اثر ضد خستگی سرکه آلو در موشهای صحرایی با شدت بالا

1 گروه علوم و فناوری غذایی، دانشگاه ملی کیونگ پوک، داگو 41566، کره؛ kimjeoho90@gmail.com (J.-HK); kdmoon@knu.ac.kr (K.-DM)

* مکاتبات: kseo@dau.ac.kr; تلفن: به علاوه 82-51-200-7565

مخاطب:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساپ: 008618081934791

خلاصه

امروزه انواع جدیدی از سرکه با استفاده از مواد اولیه و فرآیندهای بیوتکنولوژیکی مختلف تولید شده است. میوه Prunus mume به طور گسترده در شرق آسیا توزیع شده است و به عنوان یک داروی عامیانه برای رفع خستگی استفاده می شود. در این مطالعه، سرکه Prunus mume (PV) با تخمیر دو مرحله‌ای تولید شد و فعالیت ضد خستگی آن توسط میوبلاست‌های C2C12 و موش‌های ورزش‌کرده با شدت بالا مورد ارزیابی قرار گرفت. تجویز PV به طور قابل توجهی استقامت دویدن و تجمع گلیکوژن را در کبد و عضله موش‌های مکمل PV در مقایسه با گروه‌های کنترل غیرفعال و تمرین‌شده بهبود بخشید. علاوه بر این، مکمل PV نشانگرهای زیستی سرم مرتبط با خستگی کمتری را ایجاد کرد، به عنوان مثال، آمونیاک، فسفات معدنی و لاکتات. موش‌های تحت درمان با PV فعالیت لاکتات دهیدروژناز و فعالیت گلوتاتیون پراکسیداز بالاتر و فعالیت کراتین کیناز و سطوح مالون دی‌آلدئید پایین‌تری را نشان دادند. علاوه بر این، ترکیبات فنلی در PV با استفاده از آنالیز HPLC شناسایی شدند. اسیدهای فنولیک مورد تجزیه و تحلیل در PV عبارت بودند از اسید پروتوکاتچوئیک، اسید سیرینگیک، اسید کلروژنیک و مشتقات آن. این نتایج نشان می دهد که تجویز PV با خواص آنتی اکسیدانی به بهبود بازیابی خستگی در موش های خسته کمک می کند. یافته‌های این مطالعه نشان می‌دهد که PV حاوی ترکیبات زیست فعال مختلف می‌تواند به عنوان یک ماده عملکردی در برابر خستگی ناشی از ورزش با شدت بالا استفاده شود.

کلمات کلیدی: Prunus mume; سرکه؛ اثر ضد خستگی؛ ورزش با شدت بالا؛ اسید فنولیک

1. مقدمه

Prunus mume Sieb. et Zucc. که به نام‌های maesil، ume و meizi شناخته می‌شود، به طور گسترده در کره، ژاپن و چین کشت می‌شود و برای مدت طولانی به عنوان یک داروی عامیانه برای هضم، تشنگی، سم‌زدایی، استفراغ و تب استفاده می‌شده است. ]. مطالعات قبلی روی فعالیت‌های دارویی و بیولوژیکی ماسیل، آن را به‌عنوان منبع بالقوه حذف‌کننده‌های رادیکال‌های آزاد، به‌عنوان مهارکننده ویروس آنفولانزای A و تحرک هلیکوباکتر پیلوری، و به‌عنوان واسطه‌ای پیش‌التهاب و همچنین توانایی آن بررسی کرده‌اند. برای بهبود سیالیت خون [1-3]. علاوه بر این، نشان داده شده است که عصاره ماسیل در موش‌های آموزش دیده فعالیت‌های ضد خستگی دارد [4]. اگرچه تعدادی از مطالعات با استفاده از عصاره ماسیل وجود دارد، اما مطالعات روی مواد غذایی فرآوری شده با استفاده از ماسیل به طور کامل مورد بررسی قرار نگرفته است. از این رو، این مطالعه با هدف تولید سرکه با استفاده از ماسیل و بررسی فعالیت ضد خستگی آن انجام شد. سرکه یک فرآورده قلیایی است که از دیرباز به عنوان یک داروی سنتی و دلچسب مورد استفاده قرار می گرفته است [5]. اخیراً انواع مختلفی از سرکه با استفاده از منابع و فناوری های اساسی برای برآوردن نیازهای مشتری ساخته شده است. از آنجایی که اجزای اصلی سرکه اثرات مفید متعددی از خود نشان داده اند، به عنوان مثال، اثرات آنتی اکسیدانی، ضد فشار خون، ضد قند خون، و ضد میکروبی، آن را به طور رایج در سراسر جهان مصرف می کنند [6-9]. علاوه بر این، مطالعات قبلی نشان داده‌اند که تجویز اسید استیک باعث افزایش گلیکوژن در کبد و عضلات اسکلتی موش‌های خسته در حین ورزش می‌شود و استات مکمل خوراکی باعث سنتز گلیکوژن ماهیچه‌ای پس از ورزش شدید در اسب‌ها می‌شود [10،11]. این مطالعات نشان داده اند که مصرف مداوم سرکه اثرات ارزشمندی بر ظرفیت ورزش استقامتی و بازیابی خستگی جسمانی دارد. با این حال، تغییرات فیزیولوژیکی زیربنای اثرات ضد خستگی سرکه مزیل هنوز به طور کامل شناخته نشده است.

خستگی، یک علامت رایج در اکثر جوامع است که بسیاری از افراد آن را تجربه کرده اند، به عنوان مشکل در شروع یا حفظ فعالیت های خود به خودی و بدتر شدن عملکرد ورزشی در نظر گرفته می شود [12]. بسیاری از مطالعات نشان داده اند که عوامل مختلفی هنگام در نظر گرفتن خستگی و ورزش مهم هستند. به عنوان مثال، خستگی ناشی از ورزش با شدت بالا با خستگی مرتبط است که نشان می دهد ظرفیت عضله در حال کار به شدت آسیب دیده است [13]. علاوه بر این، ورزش با شدت بالا باعث کاهش منابع انرژی، به عنوان مثال، گلیکوژن کبد و ماهیچه، و همچنین تجمع متابولیت ها، از جمله اسید لاکتیک، فسفر معدنی، و آمونیاک می شود که باعث ایجاد خستگی عضلانی توسط اسیدوز داخل سلولی در بدن می شود [12]. ، 14]. بنابراین، بهبود خستگی ناشی از ورزش مستلزم این است که آسیب بدنی ترمیم شده باشد و متابولیت های انباشته شده در طول ورزش حذف شوند. علاوه بر این، استرس اکسیداتیو باعث بیماری‌های مزمن مختلفی می‌شود، به عنوان مثال، خستگی مزمن، پیری پوست، دیابت شیرین، سرطان‌ها و بیماری آلزایمر [15-18]. به این دلایل، محققان محصولات طبیعی را برای توانایی آنها در بهبود توانایی های فیزیکی، مانند کاهش خستگی و افزایش استقامت ورزش با عوارض جانبی کم، بررسی کرده اند. بنابراین، در مطالعه حاضر، سرکه حاوی سطح بالایی از اسیدهای آلی و اسیدهای آمینه از طریق تخمیر دو مرحله‌ای با استفاده از مایل همراه با آب گلابی به عنوان بستر تولید شد. سپس فعالیت ضد خستگی سرکه Prunus mume (PV) بر اساس اثرات زنده‌مانی سلولی و تجمع گلیکوژن در شرایط آزمایشگاهی و تغییرات نشانگرهای زیستی مرتبط با خستگی در داخل بدن برآورد شد.

