فناوری آماده سازی گرانول های Wenyang Tongbian

چکیده:

هدفبرای تعیین و بهینه سازی فناوری آماده سازی Wenyang Tongbiangranules.

روش هاجوشانده آب استخراج شد. محتوای گلیکوزید اکیناسه در داروی سلطنتی و ترکیب عملکرد به عنوان شاخص مورد استفاده قرار گرفت. آزمون متعامد L9 (34) برای بهینه‌سازی استخراج گرانول‌های Wenyang Tongbian استفاده شد. بهترین فرآیند شکل‌دهی بر اساس سختی دانه‌بندی، شکل‌پذیری و عملکرد ذرات بهینه شد. نتایج: استخراج بهینه شامل افزودن 10 بار آب و استخراج 3 بار، هر بار 1 ساعت بود. بهترین فرآیند تشکیل: نوع ماده کمکی ودکسترین، نسبت مواد کمکی 9/0∶1 و بهترین عامل مرطوب کننده اتانول 85 درصد بود. نتیجه گیری فرآیند استخراج و قالب گیری پایدار و معقول، ساده و امکان پذیر، با تکرارپذیری خوب است، که می تواند زمینه ای برای تولید صنعتی گرانول های Wenyang Tongbian فراهم کند.

کلمات کلیدی: گرانلو Wenyang Tongbian; تست متعامد؛ استخراج؛ قالب گیری

فرمولاسیون گیاهی جدید برای کلیهکمبود یانگ

خدمات پشتیبانی Wecistanche

ایمیل:wallence.suen@wecistanche.com

واتساپ/تلفن:+86 15292862950

یبوست کمبود یانگدر افراد مسن و زنان شایع است. روش درمان نباید پاکسازی ساده باشد. روش گرم کردن یانگ می تواند به نتایج خوبی دست یابد [1]. گرانول های Wenyang Tongbian یک آماده سازی درون بیمارستانی است که بر اساس تجربه بالینی پروفسور لین آیژن از بیمارستان طب سنتی چینی استان هوبی در درمان یبوست عملکردی در سالمندان توسعه یافته است. این گیاه از Cistanche deserticola، پوست دارچین، گون و Atractylodes macrocephala تشکیل شده است. در فرمول، Cistanche deserticola عملکردهای تقویت کننده یانگ کلیه و سودمندی جوهر و خون را دارد و داروی اصلی گرم کننده یانگ است. پوست دارچین عملکرد گرم کردن نصف النهارها و رفع انسداد عروق خونی، پر کردن آتش و حمایت از یانگ را دارد. گون دارای عملکردهای بالا بردن یانگ و پر کردن چی، سوزاندن زخم ها و ترویج بازسازی بافت است. و Atractylodes macrocephala عملکردهای تقویت طحال و پر کردن چی، خشک کردن رطوبت و تقویت دیورز را دارد.

مطالعات نشان داده است که گلیکوزیدهای فنیل اتانول مواد اصلی فعال در گیاه سیستانش دسرتیکولا هستند [2]. در میان آنها، اکیناکوزید و ورباسکوزید مواد تشکیل دهنده مشخصه برای کنترل کیفی سیستانچ دسرتیکولا هستند که در فارماکوپه چینی مشخص شده است. لیو شیان هانگ و همکاران [3] از طریق کارآزمایی‌های انسانی in vivo به این نتیجه رسیدند که Cistanche deserticola برای درمان بالینی یبوست مناسب است و می‌تواند هم علائم و هم علت اصلی را درمان کند. اجزای شیمیایی اصلی پوست دارچین شامل روغن های فرار، پلی ساکاریدها، فلاونوئیدها و غیره است. مطالعات فارماکولوژیک مدرن نشان داده است که پوست دارچین دارای اثرات دارویی مانند گشاد شدن عروق، ضد زخم معده و اثرات ضد باکتریایی است [4]. پلی ساکاریدهای گون، فلاونوئیدها و آستراگالوزید IV اجزای شیمیایی اصلی هستند که اثرات تعدیل کننده ایمنی را اعمال می کنند [5]. Atractylodes macrocephala دارای اثرات تقویت طحال و تنظیم اختلالات فلور روده است و می تواند از نظر بالینی برای درمان اختلال عملکرد دستگاه گوارش استفاده شود [6]. نسخه اصلی عمدتا در جوشانده های طب چینی استفاده می شود، اما دارای معایبی از جمله ناراحتی در جوشانده، دوز زیاد و ناراحتی در حمل است. برای اینکه این نسخه تجربه بالینی به طور گسترده در عمل بالینی مورد استفاده قرار گیرد، آن را به صورت گرانول توسعه داد. این آزمایش با استفاده از عملکرد خمیر و محتوای اکیناکوزید، ماده موثره اصلی در داروی اصلی، به عنوان شاخص، به استفاده از فرآیند سنتی جوشانده آب ادامه داد و از روش آزمایش متعامد L9 (34) برای بهینه سازی مقدار آب اضافه شده استفاده کرد. ، زمان جوشانده و زمان جوشاندن در فرآیند استخراج برای به دست آوردن بهترین فرآیند استخراج. در همان زمان، فرآیند قالب‌گیری گرانول برای تعیین یک فرآیند قالب‌گیری پایدار و معقول، ارائه مرجعی برای تولید آزمایشی، کنترل کیفیت، و کاربرد بالینی آماده‌سازی مورد بررسی قرار گرفت [7-8].

