خلاصه:قرار گرفتن در معرض اشعه ماوراء بنفش (UV) باعث پیری پوست می شود که از طریق تولید گونه های اکسیژن فعال (ROS) منجر به چین و چروک و افتادگی پوست می شود. به همین دلیل، محافظت در برابر پیری نوری یک ویژگی مهم در محصولات آرایشی و پوستی است. بیومواد مشتق شده از محصول طبیعی به عنوان مواد اولیه احتمالی در آینده بسیار مورد نیاز است زیرا این بیومواد اغلب ایمن و موثر هستند. در این مطالعه، هدف ما مشخص کردن فعالیت محافظتی پوست پرادوزیا مولتی‌سایت است که به طور سنتی برای درمان آفتاب سوختگی و اریتم استفاده می‌شود. ما اثرات مهارکننده رادیکال‌های آزاد، ضد ملانوژنیک و مرطوب‌کننده عصاره متانولی پرادوزیا مولتی‌سایت (Pm-ME) را در کراتینوسیت‌ها (سلول‌های HaCaT)، ملانوسیت‌ها (سلول‌های B16F10) و فیبروبلاست‌ها (فیبروبلاست‌های پوستی انسانی (HDF)) تعیین کردیم. غلظت های غیر سیتوتوکسیک عصاره متانولی چند سایتی پرادوزیا حاوی اسید کوماریک به عنوان یک جزء اصلی است و عصاره فعالیت محافظتی در برابر سمیت سلولی ناشی از UVB- و H2O نشان داد. این عصاره همچنین بیان متالوپروتئینازها (MMPs) و سیکلواکسیژناز (COX){9}} را در سلول‌های HaCaT سرکوب کرد. کاهش بیان Sirt{10}} تحت شرایط تیمار شده با UVB- و H2O{13}}در سلول‌های HaCaT توسط Pm-ME بازیابی شد. این عصاره با توجه به آزمایش 2،{16}}کازینو-بیس ({18}اتیل بنزوتیازولین{19}}اسید سولفونیک) نمک دی آمونیوم (ABTS) فعالیت قابل توجهی در مهار رادیکال‌های آزاد نشان داد. Pm-ME همچنین سطح بیان هیالورونیک اسید سنتاز (HAS) و ترانس گلوتامیناز{21}} (TGM{22}}) را در سلول‌های HaCaT افزایش داد، که نشان‌دهنده یک فعالیت مرطوب‌کننده احتمالی است. جالب توجه است، بیان ژن کلاژن نوع 1 (Col1A1) و فعالیت پروموتر آن، همانطور که توسط یک سنجش ژن گزارشگر ارزیابی شد، در سلول‌های HDF و HEK293 افزایش یافته است. به طور مشابه، Pm-ME به بازیابی سطوح کلاژن پس از درمان با UVB و H2O2 در HDFها و همچنین کاهش سنتز و ترشح ملانین از سلول‌های ملانوما B16F10 کمک کرد، که ممکن است نشان دهنده ارزش آرایشی سفیدکننده مفید باشد. مهارکننده p38 SB203580 و بازدارنده JNK SP600125 بیان MMP-9 و COX-2 را در سلول‌های HaCaT تیمار شده با H2O{38}} سرکوب کردند. به طور مشابه، مهارکننده ERK U0126 HAS{40}} را در سلول‌های HaCaT تیمار شده با Pm-ME/H2O{43} مهار کرد. این یافته‌ها نشان داد که مهار JNK و p38 و فعال‌سازی ERK می‌تواند توسط Pm-ME مورد هدف قرار گیرد. بنابراین، Pm-ME ممکن است از طریق تنظیم پروتئین کیناز فعال شده با میتوژن، که می تواند در صنعت آرایشی مفید باشد، خواص ضد فوتوپیری و ضد ملانوژنیک را اعمال کند.

