تعیین همزمان با HPLC عوامل سفید کننده هیدروفیل در محصولات آرایشی و بهداشتی

مخاطب:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساپ: 008618081934791

Miaw-Ling Chang a، Chur-Min Chang b،*

خلاصه

یک روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا برای تعیین کمیت چهار مورد از متداول ترین آبدوست هاسفید کردنعامل*/اسید گلیکولیک (GA)، اسید اسکوربیک (AA)،آربوتین(ART)، و منیزیم آسکوربیل فسفات (MAP)، توسعه یافته است. جداسازی ایزوکراتیک با استفاده از یک ستون C18 با عامل جفت یونی به عنوان فاز متحرک انجام شد. آنالیت ها به ترتیب با جذب نور فرابنفش در طول موج 22{10}} و 240 نانومتر شناسایی شدند. منحنی های کالیبراسیون در 8.0-36 mg/ml (GA)، 10.0-300 mg/ml (AA و ART) و 5.6-451 mg/ml (GA) خطی بودند. نقشه). ضریب همبستگی تحلیل رگرسیون خطی با محدوده 0.9997.{11}} بود. بازیابی چهار آنالیت بین 94.8 تا 100.1 درصد بود و دقت این روش بهتر از 6.9 درصد انحراف استاندارد نسبی (RSD) بود (n{19}}). مشخص شد که AA در یک محلول آبی تجزیه می شود. برای اطمینان از پایداری AA در طول تجزیه و تحلیل HPLC، تمام آنالیت ها در آب مقطر حل شدند و این محلول ها با گاز نیتروژن برای حذف اکسیژن پاکسازی شدند و در دمای {20}} درجه سانتیگراد نگهداری شدند. نتایج آزمایش نشان می دهد که این روش روشی سریع، ساده، انتخابی است و برای تجزیه و تحلیل معمول تجاری مناسب است.لوازم آرایشی.# 2003 Elsevier BV تمامی حقوق محفوظ است.

کلمات کلیدی: محصولات آرایشی و بهداشتی; عامل سفید کننده هیدروفیل؛ اسید گلیکولیک؛ اسید اسکوربیک؛ آربوتین؛ منیزیم آسکوربیل فسفات؛ HPLC

گیاه سیستانچیک عامل سفید کننده طبیعی است.

1. مقدمه

غربی ها پوست برنزه را سالم و زیبا می دانند. برعکس، پوست روشن در کشورهای شرقی زیبا محسوب می شود. بنابراین، لوسیون های سفید کننده در شرق بسیار محبوب هستند. از آنها برای سفید کردن پوست استفاده می شود. لایه برداری شیمیایی معمولاً در درمان بالینی پوست آسیب دیده صورت ناشی از آکنه، ملاسما، زگیل های معمولی و غیره استفاده می شود. در این تکنیک،لوازم آرایشیمحصولات حاوی یک عامل شیمی درمانی برای تحریک تجدید سلول های پوست بر روی پوست اعمال می شود. رنگ پوست روشن تر می شود. بنابراین این ماده شیمی درمانی a نیز نامیده می شودسفید کردنعامل [1-6]. گزارش شده است که یک عامل سفید کننده مانند اسید گلیکولیک (GA)، یکی از اسیدهای هیدروکسی، هیدراتاسیون پوست را افزایش می دهد و بنابراین ظاهر صاف تری می دهد و در نتیجه خطوط و چین و چروک صورت کمتر می شود [7،8]. دو نوع ماده سفید کننده وجود دارد: عوامل سفید کننده چربی دوست و عوامل آبدوست. نمونه هایی از سفید کننده های چربی دوست عبارتند از: کوجیک اسید، اسید سالیسیلیک، آسکوربیل پالمیتات، آزلائیک اسید و آداپالن. نمونه هایی از سفید کننده های آبدوست عبارتند از: گلیکولیک اسید (GA)، اسید اسکوربیک (AA)،آربوتین(ART)، و منیزیم آسکوربیل فسفات (MAP). عوامل سفید کننده آبدوست در اینجا مورد مطالعه قرار می گیرند زیرا گروه های قطبی آنها میل ترکیبی ضعیفی با ستون C18 مورد استفاده در HPLC دارند و جداسازی آنها در HPLC دشوار است. ما از یک روش جفت یونی برای حل این مشکل استفاده کردیم.

