استرس اکسیداتیو و بیومارکرهای آنتی اکسیدانی در مغز آنالیز شدند

لطفا تماس بگیریدoscar.xiao@wecistanche.comبرای اطلاعات بیشتر

خلاصه

پیری نشان دهنده انباشت تغییرات پیشرونده در انسان در طول زمان است و می تواند تغییرات فیزیکی، روانی و اجتماعی را پوشش دهد. این یک فرآیند مرتبط با استرس اکسیداتیو است که با افزایش سن پیشرفت می کند. فعالیت آنتی اکسیدانی اوژنول (EU) یا کارواکرول (CAR) برای پیری در موش اسباب بازی D-gal القا شده به مدت 42 روز در مطالعه حاضر با استفاده از 10 و 20 میلی گرم EU/kg/day/خوراکی مورد بررسی قرار گرفت، در حالی که CAR مکمل بود. 40 و 80 میلی گرم / کیلوگرم / روز / خوراکی. ارزیابی‌های بیوشیمیایی، بیان mRNA و هیستوپاتولوژیک نمونه‌های مغزی، تغییرات اکسیداتیو ناشی از D-gal و نقش محافظتی EU و CAR را ارزیابی کردند. سطوح بیان mRNA، به عنوان نشانگر پیری و سطح بیان mRNA Bax، به عنوان یک نشانگر آپوپتوز. همچنین، نتایج تغییراتی را در سطوح نشانگرهای بیوشیمیایی مانند کراتین فسفوکیناز (CPK) و تری آسیل گلیسرول (TAG) و افزایش ظرفیت آنتی اکسیدانی مغز مشاهده کردند. در نهایت، این نتایج با گروه‌های تحت درمان با EU و CAR مقایسه شد تا مشاهده شود که اتحادیه اروپا و CAR به طور بالقوه این تغییرات اکسیداتیو مرتبط با پیری را به شیوه‌ای وابسته به دوز کاهش می‌دهند. در نهایت، می‌توان نتیجه گرفت که مکمل‌های EU و CAR ترکیبات محافظ طبیعی امیدوارکننده‌ای در نظر گرفته می‌شوند که می‌توانند پیری را به تاخیر بیندازند و سلامتی را حفظ کنند.

کلید واژه هاپیری · آپوپتوز · ضد پیری · اوژنول · کارواکرول

مقدمه

پیری یک تغییر فیزیولوژیکی پیشرونده به دلیل استرس اکسیداتیو است که منجر به کاهش پتانسیل عملکردی در کل طول عمر بزرگسالی می شود (Davalli et al.2016). عدم تعادل بین اکسیدان ها و آنتی اکسیدان ها باعث استرس اکسیداتیو، کاهش توانایی آنتی اکسیدانی و تجمع گونه های فعال اکسیژن (ROS) می شود که منجر به تغییرات اکسیداتیو سلولی در لیپید، پروتئین و اسیدهای نوکلئیک می شود (Neki 2015). قرار گرفتن در معرض سموم، نور خورشید، غذاهای مضر، آلودگی و دود می تواند به بافت به دلیل تولید ROS آسیب برساند (Krafts 2010). در طبیعت، شکل اصلی گالاکتوز D-گالاکتوز (D-gal) است. شیر و محصولات لبنی منبع طبیعی اولیه گالاکتوز هستند (آکوستا و گراس 1995). برخی از میوه‌ها و سبزیجات مانند گوجه‌فرنگی، کلم بروکسل، موز و سیب نیز دارای گالاکتوز آزاد هستند (گروس و آکوستا 1991). دسرهای لبنی حاوی گالاکتوز بالا (ویلیامز 2003).

لطفا برای دانستن بیشتر اینجا را کلیک کنید

مدل پیری ناشی از D-gal به طور گسترده برای مطالعه پیری مورد استفاده قرار گرفته است (پارامشواران و همکاران 2010؛ الفار و همکاران 2020b). D-gal بالاتر باعث ROS و کاهش فعالیت آنتی اکسیدانی مغز، پیری مغز و کوتاه شدن طول عمر شد (Coelho et al.2015). همچنین، در طول متابولیسم خود، D-gal ROS تولید می کند و محصولات گلیکاسیون پیشرفته گلیکاسیون نهایی (AGE) تولید می کند که در نهایت روند پیری را سرعت می بخشد (Bucala and Cerami 1992; Song et al.1999).

