مطالعه عصاره سیستانش کویر تنظیم کننده M2 مانند پلاریزاسیون ماکروفاژها برای کاهش مهاجرت سلولی و تشکیل کلونی در سرطان پستان

چکیده: هدف بررسی مکانیسم تنظیمی عصاره اتانولی Cistanche deserticola epimedium brevican بر پلاریزاسیون ماکروفاژها در شرایط آزمایشگاهی و تأثیر آن بر M{0}}مانند ماکروفاژهایی که مهاجرت سلولی 4T1 و تشکیل کلنی را تحریک می‌کنند. روش‌ها از روش CCK{3}} برای تشخیص اثر غلظت‌های مختلف عصاره اتانولی گیاه Cistanche deserticola deserticola بر فعالیت ماکروفاژهای مشتق از مغز استخوان (BMDM) و تعیین غلظت بی‌خطر عصاره اتانولی Cistanche deserticola deserticola deserticola استفاده شد. وسترن بلات و qRT PCR برای تشخیص اثر عصاره اتانولی گیاه سیستانچ دسرتیکولا دسرتیکولا بر بیان آرژیناز (Arg{5}}) و CD163، نشانگرهای ماکروفاژهای مانند M2 استفاده شد. QRT PCR برای تشخیص اثر عصاره الکلی گیاه Cistanche deserticola deserticola بر روی ناحیه التهابی 1 (Fizz1) و گیرنده فعال تکثیرکننده پراکسی زوم (PPAR) ژن های مرتبط با ماکروفاژ M2 (TAMs) (گیرنده فعال شده با پراکسی زوم-پرولیفراتور، PPAR) استفاده شد. ）، اثرات کیتیناز 3-مانند 3 (Ym1)، کموکین 24 (CCL24)، ماکروفاژ گالاکتوز نوع C لکتین 2 (MGL2) و بیان mRNA ژن تنظیم کننده فاکتور 4 اینترفرون (IRF4)؛ اثر عصاره اتانولی Cistanche deserticola deserticola بر روی M2 TAMهای تحریک کننده مهاجرت سلولی 4T1 با آزمایش خراش شناسایی شد؛ اثر عصاره اتانولی گیاه Cistanche deserticola deserticola بر رشد سلول های 4T1 تحریک شده توسط M2 TAM با آزمایش کلنی تشخیص داده شد.نتایج نشان داد که عصاره اتانولی این گیاه اپیمدیوم در غلظت‌های 0.{31}} تا 2.{33}} میلی‌گرم در میلی‌لیتر، هیچ عارضه‌ای سمی یا جانبی بر روی سلول‌های BMDM نداشت؛ عصاره اتانولی Cistanche deserticola به طور قابل‌توجهی ژن‌های مرتبط با M2 TAMs Arg را مهار می‌کند. 36}}، CD163، Fizz1، PPAR، بیان CCL24، Ym1، MGL2، و IRF4 (P<0.05, 0.01, 0.001) inhibited the migration and colony formation ability of M2-TAMs in 4T1 cells (P<0.05, 0.001). Conclusion The ethanol extract of Cistanche deserticola can weaken the promotion of M2-like macrophages on 4T1 Cell migration and colony formation, and its mechanism may be related to the inhibition of M2-type polarization of macrophages.

کلید واژه ها: Cistanche deserticola; ماکروفاژها؛ قطبش M2; سرطان پستان؛ مهاجرت؛ تشکیل کلنی؛ بنزوئین اسید؛ مخروطی آلدهید؛ امودین; اسید وانیلیک

اثرات سیستانش-ضد تومور

سرطان سینه اصلی ترین تومور بدخیم است که سلامت زنان را به خطر می اندازد و همچنین دومین عامل مرگ ناشی از سرطان در جهان است [1-2]. در مرحله آخر سرطان سینه، متاستاز ریه و کبد وجود دارد. هنگامی که متاستاز اندام رخ می دهد، میزان بقا و کیفیت زندگی بیماران به شدت کاهش می یابد [3]. درمان خط اول سرطان سینه عمدتاً به شیمی درمانی آنتراسایکلین، پاکلیتاکسل و سایر داروهای سیتوتوکسیک متکی است، اما مقاومت دارویی اغلب در طول درمان رخ می دهد. بنابراین، بررسی مکانیسم پاتولوژیک سرطان پستان و یافتن روش‌های درمانی مؤثر بسیار مهم است. ماکروفاژها برای بروز و توسعه تومورهای مختلف [4-5] حیاتی هستند و نشانگرهای زیستی ماکروفاژها می‌توانند به عنوان شاخص‌های پیش آگهی عمل کنند. میزان بالای نفوذ ماکروفاژها با پیش آگهی بد سرطان پستان مرتبط است. ماکروفاژهای مرتبط با تومور (TAMs) معمولی ترین نوع سلول های ایمنی نفوذ کننده تومور هستند. آنها از سرطان اولیه سرطان پستان تا پیشرفت، به ویژه متاستاز، نقش مهمی دارند [6]. TAM ها در متاستاز، رگزایی، بازسازی ماتریکس، تهاجم و سرکوب سیستم ایمنی سرطان پستان نقش دارند. طب سنتی چینی نقش مهمی در کل دوره درمان سرطان سینه ایفا می کند. طب سنتی چینی دارای ویژگی های اجزاء، مسیرها و اهداف متعددی است که می تواند میزان عود و متاستاز بیماران تومور را کاهش دهد، کیفیت زندگی آنها را بهبود بخشد و زمان بقای آنها را طولانی تر کند. Cistanche deserticola deserticornu Maxim. گیاهی است بربریداسه از Ranunculales. مزه آن شیرین و شیرین و طبع گرم است و دو مجرای کبد و کلیه را دنبال می کند. اثرات تقویت عضلات و استخوان ها، تقویت یانگ کلیه، محافظت از سیستم قلبی عروقی [7]، تقویت استخوان سازی [8]، تنظیم ظرفیت ایمنی [9] و مهار سرطان [10] را دارد. تحقیقات نشان می‌دهد که عصاره الکلی Cistanche deserticola می‌تواند از تکثیر سلول‌های سرطان سینه جلوگیری کند [11]، اما تحقیقی در مورد اینکه چگونه عصاره الکلی Epimedium بر ریزمحیط ایمنی تومور سرطان پستان تأثیر می‌گذارد گزارش نشده است. بنابراین، این مطالعه در نظر دارد تا تأثیر عصاره الکلی Cistanche deserticola deserticola بر روی ماکروفاژهای M{12} و تنظیم آن بر مهاجرت سلولی و تشکیل کلونی سرطان پستان 4T1 را بررسی کند تا مبنای تجربی و راهنمایی های نظری برای پیگیری ارائه دهد. کاربرد بالینی اپیمدیوم

