مخاطب:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساپ: 008618081934791

نوع ژن MicroRNA-499a (rs3746444A/G) و حساسیت به بیماری کلیوی مرحله نهایی مرتبط با دیابت نوع 2

MANAL S. FAWZY، و همکاران

خلاصه

نفروپاتی دیابتی (DN) یک عامل خطر اصلی برای مرحله پایانی استکلیهمرض(ESRD). MicroRNA ها (miRNAs/miRs) و انواع آنها ممکن است در سلامت و بیماری، از جمله DN دخیل باشند. مطالعه حاضر با هدف بررسی ارتباط ژن miRNA-499a (MIR499A) نوع ناحیه دانه A/G (rs3746444) با ESRD مرتبط با DN انجام شد.(مرحله پایانیکلیهمرض)حساسیت در بیماران مبتلا به دیابت و تعیین اینکه آیا ارتباطی بین ژنوتیپ های مختلف و داده های آزمایشگاهی و بالینی بیماران وجود دارد یا خیر. یک مطالعه آزمایشی مورد شاهدی بر روی 180 بیمار بزرگسال مبتلا به دیابت نوع 2 انجام شد. در مجموع 90 بیمار مبتلا به ESRD (مرحله پایانیکلیهمرض)تحت همودیالیز منظم به عنوان موارد در نظر گرفته شد و 90 بیمار دیابتی همسان با سن، جنس و قومیت با نورموآلبومینوری به عنوان گروه شاهد در نظر گرفته شدند. ژنوتیپ MIR499A با استفاده از سنجش تمایز آللی TaqMan Real-Time انجام شد. نتایج نشان داد که نوع MIR499A rs3746444*G حساسیت به ایجاد ESRD را تحت هم غالب [(نسبت شانس (فاصله اطمینان 95 درصد): 2.49 (1.41-3.89) و 2.41 (1.68 اینچ) همسان، و 6.61 گرم همسان، و 6.61 گرم همسان می دهد. به ترتیب]، مدل‌های غالب [2.30 (1.18-3.90)] و آللی [1.82 (1.17-2.83)]. ژنوتیپ‌های مختلف واریانت مشخص شده ارتباط معنی‌داری با داده‌های کلینیکی-آزمایشگاهی بیماران مورد مطالعه یا miR در گردش نشان ندادند. سطوح پلاسمایی 499a. در نتیجه، نتایج مطالعه حاضر نشان داد که MIR499A rs3746444 ممکن است یک نوع حساسیت برای ESRD مرتبط با DN در جمعیت مورد مطالعه باشد. با این حال، مطالعات حجم نمونه بزرگتر با قومیت های مختلف برای تأیید این یافته ها ضروری است.

سیستانچ می تواند درمان کندکلیهمرض

مقدمه

مرحله پایانی مرتبط با نفروپاتی دیابتی (DN).کلیهمرض(ESRD) یک نگرانی رو به رشد بهداشت عمومی در سراسر جهان است (1). در طول سه دهه گذشته، ESRD مرتبط با DN(مرحله پایانیکلیهمرض) has been identified as a major cause for dialysis in several countries, including Saudi Arabia, in which type 2 diabetes mellitus (T2DM) accounts for >33 درصد از کل موارد ESRD (1،2). چندین مطالعه امیدوارکننده ژن‌های مرتبط با وقوع و پیشرفت DN را شناسایی کرده‌اند، از جمله ژن‌های مرتبط با microRNAs (miRNAs/miRs) (3،4). این خانواده از RNAهای غیر کدکننده بسیار حفاظت شده، مختص بافت و طول کوتاه هستند (20-24 نوکلئوتید). miRNA ها نقش کلیدی در بسیاری از شرایط فیزیولوژیکی و پاتولوژیک در اندام های انسان، از جملهکلیه ها. به عنوان مثال، تنظیم مثبت miR-192، miR-194، miR-204، miR-215، و miR-216، و تنظیم پایین miR-133a، miR-133b، miR-1d، miR-R-296، miaR. ‑122 و miR-124a در انسان مشاهده شده استکلیه ها(5). همچنین، miR-192 در قشر مغز 20 برابر بیشتر گزارش شده است.کلیهبافت در مقایسه با مدولاریکلیهبافتی که در تنظیم انتقال سدیم نقش دارد. علاوه بر این، miR-155 می تواند بیان گیرنده آنژیوتانسین II نوع 1 را سرکوب کند که می تواند بر فشار خون تأثیر بگذارد (5،6). با اتصال به اهداف mRNA، miRNA ها توانایی ایجاد سرکوب ترجمه، بی ثباتی mRNA و/یا تخریب را دارند (7). ترمودینامیک برهمکنش‌های هدف miRNA-mRNA ممکن است تحت تأثیر پلی‌مورفیسم‌های تک نوکلئوتیدی (SNP) باشد که در miRNA پیش‌ساز (pre-miRNAs) رخ می‌دهد که منجر به اختلال در تنظیم ژن هدف و متعاقباً تغییرات فنوتیپ یا حساسیت به بیماری می‌شود (8). ژن miRNA-499a (MIR499A) در ژن عضله قلبی 7B زنجیره سنگین میوزین انسانی در کروموزوم 20q11 قرار دارد.{11}-34990497 ( پلاس ) و از یک اگزون منفرد تشکیل شده است که برای یک رونوشت منفرد (MI) کد می‌کند (MI)3318300. طول آن 122 جفت باز است و به عنوان نشانگر آسیب قلبی گزارش شده است (9). اگرچه تعداد مطالعات متمرکز بر نقش دقیق miR-499a در پاتوژنز و توسعه ESRD به دلیل DN محدود است، miR-499a برای تأثیرگذاری بر چندین فرآیند بیولوژیکی مانند پیری سلولی، التهاب، آپوپتوز و ایمنی پیشنهاد شده است. پاسخ (10)، که ممکن است در ESRDbiogenesis نقش داشته باشد (جدول SI) (11-14). علاوه بر این، قبلاً گزارش شده بود که تنظیم مثبت miR-499a ممکن است مقاومت به انسولین، گلیکوژنز و تعدیل سیگنال دهی انسولین را با مهار فسفاتاز و همولوگ تنسین تنظیم کند (15).

