Tetrahymena Thermophila به عنوان ماده آزمایشی استفاده شد

لطفا تماس بگیریدoscar.xiao@wecistanche.comبرای اطلاعات بیشتر

در این آزمایش از Tetrahymena thermophila به عنوان ماده آزمایشی استفاده شد. T. thermophila یک مژک دار آزاد است که به طور گسترده در اکوسیستم های آبی جهانی وجود دارد و از نظر ساختار و پیچیدگی عملکردی شبیه سلول های متازوئر است. کشف ribozynnel6 و telomerasel7 در Tetrahymena رونق زیادی در تحقیقات مکانیسم ضد پیری ایجاد کرد که دو جایزه نوبل را دریافت کرد. به دلیل چرخه رشد کوتاه، کشت آسان و زمینه ژنتیکی واضح، T. ترموفیل می تواند تحقیقات دوگانه را در داخل بدن و در شرایط آزمایشگاهی در یک طرح آزمایشی ارائه دهد. T. thermophila با موفقیت در غربالگری دارو و مکانیسم های دارویی استفاده شده است. مهمتر از آن، اطلاعاتی در مورد تکامل مولکولی خانواده گلوتاتیون پراکسیداز T. thermophila کشف شده است9-2. مشخصات اطلاعاتی T.سیستانچ چنگیز خانژن‌های thermophila GPX را می‌توان از پایگاه داده‌های ژنومیک عملکردی Tetrahymena (TetraFGD) (http://tfgd.ihb.ac.cn/) و TGD (http://ww. ciliate.org) 22. ده مورد از دوازده GPX احتمالی به دست آورد. به عنوان فسفولیپید هیدروپراکسید گلوتاتیون پراکسیداز (PHGPx) در پایگاه داده مقایسه‌ای ژنوم Tetrahymena شناسایی شده‌اند. PHP، یک GPX وابسته به سلنیوم، می‌تواند به طور خاص هیدروپراکسید فسفولیپید را کاهش دهد تا از لیپوزوم‌های لسیتین و بیوفیلم‌ها در برابر آسیب اکسیداتیو محافظت کند. kDa) از پروتئین مونومر PHGPx که در پستانداران 24 توضیح داده شده است. علاوه بر این، تعداد زیادی گزارش نشان داد که بیان GPX Tthermophila از نظر کمی متفاوت است و به منبع استرس (اکسیدان، القاکننده آپوپتوز یا فلز) 2122 و زمان قرار گرفتن بستگی دارد{9}}

لطفا برای دانستن بیشتر اینجا را کلیک کنید

این مطالعه با مقایسه اثر عصاره آبی و مونومرهای اصلی G.lucidum بر منحنی رشد و حداکثر تراکم T. thermophila بهترین عصاره ضد پیری G. lucidum را به دست آورد. مکانیسم ضد پیری G. lucidum، به ویژه تعیین نوع عمل خانواده GPX، در سطوح مولکولی، سلولی و فردی مورد بررسی قرار گرفت. انتظار می رود نتایج این مطالعه به کاربرد بالینی محصولات G. lucidum کمک کند.

مواد و روش ها

عصاره و مونومرهای آبی گانودرما لوسیدوم. با اشاره به گزارش Cuong20،20 گرم G. lucidum خشک (فروشگاه تخصصی Changbai Mountain Senbao، Jilin) ​​آسیاب و در 1000 میلی لیتر ddHO استخراج شد. عصاره آبی با سانتریفیوژ جمع آوری و با خشک کردن خلاء تا 100 میلی لیتر تغلیظ شد و تا زمان استفاده در درجه{4}} نگهداری شد.