محصولات طبیعی نقش مهمی در کشف دارو، به ویژه سرطان و بیماری های عفونی ایفا کرده اند (El-Far 2015; El-Far et al.2018,2020a,b,2021; Eshrafizadeh et al. 2020,2021; Atanasov et al.2021; Abadi et al.2021; Mohsen et al.2022. Eugenol (4-Allyl-2-methoxyphenyl,EU) یک جزء اصلی فنولی روغن میخک (Eugenia caryophyl-lata) است که دارای آنتی اکسیدان و رادیکال قوی است. - فعالیت های پاکسازی (Gulcin 2011). محصول طبیعی دیگر کارواک رول (CAR)، مونوترپنوئید فنلی موجود در اسانس پونه کوهی (Origanum vulgare)، آویشن (Thymus vul-garis)، فلفل (Lepidium flavum)، ترنج وحشی (Cit-rus Aurantium bergamia) و گیاهان دیگر (شریفی راد و همکاران 2018). فعالیت آنتی اکسیدانی بالای CAR به دلیل گروه هیدروکسیل (OH) مرتبط با حلقه معطر است (Mondal et al. 2021).سیستانچ แอ ม เว ย์هدف آزمایش حاضر کمک به اثر محافظتی ضد پیری EU و CAR در پیری ناشی از تجربی در مغز موش‌ها توسط D-gal است.

مواد و روش ها

بیانیه اخلاق

این مطالعه در پاسخ به "راهنمای NIH برای مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی" توسط کمیته اخلاق دانشکده دامپزشکی دانشگاه دامنهور، مصر تایید شد.

طراحی تجربی

پنجاه و شش موش صحرایی نر نژاد ویستار بین 90 و 110 گرم در شرایط آزمایشگاهی استاندارد با چرخه نور/تاریکی 12- ساعت نگهداری شدند و اجازه دسترسی آزادانه به گلوله‌های غذایی داشتند (جدول 1) و آب. موش‌ها به هفت گروه (n{5}} در هر گروه) تقسیم شدند. در گروه کنترل، روزانه محلول فیزیولوژیک نمک فیزیولوژیک (9/0 درصد) به صورت زیر جلدی تزریق شد. در مقایسه، به گروه خودرو روزانه محلول فیزیولوژیک فیزیولوژیک (9/0 درصد) و به صورت خوراکی روغن زیتون تزریق شد. موش‌های گروه D-gal روزانه 200 میلی‌گرم D-gal/kg وزن بدن (BW) (Fan et al.2017) محلول در محلول نمکی به همراه مکمل خوراکی با روغن زیتون به صورت زیر جلدی تزریق شدند. در گروه D-gal به علاوه EU10، به موش‌ها روزانه 200mg D-gal/kg BW محلول در محلول نمکی و به صورت خوراکی با EU با دوز 10mg/kg BW (Mateen et al.2019) محلول در روغن زیتون تزریق شد. Yogalakshmi و همکاران 2010)، در حالی که در گروه D-gal به علاوه EU20، موش‌ها روزانه 200 میلی‌گرم D-gal/kg BW محلول در محلول نمکی علاوه بر مکمل خوراکی با EU با دوز 20 میلی‌گرم بر کیلوگرم وزن بدن به صورت زیر جلدی تزریق شدند. و همکاران 2019) محلول در روغن زیتون (Yogalakshmi et al.2010). موش های گروه D-gal به علاوه CAR40 به صورت زیر جلدی با D-gal (200mg/kg BW) محلول در محلول نمکی روزانه به همراه مکمل خوراکی تزریق شدند. CAR با دوز 40mg/kg BW روزانه (Aristatile et al.2009) محلول در روغن زیتون (Stojanovic et al.2019). از سوی دیگر، در گروه D-gal به علاوه CAR80، موش‌ها روزانه با D-gal (200/kg BW) محلول در محلول نمکی و به صورت خوراکی با دوز 80mg/kg B. W روزانه با CAR به صورت زیر جلدی تزریق شدند. Aristatile و همکاران 2009) حل شده در روغن زیتون (Stojanovic et al.2019). آزمایش به مدت 42 روز سپری شد و موش ها در روز 42 وزن شدند.