ساختارهای شیمیایی و حداکثر غلظت این آبدوست هاسفید کردنعوامل در جدول 1 آورده شده است. در تایوان، محدودیتی برای غلظت GA و AA مورد استفاده در محصولات آرایشی وجود ندارد. با این حال، ART می تواند تا 7 وزن مورد استفاده قرار گیرد. درصد و MAP تا 3 وزنی. اگرچه هیچ محدودیتی در غلظت GA مورد استفاده در محصولات آرایشی وجود ندارد، اما توسط سازمان غذا و داروی ایالات متحده گزارش شده است که این عامل سفید کننده می تواند باعث سوختگی یا تورم شدید پوست شود [9]. به طور کلی، حدود 30-40 wt. درصد از GA درلوازم آرایشیبرای استفاده در سالن های زیبایی و غلظت بالاتر، 50-70wt. درصد، در محصولات آرایشی مورد استفاده پزشکان استفاده می شود [10].

هدف از این مطالعه توسعه روش تجزیه و تحلیل کمی برای اندازه گیری دقیق سطح عوامل سفید کننده در محصولات آرایشی و بهداشتی است. این کار برای امنیت عمومی اهمیت زیادی دارد. اگرچه انتشارات زیادی وجود دارد که تخمین سفیدکننده‌ها را در فرمولاسیون‌های آرایشی توصیف می‌کنند [11-16]، روش‌های آنالیز کمی هم‌زمان هنوز در ادبیات گزارش نشده‌اند. این مطالعه مربوط به یک روش تحلیلی است که می تواند آب دوست را شناسایی و به طور همزمان کمی کند.سفید کردنعوامل

آب دوستسفید کردنعوامل همیشه در یک محلول آبی پایدار نیستند. آنها در معرض اکسیداسیون قرار می گیرند. اگرچه چندین مطالعه برای پایداری AA گزارش شده بود [17-19]، محیط AA در این گزارش ها برای HPLC برای تعیین همزمان سفید کننده های آبدوست مناسب نیست. مهم است که مطمئن شوید که عوامل سفید کننده آبدوست در طول تجزیه و تحلیل برای صحت نتایج پایدار هستند.

2. تجربی

2.1. معرف ها و استانداردها

GA، AA، ART، و MAP و تبلیغات از شرکت Alfa (آمریکایی)، AlfaCo خریداری شد. (آمریکایی)، واکو (ژاپنی)، و لیپو. شرکت (آمریکایی) به ترتیب. متیل پارابن و U{0}} از Induchem به دست می آیند. شرکت (سوئیس). اسید سیتریک، هیدروکسید تترابوتیل آمونیوم (TBAH)، سوربیتول، اسید فسفریک و دی هیرو فسفات پتاسیم از شرکت آلدریچ خریداری شد. (آمریکایی). همه مواد شیمیایی از درجه معرف تجزیه ای بودند. تجاریلوازم آرایشیمحصولات، از تولیدکنندگان مختلف، از فروشگاه‌های خرده‌فروشی و از یک داروخانه محلی خریداری شدند. حلال‌ها و آب از طریق یک غشاء .45 میلی‌متری 0 فیلتر شده و گاز زدایی شدند.

2.2. ابزار دقیق

دستگاه HPLC (شرکت هیتاچی، ژاپن) متشکل از یک سیستم کروماتوگرافی مدولار بود که یک پمپ (مدل I-7100)، یک آشکارساز UV (مدل I-7420؛ طول موج متغیر) و دریچه تزریق با یک حلقه نمونه 25 میلی لیتری (Model7725, Rheodyne, Cotati, US) متصل شد. جمع‌آوری و پردازش داده‌ها با رایانه شخصی با استفاده از نرم‌افزار SISC (تایوان) انجام شد. تزریق نمونه با سرنگ 25 میلی‌لیتری (همیلتون، سوئیس) انجام شد. یک ستون 5 میلی‌متری، 250 میلی‌متری / 4.60 میلی‌متری شناسه A Mightysil RP{10}}GP از فولاد ضد زنگ استفاده شد.

