قسمت 3: Echinacoside جدا شده از Cistanche Tubulosa به طور فرضی ترشح هورمون رشد را از طریق فعال کردن گیرنده گرلین تحریک می کند.

Echinacoside جدا شده از Cistanche tubulosa به طور فرضی ترشح هورمون رشد را از طریق فعال شدن گیرنده گرلین تحریک می کند.

چیه جو وو 1، می یین چین 2، نان هی لین 1، یی چیائو لین 1، ون یینگ چن 3، چائو هسیانگ چن 2،4* و جیسون تی سی تزن 1،*

1 موسسه فارغ التحصیل بیوتکنولوژی، دانشگاه ملی چونگ-هسینگ، تایچونگ 402، تایوان؛ baby159357520@gmail.com (C.-JW); CMNHEI@mohw.gov.tw (N.-HL); s9755702@gmail.com (Y.-CL)

2 Ko Da Pharmaceutical Co. Ltd., Taoyuan 324, Taiwan; rd1@koda.com.tw

3 گروه دامپزشکی، دانشگاه ملی چونگ-هسینگ، تایچونگ 402، تایوان. wychen@dragon.nchu.edu.tw

4 موسسه فارغ التحصیل فارماکوگنوزی، دانشگاه پزشکی تایپه، تایپه 110، تایوان

* مکاتبات: gm@koda.com.tw (C.-HC); TCTZEN@dragon.nchu.edu.tw (JTCT); تلفن: plus 886-4-22840328 (داخلی 776) (JTCT); فکس: به علاوه 886-4-22853527 (JTCT)

ویراستار آکادمیک: پیناروسا آواتو

دریافت: 22 ژانویه 2019; پذیرش: 14 فوریه 2019; تاریخ انتشار: 17 فوریه 2019

مخاطب:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساپ: 008618081934791

خلاصه:سیستانچگونه، جینسنگ صحرا، ثبت شده است که دارای بسیاری از فعالیت های بیولوژیکی در داروسازی سنتی چینی است و به عنوان داروی ضد پیری استفاده می شود. سه گلیکوزید فنیل اتانوئیداکیناکوزید، توبولوزید A و اکتئوزید در عصاره آب شناسایی شدندسیستانچ توبولوزا(Schenk) R. Wight و مؤلفه اصلی،اکیناکوزید، بیشتر تصفیه شد.اکیناکوزیدغلظت بالاتر از 10_6 M فعالیت قابل توجهی برای تحریک ترشح هورمون رشد سلول های هیپوفیز موش نشان داد. مشابه هورمون آزادکننده هورمون رشد-6، آنالوگ مصنوعی گرلین، تحریک ترشح هورمون رشد توسط اکیناکوزید توسط [D-Arg1، D-Phe5، D-Trp7،9، Leu11] - ماده P مهار شد. یک آگونیست معکوس گیرنده گرلین است. مدلسازی مولکولی نشان داد که هر سه گلیکوزید فنیل اتانوئیدی به اندازه کافی با جیب اتصال گیرنده گرلین برهمکنش داشتند و اکیناکوزید برهمکنش کمی بهتر از توبولوزید A و اکتئوزید با گیرنده نشان داد. نتایج نشان می‌دهد که گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید، به ویژه اکیناکوزید، ترکیبات فعالی هستند که احتمالاً مسئول اثرات ضد پیری C. tubulosa هستند و ممکن است به عنوان آنالوگ‌های غیر پپتیدیل گرلین در نظر گرفته شوند.

