Acteoside: تحقیقات در مورد فعالیت آنتی اکسیدانی و ضد فشار خون

تماس:joanna.jia@wecistanche.com

فعالیت های آنتی اکسیدانی و ضد فشار خون Acteoside و آنالوگ های آن

Chao-Hsiang CHEN1,2, Yin-Shiou LIN3, Mei-Yin CHIEN2,4, Wen-Chi HOU5,6,*, and Miao-Lin HU1,*

چکيده. Acteoside(Act)، یک گلیکوساید فنایلتانوئید، یک ترکیب فعال در چندین گیاه و داروهای گیاهی سنتی است. همراه با ایزومر ساختاری آن عمل کنید،ایزواکتیوساید(Isoact), and an analog, 6-O-آستيلاکتئوساید(6-O-استیلکت)، در مطالعه مورد استفاده قرار گرفت تا بررسی شود.آنتی اکسیدان، آنزیم تبدیل کننده آنتی آنژیوتنسین (ACE)، و فعالیت های مهارکننده همولیزدر vitroو فعالیت ضد فشار خون علیه موش های صحرایی خودبه خود فشار خون (SHR)در vivo. ما اون قانون رو نشون داديم، ايزاکت، و 6-O-استیلکت به طور موثر روبنده 1,1-دیفنیل-2-picryl-هیدرازیل رادیکال (با IC50 در 11.4, رادیکال های سوپراکسید (با IC50 به ترتیب 66.0، 38.5 و 39.1 میکروM) به ترتیب 9.48 و 9.55 میکرومیت هستند. به عنوان ایزوکت و 6-O-استیلکت دارای فعالیت های رو به رو شدن رادیکال مشابهی بود، تنها Act و Isoact برای مطالعات زیر مورد استفاده قرار گرفت. هر دو قانون و ایزوکت به ترتیب فعالیت زانتین اکسیداز را با IC50 در 3/53 و 2/62 میکرومیت مهار کردند. هر دو قانون و ایزوکت نیز به طور قابل توجهی مانع فعالیت ACE و همولیز ناشی از 2,2'-آزو بیس (2-amidinopropane)دی هیدوکروکلوراید, اما اثرات قانون قوی تر از ایزوکت بود. سپس به صورت خوراکی یک دوز ازAct یا Isoact (10 میلی گرم در کیلوگرم وزن بدن) را به SHR تجویز و تغییرات فشار خون سیستولیک (SBP) و فشار خون دیاستولیک (DBP) بیش از 24 ساعت اندازه گیری شد. Act, but not Isoact, showed antihypertensive activity in lowering SBP and DBP. نتایج نشان می دهد سودمندی بالقوه قانون به عنوان یک محصول مواد غذایی بهداشتی برایآنتی اکسیدانمحافظت و تنظیم فشار خون.

کليدواژه: Acteoside; فعالیت ضد فشار خون؛ آنزیم تبدیل کننده آنژیوتنسین (ACE)؛ آنتی اکسیدان; همولیز.

فعال مواد تشکیل دهنده acteoside در سیستانچه

مقدمه

Acteoside(Act)، یک گلیکوئید فنلتانوئید حاوی اسید کافئیک، 3'،4'-دی هایدروکسی فنایلتانول، گلوکز، و رامنز، برای اولین بار از گل های جدا شده ازسیرنگا ول- گاریس(Birkofer et al., 1968), and together with the structural isomer ofایزواکتیوساید(ایزوکت) و مشتق از6-O-استیل آکتئوساید(6-O-استیلکت)، در بسیاری از گیاهان و داروهای گیاهی یافت شده است، مانندلیگستروم پورپوراسکن ها(Wong et al., 2001),کالیکرپا دیچوتوما(Koo et al., 2006; Lee et al., 2006),سیستانچه بیابانیکولاوبوشنیاکیا rossica(Wu et al., 2006),اسکروفوولاریا ningpoenis(Huang et al., 2008),ریماننیا گلوتینوزا(Li et al., 2006). این عمل برای نشان دادن فعالیت آنتاستاستاتیک بر روی سلول های ملانوم B16 در مدل های موش C57BL/6 گزارش شد (Ohno et al., 2002). Act, Isoact, and 6-O-استیلکت به تازگی نشان داده شد برای مهار IL-1β فعال بیان CAM-1 بین سلولی و عروق CAM-1 در سلول های آندوتلیال ورین ناف انسان (چن و همکاران، 2009). Act همچنین سلول های آندوتلیال ریوی گاو را از استرس اکسیداتیو ناشی از رادیکال هیدروکسیل محافظت می کند (Chiou et al., 2004) و مانع تولید نیتریک اکسید و TNF-α از طریق مسدود کردن فعال سازی AP-1 در ماکروفاژهای تحریک شده با لیپولیساکارید می شود (راو و همکاران، ۲۰۰۹). قانون و ایزوکت نمایشگاه فعالیت های حفاظت عصبیدر vitro(Koo et al., 2005). Koo et al. (2006) reported that Act and its aglycones effectively scavenge 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) and nitric oxideدر vitro. با این حال، مطالعات کمی در کنار هم مقایسه کرده انددر vitro آنتی اکسیدانفعالیت های قانون و ترکیبات مرتبط با ساختاری آن مانند ایزوکت و 6-O-استيلکت

کلاس های متعددی از عوامل فارماکولوژیک در درمان فشار خون بالا مورد استفاده قرار گرفته اند (مارک و دیویس، ۲۰۰۰). یک کلاس از داروهای ضد فشار خون که با نام مهارکننده های آنزیم تبدیل کننده آنژیوتنسین I (ACE) شناخته می شوند (به عنوان مهارکننده های پپتیداز)، بروز عوارض جانبی نامطلوب پایینی دارند و کلاس ترجیحی ضد فشار خون بالا هستند

