ترکیبات مونوترپن از Cistanche Tubulosa-ساختارهای شیمیایی کانکانوزیدهای A-E و Kankanol-

سیستانچ توبولوزا (SCHRENK) R. WIGHT(Orobanchaceae) یک گیاه انگلی چند ساله است که بر روی ریشه می رویدسالوادورایاکالوتروپیسگونه و در شمال آفریقا، عربستان و کشورهای آسیایی پراکنده است.1) ساقه های این گیاه (به ژاپنی Kanka-nikujuyou) به طور سنتی برای درمان ناتوانی جنسی، عقیمی، کمر و ضعف بدن استفاده می شده است.2) قبلاً چندین ایریدوئید، مونوترپنوئید،فنیل اتانوئیدهاو لیگنان ها از چین و پاکستان جدا شدندC. tubulosa. 1,3–7) در جریان مطالعات سریالی ما بر روی ترکیبات زیست فعال از داروهای طبیعی چینی،8–18) چهار گلیکوزید ایریدوئید جدید، کانکانوزید A (1), B (2), C (3و D (4یک ایریدوئید کلردار، کانکانول (5و یک مونوترپن گلیکوزید غیر حلقوی، کانکانوزید E (6از عصاره متانولی این داروی گیاهی همراه با 16 ترکیب شناخته شده شامل 12 مونوترپن جداسازی شد.7-18). این مقاله به جداسازی و توضیح ساختار اجزای جدید مونوترپن می پردازد.1-6). 

توبولوزای طبیعی سیستانچی برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

عصاره متانولی ساقه خشک C. tubulosa (26.8 درصد از این داروی گیاهی) تحت کروماتوگرافی ستونی سیلیکاژل فاز عادی و فاز معکوس قرار گرفت و HPLC مکرر برای دادن کانکانوزید A (1, 0) قرار گرفت.{{7} {{1{13}}}}54%)، B (2، 0.{19}}30%)، C (3، 0.{ {32}}027%)، و D (4، {{40}}.0015%)، کانکانول (5، {{57) }}.0034%)، و کانکانوسید E (6، 0). .020%)، ژنیپوزیدیک اسید19) (8، 0.030%)، 8-epiloganic acid7) (9، 0.033%)، gluroside19) (10، 0.14%)، antirrhide20) (11، 0.0079 %)، ajugol19) (12، 0.011%)، bartsioside19) (13، 0.21%)، 6-deoxycatalpol19) (14، 0.11%)، argyol21) (15، 0.0030%)، سیستانین 22،23) (16) ، 0.0040٪، سیستاکلرین22) (17، 0.0035٪)، (2E،6Z) -8-bD-glucopyranosyloxy-2،6-دی متیل-2،6- اکتادینوئیک اسید24) (18، 0.0028٪)، Dmannitol25) (4.19٪)، یوریدین25) (0.0069٪)، (3R) -3-هیدروکسی-2- پیرولیدینون26،27) (0.0020٪، و (3R) )-3-هیدروکسی-1-متیل- 2-پیرولیدینون27) (0.0059%).

ساختار Kankanoside A (1)

Kankanoside A (1) به عنوان یک پودر آمورف به دست آمد و چرخش نوری منفی ([a]D 25 - 107.4 درجه در MeOH) از خود نشان داد. طیف مادون قرمز 1 یک نوار جذبی در 1647 سانتی‌متر{5}} را نشان داد که می‌توان آن را به تابع الفین و باندهای جذب قوی در 3410 و 1076 سانتی‌متر{8}} اختصاص داد که نشان‌دهنده یک نیمه گلیکوزید است. در بمباران اتم سریع یون مثبت و منفی (FAB) -MS 1، پیک های یون شبه مولکولی در m/z 369 مشاهده شد.

