خلاصه

پیشینه/هدف:الیگوساکاریدهای هیالورونان (HA) در چندین فرآیند بیولوژیکی، در درجه اول بازسازی کلاژن و بهبود زخم نقش دارند. بازسازی کلاژن در پیری پوست به تاخیر می افتد و باعث ایجاد چین و چروک می شود. این مطالعه با هدف بررسی اثر الیگوساکاریدهای 2-kDa HA (HA2k) بر چین و چروک از طریق نفوذ از لایه شاخی و ارتقاء بازسازی کلاژن انجام شد.

گلیکوزید سیستانچ همچنین می تواند فعالیت SOD را در بافت های قلب و کبد افزایش دهد و به طور قابل توجهی محتوای لیپوفوسین و MDA را در هر بافت کاهش دهد و به طور موثر رادیکال های مختلف اکسیژن فعال (OH-، H2O2 و غیره) را از بین ببرد و از آسیب DNA ناشی از آن محافظت کند. توسط رادیکال های OH گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید سیستانچ دارای توانایی مهار قوی رادیکال های آزاد، توانایی کاهش بالاتری نسبت به ویتامین C، بهبود فعالیت SOD در سوسپانسیون اسپرم، کاهش محتوای MDA و اثر محافظتی خاصی بر عملکرد غشای اسپرم هستند. پلی ساکاریدهای سیستانچ می توانند فعالیت SOD و GSH-Px را در گلبول های قرمز و بافت ریه موش های آزمایشگاهی مسن ناشی از D-گالاکتوز افزایش دهند و همچنین محتوای MDA و کلاژن را در ریه و پلاسما کاهش دهند و محتوای الاستین را افزایش دهند. اثر پاک کنندگی خوب بر روی DPPH، طولانی شدن زمان هیپوکسی در موش های پیر، بهبود فعالیت SOD در سرم، و به تاخیر انداختن انحطاط فیزیولوژیکی ریه در موش های آزمایشگاهی پیر. و این پتانسیل را دارد که دارویی برای پیشگیری و درمان بیماری های پیری پوست باشد. در عین حال، اکیناکوزید موجود در سیستانچ توانایی قابل توجهی در از بین بردن رادیکال های آزاد DPPH دارد و توانایی حذف گونه های فعال اکسیژن و جلوگیری از تخریب کلاژن ناشی از رادیکال های آزاد را دارد و همچنین اثر ترمیم خوبی بر آسیب آنیون رادیکال آزاد تیمین دارد.

برای مشاهده محصولات آنتی اکسیدان کلیک کنید

【برای اطلاعات بیشتر: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

مواد و روش ها:یک مدل پوست سه بعدی و پوست بریده شده انسان برای ارزیابی نفوذ HA2k نشاندار شده با فلورسین استفاده شد. اثر HA2k بر متابولیسم کلاژن با اندازه‌گیری سطح پروتئین پروکلاژن نوع 1 (COL1A1) و ماتریکس متالوپروتئیناز-1 (MMP-1) در مدل پوست سه‌بعدی ارزیابی شد. 0.1 درصد محلول HA2k و کنترل وسیله نقلیه به مدت 8 هفته برای ارزیابی تراکم کلاژن پوستی روی ساعد انسان اعمال شد. برای ارزیابی اثر HA2k بر عمق چین و چروک های صورت، یک کارآزمایی تصادفی کنترل شده با لوسیون HA2k و لوسیون وسیله نقلیه 0.1 درصد به مدت 8 هفته انجام شد.

نتایج:نفوذ HA2k از طریق لایه شاخی توسط میکروسکوپ فلورسنت تایید شد. هر دو COL1A1 و MMP{3}} توسط برنامه HA2k در فرهنگ مدل پوست سه بعدی تنظیم مثبت شدند. چگالی کلاژن برای ساعد تحت درمان با HA2k بیشتر از ساعد تحت درمان با خودرو پس از 4 هفته بود. حداکثر عمق چین و چروک در چین نازولبیال و ناحیه پای کلاغی در گروه لوسیون HA2k به طور قابل توجهی کمتر از گروه کنترل بود.

نتیجه:HA2k به لایه شاخی نفوذ کرد، سنتز و تخریب کلاژن را به طور همزمان فعال کرد و چین و چروک ها را بهبود بخشید.

