afزبان
صفحه اصلی / دانش / محتوای

دانش

واکسن سلولی دندریتیک سی دی انسانی WT1 دارای پتانسیل بالایی در ایمونوتراپی هدفمند تومور جامد است

Feb 20, 2024

خلاصه:

سلول های دندریتیک (DC) سلول های قدرتمندی هستند که نقش مهمی در ایمنی ضد تومور ایفا می کنند و استفاده از آنها در ایمونوتراپی سرطان قابلیت های پنهان را به عنوان یک درمان موثر باز می کند. برای به حداکثر رساندن پتانسیل کامل DC، ما یک واکسن DC به نام CellgramDC-WT1 (CDW) ایجاد کردیم. CDW با WT1، آنتی ژنی که معمولاً در تومورهای جامد بیان می شود، پالس شد و با زولدرونات برای کمک به بلوغ DC القا شد. اگرچه مطالعه قبلی ما بر روی استفاده از Rg3 به عنوان یک القاء کننده بلوغ DC متمرکز بود، مشکلات مربوط به کنترل کیفیت و دسترسی ما را به انتخاب زولدرونات به عنوان جایگزین بهتر سوق داد. علاوه بر این، CDW IL{5}} و IFN- را ترشح کرد که باعث تمایز سلول‌های T ساده به سلول‌های CD{7} T فعال و پاسخ لنفوسیت T سیتوتوکسیک (CTL) علیه سلول‌های سرطانی با آنتی‌ژن‌های WT1 شد. با تایید هویت و عملکرد CDW، ما معتقدیم CDW یک واکسن DC بهبود یافته است و دارای پتانسیل امیدوارکننده ای در زمینه ایمونوتراپی سرطان است.

Desert ginseng-Improve immunity (2)

cistanche tubulosa - بهبود سیستم ایمنی

کلید واژه ها:

واکسن DC؛ CD141; سلول های دندریتیک؛ زولدرونات؛ فعال سازی سلول های T؛ ایمونوتراپی سرطان؛ تومور جامد؛ آنتی ژن های سرطانی؛ تومور ویلمز 1 (WT1); آنتی ژن های مرتبط با تومور

1. معرفی

سرطان علت اصلی مرگ و میر در سراسر جهان است، و در حالی که روش های سنتی درمان شامل جراحی، شیمی درمانی و پرتودرمانی است، اغلب به دلیل ناتوانی در تمایز بین سلول های سرطانی و طبیعی، عوارض جانبی نامطلوبی ایجاد می کنند [1]. با این حال، پیشرفت‌های اخیر در زمینه ایمونوتراپی امکان توسعه واکسن‌های سرطان را فراهم کرده است که هدف آن فعال کردن سیستم ایمنی بدن برای هدف قرار دادن خاص سلول‌های سرطانی و در نتیجه به حداقل رساندن عوارض جانبی است [2]. واکسن‌های سرطان عمدتاً از آنتی‌ژن‌های مرتبط با تومور یا آنتی‌ژن‌های اختصاصی تومور برای فعال کردن لنفوسیت‌های آنتی‌ژن خاص سیستم ایمنی استفاده می‌کنند [3]. لنفوسیت‌های فعال، عمدتاً سلول‌های T، عملکردهای مؤثری مانند سمیت سلولی و تولید سیتوکین را برای کنترل پیشرفت سرطان بر عهده می‌گیرند [4]. انواع مختلف واکسن های سرطان از مجموعه خاصی از سلول های ایمنی مانند سلول های کشنده طبیعی (NK) [5] و سلول های دندریتیک (DC) [6] استفاده می کنند. از این میان، DC سلول های ارائه دهنده آنتی ژن (APC) هستند و نقش مهمی در فعال کردن پاسخ ایمنی از طریق سلول های T دارند. ویژگی اصلی DC شامل توانایی جذب آنتی ژن و پردازش پروتئین به یک پپتید برای ارائه به سلول‌های T توسط مولکول‌های مجتمع سازگاری بافتی اصلی (MHC) است. با این حال، DC شامل یک جمعیت ناهمگن با هر زیر مجموعه است که فنوتیپ ها و عملکردهای مجزا را حمل می کند [7].

Desert ginseng-Improve immunity (15)

گیاه سیستانچ سیستم ایمنی را افزایش می دهد

DCها عمدتاً به DC کلاسیک/معمولی (cDC)، پلاسماسیتوئید DC (pDC) و DC مشتق از مونوسیت (mo-DC) تقسیم می‌شوند. دو گروه گسترده از cDC وجود دارد: نوع 1 DC (cDC1)، که در درجه اول آنتی ژن ها را با استفاده از MHC کلاس I برای برانگیختن پاسخ CTL از سلول T CD8+ (CTL) و نوع 2 DC (cDC2) ارائه می کند که از آن استفاده می کند. MHC کلاس II برای ترویج پاسخ از سلول T CD{7}} (سلول T کمکی) [8]. DCهای پلاسماسیتوئید زیرمجموعه منحصر به فردی از DC هستند که در ترشح اینترفرون نوع I (IFN) تخصص دارند [9]. Mo-DC اساساً در التهاب نقش دارد و پاسخ ایمنی TH17 را تقویت می کند [10] (شکل 1A). در حال حاضر، mo-DC بیشترین استفاده را در زمینه تحقیقات ایمونوتراپی ضد سرطان DC دارد [11-13]. اگرچه mo-DC به خوبی قابل تحمل و بی خطر است، اثربخشی درمانی کم مانع از استفاده گسترده آن شده است. محدودیت mo-DC در شرایط آزمایشگاهی نشان داده شده است، جایی که آنها توانایی محدودی برای مهاجرت به غدد لنفاوی برای فعال کردن پاسخ‌های قوی لنفوسیت T سیتوتوکسیک (CTL) نشان می‌دهند [14]. برای غلبه بر محدودیت‌های حالت‌های فعلی واکسن DC، cDC1 در این مطالعه انتخاب شد، زیرا بالاترین توانایی ارائه آنتی‌ژن را دارد و پاسخ CTL بالایی را نشان می‌دهد. اگرچه مطالعات روی واکسن های cDC1 در حال افزایش است، cDC1 هنوز در یک کارآزمایی بالینی مورد بررسی قرار نگرفته است [15].