سیستانچ می تواند ضد پیری باشد

نمونه برداری

در روز 42، حیوانات با استنشاق ایزوفلوران بیهوش و با دررفتگی دهانه رحم کشته شدند. نمونه خون از وریدهای موش جمع آوری شد. پس از سانتریفیوژ در 100 xg به مدت 15 دقیقه در دمای اتاق، سرم های شفاف جدا شدند، برچسب گذاری شدند و تحت آنالیزهای بیوشیمیایی قرار گرفتند.

نمونه‌های مغز مخچه و هیپوکامپ پس از برداشتن جراحی جمع‌آوری شد و سپس با بافر فسفات سالین (PBS) شستشو داده شد تا خون اضافی برای پارامترهای هیستوپاتولوژیک، آنتی‌اکسیدانی و ارزیابی بیان mRNA حذف شود. بخشی از نمونه های مغز در 4 درصد پارافورمالدئید محلول در PBS به مدت 48 ساعت برای تثبیت نمونه تثبیت شد. سایر قسمت‌ها برای ارزیابی وضعیت آنتی‌اکسیدانی و بیان mRNA برچسب‌گذاری شدند و در درجه{2}} نگهداری شدند.

ارزیابی بیوشیمیایی

نمونه های سرم تحت تعیین کلسترول تام (T.cholesterol)، تری آسیل گلیسرول (TAG)، آلانین آمینوترانسفراز (ALT,EC 2.6.1.2)، آسپارتات آمینوترانسفراز (AST،EC2.6.1.1)، کراتینین، کراتین فسفوکیناز (CPK، EC 2.7.3.2)، و لاکتات دهیدروژناز (LDH، EC 1.1.1.27). آزمایش‌های بیوشیمیایی با استفاده از آنالایزرهای Roche/Hitachi Cobas c 311، Cobas c 501/502 با استفاده از سیستم تمام خودکار اندازه‌گیری شد.

ارزیابی استرس اکسیداتیو و وضعیت آنتی اکسیدانی

استرس اکسیداتیو و بیومارکرهای آنتی اکسیدانی در هموژن مغز 20 درصد (w/v) با استفاده از نمک بافر فسفات سرد 0.1 مولار تجزیه و تحلیل شدند و در معرض تعیین سطح مالون-دی آلدئید (MDA) و ظرفیت آنتی اکسیدانی کل (TAC) و فعالیت های گلوتاتیون پراکسیداز (GPx; EC 1.11.1.9) و گلوتاتیون S-ترانسفراز (GST؛ EC2.5.1.18) با استفاده از کیت های تجاری Biodiagnostic Co. (Giza، مصر). غلظت پروتئین هموژنه های مغز با روش برادفورد (5000002، Bio-Rad Laboratories، Watford، UK) برای استانداردسازی پارامترهای بیوشیمیایی ارزیابی شد (Brad-ford 1976).

ارزیابی بیان ژن توسط واکنش زنجیره ای پلیمراز بلادرنگ (RT-PCR)

با توجه به کیت سازنده، RNA کل از نمونه های بافت استخراج شد (Easy spin TM kit Total RNA Extraction Kit، INTRON Biotechnology، کره). خلوص و غلظت RNA توسط یک اسپکتروفتومتر نانودراپ (Genway Nanodrop, German) 1.1 ug RNA （260/28{11}} نسبت=1 اندازه گیری شد.{{5} }.0) برای رونویسی cDNA با استفاده از کیت RT-Premix (INTRON، بیوتکنولوژی، کره) استفاده شد. 2.2 لیتر از محصول RT با 10 لیتر از مخلوط اصلی SYBR-Green (INTRON، Biotechnology، کره) و 0.5 میلی مولار از هر یک مخلوط شد. پرایمر رو به جلو و معکوس (جدول 2) و آب بدون نوکلئاز در حجم نهایی 20 ul.تمام واکنش ها بر روی یک 7500 Applied Bio-systems، USA با شرایط زیر انجام شد: 95 درجه به مدت 10 دقیقه و سپس 40 سیکل. در 95 درجه برای 15 ثانیه، 58 درجه برای 15 درجه و 72 درجه برای 30 ثانیه بیان نسبی mRNA به -اکتین به عنوان ژن خانه دار نرمال شد و تغییرات برابری بیان mRNA با روش {28}} Ct محاسبه شد. توسط لیواک و اشمیتگن (2001) توصیف شده است.