کلید واژه ها

ضد پیری، کشت سلولی، بازسازی کلاژن، مطالعه انسانی، هیالورونان

1|مقدمه

ماتریکس خارج سلولی (ECM) ترکیبی از ماکرومولکول‌ها، شامل پروتئین‌ها و گلیکوزآمینوگلیکان‌ها است که پشتیبانی مکانیکی برای سلول‌های اطراف فراهم می‌کند. در بافت پوست، ECM به خواص فیزیکی پوست کمک می کند. به عنوان مثال، کلاژن، جزء اصلی ECM پوست، به یکپارچگی، الاستیسیته و صافی پوست کمک می کند. از نظر فیزیولوژیکی، کلاژن پوست با تخریب کلاژن قدیمی و سنتز مجدد کلاژن جدید در فرآیندی به نام کلاژن حفظ می شود. با این حال، چرخه بازسازی کلاژن می تواند در پیری پوست به تعویق بیفتد و منجر به چین و چروک، افتادگی و کاهش خاصیت ارتجاعی شود. بنابراین، بازسازی کلاژن یک هدف امیدوارکننده برای ضد پیری است. رویکردی که به طور بالقوه ECM را هدف قرار می دهد می تواند برای مدیریت این مشکلات بهتر باشد زیرا رویکردهای سطحی بر ECM تأثیر نمی گذارد. میکرونیدلینگ روشی است که ECM را برای ترویج بازسازی کلاژن پوست هدف قرار می دهد. با این حال، این یک روش نسبتا تهاجمی است.

هیالورونان (HA)، یک پلی ساکارید مشتق شده بیولوژیکی، نیز جزء ECM است. HA ابتدا در بدن زجاجیه چشم و بعداً در مایع سینوویال، بند ناف و پوست کشف شد. وزن مولکولی HA با توجه به نوع بافت و حالت بیولوژیکی آن متفاوت است و از 1 کیلو دالتون تا 3000 کیلو دالتون متغیر است. HA به عنوان یک بالشتک، روان کننده و مرطوب کننده عمل می کند. بنابراین، HA با وزن مولکولی بالا در زمینه لوازم آرایشی برای حفظ محتوای آب لایه شاخی استفاده می شود. از آنجایی که ماکرومولکول‌ها نفوذپذیری بسیار محدودی از طریق پوست دارند، تلاش‌هایی برای بهبود نفوذپذیری HA با تجزیه HA به قطعات کوچک صورت گرفته است که نفوذ آنها از طریق لایه شاخی تایید شده است.

علاوه بر عملکرد فیزیکی، عملکرد بیولوژیکی HA یکی از موضوعات اخیر تحقیق بوده است. برخی گزارش های قابل توجه در مورد عملکرد بیولوژیکی HA به عنوان جزئی از طاقچه سلول های بنیادی و طول عمر فوق العاده موش های مول برهنه منتشر شده است. هنگامی که عملکردهای بیولوژیکی آن مورد بحث قرار می گیرد، وزن مولکولی HA باید در نظر گرفته شود. HA در پوست عموماً در حالت با وزن مولکولی بالا وجود دارد و طبق گزارشات، ثبات بافت را حفظ می کند. در مقابل، HA با وزن مولکولی پایین چندین فرآیند بیولوژیکی را فعال می‌کند.7 در گزارش‌های قبلی، تتراساکارید HA سنتز HA و کلاژن نوع I را در کراتینوسیت‌ها و فیبروبلاست‌ها تنظیم مثبت کرد، نشانگرهای تمایز را در کراتینوسیت‌ها القا کرد،9 و آسیب را در کراتینوسیت‌ها بهبود بخشید. به طور خاص، الیگوساکاریدهای زیر 10 کیلو دالتون در درجه اول فرآیندهای بهبود زخم، مانند سنتز ECM، رگ زایی، مهاجرت سلولی، و تکثیر را ترویج می کنند. بهبود زخم و بازسازی کلاژن ارتباط نزدیکی با هم دارند و یک 12-مر (یعنی تقریباً 2 کیلو دالتون) HA کلاژن نوع I و متالوپروتئیناز ماتریکس 1 (MMP{17}}) را به طور همزمان در فیبروبلاست‌های کشت شده تنظیم می‌کند، اما اثر در مورد انسان باید روشن شود.

گزارش هایی از لوازم آرایشی HA گزارش شده است که اثرات ضد چروک را نشان می دهد. یک کرم پوستی با 50- کیلو دالتون HA عمق چین و چروک افراد زن 30 تا 60 ساله را در یک کارآزمایی مقایسه تصادفی نیمه‌سویه بهبود داد. -65-آزمودنی های یک ساله، که منجر به بهبود نمرات پرسشنامه در عمق چین و چروک شد. هیچ داده ای در مورد پوست انسان وجود ندارد. علاوه بر این، اثر قطعات HA بر تراکم کلاژن در انسان هنوز مشخص است.