طبق مطالعات مربوطه،سیستانچرایج استگیاه داروییکه به عنوان "گیاه معجزه آسا که عمر را طولانی می کند" شناخته می شود. جزء اصلی آن استسیستانوزید، که دارای اثرات مختلفی از جملهآنتی اکسیدان, ضد التهاب، وارتقاء عملکرد سیستم ایمنی. مکانیسم بین سیستانچ وسفید شدن پوستدر اثر آنتی اکسیدانی گلیکوزیدهای سیستانش نهفته است. ملانین در پوست انسان توسطاکسیداسیونتیروزین کاتالیز شده توسطتیروزینازو واکنش اکسیداسیون مستلزم مشارکت اکسیژن است، بنابراین رادیکال های آزاد اکسیژن در بدن به یک عامل مهم تبدیل می شوند.ملانینتولید سیستانچ حاوی سیستانوزید است که یک آنتی اکسیدان است و می تواند تولید آن را کاهش دهدرادیکال های آزاددر بدن، در نتیجه تولید ملانین را مهار می کند.

برای سفید کردن بر روی مکمل Cistanche Tubulosa کلیک کنید

بیشتر بخواهید:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

1. معرفی

پوست بزرگترین عضو بدن است که به عنوان یک مانع بین ارگانیسم و ​​محیط عمل می کند و مسئول حفظ هموستاز پوست و در نهایت تعیین بقای ارگانیسم است [1]. پوست با اپیدرم، درم با ساختارهای آدنکس و چربی زیر جلدی سازماندهی شده است [2]. علاوه بر این، پوست برای ارتباط مداوم با سیستم های ایمنی، عصبی و غدد درون ریز مهم است [3]، بیشتر محافظت در برابر عوامل بیماری زا، مواد شیمیایی، آسیب های فیزیکی و اشعه ماوراء بنفش (UV) می دهد [4]. طیف های فرابنفش به سه ناحیه UVC (200 تا 280 نانومتر)، UVB (280 تا 320 نانومتر) و UVA (320 تا 400 نانومتر) تقسیم می شوند [5]. از این میان، UVB عمدتاً توسط لایه‌های فوقانی اپیدرم پوست و همچنین درم پاپیلاری جذب می‌شود، در حالی که UVA با 1000 برابر کارایی کمتر در ایجاد اثرات بیولوژیکی مختلف، در مقایسه با UVB به درم مشبک نفوذ می‌کند [5]. اگرچه UVC بسیار واکنش پذیر است و توسط لایه شاخی جذب می شود، اما بیشتر توسط لایه اوزون و جو حذف می شود. به عنوان یک منبع اصلی تابش اشعه ماوراء بنفش، UVB می‌تواند منجر به تولید گونه‌های فعال اکسیژن (ROS) مانند پراکسید هیدروژن (H2O2) از طریق فعال‌سازی آنزیم‌های مولد ROS از جمله NADPH اکسیداز، گزانتین اکسیداز و D-آمینو اسید اکسیداز شود [6- 8] و القای پیری پوست که منجر به چین و چروک و افتادگی پوست می شود [9،10]. علاوه بر این، پاسخ استرس اکسیداتیو برای القای آسیب اجزای مختلف سلولی مانند لیپیدهای غشای سلولی، پروتئین ها و اسیدهای نوکلئیک گزارش شده است [11]. این سلول های پوستی آسیب دیده می توانند پاسخ های التهابی را آغاز کنند که منجر به آسیب نهایی می شود که در پوست در معرض مزمن ظاهر می شود [12].