2. مواد و مروش ها

2.1. مواد

آب میوه آلو (PJ) به روش چو و همکاران تولید شد. [19]. میوه P. mume (maesil) از سازمان Maesil کره (سانچئون، کره) به دست آمد. Maesil دسته بندی شد، به دقت با آب شسته شد، خرد شد و سپس با 0.1 درصد (w/v) پکتیناز واکنش نشان داد (Pectinex Ultra AFP, Novozyme, Switzerland, 10,000 Pectu/ ز) برای مختل کردن دیواره سلولی در دمای 40 ◦C به مدت ۲ ساعت. سپس، ماسیل واکنش داده شده در دمای 3500× گرم به مدت 15 دقیقه در دمای 4 درجه سانتیگراد سانتریفیوژ شد. مایع رویی با استفاده از کاغذ صافی (Whatman No.2، 8 میکرومتر) فیلتر شد و توسط یک اواپراتور چرخشی در دمای 30 درجه سانتیگراد غلیظ شد تا به بریکس 60-56 برسد. عصاره گلابی از شرکت ESfood (Gunpo، کره) تهیه شد، سپس برای حفظ کیفیت آن در دمای 4◦C نگهداری شد. مشخصات آن به شرح زیر بود: بریکس 69، pH 3.4-3.6 و اسیدیته 0.52-0.61 درصد. Saccharomyces cerevisiae KCCM 11306 و Acetobacter aceti KCCM 12654 از مرکز فرهنگ میکروارگانیسم ها کره (سئول، کره) به دست آمدند.

2.2. تولید PV

2.3. خواص فیزیکوشیمیایی PV

2.3.1. اسیدیته کل، محتوای الکل، و محتوای قند در PV

محتوای الکل PV توسط یک هیدرومتر Gay-Lussac اندازه گیری شد. به طور خلاصه، 1{9}}0 میلی‌لیتر PV از فلاسک گرفته شد و به مدت 10 دقیقه در 1800× گرم سانتریفیوژ شد تا از شر ساکارومایسس سرویزیه KCCM 11306 خلاص شود. سپس مایع رویی تقطیر شد و مجدداً با آب مقطر به 100 میلی لیتر تنظیم شد. سپس دمای تقطیر تا رسیدن به 15 درجه سانتیگراد خنک شد و پس از آن با استفاده از هیدرومتر الکل مقدار الکل تعیین شد. میزان قند PV با استفاده از یک رفرکتومتر دستی (Atago pocket PAL{8}}، Atago Co.، Fukaya، Saitama، ژاپن) اندازه گیری شد. در نهایت، اسیدیته کل PV با تیتر کردن نمونه رقیق شده با 0.1 N NaOH تا pH 8.3 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت و به عنوان یک مقدار اسید استیک بیان شد.

2.3.2. اسیدهای آلی و محتوای اسیدهای آمینه آزاد در PV

ترکیب اسید آلی توسط کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (شرکت شیمادزو مدل برجسته، کیوتو، ژاپن) تعیین شد. جداسازی اسیدهای آلی با استفاده از ستون PL Hi-Plex H (7.7 × 3 0 0 میلی متر، شرکت Agilent، سانتا کلارا، CA، ایالات متحده آمریکا) در دمای 65 درجه سانتیگراد انجام شد. فاز متحرک شامل 5 میلی مولار H2SO4 و سرعت جریان در 0.6 میلی لیتر در دقیقه ثابت نگه داشته شد. پیک کروماتوگرافی همزمان با هر اسید آلی با مقایسه زمان ماند با هر استاندارد مشخص شد. محتوای اسید آمینه آزاد با استفاده از یک اتوآنالایزر اسید آمینه (L{11}}، هیتاچی، توکیو، ژاپن) با یک ستون تبادل یونی پر شده با رزین تبادل یونی سفارشی هیتاچی (2622 SC PF، 4.6×60 میلی‌متر) آنالیز شد. ستون در دمای 50 درجه سانتیگراد در کوره ستونی نگهداری شد و دمای راکتور 135 درجه سانتیگراد بود. برای فاز متحرک، یک مجموعه بافر (PF-1، PF-2، PF-3، PF-4، PF-6، PF-RG، R{ {25}} و C1، شرکت Kanto، توکیو، ژاپن) با سرعت جریان 1 میلی لیتر در دقیقه استفاده شد. هر اسید آمینه آزاد با مقایسه زمان ماند با محلول استاندارد مخلوط اسیدهای آمینه نوع AN-II و B شناسایی شد.

(FUJIFILM Wako Pure Chemical Co.، اوزاکا، ژاپن).

2.4. سمیت سلولی و تجمع گلیکوژن در شرایط آزمایشگاهی

2.4.1. کشت سلولی و تمایز

سلول‌های C2C12 (میوبلاست‌های موش) از مجموعه فرهنگ نوع آمریکایی (ATCC، Rockville، ND، USA) خریداری شدند. سلول ها در محیط Eagle's Modified Dulbecco (DMEM) همراه با 10 درصد سرم جنین گاو (FBS)، پنی سیلین (100 IU/mL) و استرپتومایسین (100 میکروگرم بر میلی لیتر) کشت داده شدند (Gibco، Life Technologies، Grand Island، NY، ایالات متحده آمریکا). سلول‌های C2C12 در دمای 37 درجه سانتی‌گراد در اتمسفر مرطوب شده با 5 درصد شرایط CO2 انکوبه شدند. برای القای تمایز، 70 درصد سلول‌های هم‌ریز پس از آن در DMEM حاوی 2 درصد سرم اسب (HS) و 10 میکروگرم بر میلی‌لیتر انسولین به مدت 3 روز با تغییرات محیطی هر دو روز یکبار کشت داده شدند.

2.4.2. سنجش سولفورودامین B (SRB).

