نانوروبان اکسید گرافن آنتی اکسیدانی به عنوان یک عامل سفید کننده جدید، مکانیسم ملانوژنز مربوط به فاکتور رونویسی مرتبط با میکروفتالمی را مهار می کند.

مخاطب:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساپ: 008618081934791

چکیده:درملانینفرآیند سنتز، واکنش‌های اکسیداتیو نقش اساسی دارند و این یک استراتژی خوب برای مهار تولید ملانین با کاهش استرس اکسیداتیو است. فولرن و مشتقات آن یا کمپلکس‌ها به عنوان پاک‌کننده‌های قوی رادیکال‌های آزاد در نظر گرفته شدند و ما بیشتر از نانوکربن sp2 چند لایه برای کشف استفاده کردیم.ملانینمکانیسم‌های بازدارنده سنتز. در مطالعه حاضر، ما از نانومواد جدید مانند نانولوله‌های کربنی چند دیواره (MWCNTs)، MWCNT‌های نوع کوتاه، نانوروبان‌های اکسید گرافن (GONRs)، و GONR‌های نوع کوتاه، عوامل ضد اکسیداتیو برای تنظیم استفاده کردیم.ملانینتولید نتایج نشان داد که GONR ها قابلیت های آنتی اکسیداتیو بهتری در پلت فرم های آنالیز استرس اکسیداتیو درون سلولی و خارج سلولی نسبت به سایرین دارند. ما پیشنهاد کردیم که GONR ها دارای گروه های عملکردی حاوی اکسیژن هستند. در سنجش 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate، متوجه شدیم که GONR می‌تواند یون‌های فلزی را برای جمع‌آوری گونه‌های اکسیژن فعال کلات کند. در دیدگاه بینش مولکولی، ما مشاهده کردیم که این نانومواد سنتز ملانین را با کاهش بیان ژن مرتبط با فاکتور رونویسی مرتبط با میکروفتالمیا کاهش می‌دهند، و پیامدهای مشابهی در بیان پروتئین وجود دارد. به طور خلاصه، GONRs یک عامل بالقوه به عنوان یک رمان استآنتی اکسیدانو مواد آرایشی سفید کننده پوست.

سیستانچاز تشکیل ملانین جلوگیری می کند

1. مقدمه

پوست اندامی است که سطح بیرونی بدن انسان را می پوشاند. از آنجایی که رابط با محیط در تماس است، لایه پوست نقش مهمی در محافظت از بدن در برابر عوامل بیماری زا، جلوگیری از اتلاف بیش از حد آب، تنظیم دمای بدن و غیره ایفا می کند. ملانوسیت ها در غشای پایه اپیدرم پوست رشد می کنند و 5 تا 10 درصد محتوای سلولی را تشکیل می دهند. آنها به عنوان "غدد" غیر سلولی دارای دندریت های نازک، بلند، جریان مانند و انشعاب شناخته شده اند. ملانوسیت ها از طریق سلول های اپیدرمی در مجاورت آنها حرکت می کنند و یک صورت فلکی از سلول های اپیدرمی در اطراف هر ملانوسیت ایجاد می کنند. علل داخلی و خارجی زیادی برای پیری پوست وجود دارد و یکی از این عوامل تابش اشعه ماوراء بنفش (UV) از نور خورشید است.1 در طول قرار گرفتن در معرض اشعه ماوراء بنفش، سطح گونه های فعال اکسیژن (ROS) در پوست به طور چشمگیری افزایش می یابد که به عنوان استرس اکسیداتیو شناخته می شود. چندین عامل سمیت محیطی همچنین استرس اکسیداتیو را برای پوست افزایش می دهد، مانند آفت کش ها، تتراکلرید کربن، فلزات سنگین، آمین های معطر و ذرات معطر 2.5 (PM2.5).2 در مکانیسم بیوشیمیایی، اکسیدان های داخل سلولی از سیستم غیر آنزیمی تولید می شوند و آنها را به ROS برای راه اندازی مسیر ملانوژنز.

علاوه بر ROS، عوامل زیادی وجود دارند که بر تولید ملانین تأثیر می‌گذارند، از جمله بیان ژن، التهاب، تغییرات غدد درون ریز و جذب رنگدانه.1 در اولین مراحل تولید ملانین، تیروزیناز در کاتالیز کردن تیروزین به فئوملانین و اوملانین نقش دارد. هر دو مکانیسم تولید رنگدانه مشابه هستند، که شامل هیدروکسیلاسیون L تیروزین به 3،4-دی هیدروکسی-L- فنیل آلانین (L-DOPA) و اکسیداسیون L-DOPA به دوپاکینون است. در مرحله بعد، دوپامین توسط اینملانوزوم پروتئین 1 (TRP{9}}) مربوط به تیروزیناز و پروتئین مربوط به تیروزیناز 2 (TRP{12}}) اکسید می شود که توسط فاکتور رونویسی مرتبط با میکروفتالمیا (MITF) تنظیم می شود. شکل دادنملانیندر نهایت، ملانین بالغ شده و در لایه شاخی رسوب می‌کند. اینها به کراتینوسیت‌های همسایه لایه پایه نفوذ می‌کنند و DNA آن‌ها را از هرگونه جهش یا تغییرات ناشی از UV محافظت می‌کنند. بالغملانیندرون ملانوزوم ها به کراتینوسیت های 6-9 منتقل می شود و در نهایت منجر به رنگدانه طولانی مدت می شود. عدس، کک و مک، و لکه های قهوه ای/سیاه گاهی باعث مشکلات اجتماعی در مردان و زنان می شود. مسدود کردن استرس اکسیداتیو یا سرکوب فعالیت تیروزیناز یکی از راهبردهای کاهش سندرم پرپیگمانتاسیون و اختلالات پوستی است.آنتی اکسیدان هابیش‌پیگمانتاسیون‌ها و آسیب‌های سلولی ناشی از ROS را التیام می‌بخشد. 10،11 بنابراین، ترکیبات آنتی‌اکسیداتیو سنتز شده کاربردهای زیستی بسیاری در کاربردهای مراقبت از پوست دارند.