image

ما سلول‌های تک هسته‌ای (MNC) را از مغز استخوان به‌دست آوردیم و سپس سلول‌های CD{0}} (سلول‌های بنیادی خونساز) را با استفاده از تکنیک جداسازی سلول MACS® جدا کردیم. سلول ها با استفاده از فاکتور تحریک کننده کلنی گرانولوسیت-ماکروفاژ (GM-CSF)، فاکتور سلول های بنیادی (SCF) و گیرنده تیروزین کیناز 3 (FLT3)-Fms که مستقیماً باعث تمایز به DC [16] و تمایز می شود، تکثیر شدند. به DC با GM-CSF و اینترلوکین 4 (IL{10}}) القا شد. DC نابالغ پروتئین WT1 را به عنوان آنتی ژن تشخیص می دهد و با استفاده از زولدرونات بالغ می شود. آنتی ژن WT1 (Wilms' tumor1) در بدخیمی های مختلف و انواع تومورهای جامد به شدت بیان می شود. بنابراین، WT1 به عنوان یکی از اهداف ایمونوتراپی برای سرطان استفاده شده است [17]. Zoledronate دارویی از کلاس بیس فسفونات است که به طور گسترده برای درمان پوکی استخوان و متاستاز اسکلتی استفاده می شود. علاوه بر این، زولدرونات آنزیم فارنسیل دی فسفات سنتاز را مهار می کند، که در مسیر موالونات و در پرنیلاسیون بعدی پروتئین های کوچک GTPase مانند Ras نقش دارد [18]. سپس DC بالغ به عنوان واکسن DC نهایی می شود (شکل 1A). به طور کلی، DC بالغ، سیتوکین های مختلفی را برای تحریک سلول های ایمنی [19] ترشح می کند و مستقیماً به سلول های T برای ارائه آنتی ژن متصل می شود [20]. سلول‌های T با DC واکنش نشان دادند تا به سلول‌های T کمکی تبدیل شوند (CD{20}}) تا به پاسخ ایمنی یا سلول‌های T سیتوتوکسیک (CD{21}}) کمک کنند تا مستقیماً اثرات ضد سرطانی را آغاز کنند [21] (شکل 1B). ترکیب واکسن DC توسط فلوسیتومتری تأیید شد و عملکرد واکسن از طریق آزمایش ترشح سیتوکین، تغییر سلول T و سنجش لنفوسیت T سیتوتوکسیک (CTL) مورد بررسی قرار گرفت.

Desert ginseng-Improve immunity (23)

cistanche tubulosa - بهبود سیستم ایمنی

برای مشاهده محصولات Cistanche Enhance Immunity اینجا را کلیک کنید

【بیشتر بخواهید】 ایمیل:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2. نتایج

2.1. نمایه‌های فلوسایتومتری نشان‌دهنده واکسن DC با بیان CD{2}} بالا

برای تایید هویت DC، نشانگرهای مختلفی از جمله CD141 (پرکاربردترین نشانگر cDC1)، CD1c (نشانگر cDC2)، و CD303a (نشانگر pDC) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. علاوه بر این، HLA-DR، CD80 و CD{7}} که نشانگرهای فعال سازی هستند نیز مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. برخلاف 70 درصد cDC2 موجود در DC خون انسان، DC تولید شده عمدتاً از سلول‌های cDC1 (CD{11}}) تشکیل شده بود و وقوع دو برابر مثبت CD141+CD1c+ در DC فعال شده بود. نیز تایید شد [22،23]. علاوه بر این، نتایج سطح فعالیت بالایی را برای DC نشان داد (شکل 2A, B). تغییرات مورفولوژی سلولی نیز با استفاده از شمارش کامل خون (CBC) برای نقاط زمانی مختلف در تولید DC ردیابی شد. در حالی که بیشتر سلول ها به صورت مونوسیت در مرحله تکثیر تکثیر می شوند (جدول 1)، مرحله تمایز منجر به کاهش تدریجی مونوسیت ها تا سطح ناپدید شدن در پایان فرآیند تولید شد.

Figure 2. Identification of CDW subsets. Phenotypic characteristics of DC. During the differentiation process, the DC were pulsed with WT1 protein and treated with 1 µM zoledronate for 3 h. The data show the expression of stimulatory marker and subtype of DC representative of human DC (n = 5) (A). Results are shown as dot plots (B).

شکل 2. شناسایی زیر مجموعه های CDW. ویژگی های فنوتیپی DC. در طی فرآیند تمایز، DC با پروتئین WT1 پالس شد و با 1 میکرومولار زولدرونات به مدت 3 ساعت تیمار شد. داده ها بیانگر نشانگر تحریکی و زیرگروه DC نماینده DC انسانی (n=5) (A) را نشان می دهد. نتایج به صورت نمودار نقطه ای (B) نشان داده شده است.

جدول 1. در طی فرآیند تکثیر و تمایز از سلول‌های CD{1}} به DC، تغییرات فنوتیپی با استفاده از CBC مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.

Table 1. During the process of proliferation and differentiation from CD34+ cells to DC, phenotypic changes were analyzed using CBC.