تکثیر سلولی با استفاده از روش سولفورودامین B (SRB، Sigma، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا) ارزیابی شد. سلول‌های C2C12 در 1×104 سلول/چاه در صفحات 48-چاه کاشته شدند و با سوئیچینگ محیط متمایز شدند. سپس سلول ها با 0.1-0.4 میکروگرم بر میلی لیتر PV به مدت 3 روز در دمای 37 درجه سانتیگراد در انکوباتور 5 درصد CO2 مرطوب شده انکوبه شدند. پس از تیمار، محیط دور ریخته شد و سلول ها با محلول SRB در دمای اتاق به مدت 1 ساعت رنگ آمیزی شدند و پنج بار با استفاده از اسید استیک 1 درصد شستشو شدند. هر چاهک با 10 میلی‌مولار تریس حل شد و در طول موج 540 نانومتر توسط دستگاه میکروپلیت‌خوان اندازه‌گیری شد (Molecular Devices, Inc., San Jose, CA, USA)

2.4.3. محتوای گلیکوژن آزمایشگاهی

2.5. طراحی آزمایشی حیوانات

2.5.1. حیوانات و رژیم های غذایی

موش های نر چهار هفته ای Sprague-Dawley (SD) از Hyo-Chang Science Inc (بوسان، کره) خریداری شدند. موش ها به صورت جداگانه به قفس های اکریل تقسیم شدند و در دمای 2 ± 22 درجه سانتیگراد در یک چرخه 12 ساعته نور تا تاریکی قرار گرفتند. تمام موش‌ها با گلوله‌های غذایی تجاری برای دوره آزمایش تغذیه شدند. سپس موش‌ها به‌طور تصادفی به پنج گروه (n=6) ​​تقسیم شدند: کنترل بی‌تحرک (SC)، کنترل ورزش‌کرده (EC) و موش‌های ورزش‌کرده با 3 درصد آب آلو غلیظ شده (PJ)، 5 درصد PV رقیق شده با مقطر. آب (PV5) و 7.5 درصد PV رقیق شده با آب مقطر (PV7.5). تمام گروه‌ها با تجویز خوراکی با غلظت 7 میلی‌لیتر بر کیلوگرم وزن بدن برای دوره آزمایش، که حجم دریافتی روزانه در انسان در نظر گرفته می‌شود، تکمیل شدند. مکمل اسید استیک با غلظت بالا می تواند باعث التهاب روده در موش صحرایی شود. PV7.5 به عنوان غلظت بالا برای آزمایش استفاده شد [12]. موش‌های SC و EC با مقادیر مساوی آب مقطر تجویز شدند. پس از آن، تمام موش ها برای دویدن روی تردمیل تحریک شدند. در طول آزمایش، موش‌ها تا 12 ساعت آخر دوره آزمایشی دسترسی آزاد به غذا و آب داشتند و در آن زمان غذا دریغ می‌شد. همه موش‌ها مطابق با دستورالعمل‌های دانشگاه دونگ-آ برای مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی (DIACUC{22}}) تحت درمان قرار گرفتند.

2.5.2. برنامه تمرینی با بارگذاری تدریجی و تست استقامت دویدن

همه موش‌ها به استثنای گروه SC از طریق برنامه تمرینی با بار تدریجی از ساعت 09:00 تا 13:{3}}، 6 روز در هفته به مدت 4 هفته با استفاده از تردمیل (صنعت ابزار دایجونگ، سئول، کره) آموزش دیدند. . این برنامه شامل افزایش تدریجی شدت با دویدن با سرعت 20 متر در دقیقه برای 10 دقیقه، 25 متر در دقیقه برای 20 دقیقه، 30 متر در دقیقه برای 20 دقیقه و 35 متر در دقیقه برای 30 دقیقه از هفته های 1 تا 4 است. هنگامی که موش ها خسته هستند و قادر به دویدن نیستند، یک تخته شوک الکتریکی در انتهای تردمیل آنها را تنظیم می کند تا به دویدن ادامه دهند.

در پایان دوره آزمایشی، موش‌های صحرایی (n=6) مجبور به دویدن با سرعت 40 متر در دقیقه تا زمان خستگی شدند و سوابق دویدن آنها برای تعیین استقامت دویدن ثبت شد. همه موش‌ها زمانی که بیش از 10 ثانیه روی تخته الکتریکی ماندند، خسته ارزیابی شدند. بقیه (n=6) به مدت 60 دقیقه روی تردمیل با سرعت 40 متر در دقیقه قرار گرفتند. پس از آزمایش، موش‌ها با اتیل اتر قربانی شدند و نمونه‌های خون از ورید اجوف تحتانی جمع‌آوری شد و به مدت 2 ساعت در دمای اتاق قرار داده شد و سپس برای جداسازی نمونه‌های سرم در دمای 2500× گرم به مدت 20 دقیقه سانتریفیوژ شد. عضلات کبد و گاستروکنمیوس جمع آوری و با سالین شستشو داده شدند. تمام نمونه ها در دمای 80- درجه سانتیگراد در فریزر عمیق نگهداری شدند.

2.6. پارامترهای بیوشیمیایی

2.6.1. نشانگرهای زیستی مرتبط با خستگی

سطوح سرمی فسفات معدنی و آمونیاک با استفاده از شرکت Biovision (Milpitas، CA، USA) ارزیابی شد. سطوح لاکتات در سرم با استفاده از کیت سنجش لاکتات (Bioassay Systems، Hayward، CA، USA) تعیین شد.

2.6.2. تجزیه و تحلیل سطوح گلیکوژن در کبد و عضله

محتوای گلیکوژن با توجه به روش توصیف شده توسط Cho و همکاران تجزیه و تحلیل شد. [5]. به طور خلاصه، 0.2 گرم از بافت کبد و ماهیچه با 400 میکرولیتر محلول هیدروکسید پتاسیم 30 درصد واکنش داده شد، به مدت 30 دقیقه جوشانده شد و سپس در دمای 25 درجه سانتیگراد سرد شد. سپس 1 میلی لیتر اتانول به مخلوط اضافه شد و به مدت 15 دقیقه در دمای 6000× گرم و 4 درجه سانتیگراد سانتریفیوژ شد. مایع رویی متعاقبا حذف شد و گلوله با 0.5 میلی لیتر آب مقطر مخلوط شد و پس از آن 0.2 درصد محلول آنترون برای هیدرولیز گلوکز اضافه شد. در نهایت جذب در طول موج 620 نانومتر با اسپکتروفتومتر اندازه گیری شد

2.6.3. فعالیت‌های لاکتات دهیدروژناز عضلانی (LDH) و فعالیت‌های کراتین کیناز سرم (CK)

2.6.4. سطح فعالیت مالون دی آلدئید (MDA) و گلوتاتیون پراکسیداز (GPx)

سطح MDA و فعالیت GPx با همگن کردن مقادیر 1/0 گرمی 0 از کبد منجمد در سالین بافر فسفات (PBS) ارزیابی شد. پس از همگن‌سازی، نمونه‌ها به مدت 10 دقیقه در دمای 3500× گرم در دمای 4 درجه سانتی‌گراد سانتریفیوژ شدند و سپس از مایع‌های رویی برای آنالیز استفاده شد. سطح MDA و فعالیت GPx با کیت های رنگ سنجی (Biovision Inc., Milpitas, CA, USA) اندازه گیری شد.