ارزیابی هیستوپاتولوژیک

پس از شستشو با PBS (pH7.4) و تثبیت در 4 درصد پارافورمالدئید محلول در PBS به مدت 48 ساعت، نمونه‌های ثابت توسط تکنیک معمولی تعبیه پارافین پردازش شدند که شامل آبگیری از طریق درجات صعودی اتانول، پاکسازی در سه تغییر زایلن و پارافین ذوب شده و در نهایت جاسازی در موم پارافینی در دمای 65 درجه. مقاطع ضخامت چهار میکرومتری توسط هم-توکسیلین و ائوزین رنگ‌آمیزی شدند (Bancroft and Layton 2013). آلمان) متصل به میکروسکوپ (Leica DM500).

تحلیل آماری

برای تجزیه و تحلیل داده‌ها با استفاده از GraphPad Prism v.5 (https://www.graphpad.com/)، که در 10 مارس 2021 (GraphPad، سن دیگو، کالیفرنیا) مشاهده شد، از یک ANOVA یک طرفه با آزمون‌های چند دامنه‌ای تعقیبی Tukey استفاده شد. ، ایالات متحده آمریکا). همه اعلامیه های اهمیت به P بستگی داشت<>

نتایج

وزن بدن

وزن بدن در گروه D-gal به طور قابل توجهی کاهش یافت (P< 0.001)="" compared="" with="" the="" control="" group.="" on="" the="" other="" hand,="" in="" the="">< 0.001),=""><><0.01), and=""><0.01)groups,the body="" weight="" exhib-ited="" a="" significant="" increase="" in="" comparison="" with="" the="" control="">

در مقایسه با گروه خودرو، وزن بدن در D-gal به علاوه EU10 (P<0.001)and the="" d-gal+eu20(p="" <="" 0.05)="" groups="" was="" markedly="" increased.="" also,="" the="" body="" weight="" in="" the="" d-gal+eu10,="" d-gal+eu20,="" d-gal+car40,="" and="" d-gal+car80="" groups="" exhibited="" significant="" increases=""><0.001)in comparison="" with="" the="" d-gal="">

ارزیابی بیوشیمیایی

سطح کلسترول تام سرم در D-gal (P<0.01),><0.01),><0.01), vehicle="">< 0.001),="">< 0.001),="" and=""><0.001) groups="" were="" significantly="" decreased="" compared="" with="" the="" control="" group="">

سطح سرمی TAG در گروه D-gal به طور قابل توجهی افزایش یافت (P<0.01) compared="" with="" the="" control="" group.="" also,="" in="" the="" d-gal+eu10,="" its="" level="" exhibited="" a="" significant="" increase=""><0.05) in="" comparison="" with="" the="" same="" group.="" tag="" levels="" were="" markedly="" raised="" increased="" in="" d-gal=""><0.001) and=""><0.01) groups="" in="" comparison="" with="" the="" vehicle="" group="" (fig.="" 2b).="" serum="" cpk="" activities="" in="" the="" d-gal="" group="" were="" significantly="" increased="" compared="" with="" the="" control=""><0.01) and=""><0.05)groups. in="" the="" d-gal+eu20="" and="" d-gal+car80,="" its="" levels="" were="" significantly="" decreased=""><0.05) in="" comparison="" with="" the="" vehicle="">

استرس اکسیداتیو و وضعیت آنتی اکسیدانی

القای پیری توسط D-gal به طور قابل توجهی (P< 0.001)increased="" mda="" (fig.="" 3a),="" the="" product="" of="" oxidative="" stress,="" compared="" with="" control="" and="" vehicle="" groups.="" mda="" lev-els="" in="" brain="" homogenates="" were=""><0.001)decreased in="" d-gal+eu10,="" d-gal+eu20,="" d-gal+car40,="" and="" d-gal+car80="" groups="" compared="" with="" the="" d-gal="" group.="" tac="" levels="" (fig.="" 3b)="" gpx="" (fig.="" 3c)="" and="" gst="" (fig.="" 3d)activities="" were="" significantly="" increased="" in="" the="" same="" groups="" compared="" with="" the="" d-gal="" group="" to="" neutralize="" the="" oxidative="" stress="">