2.2. سطح پلاسمایی IL-12 و سیتوکین های IFN تعیین شده توسط ELISA

از بسیاری از سیتوکین های ترشح شده توسط DC، نماینده ترین آنها IL-12 و IFN- هستند. IL{2}} با پیوند دادن پاسخ‌های ایمنی ذاتی و سازگار، التهاب را تنظیم می‌کند. بیشتر اثرات ناشی از IL{3}} با ترشح IFN- انجام می شود و مشخص شد که برای القای سلول های Th1 حیاتی است. IFN- نقش کلیدی در فعال سازی ایمنی سلولی و متعاقباً تحریک پاسخ ایمنی ضد تومور ایفا می کند [24-26]. به منظور بررسی اثربخشی سطوح ترشح CDW، IL{9}} و IFN- از طریق تعامل با سلول‌های T مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. در حالی که تنها سلول‌های T و سلول‌های T تیمار شده با شرایط DC بدون پالس منجر به سطوح ترشحی مشابه یکدیگر شدند، زمانی که گروه‌ها با گروه سلول T + CDW مقایسه شدند، القای CDW بر روی سلول‌های T دو برابر سطح IL ایجاد کرد. -12(شکل 3A) و به طور قابل توجهی سطح IFN- را افزایش داد (شکل 3B).


Figure 3. Induction comparison of CDW on T cells via cytokine analysis. The secretion of IL-12 (A) and IFN-γ (B) was measured in T cell only (activated IL-2 and Trans ACT), T cell + unpulsed DC and T cell + CDW co-culture supernatant using ELISA assay (n = 3). ELISA was performed using the supernatant at the time of completion. Analysis was performed through SigmaPlot. *** p < 0.001.

شکل 3. مقایسه القایی CDW روی سلول های T از طریق آنالیز سیتوکین. ترشح IL{1}} (A) و IFN- (B) فقط در سلول T (IL{3}} فعال شده و Trans ACT)، سلول T + DC و سلول T بدون پالس + CDW هم کشت اندازه‌گیری شد. مایع رویی با استفاده از روش الایزا (n=3). الایزا با استفاده از مایع رویی در زمان تکمیل انجام شد. تجزیه و تحلیل از طریق SigmaPlot انجام شد. *** p < 0.001.

2.3. اثر زولدرونات بر تمایز و بلوغ cDC1 در CDW

در مطالعه قبلی، Rg3 [27]، یک جین سنوزید موجود در جینسنگ Panax، برای القای بلوغ DC استفاده شد. با این حال، محصول نهایی از لایه ای از ناخالصی تشکیل شده بود که باعث ایجاد مشکلاتی در کنترل کیفیت می شد. Zoledronate به عنوان جایگزینی برای Rg3 برای غلبه بر این مشکل استفاده شد و اثر آن بر القای بلوغ DC مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. مهم‌ترین تفاوت بین اثرات این دو ماده، توانایی زولدرونات برای ایجاد بیان فوق‌العاده بالای نشانگر سطحی cDC1 (سلول CD{4}}) است (شکل 4A). بنابراین، از آنجایی که cDC1 به عنوان بهترین زیرگروه DC در ارائه آنتی ژن شناخته می شود، زولدرونات برای القای بلوغ DC انتخاب شد [18]. زمان درمان بهینه زولدرونات در القای بلوغ DC نیز مورد ارزیابی قرار گرفت. اگرچه درمان 24 ساعته نسبت کافی از سلول های CD141+ را به همراه داشت، نسبت سلول های CD{10}} در نتیجه درمان 3 ساعت تقریباً 20% بیشتر بود و CD{13}} (همکار نشانگر تحریکی) نسبت در درمان 3 ساعته نیز 30 درصد بیشتر بود. علاوه بر این، با در نظر گرفتن مکانیسم اثر زولدرونات، زمان درمان کوتاهتر 3 ساعت در مقایسه با 24 ساعت در تولید کیفیت بالاتر DC موثرتر تلقی شد (جدول 2).

Figure 4. Effect of zoledronate on the differentiation and maturation of cDC1 in DC vaccine production. Effects of zoledronate in DC vaccine. In the process of DC vaccine production, 3 hr treatment with zoledronate induces differentiation and maturation of DC to cDC1 and yields a higher level of CD141 marker. Phenotype markers were analyzed by flow cytometry to compare Rg3 (n = 4) and zoledronate (n = 5), which were used for the induction of DC maturation. *** p < 0.001.

شکل 4. اثر زولدرونات بر تمایز و بلوغ cDC1 در تولید واکسن DC. اثرات زولدرونات در واکسن DC. در فرآیند تولید واکسن DC، درمان 3 ساعته با زولدرونات باعث تمایز و بلوغ DC به cDC1 می شود و سطح بالاتری از نشانگر CD141 را ایجاد می کند. نشانگرهای فنوتیپ با فلوسایتومتری برای مقایسه Rg3 (n=4) و زولدرونات (n=5) که برای القای بلوغ DC مورد استفاده قرار گرفتند، تجزیه و تحلیل شدند. *** p < 0.001.

جدول 2. اثر زمان درمان زولدرونات (3 ساعت و 24 ساعت) بر نشانگرهای سطح.

Table 2. Effect of zoledronate treatment times (3 h and 24 h) on surface markers.