2.7. تعیین محتوای فنلی کل (TPC)

TPC PV با روش رنگ سنجی Folin-Ciocalteu با برخی تغییرات تعیین شد [19]. به طور خلاصه، PV با معرف Folin-Ciocalteu واکنش داده و با محلول کربنات سدیم خنثی شد. سپس جذب رنگ آبی در طول موج 760 نانومتر توسط اسپکتروفتومتر اندازه گیری شد. به عنوان استاندارد، اسید گالیک (سیگما آلدریچ، خلوص > 99 درصد) استفاده شد و TPC به صورت میلی گرم معادل اسید گالیک در گرم (mg GAE/g) PV بیان شد.

2.8. آنالیز HPLC

2.9. تحلیل آماری

3. نتایج و بحث

3.1. محتویات اسیدهای آلی و اسیدهای آمینه آزاد در PV

ترکیبات اصلی طعم در سرکه تخمیر شده از اسیدهای آلی تولید شده از تخمیر و همچنین اسیدهای آمینه آزاد تولید شده از هیدرولیز پروتئین در طی تخمیر تشکیل شده است [2{47}}]. PV حاوی اسیدهای آلی، اسید استیک، اسید اگزالیک، اسید سیتریک، اسید سوکسینیک، اسید مالیک و اسید لاکتیک به ترتیب به میزان 4034.46، 72.76، 1530.65، 1075.51، 140.95 و 390.87 میلی گرم درصد می باشد (T). علاوه بر این، PV حاوی تعدادی اسید آمینه آزاد، یعنی اسید آسپارتیک، تیروزین، فنیل آلانین، هیستیدین، لیزین و آرژنین بود. محتوای اسید آسپارتیک، تیروزین، فنیل آلانین، هیستیدین، لیزین و آرژنین به ترتیب 7.56، 5.46، 4.43، 32.93، 4.11 و 20.76 ppm بود. پس از تخمیر دو مرحله‌ای، PV اسیدهای آلی به‌خصوص اسید استیک و محتوای اسید آمینه آزاد بالاتری نسبت به PJ نشان داد. در مقایسه با مطالعات قبلی، محتوای اسیدهای آلی موجود در سرکه تجاری با سورگوم شامل اسید استیک (3600 میلی گرم درصد)، اسید اگزالیک (16.62 میلی گرم درصد)، اسید سیتریک (49.7 میلی گرم درصد)، اسید سوکسینیک (92.5 میلی گرم درصد)، مالیک است. اسید (27.83 میلی گرم درصد) و اسید لاکتیک (820 میلی گرم درصد) [21]. PV حاوی مقادیر کمتری از اسیدهای آمینه آزاد نسبت به سرکه سیر بود که حاوی مقادیر بالایی از اسیدهای آمینه آزاد (23.4 پی پی ام)، تیروزین (تشخیص داده نشده)، فنیل آلانین (313.9 پی پی ام)، هیستیدین (4.6 پی پی ام)، لیزین (460.3 پی پی ام) و آرژنین (65.0ppm). نا و همکاران (2013) گزارش کردند که ویژگی‌های کیفی در سرکه تخمیر شده به مواد مختلف بستگی دارد و به میزان بالاتر اسید سیتریک، اسید سوکسینیک، اسید مالیک، تیروزین و هیستیدین و مقدار کمتر اسید آسپارتیک، فنیل آلانین، لیزین و آرژنین مربوط می‌شود. در PV در مقایسه با سایر سرکه های تخمیر شده مشاهده شدند [22]. به طور کلی، نتایج نشان می دهد که PV تخمیر شده با PJ غنی شده با عصاره گلابی حاوی مقدار زیادی اسیدهای آلی و محتویات مختلف اسید آمینه آزاد است.

میز 1.محتوای اسیدهای آلی و اسیدهای آمینه آزاد در سرکه Prunus mume (PV).

3.2. شناسایی و کمی سازی ترکیبات فنلی در PV

TPC PV 25.{1}} میلی‌گرم GAE/g بود (داده‌ها نشان داده نشده است). برای شناسایی بیشتر ترکیبات فنلی موجود در PV، آنالیز HPLC-PDA انجام شد. اسید پروتوکاتچوئیک، اسید سیرینگیک، اسید کلروژنیک، اسید نئوکلروژنیک و اسید کریپتوکلروژنیک با غلظت های 0.08، 0.22، 0.37، 0.82، و 1.36. mg/g به ترتیب با استفاده از آنالیز HPLC در مقایسه با هر اسید فنولیک استاندارد شناسایی شد (شکل 1). این نتیجه نشان داد که اسید کریپتوکلروژنیک و اسید نئوکلروژنیک اسیدهای فنولیک اصلی در PV هستند. بسیاری از مطالعات گزارش کرده اند که ترکیبات فنلی بر خواص عملکردی مانند آنتی اکسیدان، ضد سرطان و ضد دیابت تأثیر می گذارد [23-25]. در مطالعه مرتبط انجام شده توسط یوان و همکاران. (2019)، عصاره Sonchus arvensis غنی از پلی فنل حاوی اسید کلروژنیک، لوتئولین و اسید کاسنی باعث بهبود فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی و سنتز گلیکوژن در موش های تمرین شده با ورزش شد [26]. عصاره آبی دانه های Abelmoschus esculentus Moench حاوی مقادیر بالایی از پلی فنول ها و فلاونوئیدها، اثرات آنتی اکسیدانی و ضد خستگی قابل توجهی را در موش ها پس از آزمایش شنا با وزن نشان داد [27]. همچنین، ترکیبات فنلی شامل 5-HMF، اسید نئوکلروژنیک، اسید پروتوکاتچوئیک و اسید سیرینگیک در کنسانتره میوه Prunus mume تیمار شده با پکتیناز شناسایی شد که اثرات مهاری بر سلول‌های سرطان روده بزرگ نشان می‌دهد [19]. اگرچه مطالعات بیشتری برای بررسی مکانیسم‌های مولکولی پشت فعالیت‌های ضد خستگی ترکیبات فنلی مورد نیاز است، این نتیجه نشان می‌دهد که فعالیت‌های ضد خستگی PV به ترکیبات فنلی آن مانند پروتوکاتچوئیک اسید، اسید سیرینگیک، اسید کلروژنیک و مشتقات آن

شکل 1.ترکیبات فنلی موجود در سرکه Prunus mume (PV) توسط HPLC مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. پروتوکاتچوئیک اسید (205 نانومتر، 8.774 دقیقه)؛ اسید سیرینگیک (216.8 نانومتر، 23.857 دقیقه)؛ اسید کلروژنیک (326.1 نانومتر، 18.663 دقیقه)؛ اسید نئوکلروژنیک (324.9 نانومتر، 9.660 دقیقه)؛ کریپتوکلروژنیک اسید (326.1 نانومتر، 20.395 دقیقه).