پلی ساکارید G. lucidum، Ganoderic Acid A، Ganoderal A و G. lucidum ergosterol از Chengdu Must Biotechnology Co.,Ltd خریداری شد. این سه استاندارد طبق طرح یکنواخت در متانول حل و به محیط SPP اضافه شدند. کشت سلولی و درمان دارویی Tetrahymenathermophila (SB210) توسط موسسه هیدروبیولوژی، آکادمی علوم چین، ووهان، IPR چین ارائه شده است. T. thermophila در انکوباتور 28 درجه کشت داده شد. محیط SPP حاوی 2 درصد (w/v) پروتئوز پپتون، 0.1 درصد عصاره مخمر (Oxoid)،0.2 درصد گلوکز و 0.003 درصد سکوسترن بود. با توجه به طرح یکنواخت (جدول تکمیلی S1 و S2)، عصاره آبی G. lucidum، G. پلی ساکارید لوسیدوم، گانودریک اسید A، گانودرال A و جی. لوسیدوم ارگوسترول به محیط کشت اضافه شدند. گروه شاهد با همان حجم آب مقطر دوبل، با 3 نمونه موازی در هر گروه جایگزین شد. پس از ورود به فاز لگاریتمی، هر 2 ساعت یکبار نمونه برداری شد تا مرحله کاهش. تراکم T. thermophila توسط تخته شمارش سلول های خونی شمارش شد و رابطه بین تراکم T. thermophila و زمان ترسیم شد.

تحلیل رونویسی. آزمایش با یک صفحه چاهک 24- انجام شد و هر چاه از 900 میکرولیتر SPP تشکیل شده بود. در گروه تجربی 100 میکرولیتر عصاره آبی 200 میلی گرم بر میلی لیتر G. lucidum اضافه شد. گروه کنترل به جای آن با 100 میکرولیتر ddH O تحت درمان قرار گرفتند. در هر گروه سه نمونه موازی تعیین شد.افزایش عمر cistancheگروه کنترل و گروه آزمایش هر دو در فاز لگاریتمی (2{7}} ساعت) بودند و فاز کاهش (27 ساعت) برای آنالیز رونوشت جمع‌آوری شد. هر گروه از نظر بیولوژیکی تکثیر شد و همه نمونه‌ها تحت یک روش ریزآرایه‌ای کل رونوشت قرار گرفتند (Biomarker Technologies، پکن، چین). نمایه بیان ژن توسط یک آرایه بیانی Affymetrix 3'IVT شناسایی شد تا اثر بیان ژن های ارزش کاهش یابد، RPKM بزرگتر یا مساوی 5 و FC (تغییر برابری) بزرگتر یا مساوی 2 به عنوان معیار برای غربالگری استفاده شد. ژن‌های با بیان متفاوت (DEGs)KOBAS برای تحقق تجزیه و تحلیل مسیر ژن‌آنتولوژی (GO) و دایره‌المعارف کیوتو ژن‌ها و ژنوم‌ها (KEGG) استفاده شد. مسیر غنی سازی با مقدار P-adj اصلاح شده کمتر یا مساوی 0.05 تعیین شد. نتایج رونوشت با استفاده از رونویسی معکوس کمی PCR (RT-qPCR) تأیید شد (روش به فایل تکمیلی مراجعه کنید). سپس، شبکه تعامل پروتئین-پروتئین (PPI) بر اساس پایگاه داده STRING ایجاد شد و ژن مرکزی با استفاده از CytoHubla برای شناسایی گره مرکزی در نرم افزار Cytoscape غربالگری شد.

رنگ‌آمیزی نقره و مشاهده میکروسکوپ الکترونی عبوری (TEM). روش رنگ آمیزی نقره بر اساس روش فویسنر26 بود. ترموفیلا در زیر میکروسکوپ روغنی مشاهده شد. فراساختار T. thermophila توسط TEM مشاهده شد. سلول های تیمار شده با عصاره آبی G.lucidum و گروه شاهد با سانتریفیوژ در گرما 600 به مدت 2 دقیقه جمع آوری شدند. سلول ها در گلوتارآلدئید 2.5 درصد پیشوند شدند و به مدت 8 ساعت در دمای 4 درجه نگهداری شدند. نمونه ها سه بار با PBS (pH7.5) شسته و به مدت 5 دقیقه در 3000 xg سانتریفیوژ و سپس با 1 درصد تترااکسید اسمیم (4 ساعت) تثبیت شدند. سپس آبگیری با استفاده از گرادیان استون 15 تا 100 درصد انجام شد. سپس سلول ها در رزین با ویسکوزیته پایین Embed 812 (TAAB) جاسازی شدند. عمل آوری افتل، بخش های فوق نازک ({17}} نانومتر) توسط یک برش دهنده فوق نازک بریده شد. فراساختار توسط میکروسکوپ الکترونی عبوری (JEOL JEM{18}}، ژاپن) مشاهده شد.