عوامل در هنگام درمان بیماران مبتلا به بیماری های ثانویه همزمان (Fotherby و Panayiotou، 1999). ACE (peptidyl- dipeptide hydrolase EC 3.4.15.1) یک اکسوپپتیداز حاوی دیپپتید-آزادکننده روی است که یک دیپتید را از C-terminus آنژیوتانسین I حذف می کند تا آنژیوتانسین II را تشکیل دهد که یک ترکیب بسیار فشار خون بالا است. چندآنتی اکسیدانpeptides (کاهش گلوتاتیون و پپتیدهای مرتبط با کارنوزین) نمایشگاه ACE فعالیت های مهاری (هو و همکاران، 2003). اولین مهارکننده ACE فعال از نظر بالینی، کاپتوپریل، برای درمان های فشار خون بالا توسعه یافت (Ondetti et al., 1977; Borer, 2007). این عمل گزارش شده است به اعمال اثرات آرامش بخش با میانجیگری اکسید نیتریک بر روی حلقه های آئورتی آندوتلیوم دست نخورده از موش های SD (وونگ و همکاران، 2001). احمد و همکاران (۱۹۹۵) گزارش داده اند که Act باعث کاهش وابسته به دوز در فشار خون سیستولیک (SBP) و فشار خون دیاستولیک (DBP) به دنبال تزریق وریدی آن به موش های صحرایی ویستار بی حس کننده نورموتنسیو می شود. با این حال ، معلوم نیست که آیا به صورت خوراکی اداره قانون و / یا isomers مربوط به آن ضد فشار خوندر vivo. در مطالعه حاضر، به بررسیدر vitro آنتی اکسیدانظرفیت و ACE فعالیت های مهاری و همچنیندر vivoفعالیت ضد فشار خون قانون، ایزوکت، و / یا 6-O-استیلکت با استفاده از موش های خودبه خودی فشار خون (SHRs). انتظار می رود این مطالعات داده های مفیدی را برای توسعهAct به عنوان یک محصول غذایی بهداشتی ارائه دهند.

مواد و روش ها

مواد

2,2'-azo-bis(2-amidinopropane)dihydrochloride (AAPH), ACE (I unit, ریه خرگوش)، هیدروکسی تولوئن بوتیله (BHT)، DPPH، N-(3-[2-furyl]acryloyl)-Phe-Gly- Gly (FAPGG)، NADH، فنازین متولفت (PMS)، زانتین، و گزانتین اکسیداز از شرکت شیمیایی سیگما (سنت لوئیس، مو، ایالات متحده آمریکا) خریداری شدند. کاپتوپریل از شرکت کالبیوشیم (CA، ایالات متحده آمریکا) خریداری شد. Act, Isoact, and 6-O-استیلکت (شکل 1) از شرکت برابر خریداری شد (خالص > 98٪، شانگهای، چین). مواد شیمیایی و واکنشگرهای دیگر از شرکت شیمیایی سیگما (سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا) بودند.

لاشنگ فعالیت از عمل ایزوکت، و 6-O- استیلکت برابر dPPH رادیکال توسط طیف سنجی

حجم (0.3 میلیL) از آکت، ایزوکت، و 6-O-استیلاکت (غلظت نهایی 56/1 تا 50 میکرومتر)، BHT و اسید آسکوربیک (غلظت نهایی 4/2 تا 60 میکرومتر) به 1/0 میلی ال ال تریس-H 1 متر اضافه شد. بافرCl (pH 7.9) و سپس با 0.6 میلی ال از 100 میکرومتر DPPH در اتانول مخلوط به غلظت نهایی 60 میکرومتر برای 20 دقیقه تحت حفاظت نور در دمای اتاق (لیو و همکاران، 2004; Lin et al., 2008). کاهش جذب در 517 nm اندازه گیری و به عنوان ΔA517 nm بیان شد. آب دیونیزه شده به عنوان یک آزمایش خالی مورد استفاده قرار گرفت. فعالیت روباه سازی رادیکال DPPH (٪) با معادله محاسبه شد: (ΔA517blank − ΔA517sample) ÷ ΔA517blank × 100. IC50 مخفف غلظت نیمه مهار است.

مهار فعالیت از عمل و ایزوکت برابر زانتین اکسیداز

فعالیت گزانتین اکسیداز با تعیین تشکیل اسید اوریک در 295 nm با استفاده از زانتین به عنوان بستر اندازه گیری شد (کالکار، 1947). مقادیر مختلف Act و Isoact (غلظت نهایی 25، 50 و 75 میکرومتر بود) از پیش مخلوط با 50 میکرولیتر از 1 میلی وات بر میلی متر زانتین اکسیداز در 4 درجه سانتی گراد به مدت 1 ساعت، و سپس 300 میکرولیتر از 1 میلی متر زانتین اضافه شد. تغییرات جذب در 295 nm بیش از 2 دقیقه ثبت شد و به عنوان ΔA295 nm/ دقیقه بیان شد. فعالیت مهاری گزانتین اکسیداز (٪) به صورت زیر محاسبه شد: (ΔA295 nm/min black − ΔA295 nm/ min sample) ÷ ΔA295 nm/min black × 100. آب دیونیزه شده به جای محلول نمونه به عنوان یک آزمایش خالی مورد استفاده قرار گرفت. IC50 مخفف غلظت نیمه مهار است.