2.3. شرایط کروماتوگرافی

آنالیز کروماتوگرافی با روش فاز معکوس ایزوکراتیک تک ستونی انجام شد. در روش جفت یونی، فاز متحرک یک 0 بود.{{10}} محلول بافر دی هیدرو فسفات پتاسیم 05 مولار شامل سه ماده شیمیایی: TBAH، متانول، و اسید فسفریک. مقدار این سه ماده شیمیایی تأثیر زیادی بر جداسازی و وضوح طیف HPLC دارد. غلظت TBAH از 1 تا 10 میلی‌مولار متغیر بود. متانول از 1 تا 10 جلد درصد . مقدار مختلفی از اسید فسفریک به محلول بافر اضافه شد تا مقادیر pH را از 2.5 تا 5.0 تنظیم کند. تمام فازهای متحرک قبل از استفاده از طریق یک میلی‌پورفیلتر، اندازه منافذ 0.45 میلی‌متر فیلتر شدند و قبل از استفاده، توسط فراصوت گاز زدایی شدند. سرعت جریان 1.1 میلی لیتر در دقیقه استفاده شد. آنالیت ها با جذب UV در 220 یا 240 نانومتر شناسایی شدند. هویت چهار ماده با کروماتوگرافی با استانداردهای معتبر تعیین شد. کمی سازی با ادغام قله با استفاده از روش استانداردسازی خارجی انجام شد.

مزایای سیستانچازسفید کردن پوست موثر

2.4. منحنی کالیبراسیون

محلول های استوک با وزن کردن دقیق عوامل و سپس حل کردن آنها در آب تهیه شد. پنج محلول کاری از چهار آنالیت تازه از محلول‌های موجود آنها با نسبت {0}} با آب مقطر تهیه شد. رقت مناسب این محلول‌های کاری غلظت‌های 10/300 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر را به‌دست آورد، به‌جز GA و MAP، که غلظت‌های آن به ترتیب 0.0 میلی‌گرم در میلی‌لیتر 0-36 و mg/ml 451/5.6 بود. منحنی‌های کالیبراسیون با رسم نواحی اوج هر جزء در برابر غلظت ساخته شدند و مقادیر شیب را به همراه ضریب همبستگی و قطع برای هر منحنی کالیبراسیون ارائه کردند. منحنی های کالیبراسیون برای تعیین کمیت چهار مورد بودسفید کردننمایندگان در چهار نمونه تجاریلوازم آرایشی.

2.5. مطالعه ریکاوری

یک نمونه کرم حاوی شمارهسفید کردنعوامل به عنوان کنترل در مطالعه بهبود استفاده شد. مقدار متنوعی از چهار عامل سفید کننده آبدوست GA، AA، ART و MAP به این کرم کنترل اضافه شد. غلظت در جدول 4 آورده شده است. حدود 1 گرم از هر یک از کرم نمونه آماده شده در یک بالن شیشه ای وزن شده و 30 میلی لیتر آب مقطر به آن اضافه شده و سپس فلاسک در حمام اولتراسونیک به مدت 15 دقیقه در دمای 25 8 درجه سانتیگراد غوطه ور شد. محلول به دست آمده با آب مقطر به حجم 100 میلی لیتر رسید و سپس به مدت 3 دقیقه فیلتر شده و با N2 اکسیژن زدایی شد و سپس با درپوش Bakelitescrew و حلقه سیلیکونی مهر و موم شد.

