نسخه بهینه و ارزیابی کیفیت کرم سفید کننده سیستانچ

خلاصه:

هدف: انتخاب بهترین نسخه ازکرم سفید کننده سیستانچو استاندارد کیفیت آن را تعیین کنید.

روش‌ها: پرینت Orthagonalex برای غربالگری بهترین نسخه طراحی شد. خواص فیزیکی و شیمیاییکرم سفید کننده سیستانچمورد آزمایش قرار گرفتند،سیستانچ در کرم سفید کنندهاز نظر کیفی با روش TLC شناسایی شد و گلیکوزیدهای Verbascum در کرم سفید کننده با HPLC تعیین شد.

یافته‌ها: از طریق آزمایش‌های متعامد، تجویز بهینه کرم سفیدکننده {{0}}.3 گرم استئاریل الکل، 1.0 گرم Tween60، 0.25gSpan60 و 0.09 تعیین شد. گرم carbomerU30. نقاط TLC ازکرم سفید کننده سیستانچواضح و مشخص هستند. غلظت ورباسکوزید در محدوده 6.25~200ug/mL رابطه خطی خوبی با ناحیه پیک نشان داد.

میانگین محتوای ورباسکوزید درسیستانچبه ترتیب {{0}}.142mg/g،0.143mg/g،0.146mg/g بود.

نتیجه گیری: آماده شده استکرم سفید کننده سیستانچظاهر خوبی دارد و پایه ای برای مولتی ها منطقی است. روش تعیین محتوا ساده و امکان پذیر، با قابلیت تکرار خوب، دقت بالا و نتایج قابل اعتماد است. می توان از آن برای تعیین محتوای ورباسکوزید در آن استفاده کردکرم سفید کننده سیستانچ.

کلید واژه ها:سیستانچ; کرم سفید کننده؛ بهینه سازی نسخه؛ روش تهیه؛ ارزیابی کیفیت

رنگ پوست به وجود رنگدانه های بیولوژیکی مختلف مربوط می شود که به محافظت در برابر تابش خورشید کمک می کند، اما مهم ترین رنگدانه در تعیین رنگ پوست ملانین است [1]. ملانین در ملانوسیت ها تولید می شود که دارای اندامک لیزوزومی به نام ملانوزوم هستند که ملانین را سنتز و ذخیره می کنند [2]. سنتز ملانین توسط ال-تیروزین آغاز می شود و تحت کاتالیز تیروزیناز، ملانین از طریق یک سری فرآیندهای پیچیده مانند دوپاکروم، دوپاکینون و دوپا تولید می شود. در میان آنها، نسبت محتوای 5،6-دی هیدروکسی اندول (5،6-دی هیدروکسی اندول، DHI) و 5،6-دی هیدروکسی اندول{9}}کربوکسیلیک اسید (5،{11} }دی هیدروکسی اندول-2-کربوکسی لیسید، DHICA) تغییرات رنگ پوست را از سیاه به قهوه ای تعیین می کند [3-4].

برای دریافت نمونه رایگان اینجا کلیک کنیدکرم سفید کننده سیستانچ.

در حال حاضر بیشتر لوازم آرایشی سفیدکننده موجود در بازار تیروزیناز را هدف قرار می دهند و با کنترل فعالیت تیروزیناز می توان تولید ملانین را برای دستیابی به اثر سفید کنندگی کاهش داد [5]. مواد افزودنی سفید کننده پوست معمولاً شامل اسید کوجیک و مشتقات آن، اسید میوه، ویتامین C و غیره است، اما این افزودنی ها همگی دارای برخی واکنش های نامطلوب هستند.

سیستانچیک طب سنتی چینی است که از زمان های قدیم عمدتاً برای درمان بیماری های مردانه استفاده می شده است. ماده اصلی فعال آن فنیل اتانوئید است [6]. در تحقیقات مدرن،عصاره سیستانچشامل بهبود عملکرد جنسی، ضد پیری، ضد اکسیداسیون [7]، بهبود توانایی یادگیری و حافظه، محافظت عصبی، تنظیم ایمنی، ضد خستگی، ضد کمبود است. محافظت از خون و کبد و سایر عملکردها.