لاشنگ فعالیت از عمل ایزوکت، و 6-O- استیلکت برابر سوپراکسید رادیکال توسط طیف سنجی

رادیکال سوپراکسید توسط سیستم PMS-NA- DH تولید شد (لیو و همکاران، 2004؛ Lin et al., 2008). تمام نمونه های 0.2 میلی ال، حاوی مقادیر مختلف قانون، ایزوکت، و 6-Oاستيلات (غلظت نهائی 6/15، 3/31، 5/62، 125، و 250 میکرومتر)، در توالی به 0.2 میلی لیتر از 630 میکرومتر نیتروبلو تتراازولیم، 0.2 میلی لیتر از 33 میکرومتر PMS، و 0.2 میلی لیتر از 156 میکرومتر NADH در بافر فسفات 100 میلی متر (pH 7.4) اضافه شد. آب دیونیزه شده به جای محلول نمونه به عنوان یک آزمایش خالی مورد استفاده قرار گرفت. اسید آکوربیک (غلظت نهایی 6، 9، 12 و 24 میکرومتر بود) به عنوان یک کنترل مثبت مورد استفاده قرار گرفت. تغییرات جذب در 560 nm در طول 2 دقیقه ثبت و به عنوان ΔA560 nm/min بیان شد. فعالیت رو به رو شدن رادیکال های سوپراکسید (٪) به این صورت محاسبه شد: (ΔA560 nm/min black − ΔA560 nm/min sample) ÷ ΔA560 nm/min black × 100. IC50 مخفف غلظت نیمه مهار است.

تعیین از آس مهار فعالیت از عمل و ایزوکت توسط HPLC

هر 50 میکرولیتر قانون (0.2، 0.4، 0.5، و 2.0 میکرومول) و ایزوکت (0.1، 0.2، 0.5، 1.0، و 2.0 میکرومول) با 15 میکرولیتر 1U/mL ACE به مدت 5 دقیقه از پیش مضطرب شدند و سپس 200 میکرولیتر از 0.5 میلی متر FAPGG اضافه شد و در دمای اتاق به مدت 10 دقیقه واکنش نشان داد (Anzenbacherova و همکاران، 2001). اتانول ۸۰۰ میکرول برای متوقف کردن واکنش اضافه شد. آزمایش خالی فقط FAPGG بود. در آزمایش کنترل، ACE با FAPGG تحت همان شرایط واکنش نشان داد. جداسازی کروماتوگرافی FAPGG و FAP بر روی سیستم کروماتوگرافی هیتاچی (ژاپن) با حلقه 10 میکرول انجام شد. تجزیه و تحلیل HPLC بر روی یک ستون Biosil Aqua-ODS-W 5 μ (شرکت شیمیایی بیوتیک، با مسئولیت محدود، تایوان، 250 × 4.6 میلی متر i.d)، اندازه ذرات 5 میکرومتر انجام شد. مخلوط واکنش داده شده به صورت ایزوکراتیک با فاز متحرک متشکل از 02/0 M نوئل آمین (تنظیم شده با pH 2.4 با اسید فسفریک) و استونیتریل در نسبت 5/67:32/5 (V/V) (Anzenbacherova و همکاران، 2001) جدا شد. نرخ جریان 1 میلی ال در دقیقه بود؛ حجم تزریق 10 میکرول بود; آشکارساز در 345 nm تنظیم شد. مهارهای ACE (٪) قانون و ایزوکت به این صورت محاسبه شد: [(مساحت FAPGGblank − مساحت FAPGGcontrol) − (مساحت FAPGGblank − مساحت FAPGGsample) ÷ (مساحت FAPGGblank − مساحت FAPGGcontrol) × 100.

مهار فعالیت از عمل و ایزوکت برابر AAPH-mediated همولیز

اکسیداسیون زنجیره ای رادیکال آزاد سلول های قرمز خون موش صحرایی (RBC) از طریق همولیز با میانجیگری AAPH (میکی و همکاران، 1987). خون موش ها در لوله های هپارینیزه قرار گرفت و در ۱۰ سال ×gبه مدت 10 دقیقه. پس از شسته شدن با سه راه NaCl 0.15 متر، RBC بسته بندی شده با سنتریفیوژ در 1000 متر در ×gبه مدت 10 دقیقه. مقادیر مختلف Act و Isoact (غلظت نهایی 2، 5، و 10 میکرومتر) مخلوط 25 میکرول از 20٪ تعلیق RBC (V/V، در 10 میلی متر PBS) و 25 میکرول از 500 میلی متر محلول AAPH در 37 درجه سانتی گراد برای 0، 1، 1.5، 2، 2.5، 3، و 3.5 ساعت با تکان ملایم. هر مخلوط در ۱۰ متر از مرکز ×gبه مدت 10 دقیقه، و سوپرناتانت در 536 nm اندازه گیری شد. آب دیونیزه شده به جای محلول AAPH یا محلول نمونه به ترتیب به عنوان یک گروه خالی یا به عنوان گروه کنترل مورد استفاده قرار گرفت. مهار همولیز (٪) باکتری و ایزوکت در 3 ساعت یا در 5/3 ساعت به صورت زیر محاسبه شد: (ΔA536 nmcontrol − ΔA536 nmsample) ÷ ΔA536 nmcontrol × 100.