فواید سلامت پودر سیستانچ - ضد تومور

برای مشاهده محصولات سیستانچی اینجا کلیک کنید

【بیشتر بخواهید】 ایمیل:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1. مواد

1.1 حیوان و سلول

موش ماده با درجه SPF C57BL/6، 8 هفته، خریداری شده از شرکت بیوتکنولوژی Sibeifu (Beijing) با شماره گواهی حیوانی 110324210105240115. موش ها در مرکز آزمایشی حیوانات مرکز پزشکی پنجم بیمارستان عمومی پرورش داده شدند. ارتش آزادیبخش خلق در طول کل دوره آزمایشی، به موش‌ها غذا و آب رایگان داده شد و چرخه‌ای 12-ساعت نور/12-ساعت تاریکی به آنها داده شد. آزمایشات روی حیوانات بر اساس دستورالعمل مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشی انجام شد و مورد تایید مرکز پزشکی پنجم بیمارستان عمومی ارتش آزادیبخش خلق قرار گرفت. شماره تاییدیه اخلاقی برای آزمایشات حیوانی IACUC-2021-0007 است. سلول های 4T1 از شرکت بیوتکنولوژی شانگهای فوهنگ خریداری شد.

مطالعه تجربی روی گیاه سیستانچ کویر

1.2 دارو

Cistanche deserticola توسط محقق Xiao Xiaohe به عنوان Epimedium E.، گیاهی از برگ‌های خشک Berberidaceae از Brevicornum Maxim شناسایی شد. برگ های سیستانش دسرتیکولا دسرتیکولا را بردارید، خرد کنید و از الک شماره 4 رد کنید، دقیقا وزن کنید، اتانول رقیق اضافه کنید، عملیات اولتراسونیک (قدرت 400 وات فرکانس 50 کیلوهرتز) را به مدت 1 ساعت انجام دهید، سرد کنید، دوباره وزن کنید. برای جبران وزن از دست رفته از اتانول رقیق استفاده کنید، آنها را تکان دهید، فیلتر کنید، ادامه فیلتر را بگیرید، منجمد و خشک کنید تا عصاره سیستانش دسرتیکولا دسرتیکولا بدست آید. 1.3 آنتی بادی داروها و معرف‌های آرژیناز (Arg-1) (شماره دسته: 93668) از شرکت CST ایالات متحده خریداری شد. - آنتی بادی اکتین (بچ شماره 20536 1-AP) از شرکت Protentech خریداری شد. آنتی بادی ثانویه IgG ضد خرگوش بز با برچسب HRP (شماره دسته J111-035-003) از جکسون ایمونو ریسرچ خریداری شد. معرف تریزول (بچ شماره BSC51M1) از شرکت Biolux خریداری شد. معرف CCK{15}} (شماره دسته ای KTA1020-1000T) از شرکت ابکین خریداری شد. فاکتور اینترلوکین 4 (IL-4) (شماره دسته 96-214-14-20) از Peprotech خریداری شد.

1.4 ابزار

QB{0}} ابزار ورق لرزه ای (شرکت Haimen Qilin Bell); سنجش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم Epoch و آنالایزر غلظت اسید نوکلئیک P100 (شرکت Bio Tek، ایالات متحده). Quantstudio 6 دستگاه PCR کمی فلورسانس فلکس (Thermo Fisher Scientific, USA); سانتریفیوژ نخل MINI6K (شرکت هانگژو آوشنگ); ویبراتور Vortex-Genie 2 (صنایع علمی، ایالات متحده آمریکا).

