پلی ساکاریدهای سیستانچ می توانند به طور قابل توجهی پیری عملکرد ریه را به تاخیر بیندازند

تماس: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ایمیل:audrey.hu@wecistanche.com

سون یون وانگ دجون لیو شیائومی شی لی ژانگ هونگ کوان

(موسسه پزشکی، دانشگاه یانگژو، یانگژو 225001)

سالخوردهفرآیندی است که در آن بافت ها و اندام های بدن در طول زندگی دچار انحطاط عملکردی و مورفولوژیکی و حتی پیری می شوند. ریه مستقیماً به محیط خارجی متصل است و گردش خون را از کل بدن می پذیرد. در برابر عوامل مختلف مضر در محیط و بدن بیشترین آسیب پذیری را دارد. این یکی از اولین اندام های بدن است که پیری در آن رخ می دهد. نقش رادیکال های آزاد در روند پیری توسط تحقیقات بسیاری از محققان تایید شده است. این آزمایش از ازن برای ایجاد یک مدل آزمایشی پیری برای مشاهده استفاده می کنداثرات پلی ساکاریدهای سیستانچ بر تحمل هیپوکسی، عملکرد آنتی اکسیدانی و فراساختار ریه های موش های پیر. نفوذ. انتظار می رود که پایه های تحقیقاتی را برای آن ایجاد کندپلی ساکاریدهای سیستانچدر به تعویق انداختن تغییرات دژنراتیو ریوی و مراقبت های بهداشتی از سیستم تنفسی سالمندان.

هدف از این مطالعه مشاهده تغییرات دژنراتیو در فراساختار سلول های بافت ریه در موش های آزمایشگاهی پیر و تاثیرپلی ساکاریدهای سیستانچبر روی آن. استفاده از ازن (Ozone, Ob) استنشاق مداوم به مدت 4 هفته برای القای روش مدل پیری ریه، استفاده از پلی ساکارید از Cistanche 50 و 100 گرم برای تجویز موش های مدل به مدت 6 هفته برای تشخیص تحمل هیپوکسی، ریه و سوپراکسید سرم در موش های مسن دیسموتاز (SOD) ) فعالیت و محتوای مالون دی آلدئید (MDA). تغییرات اندامک های بافت ریه و فراساختار در زیر میکروسکوپ الکترونی مشاهده شد. ResultsThe موش های پیری تجربی ناشی از ازن به طور قابل توجهی تحمل هیپوکسی را کاهش داد. SOD ریه و سرم کاهش و MDA افزایش یافت. در مقایسه با گروه مدل، پلی ساکارید سیستانچ می تواند به طور قابل توجهی زمان تحمل هیپوکسی موش های پیر را افزایش دهد (P<0.01), improve="" the="" activity="" of="" sod="" in="" the="" serum,="" reduce="" the="" content="" of="" mda=""><0.01), and="" delay="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" and="" lamellar="" bodies="" in="" the="" lung="" cells="" of="" aging="" mice=""><0.01). conclusion="">پلی ساکاریدهای سیستانچ به میزان قابل توجهی می توانندبه تاخیر انداختن آزمایش دژنراسیون فیزیولوژیکی و مورفولوژی سلولی ریه هاموش های پیر شده از نظر جنسی

1 ماده

1.1 حیوانات

3 موش تمیز از نژاد ICR، 18 تا 22 گرم، ¥^ هر نیمه، ارائه شده توسط مرکز حیوانات تجربی دانشگاه یانگژو، شماره گواهی: Su Dongzhi 98002^

1.2 داروها و معرف ها

پلی ساکاریدها از سیستانچ: ارائه شده توسط موسسه تحقیقات گیاهان وحشی نانجینگ، تهیه شده با آب مقطر تا 2.5 گرم در لیتر، 5.0 گرم در لیتر-1؛ کیت های تست SOD، MDA توسط موسسه تحقیقات مهندسی زیست پزشکی نانجینگ جولی ارائه شده است.

1.3 ابزار

اسپکتروفتومتر فرابنفش UV755B محصول کارخانه ابزار تحلیلی شانگهای. ژنراتور ازن، محصول کارخانه ابزار پزشکی Wuxi; H{1}} میکروسکوپ الکترونی عبوری، محصول هیتاچی، ژاپن.