علاوه بر این، عصاره های طب سنتی چینی به عنوان افزودنی های محصول دارای مزایای میل ترکیبی پوستی خوب، ایمنی و قابلیت اطمینان در مقایسه با افزودنی های شیمیایی در محصولات سفید کننده مدرن هستند. آزمایش ها نشان داده استفن اتیلوزیدمی تواند به طور قابل توجهی فعالیت تیروزیناز را کاهش دهد [8]. بنابراین در این تحقیق از سیستانچه دسرتیکولا به عنوان ماده اصلی برای تهیه کرم سفید کننده استفاده شد و نسخه آن بهینه و کیفیت آن مورد ارزیابی قرار گرفت تا مرجعی برای توسعه مواد سفید کننده در سیستانش دسرتیکولا ارائه شود.

1 ماده ازکرم سفید کننده سیستانچ

1.1 معرف های آزمایشی

استریل الکل؛ گلیسریل مونوستئارات؛ استئارات PEG100; Cetearyl الکل؛ کره شیا؛ Squalane مصنوعی; پروپیلن گلیکول؛ تویین 60; دهانه 60; گلیسرین؛ Carbomer U30 (همه از شانگهای Yuanye Biotechnology Co., Ltd. خریداری شده است)؛ Cistanche deserticola (منشاء آن در مغولستان داخلی، توسط پروفسور شو لیانگ از دانشگاه طب سنتی چینی لیائونینگ به عنوان معتبر شناخته شده است). استاندارد Verbasin (شماره دسته: 111530-201007، تحقیقات آزمایش مواد غذایی و دارویی چین)

بیمارستان)؛ کلروفرم، n-بوتانول، متانول، اسید فرمیک، استونیتریل، اسید سولفوریک، اتانول بی آب، اسید فسفریک همگی معرف های تحلیلی هستند و آب نیز آب خالص است.

1.2 تجهیزات آزمایشی

FA1004 Electronic Balance (Shanghai Yueping Scientific Instrument Co., Ltd.); DZKW-S-4 حمام آب با دمای ثابت گرمایش الکتریکی (شرکت ابزار پزشکی شانگهای، کارخانه ابزار پزشکی شماره 5). پاک کننده التراسونیک SG3300H (شرکت ابزار آلتراسونیک شانگهای گوانته، آموزشی ویبولیتین); صفحه پیش ساخته سیلیکونی G (شماره دسته: 20110905، Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.); ستون کروماتوگرافی C18 (Yuexu Technology Co., Ltd.).

2 روش ها و نتیجه گیری ازکرم سفید کننده سیستانچ

2.1 تهیه کرم سفید کننده

2.1.1 فرمول کرم سفید کننده: استریل الکل 0.3 گرم، گلیسرول مونو استئارات 0.5 گرم، PEG10{{10}} استئارات 0.25 گرم، ستئاریل الکل 0.1 گرم، کره شی 0.75 گرم، اسکوالان مصنوعی 1.25 گرم، اسپان 600.25 گرم،

کربومر U300.09 گرم، عصاره گیاه سیستانچ دسرتیکولا 0.5 گرم، گلیسیرین 2.0 گرم، پروپیلن گلیکول 1.25 گرم، توئین 601.0 گرم، تری اتانول آمین 0.07 گرم.

2.1.2 روش کرم سفید کننده

استئاریل الکل، گلیسریل مونو استئارات، استئارات PEG100، ستئاریل الکل، کره شی، اسکوالن مصنوعی و اسپان 60 حرارت داده شده و در حمام آب در دمای 80 درجه ذوب شده و به صورت یکنواخت به عنوان روغن مخلوط شدند. فاز، کربومر U30 را با آب اضافه کرده و روی حمام آب با دمای 80 درجه قرار داده تا متورم شود و حل شود، عصاره سیستانش دسرتیکولا را اضافه کرده، سپس گلیسیرین، پروپیلن گلیکول، توئین 60 را اضافه کرده و خوب مخلوط کنید، فاز روغن را اضافه کنید. به فاز آب، مدام هم بزنید و امولسیون کنید و تری اتانول آمین را اضافه کنید و یکنواخت هم بزنید و بگذارید خنک شود تا کرم سفید کننده سیستانچ بدست آید.