انتجبرت اثرات از عمل و ایزوکت در اس آر

اثرات قانون خوراکی، ایزوکت و کاپتوپریل با استفاده از لوله تغذیه (2.0 × 80 میلی متر) بر کاهش SBP و DBP کاهش یافته با توجه به روش گزارش های قبلی تعیین شد (لین و همکاران، 2006؛ Lin et al., 2008; Han et al., 2011). تمام رویه های تجربی حیوانات از دستورالعمل های منتشر شده پیروی می کردند (شورای ملی علوم، ۱۹۹۴). SHRs مرد (8 هفته سن، مرکز ملی حیوانات آزمایشگاهی، تایپه) به صورت جداگانه در قفس های فولادی نگهداری شده در 24 درجه سانتی گراد با چرخه نور تاریک 12 ساعت نگهداری می شد و دسترسی آزاد به یک چو موش / موش استاندارد (Prolab RMH2500، 5P14 رژیم غذایی، PMI تغذیه بین المللی، برنتوود، MO) و آب بود. SHRs به طور تصادفی به کنترل و درمان نمونه برای تعیین SBP و DBP (شش موش صحرایی در هر گروه) تقسیم شد. برای یک آزمایش ضد فشار خون کوتاه مدت، 5/0 میلی ليتر از 10 میلی گرم Act یا Iso- act/Kg SHR یا 5 میلی گرم کاپتوپریل/کیلوگرم SHR یک بار به صورت خوراکی تجویز شد و فشار خون دم در 2، 4، 6 و 24 ساعت پس از یک تجویز خوراکی اندازه گیری شد. آب 0.5 میلی ال برای یک آزمایش خالی مورد استفاده قرار گرفت. یک متر فشار خون غیر مستقیم (BP-98A، شرکت سافترون با مسئولیت محدود توکیو، ژاپن) برای اندازه گیری SBP و DBP چهار بار در هر تعیین برای هر درمان مورد استفاده قرار گرفت.

داده تحلیل

مقادیر به عنوان میانگین ± SD ارائه شده و با استفاده از ANOVA یک طرفه تجزیه و تحلیل می شوند و به دنبال آن آزمون hoc Tukey برای مقایسه میانگین های متعدد انجام می شود. دانش آموزt-آزمون انجام شد، زمانی که تنها دو گروه از داده ها با هم مقایسه شدند (مانند بین Act و Isoact در یک غلظت). یک p-value< 0.05="" is="" considered="" statistically="" significant.="" the="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" spss="" for="" windows,="" version="" 10="" (spss,="" inc.,="" chicago,="" il,="">

acteosideدر سیستانچه به منظور افزایش حافظه

نتیجه

لاشنگ فعالیت از PPH و سوپراکسید رادیکال

Act, Isoact, and 6-O-استیلکت فعالیت های رو به رو شدن DPPH وابسته به دوز را در pH 7.9 به نمایش گذاشته است (شکل 2). مقادیر IC50 به ترتیب 4/11، 48/9 و 55/9 میکرومتر برای قانون، ایزوکت و 6-O-استیلکت مقادیر IC50 شاهد مثبت اسیدکوربیک و BHT به ترتیب 1/13 و 5/18 میکرومیت بود.

مهار از زانتین اکسیداز فعالیت

عمل و ایزوکت نشان داده شد که مهار وابسته به دوز اکسیداز زانتین (شکل 3) را نشان می دهد. IC50 به ترتیب 3/53 و 2/62 میکرومتر برای Act و Isoact محاسبه شد.

مهار از سوپراکسید dismutase فعالیت

از آنجا که هر دو قانون و ایزوکت مانع فعالیت زانتین اکسیداز، ما با استفاده از سیستم PMS-NADH برای تولید رادیکال های سوپر اکسید (لیو و همکاران، 2004؛ Lin et al., 2008). عمل

ایزوکت، و 6-O-استیلکت فعالیت های رو به رو شدن رادیکال سوپراکسید وابسته به دوز را به نمایش گذاشتند (شکل ۴). مقادیر IC50 به ترتیب 0/66، 5/38 و 1/39 میکرومتر برای قانون، ایزوکت و 6-O-استیلکت مقادیر IC50 کنترل مثبت اسید آکوربیک 0/9 میکرومیت بود. از نتایج ارقام 2 و 4 مشخص شد که ایزوکت و 6-Oاستيلات فعاليت های مشابهی در برابر راديکال های DPPH و سوپراکسيد داشت و به اين ترتيب تنها Act و Isoact برای غربالگری فعاليت های زيستی بيشتر انتخاب شدند.

آس مهار فعالیت از عمل و ایزوکت

در آزمون مقدماتی، ما دریافتیم که Act و Isoact با جذب FAPGG بستر ACE و محصول هیدرولیز شده آن FAP در 345 nm به عنوان مورد استفاده برای اندازه گیری طیف سنجی مداوم تداخل دارند (Holmquist et al., 1979). بنابراین از جداسازی همراه با تشخیص Act یا Isoact و FAPGG توسط HPLC برای نظارت بر فعالیت های مهاری ACE استفاده شد. شکل 5A به شکل 5D کروماتوگرام HPLC معمولی از 10 میکرول مخلوط واکنش از یک تست خالی (FAPGG تنها، شکل 5A)؛ آزمون کنترل (ACE دوباره با FAPGG عمل به تولید FAP، شکل 5B)؛ 0.5 میکرومویل ازAct (312.5 میکروگرم), ACE و FAPGG (شکل 5C); و 0.5 میکرومویل ایزوکت (312.5 میکروگرم)، ACE و FAPGG (شکل 5D). مساحت FAPGG در شکل 5B کمترین و در شکل 5A بالاترین از چهار کروماتوگرام HPLC معمولی بود. مناطق FAPGG در ارقام 5C و 5D وابسته به فعالیت های مهاری ACE از غلظت های مختلف قانون و ایزوکت است. مهارهای محاسبه شده ACE قانون و ایزوکت در شکل 5E نشان داده شده است. این عمل فعالیت های مهاری ACE بالاتری نسبت به ایزوکت نشان داد و IC50 سابق بر اساس مساحت در کروماتوگرام های HPLC 472 میکرومتر محاسبه شد.