2.4. پاسخ های سلول T اختصاصی آنتی ژن WT1 ناشی از واکسیناسیون CDW

Figure 5. CDW increases CD8+ T cells to promote cytotoxicity against cancer cells. Effect of CDW on T cell response assessed via CTL. IL-2 and Trans-Act are T cell stimulators and were used to stimulate T cells. The activated T cells were co-cultured with DC for the first induction, which lasts for seven days, and the second induction which extends to 10 days. The changes in the T cell subtype were analyzed via flow cytometry (A). The T cells cultured for 10–14 days were co-cultured with cancer cells expressing WT1 according to appropriate ratios in a 96-well plate. Post-72 h, the survival rate of cancer cells was analyzed using CCK8 (B–D). T cells induced by CDW group (B). T cell only group (activated IL-2 and Trans ACT) (C). T cells induced by unpulsed DC group (D). * p < 0.05, *** p < 0.001.

شکل 5. CDW سلول های CD{1}} T را افزایش می دهد تا سمیت سلولی را علیه سلول های سرطانی افزایش دهد. اثر CDW بر پاسخ سلول T از طریق CTL ارزیابی شد. IL{2}} و Trans-Act محرک سلول های T هستند و برای تحریک سلول های T استفاده می شوند. سلول‌های T فعال شده با DC برای القای اول که هفت روز طول می‌کشد و القای دوم که تا 1{14}} روز طول می‌کشد، کشت داده شدند. تغییرات در زیرگروه سلول T از طریق فلوسیتومتری (A) آنالیز شد. سلول‌های T کشت‌شده به مدت 1{16}}-14 روز با سلول‌های سرطانی بیان‌کننده WT1 مطابق با نسبت‌های مناسب در یک صفحه چاهک کشت داده شدند. بعد از ساعت، میزان بقای سلول‌های سرطانی با استفاده از CCK8 (B-D) تجزیه و تحلیل شد. سلول های T القا شده توسط گروه CDW (B). فقط گروه سلول T (فعال شده IL-2 و Trans ACT) (C). سلول های T القا شده توسط گروه DC بدون پالس (D). * p <0.05، *** p <0.001.

2.5. تایید ایمنی واکسن CellgramDC

در هر دو گروه تجویز (3.4 × 104 سلول / حیوان یا 1.7 × 105 سلول / حیوان)، هیچ ناهنجاری در مورد مرگ یا علائم عمومی در نتیجه ماده تجویز شده مشاهده نشد.

در طول دوره مشاهده، هیچ تغییر سم شناسی قابل توجهی در گروه های تجویز (3.4 × 104 سلول / حیوان یا 1.7 × 105 سلول / حیوان) به عنوان یک نتیجه از ماده تجویز مشاهده شد. مشاهدات شامل وزن بدن (شکل 6A)، آنالیز ادرار (شکل 6B)، مصرف خوراک، معاینه چشم پزشکی، معاینه خونی، معاینه بیوشیمیایی خون، وزن اندام، کالبد شکافی، و تست تحمل موضعی (مکمل 1، جداول S1-S9) بود. آزمایش های مختلف با مقایسه DC مشتق از ساقه (CellgramDC) و DC مشتق از مونوسیت (mo-DC) تایید شد. بقا و اندازه تومور موش ها نیز مورد آزمایش قرار گرفت. اندازه تومور در گروه stem-DC در مقایسه با گروه mo-DC بیش از 50٪ کاهش یافت، و میزان بقا نیز افزایش یافت، که اثر ضد سرطانی قوی را تایید کرد (مکمل 2).

Figure 6. Subcutaneous dose toxicity study of CellgramDC in C57BL/6 mice. To test the safety and toxic response of the CellgramDC, female and male mice of the C57BL/6 strain were subcutaneously injected with CellgramDC for a total of six weeks (one injection per week). The safety of Cell gramDC was tested by subcutaneous injection into female and male mice for a total of six weeks (one injection per week). Administration groups consisted of two groups: 10 mice injected with 3.4 × 104 cells/animal and 15 mice injected with 1.7 × 105 cells/animal. A negative control group was comprised of 15 mice and was injected intravenously with a solution composed of excipient, plasma solution-A/human serum albumin (HSA) 90% + DMSO 10%, and saline for six weeks (one injection per week). In order to test for a reversible toxic response, five mice from each comparison group, negative control group, and 1.7 × 105 cells/animal administration group were given two weeks of the recovery period. During the recovery period, weight check (A), urinalysis (B), general symptoms, feed intake measurement, and ophthalmological examination were observed. Following the observation period, hematological tests, blood biochemical tests, and organ weight measurements were performed, as well as visual and histopathological examinations at necropsy.

شکل 6. مطالعه سمیت دوز زیر جلدی CellgramDC در موش C57BL/6. برای آزمایش ایمنی و پاسخ سمی CellgramDC، موش‌های ماده و نر سویه C57BL/6 به صورت زیر جلدی CellgramDC به مدت شش هفته (یک تزریق در هفته) تزریق شدند. ایمنی سلول gramDC با تزریق زیر جلدی به موش‌های ماده و نر در مجموع به مدت شش هفته (یک تزریق در هفته) آزمایش شد. گروه‌های تجویز شامل دو گروه بودند: 10 موش با تزریق 3.4 × 104 سلول / حیوان و 15 موش با تزریق 1.7 × 105 سلول / حیوان. یک گروه کنترل منفی متشکل از 15 موش بود که به مدت شش هفته (یک تزریق در هفته) به صورت داخل وریدی محلولی متشکل از ماده کمکی، محلول پلاسما-آلبومین سرم انسانی (HSA) 90% + DMSO 10% و سالین تزریق شد. به منظور آزمایش پاسخ سمی برگشت پذیر، به پنج موش از هر گروه مقایسه، گروه کنترل منفی و 1.7 × 105 سلول / گروه تجویز حیوان، دو هفته دوره بهبودی داده شد. در طول دوره نقاهت، بررسی وزن (A)، آزمایش ادرار (B)، علائم عمومی، اندازه گیری مصرف خوراک و معاینه چشم پزشکی مشاهده شد. پس از دوره مشاهده، آزمایش‌های خونی، آزمایش‌های بیوشیمیایی خون و اندازه‌گیری وزن اندام‌ها و همچنین معاینات بصری و هیستوپاتولوژیک در کالبدگشایی انجام شد.