یک نوع رایج (rs3746444) که در ناحیه بذر miR-499a-3p AC(A/G)UCAC در موقعیت 20:34,990,448 (GRCh38) قرار دارد، گزارش شده است که با چندین بیماری به ویژه در خاورمیانه مرتبط است. جمعیت، مانند بیماری های قلبی عروقی (9)، بیماری های خود ایمنی (16) و سرطان (17). در مطالعه قبلی ما، اختلال قابل توجهی در سطح miR-499a در گردش در ESRD فعلی مرتبط با DM شناسایی شد.(مرحله پایانیکلیهمرض)گروه (18). بنابراین، مطالعه حاضر با هدف بررسی ارتباط نوع منطقه بذر MIR499A(A/G) (rs3746444) با حساسیت ESRD مرتبط با DN در بیماران مبتلا به دیابت T2 و تعیین اینکه آیا ارتباطی بین ژنوتیپ‌های مختلف و بیماران وجود دارد یا خیر. داده های کلینیک-آزمایشگاه تا جایی که ما می دانیم، این اولین مطالعه ای است که ارتباط بالقوه نوع مشخص شده با حساسیت ESRD را در یک نمونه بیمار خاورمیانه بررسی می کند.

مواد و روش ها

جمعیت مورد مطالعه

در مجموع 90 بیمار متوالی با ESRD مرتبط با دیابت T2(مرحله پایانیکلیهمرض)تحت همودیالیز منظم (سه بار در هفته) به عنوان گروه بیماران مطالعه حاضر انتخاب شدند. بیماران برای دیالیز کلیه در بیمارستان مرکزی عرار (عرار، عربستان سعودی) به مرکز نفرولوژی محمد بن سعود الکبیر مراجعه می کردند. معیارهای ورود/خروج برای انتخاب گروه بیماران ESRD در کار قبلی ما روی همان ESRD به تفصیل شرح داده شده است.(مرحله پایانیکلیهمرض)گروه بیماران (18). بیمارانی که با هر گونه بیماری مزمن، اختلالات خود ایمنی، سرطان وکلیهمرضغیر از نفروپاتی مرتبط با DM (تشخیص داده شده توسط بیوپسی کلیه طبق پروتکل های استاندارد محلی اتخاذ شده از استانداردهای بین المللی برای تشخیص افراد غیر دیابتیکلیهمرض) (19) مستثنی شدند. از آنجایی که احتمال زیادی وجود دارد که در نهایت، بخش قابل توجهی از بیمارانی که دیابت زودهنگام تشخیص داده می شوند، به ESRD مبتلا شوند.(مرحله پایانیکلیهمرض)بیماران مبتلا به T2DM با مدت زمان مشابه دیابت و نورموآلبومینوری (نسبت آلبومین به کراتینین ادرار،<30 µg/mg)="" (20,21)="" were="" considered="" as="" the="" control="" group.="" all="" biomedical="" research="" involving="" human="" participants="" conformed="" to="" the="" guidelines="" of="" the="" helsinki="" declaration.="" the="" protocol="" of="" the="" present="" study="" was="" approved="" by="" the="" research="" ethics="" committees="" of="" northern="" border="" university="" (approval="" no.="" 6/340/h),="" and="" written="" informed="" consent="" was="" obtained="" from="" all="">

سیستانچ می تواند درمان کندکلیهمرض

تجزیه و تحلیل آزمایشگاهی.

نمونه های وریدی ناشتا قبل از دومین جلسه دیالیز مشخص شده برای بیماران مبتلا به ESRD بر روی لوله های خلاء اسید ساده و اتیلن دی آمین تترا استیک جمع آوری شد.(مرحله پایانیکلیهمرض). سرم با سانتریفیوژ به مدت 12 دقیقه در 1300 xg در دمای اتاق، بلافاصله از لوله قبلی برای تجزیه و تحلیل بیوشیمیایی با استفاده از کیت های تجاری موجود برای گلوکز جدا شد.کلیهتست‌های عملکردی [creati-nine (شماره Cat. 4810716190) و اوره (cat. No. 4460715190)] و پروفایل لیپیدی [کلسترول کل (گروه شماره 3039773190)، تری‌اسیل-گلیسرول (cat.372702) c (شماره گربه 7528566190) و LDL-c (شماره کاتالوگ 7005717190)] روی یک آنالایزر بیوشیمیایی Cobas Integra (همه Roche Diagnostics GmbH).