مهار فعالیت از عمل و ایزوکت برابر AAPH-mediated همولیز

فعالیت های بازدارنده Act و Isoact علیه همولیز با میانجی گری AAPH در غلظت های 2، 5 و 10 میکرومیت بر 5/3 ساعت مورد ارزیابی قرار گرفت (میکی و همکاران، 1987). نتایج شکل 6A نشان می دهد که همولیز در RBC موش صحرایی به طور چشمگیری افزایش یافته است (به عنوان ΔA536 nm بیان می شود) پس از واکنش های 3-h یا 3.5-h در حضور رادیکال هایAAPH (به عنوان گروه های کنترل، نماد چرخه سفید). همولیز کم یا بدون همولیز در غیاب رادیکال هایAAPH در طول واکنش 3.5-h (به عنوان گروه های خالی، نماد چرخه سیاه) مشاهده شد. بنابراین، مهار همولیز Act و ایزوکت در 3 ساعت یا در 5/3 ساعت به صورت زیر محاسبه شد: (ΔA536 nmcontrol − ΔA536 nmsample) ÷ ΔA536 nmcontrol × 100. شکل 6B

نشان می دهد که هر دو قانون و ایزوکت در 2، 5 و 10 میکرومتر مهار وابسته به تمرکز بر همولیز ناشی از AAPH، با اثرات مهاری قانون به طور قابل توجهی قوی تر از ایزوکت در هر غلظت مورد استفاده نشان داد.

انتجبرت اثرات از عمل و ایزوکت در اس آر

SHRs یک اداره شفاهی از قانون و ایزوکت (10 میلی گرم در کیلوگرم SHR) دریافت کرد، و تغییرات در SBP و DBP بیش از 24 ساعت ثبت شد. ما قبلا گزارش داده بودیم که فشار خون (SBP و DBP) SHR در طول 24 ساعت قابل تغییر است (لین و همکاران، 2006؛ Han et al., 2011). بنابراین مقایسه در یک زمان ثابت (مانند 2، 4، 6، 8 و 24 ساعت) بین خالی و نمونه به جای قبل و بعد از خود اداره شفاهی مورد استفاده قرار گرفت. مشخص شد که Act، اما نه ایزوکت، به طور مؤثری SBP و DBP SHR را در مقایسه با گروه خالی (آب تقریر شده) کاهش داد. SBP در گروه Act به ترتیب در 2، 4 و 6 ساعت به ترتیب 8/18، 5/16 و 9/14 میلی مترHg کاهش یافت، اما کاهش SBP (3/3 میلی مترHg) در 24 ساعت پس از درمان Act استا نبود-

از نظر هنری قابل توجه (شکل 7A). همانطور که در شکل 7B نشان داده شد، DBP در گروه Act در 2، 4 و 6 ساعت (به ترتیب 5/8، 6/7 و 0/12 میلی متر در ساعت) کاهش یافت، اگرچه تنها نتیجه به دست آمده در 6 ساعت از نظر آماری معنی دار بود (P < 0.05).="" it="" was="" noted="" that="" act="" and="" captopril="" (as="" positive="" control)="" had="" similar="" effects="" on="" sbp="" at="" early="" stages="" (2,="" 4,="" and="" 6="" h)="" after="" oral="">

acteosideدر سیستانچه اثرات خوبی بر آنتی اکسیدان

بحث

گونه های فعال اکسیژن و واکنش های آزاد با میانجی گری رادیکال در فرایندهای دژنراتیو یا پاتولوژیک مانند پیری، سرطان، بیماری عروق کرونر قلب، و بیماری آلزایمر نقش دارند (Ames, 1983; Gey, 1990; Smith et al., 1996). گزارش های متعددی بر غربالگری متمرکز شده اندآنتی اکسیدانفعالیت ها از منابع طبیعی. در مطالعه حاضر ابتدا با هم مقايسه شديمآنتی اکسیدانفعالیت های قانون، ایزوکت، و 6-O-آستيليات Act و Isoact ایزومرها ساختاری هستند که در آن ها تشکیل دهنده مویت اسید کافئیک به گروه هیدروکسیل C-4 گلوکز در سابق و به گروه هیدروکسیل C-6 گلوکز در دومی پیوند داده می شود. در حالی که اجزای تشکیل دهنده رامنوز و 3',4'- دی هیدروکسی فنل اتانول به ترتیب به گروه های C-3 و C-1 هیدروکسیل مویت گلوکز در همان قانون و مولکول ایزوکت پیوند, 6-O-استیلکت یک مشتق Act است که در آن استیک اسید به گروه هیدروکسیل C-6 در مویت گلوکز پیوند داده می شود (شکل ۱). Koo et al. (2006) reported that Act and its aglycones exhibited DPPH-scavenging activities, و ترتیب این فعالیت ها (بیان شده به عنوان IC50) قانون (1.28 میکرومتر) > کافئیک اسید (2.22 میکرومتر) > 3',4'-دی هایدروکسی فنل اتانول (7.72 میکرومتر) > α-توکوفرول (1/15 میکرومتر) بود. در گزارش حاضر (شکل 2)، ترتیب فعالیت های رو به رو شدن DPPH (بیان شده به عنوان IC50) 6-O-acetylate (9.55 μM) ≈ Isoact (9.48 μM) > Act (11.4 μM). این مقادیر قابل مقایسه یا بهتر از مقادیر اسید اسکوربیک (IC50 از 13.1 میکرومتر) و BHT (IC50 از 18.5 میکرومتر) برای روباه کردن رادیکال های DPPH بودند. IC50 بالاتر از قانون در گزارش حاضر ممکن است از غلظت نهایی 60 میکرومتر DPPH به جای 30 میکروM مورد استفاده از Koo و همکاران گزارش شده (2006) باشد. همان طور که رادیکال DPPH as- می گویند متعلق به واکنش انتقال الکترون است (هوانگ و همکاران، ۲۰۰۵)، حدس زده می شود که مشتق در گروه هیدروکسیل C-6 از مویت گلوکز، مانند گروه استیل در ۶-O- استیلات و موئیتی اسید کافئیک در ایزوکت، ممکن است راحت تر یک واکنش انتقال الکترون نسبت به واکنش های گروه هیدروکسیل آزاد C-6 در موئیتی گلوکز ofAct برای اندازه رو به رو شدن DPPH ارائه دهد.