2 روش

2 1 تهیه مدل آزمایشی پیری ریه با آسیب ناشی از بدبویی موش‌های ICR از طرح آزمایشی روز و آزمایش گرفته شد و موش‌های گروه مدل و گروه درمان به‌طور تصادفی گروه‌بندی شدند.

مدل آزمایشی پیری به مدت 4 هفته به طور مداوم ایجاد شد. در همان زمان، به گروه کنترل (موش‌های معمولی خریداری شده در همان دسته را انتخاب کنید) و به گروه مدل، 20 میلی‌لیتر-کیلوگرم ^d'1 با نرمال سالین، پلی‌ساکارید از گروه درمان Cistanche I و پلی‌ساکارید II از Cistanche 50 داده شد. 100 mg-kg-1-d-' با تزریق داخل معده داده شد و دوره تجویز 6 هفته بود. پس از آخرین تجویز، آزمون های شاخص مختلفی انجام شد.

2.2 روش تست تحمل هیپوکسی (2)

هر گروه از موش ها در یک بطری آسیاب 250 میلی لیتری حاوی 20 گرم سودا لیم قرار داده شدند. وازلین مهر و موم شد و زمان از قرار دادن موش ها در بطری تا خفگی و مرگ تحت دما و فشار معمولی ثبت شد.

2.3 ریه و خون

تعیین محتوای SOD^MDA در هر گروه از موش ها 1 ساعت پس از آخرین تجویز، برداشتن کره چشم و جمع آوری خون برای جداسازی سرم. سپس موش‌ها قربانی شدند، بافت‌های ریه خارج شدند و نمک به هموژنایزر شیشه‌ای اضافه شد تا 100 گرم همگن بافت ریه تهیه شود، فعالیت SOD ریه و سرم به روش Huangsuyin اکسیداز تعیین شد و محتوای MDA تعیین شد. با روش تراکم تیوباربیتوریک اسید.

2.4 روش تهیه نمونه میکروسکوپ الکترونی (3)

آزمایش به گروه کنترل، گروه مدل و گروه با دوز بالا تقسیم می شود. روش های مدل سازی و مدیریت همانند بالا می باشد. پس از آخرین تزریق، از هر گروه 3 موش به طور تصادفی انتخاب شده و با گردن زدن کشته شده و به ترتیب سمت راست گرفته می شود. بافت راس ریه، 0.4 میلی مول، L-1 گلوتارآلدئید، و 0.04 میلی مول، تثبیت مضاعف با L'1 OfeO4، آبگیری گرادیان استون، تعبیه Epon 812، سرب-اورانیوم رنگ‌آمیزی الکترونی، میکروسکوپ الکترونی عبوری هیتاچی H{11}} با بزرگ‌نمایی 10،000 تا ۲۰،000 تغییرات و تغییرات ساختاری اندامک‌های اصلی را تحت مضرب مشاهده کنید.

2.5 نتایج پردازش آماری بر حسب ده ها خاک بیان می شود و برای مقایسه میانگین دو نمونه از آزمون t استفاده می شود.

3 نتیجه

3.1 اثر پلی ساکارید سیستانچ بر تحمل هیپوکسی در موش های مسن

یک ساعت پس از آخرین تجویز موش در هر گروه، زمان تحمل هیپوکسی مورد آزمایش قرار گرفت. نتایج نشان داد که مدت زمانی که موش های پیر می توانند هیپوکسی را تحمل کنند به طور قابل توجهی کوتاه تر از موش های معمولی بود. زمان در مقایسه با گروه مدل به طور قابل توجهی طولانی است، اما تفاوت معنی داری در مقایسه با گروه کنترل وجود ندارد، که نشان می دهد پلی ساکارید از سیستانچ می تواند به طور قابل توجهی تحمل هیپوکسی موش های پیر را بهبود بخشد، جدول 1 را ببینید.