2 روش

2.1 تجزیه و تحلیل اجزای عصاره الکلی گیاه سیستانچ دسرتیکولا

2.1.1 نمونهآماده سازی متانول را به عصاره الکلی Cistanche deserticola اضافه کنید تا سوسپانسیون 5 میلی گرم در میلی لیتر تهیه شود، آن را با سونوگرافی به مدت 40 دقیقه استخراج کنید، 1 میلی لیتر بردارید و به مدت 10 دقیقه با سرعت 12 000 r/min سانتریفیوژ کنید. پس از سانتریفیوژ، مایع رویی را بگیرید، غشای فیلتر 0.22 میکرومولار را عبور دهید، نمونه را در UPLC-MS/MS قرار دهید. اجزای Cistanche deserticola از طریق پایگاه داده فارماکولوژی سیستم های طب سنتی چینی و پلت فرم تجزیه و تحلیل (TCMSP) جمع آوری شد. نتایج MS با استفاده از پلتفرم داده‌های Progression QI (بر اساس پایگاه‌های داده NPATLAS و GNPS) تجزیه و تحلیل شد و نتایج با بازیابی مؤلفه Cistanche deserticola برای تجزیه و تحلیل مؤلفه‌های غیرهدف مقایسه شد.

2.1.2 شرایط کروماتوگرافی:

ستون کروماتوگرافی UPLC BEH C18 (100 میلی‌متر × 2.1 میلی‌متر، 1.7 میکرومتر)، فاز متحرک آب مقطر دوبل (A) - استونیتریل (B)، شستشوی گرادیان: 0-3 دقیقه، 5 درصد B; 3 تا 35 دقیقه، 5 درصد تا 95 درصد B; 35-42 دقیقه، 95 درصد -5 درصد B. سرعت جریان حجمی 0.3 میلی لیتر در دقیقه است. حجم تزریق 5 میکرولیتر است. دمای جعبه دمای ستون 40 درجه است. 2.1.3 شرایط طیف سنجی جرمی: منبع یون الکترواسپری (ESI) برای تشخیص در حالت یون مثبت استفاده می شود و دمای مویرگی 275 درجه است. نرخ جریان حجمی گاز غلاف 20 Arb; نرخ جریان حجمی گاز کمکی 5 Arb; ولتاژ منبع یون 5 کیلو ولت است. 2.2 کشت سلولی ماکروفاژهای مشتق از مغز استخوان (BMDM) از مغز استخوان فمور موش ماده C57BL/6 8- هفته ای جدا شد. آنها در محیط DMEM حاوی 10 درصد سرم جنین گاو، 1 درصد پنی سیلین/استرپتومایسین و فاکتور تحریک کننده کلنی ماکروفاژ موش M-CSF (50 نانوگرم در میلی لیتر) کشت داده شدند و در انکوباتور در دمای 37 درجه و 5 درصد CO2 برای 6 قرار گرفتند. روزها.

سلول ها را با 0.25 درصد تریپسین EDTA (2:1) با سرعت 1.2 × 106/mL تراکم تلقیح در یک صفحه چاهی یک شبه تلقیح کنید. در روز دوم، پس از افزودن عصاره الکلی گیاه سیستانش دسرتیکولا به مدت 1 ساعت، سلول ها با IL{8}} (20 نانوگرم در میلی لیتر) به مدت 24 ساعت تحریک شدند.

2.3 از روش CCK{0}} برای تشخیص سمیت سلولی عصاره الکلی Cistanche deserticola deserticola به سلول های BMDM استفاده شد. سلول‌هایی با غلظت‌های مختلف جرمی (0، 0.015 625، {{1{12}}}}.031 25، 0 را درمان کنید.{{ 9}}، 0.125، 0.25، 0.5، 1، 2، 4 میلی گرم در میلی لیتر) عصاره الکلی Cistanche deserticola به مدت 24 ساعت. محیط کشت را دور بیندازید، محلول CCK{20}}(1:10) را اضافه کنید، به مدت 1 ساعت در انکوباتور انکوبه کنید، جذب (A) را در 450 نانومتر با میکروپلیت خوان اندازه گیری کنید و سمیت عصاره الکلی را تشخیص دهید. Cistanche deserticola deserticola به سلول ها.

2.4وسترن بلات برای تشخیص بیان پروتئین Arg{{0}} در سلول های BMDM استفاده شد. گروه کنترل، گروه مدل و گروه عصاره الکلی گیاه سیستانش دسرتیکولا با غلظت‌های توده‌ای مختلف (062 5، {5}}.125، 0.25 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر) تنظیم شدند. دارو طبق روش زیر "2.2" تجویز شد. سلول ها جمع آوری شد و لیز RIPA برای استخراج پروتئین اضافه شد. نمونه پروتئین تحت الکتروفورز ژل سدیم دودسیل سولفات-پلی آکریل آمید 10 درصد قرار گرفت، به غشای PVDF منتقل شد، در TBST حاوی 5 درصد شیر بدون چربی به مدت 1 ساعت مهر و موم شد، با آنتی بادی اولیه اضافه شد و یک شب در 4 درجه انکوبه شد. پس از شستشو با TBST، با آنتی بادی ثانویه جوجه کشی کنید و با استفاده از معرف تشخیص نورتابی شیمیایی تقویت شده توسعه دهید.