قانون، 6-O-استیلات و ایزوکت گزارش شده است که دارای فعالیت روباه سوپراکسید در محیط آزمایشگاهی با استفاده از سیستم زانتین / زانتین اکسیداز برای تولید رادیکال های سوپراکسید (وانگ و همکاران، 1996؛ Gao et al., 1999). با این حال، مطالعه حاضر ما نشان داد که قانون فعالیت های مهاری زانتین اکسیداز را به نمایش گذاشته است (شکل 3). بنابراین رادیکال سوپراکسید با استفاده از سیستم PMS-NADH در گزارش حاضر تولید شد (لیو و همکاران، 2004؛ Lin et al., 2008) instead of the xanthine/xanthine oxidase system. در واقع، با استفاده از سیستم زانتین/زانتین اکسیداز برای تولید رادیکال های سوپراکسید، وانگ و همکارانش (۱۹۹۶) یک قانون IC50 از ۶۳ میکرومتر در برابر رادیکال های سوپراکسید به دست آورد و این مقدار نزدیک به آن برای مهار فعالیت زانتین اکسیداز توسط Act است، همان طور که در مطالعه حاضر (۵۳٫۳ میکرومتر) گزارش شده است. گزارش شد که کافئیک اسید فعالیت های مهارکننده زانتین اکسیداز را به نمایش گذاشته است (چیانگ و همکاران، ۱۹۹۴). ممکن است حدس زده شود که فعالیت های روباه سوپراکسید با استفاده از سیستم تولید زانتین/زانتین اکسیداز برخی از فیتوشیمیایی ها با ساختارهای مرتبط با اسیدهای کافئیک، مانند Act یا ایزوکت (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999), may have been contributed, at least in part, on xanthine oxidase inhibitions. جالب اینجاست که وانگ و همکارانش (۱۹۹۶) دریافتند که Act (۰٫۵ و ۲٫۵ میلی متر) فعالیت زانتین اکسیداز را که توسط یک الکترود اکسیژن برای مصرف اکسیژن در هنگام اکسیداسیون زانتین تعیین می شد، مهار نمی کند. بنابراین، این مهم است که در نظر داشته باشید که روش های مختلف برای اندازه سازی فعالیت رو به رو شدن سوپراکسید ممکن است داده های متناقض تولید کند.

لی و همکارانش (۱۹۹۳) میزان مشابهی از مهار قانون و ایزوکت در برابر همولیز با میانجیگری AAPH در RBC موش ها را گزارش کرده اند. با این حال ، ما در اینجا نشان داد که قانون نشان داد فعالیت های مهاری بسیار بالاتر علیه همولیز ناشی از AAPH در RBC از موش ها نسبت به ایزوکت (شکل 6). معلوم نیست که آیا چنین ناهماهنگی ممکن است به دلیل تفاوت گونه های جوندگان بوده باشد یا نه.

کانگ و همکاران (۲۰۰۳) گزارش دادند که Act فعالیت های مهاری ACE را به نمایش گذاشته است، و IC50 ۳۷۳٫۳ میکروگرم بر میلی ال بود که با استفاده از هیپ-هی-لو به عنوان بستر ۵۹۸ میکرومتر محاسبه شد. در گزارش حاضر، قانون فعالیت های مهارکننده ACE بالاتری نسبت به ایزوکت نشان داد و IC50 سابق بر اساس مساحت در کروماتوگرام های HPLC 472 میکرومتر محاسبه شد (شکل 5). این عمل گزارش شده است به اعمال اثرات آرامش بخش نیتریک اکسید میانجی بر حلقه های آئورتی آندوتلیوم دست نخورده از موش های SD (وونگ و همکاران، 2001). اگر چه قانون نشان داده شده است که ضد فشار خون در موش های ویستار،

این مطالعه تزریق وریدی قانون را به یک موش صحرایی بی حس شده به منظور رد عامل جذب به کار گرفت (احمد و همکاران، 1995). در اینجا، ما قانون را به صورت دهانه ای به SHRs مدیریت و تغییرات در فشار خون تعیین شده است. ما متوجه شدیم که واقعیت دولت شفاهی، اما نه از Isoact، اثرات ضد فشار خون با کاهش SBP و DBP بیش از 24 ساعت پس از یک دولت واحد به نمایش گذاشته (شکل 7). عمل در دوز 10 میلی گرم در کیلوگرم وزن بدن اثر نزدیک به کاپتوپریل در دوز 5 میلی گرم در کیلوگرم SHR در کاهش SBP و بهتر از کاپتوپریل در کاهش DBP بود.