کلید واژه ها: سیستانچتوبولوزا;اکیناکوزید; گرلین؛ ترشح هورمون رشد؛فنیل اتانوئیدگلیکوزیدها

اکیناکوزیدکه درسیستانچاثرات زیادی دارد

لطفا برای قسمت 2 اینجا را کلیک کنید

4. مواد و روش ها

4.1. مواد شیمیایی و مواد گیاهی

سیستانچdeserticola YC Ma از یک بازار محلی به دست آمد و توسط دکتر نان هی لین تأیید شد.سیستانچtubulosa (Schenk) R. Wight از Sinopharm Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd.، (Hangzhou، چین) خریداری شد. استونیتریل، اسید فرمیک و متانول درجه HPLC از شرکت ECHO Chemical Co., Ltd، (Miaoli، تایوان) خریداری شد. محیط Eagle اصلاح شده Dulbecco (DMEM)، سرم جنین گاوی دیالیز شده (DFBS) و Trypsin-EDTA از Invitrogen (Carlsbad، CA، USA) خریداری شد. DNase I از Worthington Biochemical (Lakewood، NJ، ایالات متحده آمریکا) خریداری شده است. هورمون آزاد کننده هورمون رشد-6 (GHRP{5}}) از Gen Way Biotech, Inc. (سان دیگو، کالیفرنیا، ایالات متحده آمریکا) تهیه شد. کلاژناز نوع I و ماده P [D-Arg1، D-Phe5، D-Trp7،9، Leu11] از شرکت سیگما آلدریچ (سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا) خریداری شد. کیت هورمون رشد موش ELISA از Sunred Biological Technology Corporation (شانگهای، چین) خریداری شد.

4.2. تجزیه و تحلیل HPLC/UV و LC{2}}MSn از استخراج آب گونه های سیستانچ.

ساقه خشک شده (25 گرم) ازسیستانچdeserticola YC Ma یاسیستانچتوبولوزا (Schenk) R سه بار با 5{4}}0 میلی لیتر آب مقطر به مدت 60 دقیقه در دمای 50 درجه در حمام آب استخراج شد. محلول از طریق یک فیلتر سوریه 13 میلی متری با فیلتر غشایی PP 0.45 um (Pall Corporation، Glen Cove، نیویورک، ایالات متحده آمریکا) فیلتر شد و تحت آنالیزهای زیر قرار گرفت. ترکیبات شیمیایی موجود در عصاره ها مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت

با استفاده از یک ستون Syncronis C18 (4.6 × 250 میلی متر قطر داخلی، 5 um، Thermo Scientific، Waltham، MA، ایالات متحده آمریکا) در سیستم HPLC همراه با یک آشکارساز آرایه دیود نوری مدل 600E (Waters Corporation،

میلفورد، MA، ایالات متحده آمریکا). فاز متحرک شامل (A) آب حاوی {{0}}.1 درصد اسید فرمیک و (B) استونیتریل بود. گرادیان شستشو به شرح زیر بود: 0–60 دقیقه، گرادیان خطی از 14 درصد B. 0-3 دقیقه، 14 درصد تا 17 درصد B; 3-4 دقیقه، 17 درصد B; 4-15 دقیقه، 17 درصد تا 20 درصد B; 15-20 دقیقه، 20 درصد B; 20-50 دقیقه، 20 درصد تا 14 درصد B; 50-60

دقیقه، 14 درصد B. طول موج تشخیص جذب اشعه ماوراء بنفش (UV) روی 330 نانومتر تنظیم شد. یک طیف‌سنج جرمی پشت سر هم چهار قطبی تله خطی (LTQ) (Thermo Electron، San Jose، CA، USA) مجهز به رابط یونیزاسیون الکترواسپری (ESI) به یک سیستم Surveyor LC (Thermo Electron) متصل شد.

با یک حلقه نمونه 5 uL. گرادیان شستشو به شرح زیر بود: 0–90 دقیقه، گرادیان خطی از 14 درصد B. 0-24 دقیقه، 14 درصد تا 17 درصد B; 24-25 دقیقه، 17 درصد B; 25-36 دقیقه، 17 درصد تا 20 درصد B; 36-37 دقیقه، 20 درصد B; 37-80 دقیقه،

20% to 14% B; 80–90 min, 14% B. The heated capillary temperature was set at 300℃ with a spray voltage of 4.5 kV. Negative ESI mode was firstly scanned ranging from m/z 400–1000. Data-dependent MSN was obtained using the high purity helium (>99.99 درصد) به عنوان گاز برخورد.