ژنوتیپ برای MIR499A (rs3746444). DNA ژنومی از خون کامل با استفاده از کیت Wizard Genomic DNA Purification (شماره Cat. A1120؛ Promega Corporation) طبق پروتکل سازنده استخراج شد و سپس غلظت و خلوص DNA با استفاده از اسپکتروفتومتر NanoDrop ND-1000 (NanoDrop Technologies؛ Thermo Fisher) ارزیابی شد. Science, Inc.) و ژل آگارز (2 درصد) الکتروفورز برای ارزیابی یکپارچگی DNA. نمونه‌ها متعاقباً تا زمان تعیین ژنوتیپ در دمای 20- درجه سانتیگراد نگهداری شدند. یک سنجش چندشکلی MIR499A (rs3746444، شناسه سنجش: C{8}}) ​​با استفاده از PCR بلادرنگ تشخیص آلل TaqMan با معیارهای کیفی همانطور که قبلاً توضیح داده شد اجرا شد (16). به طور خلاصه، PCR در یک حجم واکنش 25 میکرولیتری حاوی gDNA (20 نانوگرم) رقیق شده به 11.25 میکرولیتر با آب بدون نوکلئاز، 12.5 میکرولیتر TaqMan Universal PCR Master Mix (2X) و 1.25 میکرولیتر 20 x As TaqMan SN اجرا شد. همان تامین کننده نمونه‌های بدون الگو و آنزیم بدون پلیمراز هر بار با نمونه‌های مورد مطالعه به‌عنوان کنترل منفی اجرا شد. ژنوتیپ به روشی کورکورانه نسبت به وضعیت مورد/شاهد انجام شد. تقویت PCR با استفاده از شرایط زیر بر روی یک سیستم PCR Real-Time StepOne (Applied Biosystems؛ Thermo Fisher Scientific, Inc.) انجام شد: نگهداری اولیه دو فازی (2 دقیقه در دمای 50 درجه سانتی گراد و 10 دقیقه در دمای 95 درجه سانتی گراد) و به دنبال آن یک PCR دو مرحله ای 40 سیکلی (دناتوراسیون به مدت 15 ثانیه در دمای 95 درجه سانتیگراد و بازپخت / اکستنشن به مدت 1 دقیقه در دمای 60 درجه سانتیگراد). تمایز آللی با تجزیه و تحلیل فایل‌های داده فلورسانس از هر اجرا با استفاده از نرم‌افزار فراخوانی خودکار آلل تعیین شد (SDS نسخه 1.3.1؛ Applied Biosystems؛ Thermo Fisher Scientific, Inc.؛ شکل S1). نرخ تماس کلی ژنوتیپ 100 درصد بود.

تحلیل آماری.

اندازه نمونه و محاسبات توان با استفاده از نرم افزار G power-3 (http://www.gpower.hhu.de/) نشان داد که با طرح مطالعه مشخص شده، میزان خطای مجاز، خطا=0.05، یک اثر متوسط اندازه{3}}.5، و حجم نمونه 90/گروه، ممکن است 91 درصد قدرت مطالعه را به دست آورد. توزیع داده ها و همگنی واریانس به ترتیب با آزمون Shapiro-Wilk و آزمون Levene ارزیابی شد. داده های پیوسته به عنوان میانگین ± انحراف استاندارد بیان می شوند و متغیرهای طبقه بندی به عنوان تعداد فراوانی ارائه می شوند. داده ها با استفاده از آزمون χ2 مقایسه شدند، در حالی که از آزمون t-test بدون جفت، آزمون ANOVA یک طرفه یا Kruskal-Wallis برای مقایسه متغیرهای پیوسته استفاده شد. انحراف توزیع ژنوتیپ مشاهده‌شده از تعادل هاردی-واینبرگ با استفاده از خوب بودن تناسب χ2 با استفاده از دایره‌المعارف آنلاین برای اپیدمیولوژی ژنتیک (http://www.oege.org/) تجزیه و تحلیل شد. نسبت‌های شانس تعدیل‌شده خاص ژنوتیپ (ORs) و فاصله اطمینان 95 درصد (CIs) برای مدل‌های ژنتیکی مختلف محاسبه شد. متغیرهای مورد مطالعه شامل سن، جنس، تعداد جلسات همودیالیز، وجود فشار خون بالا و طول مدت بیماری تنظیم شد. پ<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="" difference.="" spss="" version="" 23="" (ibm="" corp.)="" was="" used="" for="" the="" statistical="">

نوع MIR499A (rs3746444) در آنالیز سیلیکو.