فولرن (C60)، نانولوله کربنی (CNT)، گرافن، و نانوروبان گرافن (GNR) چهار نوع نانو کربن sp2 هستند که به طور گسترده در سرتاسر جهان مورد تحقیق قرار گرفته اند.12 فولرن و مشتقات یا مجتمع های آن برای مدت طولانی به عنوان جاذب کننده قوی رادیکال های آزاد در نظر گرفته شده اند. یودو و همکاران از C60 محلول در آب به عنوان یک عامل محافظ در برابر انحطاط ناشی از استرس کاتابولیک استفاده کرد. اینجک و همکاران نتیجه گرفت که C60(OH)24 قوی استآنتی اکسیدانزمانی که استرس اکسیداتیو خیلی زیاد است، ترکیب می شود. اوکودا و همکاران پیشنهاد کردند که کمپلکس‌های C60 می‌توانند از آسیب سلولی با واسطه NO جلوگیری کنند. Tong et al. نشان داد که کمپلکس‌های C60 ممکن است کاندیدهای امیدوارکننده‌ای برای درمان بیماری‌های مرتبط با مغز ناشی از افزایش سطح سوپراکسید باشند. در واقع، یک شرکت ژاپنی فولرن‌ها را با فعالیت آنتی‌اکسیدانی قوی در سال 2006 شناسایی کرد. Lucente Schultz et al. نشان داد که قابلیت مهار رادیکال اکسیژن CNT های تک جداره عامل دار (SWCNT) تقریباً 40 برابر بیشتر از دندریتیک C60.15-19Fenoglio و همکاران است. مشاهده کرد که CNT های چند دیواره (MWCNT) دارای ظرفیت مهار رادیکال قابل توجهی در تماس با منبع خارجی رادیکال های هیدروکسیل یا سوپراکسید هستند. محاسبات تئوری عملکردی چگالی همچنین مدلی از SWCNT ها را به عنوان جاذب کننده های رادیکال آزاد نشان داد. در سال 2004، Novoselov و همکاران برای اولین بار نشان دادند که گرافن یک اثر دوقطبی الکتریک قوی از خود نشان می دهد و می تواند برای کاربردهای الکترونیک امیدوارکننده باشد. 22،23 از آنجا که این دو مقاله پیشگامانه، توجه بیشتر و بیشتری به تحقیقات مبتنی بر گرافن معطوف شده است. در سال 2014 نشان داد که اکسید گرافن و گرافن چند لایه نشان دهنده قابل توجهی است.آنتی اکسیدانفعالیت و می تواند مولکول های بیومولکولی مختلف را از اکسیداسیون محافظت کند.31Han et al. به طور تجربی در سال 2007 نشان داد که شکاف انرژی GNR ها را می توان در طول فرآیند لیتوگرافی با تغییر پهنای نوار کنترل کرد. با توجه به دانش ما، تحقیقات کمی در مورد خواص آنتی اکسیدانی نانو نوارهای اکسید گرافن (GONRs) وجود دارد. از این رو، در این مطالعه، ما با دقت MWCNT، MWCNT های کوتاه، GONR و GONR های کوتاه را آماده کردیم و هدف آن مقایسه خواص آنتی اکسیدانی آنها و نتایج مرتبط به طور سیستماتیک بودیم. .

2. نتایج و بحث

2.1. مورفولوژی MWCNT و GONR.

Figure 1a shows the low- and high-magnification transmission electron microscopy (TEM) images of MWCNTs and short MWCNTs. Following acidic cutting under ultrasonication, the length of MWCNTs could be shortened from >10 میکرومتر تا 2-3 میکرومتر. به طور همزمان، مشاهده شد که تیمار اسید نیتریک سطوح لوله صاف را زبر می کند. برخی از بریدگی ها و اشکال نامنظم در تصویر با بزرگنمایی بالا نمایش داده می شوند. علاوه بر این، با استفاده از MWCNT و MWCNT کوتاه از طریق واکنش‌های مایکروویو به ترتیب GONR و shortGONR بدست می‌آید. ما همچنین تصاویر TEM با بزرگنمایی کم و زیاد GONR و GONR کوتاه را نشان دادیم. به دلیل باز کردن زیپ طولی و برش جزئی، به نظر می‌رسد که GONR‌ها کوتاه‌تر از MWCNT هستند. از سوی دیگر، تصاویر با بزرگنمایی بالا قطرهای بزرگتر، یعنی 0.11-0.18 میکرومتر GONR را نسبت به MWCNT ها نشان دادند، که نشان می دهد فرآیند باز کردن زیپ موفقیت آمیز بود. به طور مشابه، GONR های کوتاه طول کوتاه تر و قطر بیشتری نسبت به MWCNT های کوتاه نشان دادند. در کمپرسور هوا فرآیند باز کردن زیپ جدید ما، ساختارهای لایه نازک GONR ها کمتر از آنچه در گزارش اولیه برای همان توان مایکروویو 250 وات به دست آوردیم بود، در حالی که MWCNT های مرکزی ضخیم تر را حفظ می کردند. برای مقایسه با GONR کوتاه در مطالعات قبلی ما، 34 قدرت مایکروویو بالاتر بریدگی‌های بیشتری را در کناره‌های نوارها ایجاد کرد و لبه‌های صاف و خوبی را ایجاد نکرد. توجه داشته باشید که ما از دو نوع مختلف شبکه مس در شکل 1a استفاده کردیم. برای MWCNT ها و GONR ها با طول کافی، شبکهGu با فرمور توری تثبیت شده با کربن (productno. 01881-F, Ted Pella, Inc., USA) استفاده شد. سوراخ‌های باز در یک لایه کربن توری از انتقال تصویر همپوشانی بین کربن‌های نانو و لایه کربنی جلوگیری کرد. شبکه های خاکستری تیره متعلق به لایه کربن توری هستند. با این حال، شبکه Gu با فرموار تثبیت شده با کربن (محصول شماره 01800-F, Ted Pella, Inc., USA) برای MWCNT کوتاه و GONR کوتاه مورد نیاز بود. این به این دلیل بود که سوراخ‌های بزرگ در لایه کربن توری باعث ایجاد مشکلاتی برای نگه‌داشتن کارآمد MWCNT کوتاه و GONR کوتاه می‌شد. همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است، کنتراست خاکستری روشن در زیر MWCNTهای کوتاه و GONRهای کوتاه یک لایه سبک از کربن است. این لایه کربنی، فیلم فرموار را که در معرض پرتو الکترونی قرار می‌گیرد، از طریق ویژگی‌های رسانای ورقه‌ای و الکتریکی، تثبیت می‌کند.

2.2. پیکربندی اتصال MWCNT و GONR.

طیف رامان چهار نانوکربن در شکل 1b ارائه شده است. باند D از GONR ها بعد از فرآیند باز کردن زیپ بالاتر از MWCNT ها بود. این به سطح اکسیداسیون بالاتر و تعداد بیشتری از ساختارهای لبه GONR در مقایسه با MWCNT ها نسبت داده شد. این پدیده همچنین مشابه چیزی است که ما در 2011.12 مشاهده کردیم، به دلیل سطح بالای گرافیتی شدن، باند G MWCNTها کمترین تعداد عرض کامل به نصف حداکثر را داشتند. نسبت ID/IG چهار نانوکربن به ترتیب 0 بود.076، 0.502، 0.483 و 0.700. به طور خلاصه، کاهش طول و اکسیداسیون سطح، سطح نقص را افزایش داد و بنابراین نسبت ID/IG را بیشتر کرد. قله D در همه گرافن‌های معیوب وجود دارد و به عنوان معیاری از کیفیت در نظر گرفته می‌شود. همانطور که در شکل 1b نشان داده شده است، پیک‌های D' در چهار طیف پس از فرآیند برش یا باز کردن زیپ برجسته‌تر می‌شوند و نشان می‌دهد که آنها فرآیندهای مخربی هستند که معرفی می‌کنند. بسیاری از نقص ها شکل 1c، d طیف طیف سنجی فوتوالکترون پرتو ایکس چهار نانوکربن را نشان می دهد. ظاهراً قله D برای GONR های کوتاه واضح ترین است. همانطور که در شکل 1c نشان داده شده است، به دلیل توانایی اکسیداسیون قوی KMnO4 در یک محیط اسیدی، سطح O به طور قابل توجهی از 7.6 درصد (MWCNTs) به 19.9 درصد (GONRs) افزایش یافته است. از سوی دیگر، سطح O اندکی 0.8 درصد از MWCNT به MWCNT های کوتاه افزایش یافت. نکته مهم این است که بالاترین سطح O برای GONR کوتاه 38.3 درصد است، که به این معنی است که انتهای نانوروبان‌ها راحت‌تر از سطوح مسطح sp2 می‌توانند گروه‌های عملکردی اکسیژن را بچسبانند. عدد پهنای کامل بزرگتر به نصف حداکثر و انتقال به اوج انرژی اتصال C 1s پس از فرآیند باز کردن زیپ MWCNT ها و MWCNT های کوتاه در شکل 1d نشان داده شده است. طرف را می توان به پیوندهای C-C(CC)، C-O، CO و COOH نسبت داد. ما GONR (200W) را در سال 2013 مشخص کردیم، و نتایج مشابه نتایج این مطالعه بود. این مطالعه نتیجه گرفت پدیده‌های طیف رامان، به این معنی که گروه‌های عاملی حاوی اکسیژن بیشتری در طول تبدیل لوله به روبان تولید می‌شوند (شکل 2).