4.3. جداسازی اکیناکوزید

عصاره آب از ساقه خشک شده (25 گرم) C. tubulosa تحت فشار کاهش یافته تغلیظ شد تا شربت قهوه ای تیره بدست آید. استخراج خام با آب مقطر به حالت تعلیق درآمد و توسط یک خشک کن انجمادی لیوفیلیز شد. پودر 100 میلی‌گرم در آب مقطر 5 میلی‌لیتری حل شد و با استفاده از ستون Sephadex LH{3}} (100 میلی‌لیتر؛ GE Healthcare Bio-Sciences AB، سوئد) با محلول متانول آبی 10 درصد شستشو داده شد و با استفاده از HPLC تحت تصفیه قرار گرفت. . فراکسیون های حاوی اکیناکوزید با خواندن جذب در 245 نانومتر شناسایی و با استفاده از نمونه برداری خودکار برداشت شدند.

4.4. حیوانات

آزمایش‌ها توسط کمیته مراقبت و استفاده از حیوانات سازمانی دانشگاه ملی Chung_Hsing با شماره تأیید IACUC 106-079 تأیید شد. موش های صحرایی نر Sprague_Dawley با وزن 250_300 گرم از BioLASCO، Taiwan Co., Ltd. (تایپه، تایوان) خریداری شدند. دو حیوان در هر قفس در یک محیط کنترل شده 23 o2، 60 o 10 درصد رطوبت و یک چرخه نور/تاریکی 12 ساعت نگهداری شدند. موش‌ها با یک رژیم غذایی استاندارد (کالری ارائه شده) تغذیه شدند

با 28.7 درصد پروتئین، 13.4 درصد چربی و 57.9 درصد کربوهیدرات، 5001 Rodent LabDiet، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا) و آب مقطر به طور آزاد.

4.5. کشت اولیه سلول های هیپوفیز

سلول های هیپوفیز بر اساس روش پراکندگی آنزیمی اصلاح شده ای که توسط Yamazaki و همکارانش ایجاد شده بود، جداسازی شدند. [29]. به طور خلاصه، موش‌های نر Sprague Dawley با Zoletil 50 (40 mg/kg، IP؛ Virbac Laboratories، Carros، فرانسه) بیهوش شدند و غدد هیپوفیز قدامی برداشته شدند و به سلول‌های هیپوفیز در حالت تعلیق پراکنده شدند، همانطور که قبلاً توضیح داده شد [30].

4.6. سنجش ترشح هورمون رشد

سلول های هیپوفیز قدامی اولیه 4 × 104 سلول در چاهک در دمای 37 درجه زیر 5 درصد CO2 به مدت 2 روز قبل از سنجش ترشح هورمون رشد طبق پروتکلی که قبلا توضیح داده شد، کشت داده شدند [30].

پس از حذف محیط کشت، سلول ها در محیط کشت عاری از سرم Dulbecco's Modied Eagle (DMEM) به مدت 90 دقیقه برای تثبیت ترشح هورمون پایه قرار گرفتند. محیط گرسنگی با DMEM تازه حاوی اکیناکوزید (از 10_8 تا 10_5 M) یا GHRP-6 (یک آگونیست گیرنده گرلین انسانی، GHSR، 10_7 M) جایگزین شد. به عنوان شاهد مثبت، سلول ها به مدت 15 و 30 دقیقه در دمای 37 درجه زیر 5 درصد CO2 انکوبه شدند. برای تشخیص اثر آنتاگونیست، سلول ها با GHSR انکوبه شدند

آگونیست معکوس، [D-Arg1، D-Phe5، D-Trp7،9، Leu11]-substance P (0.5 میکرومولار)، و سپس با DMEM حاوی اکیناکوزید (10_5 M) یا GHRP{12}} (10_7 M) به مدت 30 دقیقه. محیط برای جمع آوری شد

تعیین ترشح هورمون رشد توسط کیت ELISA هورمون رشد موش (شرکت فناوری بیولوژیکی شانگهای سانرد).