نوع MIR499A (rs3746444) در آنالیز سیلیکو. تجزیه و تحلیل ساختاری و عملکردی ژن با استفاده از پایگاه داده Ensembl Genomic (ensembl.org) و miRBase.org انجام شد. پیش‌بینی هدف با استفاده از DIANA-micro T-CDS v5 انجام شد.{3}} (http://diana.imis.athena innovation.gr/DianaTools/index.php?r=microT_ CDS/index)، miRBase (http://www.mirbase.org/) و الگوریتم DIANA‑TarBase v7.{7}} (http://diana.imis.athena‑innovation.gr/DianaTools/index.php پایگاه داده ?r=tarbase/index); و خوشه‌بندی حاشیه‌نویسی و تجزیه و تحلیل غنی‌سازی مسیر با استفاده از miRPath نسخه 3 انجام شد.{10}} (http://www.microrna.gr/miRPathv3) و همه در مطالعات قبلی ما به طور گسترده با جزئیات شرح داده شدند (8،12). اهداف پیش‌بینی‌شده miR-499a با حضور هر دو آلل A و G با استفاده از برنامه miR2Go (http://compbio.uthsc.edu/miR2GO) در سطح فیلتر سلسله مراتبی متوسط ​​مقایسه شدند (P<>

نتایج

ویژگی های جامعه مورد مطالعه.

ویژگی های پایه افراد مورد مطالعه در جدول I خلاصه شده است. میانگین سنی بیماران مبتلا به ESRD(مرحله پایانیکلیهمرض)برای مردان 12.3±46.6 سال و برای زنان 47.{5}}±14.7 سال بود. میانگین مدت زمان دیالیز برای هر دو جنس در شرکت کنندگان در مطالعه قابل مقایسه بود. هیچ تفاوتی از نظر جنسیت در ویژگی‌های بالینی و بیوشیمیایی شرکت‌کنندگان وجود نداشت، به جز موارد مرتبط با پارامترهای پروفایل لیپیدی، که در بیماران زن در مقایسه با مردان بدتر بود (جدول I).

نوع MIR499A (rs3746444) در جمعیت مورد مطالعه.

در جمعیت مورد مطالعه، فراوانی ژنوتیپ MIR499A (rs3746444) SNP از تعادل هاردی واینبرگ پیروی کرد (P{2}}.149 در گروه شاهد و P{4}}.398 در بیماران بستری). فراوانی آلل مینور برای rs3746444*G در گروه شاهد و بیماران مبتلا به ESRD 0.28 و 0.42 بود.(مرحله پایانیکلیهمرض)، به ترتیب. تفاوت معنی داری در ژنوتیپ های MIR499A بین گروه های مورد مطالعه مشاهده شد. فراوانی ژنوتیپ GG در گروه شاهد 11.1 درصد بود، در حالی که در بیماران مبتلا به ESRD 20 درصد بود.(مرحله پایانیکلیهمرض)(P{0}}.030). حمل آلل rs3746444*G باعث افزایش تقریباً 2 برابری در حساسیت به ایجاد ESRD شد.(مرحله پایانیکلیهمرض)، با OR (95 درصد CI) 1.82 (1.17-2.83) تحت مدل ارتباط ژنتیکی آللی. به طور مداوم، افراد هموزیگوت/هتروزیگوت (rs3746444*GG/AG) در مقایسه با هموزیگوت/هتروزیگوت و مدل های غالب احتمال بیشتری برای ایجاد ESRD داشتند [GG در مقابل AA: OR{8}}.41، 95 درصد فاصله اطمینان (CI): 1.66-1.68. ; AG در مقابل AA: OR{15}}.49، 95 درصد فاصله اطمینان (CI): 1.41-3.89; (AG به علاوه GG) در مقابل AA: OR=2.30، 95 درصد فاصله اطمینان (CI): 1.18-3.90; جدول II].

نوع MIR499A (rs3746444) و ویژگی های کلینیکی-آزمایشگاهی بیماران مبتلا به ESRD(مرحله پایانیکلیهمرض). هنگام بررسی ارتباط بین ژنوتیپ‌های مختلف واریانت مشخص شده و ویژگی‌های بالینی و بیوشیمیایی گروه بیمار، هیچ ارتباط معنی‌داری نشان داده نشد، همانطور که در جدول III نشان داده شده است.

تأثیر MIR499A (rs3746444) بر ساختار و عملکرد ژن.

اگرچه miR-499a یک حلقه سنجاق سر ثانویه با توالی های مکمل در ساختار آن تشکیل می دهد (شکل S2)، ژن های مختلف پیش بینی شده بود که توسط هر دو شکل بالغ سنتز شده از هر دو بازو هدف قرار گیرند. در مجموع 1890 ژن توسط miR-499a (919 ژن توسط 3p، 810 در 5p، و 161 ژن توسط هر دو)، همانطور که قبلاً توضیح داده شد، پیش‌بینی شده بود که تحت تاثیر قرار می‌گیرند (8). مهم ترین مسیرهای کیوتو دایره المعارف ژن ها و ژنوم ها (KEGG) مرتبط با اهداف miR-499a که ممکن است در پیشرفت DN به ESRD دخیل باشند.(مرحله پایانیکلیهمرض)در جدول IV خلاصه شده است.

وجود rs3746444 SNP در ناحیه بذر رشته مسافری miR-499a ممکن است منجر به اختلال در اهداف و ایجاد مجموعه متفاوتی از ژن ها شود (8،16). همچنین، ممکن است ساختار ساقه حلقه را کوتاه کند. بنابراین، بر پردازش کل miRNA تأثیر می گذارد.