استرس اکسیداتیو باعث فعال شدن فاکتورهای رونویسی التهابی و حساس به اکسیداسیون و کاهش، فاکتور هسته ای (NF)-kB و پروتئین فعال کننده (AP){2}} و آنزیم های سیگنال دهی بالادست آنها از جمله پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن (MAPKs) مانند خارج سلولی می شود. کیناز تنظیم شده با سیگنال (ERK)، p38، و کیناز c-Jun-N ترمینال (JNK) در مسیر AP{9}}، یا به عنوان یک مهارکننده κB (IκB)، کیناز IκB (IKK /)، و AKT در مسیر NF-kB مرتبط با القای التهاب و تشکیل چین و چروک [13]. کیناز تنظیم‌شده با سیگنال خارج سلولی معمولاً پاسخ‌های سلولی مربوط به فاکتورهای رشد، JNK و پاسخ‌های سلولی با واسطه p{13} مربوط به سیتوکین‌ها و استرس فیزیکی را واسطه می‌کند [14]. پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن همچنین می توانند تولید متالوپروتئینازهای ماتریکس پروتئولیتیک (MMPs) [15] را القا کنند که باعث تخریب کلاژن و در نتیجه کاهش کشش پوست می شود [16]. در رابطه با این اجزا، ترکیبات یا عصاره های آنتی اکسیداتیو مانند جین سنوزید، کورکومین، اپی کاتچین، آسیاتیکوزید، زیوگلیکوزید I، مگنولول، اسید گالیک، هیدروکسی چاویکول، اسیدهای هیدروکسی سینامیک، اسید گلیسیریزیک، منگیفرین، میرکو، تروسمارینیک اسید عصاره هیدروالکلی پیروان Spartium junceum L. برای توسعه محصولات ضد پیری پوست استفاده شده است [17-21]. از آنجایی که استرس اکسیداتیو به عنوان عامل اصلی بیماری های انسان و روند پیری شناخته شده است که بر طول عمر تأثیر می گذارد، متابولیت های زیست فعال ثانویه در رژیم غذایی انسان باaخواص آنتی اکسیدانیمواد با ارزش محسوب می شوند [22،23].

سایر ژن‌های مرتبط با پیری نوری عبارتند از سیکلواکسیژناز-2 (COX-2) و Sirt-1. سیکلواکسیژناز معمولاً در ضایعات پوستی پیش از بدخیم ناشی از اشعه ماوراء بنفش بیان می شود [24] و مهار آن می تواند تبدیل بدخیم را در اپیدرم کاهش دهد [25]. بیان Sirt{8}} می تواند از آپوپتوز سلولی جلوگیری کرده و بقای سلول را افزایش دهد [26]. مکانیسم دیگر محافظت در برابر اشعه UVB تولید ملانین است، رنگدانه ای که در ملانوسیت ها سنتز می شود و بیشتر به کراتینوسیت ها در لایه اپیدرم ترشح می شود [1]. ملانین با اکسیداسیون L-تیروزین و تبدیل آن به L-دی هیدروکسی فنیل آلانین (L-DOPA) [6] با کاتالیز کردن با آنزیم وابسته به مس تیروزیناز [27] تولید می شود. علیرغم عملکرد محافظتی آن، تولید بیش از حد ملانین می تواند لکه های پیری [28]، ملیسما و هایپرپیگمانتاسیون را ایجاد کند [29]. به دلیل روند فعلی که رنگ‌های روشن را به عنوان استاندارد زیبایی در نظر می‌گیرد، آماده‌سازی‌های سفیدکننده پوست که به سفید کردن ضایعات هیپرپیگمانته یا سفید کردن پوست می‌رسند، در صنایع داروسازی و آرایشی بسیار مطلوب شده‌اند [29]. بنابراین، تلاش قابل توجهی به سمت توسعه آماده سازی هایی انجام شده است که سنتز ملانین را کاهش می دهد [30]. از آنجایی که پیری پوست با از دست دادن رطوبت پوست همراه است، یک نکته مهم برای حفظ پوست سالم، هیدراتاسیون کافی است [31]. اسید هیالورونیک (HA)، یک گلیکوزامینوگلیکان با وزن مولکولی بالا با خواص آبدوست، با تنظیم بیان سنتازهای هیالورونیک اسید (HASs) به هیدراتاسیون و خواص پلاستیکی پوست کمک می کند [32]. یکی دیگر از ژن های مهم در پوست کلاژن است که از ساختارهای اپیدرمی پشتیبانی می کند [33]، بنابراین مسئول استحکام و انعطاف پذیری پوست است [34] و تخریب آن منجر به افتادگی و چروک شدن پوست می شود. علاوه بر این، ترانس گلوتامیناز (TGM{26}}) یک آنزیم با بیان ساختاری اپیدرمی است که تشکیل پوشش سلولی اپیدرمی را کاتالیز می‌کند و به جلوگیری از از دست دادن آب کمک می‌کند [35،36].