3.2 اثر پلی ساکارید سیستانچ بر عملکرد آنتی اکسیدانی موش های پیر

خون (سرم) و بافت ریه (هموژنه ریه) موش‌های هر گروه پس از آخرین تزریق جمع‌آوری شد و SOD و MDA تعیین شد. ResultsThe سرم و فعالیت SOD ریه موش های پیر کاهش یافته، و محتوای MDA افزایش یافته است. این تفاوت در مقایسه با گروه کنترل معنی دار بود. پلی ساکاریدهای سیستانچ می توانند فعالیت SOD سرم و ریه را در موش های مسن افزایش دهند و محتوای MDA را کاهش دهند. در مقایسه با گروه کنترل، تفاوت معنی داری وجود ندارد و تفاوت با گروه مدل سالمند معنی دار است، به جداول 2 و 3 مراجعه کنید.

3.3 اثر پلی ساکارید سیستانچ بر تاریکی درون سلولی سلول های اپیتلیال آلوئولی⑷

روش ساخت میکروسکوپ الکترونی مانند قبل است. تجزیه و تحلیل مورفومتریک: در زیر میکروسکوپ الکترونی، هر نمونه در 10 میدان دید برای اندازه گیری اندامک ها مشاهده شد. نتایج نشان داد که میتوکندری و اجسام لایه‌ای گروه مدل کاهش یافته، غشای پایه ضخیم شده و پلی‌زوم‌ها افزایش یافته‌اند. در مقایسه با گروه کنترل، تفاوت معنی داری وجود داشت. پلی ساکاریدهای گروه دوز بالا Cistanche آن را بهبود بخشیدند. در مقایسه با گروه مدل، تفاوت معنی‌دار بود و اساساً به گروه کنترل نزدیک بود. به برگه 4 مراجعه کنید.

3.4 تغییرات در فراساختار سلول های اپیتلیال ریه در موش های آزمایشگاهی پیر و تأثیر پلی ساکاریدهای سیستانچ

موش های مدل سالخورده را می توان زیر میکروسکوپ الکترونی مشاهده کرد: سلول های اپیتلیال آلوئولی نوع I یک لایه منفرد از نوع مسطح با ضخامت حدود {{0}}}.2 بعد از ظهر هستند. هسته کوچک و متراکم است. چند میتوکندری، کمپلکس گلژی و شبکه آندوپلاسمی پراکنده در سیتوپلاسم دور هسته وجود دارد. نسبتاً پراکنده، با ریز رشته‌ها و میکروتوبول‌های کمتر. تغییرات بافتی ریه‌های موش‌های پیر زیر میکروسکوپ الکترونی مشاهده شد. تغییرات اصلی سلول های اپیتلیال آلوئولی نوع II بود. میکروویلی‌های سطح آزاد سلول‌ها کاهش یا ناپدید شدند، اجسام لایه‌ای ضعیف شدند، ساختار لایه‌ای تار شد و چند سلول دارای سلول‌های لایه‌ای کوچک بودند. جسم ناپدید می شود و یک ماده نواری بی شکل توخالی یا همگن با چگالی الکترونی کم است. میتوکندری و شبکه آندوپلاسمی خشن در بدن سلولی کاهش می یابد. غشای پایه سلول های اپیتلیال آلوئولی به وضوح ضخیم شده است و تکثیر سلول های دیافراگم و فیبروبلاست ها در بینابینی آلوئولی دیده می شود (شکل 1،2). اگرچه غشای هسته داخلی و تورم میتوکندری در گروه پلی ساکارید Cistanche مشاهده شد، درجه به طور قابل توجهی در مقایسه با گروه مدل کاهش یافت (شکل 3.4). مشاهده زیر میکروسکوپ الکترونی گروه دارویی نشان داد که نوع سلول‌های اپیتلیال مسطح، با سطح صاف، بدون هسته و ضخامت برخی حدود 0.1 بودند. اندامک های کمی در پرینوکلئوس وجود داشت و ذرات رادیوم قابل مشاهده بودند. سلول های نوع II دارای پرزهای کوتاه روی سطح، تعداد زیادی میتوکندری، شبکه آندوپلاسمی خشن و کمپلکس گلژی در سیتوپلاسم هستند (شکل 5،6).