مطالعه قبلی ما اختلال در تنظیم سطح گردش خون miR-499a را در گروه بیماران مشابه گزارش کرد (18). بنابراین، مطالعه حاضر بر تعیین اینکه آیا این سطوح گردش خون تغییرات قابل توجهی را در بین ژنوتیپ‌های مختلف یک ژن نشان می‌دهند یا خیر، متمرکز شد. با این حال، یافته‌ها ارتباط معنی‌داری را بین ژنوتیپ‌های مختلف MIR499A (rs3746444) و سطوح پلاسمایی miR-499a در گردشی که قبلاً با استفاده از روش لیواک شناسایی شده بود (22) نشان ندادند (P{6}}.173؛ شکل 1). .

سیستانچ می تواند درمان کندکلیهمرض

بحث

گزارش شده است که SNP ها رایج ترین نوع تنوع ژنتیکی مرتبط با تنوع جمعیت، حساسیت به بیماری و پاسخ های درمانی فردی هستند (23). SNP ها ممکن است بر بیان و/یا بلوغ miRNA در سطح رونویسی رونوشت اولیه، پردازش پس از رونویسی رونوشت های اولیه یا pre-miRNA ها، یا بر تعاملات miRNA-mRNA تأثیر بگذارند (24).

مطالعه حاضر نشان داد که حمل آلل rs3746444*G باعث ایجاد حساسیت به ESRD می شود.(مرحله پایانیکلیهمرض)in patients with DM compared with non‑carriers under the allelic, co‑dominant, and dominant genetic association models. Results of our previous study demonstrated that the rs3746444 polymorphism results in an A>عدم تطابق G در ناحیه ساقه پیش ساز miR-499a (واقع در مقابل توالی بالغ)، بر ناحیه بذر بالغ miR-499a-3p که در اتصال صحیح miRNA-mRNA دخیل است، با اختلال متعاقب و ایجاد چندین هدف تأثیر می گذارد (8). حامل‌های ژنوتیپ‌های هموزیگوت (AA یا GG) به ترتیب دو شکل بالغ miR-499a-5p و miR-499a-3p*A یا *G را تولید می‌کنند که هر کدام دارای پانل خاصی از ژن‌های هدف هستند. در مقایسه، حامل‌های هتروزیگوت (AG) سه شکل بالغ miR-499a-5p، -3p*A و -3p*G را با سه زیر مجموعه از ژن‌های هدف تولید می‌کنند. آنالیزهای سیلیکونی مطالعه حاضر نشان داد که وجود این آلل های مختلف ممکن است به ترتیب 667 و 744 هدف ژنی را مختل کرده و ایجاد کند. از جمله اهداف ژنی معتبری که مورد بررسی قرار گرفته‌اند عبارتند از پروتئین هسته‌ای 4، پروتئین برهم‌کنش گیرنده هسته‌ای-1، پروتئین شبه Bcl-2-14، کموکاین (موتیف C-C) لیگاند 8، و ناحیه تعیین‌کننده جنسیت Y-box 4 (20) . با بهترین دانش ما، این اولین مطالعه ای است که نوع MIR499A rs3746444 را برای حساسیت ESRD در بیماران مبتلا به دیابت در نمونه ای از جمعیت خاورمیانه بررسی می کند. مطابق با یافته‌های مطالعه حاضر، Misra و همکاران (25) گزارش کردند که ژنوتیپ‌های هتروزیگوت و هموزیگوت MIR-499A rs3746444 خطر ایجاد ESRD را ایجاد می‌کنند که توسط سایر اختلالات به غیر از DN ایجاد می‌شود و ممکن است با خطر رد حاد آلوگرافت در جمعیت شمال هند تقریباً 3 برابر افزایش یافته است (25).

با توجه به اینکه SNP ها در pre-miRNA ها ممکن است پردازش و/یا بیان miRNA را تغییر دهند، در تجزیه و تحلیل ارتباط پلی مورفیسم MIR499A با سطوح پلاسمایی در گردش miR-499a و ویژگی های مختلف کلینیکی-آزمایشگاهی بیماران، هیچ ارتباط قابل توجهی مشاهده نشد، همانطور که قبلاً توضیح داده شد. فرض بر این است که وجود یک نوع miR-499a ممکن است بر ترمودینامیک فعل و انفعالات RNA-RNA و میل ترکیبی این miRNA با تداخل در اتصال بهینه به mRNA های هدف تأثیر بگذارد، در نتیجه منجر به اختلال در تنظیم ژن های هدف می شود که حساسیت بیماری را به عنوان واسطه ایجاد می کند. ESRD(مرحله پایانیکلیهمرض)بدون تأثیر بر بیان نسبی و/یا فنوتیپ بیماری (22). آنالیزهای in silico مطالعه حاضر برخی از مسیرهای مهم KEGG را نشان داد که شامل اهداف miR-499a است که ممکن است در پیشرفت DN به ESRD دخیل باشد (26-32). به عنوان مثال، مسیر (TGF-1) در اتیوپاتولوژی DN دخیل بود (26،28). مسیر TGF-1 مسیرهای سیگنال دهی کلیدی را فعال می کند، از جمله مسیر PI3K/AKT که واسطه فسفوریلاسیون و غیرفعال سازی FOXO رونویسی است که منجر به استرس اکسیدانی، گسترش سلول های مزانژیال، و تجمع پروتئین های ماتریکس خارج سلولی، اجزای کلیدی DN مزمن می شود.کلیهبیماری (26). افزایش فعالیت تیروزین کیناز گیرنده فاکتور رشد اپیدرمی (ErbB) در میانجیگری چندین عارضه دیابت، از جمله آسیب شناسی کلیوی، فیبروز قلبی، و اختلال عملکرد عروقی مهم است (29). علاوه بر این، نقش مسیر TNF در پیشرفت DN در موش‌های دیابتی و مدل‌های موش مشهود بود. به عنوان مثال، استفاده از پروتئین فیوژن گیرنده-2 TNF محلول برای بهبود مرحله اولیه DN در مدل DM موش KK-Ay گزارش شده است (30). همچنین مشخص شده است که مهارکننده TNFR-Fc TNF هیپرتروفی کلیه را بدون تأثیر بر پروفایل متابولیک در موش‌های مبتلا به دیابت القایی کاهش می‌دهد (31). mTOR در حفظ عملکرد پودوسیت گلومرولی نقش دارد. افزایش فعالیت به هیپرتروفی گلومرولی و هایپرفیلتراسیون مرتبط با DN پیشرونده کمک کرد (32).