3. نتایج و بحث

3.1. کروماتوگرافی و وضوح

ساختار چهارسفید کردنعوامل، GA، AA، ART، و MAP، در جدول 1 نشان داده شده است. همه آنها مولکول های بسیار قطبی هستند. برای آنالیت های قطبی، متانول یا استونیتریل معمولاً به عنوان یک جزء فاز متحرک در ستون C18 یا ستون سیانو پروپیل HPLC استفاده می شود. با این حال، زمانی که از متانول یا استونیتریل استفاده شد، هم‌شویی این آنالیت‌های قطبی یافت شد. بنابراین، جداسازی این آنالیت ها غیرممکن است. برای حل این مشکل از شستشوی همزمان، از روش جفت یونی برای کاهش خصیصه قطبی آنها استفاده شد تا زمان ماندگاری قابل قبولی به دست آید. علاوه بر این، یافتن یک شرایط جداسازی مناسب برای آنالیز همزمان چهار آنالیت درلوازم آرایشیمحصولات برای به دست آوردن شرایط تحلیلی بهینه، تأثیر فاز متحرک و مقادیر pH آن در اینجا در نظر گرفته شده است. نتایج به دست آمده در شکل 1 نشان داده شده است. غلظت TBAH در فاز متحرک از 1 تا 10 میلی مولار متغیر بود. ضریب ظرفیت محاسبه شده با افزایش غلظت TBAH کاهش می یابد (شکل 1(a) را ببینید). این کاهش در مقادیر ضریب ظرفیت برای MAP شدید است اما برای GA، ART و AA بسیار خفیف است. تفاوت قابل توجهی برای ضریب ظرفیت بین MAP و سایرین می تواند به دلیل شخصیت یونی قوی MAP باشد. تفاوت کوچکتر در ضریب ظرفیت، زمان ماند معقولی را در HPLC می دهد. بنابراین، غلظت TBAH برای فاز متحرک 10 میلی‌مولار انتخاب شد. اثر مقدار متانول بر فاکتور ظرفیت در شکل 1 (b) نشان داده شده است. نتایج مشابهی برای TBAH یافت شد. غلظت بالاتر متانول، تفاوت کمتر در ضریب ظرفیت و زمان ماند کوتاهتر در HPLC. ده درصد حجم متانول در این مورد انتخاب شد.

مقدار متفاوتی اسید فسفریک به محلول بافری که در بالا ذکر شد اضافه شد تا PH از 5/2 تا 5 افزایش یابد.{3}}. در pH 5. پیک های گسترده و چندگانه در نتایج کروماتوگرافی مشاهده شد. پیک های کروماتوگرافی برای GA، AA و ART با یکدیگر همپوشانی دارند. برخلاف نتایج قبلی، ضریب ظرفیت با افزایش مقادیر pH برای MAP افزایش می‌یابد (شکل 1 (c) را ببینید). تغییر در ضریب ظرفیت به دلیل مقادیر pH برای GA، AA و ART بسیار ناچیز است. ضروری است که مقدار pH را انتخاب کنید که تفاوت های کافی در مقادیر ضریب ظرفیت برای وضوح خوب در HPLC داشته باشد. به این دلایل، مقدار pH برابر با 2.5 انتخاب شد. در نتیجه، یک فاز متحرک مناسب برای آنالیز HPLC، محلول بافر 005.005 مولار بافر پتاسیم دی هیدروفسفات حاوی 10 میلی مولار TBAH، 10 جلد است. درصد متانول و اسید فسفریک. اسید فسفریک برای تنظیم مقدار pH محلول بافر به 2.5 استفاده شد.

3.2. تعیین طول موج برای آشکارساز UV

طیف UV اینهاسفید کردنعوامل حل شده در فاز متحرک با استفاده از اسپکتروفتومتر UV به دست آمد. حداکثر پیک جذب در 220 نانومتر برای GA، در 243 نانومتر برای AA، در 227 نانومتر برای ART، و در 238 نانومتر برای MAP است. در 240 نانومتر، آشکارساز UV حساسیت بالایی در تشخیص AA و MAP دارد، اما حساسیت بسیار کمی برای GA دارد. و ART (شکل 2 (b) را ببینید). در حالی که در 220 نانومتر، پیک های شفاف در کروماتوگرافی HPLC برای همه عوامل چهار سفید کننده نشان داده شد (نگاه کنید به شکل 2(a)). برای به دست آوردن حساسیت بهتر برای همه آنالیت ها، طول موج آشکارساز برای تشخیص و کمیت چهار آنالیت به 220 نانومتر تنظیم شد. این روش نسبتا سریع با زمان اجرای تحلیلی 12.1 دقیقه در دمای اتاق (حدود 26 8 درجه سانتیگراد) است.