خانواده Sapotaceae عمدتاً در نواحی گرمسیری و نیمه گرمسیری آسیا و میان‌آمریکا پراکنده می‌شوند. بسیاری از گونه های خانواده Sapotaceae میوه های خوراکی با ارزش اقتصادی بالا تولید می کنند. از این میوه ها برای مصارف دارویی استفاده می شده است. به طور خاص، دانه ها سرشار از مواد مغذی، چربی های گیاهی، پروتئین ها و سایر ترکیبات مفید هستند. به عنوان مثال، روغن مامی به طور سنتی در مراقبت از پوست، برای درمان آفتاب سوختگی و اریتم استفاده می شود [37]. موسیقی پرادوسیا عضوی از خانواده Sapotaceae است که روغن آن به طور سنتی برای درمان اسکارهای پوستی استفاده می شده است [38]. با این حال، خواص آن هنوز از نظر علمی ثابت نشده است. بنابراین هدف از این تحقیق تعیین ارزش بالقوه P. mutisii در مراقبت از پوست، زیبایی و فارماکولوژی بود.

2. نتایج

2.1. خصوصیات Pm-ME و تأثیر آن بر زنده ماندن سلول

طبق 3-(4،{ سنجش 7}}دی متیل تیازول-2- ایل)-2،{10}}دی فنیل تترازولیوم بروماید (MTT) (شکل 1a-c). با استفاده از کروماتوگرافی مایع با فشار فوق‌العاده (UHPLC) و کروماتوگرافی مایع (LC)/طیف‌سنجی جرمی، یک ترکیب اصلی در Pm-ME اسید کوماریک در 4.27 دقیقه یافت شد (شکل 1d).

2.2. اثر محافظتی Pm-ME در برابر آسیب UVB و H2O2

برای تعیین اینکه آیا Pm-ME از سلول‌های HaCaT در برابر آسیب ناشی از پیری نوری ناشی از UVB و H2O محافظت می‌کند، سلول‌ها قبل از قرار گرفتن در معرض با غلظت‌های مختلف Pm-ME ({5}}-100 میکروگرم در میلی‌لیتر) پیش تیمار شدند. UVB یا H2O2. شکل 2a نشان می دهد که تابش UVB تعداد سلول های HaCaT چسبنده را کاهش داد، در حالی که Pm-ME چسبندگی سلول را افزایش داد. علاوه بر این، آسیب سلولی ایجاد شده توسط H2O2 توسط Pm-ME در 100 میکروگرم بر میلی لیتر بازیابی شد (شکل 2b). برای روشن شدن اینکه آیا Pm-ME ضعیف‌شده با UVB- و H2O{19}}تشکیل چین و چروک واسطه‌ای، سطح بیان MMP{20}} و MMP{21}} پس از درمان با UVB یا H2O2 در حضور یا عدم حضور اندازه‌گیری شد. PM-ME. Pm-ME بیان MMP-1 و MMP-9 را تحت هر دو شرایط مهار کرد (شکل 2c,d). سپس بررسی کردیم که آیا Pm-ME با اندازه‌گیری سطوح mRNA COX، پاسخ‌های التهابی ناشی از رادیکال‌های آزاد را سرکوب می‌کند یا خیر. تحت شرایط تیمار شده با UVB یا H2O{34}، سطوح mRNA COX{35}} به شدت توسط Pm-ME در 100 میکروگرم بر میلی لیتر سرکوب شد (شکل 2e,f). سپس سطوح mRNA ژن ضد پیری، Sirt{40}} را اندازه‌گیری کردیم تا تأثیر آن بر پیری نوری را تعیین کنیم. هر دو UVB و H2O2 بیان Sirt{43}} را کاهش دادند، در حالی که Pm-ME به طور قابل توجهی بیان خود را در 50 و 100 میکروگرم بر میلی لیتر بازیابی کرد (شکل 2g,h). از آنجایی که Pm-ME پاسخ‌های مولکولی و سلولی خاصی را در سلول‌های HaCaT تیمار شده با UVB یا H2O2 سرکوب کرد، در مرحله بعدی بررسی کردیم که آیا این عصاره دارای فعالیت ضد اکسیداتیو مستقیم با استفاده از 2،2'-casino-bis (3-ethylbenzothiazoline{57) است. }}اسید سولفونیک) سنجش ABTS، که در آن Pm-ME فعالیت مهار رادیکال آزاد وابسته به دوز را نشان داد (شکل 2i).