در نتیجه، قانون به نمایش گذاشته شدآنتی اکسیدانفعالیت ها، فعالیت های مهارکننده ACE، و اثرات ضد فشار خون بر SHRs. نتایج ارائه شده در اینجا تلاش برای توسعه داروهای گیاهی و یا محصولات مرتبط با استفاده از قانون، که در بسیاری از گیاهان و داروهای گیاهی یافت شده است، برای حفاظت از آنتی اکسیدان و اثرات درمانی در آینده بهره مند شوند.

سیستانچهacteosideبرای آنتی اکسیدانی و ضد پیری

1Department food Science and Biotechnology, National Chung Hsing University, Taichung, Taiwan

2Ko دا داروسازی شرکت ، با مسئولیت محدود ، تائو یوان ، تایوان

3 مدرسه داروسازی، دانشگاه پزشکی تایپه، تایپه، تایوان

4 کارشناسی موسسه مواد و مهندسی زیست پزشکی، دانشگاه پزشکی تایپه، تایپه، تایوان

5- مرکز تحقيقات طب گياهی، بيمارستان دانشگاه علوم پزشکی تايپه، تايپه، تايوان

6Graduate Institute of pharmacognosy, Taipei Medical University, Taipei, Taiwan

(دریافت مارس 12, 2012; پذیرفته شده ۳۰ فروردین ۱۳۹۱)

ادبیات ذکر شده

احمد، محمد، غلام حسين ريزواني، کيهان افتاب، وي-يو احمد، احمد حسين گيلاني، و محمدپور احمد. 1995.Acteoside: یک داروی ضد فشار خون جدید. فيتوتر . Res. 9: 525-527.

Ames, B.N. 1983. سرطان زاهای رژیمی و آنتی سرطان زاها: رادیکال های اکسیژن و بیماری های دژنراتیو. Science 221:1256-1264.

Anzenbacherova, E., P. Anzenbacher, K. Macek, and J. Kvetina. 2001. تعیین مهارکننده آنزیم (آنژیوتنسین مبدل) بر اساس واکنش آنزیمی و به دنبال آن HPLC.J. Pharmaceut. بيومد . مقعد 24: 1151-1156.

Birkofer, L., C. Kaiser, and U. Thomas. 1968.Acteosideand neoacteoside: Zuckerester aus Syringa vulgaris. Naturforsc- hung 23B: 1051-1058.

Borer, J. S. 2007. مهار آنزیم تبدیل کننده آنژیوتنسین: یک پیشرفت برجسته در درمان بیماری های قلبی عروقی. Eur. Heart J. Suppl. 9(Suppl. E): E2-E9.

Chen, C.H., T.Y. Song, Y.C. Liang, and M.L. Hu. 2009.Acteosideو 6-O-استیل آکتئوساید پایین تنظیم مولکول های چسبنده سلول های القا شده توسط IL-1β از طریق مهار ERK و JNK در سلول های اندوتیلیال عروقی انسان. جي اگريک غذا

Chem. 57: 8852-8859.

Chiang, H.C., Y.J. Lo, and F.J. Lu. 1994. مهارکننده های زانتین اکسیداز از برگ های آل سوفیلا اسپینولوزا (هوک) Tryon. آنزیم جی را مهار می کند. 8: 61-71.

Chiou, W.F., L.C. Lin, and C.F. Chen. 2004.Acteosideسلول های آندوتلیال را در برابر استرس اکسیداتیو ناشی از رادیکال آزاد محافظت می کند. J. Pharm. Pharmacol. 56: 743-748.

Fotherby, M.D. and B. Panayiotou. 1999. درمان ضد فشار خون در پیشگیری از سکته مغزی: چه، چه زمانی، و برای چه کسی؟ مواد مخدر 58: 663-674.

Gao, J.J., K. Igalashi, and M. Nukina. 1999. فعالیت روکش رادیکال از phenylpropanoid glycosides در Caryopteris incana. بايوسچي . بيوتکنول . بيوشيم . 63: 983-988.

Gey, K.F. 1990. Theآنتی اکسیدانفرضیه بیماری های قلبی عروقی: اپیدمیولوژی و مکانیسم ها. بيوشيم . Soc. Trans. 18: 1041-1045.428 Botanical Studies, Vol. 53, 2012

Han, C.H., J.C. Liu, K.H. Chen, Y.S. Lin, C.T. Chen, C.T. Fan, H.L. Lee, D.Z. Liu, and W.C. Hou. 2011. فعالیت های ضد فشار خون سیر فرآوری شده بر روی موش های صحرایی خود به خود فشار خون و انسان های فشار خون بالا. ربات. داربست. 52: 277-283.

Holmquist, B., P. Bunning, and J.F. Riordan. 1979. یک روش اسپکتروفتومتری پیوسته برای آنزیم تبدیل کننده آنژیوتنسین. مقعد، بيوشيمي 95: 540-548.

Hou, W.C., H.J. Chen, and Y.H. Lin. 2003. پپتیدهای آنتی اکسیدانی با فعالیت های مهارکننده آنزیم تبدیل کننده آنژیوتانسین و کاربردهای تصفیه آنزیم تبدیل کننده آنژیوتانسین. جي اگريک شيمي غذايي 51: 1706-1709

Huang, D., B. Ou, and R.L. Prior. 2005. شیمی پشتآنتی اکسیدانظرفیت می دهد. جی اگریک شیمی غذایی 53: 1841-1856.

Huang, C.G., Y.J. Shang, J. Zhang, J.R. Zhang, W.J. Li, and B.H. Jiao. 2008. اثرات هیپوریسمی از گلیکوزیدهای فنل پروپانوئیدacteosideاز Scrophularia ningpoenis در سطح سرمی اسید اوریک در موش پتاسیم اکسونات از پیش درمان. عامر جی.