(M Na) و 345 (M-H)- و تجزیه و تحلیل FAB-MS با وضوح بالا فرمول مولکولی 1 را نشان داد که C16H26O8 است. هیدرولیز اسیدی 1 با 1.{11}} M اسید کلریدریک (HCl) D-گلوکز آزاد کرد، که با تجزیه و تحلیل HPLC با استفاده از آشکارساز چرخش نوری شناسایی شد. 8،{14}}، طیف‌های 1H- (CD3OD، جدول 1) و 13C-NMR (جدول 2) از 1، که توسط آزمایش‌های مختلف NMR تخصیص داده شدند، 28 سیگنال‌های قابل انتساب به دو متیل [d 1.31 (s, 10-}H3) را نشان دادند. ، 1.51 (br s، 11-H3)]، دو متیلن [d 1.49، 2.02 (هر دو m، 6a- و 6b-H)، 1.64، 1.67 (هر دو m، 7b- و 7a-H)]، دو متین [d 2.21 (dd, J= 2.7، 9.5 Hz، 9-H)، 2.71 (m, 5-}H)] و یک گروه استال غیراشباع a،b [d 5.33 (d، J= 2.7 هرتز، 1-H)، 5.95 (br s، {3-}H)] همراه با یک قسمت b-glucopyranosyl [d 4.62 (d، J= 7.9 هرتز، 1' -H)]. همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است، آزمایش طیف سنجی همبستگی 1H-1H (1H-1H COSY) روی 1 وجود ساختارهای جزئی را نشان می دهد که با خطوط پررنگ نوشته شده اند. در آزمایش همبستگی پیوندهای چندگانه هترونهسته ای (HMBC) روی 1، همبستگی های دوربرد بین پروتون ها و کربن های زیر مشاهده شد ({84}}H, 1' -H و 1-C؛ {{88} }H3 و 3-C; C; , 10-H3 و 8-H3 و 9-C همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است. هیدرولیز آنزیمی 1 با b-گلوکوزیداز یک آگلیکون، کانکاژنین a (1a) را همانطور که در شکل 3 نشان داده شده است. مقایسه طیف 13CNMR برای 1 با طیف 1a نشان داد که تغییر گلیکوزیلاسیون در اطراف موقعیت 1-در 1 [ 1: d C 94.1 ({131}}C), 134.6 ({134}}C), 53.3 (9-C); 1a: d C 92.9 ({141}}C)، 135.3 (3-C)، 54.7 (9-C)]. بنابراین، اتصال بخش bD-glucopyranosyl در 1 نیز مشخص شد که در موقعیت 1-1a قرار دارد. در مرحله بعد، ساختار کلیشه نسبی 1 توسط یک آزمایش طیف‌سنجی تقویت هسته‌ای Overhauser (NOESY) مشخص شد، که همبستگی NOE را بین fol- نشان داد.

کاهش جفت پروتون ({0}}H و 10-H3؛ 3-H و 11-H3؛ 5-H و 6b-H، {{9} }}H; 22}}موقعیت در 1 با استفاده از قانون تغییر گلیکوزیلاسیون 13CNMR از 1,1' -دی ساکارید، 29 تعیین شد) که مشخص شد برای ترکیبات همی استال اعمال می شود. 30،31) ساختار فضایی 1- در 1 با مقایسه آنالیز 1H-NMR از جمله آزمایش NOESY تأیید شد که در 1a حفظ می شود. مقادیر جابجایی گلیکوزیلاسیون [Dd 1.2 ppm (1'-C) و 0.9 ppm ({42}} C)، در پیریدین-d5] مشخص شد از ترکیب R، Rdihemiacetal، که با ساختار کلیشه مطلق مطابقت دارد. 1 همانطور که در شکل 3 نشان داده شده است. در نتیجه، پیکربندی مطلق در 1-موقعیت 1 به صورت پیکربندی S تعیین شد و ساختار کلیشه مطلق 1 همانطور که نشان داده شده است روشن شد.

طب سنتی چینی CISTANCHE TUBULOSA PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ساختارهای کانکانوزیدهای B (2) و C (3)