2.2 نسخه کرم سفید کننده ترجیحی

نسخه بهینه کرم سفید کننده سیستانش دسرتیکولا با آزمون متعامد غربالگری شد. با توجه به ظرافت، براقیت، ویسکوزیته، درجه مرطوب کنندگی و سایر جنبه های کرم سفید کننده، نمره جامع انجام شد، مقدار میانگین گرفته شد و با توجه به نتایج، نسخه بهینه کرم سفید کننده انتخاب شد.

نسخه بهینه کرم سفید کننده A2B1C2D3 است، یعنی استئاریل الکل 0.3g، Tween 601.0g، Span 00.25g،

Carbomer U300.09g. از جدول 3 می توان مشخص کرد که عاملی که بیشترین تاثیر را بر روی کرم سفید کننده دارد کربومر U30 است که تفاوت معنی داری دارد.

2.3 آزمایش خواص فیزیکی و شیمیایی

با مشاهده خواص و ظرافت کرم سفید کننده سیستانچ، pH آن مشخص شد و آزمایشات سانتریفیوژ، دمای پایین و پایداری انجام شد. نمونه آماده شده را به مدت 1 روز در -20 درجه قرار دهید و مشاهده کنید که آیا وجود دارد یا خیر

پدیده طبقه بندی و بارش ذرات [9]. به طور مداوم به مدت 30 روز در دمای اتاق قرار داده شد تا مشاهده شود که آیا پایدار است، آیا لایه لایه شدن، تغییرات رنگ و سایر پدیده ها وجود دارد یا خیر. کرم سفید کننده سیستانچ تهیه شده به روش «2.1.2» قهوه ای است

کرم رنگی با ظاهری خوب، نرم و لطیف، بدون چربی هنگام استفاده روی پوست. pH اندازه‌گیری‌شده (۰۵/۰±۹/۶0) بود که الزامات فارماکوپه جمهوری خلق چین را برآورده کرد و پس از سانتریفیوژ کردن، هیچ طبقه‌بندی نفت-آب در نمونه‌ها ظاهر نشد. پس از قرار دادن در درجه -20 به مدت 1 روز و در دمای اتاق به مدت 30 روز، هیچ لایه لایه و تغییر رنگی رخ نداد. کرم سفید کننده Cistanche deserticola پایداری خوبی از خود نشان داد.

2.4 شناسایی TLC

1 گرم از عصاره سیستانش دسرتیکولا را دقیقاً وزن کنید، مقدار مناسبی متانول را اضافه کنید، در یک پاک کننده اولتراسونیک به مدت 15 دقیقه اولتراسونیک کنید، فیلتر کنید، آب را تقریباً خشک کنید و در متانول حل کنید تا محلول ماده دارویی مرجع را به دست آورید. 0.5 گرم از ماتریس خالی و کرم سفید کننده سیستانچ را بگیرید، متانول را اضافه کنید، با اولتراسونیک حل کنید، سانتریفیوژ کنید و مایع رویی را به ترتیب به عنوان محلول منفی و محلول آزمایش بگیرید.

10 میکرولیتر از هر یک از 3 محلول بالا را پیپت کنید، آنها را روی همان صفحه لایه نازک قرار دهید و یک عامل ایجاد کننده را به نسبت کلروفرم 6: n-بوتانول 1: متانول 2: اسید فرمیک 2 مستقر کنید [10]، آن را بگیرید. آن را بیرون آورده و خشک کنید، آن را با اتانول سولفات 10 درصد اسپری کنید و در دمای 105 درجه حرارت دهید تا لکه ها پاک شوند. از شکل 1 می توان دریافت که نقاط TLC کرم سفید کننده سیستانش شفاف و خاص هستند و ماتریس خالی هیچ تداخلی ندارد.