1 ابزار و معرف

1.1 ابزار

اتحاد e2695کروماتوگراف مایع با کارایی بالا, آشکارساز آرایه دیود 2998 (Waters, USA), ES225SMDR 1/100,{4}} تعادل تحلیلی (Precisa, Switzerland), UPT-11-10ماشین آب فوق خالص T (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.) پاک کننده اولتراسونیک CNC با فرکانس دوگانه KQ (کونشان آلتراسونیک اینسترومنت کو.، ویبولیتین).

1.2 داروهای آزمایشی

برش های شراب سیستانچ(شماره دسته ای: 2322050113، تولید شده در مغولستان داخلی)، برش های دارچین (شماره دسته: 2323020103، تولید شده در گوانگشی)، برش های گون (شماره دسته: 2323020105، تولید شده در گانسو)، Atractylodes: 2010 macrocephala ang ) (Hubei Chenmei China Medicine Co., Ltd.، تمام برش ها توسط Chen Shuhe، داروساز ارشد مؤسسهطب سنتی چینیبیمارستان طب سنتی چینی استانی هوبی، و مطابق با نسخه 2020چینی فارماکوپهقسمت اول). ماده مرجع اکیناکوزید(شماره دسته: 111670-201907، خلوص: 91.8٪، تحقیقات بازرسی غذا و داروی چین).

دکسترین (شماره دسته: 230102)، نشاسته ذرت (شماره دسته: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.)، ساکارز (شماره دسته: TF28221205)، سلولز میکروکریستالی (شماره دسته: TF47121210)، تعداد دسته: TF4712110 TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.).

2 روش ها و نتایج

2.1 تعیین محتوای اکیناکوزید

2.1.1 شرایط کروماتوگرافی: Agilent 5 TC-C18 (25{10}} nm×4.6 mm، 5 μm) به عنوان ستون کروماتوگرافی استفاده شد. متانول به عنوان فاز متحرک A استفاده شد، محلول اسید فرمیک 0.1٪ به عنوان فاز متحرک B، شستشوی گرادیان استفاده شد (0-17 دقیقه، 26.5% A؛ 17-20 دقیقه، 26.5% → 29.5% A; 20-54 دقیقه،

29.5%A، 54-55 دقیقه، 29.5% → 26.5%A; 55-60دقیقه، 26.5%A)؛ سرعت جریان 1.{11}} mL·min-1; دمای ستون 30 درجه؛ آشکارساز آرایه دیود، طول موج تشخیص 330 نانومتر. حجم تزریق 10μL; شماره پلاک نظری محاسبه شده بر اساس پیک اکیناکوزید نباید کمتر از 3000 باشد[9].

2.1.2 تهیه محلول مرجع

مقدار مناسبی از اکیناکوزید را بردارید، به طور دقیق 9.65 میلی گرم وزن کنید، آن را در یک فلاسک حجمی 25 میلی لیتری قرار دهید، 50٪ اضافه کنید.

متانول برای حل و رقیق شدن به عنوان محلول منبع مرجع. 1 میلی لیتر محلول استوک اکیناکوزید را به دقت در یک فلاسک حجمی 25 میلی لیتری پیپت کنید، متانول 50 درصد را برای رقیق شدن به علامت اضافه کنید، خوب تکان دهید و یک محلول مرجع حاوی 14.17 میکروگرم در هر 1 میلی لیتر آماده کنید [9].