4.7. تحلیل آماری

داده ها به عنوان مقادیر میانگین o SD ارائه شد. تفاوت ها با آزمون تی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. محاسبات آماری توسط GraphPad Prism 6 (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, USA) انجام شد. سطح p < 0.05="" از="" نظر="" آماری="" معنی="" دار="" در="" نظر="" گرفته="">

4.8. همسانی مدلسازی و داکینگ

مدل‌سازی همسانی و اتصال به گیرنده گرلین انسانی، گیرنده ترشح‌کننده هورمون رشد (GHSR، شماره دسترسی AAI13548)، با پیروی از ساختار قبلی ما ایجاد شد [21،24]. به طور خلاصه، ساختارهای کریستالی گیرنده های آدرنرژیک 1 و 2 (PDB 2YCY و 3PDS) با لیگاندهای متصل، سیانوپیندولول و FAUC50 به عنوان الگو برای ساخت ساختار GHSR استفاده شد [31،32]. ساختار GHSR با کمترین انرژی کل PDF برای اتصال بیشتر با GHRP{10}}، اکیناکوزید، توبولوزید A و اکتئوزید انتخاب شد. تمام فرآیندهای مدل سازی با استفاده از پلتفرم Discovery Studio 2.1 (http://accelrys.com/) انجام شد.

ساختار سه بعدی GHRP{1}} از پایگاه داده ترکیبی Pub-Chem در وب سایت NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) دانلود شد. ساختارهای سه بعدی اکیناکوزید، توبولوزید A و اکتئوزید با استفاده از برنامه Chem3D (http://www.cambridgesoft.com/) ساخته شدند. محل اتصال لیگاند GHSR به عنوان فضای کروی با شعاع 14 Å از مرکز جیب اتصال در شبیه سازی داکینگ تعریف شد. اتصال GHRP-6، اکیناکوزید، توبولوزید A، یا اکتئوزید به محل اتصال GHSR با استفاده از ماژول LibDock در بسته Discover Studio 2.1 به صورت سیلیکونی انجام شد و توسط الگوریتم کمینه سازی هوشمند با میدان نیروی CHARMm به حداقل رسید. بسته استودیو 2.1 را کشف کنید [33]. برای مقایسه پیوندهای نسبی اکیناکوزید، توبولوزید A و اکتئوزید در GHSR، ناحیه مرکز فعال ساخته شده با GHRP{13}} در GHSR برای اتصال استفاده شد و انرژی اتصال توسط GEMDOCK (موسسه بیوانفورماتیک) محاسبه شد. ، دانشگاه ملی چیائو تونگ، تایوان).

مشارکت های نویسنده: آزمایش های حیوانی، C.-JW، Y.-CL، و W.-YC. شناسایی و تصفیه: MY.C.، N.-HL، و C.-HC. مدلسازی مولکولی: C.-JW، Y.-CL، و JTCT. طراحی و نگارش پروژه: C.-HC و JTCT

بودجه: این کار تا حدی توسط کمک مالی به Jason TC Tzen از دانشگاه ملی Chung-Hsing (NCHU-102D604) پشتیبانی شد.

قدردانی: نویسندگان از Tian-Shun Weng برای به اشتراک گذاشتن تجربه حرفه ای خود در استفاده از گونه های Cistanche تشکر می کنند.

تضاد منافع: همه نویسندگان هیچ تضاد منافعی را اعلام نمی کنند.