ما فرض کردیم که الیگوساکاریدهای HA در لایه شاخی نفوذ می کنند، بازسازی کلاژن را تقویت می کنند و چین و چروک ها را به عنوان یک اثر ضد پیری بهبود می بخشند. این مطالعه با هدف ارزیابی اثرات 2-kDa HA (HA2k) بر بازسازی کلاژن و شرایط پوست از طریق مطالعات in vitro و in vivo انجام شد. ابتدا، نفوذ HA2k در یک مدل پوست بازسازی شده و پوست بریده شده انسان ارزیابی شد. پس از آن، اثرات بر بازسازی کلاژن در شرایط آزمایشگاهی و افراد انسانی مورد بررسی قرار گرفت. در نهایت، یک مقایسه تصادفی نیمه جانبی لوسیون پوستی حاوی HA2k و لوسیون کنترل در بین 21 نفر برای ارزیابی اثرات بر روی چین و چروک های پوست انجام شد.

2|مواد و روشها

این مطالعه توسط اعلامیه هلسینکی انجام شد و توسط کمیته اخلاق پزشکی Kewpie Corp. و هیئت بررسی نهادی DERMAPRO Ltd. به ترتیب با شماره های تأیید 17-4 و 1-220 777-AN-02-DICN18228 تأیید شد. . این مطالعه با رضایت داوطلبانه آزمودنی ها انجام شد.

2.1| معرفها

HAbooster™، یک معرف HA2k با درجه آرایشی، از Kewpie Corp. (ژاپن) به دست آمد.

2.2|نفوذ پوستی HA2k در اپیدرم انسانی کشت شده سه بعدی و پوست بریده شده انسان

طبق گزارش قبلی، نفوذ HA2k با استفاده از یک سلول انتشاری نوع فرانتس ارزیابی شد. 12 نمونه HA نشاندار شده با فلورسین (Fl-) در<1.25 mg/ml HA in water and dimethyl sulfoxide mixed at a ratio of 2:1 (v:v). Next, 50 mg/ml each of 5-amino fluorescein, cyclohexyl isocyanide, and acetaldehyde was added to bind fluorescein to HA. After 5 h of reaction at room temperature in the dark, the sample was purified by gel filtration chromatography using a PD Midi Trap G-10 (GE Healthcare,) with an exclusion lower limit of 700 M r. The obtained FL-HA solution was lyophilized and used in the following experiments. For evaluation with reconstituted skin by cell culture, a 3D skin model EPI-606X (Mat Tek,), which was confirmed to retain barrier function, was fixed in a Franz-type diffusion cell. The three-dimensional (3D) skin model was precultured for 16–18 h at 37°C, 5% CO2 in the medium provided by the supplier. After the equilibration process, the medium was changed for testing. A 1% solution of Fl-HA samples of 2 or 8 kDa was applied to the upper compartment and then incubated for 5 h. After washing four times with phosphate-buffered saline, the specimen was embedded in OCT compound (Sakura Finetek,) and frozen by using dry ice/acetone for the preparation of the tissue section. For evaluation on human skin, dermatomed abdominal skin from a 34-year-old Caucasian woman (Biopredic International, France) was fixed in a Franz-type diffusion cell. A 0.1% Fl-HA solution (molecular weight, 2 or 1000 kDa) was applied to the human skin. After incubation at 32°C for 24 h, the tissue was subjected to cryosection preparation as described above. The tissue slides were observed under a fluorescent microscope.

2.3|ارزیابی متابولیسم کلاژن در مدل پوست سه بعدی و پوست بریده شده انسان

یک مدل پوست سه بعدی برای ارزیابی اثرات HA2k بر متابولیسم کلاژن استفاده شد. به طور خلاصه، یک مدل با ضخامت کامل (EFT{4}}، Mat Tek) متشکل از کراتینوسیت ها و فیبروبلاست ها در یک میکروگرم بر میلی لیتر HA2k- کشت داده شد. حاوی محیط پس از 48 ساعت، محیط تهویه‌شده جمع‌آوری شد و سطح پروکلاژن نوع 1 (COL1A1) و MMP اندازه‌گیری شد. بافت برای تجزیه و تحلیل ایمونوهیستولوژیک پردازش شد. کلاژن در بافت ها با استفاده از رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی COL1A1 بر روی اسلایدهای بافتی مقاطع پارافین تثبیت شده با فرمالین ارزیابی شد. برش ها با پروتئیناز K به مدت 10 دقیقه در دمای 37 درجه برای بازیابی آنتی ژن تیمار شدند. پس از انسداد، آنتی بادی های مونوکلونال ضد COL1A1 (Abcam) در دمای 4 درجه یک شبه انکوبه شدند. سپس اسلایدها با Alexa Fluor® 488 Goat Anti-Rabbit IgG (Abcam) در دمای اتاق به مدت 2 ساعت انکوبه شدند. هسته با یدید پروپیدیوم ضد رنگ آمیزی شد. مقاطع زیر میکروسکوپ فلورسنت مشاهده شدند.