تعیین آسیب سلولی lROS درون سلولی توسط پروب حساس فلورسنت 2'،7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA)27 شناسایی شد. فعالیت مالون دی آلدئید (MDA) توسط کیت های تجاری ارائه شده توسط نانجینگ Jiancheng موسسه مهندسی زیستی (Nanjing, Jiangsu, China) تعیین شد. روش تعیین توانایی حذف رادیکال های هیدروکسیل (·OH) همانطور که توسط Takemura28 توضیح داده شد. توانایی عصاره آبی G. lucidum برای از بین بردن رادیکال آزاد OH به عنوان چگالی نوری گروه آزمایش منهای چگالی نوری گروه کنترل بیان شد.

سیستانچ می تواند ضد پیری باشد

فعالیت PHGPx نسبت نیکوتین آمید آدنین دی نوکلئوتید فسفات (NADPH)/NADP* و نسبت گلوتاتیون/گلوتاتیون دی سولفید (GSH/GSSG) با استفاده از کیت سنجش کمی NADP*/NADPH (S0179، Beyotime)، GSH/GSSG Assay Kit53All(SBeyotime) تعیین شد. سنجش طبق پروتکل سازنده انجام شد.

نتایج

تأثیر عصاره آبی G.lucidum و مونومرهای G.lucidum بر رشد T. ther-mochila. همانطور که مطالعات قبلی 7، G. پلی ساکارید lucidum جزء اصلی عصاره آبی G. lucidum در این آزمایش بر اساس شناسایی اسپکتروفتومتر بود (شکل S1 تکمیلی). مواد فعال عصاره آبی G. lucidum نیز توسط GC-MS آنالیز شد. نمودار یون کل عصاره آبی G. lucidum نشان داد که اجزای ll در عصاره آبی وجود دارد (شکل تکمیلی S2). از جمله ترکیبات عصاره آبی G.lucidum (جدول تکمیلی S3 و S4)، G. لوسیدوم اسید A، Ganoderal A و G. lucidum ergosterol بر اساس زمان ماند و درجه تطابق انتخاب شدند.

به منظور مقایسه اثرات عصاره آبی G. lucidum و این مونومرهای اصلی بر رشد T. thermophila، عصاره آبی G. lucidum و محلول مونومر G. lucidum به محیط کشت T. thermophila اضافه شدند. نتایج در شکل 1 نشان داده شد. حداکثر تراکم گروه کنترل 6×104 سلول در میلی لیتر در 24 ساعت بود. تراکم سلولی گروه عصاره آبی G. lucidum از 12 تا 20 ساعت تقریباً مشابه گروه کنترل بود، اما از ساعت 20 تا 25 به طور قابل توجهی بیشتر از تراکم سلولی گروه کنترل بود.cistanche nzبه طور همزمان، فاز لگاریتمی 1 ساعت طولانی شد، حداکثر چگالی 1.15×105 سلول / میلی لیتر بود. اگرچه حداکثر چگالی گروه پلی ساکارید G. lucidum بیشتر از گروه کنترل به میزان 9.7×104 سلول در میلی لیتر بود، اما کمتر از گروه عصاره آبی G.lucidum بود. حداکثر چگالی اسیدهای G. lucidum A، Ganoderal A و G. lucidum ergosterol از گروه کنترل تجاوز نکرد که نشان داد املاح الکلی این مونومرها برای رشد T. thermophila مناسب نیستند. می توان نتیجه گرفت که عصاره آبی G.lucidum حاوی انواع مواد فعال می تواند رشد T. thermophila را بیش از مونومرهای آن افزایش دهد.