2.3. خواص آنتی اکسیدانی MWCNT ها و GONR ها

2.3.1. تعیین 1،1-دی فنیل-2-پیکریل هیدرازیل سنجش فعالیت مهار رادیکال آزاد.

1،1-دی فنیل-2-پیکریل هیدرازیل (DPPH) فعالیت مهار رادیکال آزاد یکآنتی اکسیدانپلت فرم اعمال شده برای تشخیص ظرفیت آنتی اکسیدانی؛ نتایج برای چهار نانوکربن در جدول 2 توضیح داده شده است. در سنجش DPPH، ویتامین C با غلظت 1{9}}0 میکرومولار به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. برای آزمایش فعالیت های آنتی اکسیدانی MWCNT، MWCNT های کوتاه، GONR، و GONR های کوتاه، دوزهای 1، 5، و 10 میلی گرم/کمتر در محلول واکنش برای اندازه گیری خواص انکوبه شدند. MWCNTها، MWCNTهای کوتاه، GONRها، و GONRهای کوتاه دارای توانایی بازدارندگی متوسطی در 1{{20}} mg/L (19.2±0.3، 12.1±0.3، 26.8±0.3، و 30) بودند. 0.4 ± درصد)، در حالی که ویتامین چاد شرایط مشابهی در 100 میکرومولار (0.1 ± 93.4 درصد) برای این سرکوب داشت.

2.3.2. سنجش فعالیت یون کیلیت.

در شرایط استرس اکسیداتیو، فروزین می تواند یک کمپلکس با Fe2 پلاس ایجاد کند تا به صورت کمی اندازه گیری شود. در حضور واسطه‌های کیل‌کننده، کمپلکس شکسته می‌شود و باعث می‌شود یون‌های آهن از رنگ قرمز تیره کمپلکس Fe2 پلاس جدا شوند. ما از EDTA به عنوان کنترل مثبت استفاده کردیم. جدول 2 نشان می دهد که MWCNT ها، MWCNT های کوتاه، GONR ها، و GONR های کوتاه دارای فعالیت شلاته در 10 میلی گرم در لیتر (29.2 ± {{10}.8، 28.7 ± 0 بودند. 7، 6.6 ± 0 69.7 و 0.3 ± 68.9 درصد)، در حالی که کنترل مثبت در 100 میکرومولار (0.1 ± 93.4 درصد) شرایط مشابهی داشت.

2.3.3. اندازه گیری قدرت آنتی اکسیدانی کاهش دهنده آهن

سنجش پتانسیل کاهش آهن یک روش ساده و قابل اعتماد است که برای تعیین کمیت سنتز کمپلکس آهن (III)-ferricyanide مورد استفاده قرار گرفته است. در این روش، قدرت کاهشی چهار نانو کربن که مجتمع آهنی (III)-TPTZ را تولید می‌کنند، با تغییر رنگ محلول از زرد به سبز و آبی شناسایی شد. جدول 2 نشان می دهد که قدرت کاهنده MWCNT، MWCNT کوتاه، GONR، و چگالی نوری کوتاه GONR (OD) 1.11، 1.13، 1.15، و 1.11 در 10 میلی گرم در لیتر است.

2.3.4. MWCNT ها و GONR ها تجمع ROSA درون سلولی را مهار می کنند.

بسیاری از گزارش‌ها نشان داده‌اند که ROS یکپارچگی ساختاری غشای سلولی، از جمله غشای سلولی و غشای هسته‌ای را از بین می‌برد تا منجر به آسیب سلولی و از دست دادن عملکرد طبیعی شود. مهار تولید ROS یک استراتژی خوب برای تنظیم پایین استملانین synthesis. In this study, we used the 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA) staining assay to analyze the intracellular oxidative stress level in MWCNT and GONR treatment cells. Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) induced oxidative stimulations in MWCNT and GONR groups and was used as a negative control.41 When the concentration of PMA was 20 ng/mL, it induced oxidative stress, increasing the value to 38%; after treating GONRs and MWCNTs, the levels of ROS were downregulated to the normal level. The data showed that both materials inhibited oxidative stress levels, and the anti-oxidative effect of GONRs was higher than that of MWCNTs (Figure 3). Table 1 shows a similar consequence list. We contended that there are three reasons for our new findings: first, the order of solubility of these materials was as follows: short GONRs > GONRs >MWCNT های کوتاه > MWCNT، به این معنی که ناحیه تماس GONR های کوتاه بزرگترین بود، بنابراین برای ROSscavenging برتر بود. دوم، GONRها و MWCNTها ساختارهای کربنی sp2-بودند که می‌توانستند الکتریسیته ROS را از طریق تشکیل اضافی یا انتقال الکترون از بین ببرند.42 ما دریافتیم کهاثرات آنتی اکسیدانیساختارهای نانوروبان بهتر از ساختارهای نانولوله‌ای بودند، بنابراین نانوروبان‌ها انتقال الکترون‌ها را آسان‌تر از نانولوله‌ها می‌کنند. در نهایت، در شکل 1b، مشاهده می‌کنیم که محل کربن GONR sp{1} حاوی گروه‌های عاملی اکسیژن بیشتری نسبت به MWCNT‌ها است، گروه‌های اسید کربوکسیلیک می‌توانند یون‌های فلزی را کلات کنند، و گروه‌های هیدروکسیل می‌توانند یک اهداکننده H برای حذف ROS و مهار تولید ملانین باشند.

2.4. سمیت سلولی MWCNT ها و GONR های درمان شده در سلول های فیبروبلاست پوستی انسان.

روش {0}}(4,5-دی متیلث-تریازول-2-ایل)-2،5-دی فنیل تترازولیوم بروماید (MTT) برای ارزیابی سیتوتوکسیک استفاده شد خواص GONRs روی سلول‌های Hs68 (شکل 3)، و سلول‌ها در دوزهای مختلف 1، 5 و 10 میکروگرم بر میلی‌لیتر کشت داده شدند. ما بررسی کردیم که قابلیت حیات سلولی MWCNT به ترتیب 7/3 ± 7/100، 9/4 ± 8/99 و 7/4 ± 1/94 درصد در غلظت‌های 1، 5 و 10 میلی‌گرم در لیتر بود. قابلیت زنده ماندن برای MWCNT کوتاه به همان ترتیب محاسبه شد و 2.2 ± 93.9، 3.0 ± 4. 86 و 2.1 ± 98.9 درصد یافت شد. مشاهده کردیم که سلول‌های B16-F10 در غلظت‌های بالا انکوبه شدند و بقای سلولی سلول‌های Hs68 بیش از 80 درصد بود، که نشان می‌دهد MWCNT و MWCNT کوتاه هیچ اثر سمی روی سلول‌های فیبروبلاست پوستی انسان ندارند. قابلیت زنده ماندن سلولی GONR و GONR کوتاه 2.1 ± 2.24، 3.5 ± 90.87، 2.5 ± 88.58، 3.6 ± 89.03، 2.8 ± 90.71 و 2.5 ± 90.64 86} بود. همچنین در شکل 4a اشاره شده است که GONR و shortGONR اثر سیتوتوکسیک قابل تشخیصی روی سلول های HS68 ندارند. در گزارش‌های قبلی، استفاده از نانومواد آزمایش‌نشده برای اهداف آرایشی می‌تواند مشکوک تلقی شود، ۴۳،۴۴ و معمولاً به دلیل حمله DNA پس از ورود نانوذرات به سلول‌ها بود. پس از آزمایش سمیت سلولی، متوجه شدیم که مواد ما برای سلول‌های طبیعی پوست سمی ایجاد نمی‌کنند. ما به این نتیجه رسیدیم که پس از ورود نانومواد به سلول‌ها، نانومواد فقط با کاهش استرس اکسیداتیو و یون‌های فلزی کیلیت تولید ملانین را مهار می‌کنند و به میتوکندری یا DNA آسیب نمی‌رسانند، به این معنی که MWCNT و GONR برای استفاده بی‌خطر بودند.