3.3. مطالعه پایداری برای عوامل سفید کننده

AA هنگامی که در یک آب حل می شود به اسید دهیدروآسکوربیک (DHA) تجزیه می شود. بنابراین، پایدار نگه داشتن اسید آسکوبیک در طول تجزیه و تحلیل برای دقت نتایج بسیار مهم است. فرناندس و همکاران گزارش کردند که عوامل اصلی مؤثر بر تجزیه اکسیژن و دما هستند [19]. در مطالعه آنها، تجزیه در 1 ساعت معنی دار بود و تأثیر مقادیر pH محلول بر تجزیه فقط در pH 5 و 5.6 ذکر شد. در مطالعه ما، پایداری AA با استفاده از تغییر غلظت مورد ارزیابی قرار گرفت. AA در شرایط مختلف محیطی مانند محلول تیمار شده یا تیمار نشده با N2، مقدار pH و دما. هر چه زمان برای تغییرات مهم طولانی تر باشد، آسکوربیک پایدارتر است.

نتایج که در جدول 3 خلاصه شده است، همبستگی قوی بین پایداری و محلول تیمار شده یا تیمار نشده با N2 را نشان می دهد. از دست دادن محلول AA درمان نشده سریعتر از محلول درمان شده است. همانطور که در جدول 3 نشان داده شده است، در دمای 10 8C و pH2، زمان مورد نیاز برای 10 درصد تخریب AA حدود 10 ساعت برای عدم درمان و حدود 48 ساعت برای محلول تیمار شده بود. این ممکن است به دلیل این باشد که اکسیژن بسیار کمتری برای اکسیداسیون در دسترس است. خاطرنشان می شود که در حضور اکسیژن و در دمای 25 8 درجه سانتیگراد، سطح AA 8.7 و 71.2 درصد پس از 10 ساعت برای pH 6.9 و 2.0 مشاهده شد. این نتیجه را می توان با مقدار بیشتر AA تفکیک شده در pH 6.9 توضیح داد و این شکل نسبت به شکل غیر تفکیک نشده پایدارتر است [19]. برعکس، در غیاب اکسیژن و در دمای 25 یا{22}} درجه سانتیگراد، محلول آبی AA در pH 6.9 بسیار پایدارتر است. دلیل پایداری بیشتر AA هنوز بیشتر مورد بررسی قرار نگرفته است. نسبت به دمای محلول، در محلول‌های تیمار نشده، AA در دمای بالاتر ({25}}C) نسبت به دمای پایین (10 8C) پایداری کمتری دارد. اما برای محلول‌های تیمار شده، محلول آبی AA پایدار است و تحت تأثیر دما قرار نمی گیرد.

3.4. اعتبارسنجی برای خطی بودن و سنجش برای دقت

با استفاده از شرایط کروماتوگرافی توصیف شده، تفکیک معقولی بین این آنالیت ها و سایر ترکیبات درلوازم آرایشیتولید - محصول. روش برای خطی بودن و دقت تایید شد. برازش منحنی خطی برای محاسبه منحنی‌های کالیبراسیون برای هر کدام اعمال شدسفید کردنعامل. نتایج در جدول 4 آورده شده است. خطی عالی در محدوده 5.6 تا 451 mg/ml برای همه استانداردها به‌جز GA که دامنه آن از 8 تا 36 mg/ml بود، به‌دست آمد. ضریب همبستگی از 0 0.9974 تا 0.9997. دقت روش به‌عنوان انحراف استاندارد نسبی (RSD، n{{10}}) سنجش‌های حاوی سفیدکننده‌های چهارآب دوست در همان محدوده غلظت محاسبه شد. محدوده RSD بین 0.3 تا 6.43 درصد بود.