مدل پیری آسیب ازن بر اساس نظریه رادیکال آزاد پیری است. آسیب رادیکال های بدون اکسیژن نقش مهمی در روند پیری ریه ایفا می کند. ریه ها تنها عضوی هستند که با محیط خارجی ارتباط برقرار می کنند. در یک دوره زمانی مشخص، حیوانات به طور مداوم با ازن استنشاق می شوند. ریه ها اولین کسانی هستند که در معرض ازن قرار می گیرند و آسیب پذیرترین آنها در برابر آسیب هستند. پس از ورود ازن به بدن، به سرعت رادیکال های آزاد آنیون سوپراکسید بسیار فعال تولید می کند. رادیکال‌های آزاد اضافی از توانایی دفع رادیکال‌های آزاد فراتر رفته، آنزیم‌های مهارکننده رادیکال‌های آزاد (مانند SOD) را در بدن از بین می‌برند و مصرف می‌کنند و سپس باعث پیری اندام‌ها و حتی بدن می‌شوند. در این آزمایش، توانایی ضد هیپوکسی موش های پیر ناشی از ازن به طور قابل توجهی کاهش یافت، فعالیت ماده آنتی اکسیدانی SOD در سرم و بافت ریه کاهش یافت و متابولیت پراکسیداسیون لیپیدی MDA به طور معنی داری افزایش یافت. با استفاده از تزریق مداوم Rongrong Duojing 50100 mg-kg1 موش‌های مسن تجربی، موش‌های پیر دارای تحمل آشکار هیپوکسی هستند، افزایش فعالیت سوپراکسید دیسموتاز برای از بین بردن رادیکال‌های آزاد افزایش می‌یابد. محتوای متابولیت های پراکسیداسیون لیپیدی کاهش می یابد، که نشان می دهد پلی ساکاریدهای سیستانچ می توانند عملکرد آنتی اکسیدانی موش های پیر را افزایش دهند.

اجسام لایه ای در سیتوپلاسم سلول های اپیتلیال آلوئولی نوع n اغلب برای اندازه گیری عملکرد سلول های اپیتلیال استفاده می شوند. ترشحات اجسام لایه‌ای گرسنگی را سورفکتانت‌های آلوئولی می‌گویند که در سطح مشترک هوا-مایع آلوئول‌ها وجود دارد و می‌تواند کشش سطحی آلوئول‌ها را کاهش دهد. تغییرات پیری اجسام لایه ای می تواند منجر به کاهش مواد فعال سطح آلوئولی شود. کشش سطحی آلوئول ها نسبتاً زیاد است و نیروی پس رفتگی آلوئول ها افزایش می یابد که منجر به انقباض آلوئول ها می شود. مشاهدات میکروسکوپ الکترونی نشان داد که سلول های اپیتلیال آلوئولی نوع n موش های پیر به طور قابل توجهی تغییر کرده اند. مشاهده می شود که سلول های لایه ای ضعیف شده، ساختار تار شده، میتوکندری ها متورم و کاهش می یابد، شبکه آندوپلاسمی خشن نیز کاهش می یابد، و غشای پایه به طور قابل توجهی ضخیم شده است. اگرچه تغییرات ساختاری مشابهی را می توان پس از استفاده از پلی ساکارید از سیستانچ مشاهده کرد، اما درجه به طور قابل توجهی کاهش می یابد، که نشان می دهد پلی ساکارید از سیستانچ می تواند به طور قابل توجهی تغییرات تخریبی مورفولوژیکی در اجسام لایه ای سلول های اپیتلیال ریه و انحطاط میتوکندری در موش های پیر را بهبود بخشد یا به تاخیر بیاندازد. بیشتر ساختار سلولی اساساً دست نخورده است و تغییرات فراساختار ریه را به تاخیر می اندازد. نتایج این مطالعه نشان می دهد که پلی ساکاریدهای سیستانچ می توانند تغییرات ساختاری و عملکردی ناشی از آسیب اکسیداتیو ریه ناشی از ازن را کاهش دهند، پیری ریه را به تاخیر بیندازند و شواهد تجربی برای تحقیقات کاربردی ارائه دهند.