2.5. دو نوع MWCNT و GONR در فعالیت تیروزیناز سلولی B16-F10 و محتوای ملانین.

درملانیندر مسیر سنتز، تیروزیناز نقش مهمی ایفا می کند. تیروزیناز اکسید می شود و از طریق یک سری واکنش های بیوشیمیایی، یوملانین و فئوملانین را تشکیل می دهد. به منظور تعیین اینکه آیا GONR ها و MWCNT ها فعالیت تیروزیناز را مهار می کنند و باعث کاهش تولید ملانین می شوند، ما فعالیت تیروزیناز را در سلول های B16-F10 تجزیه و تحلیل کردیم. ما دریافتیم که MWCNT ها و MWCNT های کوتاه فعالیت تیروزیناز را تقریباً 17.1 درصد و 23 درصد در 10mg/L مهار می کنند. GONRها و GONRهای کوتاه اثر بهتری در سرکوب فعالیت تیروزیناز در همان غلظت در مقایسه با GONR دیگر داشتند. آنها همچنین به صورت وابسته به دوز بودند و 49.8 درصد و 44.7 درصد از فعالیت تیروزیناز را مهار کردند، همانطور که در شکل 4b نشان داده شده است.

ملانینیک رنگدانه ضروری در بدن انسان است، اما بیان بیش از حد ملانین اغلب باعث ایجاد یک سری بیماری ها می شود. در مطالعات قبلی، شیائو و همکاران. از یک ماده مشابه، اسفنج رادیکال، یک نانوذره فولرن، به عنوان ضد ملانین استفاده کرد. نتایج خوبی به دست آمد. حدود 20 درصد ازملانینتولید را می توان مهار کرد. به منظور بهبود کارایی آن، ما ماده آزمایشی را برای اندازه‌گیری میزان مهار ملانین و مکانیسم مولکولی آن، که در شکل‌های 4c و 5 نشان داده شده است، بیشتر بهبود دادیم. 2 درصد در 10 میلی گرم در لیتر و به روشی وابسته به دوز. GONRها و GONRهای کوتاه به شدت مقادیر را به 2.3 ± 32.0 و 3.4 ± 35.3 درصد در 10 میلی گرم در لیتر کاهش دادند. نتایج تجربی نشان داد که هر چهار نوع می توانند سنتز ملانین را مهار کنند و GONR ها تأثیر قوی تری داشتند. از سوی دیگر، ما همچنین مشاهده کردیم که GONR کوتاه اثر بهتری در مهار تولید ملانین دارد. نتیجه می گیریم که GONR های کوتاه گروه های عملکردی بیشتری دارند و می توانند به طور موثری از تیروزیناز کاتالیز شده توسط یون های فلزی جلوگیری کنند و تولید ملانین را بیشتر مهار کنند (شکل 2). در جدول 1 مشاهده می کنیم که تلاش نوع کوتاه یون-کلات کننده فلزی بیشتر از نوع معمولی است. این بدان معنی است که این GONR های کوتاه می توانند به طور بالقوه در زمینه آرایشی به عنوان عوامل مراقبت از پوست استفاده شوند.

2.6. مکانیسم MWCNT ها و GONR ها محتوای ملانین سلولی B16-F10 را مهار کرد.

سلول ها با تنظیم بیان پروتئین به استرس اکسیداتیو خارجی پاسخ می دهند. سلول‌های B16-F10 بیان ژن c-myc و AMPK تنظیم‌شده را برای کاهش سطوح اکسیداتیو افزایش می‌دهند، و در این کار، MITF یک فاکتور رونویسی خاص تیروزیناز برای تنظیم مسیر سیگنال سنتز ملانین مولکولی است. در شکل 5a، MWCNTs و GONRs با کاهش استرس اکسیداتیو، فاکتور رونویسی مرتبط با میکروفتالمیا را کاهش داد و سپس، ژن پایین دستی TRP-1 و TRP-2 نیز کاهش یافت. برای سطح پروتئین، یک پدیده مشابه پیدا شد که به موجب آن MWCNTs و GONRs مسیر ملانوژنز مربوط به MITF را تنظیم کرده و در نهایت کاهشملانینمحتوا (شکل 5b).

بدنسازی سیستانچ

3. مواد و روش های تجربی

3.1. تهیه MWCNT و GONR.

فرآیند مربوط به ساخت GONR در مقاله قبلی گزارش شده بود. 12MWCNT (0.05 گرم) در 9:1 H2SO4/H3PO4 معلق شد و با یک راکتور مایکروویو (CEM-Discover) با مجموعه قدرت درمان شد. در 250 وات به مدت 2 دقیقه پس از افزودن KMnO4 (0.25 گرم) به محلول‌ها، محلول‌ها با همان قدرت مایکروویو در دمای 65 درجه به مدت 4 دقیقه تحت درمان قرار گرفتند. در اینجا، از کمپرسور هوا برای کنترل دمای راکتور مایکروویو در طول فرآیند استفاده می شود. توان مایکروویو در آزمایش های اولیه روی 250 وات تنظیم شد.

3.2. تهیه MWCNT های کوتاه و GONR های کوتاه.

روند مربوط به ساخت GONRهای کوتاه در مقاله قبلی ما گزارش شده است. زمان تیمار اسیدی 8 ساعت انتخاب شد. توان مایکروویو روی 250 وات تنظیم شده بود که همان قدرت دریافت GONR است.

3.3. فعالیت پاکسازی رادیکال DPPH.

DPPH اغلب برای تعیین ظرفیت مهار نمونه ها و خواص آنتی اکسیدانی استفاده می شود. نمونه های آنتی اکسیدانی مثبت با غلظت های مناسب به محلول اضافه شد و نمونه ها در طول موج 517 نانومتر به مدت 30 دقیقه مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. ما از درصد DPPH باقیمانده در کنار نمونه های آزمایشی برای اندازه گیری تعداد استفاده کردیمآنتی اکسیدان هالازم است رادیکال های قبلی DPPH را کاهش دهد. ویتامین C در غلظت 100 میکرومولار به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. فعالیت مهار (درصد) به عنوان اندازه گیری شد

3.4. فعالیت کیلاسیون فلزی

یون فلزی عاملی است که باعث اکسیداسیون بیش از حد لیپید می شود و Fe2 پلاس یکی از یون های تأثیرگذار است. 10 میکرولیتر)، و سپس در فروزین (5 میلی‌مولار، 20 میکرولیتر) بارگیری شد. این مخلوط به طور کامل با 69 میکرولیتر منتول مخلوط شد و به مدت 10 دقیقه در دمای اتاق نگهداری شد. سپس محلول واکنش نمونه در طول موج 562 نانومتر مشاهده شد. EDTA به عنوان یک کنترل مثبت در 100 میکرومولار مورد استفاده قرار گرفت و فرمول محاسبه فعالیت کلاتینگ فلز بر اساس معادله 1 بود.