ارزیابی بیان ژن توسط RT-PCR

بیان mRNA p53 مغز در گروه های D-gal، D-gal به علاوه EU10، D-gal به علاوه EU20، D-gal به علاوه CAR40 و D-gal به علاوه CAR80 به طور قابل توجهی افزایش یافت (P<0.001) compared="" with="" the="" control="" and="" vehicle="" groups="" (fig.="" 4a).="" compared="" with="" the="" d-gal="" group,="" in="" the="" d-gal+eu10,="" d-gal+eu20,="" d-gal+car40,="" and="" d-gal+car80="" groups,="" p53="" expressions="" were="" signifi-cantly="" decreased=""><>

از سوی دیگر، سطح بیان آن در D-gal به علاوه CAR40 به طور قابل توجهی افزایش یافت (P<0.001) compared="" with="" the="" d-gal+car80="" group.="" in="" the="" d-gal+eu10="" group,="" its="" level="" was="" a="" significant="" decrease="">< 0.001)="" in="" comparison="" with="" d-gal+eu20="" and="" d-gal+car40="" groups,="" while="" in="" the="" d-gal+eu20,="" its="" level="" showed="" a="" significant="" increase=""><0.001) compared="" with="" the="" d-gal+car80="" group="">

سطح بیان mRNA p21 مغز در گروه D-gal به طور قابل توجهی افزایش یافت (P<0.001) compared="" with="" the="" control="" group="" (fig.4b).in="" the="" d-gal+eu10,="" d-gal+eu20,="" d-gal+car40,="" and="" d-gal+car80="" groups,="" the="" expression="" levels="" were="" significantly="" decreased=""><0.001) compared="" with="" the="" d-gal="" group.="">چه مقدار سیستانچ مصرف کنیمدر گروه D-gal سطوح آن افزایش معنی داری نشان داد (P< 0.001)="" compared="" with="" the="" vehicle="" group,="" while="" its="" levels="" were="" significantly="" decreased="" (p=""><0.001)in d-gal+eu10,="" d-gal+eu20,="" d-gal+car40,="" and="" d-gal+car80="" groups="" compared="" with="" the="" vehicle="" group.="" the="" brain="" bax="" mrna="" expression="" in="" the="" d-gal="" group="" was="" significantly="" increased="">< 0.001)="" compared="" with="" the="" control="" group.="" on="" the="" other="" hand,="" in="" the="" d-gal+eu10,="" d-gal+eu20,="" d-gal+car40,="" and="" d-gal+car80="" groups,="" its="" expression="" levels="" were="" significantly="" decreased=""><0.001) in="" comparison="" with="" the="" control="" group.="" also,="" the="" d-gal="" group="" was="" exhibited="" significant="" increases="" in="" bax="" expres-sion="" levels="">< 0.001)="" compared="" with="" the="" vehicle="" group="" (fig.4c).in="" the="" d-gal+eu10,="" d-gal+eu20,="" d-gal+car40,="" and="" d-gal+car80="" groups,="" the="" brain="" bax="" mrna="" expression="" levels="" were="" significantly="" decreased=""><0.001) in="" compari-son="" with="" the="" d-gal="" and="" vehicle="" group.="" the="" d-gal+eu10="" group="" showed="" a="" markedly="" raised="">< 0.05)="" expression="" level="" compared="" with="" the="" d-gal+eu20="" group.="" also,="" in="" the="" d-gal+eu10="" group,="" its="" levels="" were="" significantly="" increased="" (p=""><0.001)compared with="" the="" d-gal+car40="" group="">

ارزیابی هیستوپاتولوژیک

گروه های کنترل منفی و وسیله نقلیه یک ساختار مخچه طبیعی را نشان دادند که شامل لایه های مولکولی یکنواخت، دانه ای و سلولی پورکنژ بود (شکل 5A, B). از سوی دیگر، گروه D-gal از بین رفتن و نکروز سلول های پورکنژ را در سلول های پورکنژ و لایه های سلول های دانه ای نشان داد (شکل 5C). لایه ای با تعداد هسته های پیکنوز کمتر از گروه D-gal (شکل 5D).D-gal به علاوه EU20 و D-gal به علاوه CAR40 ساختار مخچه ای نسبتاً طبیعی را به عنوان گروه کنترل منفی نشان داد (شکل 5D,F). D-gal به علاوه CAR80 بهبود در تعداد سلول های پورکنژ در لایه سلول های پورکنژ با تعداد هسته های پیکنوتیک کمتری نسبت به گروه D-gal نشان داد (شکل 5G).