ما ثبات و اثربخشی CellgramDC را تأیید کردیم. CDW که با WT1 پالس می شود و با زولدرونات درمان می شود نیز از نظر سمیت و اثربخشی مورد آزمایش قرار می گیرد و انتظار می رود نتایج بهبودی حاصل شود.

3. بحث

در واکسن CDW که تولید شد، cDC1 بالاترین نسبت بود و سطح بالایی از فعالیت را نشان داد. cDC1 سلول هایی با بالاترین توانایی ارائه آنتی ژن هستند و وظیفه اصلی DC را بر عهده دارند. با توجه به اینکه چگونه cDC1 زیرمجموعه نادری از DC [~{3}}.03٪ از PBMC] [28] را تشکیل می‌دهد، غلبه جمعیت CD141+ در CDW یک مزیت آشکار در افزایش کارایی واکسن علاوه بر این، cDC1 در CDW سیتوکین‌ها (IL{8}} و IFN-) را در سطح بالایی ترشح می‌کند و قادر به القای تمایز سلول‌های T ساده به سلول‌های CD{10}} T فعال است. در مطالعه قبلی ما، Rg3 به عنوان یک عامل بلوغ استفاده شد، اما با توجه به مشکل در به دست آوردن عرضه و کنترل کیفیت محصول نهایی، زولدرونات به عنوان یک جایگزین برای غلبه بر این چالش ها استفاده شد. DC القا شده توسط زولدرونات برای تجزیه و تحلیل نقش آن به عنوان یک القاء کننده فعال سازی سلول های T V9 δ [29] مورد مطالعه قرار گرفت. زولدرونات یک کلاس از بیس فسفونات ها است و بیس فسفونات ها فعالیت سلول های δ T را برای تولید سریع و فراوان سیتوکین های پیش التهابی [30] تحریک می کنند، با در نظر گرفتن این موضوع، آزمایش خود را برای آزمایش اثرات درمان کوتاه مدت طراحی کردیم. در مطالعه ما، زولدرونات (در مقایسه با Rg3) باعث فعال شدن سلول‌های CD{17}} در CDW و همچنین افزایش سطح cDC1 شد. اولین کارآزمایی بالینی برای DC ناشی از Rg3 (NCT 046158-45) از مطالعه قبلی ما انجام شد، اما نتایج گزارش نشده است. با این حال، با توجه به یافته‌های فعلی، انتظار داریم نتایج بهتری در کارآزمایی‌های بالینی آینده با استفاده از DC القاء شده توسط زولدرونات انجام شود.

Cistanche deserticola-improve immunity (6)

گیاه سیستانچ سیستم ایمنی را افزایش می دهد

اخیراً مطالعات زیادی در مورد ایمونوتراپی علیه سرطان انجام شده است و درمان‌های مورد تحقیق CAR-T [31،32] و CAR-NK [33،34] هستند. این درمان ها کارایی خود را تایید کرده اند و برای درمان سرطان بسیار پیش بینی می شود. با این حال، CAR-T محدود به درمان سرطان خون است که بخش بسیار کمی از انواع سرطان را شامل می شود [35]. علاوه بر این، بیماران ممکن است از عوارض جانبی درمان، مانند سندرم آزادسازی سیتوکین (CRS) رنج ببرند [36]. به منظور غلبه بر این کاستی ها، ایمنی درمانی با استفاده از سلول های NK در حال تحقیق است. سلول‌های NK لنفوسیت‌های بسیار قوی هستند و سرطان را از طریق لیگاندهای فعال کننده متعددی که به طور گسترده بیان می‌شوند هدف قرار می‌دهند. در نتیجه، سلول‌های NK ممکن است محدودیت‌های درمان با سلول‌های CAR T اتولوگ را برطرف کنند. با این حال، چندین اشکال بالقوه برای استفاده از سلول‌های NK وجود دارد، مانند مشکل در کشت سلولی، بی‌درنگ در اوج فعالیت سینتیک سلولی، و طول عمر ذاتی کوتاه‌تر و همچنین فنوتیپ حافظه محدود در طول عمر و پاسخ [34،37]. ، 38]. تحقیقات دیگر شامل درمان‌های ترکیبی با استفاده از سلول‌های DC یا T و مهارکننده‌های ایمون بازرسی مانند anti-PD1 (پروتئین مرگ برنامه‌ریزی‌شده سلولی1) [39] یا anti-PD-L1 (برنامه‌ریزی مرگ لیگاند1) [40] است. مصرف همزمان این داروها امکان هدف قرار دادن ریزمحیط تومور سرکوبگر سیستم ایمنی را فراهم می کند و تحقیقات بیشتر برای افزایش اثربخشی این درمان ها در حال انجام است.