3.5. کاهش قدرت.

محاسبه توان کاهشی بر اساس مطالعه قبلی است. 50 ابتدا، 2.5 میکرولیتر مواد گرافن با بافر PBS (67 میلی‌مولار، pH 6.8) و K3Fe (CN)6 (2.5 میکرولیتر، 20 درصد) مخلوط شدند و سپس در دمای 50 درجه به مدت 20 انکوبه شدند. دقیقه سپس 10 درصد تری کلرواستیک اسید (160 میکرولیتر) با عوامل آن در 300 گرم به مدت 20 دقیقه سانتریفیوژ شد. طول جذب پس از مخلوط شدن با 25 میکرولیتر FeCl3 (2 درصد) در 700 نانومتر تعیین شد. هیدروکسی آنیزول بوتیله (BHA) در 100 میکرومولار استفاده شد.

3.6. آزمایشات تکثیر سلولی

رده سلولی درمالفیبروبلاست انسانی HS68 برای تجزیه و تحلیل نسبت تکثیر سلولی استفاده شد. HS68 در محیط Eagle اصلاح شده Dulbecco (DMEM) حاوی 10 درصد سرم جنین گاو و 1 درصد پنی سیلین و استرپتومایسین مخلوط انکوبه شد. 8000 سلول در پلیت های چاهک کاشته شدند و به مدت 24 ساعت با نمونه ها تیمار شدند. محلول رویی برداشته شد و ما از محلول MTT برای کشت به مدت 2 ساعت در دمای 37 درجه استفاده کردیم. پس از انکوباسیون، محیط حاوی MTT برداشته شد و آن را با دی متیل سولفوکسید (DMSO) حل کرد. محلول در OD 590nm خوانده شد و نرخ با معادله 1 محاسبه شد.

3.7. ارزیابی محتوای ملانین سلولی.

ما از روشی با تغییرات جزئی بر اساس سنجش قبلی استفاده کردیم. 52،53 گلوله سلولی B16-F1{6}} از مرکز تحقیقات و مجموعه منابع زیستی (BCRC، CRL 6323، Hsinchu، تایوان) در مخلوطی از NaOH 2.0 N حل شد. و 10 درصد DMSO. نمونه متعاقباً به مدت 1 ساعت در دمای 90 درجه حرارت داده شد و در 10،{11}} گرم به مدت 10 دقیقه دیگر سانتریفیوژ شد تا مایع رویی شفاف به دست آید. اینملانینشمارش با نظارت بر OD از مایع رویی در 475 نانومتر تعیین شد.

3.8. فعالیت تیروزیناز سلولی B16-F10.

برای فعالیت تیروزیناز سلولی B16-F10، به کارهای قبلی با برخی تغییرات اشاره کردیم. 50 سلول در صفحات چاهک در 105 سلول در هر چاهک کشت شدند. پس از تیمار با نمونه‌ها، سلول‌ها در 1 درصد Triton X{6}}/PBS و 2 میلی‌لیتر-تیروزین (50 میکرولیتر) به مدت 3 ساعت لیز شدند. پس از انکوباسیون، محیط را برداشته و جذب را در OD 590 نانومتر خواندیم. فرمول فعالیت تیروزیناز با معادله 1 محاسبه شد.

3.9. تشخیص ROS با رنگ آمیزی DCFDA.

با اشاره به مطالعه قبلی،54 1.2 1.105 سلول B16-F10 در صفحات چاهک کاشته شدند و با غلظت‌های مختلف نمونه‌ها تیمار شدند. سلول ها در PBS معلق شدند و سپس با DCFDA (5 میکرومولار) در DMEM قرمز غیر فنلی به مدت 30 دقیقه در دمای 37 درجه بارگذاری شدند. فلوسایتومتر (Guava، Merck، آلمان) برای تشخیص سیگنال فلورسنت DCFDA استفاده شد. طول موج تحریک و انتشار DCFDA به ترتیب 488 و 535 نانومتر بود.

3.10. واکنش زنجیره ای پلیمراز در زمان واقعی.

ما از روش های لین و همکاران پیروی کردیم. (2018). 1 واکنش زنجیره ای پلیمراز رونویسی معکوس کمی در زمان واقعی (qRT-PCR) از یک پرایمر انحصاری برای تولید فلورسانس تشکیل شده است. از یک تکنیک تشخیص فلورسانس استفاده کرد که هر چرخه را با استفاده از یک سیستم 7500 qRT-PCRS (Applied Biosystems، ایالات متحده آمریکا) حس می کند. این چرخه را بر اساس مقدار فلورسانس آزاد شده تشخیص داد، و سپس محصول هر چرخه برای محتوای تولید شده محاسبه شد، که منجر به دستیابی به اهداف کمی در زمان واقعی شد. Trizol (Invitrogen، ایالات متحده آمریکا) برای استخراج RNA کامل از بافت ریه، مطابق جهت داده شده توسط سازنده استفاده شد. متعاقبا، یک کیت رونویسی معکوس (Takara، ژاپن) برای تولید DNA استفاده شد. در qRT-PCR با استفاده از پرایمرها، فهرست شده در جدول 1، ابتدا نمونه حرارت داده شد تا DNA تک رشته ای تشکیل شود. سپس اتصال پرایمر برای تشکیل یک DNA دو رشته ای (dsDNA) انجام شد، پس از آن dsDNA سبز SYBR ترکیب شد، که برای آن از کیت معرف سبز پلاس SYBR (روش، بازل، سوئیس) استفاده شد که منجر به آزاد شدن فلورسانس شد. حاصل از یک سیستم تشخیص فلورسانس عبور داده شد. تشخیص سیگنال‌های فلورسنت در طول مرحله ازدیاد طول یا بازپخت هر چرخه انجام می‌شود؛ پس از تشخیص، محتویات نمونه با شدت فلورسانس شناسایی‌شده به عقب رانده می‌شوند. سطوح بیان ژن‌های هدف با استفاده از روش ۲-ΔΔCt به سطوح توبولین نرمال می‌شوند. .

اثر سفید کننده سیستانچ بر روی پوست به ضد اکسیداسیون

3.11. تست وسترن بلات

سلول های B16-F10 در 4 درجه یک شبه با یک بافر سنجش رادیو ایمونوپسیتیشن (شرکت علمی Thermo، ایالات متحده آمریکا)، که حاوی مهارکننده های پروتئاز است، لیز شدند. کیت سنجش پروتئین اسید بیسینکونیک (BCA, Sigma-Aldrich Corp., USA) برای تعیین کمیت مقدار پروتئین استفاده شد. پروتئین های نمونه بر روی ژل 10 درصد سدیم دودسیل سولفات-پلی آکریل آمید جدا شده و روی غشای آپولیوینیلیدین دی فلوراید (PVDF) (Pall LifeScience, Ann Arbor, MI, USA) منتقل شدند. غشای PVDF با یک بافر مسدود کننده (Thermo Scientific) به مدت 1 ساعت مسدود شد و با آنتی بادی اولیه اختصاصی در طول شب در دمای 4 درجه انکوبه شد. پس از آن، غشاء در معرف‌های تشخیص نورتابی شیمیایی (Thermo Scientific) غوطه‌ور شد و توسط یک MiniChemi Chemiluminescenceimager (Beijing Sage Creation Science، چین) آنالیز شد. منابع آنتی بادی ها عبارتند از: خرگوش ضد MITF، خرگوش ضد TRP-1، خرگوش ضد TRP-2، و -اکتین (Thermo Scientific).