3.3. اثرات PV بر تکثیر سلولی و تجمع گلیکوژن در میوبلاست های C2C12

عضله اسکلتی نقش مهمی در حمایت از تولید انرژی در بدن دارد [27]. همانطور که در شکل 2 نشان داده شده است، ما سمیت سلولی و تجمع گلیکوژن PV را روی میوبلاست C2C12 ارزیابی کردیم. برای ارزیابی سمیت سلولی PV، سنجش SRB در میوبلاست‌های C2C12 انجام شد و پس از تمایز، سلول‌ها با غلظت‌های مختلف PV تیمار شدند (0.1، 0.2، {{1{{{{ 12}}}}.3 و 0.4 μg/mL) به مدت 48 ساعت (شکل 2A). قابلیت زنده ماندن سلولی میوبلاست های C2C12 تیمار شده با PV بیش از 95 درصد بود که نشان دهنده تفاوت معنی داری در مقایسه با شاهد نیست. برای ارزیابی محتوای گلیکوژن در میوبلاست های C2C12، یک سنجش گلیکوژن با استفاده از لیزات سلولی انجام شد. همانطور که در شکل 2B نشان داده شده است، محتوای گلیکوژن در میوبلاست های C2C12 به طور قابل توجهی توسط PV به صورت وابسته به دوز افزایش یافت. با این حال، تیمار PV در دوز 0.4 میکروگرم بر میلی‌لیتر تفاوت معنی‌داری در مقایسه با 0.3 میکروگرم در میلی‌لیتر PV نشان نداد. این نتایج نشان داد که درمان PV می‌تواند تجمع گلیکوژن را با غلظت‌های غیر سیتوتوکسیک در عضلات اسکلتی افزایش دهد.

شکل 2.اثرات PV بر (A) تکثیر سلولی و (B) تجمع گلیکوژن در myoblasts C2C12. مقادیر داده ها به صورت میانگین ± SE (n=3) بیان می شوند. حروف مختلف روی نوار به طور قابل توجهی متفاوت هستند (p <>

3.4. اثرات PV بر زمان کار تردمیل

زمان دویدن تا زمان خستگی نشانگر ظرفیت ورزش است که نشان دهنده بازیابی خستگی است [5]. در این مطالعه یک برنامه تمرینی ورزشی با استفاده از تردمیل به مدت 4 هفته بر روی موش‌ها انجام شد. پس از تمرین با شدت بالا تا خستگی، همه گروه‌ها افزایش قابل توجهی در استقامت دویدن در مقایسه با موش‌های SC نشان دادند و PV7.5 طولانی‌ترین زمان دویدن را در بین همه گروه‌ها ثبت کرد (شکل 3). Reidy & Rasmussen (2016) گزارش کردند که مکمل با اسیدهای آمینه باعث افزایش عملکرد ورزشی از طریق القای سنتز پروتئین در عضلات اسکلتی انسان پس از تمرین مقاومتی می شود [28]. این نتیجه نشان داد که PV به طور موثر ظرفیت استقامتی را در موش‌های تمرین شده با شدت بالا افزایش می‌دهد.

شکل 3.تاثیر PV بر زمان استقامت دویدن. مقادیر داده ها به صورت میانگین ± SE (n {{0}}) بیان می شوند. SC: کنترل بی تحرک، EC: کنترل تمرین شده، PJ: آب آلو، PV5: 5 درصد نوشیدنی سرکه Prunus mume، PV7.5: 7.5 درصد نوشیدنی سرکه Prunus mume. حروف مختلف روی نوار به طور قابل توجهی متفاوت هستند (p <>

3.5. اثرات PV بر بیومارکرهای سرم مرتبط با خستگی

بروز خستگی فیزیکی با کمبود انرژی در حین ورزش مرتبط است. از آنجایی که مقادیر زیادی انرژی، مایعات و اسیدهای آمینه در طول ورزش با شدت بالا مصرف می شود، نوشیدنی های ورزشی می توانند به حفظ تعادل مایعات و سنتز مجدد پروتئین ها کمک کنند [29]. به همین دلیل، PV می تواند به عنوان یک نوشیدنی ورزشی برای بهبود خستگی ناشی از ورزش استفاده شود. علاوه بر این، اسیدوز داخل سلولی باعث خستگی عضلانی ناشی از تجمع لاکتات و فسفات معدنی می شود [12]. در طول ورزش شدید، بیومارکرهای سرم مرتبط با خستگی مانند آمونیاک سرم، فسفات معدنی و لاکتات تجمع می‌یابند که باعث خستگی عضلانی در نتیجه اسیدوز داخل سلولی می‌شوند [30]. بنابراین، کاهش حساسیت به خستگی با افزایش زمان اجرا و کاهش نشانگرهای زیستی خستگی مرتبط است. گلیکوژن کبد و ماهیچه، که منابع شناخته شده سوبسترا برای گلیکولیز و تولید انرژی هستند، به عنوان اولین دفاع در برابر کاهش انرژی عمل می کنند [5]. از این رو گلیکوژن یکی از شاخص های خستگی است. سطوح سرمی آمونیاک، فسفات معدنی و لاکتات گروه PV7.5 57/64 میکروگرم بر میلی‌لیتر، 98/2 میلی‌مولار و 21/1 میلی‌مولار بود (شکل 4A-C). این مقادیر به ترتیب 28.22 درصد، 25.91 درصد و 18.24 درصد نسبت به گروه EC به طور قابل توجهی کاهش یافت. در مقایسه با بیومارکرهای سرمی در موش‌های صحرایی EC، موش‌های SC و PJ تفاوت معنی‌داری نشان ندادند. فوشیمی و همکاران (2001) گزارش کردند که مکمل سرکه به طور قابل توجهی لاکتات و آمونیاک سرم را پس از تمرین تا خستگی در موش‌ها کاهش می‌دهد و استفنز و همکارانش. (2008) گزارش داد که تجویز خوراکی استات باعث بهبود سطح لاکتات خون در خوک ها شد [31،32]. بر اساس این نتایج، سطوح بالای اسیدهای آلی و اسیدهای آمینه آزاد مختلف در PV ممکن است بر تنظیم آمونیاک سرم، فسفات معدنی و لاکتات تأثیر بگذارد. بنابراین، تجویز PV به طور موثر با تنظیم بیومارکرهای سرمی مرتبط با خستگی در موش‌های تمرین‌کرده، اثر ضد خستگی اعمال کرد.