Cistanche deserticola-improve immunity (7)

فواید سیستانچ توبولوزا-تقویت سیستم ایمنی بدن

تحقیقات برای توسعه واکسن DC برای ایمونوتراپی به طور مداوم در حال افزایش است و پیشرفت‌های زیادی در این زمینه در حال انجام است. DC نقش اصلی و حیاتی را در سیستم ایمنی پیشرفته ایفا می کند و واکسن DC ممکن است در مقایسه با سایر روش های ایمونوتراپی سرطان مزیتی را ارائه دهد. از آنجایی که DC مستقیماً سلول های سرطانی را از بین نمی برد، سلول های طبیعی تحت تأثیر قرار نمی گیرند و عوارض جانبی نامطلوب را از بین می برند. علاوه بر این، با ضربان DC با WT1، آنتی ژنی که معمولا در بسیاری از تومورهای جامد بیان می شود [17]، واکسن DC می تواند مدل های تومور جامد را هدف قرار دهد. قبل از تصمیم گیری در مورد آنتی ژن پروتئین WT1، انواع مختلفی از آنتی ژن ها را آزمایش کردیم. با استفاده از محصولات تضمین شده با کیفیت و همچنین آنتی ژن های مختلف مانند پپتید، کپتیواتور یا میکس پاپ، آنتی ژن با بیشترین تأثیر زمانی که به عنوان پروتئین مورد استفاده قرار می گرفت. در نتیجه، ما از پروتئین WT1 برای پالس آنتی ژن استفاده کردیم. گسترده ترین رویکرد مطالعه شده در درمان DC از mo-DC پالس شده با WT1 همراه با شیمی درمانی استفاده می کند [12]. ایمنی و ایمنی زایی mo-DC از طریق آزمایشات بالینی تایید شده است [13]. در حالی که سایر تحقیقات واکسن DC واکسن‌های خود را با استفاده از DC مشتق شده از مونوسیت از خون توسعه می‌دهند، ما پیش‌بینی کردیم که DC مشتق شده از سلول‌های بنیادی پتانسیل بیشتری خواهد داشت. علاوه بر این، مشخص است که cDC قدرت بیشتری نسبت به mo-DC دارد و ما را به سمت این تحقیق سوق می دهد. بنابراین، CDW ممکن است جایگزین بهتری برای mo-DC باشد، زیرا جزء اصلی آن cDC1 است، یک نوع فرعی DC با مؤثرترین توانایی ارائه متقابل. اگرچه فعالیت سیتوتوکسیک در سلول‌های T + گروه DC بدون پالس و گروه CDW مشابه بود، ما فرض می‌کنیم که این به این دلیل است که DC بدون پالس نیز نوعی از سلول‌های cDC1 است. صرف نظر از این، CDW ممکن است به طور موثری با افزایش جمعیت cDC1 یک پاسخ ایمنی قوی ضد تومور ایجاد کند. از طریق مطالعه پیش بالینی، سمیت دوز مکرر واکسن DC را آزمایش کردیم. روند توسعه و تولید CDW تأیید شده است، و ما امیدواریم که مطالعات بیشتری برای آزمایش اثرات بهبود یافته CDW انجام دهیم. در حالی که اثربخشی در شرایط آزمایشگاهی تایید شد، یک مطالعه سمیت دوز برای اعتبار سنجی اثر در داخل بدن انجام شد. هنگامی که نتایج کارآزمایی‌های بالینی با استفاده از CDW گزارش شد، ما قصد داریم تحقیقات خود را در جهتی هدایت کنیم که تحقیقات فعلی را بهبود بخشد.

منابع

1. Padma، VV مروری بر درمان هدفمند سرطان. BioMedicine 2015, 5, 19. [CrossRef] [PubMed]

2. Schirrmacher، V. واکسن‌های سرطان و ویروس‌های انکولیتیک عوارض جانبی بسیار کمتری در بیماران سرطانی نسبت به سایر درمان‌های سیستمیک دارند: یک تحلیل مقایسه‌ای. Biomedicines 2020، 8، 61. [CrossRef] [PubMed]

3. اسمیت، سی سی; سلیتسکی، اس آر. چای، اس. Armistead، PM; وینسنت، بی جی; Serody، JS آنتی ژن های اختصاصی تومور جایگزین. نات. Rev. Cancer 2019، 19، 465-478. [CrossRef] [PubMed]

4. لو، اچ. ژائو، ایکس. لی، ز. هو، ی. وانگ، H. از سلول های CAR-T تا سلول های CAR-NK: یک روش ایمونوتراپی در حال توسعه برای بدخیمی های خونی. جلو. اونکول. 2021, 11, 720501. [CrossRef]

5. چو، ج. گائو، اف. یان، م. ژائو، اس. یان، ز. شی، بی. لیو، ی. سلول های کشنده طبیعی: ایمونوتراپی امیدوارکننده برای سرطان. J. Transl. پزشکی 2022، 20، 240. [CrossRef] [PubMed]

6. Sabado, RL; بالان، اس. Bhardwaj، N. ایمونوتراپی مبتنی بر سلول های دندریتیک. Cell Res. 2017، 27، 74–95. [CrossRef] [PubMed]

7. ثبت اختراع، TA; پینیو، نماینده مجلس؛ اولیویرا، AA; اوانجلیستا، GCM; Bergami-Santos، PC; Barbuto، JAM سلول های دندریتیک انسانی: ناهمگنی و پتانسیل کاربرد بالینی آنها در ایمونوتراپی سرطان. جلو. ایمونول. 2019, 9, 3176. [CrossRef]

8. کولین، ام. Bigley، V. زیرمجموعه های سلول های دندریتیک انسانی: به روز رسانی. ایمونولوژی 2018، 154، 3-20. [CrossRef]

9. فیتزجرالد بوکارسلی، پی. دای، جی. سینگ، S. سلول های دندریتیک پلاسماسیتوئید و IFN نوع I: 50 سال سابقه همگرا. فاکتور رشد سیتوکین Rev. 2008، 19، 3-19. [CrossRef]

10. سگورا، ای. توزوت، م. بوهینوست، ا. کاپوچیو، آ. چیوکیا، جی. حسمالین، ع. دالود، م. سوملیس، وی. Amigorena، S. سلول های دندریتیک التهابی انسان تمایز سلولی Th17 را القا می کنند. مصونیت 2013، 38، 336-348. [CrossRef]