اثر ضد پیری عصاره آبی G. lucidum. با افزایش زمان کشت، شدت نور ROS در فاز کاهش (شکل 2b) بیشتر از فاز لگاریتمی (شکل 2a) بود. پس از افزودن عصاره آبی G. lucidum، اگرچه شدت فلورسانس فاز کاهش (شکل 2d) همچنان در مقایسه با فاز لگاریتمی (شکل 2c) افزایش یافته بود، اما به طور قابل توجهی کمتر از گروه کنترل بود. محتوای MDA در گروه کنترل نیز در مرحله کاهش بیشتر از فاز لگاریتمی بود (شکل 2e). در همین حال، توانایی مهار OH در فاز کاهش کمتر از آن در فاز لگاریتمی بود (شکل 2e). تعادل بین اکسیداسیون و کاهش از بین رفت و بدن پیر شد. پس از افزودن عصاره آبی G. lucidum، محتوای MDA کمتر از گروه کنترل بود (ستون سمت چپ در شکل 2e)، و مقدار OH حذف شده توسط سلول ها در فاز لگاریتمی و فاز کاهش بیشتر از آن در گروه کنترل بود. گروه کنترل (ستون سمت راست در شکل 2e). رشد T[ thermophila را می توان با روند پیری موجودات چند سلولی از طریق آسیب سلولی آن مقایسه کرد. همانطور که ROS و MDA انباشته شدند، رشد مهار شد و تراکم T. thermophila کاهش یافت. افزودن عصاره آبی G. lucidum می تواند تعادل ردوکس را در T. thermophila حفظ کرده و اثرات ضد پیری را به دست آورد.

تجزیه و تحلیل ژن های بیان شده متفاوت و تأیید با RT-qPCR. در مقایسه با گروه کنترل، بیان 11519 ژن در فاز لگاریتمی T. thermophila پس از افزودن عصاره آبی G. lucidum به SPP به طور معنی‌داری تغییر کرد. از این میان، 6201 ژن با تنظیم بالا و 5318 ژن کاهش یافت.اندازه آلت تناسلی سیستانچبیان 8772 ژن به طور قابل توجهی در طول مرحله کاهش تغییر کرد، که در میان آنها 4721 ژن تنظیم شده و 4051 ژن کاهش یافت. در مطالعات قبلی در آزمایشگاه ما،

اثر ضد پیری G.lucidum بر روی Stylonychia در شاخص آنتی اکسیدانی منعکس شد، بنابراین 10 ژن (جدول تکمیلی S5) مربوط به آنتی اکسیدان ها به طور تصادفی از بین DEG ها انتخاب شدند و صحت داده های RNA-seq توسط RT- تأیید شد. qPCR. الگوهای بیان این 10 ژن در فاز لگاریتمی و فاز کاهش با روند داده های RNA-seq مطابقت داشت (شکل تکمیلی S3). نتایج نشان داد که داده‌های RNA-seq قابل اعتماد هستند و می‌توانند برای تجزیه و تحلیل بعدی مورد استفاده قرار گیرند.

غنی سازی GO و تجزیه و تحلیل مسیر KEGG. DEGها در فاز لگاریتمی در 14 فرآیند بیولوژیکی (BP) با 6 نوع عملکرد مولکولی (MF) شرکت داشتند و در تمام اجزای سلولی (CC) وجود داشتند (شکل 3a). DEG ها در فاز کاهش در 12 BP با 4 نوع MF درگیر بودند و در 12 CC وجود داشتند. بیشترین فشار خون در دو فاز فرآیند متابولیک، MF اتصال و CC غشایی بود. در میان فرآیند متابولیک، اتصال و غشاء، ژن‌های تنظیم‌شده بالا 70 درصد در فاز لگاریتمی (شکل 3b) و 75 درصد در فاز کاهش (شکل 3c) را تشکیل می‌دهند. این نتایج نشان می دهد که عصاره آبی G. lucidum می تواند حفظ یکپارچگی غشای سلولی را در هر دو فاز ارتقا دهد.