گروه های کنترل منفی و وسیله نقلیه ساختار هیپوکامپ طبیعی را نشان دادند (شکل 6A, B).سیستانچ چیستاز سوی دیگر، نکروز نورون های شکنج دندانه دار در گروه D-gal شدید بود. لایه ها و تعداد سلول های هیپوکامپ با بزرگ شدن فضای بین سلولی و سلول های بی نظم کاهش یافت. به ویژه، برخی از سلول‌ها در حجم کوچک می‌شوند، همراه با پیکنوز یا پارگی در هسته (شکل 6C). EU20 ساختار هیپوکامپ نسبتاً طبیعی را به عنوان گروه کنترل منفی نشان داد (شکل 6E). سلول های هیپوکامپ با نکروز کمتر از گروه D-gal (شکل 6G).

بحث

بر اساس چشم انداز جمعیت جهانی سازمان ملل متحد (ساندر و همکاران 2015)، درصد افراد 60 ساله یا بیشتر در سال 2015 12.3 درصد گزارش شد و پیش بینی می شود تا سال 2050 به 21.5 درصد از جمعیت جهان افزایش یابد. استرس اکسیداتیو، فرآیندی که با از دست دادن تدریجی عملکرد بافت/ارگان مشخص می شود، محرک اصلی پیری است (Shwe et al.2018). یک دوز برون زا از D-gal می تواند با افزایش استرس اکسیداتیو، آپوپتوز و التهاب، اثرات پیری را در چندین اندام القا کند (رحمان و همکاران 2017؛ الفار و همکاران 2020b). مغز به دلیل متابولیسم بالا، چربی بالا محتوا و مکانیسم‌های حفاظت آنتی‌اکسیدانی محدود، آسیب‌پذیرترین اندام در برابر استرس اکسیدانی است (Cakatay 2010).

در مطالعه حاضر، EU و CAR به طور قابل توجهی فرآیند استرس اکسیداتیو در هموژن های مغز ناشی از D-gal را کاهش دادند. EU و CAR به طور قابل توجهی فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی GPx و GST را افزایش دادند که در شکل 7 نشان داده شده است. در همین زمینه، اتحادیه اروپا با افزایش فعالیت GPx، پتانسیل محافظت عصبی را در برابر استرس اکسیداتیو ناشی از آلومینیوم القا کرد (Mesole et al. 2020). علاوه بر این، ترکیب طب سوزنی و اوژنول توانایی یادگیری-حافظه و سیستم آنتی اکسیدانی هیپوکامپ را در موش‌های مبتلا به آلزایمر افزایش داد (Liu et al.2013).بیوفلاونوئیدهاهمچنین، CAR در برابر استرس اکسیداتیو ناشی از آلومینیوم (Baranauskaite et al.2020) و بیماری پارکینسون (Man-ouchehrabadi et al.2020) از طریق افزایش فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی محافظت می شود. D-gal باعث کاهش قابل توجه وزن بدن هنگام مقایسه گروه D-gal با گروه کنترل می شود. مطالعات متعددی در مورد پیری ناشی از تجربی گزارش کردند که D-gal باعث کاهش وزن بدن در موش‌ها (چن و همکاران 2018) و موش‌ها (Suo et al.2018) شد. مطالعه فعلی نشان داد که تجویز اتحادیه اروپا یا CAR در موش‌های تحت درمان با D -gal می تواند به طور قابل توجهی وزن بدن را در طول دوره درمان (42 روز) به نزدیک به نرمال بازگرداند. این مشاهدات توسط مطالعه هارب و همکاران پشتیبانی می شود. (2019) که این بهبود را در افزایش وزن بدن در موش‌ها با دوز 10 میلی گرم اتحادیه اروپا در کیلوگرم نشان داد. روده کوچک و به طور موثر عملکرد رشد جوجه های گوشتی را بهبود می بخشد. همچنین CAR در افزایش عملکرد دام مانند موش‌های صحرایی Wister (راجان و همکاران 2015)، جوجه‌های گوشتی (هاشمی پور و همکاران 2013) و قزل‌آلای رنگین کمان نوجوان (احمدی فر و همکاران 2011).