11. Geskin، LJ; دامیانو، جی جی؛ Patrone, CC; باترفیلد، ال. کرکوود، جی.ام. Falo, LD سه روش بارگذاری آنتی ژن در واکسن های سلول دندریتیک برای ملانوم متاستاتیک. ملانوما Res. 2018، 28، 211. [CrossRef] [PubMed]

12. گوا، ز. یوان، ی. چن، سی. لین، جی. ما، س. لیو، جی. گائو، ی. هوانگ، ی. چن، ال. چن، L.-Z. و همکاران پاسخ کامل بادوام به واکسن سلول دندریتیک حاوی نئوآنتی ژن به دنبال درمان ضد PD{5}} در سرطان متاستاتیک معده. Npj دقیق. اونکول. 2022، 6، 34. [CrossRef] [PubMed]

13. بول، KF; شرایبلت، جی. رابولد، ک. Wculek، SK; شوارتز، جی.کی. Dzionek، A.; تیجیرا، ا. کندلافت، LE; رومرو، پی. کوکوس، جی. و همکاران کاربرد بالینی ایمونوتراپی سرطان بر اساس سلول های دندریتیک در گردش طبیعی J. Immunother. سرطان 2019، 7، 109. [CrossRef] [PubMed]

14. کویا، ت. تاریخ، I. کاواگوچی، اچ. واتانابه، آ. ساکاموتو، تی. توگی، م. کاتو، جی تی. یوشیدا، ک. کوجیما، اس. یاناگیساوا، آر. و همکاران سلول های دندریتیک با تومور ویلمز 1 در کشت بهینه برای واکسیناسیون سرطان پیش پالس شده اند. Pharmaceutics 2020, 12, 305. [CrossRef] [PubMed]

15. ژو، ی. اسلون، ن. کریسیکوس، تی تی. کیریسیوک، او. Babcock, RL; مدیک، YB; لی، اچ اس. کلاینرمن، ES; کارآیی واکسن واتوویچ، SS در برابر سرطان اولیه و متاستاتیک با سلول‌های دندریتیک معمولی CD{2}} تولید شده در آزمایشگاه. J. Immunother. Cancer 2020, 8, e000474. [CrossRef]

16. کوئتو، اف. سانچو، دی. محور Flt3L/Flt3 در زیست‌شناسی سلول‌های دندریتیک و ایمونوتراپی سرطان. سرطان‌ها 2021، 13، 1525. [CrossRef]

17. یاناگیساوا، ر. کویزومی، تی. کویا، تی. سانو، ک. کویدو، اس. ناگای، ک. کوبایاشی، م. اوکاموتو، ام. سوگیاما، اچ. Shimodaira، S. WT{1}}واکسن سلولی دندریتیک پالسی همراه با شیمی درمانی برای سرطان پانکراس برداشته شده در مرحله اول مطالعه. ضد سرطان. Res. 2018، 38، 2217–2225. 18. اورسینی، جی. فایلی، ع. لجیتیمو، ا. ادینولفی، بی. رومانینی، آ. Consolini، R. Zoledronic اسید بلوغ سلول های دندریتیک مشتق از مونوسیت های انسانی را تعدیل می کند. انقضا Biol. پزشکی 2011، 236، 1420-1426. [CrossRef] [PubMed]

19. اشمیت، اس وی; نینو کاسترو، AC; شولتز، JL سلول های دندریتیک تنظیم کننده: چیزی بیش از فعال سازی سیستم ایمنی وجود دارد. جلو. ایمونول. 2012، 3، 274. [CrossRef]

20. تای، ی. وانگ، کیو. کورنر، اچ. ژانگ، ال. Wei, W. مکانیسم‌های مولکولی فعال‌سازی سلول‌های T توسط سلول‌های دندریتیک در بیماری‌های خودایمنی. جلو. فارماکول. 2018, 9, 642. [CrossRef]

21. الفی، ف. هو، پی.-سی. لو، W.-L. تصمیم گیری در تومورها ایمنی ضد تومور سلول T را کنترل می کند. Oncogene 2021، 40، 5253-5261. [CrossRef] [PubMed]

22. گرانوت، تی. سندا، تی. نجار، دی جی; ماتسوکا، ن. وینر، جی. گوردون، CL; میرون، م. کومار، BV; گریزمر، ا. هو، S.-H. و همکاران سلول های دندریتیک زیر مجموعه و پویایی بلوغ خاص بافت را در طول زندگی انسان نشان می دهند. مصونیت 2017، 46، 504-515. [CrossRef] [PubMed]

23. برتون، جی. لی، جی. ژو، YJ; شرایبر، جی جی; کلر، تی. پور، اس. آنانداساباپاتی، ن. شلزینگر، اس. کیسکی، م. لیو، ک. و همکاران پیش سازهای در حال گردش سلول های دندریتیک CD1c+ و CD{3}} انسانی. J. Exp. پزشکی 2015، 212، 401-413. [CrossRef] [PubMed]

24. توگس، اس. Burkhard، SH; آه، من. Vrohlings، M. Nussbaum، K. ووم برگ، ج. کولیگ، پ. Becher, B. بینش های جدید در مورد سرکوب تومور با واسطه IL-12-. مرگ سلولی متفاوت است. 2015، 22، 237-246. [CrossRef]

25. آشور، د. آرامپاتزی، پ. پاولوویچ، وی. فورستنر، کو. کایشو، تی. بیلهک، ا. ارهارد، اف. Lutz، MB IL-12 از cDC1 درون زا، و نه DC واکسن، برای القای Th1 مورد نیاز است. JCI Insight. 2020, 5, e135143. [CrossRef]