2.4|بررسی تراکم کلاژن پوست، رطوبت و توموگرافی در افراد انسانی

HA2k به صورت موضعی روی پوست انسان اعمال شد تا عملکرد آن به عنوان یک ماده فعال ارزیابی شود. هشت نفر (دو زن و شش مرد؛ سن، 26 تا 39 سال) به طور داوطلبانه در مطالعه ثبت نام کردند. ساعد آنها به دو ناحیه به ابعاد 2 × 2 سانتی متر تقسیم شد تا نمونه ها دو بار در روز اعمال شوند. 0.1 درصد محلول HA2k و کنترل وسیله نقلیه به طور جداگانه در دو ناحیه اعمال شد. در هفته های 0، 4 و 8، نمره کلاژن، رطوبت پوست و زبری پوست بررسی شد. آزمودنی ها تحت یک جو کنترل شده در دمای 1±23 درجه و رطوبت نسبی 2±55 درصد به مدت 20 دقیقه سازگار شدند. این دوره سازگاری با اندازه گیری دنبال شد.

2.5|ارزیابی نمره کلاژن

از اولتراسوند برای اندازه گیری تراکم کلاژن پوست استفاده شد (DermaLab، Cortex Technology، دانمارک). کاوشگر بر روی لوسیون HA2k و مکان های کنترل وسیله نقلیه برای اندازه گیری نمرات کلاژن استفاده شد. در مجموع پنج نقطه، شامل چهار گوشه و مرکز هر سایت، اندازه گیری شد و مقدار متوسط ​​محاسبه شد.

2.6|ارزیابی رطوبت پوست

رطوبت پوست با استفاده از روش امپدانس (SKICON، Yayoi،) اندازه‌گیری شد. در مجموع پنج نقطه در چهار گوشه و مرکز اندازه گیری شد. مقدار متوسط ​​محاسبه شد.

2.7|ارزیابی زبری پوست

زبری پوست با آنالیز بصری (VisioScan، Courage plus Khazaka Electronic، آلمان) اندازه‌گیری شد. مقدار متوسط ​​محاسبه شد.

2.8|بررسی چین و چروک، افتادگی و قابلیت ارتجاعی پوست در افراد انسانی

با توجه به اینکه کلاژن پوستی با چین و چروک، افتادگی و خاصیت ارتجاعی پوست مرتبط است، کاربرد HA2K در محصولات آرایشی مورد ارزیابی قرار گرفت. بیست و یک آزمودنی بر اساس معیارهای زیر ثبت‌نام شدند: زنان سالم با چین‌وچروک‌های خفیف تا متوسط ​​با ارزیابی تصویری و تصویری از درجه‌های 1 تا 3 چین و چروک طبق دستورالعمل‌های درجه‌بندی چین و چروک انجمن علوم آرایشی ژاپن، داشتن چین‌های نازولبیال، نه باردار. نه پرستاری و نه داشتن حساسیت و نه حساسیت بیش از حد پوست. در طول این دوره آزمایشی، آزمودنی‌ها از هیچ محصول آرایشی، ابزار زیبایی، یا روش‌های مراقبت از پوست به جز مقاله آزمایشی استفاده نکردند. محصولات نمونه ارائه شده به عنوان لوسیون دو بار در روز (صبح و عصر) استفاده شد. فرمولاسیون لوسیون ها در جدول 1 نشان داده شده است. پس از شستن صورت، لوسیون ها اعمال شد و در صورت لزوم، لوسیون شیری و کرم مشخص شده استفاده می شود. لوسیون HA2k در یک طرف و محصول کنترل در طرف دیگر اعمال شد. افراد توسط یک سیستم تجزیه و تحلیل تصویر سه بعدی برای ارزیابی پای کلاغ، چین بینی، افتادگی پوست و خاصیت ارتجاعی در ابتدا ({9}} هفته)، 4 هفته و 8 هفته پس از درمان مورد بررسی قرار گرفتند. همه اندازه‌گیری‌ها در دمای نسبی (20-24 درجه) و رطوبت (45-55 درصد) انجام شد.

2.9|اندازه گیری پارامترهای چین و چروک

پارامترهای چین و چروک پای کلاغ و چین بینی با استفاده از آنالیز بصری (PRIMOS® Premium and Lite, GFMesstechnik,) ارزیابی شد.17 تصویر در همان ناحیه در ابتدا، 4 و 8 هفته پس از درمان با استفاده از نرم افزار (Primos) آنالیز شد. نسخه 5.8 E.).