با توجه به سطح بیوشیمیایی، کاهش قابل توجهی در سطح کلسترول سرم گروه های تحت درمان با اتحادیه اروپا یا CAR مشاهده شد. این می تواند به دلیل فعالیت هیپوکلسترولمیک آنها باشد. همه دوزهای EU یا CAR باعث کاهش سطح سرمی کل TAG می شوند که به صورت خوراکی در گروه تحت درمان با D-gal روزانه 42 روز تجویز شود، اگرچه این کاهش زیاد نبود. الباحی و همکاران

(2015) و کرم و همکاران. (2015) یافته های ما را تأیید کرد که اتحادیه اروپا و CAR سطح سرمی TAG و کلسترول را کاهش می دهند.

در پاسخ به آسیب DNA، p53 از نظر عملکردی فعال می شود. این یک توقف چرخه سلولی برگشت پذیر، مرگ سلولی (آپوپتوز)، یا توقف برگشت ناپذیر چرخه سلولی (پیری سلولی) را آغاز می کند، که منجر به پیری می شود (Rodier et al.2007). p53 یک برنامه رونویسی ضد تکثیر پیچیده را تنظیم می کند که به پیری مربوط می شود. رونویسی مهارکننده کیناز وابسته به سیکلین (CDKi) p21 (Macip et al.2002) را تحریک می کند، که فعالیت CDK2 را مسدود می کند و در نتیجه خروج چرخه سلولی را به همراه دارد (Herranz and Gil 2018).

با توجه به سطح مولکولی، این مطالعه تأثیر تزریق D-gal را بر سطوح بیان mRNA p53 و p2I مغز نشان داد. افزایش قابل توجهی در بیان mRNA p53 و p21 مغز در پاسخ به تزریق D-gal وجود داشت. الفر و همکاران (2020a) تغییرات قابل توجهی در بیان p53 و p21 در موش های تحت درمان با D-gal تشخیص داد. همچنین سان و همکاران. (2018) دخیل در تنظیم دگرگونی p21 در موش های تزریق شده با D-gal را اعلام کرد. D-gal باعث استرس اکسیداتیو در سطوح بالا از طریق تجمع ROS می شود، تولید رادیکال های آزاد را تحریک می کند و فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی را کاهش می دهد (Xu et al.2009).سیستانچ بخرآسیب اکسیداتیو و التهاب نقش مهمی در میانجی تغییرات مرتبط با سن در اندام های مختلف مانند مغز، ماهیچه و کلیه ایفا می کند (Wei et al.2005).

نتایج فعلی کاهش قابل توجهی را در بیان mRNA p53 مغز در گروه‌های تحت درمان با EUR و CAR نسبت به گروه D-gal نشان داد، اما سطوح آن همچنان بالاتر از گروه‌های کنترل بود. در مورد مغز، سطح بیان mRNA p21 و Bax در گروه‌های تحت درمان با EUR و CAR نسبت به گروه‌های کنترل و D-gal به طور قابل توجهی کاهش یافت. لیو و همکاران (2018) تنظیم مثبت p53 و p21 را در هیپوکامپ موش‌های تحت درمان با D-gal تشخیص دادند. همچنین، D-gal باعث افزایش قابل توجهی در p53، p21 و Bax در پانکراس و کلیه موش‌ها شد (El-Far et al.2020b).