قابل توجه است که مسیرهای ذکر شده در تحقیقات تجربی متعددی برای اعتبار بخشیدن به پیامدهای درمانی آنها در DN مورد هدف قرار گرفتند (29،30،33،34). Ziyadeh و همکاران (33) بهبودی در میزان فیلتراسیون گلومرولی ناشی از آنتی بادی مونوکلونال ضد TGF در موش‌های دیابتی db/db گزارش کردند (33). علاوه بر این، درمان طولانی‌مدت موش‌های دیابتی ناشی از استرپتوزوتوسین با AG825، یک مهارکننده خاص گیرنده تیروزین-پروتئین کیناز ErbB-2، گزارش شده است که به طور قابل‌توجهی واکنش‌پذیری بستر عروقی مزانتریک پرفیوژن و نوراپی‌نفین مجدد را اصلاح می‌کند. کارباکول (29). مهار TNF- با پروتئین فیوژن گیرنده TNF محلول (TNFR)2، اتانرسپت، پیشرفت مرحله اولیه DN را در یک مدل دیابتی ایجاد شده در موش KK-A(y)، عمدتاً از طریق مهار ضد التهابی بهبود بخشید. عملکرد مسیر کلیوی TNF---TNFR2 (30). علاوه بر این، راپامایسین، اولین ترکیب گزارش شده برای مهار mTOR، فسفوریلاسیون ناشی از گلوکز p70S6 کیناز و بستر آن، پروتئین ریبوزومی S6 را در سلول‌های مزانژیال مهار می‌کند و اختلالات مورفولوژیکی و عملکردی بیماران دیابتی را کاهش می‌دهد.کلیه هادر مدل موس T2DM (34).

مطابق با یافته های مطالعه حاضر، سیکاچی و همکاران (35) دخالت miR-499a را در حساسیت به DN در یک گروه T2DM ایتالیایی نشان دادند (35). نتایج مطالعه فوق الذکر نشان داد که این ارتباط به دلیل تأثیر miR-499a بر روی دو بازیکن آپوپتوز، کلسینورین و پروتئین مرتبط با دینامین است، که به موجب آن اختلال در تنظیم miR-499a باعث اختلال عملکرد میتوکندری و آپوپتوز سلولی می شود که ممکن است در ایجاد بیماری نقش داشته باشد. (33). قابل توجه است که فرآیندهای اخیر در DN دخیل بوده اند (36،37)، که ممکن است تا حدی از ارتباط نوع miR-499a با ESRD حمایت کند.(مرحله پایانیکلیهمرض)حساسیت در گروه حاضر با این حال، تعداد فزاینده ای از مطالعات شامل گروه های مستقل بزرگتر با قومیت های مختلف برای تایید یافته های مطالعه حاضر مورد نیاز است.

در نتیجه، با بهترین دانش ما، مطالعه حاضر اولین مطالعه ای بود که تاثیر نوع منطقه دانه MIR499A A/G (rs3746444) را بر ESRD مرتبط با DN پیشنهاد کرد.(مرحله پایانیکلیهمرض)حساسیت ممکن است در فهرست ژن‌های حساسیت مولکولی قرار گیرد که ممکن است از طبقه‌بندی ریسک بیمار و اجرای اندازه‌گیری‌های پیشگیرانه اولیه پشتیبانی کند. با این حال، شایان ذکر است که دیگر عوامل مخدوش کننده بالقوه را نمی توان به طور قطعی رد کرد، مانند قرار گرفتن در معرض عوامل محیطی مختلف (مانند نوع درمان یا تغذیه) و عوامل ژنتیکی اضافی. اندازه نمونه بزرگتر و مطالعات تکراری طولانی مدت، به ویژه در جمعیت هایی با قومیت های مختلف، ضروری است. همچنین مطالعات عملکردی برای تایید نقش miR-499a در آسیب شناسی ESRD مرتبط با DN مورد نیاز است.