شکل 4.اثر PV بر سرم (A) آمونیاک، (B) فسفر معدنی و (C) لاکتات در موش‌های فرسوده. مقادیر داده ها به صورت میانگین ± SE (n {{0}}) بیان می شوند. SC: کنترل بی تحرک، EC: کنترل تمرین شده، PJ: آب آلو، PV5: 5 درصد نوشیدنی سرکه Prunus mume، PV7.5: 7.5 درصد نوشیدنی سرکه Prunus mume. حروف مختلف روی نوار به طور قابل توجهی متفاوت هستند (p <>

3.6. اثرات PV بر تغییرات تجمع گلیکوژن

اثرات PV بر روی گلیکوژن کبد و ماهیچه در شکل 5 نشان داده شده است. گروه EC محتوای بالاتری از گلیکوژن عضله گاستروکنمیوس را نشان داد، اما هیچ تفاوت قابل توجهی بین گروه‌های SC و EC وجود نداشت (شکل 5A). با این حال، افزایش قابل توجهی از محتوای گلیکوژن (34.25 درصد) نسبت به گروه EC و PV7.5 مشاهده شد. محتوای گلیکوژن کبد نیز در پاسخ به مکمل با PV7.5 تا 24.21 درصد نسبت به گروه EC افزایش یافت (شکل 5B). مطالعات قبلی گزارش کردند که مکمل خوراکی اسید استیک سنتز گلیکوژن را در کبد و ماهیچه پس از ورزش در موش‌ها و اسب‌ها افزایش می‌دهد [10،11،31]. بنابراین، این نتیجه نشان می دهد که افزایش سطح گلیکوژن کبد و ماهیچه ممکن است با فعالیت ضد خستگی در موش های با شدت بالا مرتبط باشد.

شکل 5. اثر PV بر تجمع گلیکوژن عضله (A) و (B) کبد در موش‌های فرسوده. مقادیر داده ها به صورت میانگین ± SE (n {{0}}) بیان می شوند. SC: کنترل بی تحرک، EC: کنترل تمرین شده، PJ: آب آلو، PV5: 5 درصد نوشیدنی سرکه Prunus mume، PV7.5: 7.5 درصد نوشیدنی سرکه Prunus mume. حروف مختلف روی نوار به طور قابل توجهی متفاوت هستند (p <>

3.7. اثرات PV بر تغییرات فعالیت های LDH و CK

لاکتات دهیدروژناز (LDH) یک اکسیدوردوکتاز در گلیکولیز است که تبدیل برگشت پذیر اسید لاکتیک به پیروات را کاتالیز می کند [33]. کراتین کیناز سرم (CK) یک آنزیم مهم نشان دهنده آسیب عضلانی است [34]. بنابراین، ما سطح LDH عضلانی و CK سرم را برای ارزیابی سطح آسیب عضلانی ارزیابی کردیم. سطح LDH گاستروکنمیوس در موشهای صحرایی EC در مقایسه با گروه SC تفاوت قابل توجهی نداشت (شکل 6A). فعالیت LDH موش‌های دریافت شده با PV7.5 به طور قابل‌توجهی 27.75 درصد در مقایسه با گروه EC افزایش یافت. همانطور که در شکل 6B نشان داده شده است، سطح سرمی CK گروه SC 60.35 U/L بود. مقدار CK گروه EC 71/54 U/L بود که تفاوت معنی داری با مقایسه گروه SC نداشت. با این حال، مکمل PV7.5 به طور قابل توجهی سطوح CK را در مقایسه با موش های صحرایی EC 35.66 درصد کاهش داد. در مطالعات مشابه، عصاره Prunus mume از طریق افزایش فعالیت LDH و تنظیم بیومارکرهای سرم در موش‌های آموزش دیده، بهبود خستگی را بهبود بخشید و CK سرم را در پاسخ به آسیب عضلانی ناشی از سفتی عضلانی افزایش داد و باعث خستگی شد [4،35]. این یافته‌ها نشان می‌دهد که تجویز PV با ارتقای متابولیسم اسید لاکتیک در سلول‌های عضلانی و کاهش آسیب عضلانی با کاهش سطح نشانگرهای خستگی سرم در موش‌ها، از خستگی جلوگیری می‌کند.

شکل 6.اثرات PV بر (A) لاکتات دهیدروژناز و (B) فعالیت های کراتین کیناز در موش های فرسوده شده توسط ورزش. مقادیر داده ها به صورت میانگین ± SE (n {{0}}) بیان می شوند. SC: کنترل بی تحرک، EC: کنترل تمرین شده، PJ: آب آلو، PV5: 5 درصد نوشیدنی سرکه Prunus mume، PV7.5: 7.5 درصد نوشیدنی سرکه Prunus mume. حروف مختلف روی نوار به طور قابل توجهی متفاوت هستند (p <>

3.8. اثرات PV بر تغییرات در سطح MDA و فعالیت GPx در کبد

آسیب عضلانی باعث تغییر در فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی و سطوح MDA می شود [34]. MDA یکی از محصولات جانبی پراکسیداسیون لیپیدی ناشی از استرس اکسیداتیو است. برای مشاهده تغییرات در آنزیم آنتی اکسیدانی و پراکسیداسیون لیپیدی، ما سطوح MDA و GPx را در بافت کبد با تجویز PV به موش‌های تمرین خسته اندازه‌گیری کردیم. نتایج تغییرات قابل توجهی را در پاسخ به تجویز PV نشان داد. به طور خاص، محتوای MDA گروه EC نسبت به گروه SC 10 درصد کاهش یافت (شکل 7A). تجویز PJ، PV5 و PV7.5 باعث کاهش محتوای MDA به ترتیب 18.35 درصد، 20.36 درصد و 25.05 درصد نسبت به گروه EC شد. تجويز PV تحت افزايش قابل ملاحظه فعاليت GPx ناشي از تمرين شديد خسته (شكل 7B). در کبد، تیمار PV7.5 به طور قابل توجهی فعالیت GPx را به میزان 19.65 درصد و 41.14 درصد افزایش داد، اگرچه PV5 تفاوتی در مقایسه با موش‌های EC نشان نداد. در مطالعات قبلی، مکمل‌های خارجی آنتی‌اکسیدان‌ها و یک رژیم غذایی آنتی‌اکسیداتیو سطوح استرس اکسیداتیو را در ورزشکاران پس از تمرین خسته‌کننده کاهش داد [36]. تجویز آنتی اکسیدان ها از درد عضلانی در انسان به دنبال ورزش جلوگیری می کند [37]. علاوه بر این، سرکه سیاه چینی از طریق مهار گونه‌های اکسیژن فعال و همچنین افزایش فعالیت‌های SOD و CAT، فعالیت‌های آنتی اکسیدانی را القا کرد [38]. در مجموع، این نتایج نشان می دهد که مکمل سرکه با فعالیت آنتی اکسیدانی باعث بهبود خستگی می شود. بنابراین، فعالیت های ضد خستگی PV ممکن است با تنظیم آنزیم های آنتی اکسیدانی در موش های خسته همراه باشد.