تجزیه و تحلیل غنی سازی مسیر KEGG برای تجزیه و تحلیل بیشتر DEGs بین دو فاز انجام شد. در فاز لگاریتمی، 94 مسیر متمرکز شد که در این میان 68 درصد از کل ژن ها در متابولیسم نقش داشتند. در مرحله کاهش، 91 مسیر غنی شد که در میان آنها متابولیسم همچنان بزرگترین مسیر بود که 68 درصد را تشکیل می داد. 20 مسیر برتر در فاز لگاریتمی (شکل 3d) و فاز کاهش (شکل 3e) برای ترسیم نمودار حباب استفاده شد و نشان داد که صرف نظر از اهمیت یا تعداد ژن‌های درگیر، اثر G.پودر سیستانچعصاره آبی lucidum در درجه اول بر روی مسیر متابولیسم گلوتاتیون متمرکز شده است. در فاز لگاریتمی، 38 ژن با بیان متفاوت در این مسیر غنی شدند که 45 درصد را شامل می شود. در مرحله کاهش، 43 ژن با بیان متفاوت در این مسیر غنی شدند که 50 درصد را شامل می شود.

شبکه های برهمکنش پروتئین-پروتئین (PPI) DEGs. روشن شدن DEG ها در مسیر متابولیسم گلوتاتیون و بینش در مورد تعامل آنها با سایر پروتئین ها به بررسی بیشتر مکانیسم تنظیمی بالقوه عصاره آبی G. lucidum کمک می کند. هر دو فاز لگاریتمی (شکل 4a) و فاز نزولی (شکل 4b) مهمترین اثرات را بر GPX1، GPX2، GPX7 و GPX11 داشتند. از طریق پرس و جو از پایگاه داده TetraFGD، این آنزیم های GPX متعلق به PHGPx (جدول تکمیلی S6) بودند. بنابراین، آنزیم های آنتی اکسیدانی، به ویژه PHGPx، نقش مهمی در ترویج رشد T. thermophila از طریق القای عصاره آبی G. lucidum ایفا می کنند.

فعالیت GPS و تأیید عملکرد. فعالیت PHGPx به میزان کاهش جذب NADPH اشاره دارد2". مقدار NADPH/NADP* در مرحله کاهش گروه کنترل کمتر از فاز لگاریتمی بود (شکل 5a). نتیجه نشان داد که فعالیت PHGPx پس از افزودن عصاره آبی G. lucidum، مقدار مثبت NADPH/NADP در مرحله کاهش همچنان کمتر از فاز لگاریتمی بود، اما بیشتر از هر دو فاز گروه کنترل بود. عصاره آبی G.lucidum می تواند فعالیت PHGPx را تقویت کند.