2.5 QRT PCR برای تشخیص فاکتور کموتاکتیک سلولی BMDM 24 (CCL24)، ناحیه التهابی 1 (Fizz1)، کیتیناز 3-مانند 3 (Ym1)، ماکروفاژ گالاکتوز نوع C لکتین 2 (MGL2) و پراکسی زوم پرولیفراتور- استفاده شد. گیرنده فعال شده (گیرنده فعال پراکسیزوم-پرولیفراتور، PPAR)، فاکتور تنظیم کننده اینترفرون 4 (IRF4)، بیان mRNA ارگ و CD163 در گروه کنترل، گروه مدل و غلظت های مختلف جرمی تنظیم شد ({17} }.062 5، 0.125، 0.25 mg/mL) عصاره الکلی Cistanche deserticola مطابق "2.2"

2.6تهیه محیط مطبوع روش مرجع [12]: BMDM طبق روش زیر "2.2" کشت داده شد. پس از چسباندن صفحه بذر سلولی، یک محیط بدون سرم حاوی عصاره الکل Cistanche deserticola ({4}}.25 میلی گرم در میلی لیتر) و IL{6}} (20 نانوگرم در میلی لیتر) اضافه شد. ) 1 ساعت بعد اضافه شد. پس از 24 ساعت، مایع رویی را به عنوان محیط آماده شده جمع آوری کنید. محیط شرطی شده با سرعت 2000 r/min سانتریفیوژ شد تا قطعات رسوب کند، آسپیره شد و در دمای 80- درجه برای آزمایش مهاجرت سلولی ذخیره شد. BMDM طبق روش "2.2" کشت شد و محیط DMEM حاوی عصاره الکلی گیاه سیستانچ دسرتیکولا (0.25 میلی گرم در میلی لیتر) پس از چسباندن صفحه بذر سلولی به دیواره و IL{16}} (20 نانوگرم) اضافه شد. /mL) یک ساعت بعد اضافه شد. پس از 24 ساعت، مایع رویی را به عنوان محیط آماده شده جمع آوری کنید. محیط تهویه شده 2000 را سانتریفیوژ کنید تا قطعات رسوب کند، مایع رویی را آسپیره کنید و آن را در درجه {20}} برای آزمایش کلنی سلولی ذخیره کنید.2.7 آزمایش مهاجرت سلولی پلاگین سوراخ برای بهبود زخم را در 12-صفحه سوراخ قرار دهید و سلول‌های 4T1 با واکسیناسیون 3.6×105/mL درمان می‌شوند. . پس از اینکه سلول ها در طول شب به دیوار چسبیدند، افزونه را بردارید و سلول های مرده شناور را با PBS بشویید. محیط بدون سرم حاوی 50 درصد محیط مطبوع را اضافه کنید. در انکوباتور به مدت 24 ساعت جوجه کشی کنید. در ساعت 0 و 24 ساعت، با میکروسکوپ معکوس عکس بگیرید، تصاویر را با Image J تجزیه و تحلیل کنید و نرخ مهاجرت سلول را محاسبه کنید. نرخ مهاجرت سلولی=(۰ ساعت ناحیه زخم -24 ساعت ناحیه زخم)/۰ ساعت منطقه زخم

2.8آزمایش کلنی سلولی 1000 4سلول‌های T1 در هر چاهک از صفحات 6 چاهی تلقیح شدند و با محیط حاوی 50 درصد محیط تهویه‌شده به مدت 8 روز انکوبه شدند. با 2 درصد پارافورمالدئید درست کنید، با 1 درصد کریستال ویولت رنگ کنید، عکس بگیرید و تصاویر را با Image J آنالیز کنید.

2.9تجزیه و تحلیل آماری با استفاده از نرم افزار GraphPad Prism 8، با داده های اندازه گیری به صورت xs ± و مقایسه بین گروهی با استفاده از ANOVA یک طرفه انجام شد.

3 نتیجه

3.1 آنالیز ترکیب عصاره الکلی گیاه سیستانش دسرتیکولا دسرتیکولا در شکل 1 و جدول 2 نشان داده شده است.

جدول 1 توالی پرایمر

شکل 1 تجزیه و تحلیل عصاره الکلی Cistanche deserticola deserticola

جدول 2 تجزیه و تحلیل اجزای عصاره الکلی Cistanche deserticola deserticola

3.2سمیت سلولی عصاره الکلی سیستانش دسرتیکولا بر روی BMDM نتایج نشان داد که 0.015 625 - 2 میلی‌گرم در میلی‌لیتر عصاره الکلی سیستانش دسرتیکولا پس از تیمار سلول‌های BMDMs با غلظت‌های مختلف عصاره الکلی سیستانش دسرتیکولا هیچ اثر سمی بر سلول‌های BMDMs نداشت. به مدت 24 ساعت (شکل 2).

شکل 2 سمیت سلولی عصاره الکلی Cistanche deserticola deserticola به BMDM (xs ±, n=3)