منابع

1. وانگ، تی. ژانگ، ایکس. Xie، W. Cistanche deserticola YC Ma، "Desert ginseng": یک بررسی. صبح. جی. چین. پزشکی 2012،40، 1123-1141. [CrossRef] [PubMed]

2. وانگ، تی. چن، سی. یانگ، م. دنگ، بی. کربی، ام جی؛ Zhang, X. Cistanche tubulosa عصاره اتانولی سطح هورمون جنسی موش را با القای آنزیم های استروئیدوژن بیضه واسطه می کند. فارم. Biol. 2016، 54، 481-487. [CrossRef] [PubMed]

3. Lin, WY; چون، ی. جک، سی. کائو، ST; تسای، اف جی. مسیرهای مولکولی لیو، HP مربوط به ارتقاء طول عمر و بهبود شناختی Cistanche tubulosa در مگس سرکه. فیتومدیسین 2017، 26، 37-44. [CrossRef]

4. وو، CR; Lin، HC; معکوس سو، MH توسط عصاره آبی Cistanche tubulosa از نقص های رفتاری در مدل موش شبیه بیماری آلزایمر: ارتباط با رسوب آمیلوئید و عملکرد انتقال دهنده عصبی مرکزی. مکمل BMC. جایگزین. پزشکی 2014، 14، 202. [CrossRef]

5. Xuan، GD; Liu, CQ تحقیق در مورد تأثیر گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید (PEG) گیاه سیستانچ کویر بر ضد پیری در موش های مسن القا شده توسط D-گالاکتوز. Zhong Yao Cai 2008، 31، 1385-1388. [PubMed]

6. جیانگ، ی. Tu، PF تجزیه و تحلیل ترکیبات شیمیایی در گونه Cistanche. J. کروماتوگر. 2009، 1216، 1970-1979. [CrossRef] [PubMed]

7. گائو، سی. وانگ، سی. گلیکوزیدهای تام Wu، G. Cistanche بر تأثیر یادگیری و حافظه موش‌های زوال عقل عروقی و تحقیق مکانیسم. چانه. گیاه دارویی. پزشکی 2005، 36، 1852-1855.

8. لی، اف. یانگ، ی. زو، پی. چن، دبلیو. چی، دی. شی، ایکس. ژانگ، سی. یانگ، ز. Li، P. Echinacoside با افزایش نسبت OPG/RANKL در سلول‌های MC3T{2}}E1 باعث بازسازی استخوان می‌شود. فیتوتراپیا 2012، 83، 1443-1450. [CrossRef]

9. شیمودا، اچ. تاناکا، جی. تاکاهارا، ی. Takemoto، K. شان، اس جی. Su، MH اثرات هیپوکلسترولمی عصاره Cistanche tubulosa، یک داروی خام سنتی چینی، در موش. صبح. جی. چین. پزشکی 2009، 37، 1125-1138. [CrossRef]

10. تانگ، اف. هائو، ی. ژانگ، ایکس. Qin, J. اثر اکیناکوزید بر فیبروز کلیه با مهار مسیر سیگنالینگ TGF- 1/Smads در مدل موش DB/DB نفروپاتی دیابتی. دارو دس. توسعه دهید. آنجا 2017، 112813–2826. [CrossRef]

11. Xiong، WT; گو، ال. وانگ، سی. Sun، HX; لیو، ایکس. اثرات ضد هیپرگلیسمی و کاهش چربی سیستانچ توبولوزا در موش های دیابتی نوع 2 DB/DB. J. Ethnopharmacol. 2013، 150، 935-945. [CrossRef] [PubMed]

12. بائو، XX; ما، HH; دینگ، اچ. لی، دبلیو دبلیو; زو، ام. بهینه سازی اولیه یک فرمول دارویی گیاهی چینی بر اساس اثرات محافظت کننده عصبی در مدل موش بیماری پارکینسون ناشی از روتنون. جی. اینتگر. پزشکی 2018، 16، 290-296. [CrossRef] [PubMed]

13. کوجیما، م. هوسودا، اچ. تاریخ، ی. ناکازاتو، م. ماتسو، اچ. Kanagawa، K. Ghrelin یک پپتید آسیله آزاد کننده هورمون رشد از معده است. طبیعت 1999، 402، 656-660. [CrossRef] [PubMed]