3.12. تجزیه و تحلیل مواد.

TEM (JEOL JEM-1230، 100 کیلوولت) برای مشاهده مورفولوژی نانوکربن استفاده شد. طیف‌سنج آمیکرو رامان (PTT، RAMaker) برای بررسی حالت‌های تشدید نانوکربن استفاده شد. اندازه‌گیری‌های طیف‌سنجی پرتو الکترون ایکس (XPS، Kratos Axis Ultra DLD) نیز برای تعیین آنالیز ترکیبی انجام شد.

3.13. تحلیل آماری.

تمام نمونه ها و آزمایش های استاندارد حداقل سه بار تکرار شدند. برای مقایسه و بیان میانگین مقادیر میانگین ± انحراف معیار از آزمون t-Student استفاده کردیم.

4. نتیجه گیری

به طور خلاصه، مشاهده کردیم که GONR کوتاه به دلیل خواص چندگانه عملکردی آن، ماده بالقوه ای برای تولید مراقبت از پوست است (شکل 6). نتایج نشان داد که نانوکربن به عنوان یک آنتی اکسیدان خارج سلولی و درون سلولی نقش دارد. در همین حال، نانوکربن فعالیت تیروزیناز را مهار کردملانینمحتوا و هیچ آسیب جدی به سلول های رنگدانه وارد نکرد. این کار عملکردهای ضد ملانوژنز چهار نوع نانوکربن را مشخص کرد؛ مطالعات آینده مکانیسم این ترکیبات را بر روی بیان ژن و پروتئین خاص مربوط به بلوغ، حمل و نقل و تجمع ملانین مورد بررسی قرار خواهد داد.

cistanche bienfaits

منابع

(1) Lin, L.-C.; چن، سی.-ای. کو، سی.-اچ. لین، Y.-S. هوانگ، BH؛ وانگ، TK; Kuo، Y.-H. وانگ، H.-MD 36H: یک مهارکننده قوی جدید برای ضد ملانوژنز. اکسید. پزشکی سلول. طول عمر 2018,2018, 6354972.

(2) لی، آر. کیو، ایکس. خو، اف. لین، ی. نیش، ی. زو، T. اثرات ذرات ریز معلق در هوا (PM2.5) بر مقاومت به انسولین هپاتوسیت در شرایط آزمایشگاهی با واسطه ماکروفاژها. ACS Omega 2016، 1، 736-743.

(3) شما، Y.-J. وو، پی.-ای. لیو، ی.-جی. Hou، C.-W.; وو، سی.-اس. Wen، K.-C.; لین، سی.-ای. چیانگ، اچ.-ام. سسامول، هیپرپیگمانتاسیون و آسیب ناشی از اشعه ماوراء بنفش را در پوست موش C57BL/6 مهار کرد. آنتی اکسیدان ها 2019، 8، 207.

(4) Hseu، Y.-C.; چنگ، ک.-سی. لین، Y.-C. چن، سی.-ای. Chou, H.-Y.;Ma, D.-L.; Leung، C.-H.; Wen، Z.-H.; وانگ، اچ.-ام. اثرات هم افزایی لیندرانولید B همراه با آربوتین، PTU یا اسید کوجیک بر مهار تیروزیناز. Curr. فارم. بیوتکنول. 2015، 16، 1120-1126.

(5) Bae-Harboe, Y.-SC; پارک، اچ.-ای. تیروزیناز: یک پروتئین تنظیم کننده مرکزی برای رنگدانه های پوستی. ج. سرمایه گذاری درماتول. 2012، 132،2678-2680.

(6) رضاپور-لاکتوز، ع. یگانه، ح. استاد، SN; غریبی، ر.؛ مظاهری، ز. Ai, J. غشای پلی اورتان/سیلوکسان پاسخگو به حرارت برای پانسمان زخم و پیوند ورقه سلولی: مطالعات آزمایشگاهی و درون تنی. ماتر علمی Eng., C 2016, 69, 804-814.

(7) Boo, YC p-Coumaric Acid به عنوان یک ماده فعال در لوازم آرایشی: مروری با تمرکز بر اثرات ضد ملانوژنیک آن. آنتی اکسیدان ها 2019، 8، 275.

(8) عوان، ف. اسلام، ام اس; ممکن است.؛ یانگ، سی. شی، ز. بری، RM؛ تام، نانوهیبریدهای نانوکریستال-ZnO سلولز KC برای کنترل فعالیت فوتوکاتالیستی و حفاظت UV در فرمولاسیون آرایشی.ACS Omega 2018، 3، 12403-12411.

(9) کریستینا نگریتو، م. والدز، سی. شارما، جی. روزنبرگ، سی.؛ سلاسی، مهار رشد CR و آسیب DNA ناشی از X فنل در مخمر: یک مطالعه کمی ساختار-فعالیت رابطه. ACS Omega 2017, 2, 8568-8579.

(10) هملین، م. همتی، س. وارما، ک. ویسی، H. Greensynthesis، اثر ضد باکتریایی، آنتی اکسیدانی و سیتوتوکسیک نانوذرات طلا با استفاده از عصاره پسته آتلانتیکا. J. Taiwan Inst. Chem.Eng. 2018، 93، 21-30.

(11) Meneses-Gutierrez, CL; Herna ́ روشن-Damia ́ n، J.; Pedraza-'Chaverri, J.; Guerrero-Legarreta، I.; تلز، دی. Jaramillo-Flores، M. ́E. ظرفیت آنتی اکسیدانی و اثرات سیتوتوکسیک کاتچین ها و الیگومرهای رسوراترول تولید شده توسط اکسیداسیون آنزیمی در برابر سلول های سرطانی مثانه T24 انسانی. آنتی اکسیدان ها 2019، 8، 214.

(12) Sun, C.-L.; چانگ، سی.-تی. لی، اچ.-اچ. ژو، جی. وانگ، جی. شم، ت.-ک. پونگ، W.-F. سنتز یک ساختار ناهمگن MWCNT/GONR با کمک مایکروویو برای تشخیص الکتروشیمیایی اسید اسکوربیک، دوپامین و اسید اوریک. ACS Nano 2011، 5، 7788-7795.

(13) Lin, T.-E.; لو، ی.-جی. Sun، C.-L.; پیک، اچ. چن، جی.-پی. Lesch، A.; Girault، پروب‌های الکتروشیمیایی نرم HH برای نقشه‌برداری از توزیع نشانگرهای زیستی و نانومواد تزریقی در بافت‌های انسانی حیوانات. آنژو. Chem., Int. اد. انگلیسی 2017، 56، 16498-16502.

(14) اوکودا، ک. هیروتا، تی. هیروبه، ام. ناگانو، تی. Mochizuki، M.؛ Nishino، T. سنتز مشتقات مختلف G60 محلول در آب و فعالیت رفع سوپراکسید آنها. فولرن Sci. تکنولوژی 2000، 8،127-142.

(15) لوسنت-شولتز، RM; مور، وی سی. لئونارد، AD; قیمت، BK; Kosynkin، DV; لو، ام. پارتا، ر. Conyers، JL; تور، نانولوله های کربنی تک جداره آنتی اکسیدانی JMA. مربا. شیمی. Soc. 2009,131, 3934-3941.