2.1.3 تهیه محلول آزمایشی

حدود 0.۵ گرم پودر خمیر خشک بردارید، آن را به صورت پودر خرد کنید، با دقت وزن کنید، آن را در یک بطری مخروطی درب قهوه ای قرار دهید، 50 میلی لیتر متانول 50% را با دقت اضافه کنید، آن را محکم ببندید، خوب تکان دهید. آن را وزن کنید، آن را به مدت 40 دقیقه با اولتراسونیک درمان کنید (قدرت 250 وات، فرکانس 45 کیلوهرتز)، بگذارید خنک شود، دوباره وزن کنید، 50٪ متانول اضافه کنید تا وزن از دست رفته را جبران کنید، آن را خوب تکان دهید، بگذارید بماند، مایع رویی را بگیرید. آن را فیلتر کنید و فیلتر را بگیرید.

2.1.4 تهیه محلول نمونه منفی

حدود 0.5 گرم از پودر خمیر خشک فرمول بدون مواد دارویی سیستانچ شراب را بردارید و محلول نمونه منفی را طبق روش زیر "2.1.3" تهیه کنید.

2.1.5 آزمون ویژگی

محلول آزمایش، محلول مرجع و محلول نمونه منفی را دقیقاً پیپت کنید و مطابق با شرایط کروماتوگرافی تحت "2.1.1" اندازه گیری کنید. کروماتوگرام را ثبت کنید. نتایج در شکل 1 نشان داده شده است. هیچ تداخلی با نمونه منفی وجود ندارد. نتایج نشان می دهد که روش از ویژگی خوبی برخوردار است.

شکل 1 کروماتوگرام اختصاصی گرانول های Wenyang Tongbian

2.1.6 بررسی رابطه خطی

مقدار مناسبی از اکیناکوزید را بردارید، آن را با دقت تا 10.11 میلی‌گرم وزن کنید، آن را در یک فلاسک حجمی 25 میلی‌لیتری قرار دهید، متانول 50 درصد را به آن اضافه کنید تا در یک سری از غلظت‌های محلول مرجع رقیق شود و آن را مطابق شرایط کروماتوگرافی تحت «2.1» تزریق کنید. 0.1 اینچ برای تعیین مقدار منطقه پیک اکیناکوزید. یک منحنی استاندارد، با مقدار تزریق مرجع اکیناکوزید به عنوان محور افقی (ug، X) و مقدار انتگرال منطقه اوج به عنوان محور عمودی (Y) رسم کنید و رگرسیون خطی را انجام دهید.

معادله رگرسیون Y=1.294×104X - 4.931×104، r=0.9997 است. نتایج نشان می دهد که مقدار انتگرال سطح پیک مقدار تزریق اکیناکوزید در یک رابطه خطی خوب بین 1.4850 و 371.2392 میکروگرم است.

2.1.7 تست دقیق

10 میکرولیتر از محلول مرجع (غلظت جرمی 37.12 ug·mL-1) را با دقت در زیر "2.1.6"، 6 بار تزریق کنید، به ترتیب مقدار منطقه پیک اکیناکوزید را ثبت کنید و مقدار RSD را 1.1٪ محاسبه کنید. که ابزار دقت خوبی دارد.

2.1.8 آزمون تکرارپذیری

همان خمیر خشک را بردارید و پودر کنید و 6 قسمت که هر کدام حدود 0.5 گرم است را با دقت وزن کنید و در یک بطری مخروطی قهوه ای درب دار قرار دهید. مطابق روش زیر "2.1.3" استخراج کنید، محتوا را تعیین کنید و محاسبه کنید. نتایج نشان می دهد که میانگین محتوای اکیناکوزید در نمونه 1.46 mg·g±1 و مقدار RSD 2.7 درصد است که نشان دهنده تکرارپذیری این روش خوب است.

2.1.9 تست پایداری

همان محلول نمونه را بردارید، با دقت 10 میکرولیتر بکشید و به ترتیب در مدت 0، 2، 4، 8، 12، 18 و 24 ساعت تزریق کنید. مقدار RSD ناحیه پیک 0.71 درصد است که نشان می دهد محلول نمونه در عرض 24 ساعت پایداری خوبی دارد.