مانیکاندان و همکاران (2010،2011) گزارش کردند که تجویز اتحادیه اروپا با تعدیل پروتئین های خانواده Bcl{3}} آپوپتوز را از طریق مسیر میتوکندری القا می کند، در حالی که طبق CAR، Potocnjak و Domitrovic (2016) نقش آن را در کاهش بیان کردند. بیان عبارات p53 و p21 در برابر سمیت ناشی از سیس پلاتین در موش

در مطالعه حاضر، سطح بیان mRNA Bax به دلیل D-gal افزایش قابل توجهی را نشان داد. در بسیاری از مطالعات شاهرودی و همکاران. (2017) و Xu et al. (2016) افزایش قابل توجهی در بیان Bax در بافت مغز موش های تحت درمان با D-gal گزارش کرد، در حالی که سطح بیان mRNA Bax کاهش قابل توجهی را در موش های تحت درمان با EU و CAR.Jünior و همکاران نشان داد. (2016) نشان داد که اتحادیه اروپا از بیان بیش از حد Bax در سلول های سرطان دهانه رحم حمایت می کند. شوری و همکاران (2019) گزارش داد که CAR بیان Bax را در بافت بیضه موش‌های دیابتی بالغ کاهش داد. همچنین صادق زاده و همکاران. (2018) اشاره کرد که بیان Bax با اثر CAR در قلب هیپرتروفی شده در موش کاهش می یابد.

در مطالعه حاضر، D-gal باعث نکروز سلول های پورکنژ در لایه سلول های پورکنژ مخچه موش ها و نکروز سلول های عصبی شکنج دندانه دار هیپوکامپ شد. در مقابل، این نکروزها در گروه های مکمل اتحادیه اروپا و CAR شکست خوردند. چیروما و همکاران (2018) بیان کرد که D-gal و کلرید آلومینیوم باعث از دست دادن نورون مشخص در هیپوکامپ موش‌ها شدند.

با توجه به اثرات محافظتی EU و CAR در برابر تغییرات هیستوپاتولوژیک در مخچه و هیپوکامپ، مطالعه حاضر اولین کاهش قابل توجه شناخته شده در تغییرات هیستوپاتولوژیک مغز در نظر گرفته می شود.

نتیجه

فرضیه استرس اکسیداتیو احتمالاً اساس تغییرات سلولی مرتبط با پیری باقی می ماند. EU و CAR به روشی وابسته به دوز به طور بالقوه استرس اکسیداتیو ناشی از D-gal را در بافت مغز موش ها از طریق تنظیم پایین نشانگرهای پیری کاهش دادند (p53 و p21) و نشانگر آپوپتوز (Bax) با افزایش وضعیت آنتی اکسیدانی بافت های مغز. نتایج ما نشان می‌دهد که اتحادیه اروپا و CAR با موفقیت پیری بافت‌های مغز موش‌ها را کاهش داده‌اند، و آنها را نویدبخش مکمل‌های طبیعی ضد پیری می‌کنند.

مشارکت نویسنده مفهوم سازی: علی ح. الفار، هدیر ح. محمد، دعا ع. الساباغ، شیما ع. محمد، احمد ای. نورالدین، سواد الجوونی، و عبدالوهاب السنوسی. تحلیل رسمی: علی ح. الفر، هدیر ح. محمد، دعا ع. الساباغ، شیما ع. محمد، احمد ای. نورالدین، سود الجوونی، و عبدالوهاب السنوسی. تحقیق: علی الفر، هدیر ح.محمد، دعا ع. الساباغ، شیما ع.محمد، احمد ای. نورالدین، و عبدالوهاب السنوسی. نرم افزار: علی ح.الفر،حدیرح.محمد و دعای ع.الساباغ. اعتبار سنجی: علی ح. الفر، هدیر ح. محمد، دعا ع. الساباغ، شیما ع.محمد، احمد نورالدین، سواد الجاونی، و عبدالوهاب السنوسی. تجسم: علی ح. الفر، هدیر ح. محمد، دعا ع. الساباغ، شیما ع. محمد، احمد ای. نورل الدین، و عبدالوهاب السنوسی. نگارش - پیش نویس اصلی: علی ح. الفر، هدیر ح.محمد، دعا ع.الساباغ، و شیما ع.محمد؛ نگارش- بررسی و ویرایش: علی ح. الفر، حدیر ح. محمد، دعای ع.الساباغ ، شیما ا.محمد، احمد ای. نورالدین، سواد الجاونی، و عبدالوهاب السنوسی.

منابع مالیبودجه دسترسی آزاد توسط اداره سرمایه گذاری علم، فناوری و نوآوری (STDF) با همکاری بانک دانش مصر (EKB) ارائه شده است.

این مقاله از Environmental Science and Pollution Research استخراج شده است https://doi.org/10.1007/s11356-022-18984-8