2.5 تعیین محتوای ورباسکوزید

2.5.1 شرایط کروماتوگرافی [11] ستون کروماتوگرافی یک ستون C18 (250mm×4.6mm, 5μm) است. فاز متحرک: استونیتریل-0.1 درصد محلول اسید فسفریک (20:80); سرعت جریان: 1.0 میلی لیتر در دقیقه؛ طول موج تشخیص: 330 نانومتر. دمای ستون:

30 درجه؛ حجم تزریق: 20 میکرولیتر

2.5.2 آماده سازی محلول

① تهیه محلول آزمایشی. 0.5 گرم از کرم سفید کننده تهیه شده از سیستانش دسرتیکولا را دقیقاً وزن کنید، مقدار مناسبی متانول اضافه کنید، با اولتراسونیک به مدت 15 دقیقه (40 کیلوهرتز) حل کنید و در یک فلاسک حجمی 10 میلی لیتری تا حجم ثابت فیلتر کنید. محلول تست را بدست آورید ②تهیه محلول مرجع. 4.13 میلی گرم از ماده مرجع Verbasin را به طور دقیق وزن کنید، آن را در یک فلاسک حجمی 100 میلی لیتری قرار دهید، با متانول 50 درصد به حجم رقیق کنید و خوب تکان دهید تا محلول ماده مرجع به دست آید.

③نکته منفی: 1. کنترل مواد دارویی. 2. ماتریس خالی; کرم سفید کننده سیستانچ 3، 4، 5.

آماده سازی محلول. مقدار {0}}.5 گرم از ماتریس خالی آماده شده را به طور دقیق وزن کرده، مقدار مناسبی متانول اضافه کنید، با اولتراسونیک حل کنید و در یک فلاسک حجمی به حجم 10 میلی لیتر صاف کنید تا محلول منفی به دست آید. محلول های فوق از طریق یک غشای ریز متخلخل 0.45 میکرومتر فیلتر شدند.

2.5.3 بررسی سازگاری سیستم

ماده آزمایش، ماده مرجع و محلول منفی را به ترتیب گرفته و با توجه به شرایط کروماتوگرافی تحت "2.5.1" تعیین را انجام دهید.

زمان پیک ورباسکوزید در ماده آزمایش و ماده مرجع مشابه بود و پیک در محلول منفی مشاهده نشد که نشان می دهد ویژگی خوب بوده و محلول منفی با آن تداخلی نداشته است.

2.5.4 بررسی رابطه خطی

محلول ماده مرجع ورباسیدین را جذب کنید تا محلول استاندارد 6.25، 12.5، 25، 50، 100، 200 ug/mL تهیه کنید و تحت شرایط کروماتوگرافی تحت "2.5.1" اندازه گیری کنید، غلظت را به عنوان آبسیسا و ناحیه پیک در نظر بگیرید. به عنوان مختصات عمودی، معادله رگرسیون خطی y=28483x به علاوه 54316 (R{13}}.9994) به دست آمد، که نشان می‌دهد رابطه خطی بین ورباسکوزید و مساحت پیک در محدوده 6.25~ خوب است. 200 گرم در میلی لیتر

2.5.5 تست دقیق

محلول مرجع را با دقت رسم کنید و آن را با توجه به شرایط کروماتوگرافی در "2.5.1" اندازه گیری کنید، RSD ناحیه پیک ورباسکوزید 1.58 درصد است (n=6)، که نشان می دهد دقت ابزار خوب است. .

2.5.6 آزمون تکرارپذیری

محلول نمونه آزمایشی را با دقت رسم کنید و آن را با توجه به شرایط کروماتوگرافی در "2.5.1" اندازه گیری کنید، RSD ناحیه پیک ورباسکوزید 1.81 درصد است (n=6)، که نشان می دهد روش تکرارپذیری خوبی دارد. .

2.5.7 تست پایداری

محلول آزمایشی را که به مدت 0، 4، 8، 12، 20 و 24 ساعت در دمای اتاق قرار داده شده بود، به دقت رسم کنید و آن را اندازه بگیرید. RSD ناحیه پیک ورباسکوزید 1.04 درصد است که نشان می‌دهد محلول آزمایشی پایداری خوبی در 24 ساعت دارد.