3.3 عصاره اتانولی Cistanche deserticola قطبش M2 ماکروفاژها را در شرایط آزمایشگاهی مهار می کند. در ماکروفاژهای BMDM M0، نشانگرهای Arg-1 و CD163 ماکروفاژهای M{{4} مانند کم بیان می‌شوند و بیان به طور قابل توجهی پس از القای IL-4 افزایش می‌یابد که نشان می‌دهد که BMDM با موفقیت به M2-مانند ماکروفاژها قطبی می شود. تکنیک‌های وسترن بلات و qRT PCR برای تأیید اینکه عصاره الکلی Cistanche deserticola می‌تواند بیان Arg-1 و CD163 ناشی از IL-4 را به صورت وابسته به دوز تعدیل کند استفاده شد (شکل 3) که نشان می‌دهد. که عصاره الکلی Cistanche deserticola می تواند مستقیماً قطبش M2 ماکروفاژها را مهار کند. برای بررسی بیشتر اثر عصاره الکلی Cistanche deserticola deserticola بر پلاریزاسیون M2 ماکروفاژها، از qRT PCR برای مطالعه ژن‌های مرتبط با ماکروفاژ مانند M2 Fizz1 و PPAR استفاده شد، سطوح رونویسی Ym1، CCL24، MGL2 و IRF4 در شکل نشان داده شده است. 4. در مقایسه با گروه مدل، سطوح بیان mRNA Fizz1، Ym1، CCL24، و IRF4 در عصاره الکلی Cistanche deserticola (0.062 5، 0.125، 0}. گروه 25/<0.05, 0.01, 0.001), and the PPAR in the alcohol extract of Cistanche deserticola (0.125, 0.25 mg/mL) group γ The mRNA expression level decreased significantly (P<0.01, 0.001), and the MGL2 mRNA expression level in the alcohol extract of Cistanche deserticola deserticola (0.25 mg/mL) group decreased significantly (P<0.001).

3.4 عصاره اتانولی Cistanche deserticola باعث تضعیف ماکروفاژهای مشابه M2- در مهاجرت سلولی 4T1 می شود. از آزمون خراش برای مشاهده اثر مایع رویی عصاره اتانولی Cistanche deserticola بر توانایی مهاجرت سلول های سرطانی پستان استفاده شد. BMDM در محیط بدون سرم حاوی IL{4}} و عصاره الکلی Cistanche deserticola deserticola به مدت 24 ساعت انکوبه شد و مایع رویی به عنوان یک محیط مطبوع جمع آوری شد. 4T1 در محیط بدون سرم حاوی 50 درصد محیط مطبوع کشت داده شد، همانطور که در شکل 5 نشان داده شده است، محیط تهویه شده جمع آوری شده توسط BMDM تیمار شده با IL{11}} به تنهایی به طور قابل توجهی مهاجرت سلول های 4T1 را افزایش داد (P<0.05), while the conditioned medium of BMDM treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the migration of 4T1 cells (P<0.05). 3.5 Cistanche deserticola alcohol extract weakens the promotion of M2-like macrophages on 4T1 cell colony formation Use colony formation experiment to evaluate the effect of Cistanche deserticola alcohol extract on M2-like macrophages promoting 4T1 cell colony formation. As shown in Figure 6, the conditioned medium treated with IL-4 significantly promoted the colony formation of 4T1 cells (P<0.05), while the conditioned medium treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the colony formation of cells (P<0.001)

4. بحث

فواید سیستانچ توبولوزا-ضد تومور

در حال حاضر، سرطان سینه هنوز یک مشکل بهداشت عمومی جهانی است. میزان بروز سرطان سینه سال به سال و در جوانی در حال افزایش است که سلامت زنان را به طور جدی تهدید می کند [13]. طب سنتی چینی معتقد است که در مراحل اولیه تومورها، به دلیل عدم توانایی بدن در دفع چی به دلیل کمبود یانگ، یین چی ناکافی است و نمی تواند تجمع طبیعی اسپرم را تشکیل دهد. با این حال، تجمع غیر طبیعی منجر به محصولات پاتولوژیک مانند کدورت خلط و استاز خون می شود که منجر به تبدیل سموم به تومور می شود [14]. Cistanche deserticola deserticola به عنوان یک داروی ضروری برای تقویت یانگ، دارای اثرات تقویت کننده انرژی حیاتی و یانگ کلیه است و می تواند ایمنی را تنظیم کند. این یک داروی چینی برای تقویت کلیه در عمل بالینی است. اکنون اغلب برای درمان سرطان سینه استفاده می شود و اغلب به عنوان یک داروی ترکیبی با فرکانس بالا استفاده می شود. یکی از ویژگی های سرطان، اختلال در عملکرد سیستم ایمنی است. سلول های ایمنی که باید با تومورها مبارزه کنند، به طور خاص توسط بافت های اطراف و ریزمحیط تومور مهار می شوند که منجر به رشد و گسترش کنترل نشده تومورها می شود [15]. شواهد بیشتر و بیشتر نشان می‌دهد که وقتی در ریزمحیط تومور وجود دارد، سلول‌های ایمنی ذاتی (ماکروفاژها، نوتروفیل‌ها، سلول‌های دندریتیک، سلول‌های لنفوئیدی ذاتی، سلول‌های بازدارنده جنسی مشتق از مغز استخوان و سلول‌های NK) و سلول‌های ایمنی سازگار (سلول‌های T و سلول‌های B) ) به پیشرفت تومور کمک می کند [16]. ماکروفاژها واسطه های ضروری هموستاز بافتی هستند و قطبش آنها به سمت ماکروفاژهای فعال جایگزین (نوع M2) می تواند تکثیر سلول های سرطانی، رگ زایی و متاستاز را افزایش دهد. بنابراین، تنظیم TAM ها و حفظ هموستاز آنها به کانون درمان تومور تبدیل شده است [17]. TAM ها در متاستاز، رگزایی، بازسازی ماتریکس، تهاجم و سرکوب سیستم ایمنی سرطان پستان نقش دارند. TAMها عمدتاً به دو فنوتیپ مختلف تقسیم می‌شوند، یعنی ماکروفاژهای فعال کلاسیک M1-مانند ماکروفاژها و M{9}}مانند ماکروفاژهای فعال جایگزین [18]. در تومورهای خوش‌خیم یا غیرعملکردی، بیشتر TAMها به‌طور کلاسیک M{11}}مانند ماکروفاژها فعال می‌شوند که فعال‌سازی اینترفرون، IFN- یا لیپوپلی‌ساکارید (LPS) هستند، بنابراین TAM‌ها را برای تولید عوامل پیش‌التهابی و فاگوسیتوز سلول‌های تومور تشویق می‌کنند. M{14}}مانند ماکروفاژها می‌توانند توسط سیتوکین‌های Th2 مانند IL{16}} فعال شوند تا تعداد زیادی از عوامل ضدالتهابی تولید کنند که مستقیماً باعث ایجاد سرطان پستان می‌شوند [19]. بنابراین، معکوس کردن یا مهار پلاریزاسیون ماکروفاژهای M{19}مانند، استراتژی ایمونوتراپی برای سرطان پستان است. ارگ{20}} نشانگر ماکروفاژهای مانند M است و بیان بیش از حد آن با پیش آگهی ضعیف در بیماران سرطانی همراه است [20].