PHP به طور خاص می تواند کاهش هیدروپراکسید فسفولیپید را با کاهش گلوتاتیون (GSH) کاتالیز کند، به طوری که پراکسید لیپیدی سمی (PL-PUFA-OOH) را به طور موثر به اسیدهای چرب غیر اشباع غیر سمی (PL-PUFA-OH) تبدیل کند. تغییر نسبت GSH/GSSH می تواند منعکس کننده تغییر PL-PUFA-OOH و PL-PUFA-OH باشد. به دلیل کاهش فعالیت PHGPx (شکل 5a)، نسبت GSH/GSSH در گروه کنترل نیز با کاهش یافت افزایش زمان کشت (شکل 5b). اما پس از افزودن عصاره آبی G.lucidum نسبت GSH/GSSH در فاز لگاریتمی و فاز کاهشی افزایش یافت. PL-PUFA-OOH سمی داخل سلولی در گروه آزمایش به PL-PUFA-OH غیرسمی تبدیل شد که بیشتر از گروه کنترل بود. مشاهده مورفولوژی میکروسکوپی و فراساختار. اثر محافظتی عصاره آبی G. Luci-dum بر روی غشا با رنگ آمیزی نقره آمونیاک و TEM مشاهده شد. با مقایسه فاز لگاریتمی گروه کنترل (شکل 6a) و فاز کاهشی گروه کنترل (شکل 6c)، مشخص شد که مورفولوژی سلولی T. thermophila با افزایش زمان کشت به طور جدی تغییر شکل داده است. هسته تار بود، که نشان می‌دهد سلول‌ها در حالت پیری به نظر می‌رسند. با این حال، در گروه عصاره آبی G.lucidum، مورفولوژی و یکپارچگی سلول ها در فاز لگاریتمی (شکل 6e) و فاز کاهش (شکل 6g) به خوبی محافظت شد. تغییرات فراساختاری در سلول ها توسط TEM مشاهده شد. برجستگی و کانتور میتوکندری در مرحله کاهش (شکل 6d) در مقایسه با فاز لگاریتمی (شکل 6b) در گروه کنترل تار شد. پوسیدگی میتوکندری با افزایش زمان کشت افزایش یافت. افزودن عصاره آبی G. lucidum مورفولوژی میتوکندری را در فاز لگاریتمی (شکل 6f) و فاز کاهش (شکل 6h) بهبود بخشید. عصاره آبی G. lucidum عملکرد میتوکندری را تضمین می کند که ارتباط نزدیکی با یکپارچگی غشاء دارد. لازم به ذکر است که در فاز لگاریتمی، میتوکندری در گروه آزمایش تغییرات مورفولوژیکی نشان داد (شکل 6f، h)، اما یکپارچگی غشاء تحت تأثیر قرار نگرفت.

بحث

کاربرد عصاره G.lucidum هم در طب سنتی چین و هم در آسیای شرقی سابقه طولانی دارد. تعداد زیادی از مطالعات اثربخشی آنها را نشان داده است. گزارش های قبلی نشان داد که عصاره آبی G.lucidum نه تنها حاوی پلی ساکارید G. lucidum بلکه تری ترپنوئیدهای Glucidum نیز می باشد. طبق گزارشات قبلی، اسید گانودرما، گانودرما آلدهید و گانودرما ارگوسترول ترکیبات اصلی G. lucidum triterpene 3 هستند. آنها با عملکردهای ترمیم متفاوتی برای سلول عمل می کنند (جدول 1). عصاره آبی گانودرما لوسیدوم حاوی انواع مختلفی از مواد فعال است که عملکرد چهار ماده فعال دیگر را یکپارچه می کند که نه تنها می تواند در برابر اکسیداسیون مقاومت کند بلکه یکپارچگی غشاء را نیز حفظ می کند. در این مطالعه،

افزایش رشد عصاره آبی G. lucidum در T. thermophila این رابطه گنجاندن را تأیید کرد. از طریق تجزیه و تحلیل عصاره آبی G. lucidum توسط کروماتوگرافی جریان یون توتال (شکل S2 تکمیلی)، می توان دریافت که زمان انحلال مواد فعال مختلف متفاوت است. بنابراین عصاره آبی G. lucidum با افزایش زمان جوش تبدیل به یک حلال آلی پیچیده می شود. ما فکر می کنیم که مواد فعال در عصاره آبی G.lucidum ممکن است در زمان های مختلف عمل کنند و در نتیجه یک هم افزایی ایجاد کنند. این باید یک مطالعه بیشتر در آینده باشد.