14. Zigman، JM; جونز، جی. لی، CE; Saper، CB; Elmquist، JK بیان mRNA گیرنده گرلین در موش و مغز موش. J. Comp. نورول. 2006، 494، 528-548. [CrossRef] [PubMed]

15. Castaneda، TR; تانگ، جی. داتا، آر. کولر، ام. Tschop، MH گرلین در تنظیم وزن بدن و متابولیسم. جلو. نورواندوکرینول. 2010، 31، 44-60. [CrossRef] [PubMed]

16. رودمن، د. فلر، AG; نگرج، اچ اس. آلمانی ها، GA; لالیتا، پی. گلدبرگ، AF; شلنکر، RA; کوهن، ال. رودمن، IW; Mattson، DE اثرات هورمون رشد انسانی در مردان بالای 60 سال. N. Engl. جی. مد. 1990، 323، 1-6. [CrossRef] [PubMed]

17. لیو، اچ. Bravata، DM; اولکین، آی. نایاک، س. رابرتز، بی. گاربر، AM; هافمن، بررسی سیستماتیک AR: ایمنی و اثربخشی هورمون رشد در سالمندان سالم. ان کارآموز پزشکی 2007، 146، 104-115. [CrossRef] [PubMed]

18. جووردانو، آر. بونلی، ال. ماریناتزو، ای. گیگو، ای. Arviat، E. درمان هورمون رشد در پیری انسان: مزایا و خطرات. هورمون ها 2008، 7، 133-139. [CrossRef] [PubMed]

19. Sattler، FR هورمون رشد در مردان پیر. بهترین عمل. Res. کلین اندوکرینول. 2013، 27، 541-555. [CrossRef]

20. Lo, YH; چن، YJ; چانگ، CI; لین، YW; چن، سی. لی، ام آر؛ لی، VS; Tzen، JTC Teaghrelins، تتراگلیکوزیدهای فلاونوئید آسیله منحصر به فرد موجود در چای چین شین اولانگ، آگونیست های خوراکی گیرنده گرلین هستند.

جی. آگریک. مواد شیمیایی مواد غذایی 2014، 62، 5085-5091. [CrossRef]

21. حسیه، SK; لو، YH; Wu، CC; چانگ، تی. Tzen, JTC شناسایی واسطه های بیوسنتزی تگرلین ها و ترکیبات تگرلین مانند در چای اولانگ و اتصال مولکولی آنها به گیرنده گرلین.

J. مواد غذایی مقعدی. 2015، 23، 660-670. [CrossRef]

22. حسیه، SK; چانگ، تی. لی، YC; لو، YH; لین، NH; Kuo، PC؛ چن، وای؛ جینکوگرلین Tzen، JTC، گلیکوزیدهای فلاونوئید اسیله شده منحصر به فرد موجود در جینکو فولیوم، ترشح هورمون رشد را از طریق فعال شدن گیرنده گرلین تحریک می کند. J. Ethnopharmacol. 2016، 193، 237-247. [CrossRef]

23. هان، ال. Mavis، BY; لیو، ای. ژانگ، ی. لی، دبلیو. آهنگ، X. فو، اف. Gao, X. خصوصیات ساختاری و شناسایی گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید از Cistanches deserticola YC Ma توسط UHPLC/ESI-QTOF-MS/MS. فیتوشیمی. مقعدی 2012، 23، 668-676. [CrossRef]

24. لو، دی. ژانگ، جی. یانگ، ز. لیو، اچ. لی، اس. وو، بی. Ma، Z. تجزیه و تحلیل کمی Cistanches Herba با استفاده از کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا همراه با تشخیص آرایه دیود و طیف‌سنجی جرمی با وضوح بالا همراه با روش‌های کمومتری. J. Sep. Sci. 2013، 36، 1945-1952. [CrossRef]