Kankanoside B (2) نیز به عنوان یک پودر آمورف با چرخش نوری منفی ([a]D 26 - 118.7 درجه در MeOH) جدا شد. طیف IR 2 نوارهای جذبی را در 3410، 1647، و 1085 سانتی متر{7}} نشان داد که به توابع هیدروکسیل، الفین و اتر قابل انتساب است. فرمول مولکولی C15H24O10 از 2 توسط پیک های یون شبه مولکولی در FABMS یون مثبت و توسط FAB-MS با وضوح بالا تعیین شد. هیدرولیز اسیدی 2 با 1.{85}} M HCl D-گلوکز آزاد شده، که با تجزیه و تحلیل HPLC با استفاده از آشکارساز چرخش نوری شناسایی شد. 8،{20}}،15-18 CD3OD، جدول 1) و 13C-NMR (جدول 2) spectra28) از 2 سیگنال های قابل انتساب به دو متیلن را نشان دادند [d 1.40 (ddd, J= 5.2, 7.3, 13.5 Hz, 6a-H), 2.52 ( ddd، J= 7.0، 9.2، 13.5 هرتز، 6b-H)، 3.85، 3.99 (هر دو d، J= 11.9 هرتز، 10-H2)]، چهار متین [ d 2.21 (dd, J= 6.4, 8.6 هرتز, 9-H), 2.83 (m, 5-H), 4.02 (dd, J= 5}.2, 7.0 هرتز، 7-H)، 5.49 (d، J= 6.4 هرتز، 1-H)]، و یک جفت سیس-الفین [d 4.95 (dd, J{84 }}.0، 6.1 هرتز، 4-H)، 6.22 (dd، J= 1.8، 6.1 هرتز، 3-H)]، همراه با یک نیمه b-glucopyranosyl [d 4.72 (d, J= 7.9 Hz, 1' -H)]. سیگنال‌های پروتون و کربن در داده‌های 1H- و 13C-NMR 2 مشابه سیگنال‌های 6-deoxycatalpol (14) بودند، به جز سیگنال‌های ناشی از 7- و 8- موقعیت ها همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است، آزمایش 1 H-1 H COZY در 2 وجود ساختارهای جزئی را نشان داد که با خطوط پررنگ نوشته شده بودند، و در آزمایش HMBC، همبستگی های دوربرد بین جفت پروتون و کربن زیر مشاهده شد ({{ {117}}H, 1' و 1-H و 10-H2 و {{126}; }H، 7-H، 9-H، 10-H2 و 8-}}H، 10-H2 و 9- C; 7-H و 10-C). ساختار کلیشه نسبی 2 با آزمایش NOESY مشخص شد، که همبستگی NOE را بین جفت‌های پروتون زیر نشان داد ({139}}H و 10-H2؛ 3-}} H و 4-H; {144}}H and 6b-H, 9-H 6b-H and 7-H and 9-H) همانطور که در شکل 2 نشان داده شده است تیمار قلیایی 14 با هیدروکسید پتاسیم آبی 5 درصد (KOH) 2 و 19، 32) را به دست آورد به طوری که ساختار فضایی 2 مشخص شد.

کانکانوسایدC (3) به صورت پودر آمورف با چرخش نوری منفی ([a]D 26 - 34.{2}} درجه در MeOH) جدا شد. در FAB-MS یون منفی 3، یک جفت پیک یون شبه مولکولی ایزوتوپی در m/z 399 و 4{18}}1 (M-H)- مشاهده شد. فرمول مولکولی 3 با اندازه‌گیری FAB-MS با وضوح بالا C15H25ClO1{90}} تعیین شد. هیدرولیز اسیدی 3 با 1.0 مولار HCl D-گلوکز آزاد کرد، که با تجزیه و تحلیل HPLC با استفاده از آشکارساز چرخش نوری شناسایی شد. 8،{21}}،{22}} 13C-NMR (جدول 2) طیف 28) از 3 سیگنال های قابل انتساب به سه متیلن را نشان داد [d 1.70 (br dd, J= ca. 3, 13 Hz, 4a-H), 2.70 (br dd, J{{{{ 41}} حدود 6، 13 هرتز، 4b-H)، 1.68 (br d، J{48}} حدود 13 هرتز، 6aH)، 2.44 (m، 6b-H)، 4.01، 4.04 (هر دو d، J= 11.3 هرتز، {10-H2)]، پنج متین [d 2.47 (dd, J= 2.5, 7.9 Hz, 9-H), 2.61 (m , 5- H), 3.94 (br s, 7-H), 5.10 (br d, J= ca. 3 Hz, 3-H), 5.48 (d, J= 2.5 هرتز، 1-H)]، و یک قسمت b-glucopyranosyl [d 4.60 (d، J= 8.0 Hz، 1' -H)]. سیگنال‌های پروتون و کربن در طیف‌های 1H- و 13C-NMR 3 روی سیگنال‌های 2 قرار می‌گیرند، به جز سیگنال‌های ناشی از موقعیت‌های 3- و 4-. موقعیت bD-glucopyranosyl و عملکرد کلر در 3 از آزمایشات H-H COZY و HMBC همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است مشخص شد. در نتیجه، ساختار مسطح 3 به گونه ای ساخته شد که نشان داده شده است. ساختار نسبی 3 توسط یک آزمایش NOESY تعیین شد، که در آن همبستگی‌های NOE بین جفت‌های پروتون زیر مشاهده شد ({107}}H و 3-H، 10-H2؛ 3- H و 4a-H و 5-H و 6b-H، 7-H; }H و 9-H) همانطور که در شکل 2 نشان داده شده است.