2.10|اندازه گیری خاصیت ارتجاعی پوست

طبق گزارش قبلی، خاصیت ارتجاعی پوست با روش مکش (Cutometer® MPA580، Courage plus Khazaka electronic) اندازه‌گیری شد. به طور خلاصه، پوست به مدت 2 ثانیه به داخل دهانه پروب در فشار 450 بار کشیده شد. پس از آن، فشار منفی به مدت 2 ثانیه خاموش شد و پوست اجازه یافت تا به شکل اولیه خود بازگردد. سه تکرار در یک سیکل اندازه گیری انجام شد. خاصیت ارتجاعی پوست روی گونه با پارامترهای R2 در ابتدا، 4 و 8 هفته پس از درمان بررسی شد.

2.11|اندازه گیری افتادگی پوست

افتادگی پوست روی گونه با استفاده از روش توپوگرافی Moire (F-ray®, Beyoung,19) ارزیابی شد که یک روش مورفومتریک سه بعدی است که در آن نقشه‌های کانتور از حاشیه‌های تداخلی همپوشانی ایجاد می‌شوند که هنگام روشن شدن یک جسم توسط یک جسم توسط نورپردازی شده است. نور منسجم الگوی Moire روی گونه گرفته شد و زاویه ایجاد شده با کشیدن دو خط در انتهای بینی با استفاده از نرم افزار (Image-Pro Plus®، MediaCybernetics) در ابتدا، 4 و 8 هفته پس از درمان مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.

2.12|تحلیل آماری

تجزیه و تحلیل آماری با استفاده از نرم افزار SPSS® (IBM) انجام شد. آزمون U Mann-Whitney برای ارزیابی اثر HA2k بر بازسازی کلاژن در شرایط آزمایشگاهی انجام شد. اثر HA2k بر کلاژن در افراد انسانی با استفاده از آزمون t زوجی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. در مطالعات انسانی که اثر HA2k را بر روی چین و چروک، افتادگی و قابلیت ارتجاعی پوست ارزیابی کردند، از آزمون Shapiro-Wilks یا کشیدگی و چولگی برای تست نرمال بودن استفاده شد. تجزیه و تحلیل آماری متغیرهای پارامتری با استفاده از آنالیز واریانس با اندازه‌های مکرر انجام شد. اگر مقدار ناپارامتریک بود، ابتدا همه با استفاده از آزمون رتبه علامت دار Wilcoxon با تصحیح بونفرونی مقایسه شدند. تجزیه و تحلیل آماری برای مقایسه بین سایت‌ها با اندازه‌گیری‌های مکرر ANOVA یا ANCOVA با استفاده از مقدار تغییرات از پایه تا 4 و 8 هفته پس از درمان انجام شد. یک مقدار p از<0.05 was considered to be indicative of statistical significance. Change from baseline (%)   was defined as follows: (Baseline − After treatment)/Baseline × 100.

3|نتایج

3.1|نفوذ پوست HA2k

در یک مدل پوست سه بعدی، HA2k نشاندار شده با فلورسئین از لایه شاخی (شکل 1) عبور کرد، در حالی که 8-kDa HA اینطور نبود. در پوست انسان، HA2k نشاندار شده با فلورسئین به درم نفوذ کرد. 1000- کیلو دالتون HA از لایه شاخی عبور نکرد. این نتایج نشان می دهد که در مقایسه با وزن مولکولی بزرگتر HA، HA2k دارای نفوذپذیری پوستی بالایی است.

3.2|اثر HA2k بر متابولیسم کلاژن

در یک مدل پوست سه بعدی، محتوای پروتئین هر دو COL1A1 و MMP{4}} در محیط شرطی شده با افزودن HA2k افزایش یافت (شکل 2). بنابراین، فرض بر این بود که HA2k به طور همزمان تولید COL1A1 و MMP را ترویج می‌کند.

3.3|اثر HA2k بر محتوای کلاژن و وضعیت پوست در افراد انسانی

در مطالعات انسانی، نمرات کلاژن پوستی پس از 4 هفته در محلی که محلول 0}.1 درصد HA2k استفاده شده بود بیشتر از محلی بود که محلول کنترل استفاده شده بود (شکل 3). علاوه بر این، وضعیت محتوای آب پوست و زبری پوست پس از 8 هفته در محل تیمار شده با محلول HA2k نسبت به محل درمان شده با محلول شاهد بهتر بود. بنابراین، پیشنهاد شد که HA2k باعث تولید کلاژن در پوست انسان و بهبود وضعیت آن می شود.