(16) Injac، R.; پرس، م. اوبرماجر، ن. جورجویچ-میلیچ، وی.؛ پریاتلی، م. جورجویچ، آ. سرار، ا. Strukelj، B. اثرات بالقوه محافظت از کبد فولرن C60 (OH)24 در سمیت کبدی ناشی از دوکسوروبیسین در موش‌های صحرایی مبتلا به سرطان پستان. بیومتریال 2008، 29، 3451-3460.

(17) تانگ، ج. زیمرمن، ام سی; لی، اس. یی، ایکس. لوکسنهوفر، آر.؛ اردن، آر. کابانوف، جذب عصبی AV و مهار سوپراکسید درون سلولی نانوفرمولاسیون فولرن (C60)-poly(2-oxazoline). بیومتریال 2011، 32، 3654-3665.

(18) یوگیو، ک. شیشیدو، ک. مورایاما، اچ. یانو، م.؛ ماتسوبایاشی، ک. تاکادا، اچ. ناکامورا، اچ. ماسوکو، ک. Kato, T.; Nishioka, K. فولرن C60 محلول در آب از انحطاط غضروف مفصلی در استئوآرتریت از طریق کاهش فعالیت غضروفی کاتابولیک و مهار انحطاط غضروف در طول توسعه بیماری جلوگیری می کند. آرتریت روم. 2007، 56، 3307-3318.

(19) تاکادا، اچ. میمورا، اچ. شیائو، ال. اسلام، RM; ماتسوبیاشی، ک. ایتو، اس. میوا، N. آنتی اکسیدان نوآورانه: فولرن (INCI #: 7587) به عنوان "اسفنج رادیکال" روی پوست است. سطح بالایی از ایمنی، پایداری و پتانسیل آن به عنوان یک ماده آرایشی ضد پیری و سفید کننده برتر است. فولرن ها، نانولوله ها، نانوساختار کربنی. 2006، 14، 335-341.

(20) Fenoglio، I.; گرکو، جی. توماتیس، م. مولر، جی. ریموندو پینیرو، ای. بگین، اف. فونسکا، آ. Nagy، JB; لیسون، دی. Fubini, B. 'نقایص ساختاری نقش عمده ای در سمیت حاد ریه نانولوله های کربنی چند جداره ایفا می کنند: جنبه های فیزیکوشیمیایی. شیمی. Res.Toxicol. 2008، 21، 1690-1697.

(21) Novoselov، KS; گیم، AK; موروزوف، اس وی؛ جیانگ، دی؛ ژانگ، ی. دوبونوس، اس وی؛ گریگوریوا، IV; Firsov، AA اثر میدان الکتریکی در لایه‌های کربن نازک اتمی. Science 2004, 306, 666-669.

(22) Novoselov، KS; گیم، AK; موروزوف، اس وی؛ جیانگ، دی؛ کاتسنلسون، MI; گریگوریوا، IV; دوبونوس، اس وی؛ Firsov، AA گاز دو بعدی فرمیونهای دیراک بدون جرم در گرافن. طبیعت 2005،438، 197-200.

(23) ژو، ایکس. وی، ی. او، س. بوی، اف. ژانگ، Q. Zhang، H. فیلم‌های اکسید گرافن کاهش‌یافته به عنوان ماتریس MALDI-TOF-MS برای تشخیص اکتاکلرودی‌بنزو-p-دیوکسین استفاده می‌شوند. شیمی. اشتراک. 2010، 466974-6976.

(24) ژائو، دبلیو. فن، اس. شیائو، ن. لیو، دی. تای، YY; یو، سی. Sim, D.;Huang, HH; ژانگ، Q. بوی، اف. ما، ایکس. ژانگ، اچ. Yan, Q. کاغذهای نانولوله کربنی انعطاف پذیر با خواص ترموالکتریک بهبود یافته. Environ Environ. علمی 2012، 5، 5364-5369.

(25) وانگ، ز. وو، اس. ژانگ، جی. چن، پی. یانگ، جی. ژو، ایکس.؛ ژانگ، کیو. یان، س. ژانگ، اچ. مطالعات مقایسه‌ای روی فیلم‌های اکسید گرافن کاهش‌یافته تک لایه به‌دست‌آمده از احیای الکتروشیمیایی و کاهش بخار هیدرازین. مقیاس نانو Res. Lett. 2012، 7، 161.

(26) لیانگ، ایکس. فو، ز. ترانزیستورهای گرافنی Chou، SY از طریق چاپ انتقالی در نواحی فعال دستگاه روی ویفر بزرگ ساخته شده است. Nano Lett.2007, 7, 3840-3844.

(27) Sun, X.; لیو، ز. ویلسر، ک. رابینسون، جی تی. گودوین، آ.؛ زاریک، اس. دای، H. اکسید نانو گرافن برای تصویربرداری سلولی و تحویل دارو. Nano Res. 2008، 1، 203-212.

(28) چن، دبلیو. شیائو، پی. چن، اچ. ژانگ، اچ. ژانگ، Q. چن، Y. مواد توده گرافن پلیمری با شبکه گرافن سه بعدی متقاطع یکپارچه. Adv. ماتر 2019, 31, 1802403.

(29) چن، دی. فنگ، اچ. لی، جی. اکسید گرافن: آماده‌سازی، عامل‌سازی و کاربردهای الکتروشیمیایی. شیمی. Rev. 2012,112, 6027-6053.

(30) رنجان، ص. آگراوال، اس. سینها، ا. رائو، TR; Balakrishnan, J.; Thakur, AD یک سنتز کم هزینه غیر منفجره گرافن اکسید برای کاربردهای مقیاس پذیر. علمی Rep. 2018, 8, 12007.

(31) کیو، ی. وانگ، ز. اونز، ACE; کولاوتس، آی. چن، ی. کین، AB; آسیب، شیمی آنتی اکسیدان RH مواد مبتنی بر گرافن و نقش آن در فناوری حفاظت از اکسیداسیون. مقیاس نانو 2014، 6،11744-11755.

(32) Han, MY; اوزیلماز، بی. ژانگ، ی. کیم، پی. مهندسی باند انرژی نانوروبان‌های گرافن. فیزیک کشیش لِت. 2007, 98,206805.

(33) سوزا، JP; مانسانو، ع. ونتورینی، FP; سانتوس، اف.؛ زوکولوتو، وی. متابولیسم آنتی اکسیدانی گورخرماهی پس از قرار گرفتن در معرض اکسید گرافن و بازیابی. فیزیول ماهی. بیوشیمی. 2019،45، 1289-1297.

(34) Sun, C.-L.; چنین.؛ وو، جی.-جی. سنتز نانوروبان‌های کوتاه گرافن‌اکسید برای تشخیص بهتر نشانگر زیستی بیماری پارکینسون Biosens. بیوالکترون. 2015، 67، 327-333.

(35) پادشاه، AAK; دیویس، BR; نوربهشت، ن. نیومن، P.; کلیسا، TL; هریس، AT; رازال، ج.م. مینت، هوش مصنوعی رامان متریک جدید برای مشخص کردن اکسید گرافن و مشتقات آن. Rep. 2016, 6, 19491.

(36) Hsu, H.-C.; نشان داده شده، I. وی، H.-Y.; چانگ، Y.-C. دو، H.-Y. لین، ی.-جی. Tseng، C.-A.; وانگ، سی.-اچ. چن، L.-C.; لین، Y.-C. چن، ک.-اچ. اکسید گرافن به عنوان یک فوتوکاتالیست امیدوارکننده برای تبدیل CO2 به متانول. مقیاس نانو 2013، 5، 262-268.