2.3. اثرات مرطوب کنندگی و کلاژن سازی Pm-ME

Pm-ME بیان ژن‌های مرتبط با رطوبت مانند HAS{2}} و TGM-1 را در سلول‌های HaCaT افزایش داد (شکل 3a). برای تعیین اینکه آیا Pm-ME می تواند بیان یک ژن کلاژن (Col1A1) را افزایش دهد، ابتدا سلول های HDF را با Pm-ME ({9}}-100 میکروگرم در میلی لیتر) درمان کردیم و سپس سطح بیان Col1A1 را تعیین کردیم. همانطور که شکل 3b نشان می دهد، افزایش بیان ژن Col1A1 تحت شرایط تیمار Pm-ME وابسته به دوز مشاهده شد. این نتایج بیشتر با استفاده از یک سنجش ژن گزارشگر با ساختار Col1A{19}}Luc ترانسفکت شده در سلول‌های HEK293 و سلول‌های HDF تأیید شد. انتظار می رود، Pm-ME فعالیت پروموتر ژن Col1A1 را به روشی وابسته به دوز در هر دو سلول افزایش داد (شکل 3c,d). علاوه بر این، Pm-ME برای بازیابی سطوح ژن کلاژن که تحت تابش اشعه ماوراء بنفش و شرایط تیمار H2O2 کاهش یافته بود (شکل 3e,f) پیدا شد.

2.4. اثر ضد ملانوژنیک Pm-ME

از آنجایی که غلظت هدف ما با 1{23}}0 میکروگرم در میلی لیتر مطابقت داشت، تعیین کردیم که آیا Pm-ME قادر به سرکوب ترشح ملانین و محتویات سلولی آن است یا خیر. برای تعیین این موضوع، سلول های ملانوما B16F10 توسط هورمون محرک ملانوسیت (-MSH) در حضور یا عدم حضور Pm-ME یا آربوتین (کنترل مثبت) تحریک شدند. سپس سطح ملانین اندازه گیری شد. Pm-ME ترشح ملانین را تا 75 درصد در 100 میکروگرم بر میلی لیتر کاهش داد (شکل 4a,b). Pm-ME همچنین محتوای ملانین را در سلول‌های B16F10 تیمار شده با MSH تا 30 درصد در 100 میکروگرم بر میلی‌لیتر کاهش داد، در حالی که محتوای ملانین در 50 میکروگرم بر میلی‌لیتر در مقایسه با کنترل مثبت (-MSH) کاهش معنی‌داری نداشت (شکل 4c). . در نهایت، برای تعیین اثر Pm-ME بر فعالیت آنزیم‌های تولیدکننده ملانین، سنجش آنزیم تیروزیناز را انجام دادیم. جالب توجه است که Pm-ME (0-400 میکروگرم بر میلی لیتر) به طور قابل توجهی فعالیت تیروزیناز را در غلظت های بالاتر از 200 میکروگرم در میلی لیتر کاهش داد، در حالی که اسید کوجیک (KA)، یک داروی کنترل شده، به شدت فعالیت تیروزیناز را کاهش داد (شکل 4d).

2.5. مکانیسم‌های مولکولی اثرات ضدپیری و مرطوب‌کننده با واسطه Pm-ME

3. بحث

گونه های مختلفی از خانواده Sapotaceae به دلیل غنی بودن از نظر مواد مغذی و ویتامین ها در طب سنتی مورد استفاده قرار گرفته اند [39]. با این حال، استفاده بالقوه P. mutisii در صنایع آرایشی و بهداشتی و دارویی هنوز مورد بررسی قرار نگرفته است. به همین دلیل، ما فعالیت محافظتی پوست P. mutisii در کراتینوسیت ها و فیبروبلاست ها را تحت شرایط آسیب رسان پوست مورد مطالعه قرار دادیم. ما همچنین مناسب بودن آن را برای آماده سازی لوازم آرایشی ارزیابی کردیم. از آنجا که آزمایش سمیت برای شناسایی خطرات بالقوه در انسان یک مرحله ضروری و حیاتی در هر دو صنعت دارو و آرایشی است [40]، سمیت سلولی P. mutisii در سلول‌های HaCaT، B16F10 و HDF مورد آزمایش قرار گرفت. Pradosia mutisii سمیت کم تا 200 میکروگرم بر میلی لیتر و بدون سمیت در 100 میکروگرم در میلی لیتر در سلول های HaCaT، B16F10 (شکل 1a،b) و HDF (شکل 3c) نشان داد. با استفاده از تجزیه و تحلیل UHPLC/MS (شکل 1c)، Pm-ME نشان داده شد که غلظت بالایی از اسید کوماریک، یک اسید فنولیک دارد [41،42]. پلی فنول ها متابولیت های ثانویه گیاهان هستند و به طور کلی در دفاع در برابر اشعه ماوراء بنفش یا عفونت توسط عوامل بیماری زا نقش دارند. نشان داده شده است که در بدن انسان، پلی فنول ها در برابر توسعه سرطان، بیماری های قلبی عروقی، دیابت، پوکی استخوان و بیماری های عصبی محافظت می کنند [1]. نشان داده شده است که اسید کوماریک دارای خواص آنتی اکسیدانی و ضد التهابی است [43].