3.4|اثر HA2k بر چین و چروک، افتادگی و خاصیت ارتجاعی پوست در افراد انسانی

در آزمایش انسانی، حداکثر عمق پنجه کلاغی و چین و چروک‌های نازولبیال در 4 هفته و 8 هفته در سمتی که با لوسیون 0. 1 درصد درمان شده بود کمتر از سمتی بود که با لوسیون کنترل درمان شده بود (شکل 4). . افتادگی پوست در سمت درمان شده با لوسیون HA2k پس از 4 هفته نسبت به ابتدای مطالعه بهبود یافت. خاصیت ارتجاعی پوست پس از 4 و 8 هفته در سمت درمان شده با لوسیون HA2k بهبود یافت، در حالی که تنها پس از 8 هفته در سمت درمان شده با لوسیون کنترل بهبود یافت. این نتایج نشان می دهد که لوسیون HA2k چین و چروک، افتادگی و قابلیت ارتجاعی پوست را بهبود می بخشد.

4|بحث

گزارش شده است که چین بینی یکی از قوی ترین عواملی است که بر فاصله بین سن واقعی فرد و سن درک شده تأثیر می گذارد. تزریق فیلر یک روش رایج برای بهبود چین بینی است. با این حال، اثر و ایمنی به تکنیک پزشکان بستگی دارد. برخی از عوارض جانبی شدید تزریق ناشی از انسداد عروقی که منجر به نکروز پوست و کوری می شود گزارش شده است. 20 HA2k یک گزینه ایمن تر و کمتر تهاجمی برای بهبود چین بینی است. علاوه بر این، HA2k به عنوان یک لوسیون فرموله شده در این مطالعه آزمایش شد و قرار بود یک ماده آرایشی فعال تر (ACI) باشد.

چین نازولبیال به دلیل افزایش سن در درم ایجاد می شود و بهبود آن با نزدیک شدن به لایه بالایی اپیدرم دشوار است. برای رساندن ACI ها به لایه های عمیق تر، مانند اپیدرم و درم، لازم است از طریق لایه شاخی نفوذ کند. قبلا،<300-kDa HAs have been shown to permeate through the stratum corneum of excised human skin.21 It is, therefore, reasonable that HA2k permeates through the stratum corneum. Interestingly,   a 1200-kDa HA has been reported to permeate through the stratum corneum of excised skin when polyion complex particles were constructed with a specific polycation.22 It is suggested that higher transdermal absorption of HA2k would be achieved by optimizing the formulation.

برخی گزارش ها بیان کرده اند که ACI ها سنتز کلاژن را تنظیم می کنند. ما قبلاً در مورد چنین ACI هایی از جمله تتراساکاریدهای HA، 8 پپتید سویا و پپتیدهای کلاژن گزارش داده بودیم. HA2k منحصر به فرد است زیرا سنتز و تخریب کلاژن را به طور همزمان تنظیم می کند. نیاز به روشن شدن مکانیسم تنظیم مثبت COL1A1 و MMP{4}} در مطالعات آینده وجود دارد.

گزارش شده است که HA با وزن مولکولی کم باعث ایجاد التهاب در پوست می شود. با این حال، مکانیسم عمل بحث برانگیز است. مطالعه دیگری با استفاده از اپیدرم بازسازی شده گزارش داد که یک HA با وزن مولکولی کم التهابی است. در مطالعه انسانی ما، هیچ عارضه جانبی، از جمله علائم التهابی، مشاهده نشد. وزن مولکولی کم ممکن است فقط در شرایط آزمایشگاهی، بدون درم، سیگنال‌های التهابی را القا کند. تحت شرایط پیچیده تر، مانند پوست انسان، تداخل بین سلول های مختلف بافت رخ می دهد و سیگنال های التهابی لغو می شود. قابل توجه است که یک مطالعه اخیر نشان داد که تکه تکه شدن HA درون زا باعث ایجاد پاسخ های التهابی می شود، در حالی که HA های اگزوژن با وزن مولکولی پایین (2800– 60 000 Da) این کار را نمی کنند.

غلظت HA2k مورد استفاده در این مطالعه انسانی 0.1 درصد بود، اما دوز بهینه آن هنوز مشخص است. اگر دوزهای پایین‌تر مؤثر باشند، HA2k می‌تواند به طور گسترده‌تری مورد استفاده قرار گیرد. علاوه بر این، ترکیب با HA با وزن مولکولی بالاتر، تولید لوازم آرایشی موثرتری را برای ضد پیری امکان پذیر می کند، زیرا HA های بزرگتر مرطوب کننده های بهتری هستند. یک پزشک.