گیاه چینی cistanche-ضد تومور

CD163 نشانگر خاصی از ماکروفاژهای M{1}مانند [21] است که با متاستاز تومور مرتبط است. CD163 پلاس TAM انتقال اپیتلیال- مزانشیمی (EMT) را القا می کند و مهاجرت سلول های سرطانی را ترویج می کند [22]. نتایج این مطالعه حاکی از آن است که عصاره Cistanche deserticola deserticola تا حدودی در تنظیم ایمنی نقش دارد و از بیان Arg{6}} و CD163، نشانگرهای سطحی M2-مانند ماکروفاژها، جلوگیری می‌کند. و مهار پلاریزاسیون نوع M2- ماکروفاژها. PPAR یک حسگر متابولیک است که هموستاز لیپید را از طریق فعال سازی اسیدهای چرب مختلف و مشتقات اسیدهای چرب (مانند اسید پالمتیک) تنظیم می کند [23]. PPAR مرتبط با پلاریزاسیون M2 ماکروفاژها، PPAR به تنظیم کننده اصلی پلاریزاسیون M2 در ماکروفاژها تبدیل شده است [24]، لیگاندهای PPAR اثرات مهاری قوی بر رشد تومور در داخل بدن دارند [25]. Fizz1 و Ym1 هر دو ژن های نشانگر ماکروفاژ M{17} هستند و Fizz1 و Ym1 در فیبروز در طول ترمیم بافت نقش دارند [26]. M2-مانند ماکروفاژها مقدار زیادی CCL24 را در شرایط آزمایشگاهی تولید می‌کنند [27] و افزایش بیان CCL24 می‌تواند باعث تکثیر، مهاجرت و تهاجم تومور شود [28]. IRF4 عضوی از خانواده IRF است. در فرآیند پلاریزاسیون M2 ماکروفاژها شرکت می کند و با ترکیب با مولکول آداپتور MyD88 به عنوان یک تنظیم کننده منفی سیگنال های گیرنده Toll مانند عمل می کند [29]. MGL2 عضوی از خانواده ماکروفاژها لکتین نوع C گالاکتوز است و همچنین در ماکروفاژهایی که تحت شرایط فعال سازی جایگزین تحریک می شوند بیان می شود [30]. نتایج این مطالعه نشان می دهد که عصاره Cistanche deserticola deserticola ژن PPAR مرتبط با ماکروفاژ M2 را مهار می کند، بیان Fizz1، Ym1، CCL24، IRF4 و MGL2 قطبش نوع M2 ماکروفاژها را مهار می کند، که نشان می دهد اپیمدیوم می تواند به عنوان یک موثر عمل کند. مهارکننده M2 مانند ماکروفاژها. شواهد بیشتر و بیشتر نشان می‌دهد که ماکروفاژها مانند M{41}می‌توانند متاستاز و رشد سرطان را افزایش دهند [31]. محیط‌های شرطی‌شده از M{43}مانند ماکروفاژها می‌توانند ریزمحیط تومور را شبیه‌سازی کنند و مهاجرت و رشد تومور را تحریک کنند، که مشابه ماکروفاژهای جدا شده از تومورهای بدخیم است [12]. IL{45}} می‌تواند پلاریزاسیون ماکروفاژها را به سمت نوع M2 ترویج کند و تکثیر تومور و رگ‌زایی را تقویت کند [18]. این مطالعه ارتباط بین پلاریزاسیون ماکروفاژها و اثر ضد توموری Cistanche deserticola deserticola را نشان داد. رسانه‌های شرطی‌شده از ماکروفاژهای فعال‌شده IL، مهاجرت و رشد سلول‌های 4T1 را تقویت کردند، و پس از مداخله مشترک با سیستانش دسرتیکولا، این اثر تحریک‌کننده تومور را معکوس کردند، که نشان می‌دهد IL{55} قطبش M2 فعال شده توسط Cistanche deserticola حذف شد.