2.1.10 تست بازیابی نمونه

6 قسمت از همان دسته از نمونه های آزمایشی را با دقت وزن کنید، هر کدام 0}.24 گرم، و آنها را در یک بطری مخروطی قهوه ای رنگ قرار دهید. با توجه به نسبت جرمی 1:1 اجزای موجود در نمونه آزمایش، 0.9 میلی‌لیتر از ماده مرجع اکیناکوزید (غلظت جرمی 371.24 ug·mL-1) را با دقت در «2.1.6» اضافه کنید. محلول آزمایش را طبق روش زیر "2.1.3" آماده کنید، ناحیه پیک کروماتوگرافی اکیناکوزید را تعیین کنید و محتوای آن را محاسبه کنید. نتایج نشان می دهد که میانگین نرخ بازیابی اکیناکوزید 101.09٪ و مقدار RSD 1.6٪ است.

2.2 طرح آزمایشی و شاخص های ارزیابی

مقدار آب اضافه شده (A)، زمان استخراج (B) و تعداد استخراج (D) به عنوان عوامل مورد بررسی انتخاب شدند. سه سطح فاکتور با توجه به نتایج تحقیقات تک عاملی قبلی تعیین شد، جدول 1 را ببینید. جدول آزمون متعامد L9 (34) در آزمایش استفاده شد، جدول 2 را ببینید. این آزمایش از بازده خمیر و محتوای اکیناکوزید استفاده کرد. به عنوان شاخص های ارزیابی برای بررسی فرآیند بهینه استحصال آب.

تب 1 فاکتور و سطح آزمون متعامد

2.2.1 آزمون متعامد

با توجه به نسبت نسخه ای، 18 قسمت از هر طعم دارویی را وزن کنید، هر کدام 55 گرم، و عصاره جوشانده آب را طبق طرح طراحی متعامد جدول 2 انجام دهید. هر گروه دارای 2 قسمت موازی است. جوشانده از طریق یک صفحه مشبک فیلتر می شود، فیلتر ترکیب می شود، خنک می شود، حجم جوشانده اندازه گیری می شود، 5{19}} میلی لیتر به طور دقیق در ظرف تبخیری که وزن ثابتی دارد، تبخیر می شود تا خشک شود. و برای به دست آوردن خمیر خشک نمونه آزمایشی متعامد، تحت فشار کاهش یافته در 60 درجه خشک شد. بازده رب (بازده رب=(وزن رب خشک × حجم مایع دارویی) / (50 × وزن قطعه جوشانده) × 100 درصد را محاسبه کنید. با توجه به شرایط کروماتوگرافی در "2.1.1" و روش تحت "2.1.3"، میزان استخراج اکیناکوزید در 9 گروه عصاره آزمایش متعامد به ترتیب تعیین شد. مقدار استخراج اکیناکوزید=وزن خمیر خشک × محتوای اکیناکوزید / وزن قطعه جوشانده شراب سیستانچ. امتیاز جامع=محتوای اکیناکوزید ÷ حداکثر محتوای × 0.5 × 100٪ + بازده خمیر ÷ حداکثر بازده خمیر × 0.5 × 100٪ [10]. نتایج در جدول 2 نشان داده شده است.

همانطور که در جدول 3 نشان داده شده است، با در نظر گرفتن عملکرد خمیر و امتیاز جامع محتوای اکیناکوزید به عنوان شاخص های ارزیابی، مقدار دامنه R در جدول نشان می دهد که اثرات اولیه و ثانویه هر عامل D> B> A است. نتایج تحلیل واریانس نشان می‌دهد که عامل D (زمان جوشاندن) از نظر آماری معنی‌دار است (P < 0.05) و سطح D3 انتخاب شده است. فاکتور A (افزایش آب) و فاکتور B (زمان جوشاندن) از نظر آماری معنی دار نیستند (05/0 P>). با توجه به اینکه میزان جذب آب مواد دارویی در این فرآورده نسبتاً بالا است (155%) و همراه با عواملی مانند نیاز واقعی تولید، شرایط بهینه استخراج به عنوان A2B1D3 انتخاب می شود، یعنی اضافه کردن 10 بار آب، جوشانده. 3 بار، هر بار به مدت 1 ساعت.