5|نتیجه گیری

در این مطالعه، ما اثر HA2k را بر بهبود چین و چروک های پوست با استفاده موضعی روی پوست انسان بررسی کردیم. چین نازولبیال و پای کلاغی با لوسیون HA2k 0.1 درصد به طور قابل توجهی بهبود یافت. اولین مرحله در مکانیسم پیشنهادی، نفوذ HA2k از طریق لایه شاخی است که ما با انجام آزمایش نفوذ در یک مدل پوست سه بعدی و پوست بریده شده انسان تایید کردیم. مرحله دوم مکانیسم، فعال‌سازی بازسازی کلاژن توسط HA2k است که با انجام یک ELISA روی COL1A1 و MMP{9}} در یک مدل پوست سه‌بعدی و با تجزیه و تحلیل اولتراسوند چگالی کلاژن در یک مطالعه آزمایشی در انسان نشان دادیم. فاعل، موضوع. روی هم رفته، HA2k یک ماده امیدوارکننده برای لوازم آرایشی ضد پیری است.

مشارکت های نویسنده

YA و YT تحقیق را طراحی کردند. YA، HK و MK آزمایشاتی را انجام دادند. YA و SS داده ها را تجزیه و تحلیل کردند و SS نسخه خطی را با نظارت TY نوشت همه نویسندگان نسخه نهایی را خوانده و تأیید کرده اند.

تصدیق

کمک نوشتن علمی توسط Crimson Interactive Pvt ارائه شد. Ltd.

تضاد منافع 

YT و MK اعلام می کنند که هیچ منافع رقابتی ندارند. YA، SS، و HK کارمندان Kewpie Corporation، تامین کننده HA هستند.

بیانیه در دسترس بودن داده ها

داده‌هایی که یافته‌های این مطالعه را پشتیبانی می‌کنند، در صورت درخواست معقول از نویسنده مسئول در دسترس هستند.

تایید اخلاقی

این مطالعه توسط اعلامیه هلسینکی انجام شد و توسط کمیته اخلاق پزشکی Kewpie Corp. و هیئت بازبینی سازمانی DERMAPRO Ltd. با شماره های تأیید 17-4 و 1-220777-AN-02-DICN18228 تأیید شد. ، به ترتیب

منابع

1. Arseni L، Lombardi A، Orioli D. از ساختار تا فنوتیپ: تأثیر تغییرات کلاژن بر سلامت انسان. Int J Mol Sci. 2018؛ 19:1407.

2. Page-McCaw A، Ewald AJ، Werb Z. ماتریکس متالوپروتئینازها و تنظیم بازسازی بافت. Nat Rev Mol Cell Biol. 2007؛ 8: 221-233.

3. لی دی اچ، اوه جی اچ، چونگ جی اچ. گلیکوزامینوگلیکان و پروتئوگلیکان در پیری پوست J Dermatol Sci. 2016؛ 83: 174-181.

4. Fraser JR، Laurent TC، Laurent UB. هیالورونان: ماهیت، توزیع، عملکرد و گردش آن. J Intern Med. 1997؛ 242: 27-33.

5. Kage M، Tokudome Y، Hashimoto F. نفوذ تتراساکاریدهای هیالورونان از طریق پوست موش بدون مو: یک مطالعه in vitro و in vivo. Arch Dermatol Res. 2013؛ 305: 69-77. doi:10.1007/ s00403-012-1252-2

6. Gesteira TF، Sun M، Coulson-Thomas YM، و همکاران. ریزمحیط غنی از هیالورونان در طاقچه سلول های بنیادی لیمبال تمایز سلول های بنیادی لیمبال را تنظیم می کند. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2017؛ 58: 4407-4421.

7. کاواسی RM، بردیاکی A، Spyridaki I، و همکاران. متابولیسم HA در هموستاز پوست و بیماری های التهابی مواد غذایی شیمیایی سم. 2017؛ 101: 128-138.

8. Kage M، Tokudome Y، Matsunaga Y، Hariya T، Hashimoto F. بیان mRNA هیالورونان سنتاز و کلاژن نوع I توسط تتراساکاریدهای هیالورونان در فیبروبلاست های پوستی طبیعی انسان. J ژاپنی Cosmet Sci Soc. 2013؛ 37: 1-5.

9. Kage M، Tokudome Y، Matsunaga Y، Hariya T، Hashimoto F. اثر تتراساکاریدهای هیالورونان بر تمایز اپیدرمی در کراتینوسیت های اپیدرمی طبیعی انسان. Int J Cosmet Sci. 2014؛ 36: 109- 115.

10. Pavicic T، Gauglitz GG، Lersch P، و همکاران. اثربخشی فرمولاسیون های جدید هیالورونیک اسید مبتنی بر کرم با وزن های مولکولی مختلف در درمان ضد چروک. جی داروی درماتول. 2011؛ ​​10: 990-1000.