3.5. بهبود

یک کرم حاوی شمارهسفید کردنعوامل به عنوان کنترل در مطالعه بهبود استفاده شد. مقدار کمی از چهار عامل سفید کننده به این کرم کنترل اضافه شد. کروماتوگرافی HPLC نشان می دهد که هیچ اوج جذب UV برای کرم کنترل شناسایی نشده است (شکل 3 (a) را ببینید) و چهار پیک جذب برای یک کرم نمونه حاوی این چهار عامل سفید کننده یافت شد. در شکل 3(b)، پیک 1 اوج جذب UV برای GA است. پیک 2 برای AA؛ قله 3 برای ART. پیک 4 فرم مپ. هر عامل سفید کننده زمان ماندگاری خاص خود را دارد. این کاراکتر بعداً برای شناسایی این عوامل سفید کننده استفاده خواهد شد. نتایج در جدول 2 خلاصه شده است. محدوده بازیابی 94-100 درصدی برای چهار عامل در هر دو غلظت کم و بالا به دست آمد. ضرایب واریانس محاسبه شده از سه تکرار همگی کمتر از 6.9 درصد بود. کروماتوگرام HPLC از چهار آنالیت استخراج شده از فرمول تجربی در شکل 3 نشان داده شده است و هیچ تداخلی مشاهده نشد.

گیاه سیستانچداردضد پیری, آنتی اکسیدان، واثرات مراقبت از پوست

3.6. کاربرد

چهار مورد به صورت تجاری موجود استلوازم آرایشیمحصولات مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. آن ها هستندسفید کردنبه ترتیب کرم (مواد آرایشی شماره 1)، ژل سفید کننده C20 (شماره آرایشی 2)، لوسیون اسانس (مواد آرایشی شماره 3) و لوسیون لایه بردار (مواد آرایشی شماره 4). کروماتوگراف های این چهار ماده آرایشی در شکل 4 (a /d) آورده شده است. کروماتوگرافی 4 (a) یک پیک جذب کوچک از پیک 4 را نشان می دهد، یعنی ماده آرایشی شماره 1 حاوی MAP است. کروماتوگراف 4 (b) پیک پیک 2 را نشان می دهد که نشانه ای از این است که شماره آرایشی 2 حاوی AA است. از کروماتوگراف 4 (c) و (d)، ART در cosmeticnumber 3 شناسایی شد و هر دو GA و AA در آرایشی شماره 4 شناسایی شدند. یک کروماتوگرافی پیکین بدون علامت 4 (d) وجود دارد. این پیک جذب اشعه ماوراء بنفش زمان ماندگاری طولانی‌تری نسبت به پیک 3 دارد، اما بسیار کوتاه‌تر از پیک 4 است. واضح است که این پیک جذب مشخص نشده به دلیل مواد سفیدکننده نیست، بلکه به دلیل ترکیبات دیگر غیر آرایشی شماره 4 است. تعیین کمیت این عوامل سفیدکننده توسط ادغام پیک ها در کروماتوگرافی با استفاده از روش استانداردسازی خارجی. سطح عوامل سفید کننده در این چهارلوازم آرایشیدر جدول 5 آورده شده است. خاطرنشان می شود که نتایج به دست آمده صحت را تأیید می کند و انطباق با ادعای برچسب را نشان می دهد.

4. نتیجه گیری

روش HPLC توسعه یافته برای تجزیه و تحلیل همزمان آب دوست ساده و سریع استسفید کردنعوامل یک فاکتور ظرفیت برای انتخاب فاز متحرک مناسب برای HPLC استفاده شد. باید شرایطی را انتخاب کنید که تفاوت کمتری در ضریب ظرفیت برای مدت زمان نگهداری معقول ایجاد کند. برای شرایط انتخاب شده ضروری است که تفاوت های کافی در مقادیر ضریب ظرفیت برای وضوح خوب در کروماتوگرافی HPLC ارائه شود. در نتیجه، یک فاز متحرک مناسب برای تجزیه و تحلیل HPLC، محلول بافر دی هیدرو فسفات 0.005 مگاپتاسیم حاوی 10 میلی مولار TBAH، 10 جلد است. درصد متانول و اسید فسفریک از اسید فسفریک برای تنظیم مقدار pH محلول بافر به 2.5 استفاده شد. طول موج تشخیص بهتر برایسفید کردنعوامل در 220 نانومتر برای HPLC است. علاوه بر این، روش مناسبی برای تثبیت AA در روش تحلیلی به دست آمده است. که برای صحت نتایج مهم است.

سیستانچ توبولوزابرش ها

روی عکس کلیک کنید و اطلاعات بیشتری کسب کنید