این، نمونه های IN از تمام عصاره های آبی نشان داد فعالیت های مهار آنزیم پایین تر در مقایسه با نمونه های ND. 2.4.AGEs فعالیت های مهاری

همانطور که در جدول 4 ارائه شد، فعاليت بازدارنده سن وابسته به غلظت در تمام عصاره های آبی مشاهده شد. نمونه های ND CCA، CPA و CSA فعالیت مهاری بهتری نسبت به کوئرستین ترکیب مرجع در هر دو غلظت 0.5 و 1 میلی گرم در میلی ليتر به نمایش گذاشتند. با این حال، تنها عصاره C.salvifolius فعالیت مهاری بهتری نسبت به کوئرستین در میان نمونه های IN عصاره ها نشان داد. نمونه های در دسترس زیستی عصاره های آبی فعالیت های بازدارنده سن پایین تری را نسبت به نمونه های غیر هضم شده نشان دادند. با توجه به نتایج، نمونه ND عصاره آبی سالویفولیوس C. salvifolius دارای بیشترین فعالیت مهاری سن بود. با این حال، نمونه IN عصاره آبی C. monspeliensis ضعیف ترین پتانسیل مهار سن را در غلظت های آزمایش شده به نمایش گذاشت.

این مقاله از مولکول های 2021، 26، 5322 استخراج شده است. https://doi.org/10.3390/molecules26175322 https://www.mdpi.com/journal/molecules