شکل 7.اثرات PV بر (A) مالون دی‌آلدئید و (B) فعالیت‌های گلوتاتیون پراکسیداز در موش‌های فرسوده شده توسط ورزش. مقادیر داده ها به صورت میانگین ± SE (n {{0}}) بیان می شوند. SC: کنترل بی تحرک، EC: کنترل تمرین شده، PJ: آب آلو، PV5: 5 درصد نوشیدنی سرکه Prunus mume، PV7.5: 7.5 درصد نوشیدنی سرکه Prunus mume. حروف مختلف روی نوار به طور قابل توجهی متفاوت هستند (p <>

4. نتیجه گیری

در این مطالعه، PV حاوی اسیدهای آمینه آزاد مختلف و اسیدهای آلی با یک فرآیند تخمیر دو مرحله‌ای توسعه یافت و با تجزیه و تحلیل سمیت سلولی و تجمع گلیکوژن در میوبلاست‌های C2C12 و همچنین اثرات ضد خستگی in vivo در موش‌های خسته به دنبال شدت بالا ارزیابی شد. ورزش. سطوح بالای تجمع گلیکوژن در شرایط آزمایشگاهی مشاهده شد، و تجویز PV با تنظیم بیومارکرهای خستگی سرم و نشانگرهای آسیب عضلانی در موش‌های خسته به جلوگیری از خستگی کمک کرد. علاوه بر این، ترکیبات فنلی مانند اسید پروتوکاتچوئیک، اسید سیرینگیک و مشتقات اسید کلروژنیک در PV شناسایی شدند. در مجموع، می توان انتظار داشت که PV به عنوان یک ماده کاربردی در برابر خستگی ناشی از ورزش با شدت بالا استفاده شود.

این محصول ما برای ضد خستگی است! برای اطلاعات بیشتر روی عکس کلیک کنید!

منابع

1. هوانگ، جی. ژامبون، JW; Nam, SH فعالیت آنتی اکسیدانی maesil (Prunus mume). کره ای J. Food Sci. تکنولوژی 2004، 36، 461-464.

2. Paik, IY; چانگ، WR; کواک، YS; Cho, SY; جین، HE اثر مکمل پرونوس موم بر سطوح انرژی و عوامل القای خستگی. J. Life Sci. 2010، 20، 49-54. [CrossRef]

3. ناکاجیما، س. فوجیتا، ک. اینو، ی. نیشیو، م. Seto, Y. اثر داروی عامیانه، Bainiku-ekisu، کنسانتره آب موم Prunus، بر عفونت هلیکوباکتر پیلوری در انسان. هلیکوباکتر 2006، 11، 589-591. [CrossRef]

4. کیم، SY; پارک، SH; لی، HN; عصاره مومی پارک، TS Prunus خستگی ناشی از ورزش را در موش‌های آموزش دیده بهبود می‌بخشد. جی. مد. غذا. 2008، 11، 460-468. [CrossRef] [PubMed]

5. Cho, HD; لی، جی اچ. جئونگ، جی اچ. کیم، جی. بله، ST; پارک، اسکی لی، MK; Seo, KI تولید سرکه جدید دارای فعالیت آنتی اکسیدانی و ضد خستگی از Salicornia herbacea LJ Sci. کشاورزی مواد غذایی 2016، 96، 1085-1092. [CrossRef] [PubMed]

6. Xie، X. ژنگ، ی. لیو، ایکس. چنگ، سی. ژانگ، ایکس. شیا، تی. یو، اس. وانگ، ام. فعالیت آنتی اکسیدانی سرکه چینی شانشی و ارتباط آن با پلی فنل ها و فلاونوئیدها در طول فرآیند دم کردن. J. Food Sci. 2017، 82، 2479–2486. [CrossRef]

7. کوندو، س. تایاما، ک. تسوکاموتو، ی. ایکدا، ک. Yamori, Y. اثرات ضد فشار خون اسید استیک و سرکه در موش‌های با فشار خون خود به خود. Biosci. بیوتکنول. بیوشیمی. 2001، 65، 2690-2694. [CrossRef]

8. ساکاکیبارا، س. یامائوچی، تی. اوشیما، ی. تسوکاموتو، ی. Kadowaki, T. استیک اسید AMPK کبدی را فعال می کند و هیپرگلیسمی را در موش های دیابتی KK-A(y) کاهش می دهد. بیوشیمی. بیوف. Res. Co. 2006, 344, 597-604. [CrossRef]

9. یاگنیک، د. سرافین، وی. شاه، ای جی فعالیت ضد میکروبی سرکه سیب علیه اشریشیا کلی، استافیلوکوکوس اورئوس و کاندیدا آلبیکنس. کاهش بیان سیتوکین و پروتئین میکروبی علمی Rep. 2018, 8, 1732–1744. [CrossRef]

10. فوشیمی، ت. تایاما، ک. فوکایا، م. کیتاکوشی، ک. ناکایی، ن. تسوکاموتو، ی. Sato, Y. اثربخشی اسید استیک برای تکمیل گلیکوژن در عضله اسکلتی موش بعد از ورزش. بین المللی J. Sports Med. 2002، 23، 218-222. [CrossRef]

11. والر، AP; Geor، RJ; اسپریت، LL; هایگنهاوزر، GJF; Lindinger, MI مکمل استات خوراکی پس از تمرین طولانی مدت با شدت متوسط، سنتز اولیه گلیکوژن ماهیچه ای را در اسب ها افزایش می دهد. انقضا فیزیول. 2009، 94، 888-898. [CrossRef] [PubMed]

12. چو، HD; کیم، جی اچ. لی، جی اچ. هنگ، اس ام؛ بله، ST; Seo, KI اثر ضد خستگی نوشیدنی سرکه خیار بر موش‌ها پس از ورزش شدید. کره ای J. Food Sci. تکنولوژی 2017، 49، 209-214. [CrossRef]

13. بلین، جنرال موتورز; Hureau، TJ محدودیت خستگی و عملکرد در طول ورزش: تعامل مغز و عضله. انقضا فیزیول. 2017، 102، 3-4. [CrossRef] [PubMed]

14. خو، سی. Lv، J. Lo, YM; Cui، SW; هو، ایکس. فن، ام. اثرات جو-گلوکان بر ورزش استقامتی و خواص ضد خستگی آن در موش‌های تمرین‌کرده. کربوهیدرات. پلیم. 2013، 92، 1159-1165. [CrossRef]

15. میس، م. Twisk، FNM نشانگان خستگی مزمن: مدل (زیستی) روانی اجتماعی هاروی و وسلی در مقابل یک مدل زیستی (روانی اجتماعی) مبتنی بر مسیرهای استرس التهابی و اکسیداتیو و نیتروزاتیو. BMC Med. 2010، 8، 1-13. [CrossRef]

16. ریتی، ال. فیشر، سیگنال های ناشی از نور UV GJ و پیری پوست را آبشار می کند. Aging Res. Rev. 2002, 1, 705-720. [CrossRef]

17. Kaulmann، A. Bohn، T. کاروتنوئیدها، التهاب، و استرس اکسیداتیو پیامدهای مسیرهای پیام رسانی سلولی و ارتباط با پیشگیری از بیماری مزمن. Nutr. Res. 2014، 34، 907-929. [CrossRef]

18. شن، ی. ژانگ، اچ. چنگ، ال. وانگ، ال. ویان، اچ. Qi، X. فعالیت آنتی اکسیدانی در شرایط آزمایشگاهی و درون تنی پلی فنل های استخراج شده از جو سیاه کوهستانی. مواد شیمیایی مواد غذایی 2016، 194، 1003-1012. [CrossRef]

19. چو، HD; کیم، جی اچ. برنده، YS; ماه، KD; Seo, KI اثرات مهاری کنسانتره میوه Prunus mume تیمار شده با پکتیناز بر تکثیر سرطان کولورکتال و رگزایی سلول های اندوتلیال. J. Food Sci. 2019، 84، 3284–3295. [CrossRef]

20. یونگ، KM; لی، YS; کیم، جی دبلیو. سئول، جی.ام. یونگ، YH; Kim, SR تخمیر الکلی با دمای پایین برای تولید سرکه با کیفیت بالا با استفاده از هلو. شرکت کره ای بیوتکنول. Bioeng. J. 2018, 33, 95-103.