توبولوزای طبیعی سیستانچی برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

سازه های کانکانوزید D (4) و کانکانول (5)

Kankanoside D (4) به عنوان یک پودر آمورف با چرخش نوری منفی ([a]D 25 - 30.6 درجه در MeOH) جدا شد. طیف IR 4 نوار جذبی را در 1655 سانتی متر- 1 قابل انتساب به عملکرد الفین و نوارهای جذب قوی در 3410 و 1078 سانتی متر- 1 نشان داد که نشان دهنده گلیکوزیدی بودن آن است. ساختار در FAB-MS یون مثبت 4، یک پیک یون شبه مولکولی در m/z 341 (M Na) مشاهده شد. فرمول مولکولی C15H26O7 از 4 با اندازه گیری با وضوح بالا FAB-MS تعیین شد. هیدرولیز اسیدی 4 با 1.0 مولار HCl D-گلوکز آزاد کرد، 8،{24}}،15-18) در حالی که (R)-rotundiol (4a) 33،34) با هیدرولیز آنزیمی 4 با b- بدست آمد. گلوکوزیداز 1H-NMR (جدول 3، CD3OD) و 13C-NMR (جدول 4) طیف 28) از 4 سیگنال های قابل انتساب به متیل [d 1.69 (s, 10-}H3)]، سه متیلن [d 1.41، 2.06 (هر دو m، 4-H2)، 1.51، 2.01 (هر دو m، 6a- و 6b-H)، 2.23 (br dd، J= حدود 8، 15 هرتز، 7a-H) ، 2.37 (br dd، J{= حدود 8، 15 هرتز، 7b-H)]، یک متین [d 2.90 (m, 5-}H)]، و دو متیلن دارای تابع اکسیژن { d [3.56 (ddd، J= 2.8، 7.4، 13.2 هرتز)، 3.97 (ddd، J= 4.9، 8.0، 13.2 هرتز)، 3-H2]، 4.04، 4.18 (هر دو d، J= 12.2 هرتز، 1-H2)} همراه با یک قطعه b-glucopyranosyl [d 4.25 (d, J= 7.7 Hz، 1' -H )]. موقعیت قسمت bD-glucopyranosyl در 4 با آزمایش HMBC مشخص شد که یک موقعیت 3- است (شکل 1). بر اساس این شواهد، ساختار کلیشه مطلق 4 مشخص شد که نشان داده شده است.