26. جورگووانوویچ، دی. آهنگ، م. وانگ، ال. Zhang، Y. نقش IFN- در پیشرفت و رگرسیون تومور: یک بررسی. بیومارک. Res. 2020، 8، 49. [CrossRef]

27. پسر، ک.-ج. چوی، KR; لی، اس جی; لی، H. مرگ سلولی ایمونوژنیک ناشی از جین سنوزید Rg3: اهمیت در ایمونوتراپی ضد تومور مبتنی بر سلول دندریتیک. شبکه ایمنی 2016، 16، 75-84. [CrossRef]

28. Jongbloed، SL; کاسیانوس، ای جی; مک دونالد، کی جی. کلارک، جی. جو، ایکس. فرشته، م. چن، سی.-جی. دانبار، روابط عمومی؛ وادلی، آر.بی. جیت، وی. و همکاران سلول‌های دندریتیک CD{2}} انسانی (BDCA-3)+ (DCs) یک زیر مجموعه DC میلوئیدی منحصربه‌فرد را نشان می‌دهند که آنتی‌ژن‌های سلول نکروزه را متقاطع ارائه می‌کند. J. Exp. پزشکی 2010، 207، 1247-1260. [CrossRef]

29. نوگوچی، ا. کانکو، تی. کامیگاکی، تی. فوجیموتو، ک. اوزاوا، م. سایتو، م. آریوشی، ن. Goto, S. Zoledronate-activated V9 δ T ایمونوتراپی مبتنی بر سلول T امکان پذیر است و آسیب سلول های δ T را در بیماران مبتلا به تومورهای جامد بازیابی می کند. سیتوتراپی 2011، 13، 92-97. [CrossRef]

30. هویت، RE; لیسینا، ا. گرین، AE؛ اسلای، ES; قیمت، DA; Sewell، AK پاسخ فاز حاد بیس فسفونات: تولید سریع و فراوان سیتوکین های پیش التهابی توسط سلول های T gd خون محیطی در پاسخ به آمینو بیس فسفونات ها توسط استاتین ها مهار می شود. کلین انقضا ایمونول. 2005، 139، 101-111. [CrossRef]

31. ژوئن، CH; اوکانر، آر اس؛ Kawalekar، OU; قاسمی، س. Milone، ایمونوتراپی سلول T MC CAR برای سرطان انسان. Science 2018, 359, 1361–1365. [CrossRef] [PubMed]

32. Sterner, RC; استرنر، RM CAR-T سلول درمانی: محدودیت های فعلی و استراتژی های بالقوه. Blood Cancer J. 2021, 11, 69. [CrossRef] [PubMed]

33. زی، جی. دونگ، اچ. لیانگ، ی. ژامبون، JD; رضوان، ر. چن، J. سلول های CAR-NK: یک ایمونوتراپی سلولی امیدوارکننده برای سرطان. EBioMedicine 2020, 59, 102975. [CrossRef] [PubMed]

34. ژانگ، ال. منگ، ی. فنگ، ایکس. هان، Z. سلول های CAR-NK برای ایمونوتراپی سرطان: از نیمکت تا کنار تخت. بیومارک. Res. 2022، 10، 12. [CrossRef] [PubMed]

35. معروفی، ف. متولی، ر. سافونوف، ویرجینیا؛ تانگاولو، ال. یوماشف، ای وی. اسکندر، م. شمالی، ن. Chartrand، MS; پاتک، ی. جراحیان، م. و همکاران سلول های CAR T در تومورهای جامد: چالش ها و فرصت ها سلول های بنیادی Res. آنجا 2021، 12، 81. [CrossRef]

36. سانتوماسو، بی. باچیر، سی. وستین، جی. رضوانی، ک. Shpall، EJ طرف دیگر درمان با سلول T CAR: سندرم آزادسازی سیتوکین، سمیت عصبی، و بار مالی. صبح. Soc. کلین اونکول. آموزش. کتاب 2019، 39، 433-444. [CrossRef]

37. لیو، اس. گالات، وی. گالات، ی. لی، YKA؛ وین رایت، دی. ایمونوتراپی سرطان مبتنی بر سلول Wu، J. NK: از زیست شناسی پایه تا توسعه بالینی. J. هماتول. اونکول. 2021، 14، 7. [CrossRef]

38. استرلتسووا، م. اوستیوزانینا، م. بارسوف، ای. کوست، اس. ولیچینسکی، ر. Kovalenko، E. تلومراز رونوشت معکوس، تکثیر و طول عمر سلول های NK انسانی را بدون جاودانگی افزایش می دهد. Biomedicines 2021, 9, 662. [CrossRef]

39. Garris, CS; Arlauckas، SP; کوهلر، RH; ترفنی، نماینده مجلس؛ گارن، اس. پیوت، سی. انگبلوم، سی. Pfirschke، C. سیویکی، ام. گونگابیسون، جی. و همکاران ایمونوتراپی موفقیت آمیز ضد PD{2}} مستلزم تداخل سلول T-سلول دندریتیک شامل سیتوکین های IFN- و IL-12 است. مصونیت 2018، 49، 1148-1161.e7. [CrossRef]

40. Thongchot، S. جیراپونگ واتانا، ن. Luangwattananun، P. Chiraphapphaiboon، W. چوانگچوت، ن. سا-نگوانراکسا، دی. ای شارونات، پ. تووجیت، پ. Yenchitsomanus، P.-T.; Thuwajit، C. انتقال پذیرفته شده سلول های T ضد نوکلئولین همراه با مهار PD-L1 در برابر سرطان پستان سه گانه منفی. مول. سرطان وجود دارد. 2022، 21، 727-739. [CrossRef]

شما نیز ممکن است دوست داشته باشید