21. کنگ، ی. ژانگ، LL; سان، ی. ژانگ، YY; Sun، BG; چن، HT تعیین اسید آمینه آزاد، اسید آلی و نوکلئوتید در سرکه تجاری. J. Food Sci. 2017، 82، 1116–1123. [CrossRef] [PubMed]

22. Na, HS; چوی، جی سی. یانگ، SI; لی، جی اچ. چو، جی. ما، SJ; Kim, JY مقایسه ویژگی‌های سرکه تخمیر شده تجاری ساخته شده با مواد مختلف. کره ای جی. نگهدارنده غذا. 2013، 20، 482-487. [CrossRef]

23. خو، DP; لی، ی. منگ، ایکس. ژو، تی. ژو، ی. ژنگ، جی. ژانگ، جی جی؛ آنتی اکسیدان های طبیعی لی، HB در غذاها و گیاهان دارویی: استخراج، ارزیابی و منابع بین المللی جی. مول. علمی 2017، 18، 96. [CrossRef] [PubMed]

24. ژو، ی. ژنگ، جی. لی، ی. Xu، DP; لی، اس. چن، YM; Li, HB پلی فنول های طبیعی برای پیشگیری و درمان سرطان. Nutrients 2016, 8, 515. [CrossRef] [PubMed]

25. Guasch-Ferré، M. مرینو، جی. سان، س. فیت6، م. Sales-Salvad6، J. پلی فنول های غذایی، رژیم غذایی مدیترانه ای، پیش دیابت، و دیابت نوع 2: مروری روایتی از شواهد. اکسید. پزشکی سلول. لانگف. 2017، 2017،

6723931. [CrossRef] [PubMed]

26. یوان، تی. وو، دی. سان، ک. تان، ایکس. وانگ، جی. رن، بی. ژائو، بی. لیو، ز. Liu, X. فعالیت ضد خستگی عصاره های آبی Sonchus arvensis L. در موش های تمرین دیده. Molecules 2019, 24, 1168. [CrossRef]

27. شیا، ف. ژونگ، ی. لی، ام. چانگ، Q. لیائو، ی. لیو، ایکس. Pan, R. ترکیبات آنتی اکسیدانی و ضد خستگی بامیه. مواد مغذی 2015، 7، 8846-8858. [CrossRef]

28. Reidy، PT; راسموسن، BB نقش آمینو اسیدها و پروتئین مصرفی در ارتقاء آنابولیسم پروتئین عضلانی ناشی از ورزش مقاومتی. J. Nutr. 2016، 146، 155-183. [CrossRef]

29. Evans, GH; جیمز، LJ; Shirrefs، SM; Maughan، RJ بهینه سازی بازیابی و حفظ تعادل مایعات پس از کم آبی ناشی از ورزش. J. Appl. فیزیول. 2017، 122، 945-951. [CrossRef]

30. Robergs, RA; غیاثوند، ف. پارکر، دی. بیوشیمی اسیدوز متابولیک ناشی از ورزش. صبح. جی. فیزیول. منظم. عدد صحیح Comp. فیزیول. 2004، 287، R502–R516. [CrossRef]

31. فوشیمی، ت. تایاما، ک. فوکایا، م. کیتاکوشی، ک. ناکایی، ن. تسوکاموتو، ی. Sato, Y. تغذیه با اسید استیک باعث افزایش گلیکوژن در کبد و عضله اسکلتی موش می شود. J. Nutr. 2001، 131، 1973-1977. [CrossRef] [PubMed]

32. استفنز، جی دبلیو. دایکمن، من؛ Unruh، JA; هاوب، MD؛ توکاچ، MD; Dritz، SS اثرات تجویز خوراکی سیترات سدیم یا استات به خوک ها بر پارامترهای خون، گلیکولیز پس از مرگ، کاهش pH عضلانی و ویژگی های کیفیت گوشت خوک. J. Anim. علمی 2008، 86، 1669-1677. [CrossRef] [PubMed]

33. ژنگ، ی. ژانگ، WC; وو، زی؛ فو، CX؛ هوی، آل. گائو، اچ. چن، پی پی. دو، بی. ژانگ، اچ دبلیو دو عصاره ماکامید با کاهش آسیب عضلانی در موش، خستگی فیزیکی را از بین می برد. J. Sci. کشاورزی مواد غذایی 2018، 99، 1405-1412. [CrossRef] [PubMed]

34. فیلهو، LFS; Menezes، PP; سانتانا، DVS؛ لیما، BS; سراوانان، س. آلمیدا، GKM؛ فیلهو، جرم؛ سانتوس، MMB؛ Araujo، AAS; de Oliveira، ED اثر اولتراسوند درمانی پالسی و دیوسمین بر پارامتر اکسیداتیو عضلات اسکلتی. سونوگرافی پزشکی Biol. 2018، 44، 359-367. [CrossRef]

35. توجیما، م. نوما، ک. Torii، S. تغییرات در کراتین کیناز سرم، سفتی عضلات پا، و درد عضلانی تاخیری پس از یک مسابقه ماراتن کامل. J. Sports Med. فیتنس فیتنس 2016، 56، 782-788.

36. پینگیتور، ا. لیما، GP; ماستورچی، اف. کوئینونز، آ. لرواسی، جی. Vassalle، C. ورزش و استرس اکسیداتیو: اثرات بالقوه استراتژی های رژیم غذایی آنتی اکسیدانی در ورزش. تغذیه 2015، 31، 916-922. [CrossRef]

37. Ranchordas، MK; راجرسون، دی. سلطانی، ح. Costello, JT آنتی اکسیدان برای پیشگیری و کاهش درد عضلانی بعد از ورزش. سیستم پایگاه داده کاکرین Rev. 2017, 12, CD009789. [CrossRef]

38. چن، ج. تیان، جی. جنرال الکتریک، اچ. لیو، آر. Xiao, J. اثرات تترمتیل پیرازین از سرکه سیاه چینی بر فعالیت های آنتی اکسیدانی و هیپولیپیدمیک در سلول های HepG2. مواد شیمیایی مواد غذایی سموم 2017، 109 Pt 2، 930–940. [CrossRef]