25. ماه، م. کیم، اچ جی; هوانگ، ال. Seo, JH; کیم، اس. هوانگ، اس. کیم، اس. لی، دی. چانگ، اچ. اوه، ام اس؛ و همکاران اثر محافظتی عصبی گرلین در 1-متیل-4-فنیل-1، 2، 3، یک مدل 6-تتراهیدروپیریدینی موش بیماری پارکینسون با مسدود کردن فعال‌سازی میکروگلیال. نوروتاکس. Res. 2009، 15، 332-347. [CrossRef]

26. لوپین، اس جی; ایزابل، OM; هاپباخ، ا. Tu, MT; اتوبوس، سی. واکر، دی. پروسنر، جی. Mcewen، BS فراتر از مفهوم استرس: بار آلوستاتیک - دیدگاه بیولوژیکی و شناختی رشد. در آسیب شناسی روانی رشد: جلد دوم: علوم اعصاب رشد. John Wiley & Sons, Inc.: New York, NY, USA, 2015; صص 578-628.

27. ریزو، م. رضوی، ع.ا. سودار، ای. سوسکیچ، اس. اوبرادویچ، م. مونتالتو، جی. بوتجدیر، م. Mikhailidis، DP; Isenovic, ER مروری بر اثرات قلبی عروقی و ضد آتروژنیک گرلین. کر. فارم. دس 2013، 19، 4953-4963. [CrossRef]

28. هلست، بی. لانگ، ام. برانت، ای. باخ، آ. هوارد، آ. Frimurer, TM; بک سیکینگر، ا. شوارتز، آگونیست معکوس گیرنده گرلین TW: شناسایی یک هسته پپتیدی فعال و اپی توپ های برهمکنش آن بر روی گیرنده. مول. داروسازی 2006، 70، 936-946. [CrossRef]

29. یامازاکی، م. ناکامورا، ک. کوبایاشی، ح. ماتسوبارا، م. هایاشی، ی. کاناگاوا، ک. ساکای، تی. اثر تنظیم گرلین بر ترشح هورمون رشد از سلول های هیپوفیز قدامی موش صحرایی پرفیوژن. J. نورواندوکرینول. 2002، 14، 156-162. [CrossRef]

30. Lo, YH; چن، YJ; چانگ، تی. لین، NH; چن، وای؛ چن، سی. لی، ام آر؛ Chou, CC; Tzen، JTC Emoghrelin، یک مشتق منحصر به فرد امودین در Heshouwu، ترشح هورمون رشد را از طریق فعال شدن گیرنده گرلین تحریک می کند. J. Ethnopharmacol. 2015، 159، 1-8. [CrossRef]

31. موخامتزیانوف، ر. وارن، تی. ادواردز، کامپیوتر; Serrano-Vega، MJ; لزلی، AG; تیت، سی جی؛ Schertler، GF دو ترکیب مجزا از مارپیچ 6 در ساختارهای متصل به آنتاگونیست گیرنده بتا{4} آدرنرژیک مشاهده شد. Proc. Natl. آکادمی علمی USA 2011, 108, 8228–8232. [CrossRef]

32. Rosenbaum، DM; ژانگ، سی. لیون، جی. هال، آر. آراگائو، دی. آرلو، دی اچ. راسموسن، اس جی; چوی، اچ جی. Devree، BT; سوناهارا، RK; و همکاران ساختار و عملکرد یک کمپلکس گیرنده آدرنرژیک آگونیست-بتا (2) برگشت ناپذیر. طبیعت 2011، 469، 236-240. [CrossRef]

33. بروکس، BR; بروکلری، RE; اولافسون، بی.دی. ایالات، دی جی; سوامیناتان، اس. Karplus، M. CHARMM - برنامه ای برای محاسبات انرژی ماکرومولکولی، کمینه سازی و دینامیک. جی. کامپیوتر. شیمی. 1983، 4، 187-217. [CrossRef]