این مطالعه ارتباط بین پلاریزاسیون ماکروفاژها و اثر ضد توموری Cistanche deserticola deserticola را نشان داد. رسانه‌های شرطی‌شده از ماکروفاژهای فعال‌شده IL، مهاجرت و رشد سلول‌های 4T1 را تقویت کردند، و پس از مداخله مشترک با سیستانش دسرتیکولا، این اثر تحریک‌کننده تومور M2-فعال‌شده را معکوس کردند، که نشان می‌دهد IL{{7} قطبش M2 فعال شده توسط Epimedium حذف شد. این مطالعه نشان داد که عصاره گیاه Cistanche deserticola با تنظیم پلاریزاسیون ماکروفاژها در شرایط آزمایشگاهی از مهاجرت سلولی و تشکیل کلنی سرطان پستان جلوگیری می کند، که نشان می دهد درمان سرطان سیستان با Cistanche deserticola ممکن است با تنظیم ریزمحیط تومور مرتبط باشد و Epimedium ممکن است به عنوان عمل کند. یک تنظیم کننده ریزمحیط تومور در محل متاستاز با تأثیرگذاری بر ماکروفاژها، که بینش مکانیزم جدیدی را برای عملکرد ضد تومور Cistanche deserticola ارائه می دهد، مکانیسم بالقوه جدید Cistanche deserticola را برای درمان سرطان نشان می دهد، که ممکن است به کاهش میزان بروز کمک کند. سرطان و مرگ و میر ناشی از سرطان در آینده، تیم تحقیقاتی به بررسی بیشتر اثر Cistanche deserticola بر رشد و متاستاز سرطان سینه پس از مهار پلاریزاسیون M2 ماکروفاژها در داخل بدن می پردازد تا مکانیسم ضد توموری Cistanche deserticola را بیشتر توضیح دهد و مبنایی را برای کاربرد بالینی فراهم کند. Cistanche deserticola در درمان بیماری های تومور.

منابع

منابع

[1] همکاران عوامل خطر سرطان GBD 2019. بار جهانی سرطان قابل انتساب به عوامل خطر، 2010-19: تجزیه و تحلیل سیستماتیک برای مطالعه بار جهانی بیماری 2019 [J]. Lancet، 2022، 400(10352): 563-591.

[2] Yin L، Duan JJ، Bian XW، و همکاران. زیرتایپ مولکولی سرطان سینه سه گانه منفی و پیشرفت درمان [J]. سرطان سینه، 2020، 22 (1): 61.

[3] Medeiros B، Allan A L. مکانیسم‌های مولکولی متاستاز سرطان پستان به ریه: دیدگاه‌های بالینی و تجربی [J]. Int J Mol Sci، 2019، 20(9): 2272.

[4] Pathria P، Louis TL، Varner J A. هدف قرار دادن ماکروفاژهای مرتبط با تومور در سرطان [J]. Trends Immunol، 2019، 40(4): 310-327.

[5] Shen MJ، Chen YB، Xu LJ، و همکاران. افزایش نفوذ ماکروفاژها به سلول‌های سرطان ریه مقاوم در برابر پرتو، به ایجاد مقاومت اضافی سلول‌های تومور در برابر اثرات سیتوتوکسیک سلول‌های NK کمک می‌کند [J]. Int J Oncol، 2018، 53(1): 317-328.

[6] Tariq M، Zhang JQ، Liang GK، و همکاران. پلاریزاسیون ماکروفاژها: استراتژی های ضد سرطانی برای هدف قرار دادن ماکروفاژهای مرتبط با تومور در سرطان پستان [J]. J Cell Biochem، 2017، 118(9): 2484-2501.

[7] اثرات Ma Li گلیکوزید Cistanche deserticola بر فاکتور مشتق از سلول های استرومایی (SDF-1) و گیرنده آن CXCR-4 در موش های صحرایی مبتلا به انفارکتوس حاد شریان مغزی میانی [D] Nanjing : دانشگاه پزشکی چینی نانجینگ، 2014

[8] Hao Fuliang اثر و مکانیسم گلیکوزید Cistanche deserticola در ترمیم و بهبود نقایص جمجمه خرگوش [D] Shijiazhuang: دانشگاه پزشکی هبی، 2013

[9] He J، Zang SL، Liu N، و همکاران. پلی ساکاریدهای اپیمدیوم با کاهش استرس اکسیداتیو و افزایش عملکرد ایمنی در مدل موش های نارسایی مغز استخوان ناشی از بنزن [J]، سمیت خونی را کاهش می دهند. Biomed Pharmacother، 2020، 125: 109908.

[10] Hua Ciyi, Shi Youyang, Xie Ying, et al پیشرفت تحقیق در مورد مکانیسم Cistanche deserticola Active ingredient در درمان سرطان پستان [J] China Herbal Medicine, 2022, 53 (20): 6593-6600

[11] Chen Xiaolei, Tang Lijian, Li Qinglin Study on the anti-proliferation of سرطان پستان توسط Cistanche deserticola and frazil عصاره in vitro [J] China Pharmacy, 2007, 18 (15): 1124-1127

[12] Xu F، Cui WQ، Wei Y، و همکاران. Astragaloside IV با تعدیل پلاریزاسیون ماکروفاژها از طریق سیگنال دهی AMPK [J] از پیشرفت سرطان ریه و متاستاز جلوگیری می کند. J Exp Clin Cancer Res, 2018, 37(1): 207.