سیستانچ می تواند درمان کندکلیهمرض

منابع:

1. Sattar A، Argyropoulos C، Weissfeld L، Younas N، Fried L، Kellum JA و Unruh M: مرگ و میر ناشی از همه علل و علل خاص مرتبط با دیابت در بیماران همودیالیزی شایع. BMC Nephrol 13: 130، 2012.
2. السیاری ع.ع. و شاهین ف.ا: مزمن مرحله پایانیکلیهبیماری در عربستان سعودی صحنه ای که به سرعت در حال تغییر است. Saudi Med J 32: 339-346، 2011.
3. Mooyaart AL: ارتباط ژنتیکی در نفروپاتی دیابتی. Clin Exp Nephrol 18: 197-200، 2014.
4. Lu Z، Liu N و Wang F: مقررات اپی ژنتیک در نفروپاتی دیابتی. J Diabetes Res 2017: 7805058، 2017.
5. Schena FP، Serino G و Sallustio F: MicroRNA ها درکلیهبیماری ها: نشانگرهای زیستی امیدوارکننده جدید برای تشخیص و نظارت Nephrol Dial Transplant 29: 755-763، 2014.
6. Felekkis K، Touvana E، Stefanou Ch و Deltas C: MicroRNAs: یک کلاس جدید از مولکول های رمزگذاری شده که در سلامت و بیماری نقش دارند. بقراطیه 14: 236-240، 2010.
7. مشایخی س، سعیدی ساعدی ح، صالحی زهرا، سلطانی پور س، و میرزاجانی عیسی: اثرات پلی‌مورفیسم‌های miR-27a، miR-196a2 و miR-146a بر خطر سرطان پستان. Br J Biomed Sci 75: 76-81، 2018.

8. Toraih EA، Hussein MH، Al Ageeli E، Riad E، Abdallah NB، Helal GM، و Fawzy MS: ساختار و تأثیر عملکردی واریانت ناحیه بذر در خانواده ژن MIR-499 در آسم برونش. Respir Res 18: 169, 2017.

9. Fawzy MS، Toraih EA، Hamed EO، حسین MH، و اسماعیل HM: ارتباط بیان MIR-499a و نوع ناحیه بذر (rs3746444) با بیماری قلبی عروقی در بیماران مصری. Acta Cardiol 73: 131-140، 2018.

10. Wang WJ، Cai GY و Chen XM: پیری سلولی، فنوتیپ ترشحی مرتبط با پیری و مزمنکلیهمرض. Oncotarget 8: 64520-64533، 2017.
11. Sluijter JP، van Mil A، van Vliet P، Metz CH، Liu J، Doevendans PA و Goumans MJ: MicroRNA-1 و -499 تمایز و تکثیر را در سلول های پیش ساز کاردیومیوسیت مشتق شده از انسان تنظیم می کنند. Arterioscler Thromb Vasc Biol 30: 859-868، 2010.
12. Ling TY، Wang XL، Chai Q، Lau TW، Koestler CM، Park SJ، Daly RC، Greason KL، Jen J، Wu LQ، و همکاران: تنظیم کانال SK3 توسط microRNA-499 نقش بالقوه در فیبریلاسیون دهلیزی . ریتم قلب 10: 1001-1009، 2013.
13. Xu Z، Han Y، Liu J، Jiang F، Hu H، Wang Y، Liu Q، Gong Y و Li X: MiR-135b-5p و MiR-499a-3p به طور مستقیم تکثیر سلولی و مهاجرت را در تصلب شرایین ترویج می کنند. هدف قرار دادن MEF2C Sci Rep 5: 12276, 2015.
14. کنسرسیوم هستی شناسی ژن: منبع هستی شناسی ژن: غنی سازی معدن طلا. Nucleic Acids Res 49: D325-D334، 2021.
15. Wang L، Zhang N، Pan HP، Wang Z و Cao ZY: MiR-499-5p با سرکوب PTEN به مقاومت به انسولین کبدی کمک می کند. Cell Physiol Biochem 36: 2357-2365، 2015.
16. Toraih EA، Ismail NM، Toraih AA، Hussein MH و Fawzy MS: پیش ساز miR-499a نوع اما نه miR-196a2 با حساسیت به روماتیسم مفصلی در جمعیت مصری مرتبط است. Mol Diagn Ther 20: 279-295، 2016.
17. Toraih EA، Fawz MS، Elgazzaz MG، Hussein MH، Shehata RH و Daoud HG: تجزیه و تحلیل ژنوتیپ ترکیبی پیش سازهای miRNA196a2 و 499a با حساسیت به سرطان کبد و کلیه یک مطالعه مقدماتی. Asian Pac J Cancer 17 قبلی: 3369-3375، 2016.

18. Fawzy MS، Abu AlSel BT، Al Ageeli E، Al-Qahtani SA، Abdel-Daim MM و Toraih EA: نمایه های بیانی طولانی RNA غیر کدکننده MALAT1 و microRNA-499a در بیماران دیابتی ESRD که تحت دیالیز متقاطع ESRD هستند: A تحلیل مقطعی Arch Physiol Biochem 126: 172-182، 2020.

19. غنی ع.، الوحیب س، الصحو ع و حسین ن: بیوپسی کلیه در بیماران مبتلا به دیابت نوع 2: نشانه ها و ماهیت ضایعات. Ann Saudi Med 29: 450-453، 2009.