چانه. دکتر 36: 149-157.

Lee, K.Y., E.J. Jeong, H.S. Lee, and Y.C. Kim. 2006.Acteosideاز Callicarpa dichotoma attenuates اختلالات حافظه ناشی از اسکوپول امین. بيول، فارم، گاو نر 29: 71-74.

Li, J., P. Wang, R. Genev, Z. Liu, and Z. Jia. 1993. حفاظت از گلیکوزیدهای فنل پروپانوئید از Pedicularis در برابر همولیز اکسیداتیو در محیط آزمایشگاهی. پلانتا دکتر 59: 315-317.

Li, H., G.X. Chou, Z.T. Wang, and Z.B. Hu. 2006. HPLC de- termination ofacteosidein Radix Rehmanniae. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 31: 822-824.

Lin, S.Y., C.C. Wang, Y.L. Lu, W.C. Wu, and W.C. Hou. 2008.آنتی اکسیدان، آنتی سمیکاربازید حساس به امین اکسیداز، و فعالیت های ضد فشار خون ژرانین جدا شده از فیلانتوس ادرار. مواد غذايي شيمي سميول 46: 2485-2492.

Liu, D.Z., Y.S. Lin, and W.C. Hou. 2004. Monohydroxamates از اسید آسپارتیک و گلوتامیک اسید نمایشگاهآنتی اکسیدانو فعالیت های بازدارنده آنزیم تبدیل کننده آنژیوتنسین. J. Agric.Food Chem. 52: 2386-2390.

Kalckar, H.M. 1947. اسپکتروفتومتری دیفزیال ترکیبات پورین به وسیله یک آنزیم خاص. J. Biol. Chem.167: 429-443.

Kang, D.G., Y.S. Lee, H.J. Kim, Y.M. Lee, and H.S. Lee. 2003. آنزیم تبدیل آنژیوتانسین مهار کننده وینیل پروپانویید گلیکوزیدها از Clerodenron trichotomum. J. Ethnopharmacol. 89: 151-154.

Koo, K.A., S.H. Sung, J.H. Park, S.H. Kim, K.Y. Lee, and Y.C. Kim. 2005. در آزمایشگاهی فعالیت های محافظت عصبی از گلیکوسایدهای فنلتانوئید از Callicarpa dichotoma. Planta Med.71: 778-780.

Koo, K.A., S.H. Kim, T.H. Oh, and Y.C. Kim. 2006.Acteosideو آگلیکون های آن از کشت های اولیه سلول های قشری موش صحرایی در برابر اکسی توکسیته ناشی از گلوتامات محافظت می کنند. علوم زندگی 79:709-716.

Lin, C.L., S.Y. Lin, Y.H. Lin, and W.C. Hou. 2006. اثرات پروتئین ذخیره سازی لوله یام (Dioscorea alata cv. Tainong No.1) و هیدرولیزات های پپتیک آن بر موش های خود به خود بیش از حد تنسیوز. ج. Sci. مواد غذایی اگریک 86: 1489-1494.

مارک ، کي اس و تي پي ديويس . 2000. سکته مغزی: توسعه, پیشگیری, و درمان با مهار کننده پپتیداز. Peptides 21:1965-1973.

Miki, M., H. Tamai, M. Mino, Y. Yamamoto, and E. Niki. 1987. اکسیداسیون زنجیره ای آزاد رادیکال از سلول های قرمز خون موش توسط اکسیژن مولکولی و مهار آن توسط α- tocopherol. بيوشيم قوسي . بيوفي . 258: 373-380.

شورای ملی علوم. 1994. راهنمای مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی. شورای ملی علوم، تایوان.

Ohno, T., M. Inoue, Y. Ogihara, and I. Saracoglu. 2002. فعالیت ضد متاستاتیکacteoside, a phenylethanoid glycoside.Biol. Pharm. Bull. 25: 666-668.

Vendetti, M. A., B. Rubin, D. W. Cushman. 1977. طراحی مهار کننده های خاص آنزیم تبدیل کننده آنژیوتنسین: یک کلاس جدید از عوامل ضد فشار خون فعال دهانی. Science 196: 441-444.

Rao, Y.K., S.H. Fang, S.C. Hsieh, T.H. Yeh, and Y.M. Tzeng. 2009. اجزای تشکیل دهنده از هند و فعالیت های ضد التهابی خود را. J. Ethnopharmacol. 121: 292-296.

Smith, M.A., G. Perry, P.L. Richey, L.M. Sayre, V.E. Anderson, M.F. Beal, and N. Kowal 1996. آسیب اکسیداتیو در آلزایمر. Nature 382: 120-121.Wang, P., J. Kang, R. Genev, Z. Yang, J. Lu, J. Gao, and Z. Jia.

1996. اثرات روکش گلیکوزید فنیل پروپانوئید از Pedicularis بر آنیون سوپر اکسید و رادیکال هیدروکسیل با روش اسپین به دام انداختن. بيوشيم . فارماکول . 51: 687- 691.

Wong, I.Y.F., Y. Huang, Z.D. He, C.W. Lau, and Z.Y. Chen. 2001. اثرات آرامش بخش عصاره Purpurascens Ligstrum و تصفیهacteosideدر حلقه های آهورتیک موش. پلانتا دکتر 67:317-321

Wu, Y.T., L.C. Lin, J.S. Sung, and T.H. Tsai. 2006. تعیینacteosideدر Cistanche deserticola و Boschniakia rossica و فارماکوکینتیک آن در موش های صحرایی آزاد در حال حرکت با استفاده از LC-MS/MS. J. کروماتوگر. ب ۸۴۴: ۸۹-۹۵.