تابش اشعه ماوراء بنفش یکی از دلایل اصلی تولید رادیکال های آزاد (به عنوان مثال، ROS) در پوست است. رادیکال های آزاد در صورت تجمع طولانی مدت می توانند منجر به پیری پوست و سرطان شوند [44]. مشخص است که استرس اکسیداتیو تولید شده توسط رادیکال های آزاد و آسیب می تواند بقای سلولی، تکثیر، تمایز و متابولیسم را به خطر بیندازد [45،46]. مطابق با گزارش‌های قبلی [47،48]، ما همچنین دریافتیم که آسیب سلولی ناشی از تابش UVB در سلول‌های HaCaT ایجاد می‌شود. آسیب شامل کاهش تکثیر، افزایش آپوپتوز و پاسخ‌های مولکولی از جمله بیان ژن‌های مربوط به التهاب، تشکیل چین و چروک و پیری بود (شکل‌های 2 و 3). از آنجایی که رادیکال های ناشی از UVB عوامل اصلی آسیب رساندن به سلول ها، بافت ها و اندام ها هستند، مشخص شد که برخی از ترکیبات درون زا مانند ملاتونین و متابولیت آن [49-52] و بیلی روبین [53] با نشان دادن آنتی اکسیدان در از بین بردن رادیکال های سمی نقش دارند. خواص محافظت کننده از عکس و ضد پیری در بدن ما. تاکنون، این ترکیبات نیز به عنوان مواد زیستی بسیار با ارزشی توسعه یافته اند که می توانند توسط صنایع داروسازی در بدن ما اعمال شوند [54]. با این وجود، ویتامین C، کوآنزیم Q10 و توکوفرول به دلیل خواص آنتی اکسیدانی قابل توجهی که دارند در حال تبدیل شدن به محصولات برتر فروش جهانی برای سلامت انسان هستند. آزمایشگاه‌های تحقیقاتی در شرکت‌های دارویی و آرایشی همچنان بر شناسایی و توسعه داروهای ضد اکسیداتیو مؤثر و ترکیبات طبیعی تأکید دارند. در مطالعه ما مشاهده کردیم که Pm-ME هنگام آزمایش با استفاده از روش ABTS دارای فعالیت آنتی اکسیدانی قوی بود (شکل 2i). به طور مشابه، Pm-ME سرکوب چسبندگی سلولی ناشی از رادیکال‌های آزاد، القای آسیب هسته‌ای، و بیان تغییر یافته ژن‌هایی مانند MMP{25}}، MMP{26}} و COX را معکوس کرد. } تحت شرایط UVB و H2O2 به روشی وابسته به دوز (شکل 2a-f). قابل توجه، Pm-ME سطوح ژن Sirt{33}} را بازیابی کرد (شکل 2g,h)، که در جلوگیری از آپوپتوز و افزایش بقای سلول در شرایط استرس اکسیداتیو نقش دارد [26]. این نتایج به شدت حاکی از آن است که پیری سلول ها از طریق کاهش بیان Sirt1 با استرس اکسیداتیو مرتبط است. خواص آنتی اکسیدانی Pm-ME امکان بازیابی بیان Sirt1 را فراهم کرد. این ممکن است باعث محافظت در برابر آسیب پوست و پیری تحت شرایط تابش طبیعی UVB در داخل بدن شود. علاوه بر این، این احتمال وجود دارد که Pm-ME بتواند از پاسخ های سلولی ناشی از UVC نیز محافظت کند زیرا شرایط تابش UV ما ممکن است با UVC آلوده باشد، اگرچه ما از یک سیستم فیلتر برای پاک کردن تمام طول موج های زیر 290 نانومتر استفاده کردیم. این مفهوم که بیومواد آنتی اکسیداتیو می تواند آسیب سلولی و مولکولی را تحت شرایط استرس اکسیداتیو بهبود بخشد، باعث تولید تجاری محصولات مختلف مانند BIOGF1K، ginsenoside Ro، EGCG، عصاره Fraxinus chinensis و برخی آنتی اکسیدان های مصنوعی شده است. اثرات ضد چروک و ضد پیری مواد زیستی در این محصولات و سایر محصولات به طور گسترده در صنعت آرایشی گزارش شده است [48،55،56].