(37) Lin, L.-Y.; بله، م.-ح. تسای، جی.-تی. هوانگ، Y.-H. Sun، C.-L.;Ho، K.-C. یک ساختار ناهمگن نانولوله کربنی چند جداره هسته-پوسته جدید به عنوان یک ماده ابرخازن بالقوه. جی. ماتر. شیمی. 2013، 1، 11237-11245.

(38) یین، اچ. خو، ال. پورتر، NA پراکسیداسیون لیپیدی رادیکال آزاد: مکانیسم ها و تجزیه و تحلیل شیمی. Rev. 2011, 111, 5944-5972.

(39) Tung, C.-H.; چانگ، J.-H. حسیه، ی.-ح. Hsu، J.-C.; الیس، AV؛ لیو، W.-C. یان، R.-H. مقایسه بازده رادیکال هیدروکسیل بین تیمارهای آب فوتو و الکتروکاتالیز شده J. Taiwan Inst. Chem.Eng. 2014، 45، 1649-1654.

(40) اوشیما، اچ. یوشی، ی. آئوریول، اس. گیلبرت، I. اثرات آنتی اکسیدانی و پرواکسیدانی فلاونوئیدها: اثرات بر آسیب DNA ناشی از اکسید نیتریک، پراکسی نیتریت و آنیون نیتروکسیل. رادیکال آزاد بیول. Med.1998, 25, 1057-1065.

(41) چو، H.-Y.; لی، سی. Pan، J.-L. Wen، Z.-H.; هوانگ، S.-H. Lan, C.-W.; لیو، W.-T. ساعت، T.-C. Hseu، Y.-C.; هوانگ، بی. چنگ، ک.-سی. وانگ، اچ.-ام. عصاره غنی شده آستاگزانتین از هماتوکوکوس پلویالیس ترشحات فاکتور رشد را برای افزایش تکثیر سلولی افزایش می دهد و باعث تخریب MMP1 برای افزایش تولید کلاژن در فیبروبلاست های پوستی انسان می شود. بین المللی جی. مول. علمی 2016, 17,955.

(42) Bitner, BR; مارکانو، دی سی؛ برلین، جی.ام. فابیان، RH؛ Cherian، L.; کالور، جی سی. دیکنسون، من؛ رابرتسون، CS; Pautler, RG; کنت، TA; تور، ذرات کربن آنتی اکسیدان JM باعث بهبود اختلال عملکرد عروق مغزی به دنبال آسیب مغزی تروماتیک می شود. ACSNano 2012، 6، 8007-8014.

(43) لیائو، سی. لی، ی. Tjong، S. نانومواد گرافن: سنتز، زیست سازگاری، و سمیت سلولی. بین المللی جی. مول. علمی 2018, 19, 3564.

(44) کنگ، اچ. وانگ، ال. زو، ی. هوانگ، Q. فن، سی. بینش فیزیکوشیمیایی مرتبط با محیط کشت در مورد سمیت سلولی نانومواد کربن. شیمی. Res. سموم 2015، 28، 290-295.

(45) شیائو، ال. ماتسوبیاشی، ک. میوا، N. اثر مهاری مشتق پیچیده شده در پلیمر محلول در آب از فولرن بر ملانوژنز ناشی از UVA از طریق کاهش بیان تیروزیناز ملانوسیت‌های غیرانسانی و بافت‌های پوست. قوس. درماتول. Res. 2007، 299،245-257.

(46) کفوری، ع. آمارو، م. کولت، سی. Sordet-Dessimoz, J.;Giner, MP; کریستن، اس. موکو، اس. للو، م. لوال، ال. کوچ، یو.؛ ترامپ، ک. ساکاموتو، ک. بیرمن، اف. Radtke، F. AMPK با سرکوب استرس اکسیداتیو، بقای سلول های ملانوم c-Myc مثبت را افزایش می دهد. EMBO J. 2018, 37, No. e97673.

(47) Hseu, Y.-C.; چنگ، ک.-سی. لین، Y.-C. چن، سی.-ای. چو، H.-Y.; ما، D.-L. Leung، C.-H.; Wen، Z.-H.; وانگ، اچ.-ام. اثرات هم افزایی لیندرانولید B همراه با آربوتین، PTU یا اسید کوجیک بر مهار تیروزیناز. Curr. فارم. بیوتکنول. 2015، 16،1120-1126.

(48) لی، اس. کیم، جی. آهنگ، اچ. سوک، جی. هونگ، اس. Boo, Y. Luteolin7-سولفات سنتز ملانین را از طریق مهار CREB و بیان تیروزیناز با واسطه MITF کاهش می‌دهد. آنتی اکسیدان ها 2019، 8، 87.

(49) دووال، سی. کوهن، سی. Chagnoleau، C. فلورت، وی. بوررو، ای. برنارد، اف. نقش تنظیمی کلیدی رنگدانه فیبروبلاست های پوستی که با استفاده از یک مدل پوست بازسازی شده نشان داده شده است: تاثیر پیری عکس. PLoS One 2014, 9, No. e114182.

(50) Li, P.-H.; چیو، ی.-پی. Shih, C.-C.; Wen، Z.-H.; Ibeto، LK; Huang، S.-H.; Chiu، CC; ما، D.-L. Leung، C.-H.; Chang، Y.-N.؛ Wang، H.-MD فعالیت های زیستی عملکردی عصاره Equisetum ramosisimum: اثرات محافظتی در برابر اکسیداسیون، ملانوما، و ملانوژنز. اکسید. پزشکی سلول. Longevity 2016, 2016, 2853543.

(51) Liang, C.-H.; چان، L.-P. دینگ، H.-Y.; بنابراین، EC; لین، آر.-جی.؛ وانگ، اچ.-م. چن، ی.-جی. چو، T.-H. فعالیت مهار رادیکال آزاد 4-(3،{10}}دی هیدروکسی بنزوئیلوکسی متیل) فنیل-O{12}}d-گلوکوپیرانوزید از Origanum vulgare و محافظت از آن در برابر آسیب اکسیداتیو. جی. آگریک. مواد شیمیایی مواد غذایی 2012، 60، 7690-7696.

(52) وانگ، H.-M.; چن، سی.-ای. ون، ز.-اچ. شناسایی مهارکننده‌های ملانوژنز از Cinnamomum SubGenius با سیستم‌های غربالگری in vitro andin vivo با هدف قرار دادن تیروزیناز انسانی. Exp.Dermatol. 2011، 20، 242-248.

(53) وانگ، Y.-C.; هوانگ، X.-Y. Chiu، C.-C.; لین، ام.-ای. لین، W.-H.؛ چانگ، W.-T. Tseng، C.-C.; Wang, H.-MD مهار ملانوژنز از طریق پودر عصاره میوه Phyllanthus Emblica در سلولهای B16F10. مواد غذایی بیوسی. 2019، 28، 177-182.

(54) Panchuk، RR; اسکوروخید، NR; کوزاک، YS؛ Lehka، LV;Moiseenok، AG; فعالیت محافظ بافت سلنومتیونین و D-پانترین Stoica، RS در درمان دوکسوروبیسین میشندر حاوی ملانوم B16 با پتانسیل مهار ROS آنها مرتبط نیست. کروات. پزشکی J. 2017, 58, 171.

(55) وانگ، H.-MD; چن، سی.-سی. هوین، پی. Chang, J.-S.Exploring پتانسیل استفاده از جلبک در لوازم آرایشی. بیورسور. Technol.2015, 184, 355-362