11. Lubart R, Yariv I, Fixler D, Lipovsky A. کرم صورت موضعی اسید هیالورونیک با فناوری جدید مولکول میکرونیزه به طور موثری نفوذ می کند و کیفیت پوست صورت را بهبود می بخشد: نتایج حاصل از in-vitro، ex-vivo، و in-vivo (برچسب باز) ) مطالعات. J Clin Aesthet Dermatol. 2019؛ 12: 39-44.

12. کانو اس، تودو اچ، سوگی ک، و همکاران. استفاده از مدل های پوست انسان کشت شده بازسازی شده به عنوان یک پوست جایگزین برای مطالعات نفوذ ترکیبات شیمیایی. Altern Anim Test Exp. 2010؛ 15: 61-70.

13. McDaniel DH, Hamzavi IH, Zeichner JA, et al. دفاع کامل به علاوه ترمیم: مفهومی جدید در حفاظت از خورشید و جوانسازی پوست. جی داروی درماتول. 2015; 14:s3-s11.

14. Vitral GLN، Aguiar RAPL، de Souza IMF، Rego MAS، Guimarães RN، Reis ZSN. ضخامت پوست به عنوان یک نشانگر بالقوه سن حاملگی در بدو تولد علیرغم پروفایل های مختلف رشد جنین: یک مطالعه امکان سنجی PLoS One. 2018؛ 13:e0196542.

15. Clarys P، Clijsen R، Taeymans J، Barel AO. اندازه گیری هیدراتاسیون لایه شاخی: مقایسه بین روش خازنی (نسخه دیجیتال Corneometer CM 825) و روش امپدانس (Skicon{2}}EX). Skin Res Technol. 2012؛ 18:316- 323.

16. Li X، Yuan C، Xing L، Humbert P. تنوع توپوگرافی میکرو فلور پوست مشترک و ارتباط آن با نوع محیط پوست: یک مطالعه مشاهده ای در زنان چینی. Sci Rep. 2017; 7:18046.

17. Roques C، Téot L، Frasson N، Meaume S. PRIMOS: یک سیستم نوری که اندازه گیری سه بعدی سطوح پوست را تولید می کند. J مراقبت از زخم. 2003؛ 12: 362-364.

18. Matsunaga Y، Fujiwara S، Mori Y، و همکاران. ساخت میکروسوزن های خود حل شونده متشکل از اسید هیالورونیک به عنوان یک درمان ضد چروک. مجله IFSCC. 2012؛ 15: 73-78.

19. Borkow G, Elías AC. لیفت و روشن کردن پوست صورت پس از خواب روی روبالشی حاوی اکسید مس. لوازم آرایشی. 2016؛ 3:24.

20. Sito G، Manzoni V، Sommariva R. عوارض عروقی پس از تزریق فیلر صورت: بررسی ادبیات و متاآنالیز. J Clin Aesthet Dermatol. 2019؛ 12: E65-E72.

21. Essendoubi M، Gobinet C، Reynaud R، Angiboust JF، Manfait M، Piot O. نفوذ اسید هیالورونیک با وزن‌های مولکولی مختلف در پوست انسان که توسط طیف‌سنجی رامان بررسی شده است. Skin Res Technol. 2016؛ 22: 55-62.

22. Tokudome Y, Komi T, Omata A, Sekita M. یک استراتژی جدید برای تحویل غیرفعال پوست اسید هیالورونیک نانوذرات با وزن مولکولی بالا که با روش کمپلکس پلی یون تهیه شده است. Sci Rep. 2018; 8:2336.

23. جیانگ دی، لیانگ جی، نوبل پی دبلیو. هیالورونان یک تنظیم کننده ایمنی در بیماری های انسان است. Physiol Rev. 2011; 91:221-264.

24. Farwick M, Gauglitz G, Pavicic T, et al. اسید هیالورونیک پنجاه کیلو دالتونی برخی از ژن های اپیدرمی را بدون تغییر بیان TNF- در اپیدرم بازسازی شده تنظیم می کند. Skin Pharmacol Physiol. 2011؛ ​​24: 210-217.

25. Takabe P، Kärnä R، Rauhala L، Tammi M، Tammi R، PasonenSeppänen S. تکه تکه شدن پوشش هیالورونان ملانوسیت سیگنالینگ گیرنده TLR{2}} ناشی از UVB و بیان واسطه های پیش التهابی IL6، ILXCL1، و CXCL10، و CXCL10، را افزایش می دهد. از طریق فعال سازی NF-kappaB. J Invest Dermatol. 2019; 139:{10}}.

【برای اطلاعات بیشتر: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】