20. Nah EH، Cho S، Kim S و Cho HI: مقایسه نسبت آلبومین به کراتینین ادرار (ACR) بین تست نواری ACR و آزمایش کمی در پیش دیابت و دیابت. Ann Lab Med 37: 28-33، 2017.
21. Fawzy MS و Beladi FIA: ارتباط بیان گیرنده ویتامین D، VDBP و ویتامین D در گردش با شدت نفروپاتی دیابتی در گروهی از بیماران دیابتی نوع 2 سعودی. Clin Lab 64: 1623-1633، 2018.
22. Livak KJ و Schmittgen TD: تجزیه و تحلیل داده های بیان ژن نسبی با استفاده از PCR کمی زمان واقعی و روش 2 (--Delta Delta C(T)). روش 25: 402-408، 2001.
23. Shastry BS: SNPs: تاثیر بر عملکرد ژن و فنوتیپ. Methods Mol Biol 578: 3-22، 2009.
24. Hoffman AE، Zheng T، Yi C، Leaderer D، Weidhaas J، Slack F، Zhang Y، Paranjape T و Zhu Y: MicroRNA miR-196a-2 و سرطان پستان: یک مطالعه ارتباط ژنتیکی و اپی ژنتیکی و تجزیه و تحلیل عملکردی. Cancer Res 69: 5970-5977، 2009.
25. Misra MK، Pandey SK، Kapoor R، Sharma RK و Agrawal S: گونه های ژنتیکی ژن های مرتبط با MicroRNA در حساسیت و پیش آگهی مرحله پایانیکلیهمرضو نتیجه آلوگرافت کلیه در میان سرخپوستان شمالی Pharmacogenet Genomics 24: 442-450، 2014.
26. Kato M، Yuan H، Xu ZG، Lanting L، Li SL، Wang M، Hu MC، Reddy MA، و Natarajan R: نقش مسیر Akt/FoxO3a با واسطه TGF-beta1 اختلال عملکرد سلولی مزانژیال: یک مکانیسم جدید مرتبط به دیابتیکلیهمرض. J Am Soc Nephrol 17: 3325-3335، 2006.
27. Qin G، Zhou Y، Guo F، Ren L، Wu L، Zhang Y، Ma X و Wang Q: بیان بیش از حد FoxO1 اختلال عملکرد سلول های مزانژیال را در موش های صحرایی نر دیابتی بهبود می بخشد. مول اندوکرینول 29: 1080-1091، 2015.
28. Chang AS، Hathaway CK، Smithies O و Kakoki M: تبدیل کننده فاکتور رشد 1 و نفروپاتی دیابتی. Am J Physiol Renal Physiol 310: F689-F696، 2016.
29. Akhtar S، Yousif MH، Dhaunsi GS، Sarkhouh F، Chandrasekhar B، Attur S و Benter IF: فعال شدن ErbB2 و سیگنال دهی پایین دستی از طریق Rho کینازها و ERK1/2 به اختلال عملکرد عروقی ناشی از دیابت کمک می کند. PLoS One 8: e67813، 2013.

30. Omote K، Gohda T، Murakoshi M، Sasaki Y، Kazuno S، Fujimura T، Ishizaka M، Sonoda Y و Tomino Y: نقش مسیر TNF در پیشرفت نفروپاتی دیابتی در موش‌های KK-A(y). Am J Physiol Renal Physiol 306: F1335-F1347، 2014.

31. Al-Lamki RS و Mayadas TN: گیرنده های TNF: مسیرهای سیگنالینگ و کمک به اختلال عملکرد کلیه.کلیهInt 87: 281-296، 2015.
32. گودل ام، هارتلبن بی، هرباخ ان، لیو اس، زشیدریش اس، لو اس، دبرچنی مور A، لیندن مایر MT، راستالدی MP، هارتلبن جی، و همکاران: نقش mTOR در عملکرد سلول‌های بدن و نفروپاتی دیابتی در انسان و موش . J Clin Invest 121: 2197-2209، 2011.

33. Ziyadeh FN، Hoffman BB، Han DC، Iglesias-De La Cruz MC، Hong SW، Isono M، Chen S، McGowan TA و Sharma K: پیشگیری طولانی مدت از نارسایی کلیوی، بیان ژن ماتریکس اضافی، و مزانژیال ماتریکس گلومرولی. گسترش با درمان با آنتی بادی مونوکلونال ضد تبدیل فاکتور رشد-بتا در موش های دیابتی db/db. Proc Natl Acad Sci USA 97: 8015-8020، 2000.

34. Mori H، Inoki K، Masutani K، Wakabayashi Y، Komai K، Nakagawa R، Guan KL و Yoshimura A: مسیر mTOR در نفروپاتی دیابتی بسیار فعال است و راپامایسین دارای پتانسیل درمانی قوی است. Biochem Biophys Res Commun 384: 471-475، 2009.
35. Ciccacci C، Latini A، Greco C، Politi C، D'Amato C، Lauro D، Novelli G، Borgiani P و Spallone V: ارتباط بین پلی مورفیسم MIR499A و نوروپاتی دیابتی در دیابت نوع 2. J عوارض دیابت 32: 11-17، 2018.
36. Forbes JM و Thorburn DR: اختلال عملکرد میتوکندری در بیماران دیابتیکلیهمرض. Nat Rev Nephrol 14: 291-312، 2018.
37. Flemming NB، Gallo LA و Forbes JM: اختلال عملکرد و سیگنال دهی میتوکندری در بیماران دیابتیکلیهبیماری: استرس اکسیداتیو و فراتر از آن. Semin Nephrol 38: 101-110، 2018.