کانکانول (5) به صورت پودر آمورف با چرخش نوری مثبت ([a]D 25 11.1 درجه) به دست آمد. یونیزاسیون شیمیایی (CI)-MS 5 یک جفت پیک یون ایزوتوپی را در m/z 221 و 223 به دلیل یک یون شبه مولکولی (MH) نشان داد. اندازه گیری CI-MS با وضوح بالا از 5 فرمول مولکولی C9H13ClO4 را نشان داد. 1 H-NMR (جدول 1، CD3OD) و 13C-NMR (جدول 2) طیف 28) از 5 وجود توابع زیر را نشان داد: سه متیلن [d 1.60 (ddd, J{24}} .5، 5.5، 13.1 هرتز، 4a-H)، 1.80 (br dd، J{34}} حدود 3، 13 هرتز، 4bH)، 1.83 (br d، J= حدود 12 هرتز، 6a-H)، 2.57 (m، 6b-H)، 3.75، 3.88 (هر دو d، J= 9.2 Hz، 10-H2)]، پنج متین [d 2.76 (dd، J{ {58}}.3، 8.0 هرتز، 9-H)، 2.50 (m، 5-H)، 3.80 (br s، 7-H)، 5.17 (br d، J{ {71}} حدود 3 هرتز، 3-H)، 5.26 (d، J= 4.3 هرتز، 1-H)]. ساختار مسطح 5 با آزمایش 1H-1H COZY و HMBC تایید شد. یعنی آزمایش 1H-1H COZY در 5 نشان دهنده وجود ساختارهای جزئی نوشته شده با خطوط پررنگ بود، و در آزمایش HMBC، همبستگی های دوربرد همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است مشاهده شد. ساختار نسبی 5 بود. توسط آزمایش NOESY تعیین شد، که در آن همبستگی‌های NOE بین جفت‌های پروتون زیر مشاهده شد ({88}}H و 9-H؛ 3-}}H و 4a-H؛ 4b-H و {{95} }} H; 5-H و 6b-H، 7-H و 9-H شکل 2. با مقایسه داده های 1H- و 13C-NMR برای 5 با داده های 14a، که با تیمار 14 با هیدروکلراید آبی 5 درصد همانطور که در نمودار 1،35 نشان داده شده است) موقعیت گروه کلر به دست آمد. در 5 پشتیبانی شد تا موقعیت 3- باشد. علاوه بر این، استیلاسیون 5 با انیدرید استیک (Ac2O) و پیریدین، 3،{121}}اکسید (5a) را به دست آورد، در حالی که 14a دی استات (14b) را تحت شرایط استیلاسیون یکسان داد. این شواهد همچنین ما را بر آن داشت تا موقعیت عملکرد کلر را در موقعیت 3b تأیید کنیم (نمودار 3). در نتیجه، ساختار stereostructure 5 به صورت نشان داده شده تعیین شد.

ساختار Kankanoside E (6) Kankanoside E (6) به صورت پودر آمورف با چرخش نوری منفی ([a]D 25 - 20.{3}} درجه در MeOH) جدا شد. طیف IR 6 باندهای جذبی را در 3410، 1647 و 1085 سانتی متر{8}} نشان داد که قابل انتساب به عملکردهای گلیکوزیدی و کربونیل بود، در حالی که طیف UV حداکثر جذب را در 211 نانومتر نشان داد (log e 4.63) وجود یک اسید کربوکسیلیک غیر اشباع a،b. فرمول مولکولی C16H28O8 از 6 با یون مثبت و منفی FAB-MS و با اندازه‌گیری MS با وضوح بالا مشخص شد. هیدرولیز اسیدی 6 D-گلوکز آزاد شده، 8،{24}}،15-18) در حالی که (2E،6R)-8-هیدروکسی-2،{30}}دی متیل{31 }} اکتانوئیک اسید (6a) 36) با هیدرولیز آنزیمی 6 با b-گلوکوزیداز به دست آمد. 1 H-NMR (جدول 3، CD3OD) و 13C-NMR (جدول 4) طیف 28) از 6 نشان دهنده حضور یک (2E,6R){47}}هیدروکسی-2،{49}} نیمه دی متیل{50}}اکتنوئیک اسید [d 0.95 (d، J= 6.4 هرتز، 10-}H3)، 1.30، 1.48 (هر دو m، 5-H2)، 1.45، 1.70 (هر دو m، 7-H2)، 1.65 (m، 6-H)، 1.81 (s، 9-H3)، 2.22 (2H، m، 4-H2) ، 3.61، 3.94 (هر دو m، 8-H2)، 6.78 (dd، J= 1.2، 7.3 هرتز، 3-H)] همراه با یک بخش bD-glucopyranosyl [d 4.26 (d، J= 7.6 هرتز، 1' -H)]. با مقایسه سیگنال‌های کربن در طیف 13C-NMR 6 با سیگنال‌های 6a، تغییر گلیکوزیلاسیون حول موقعیت 8-6 مشاهده شد. موقعیت پیوند گلوکزید نیز توسط آزمایش‌های HMBC تأیید شد همانطور که در نشان داده شده است. شکل 1. در نتیجه، ساختار کلیشه مطلق 6 مشخص شد که (2E,6R){112}}bD-glucopyranosyloxy-2،{115}}دی متیل{116}}octenoic اسید است.

توبولوزای طبیعی سیستانچی برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%