2.5.8 آزمایش بازیابی اضافه نمونه

9 قسمت از محلول آزمایشی با محتوای شناخته شده را دقیقاً رسم کنید، به همان مقدار ماده مرجع Verbasin اضافه کنید تا حل شود.

مایع، و با توجه به شرایط کروماتوگرافی تحت "2.5.1" اندازه گیری کنید. هر 0.5g، با توجه به روش "2.5.2 ①" برای آماده سازی محلول آزمایش، با توجه به "2.5.1" تحت شرایط کروماتوگرافی برای تزریق نمونه و تعیین.

3 بحث در موردکرم سفید کننده سیستانچ

اگرچه بسیاری از آنزیم‌ها در تولید ملانین نقش دارند، تیروزیناز و پروتئین مربوط به تیروزیناز-1 (TRP{2}}) و پروتئین مربوط به تیروزیناز-2 (پروتئین مربوط به تیروزیناز-2) ) ، TRP-2) نقش مهمی در سنتز ملانین دارد. به طور خاص، تیروزیناز نقش محدود کننده سرعت در کاتالیز سنتز ملانین ایفا می کند و مهم ترین راه برای توسعه مهارکننده های سنتز ملانین است. ملانوز شناخته شده است که توسط بیش از 125 ژن مختلف تنظیم می شود [12]. این ژن ها برخی از عملکردهای بیولوژیکی مهم ملانوسیت ها مانند تمایز سلولی و تنظیم رنگدانه یا ملانوژنز را تنظیم می کنند. در میان آنها، فاکتور رونویسی میکروفتامیا (MITF) مهمترین عضو فاکتورهای رونویسی رشد ملانوسیت شناخته شده است [13]. MITF فرآیند رونویسی خود را با اتصال به نواحی پروموتر بیان ژن TYR، TRP{12}} و TRP{13}} تنظیم می‌کند [14]. فنیل اتانوئید Cistanche deserticola می تواند محتوای ملانین را کاهش دهد، به طور قابل توجهی سطح رونویسی ژن های TYR و TRP{15}} را مهار کند، و بیان پروتئین های TYR، TRP{17}} و TRP{18}} را کاهش دهد. علاوه بر این، فنیل گلیکوزید Cistanche deserticola همچنین می‌تواند سطح رونویسی mRNA MITF را مهار کرده و بیان پروتئین MITF را کاهش دهد[15].

تقاضا برای لوازم آرایشی سفید کننده در چین و آسیا سال به سال در حال افزایش است، اما مواد فعال در اکثر لوازم آرایشی معمولا حاوی مواد مضر هستند. کشور من از نظر منابع طب سنتی چینی غنی است و ایمنی بالایی دارد. بنابراین، این مطالعه استفاده شدسیستانچبه عنوان ماده اولیه برای تهیه کرم سفید کننده. کرم سفید کننده آماده شده دارای ظاهری خوب، لطیف و صاف، خواص پایدار، بدون احساس چربی در هنگام آغشته شدن بر روی پوست و میل ترکیبی قوی پوست است. خواص فیزیکی و شیمیایی آن مورد آزمایش قرار می گیرد و نتایج آزمایش نشان می دهد که پایداری خوبی دارد. طراحی تست متعامد دارای مزایای روش علمی، عملیات ساده و اثر قابل توجه است. بنابراین برای غربالگری نسخه بهینه از آزمون متعامد استفاده شدکرم سفید کننده سیستانچ. 600.25 گرم، Carbomer U300.09g. فاکتوری که بیشترین تأثیر را بر روی کرم سفید کننده داشت با استفاده از ANOVA کربومر U30 تعیین شد. تعیین محتوای ورباسکوزید توسط کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا ساده و امکان پذیر است، با قابلیت تکرار خوب، دقت بالا و نتایج قابل اعتماد.

If you have any questions, please send us Email at: wallencesuen@wecistanche.com