تجزیه و تحلیل رونوشت T. thermophila اثر عصاره آبی G. lucidum را بر بیان ژن در طول رشد بررسی کرد. پس از درمان با عصاره آبی G. lucidum، PHGPx تاثیر کلیدی در تراکم سلولی و زمان تولید ظاهر شد. این نتیجه تایید کرد که عصاره آبی G.lucidum بر روی نوع وابسته به سلنیوم خانواده GPX اثر می‌گذارد. PHP یک سلنو پروتئین چند منظوره است که به طور گسترده در بدن توزیع می شود و نه تنها می تواند در واکنش های آنتی اکسیدانی شرکت کند، بلکه مستقیماً لیپیدهای غشا را کاهش می دهد تا از یکپارچگی سیستم غشایی محافظت کند. در مقایسه با سایر GPX ها، PHGPx دارای حجم کمتر و آب گریزی بیشتر است. گزارش های بسیاری نشان داده اند که بیان بیش از حد PHGPx در سلول ها می تواند در برابر پاسخ سلولی به آسیب پراکسیداسیون درون زا (مثلاً پیری) و اگزوژن (مثلاً محیطی) مقاومت کند 2-45. PHP تنها آنزیمی است که می تواند مستقیماً PL-PUFA- را کاهش دهد. OOH غشا را به ترکیبات هیدروکسیل مربوطه تبدیل می کند، در نتیجه پراکسیداسیون را متوقف می کند و غشای بیولوژیکی را از آسیب پراکسیداسیون محافظت می کند. افزایش محتوای PL-PUFA-OOH دلیل آسیب غشای سلولی در گروه کنترل در مرحله زوال بود که به یک چرخه معیوب تبدیل شد و پیری سلولی را تسریع کرد. در این مطالعه محتوای ROS و MDA بررسی شد. (شکل 2) T.thermophila در گروه شاهد با افزایش زمان کشت افزایش یافت. غشاء تغییر شکل جدی در مرحله کاهش از طریق مشاهده مورفولوژیکی ظاهر شد. با این حال، زمانی که عصاره آبی G. lucidun اضافه شد، بیان PHGPx تا تنظیم شد. بنابراین، PL-PUFA-OOH روی غشاء به PL-PUFA-OH غیر سمی تبدیل شد و پایداری ساختار غشاء هم در فاز لگاریتمی و هم در فاز زوال افزایش می‌یابد. با توجه به مشاهده غشا با رنگ آمیزی نقره آمونیاکی و TEM، می توان نتیجه گرفت که عصاره آبی G.lucidum در طول فرآیند رشد به غشای سلولی نفوذ کرده است. این اثر ترمیم بر روی غشای سلولی می‌تواند مواد فعال عصاره آبی G. lucidum را وادار به ورود به سیتوپلاسم کند و از ساختار غشایی هسته و میتوکندری محافظت کند تا متابولیسم T. thermophila را تقویت کند و اثرات ضد پیری را به دست آورد. همانطور که نتایج غنی سازی lKEGG نشان می دهد، تعداد زیادی از ژن های دیفرانسیل در مسیرهای متابولیک متمرکز شده اند. این نتایج نشان داد که عصاره آبی G. lucidum برای متابولیسم گلوتاتیون و حذف پراکسیدهای سمی تولید شده توسط پیری سلول مفید است.

به طور کلی، عصاره آبی G. lucidum بیان آنزیم وابسته به سلنیوم PHGPx را در خانواده GPX ترویج کرد. افزایش فعالیت PHGPx نه تنها می تواند پاسخ استرس اکسیداتیو را در داخل بدن کاهش دهد، بلکه به طور خاص و موثر رسوب چربی غشای بیولوژیکی را کاهش داده و یکپارچگی غشاء را حفظ می کند (شکل 7). در نتیجه، مواد فعال در عصاره آبی G. lucidum از طریق غشای دست نخورده وارد سلول ها شده و متابولیسم آنها را ارتقا می دهد. این یک چرخه با فضیلت برای دستیابی به اثر ضد پیری ایجاد کرد.

این مقاله از Scientifc Reports|استخراج شده است (2022) 12:3139|https://doi.org/10.1038/s{5}}z