حفظ رطوبت کافی پوست [31] و تولید کلاژن جدید [57] فرآیندهای مهمی برای سلامت پوست هستند. بیان ژن های مرطوب کننده (HAS2، TGM{3}}) (شکل 3a) و کلاژن (Col1A1) به طور قابل ملاحظه ای توسط Pm-ME (شکل 3b-d) افزایش یافت و به بازیابی سطوح کلاژن پس از قرار گرفتن در معرض UVB و درمان H2O2 کمک کرد. (شکل 3e,f). بنابراین، این نشان می دهد که Pm-ME می تواند یک عنصر موثر در حفظ سلامت پوست باشد. سرکوب ملانین توسط Pm-ME نیز برای استفاده از آن در مواد آرایشی مفید است. اگرچه ملانین در محافظت از پوست در برابر اشعه ماوراء بنفش ارزشمند است، زیرا بسیاری از زنان ترجیح می دهند پوست خود را روشن کنند، سفید شدن با فعالیت ضد ملانوژنیک یک ویژگی مفید در مواد آرایشی است [29]. Pm-ME (100 میکروگرم بر میلی لیتر) فعالیت بازدارندگی قوی در طول ملانوژنز نشان داد، همانطور که با تعیین سطح ملانین از محیط ترشح شده و کاهش نشان داده شده در سطوح ترشح ملانین ارزیابی شد (شکل 4a-c). علاوه بر این، Pm-ME (200 میکروگرم در میلی‌لیتر) به طور قابل توجهی فعالیت آنزیم تیروزیناز را سرکوب کرد (شکل 4d)، به این معنی که غلظت بالاتر مستقیماً برای سرکوب فعالیت آنزیم مؤثر است، در حالی که غلظت کمتر در تنظیم ترشح ملانین نقش دارد. بنابراین، Pm-ME به دلیل فعالیت های آنتی اکسیداتیو، ضد پیری، ضد چروک، مرطوب کننده و ضد ملانوژنی که دارد، می تواند کاندیدای خوبی برای آرایشی و بهداشتی در نظر گرفته شود. برای بررسی بیشتر این امکان، ما قصد داریم کارایی بالینی آن را در مطالعات آینده ارزیابی کنیم.