[13] Britt KL، Cuzick J، Phillips K A. مراحل کلیدی برای پیشگیری موثر از سرطان پستان [J]. Nat Rev Cancer، 2020، 20(8): 417-436.

[14] Hao Feifei، Tian Sisheng Exploration of the "Yang Dominating Yin Following" در متاستاز تومور بدخیم بر اساس نظریه گازی شدن [J] Shi Zhen Guoyi Guoyao، 2021، 32 (1): 164-166

[15] Denk D، Petrocelli V، Conche C، و همکاران. گسترش سلول های بنیادی حافظه T با ایمنی ضد تومور برتر توسط میتوفاژی ناشی از urolithin A [J]. مصونیت، 2022، 55(11): 2059-2073.

[16] Hinshaw DC، Shevde L A. ریزمحیط تومور به طور ذاتی پیشرفت سرطان را تعدیل می کند [J]. Cancer Res, 2019, 79(18): 4557-4566.

[17] DeNardo DG، Ruffell B. ماکروفاژها به عنوان تنظیم کننده ایمنی تومور و ایمونوتراپی [J]. Nat Rev Immunol، 2019، 19(6): 369-382.

[18] Dong R، Gong YL، Meng W، و همکاران. دخالت مهار پلاریزاسیون ماکروفاژ M2 در اثرات شیمیایی پیشگیرانه با واسطه فنرتینید بر سرطان روده بزرگ [J]. Cancer Lett، 2017، 388: 43-53. [19] Jiménez-Garcia L, Herránz S, Luque A, et al. نقش حیاتی MAPK p38 در فعال‌سازی جایگزین ماکروفاژهای صفاقی [J] IL{8}}. Eur J Immunol، 2015، 45(1): 273-286.

[20] Ma ZG، Lian J، Yang M، و همکاران. بیان بیش از حد آرژیناز{1}} شاخصی از پیش آگهی ضعیف در بیماران مبتلا به سرطان کولورکتال است [J]. Pathol Res Pract، 2019، 215(6): 152383.

[21] تائو اس اف، چن کیو، لین سی، و همکاران. Linc00514 متاستاز سرطان سینه و پلاریزاسیون M2 ماکروفاژهای مرتبط با تومور را از طریق مسیر سیگنالینگ Notch با واسطه ناهموار1-[J] ترویج می‌کند. J Exp Clin Cancer Res، 2020، 39 (1): 191.

[22] وی سی، یانگ سی جی، وانگ سی، و همکاران. برای متاستاز سرطان کولورکتال با واسطه سلول های تومور در گردش مزانشیمی، ارتباط متقابل بین سلول های سرطانی و ماکروفاژهای مرتبط با تومور مورد نیاز است [J]. سرطان مول، 2019، 18 (1): 64.

[23] Francque S, Szabo G, Abdelmalek MF, et al. استئاتوهپاتیت غیر الکلی: نقش گیرنده های فعال شده توسط پراکسی زوم [J]. Nat Rev Gastroenterol Hepatol، 2021، 18(1): 24-39.

[24] Tian Y، Yang CM، Yao QY، و همکاران. پروسیانیدین B2 PPAR را برای القای پلاریزاسیون M2 در ماکروفاژهای موش فعال می کند [J]. Front Immunol، 2019، 10: 1895.

[25] Takada I، Makishima M. آگونیست‌ها و آنتاگونیست‌های گیرنده فعال‌شده با تکثیر پراکسی‌زوم: بررسی ثبت اختراع (2014- موجود) [J]. Expert Opin Ther Pat, 2020, 30(1): 1-13.

[26] Okuzumi S، Miyata J، Kabata H، و همکاران. آگونیست TLR7 از طریق ماکروفاژهای بینابینی [J] تولید کننده IL{4} التهاب ناشی از سلول لنفوئیدی ذاتی گروه 2 را سرکوب می کند. Am J Respir Cell Mol Biol، 2021، 65(3): 309-318.

[27] Makita N، Hizukuri Y، Yamashiro K، و همکاران. IL{1}} فنوتیپ ماکروفاژهای M2 القا شده توسط IL-4 را افزایش می‌دهد و توانایی افزایش مهاجرت ائوزینوفیل [J] را می‌دهد. Int Immunol، 2015، 27(3): 131-141.

[28] جین ال، لیو دبلیو آر، تیان ام ایکس، و همکاران. CCL24 از طریق مسیر رگزایی RhoB-VEGFA-VEGFR2 به بدخیمی HCC کمک می کند و نشان دهنده پیش آگهی ضعیف است [J]. Oncotarget، 2017، 8(3): 5135-5148.

[29] Satoh T، Takeuchi O، Vandenbon A، و همکاران. محور Jmjd3-Irf4 پلاریزاسیون ماکروفاژ M2 و پاسخ میزبان را در برابر عفونت کرم [J] تنظیم می‌کند. Nat Immunol، 2010، 11(10): 936-944.

[30] Raes G، Brys L، Dahal BK، و همکاران. لکتین‌های گالاکتوز ماکروفاژ نوع C به عنوان نشانگرهای جدید برای ماکروفاژهای فعال شده جایگزین ناشی از عفونت‌های انگلی و التهاب آلرژیک راه هوایی [J]. J Leukoc Biol، 2005، 77(3): 321-327.

[31] Mantovani A, Allavena P, Sica A, et al. التهاب مرتبط با سرطان [J]. طبیعت، 2008، 454(7203): 436-444.