ما مطالعاتی را برای تعیین مکانیسم‌های مولکولی انجام دادیم که توسط آن Pm-ME ضد اکسیداتیو و مرطوب‌کننده خود را در کراتینوسیت‌ها اعمال می‌کند. ما بر روی آنزیم‌های مرتبط با MAPK (ERK، JNK و p38) تمرکز کردیم، زیرا این آنزیم‌ها نقش مهمی در پیری و ملانوژنز کراتینوسیت‌ها و ملانوسیت‌های پوست دارند [58،59]. به عنوان مثال، مسیر ERK با افزایش مسیرهای سنتز کلاژن [60] و HA در کراتینوسیت ها، پاسخ های سلولی به فاکتور رشد تبدیل کننده{6}} را واسطه می کند [61]. JNK نقش کلیدی در آپوپتوز کراتینوسیت ناشی از استرس اکسیداتیو دارد [62]. آنزیم p38 در حفظ هموستاز پوست انسان مهم است [63]. مسیرهای JNK و p38 هر دو واسطه پاسخ های سلولی به سیتوکین ها و استرس فیزیکی هستند [14]. این مسیرها توسط تنش های ناشی از UVB و ROS فعال می شوند. این مسیرها می‌توانند تولید ژن‌های پروتئولیتیک MMP و COX را افزایش دهند که به ترتیب با تخریب کلاژن و التهاب پوست مرتبط هستند [64]. قابل توجه است که استرس اکسیداتیو فسفوریلاسیون ERK را مسدود می کند، در حالی که p38 و JNK هنگام درمان با H2O2 فسفریله شدند (شکل 5a). در مقابل، Pm-ME فسفوریلاسیون ERK را افزایش داد و فسفوریلاسیون p38 و JNK را کاهش داد (شکل 5a)، به این معنی که این آنزیم ها می توانند به طور متفاوت در فعالیت های دارویی با واسطه Pm-ME شرکت کنند. برای درک بیشتر نقش عملکردی MAPK در اثرات ضد فوتوپیری، ضد ملانوژنیک و ضد التهابی Pm-ME در کراتینوسیت‌های تحت تابش UVB و H2O{36}، از مهارکننده‌های خاص MAPK استفاده شد. نتایج شکل 5b قویاً نشان می دهد که مهار p38 و JNK توسط Pm-ME منجر به اثرات ضد چروک و ضد التهابی می شود، زیرا یک مهارکننده p38 (SB203580) و یک مهارکننده JNK (SP600125) بیان MMP را مسدود می کند. }} و COX-2، به ترتیب. علاوه بر این، فسفوریلاسیون ERK تحریک‌شده با Pm-ME بیان ژن‌های مرتبط با مرطوب‌سازی را القا کرد، زیرا درمان Pm-ME باعث بیان HAS{50}} شد، در حالی که U0126 آن را سرکوب کرد (شکل 5c). این نتایج نشان داد که آنزیم‌های مرتبط با MAPK در فعالیت‌های ضد پیری، ضد چروک و ضدالتهابی با واسطه PM-ME نقش دارند. شناخته شده است که تابش UVB باعث افزایش دیگر آبشارهای سیگنالینگ می شود، مانند آنهایی که به NF-kB و STAT3 مرتبط هستند [65،66]. اینکه آیا Pm-ME می تواند این مسیرهای سیگنال دهی را تنظیم کند یا خیر، هنوز باید بررسی شود.

در نتیجه، ما دریافتیم که Pm-ME غنی از اسید کوماریک در سلول‌های پوستی تحت تابش UVB یا تحت درمان با H2O2 فعالیت‌های ضد اکسیداتیو، ضد چروک، تحریک‌کننده مرطوب‌کننده و ضد ملانوژنیک را نشان می‌دهد. Pm-ME فسفوریلاسیون ERK را به صورت وابسته به دوز افزایش داد اما فسفوریلاسیون p38 و JNK را کاهش داد (شکل 6). نتایج ما قویاً نشان داد که Pm-ME ممکن است یک ماده زیستی محافظ پوست موثر باشد. از آنجایی که Pm-ME در سلول‌های سرطانی پوست (سلول‌های HaCaT و B16F10) و کراتینوسیت‌های طبیعی انسان در شرایط استرس اکسیداتیو فعالیت‌های بسیار امیدوارکننده‌ای را نشان داد، بنابراین، ما نقش مفید استفاده از Pm-ME را در آماده‌سازی‌های آرایشی پیشنهاد می‌کنیم. با این حال، سلول‌های ملانوما دارای ویژگی‌های غیرطبیعی مانند کنترل چرخه سلولی مختل، الگوهای بیان ژن ناهنجار، و ظرفیت‌های تمایز محدود هستند [67]، و کار اضافی با ملانوسیت‌های اولیه باید دنبال شود تا دقیقاً فعالیت ضد ملانوژنز Pm-ME و آن را درک کنیم. مکانیسم مولکولی علاوه بر این، گیاهانی از همان خانواده (Sapotaceae) یا جنس (Pradosia spp.) برای فعالیت های محافظتی مشابه پوست مورد آزمایش قرار خواهند گرفت.

بیشتر بخواهید: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501