آپوسینین آسیب بیضه ناشی از گلوتامات مونو سدیم را با اختلال در سد خونی بیضه و پارامترهای استرس اکسیداتیو بهبود می بخشد.

4. بحث

در این مطالعه، اثر درمانی APO بر آسیب بیضه ناشی از MSG توسط پارامترهای بیوشیمیایی، میکروسکوپی و ایمونوهیستوشیمی مورد ارزیابی قرار گرفت. سطوح تستوسترون و LH کاهش و سطوح FSH افزایش یافت، پارامترهای استرس اکسیداتیو مانند سطح MDA افزایش یافت، در حالی که سطوح GSH و SOD در گروه MSG کاهش یافت. در آسیب بیضه ناشی از MSG، امتیاز هیستوپاتولوژیک و تعداد لوله های اسپرم ساز آسیب دیده و اسپرم افزایش یافت. شاخص پرولیفراتیو پایین و شاخص آپوپتوز در گروه MSG بیشتر بود. ضخامت اپیتلیوم ژرمینال لوله های اسپرم ساز کاهش یافت.

برای تستوسترون روی سیستانچ یشم کلیک کنید

آن تغییرات دژنراتیو توسط مدیریت APO معکوس شده است. گروه MSG کاهش در توزیع ZO-1 و مسدود شدن به عنوان پروتئین های اتصال محکم سد خونی بیضه را به تصویر کشید. MSG بر نشانگرهای استرس اکسیداتیو تأثیر گذاشت. در این گروه، افزایش توزیع پروتئین NOX{2}} که در سنتز ROS نقش داشت، مشاهده شد. بررسی های فراساختاری گروه MSG نشان دهنده آسیب برجسته در سیتوپلاسم سلول های اپیتلیال ژرمینال لوله اسپرم ساز لوله های اسپرم ساز با اتصالات محکم جدا شد. تجزیه و تحلیل های بیوشیمیایی، بافت شناسی، ایمونوهیستوشیمی و فراساختاری نشان داد که این پارامترها با درمان APO در گروه MSG به علاوه APO بهبود یافتند.

مطالعات تجربی نشان داده اند که مصرف خوراکی MSG می تواند برای تولید مثل سمی باشد. با این حال، به دلیل دوزهای بالای مورد استفاده در مطالعات، اثرات سمی بر روی سیستم تولید مثل ناشی از مصرف MSG بعید است که به مصرف انسانی ترجمه شود [33،34] تصور می شود که دوز روزانه MSG مصرف شده توسط انسان بین 1200 و 1200 باشد. 3000 میلی گرم بر کیلوگرم [35]. در این مطالعه، دوز 120 میلی‌گرم بر کیلوگرم وزن بدن MSG بر اساس برون‌یابی آلومتریک میانگین دریافت روزانه این ماده در انسان برای طراحی آزمایشی استفاده شد [5].

محور هیپوتالاموس-هیپوفیز-گناد (HPG) نقش کلیدی در فرآیندهای مربوط به رشد و بلوغ دستگاه تناسلی مردانه دارد. FSH عاملی در حفظ سنتز تستوسترون داخل گناد و اسپرماتوژنز است. LH با تحریک سلول های لیدیگ در رشد دستگاه تناسلی مردانه و فرآیند تعیین جنسیت نقش دارد [36]. این تحریک باعث می شود که سلول های لیدیگ سطوح لازم تستوسترون را ترشح کنند. سطح تستوسترون مناسب توسط فعالیت GnRH از طریق مکانیسم بازخورد منفی کنترل می شود [36].

با این مکانیسم، محور HPG به صورت کنترل شده عمل می کند [37،38]. در برخی از مطالعات مبتنی بر جمعیت، نشان داده شده است که هورمون‌های جنسی بر مورفولوژی، غلظت و تحرک اسپرم تأثیر می‌گذارند. در مطالعه ای بر روی زوج های نابارور، رابطه معکوس بین LH و تحرک و مورفولوژی اسپرم پیدا شد [39]. در مطالعات بالینی، سطح FSH با غلظت اسپرم ارتباط منفی داشت [40]. در سایر مطالعات تجربی، به دنبال تجویز MSG، کاهش تحرک اسپرم، غلظت و سطح هورمون LH آشکار شد. مطالعات همچنین نشان داده اند که MSG باعث کاهش سطح هورمون تستوسترون و غلظت اسپرم می شود [34،41].

در مطالعه حاضر، سطوح FSH، LH و تستوسترون در گروه APO مشابه گروه کنترل بود. کاهش معنی دار آماری در هورمون تستوسترون در گروه MSG مشاهده شد. افزایش قابل توجهی در سطح هورمون FSH در گروه MSG مشاهده شد. در گروه MSG به علاوه APO، سطح FSH کمتر از گروه MSG بود. اگرچه کاهش هورمون LH در گروه MSG مشاهده شد، اما تفاوت آماری در هورمون LH بین گروه های تجربی مشاهده نشد. MSG می تواند به سلول های لیدیگ برای ترشح تستوسترون آسیب برساند. کاهش سطح تستوسترون و LH نیز با تعداد اسپرم مرتبط است. بنابراین، سطوح پایین تستوسترون و LH می تواند با کاهش تعداد اسپرم و مورفولوژی غیر طبیعی اسپرم مرتبط باشد [42].

در مقابل، افزایش سطح FSH نشان می دهد که اختلالی در اسپرماتوژنز وجود دارد که باعث تغییر سیگنالینگ FSH می شود. نشان داده شده است که MSG ممکن است باعث اختلال در مسیرهای هورمونی در هیپوتالاموس شود [4]. در نتیجه مطالعه ما، مشاهده شد که تجویز MSG با تأثیر بر سطوح FSH، LH و تستوسترون، و همچنین مورفولوژی بیضه و اسپرم، غلظت و تحرک اسپرم، با محور HPG تداخل دارد. تجویز آپوسینین باعث کاهش سطح اختلال تستوسترون، FSH و LH به سطوح نزدیک به نرمال شد و این بهبود در سطوح هورمونی نیز بر پارامترهای مورفولوژیکی تأثیر گذاشت. SOD یک آنزیم مهم است که از سلول ها در برابر آسیب های ناشی از یون های سوپراکسید داخلی و خارجی محافظت می کند [43].

MDA آلدهیدی است که توسط رادیکال‌های آزاد در طی پراکسیداسیون لیپیدی تشکیل می‌شود و نشان‌دهنده آسیب غشای سلولی و شدت اثر رادیکال‌های اکسیژن بر سلول‌های فعال است. کاهش SOD و افزایش MDA می تواند باعث استرس اکسیداتیو شود و منجر به آسیب سلولی و مرگ سلولی شود [24]. GSH در کاهش ROS مانند پراکسید هیدروژن در سلول نقش دارد [44]. NOX منبع ROS است و آپوسینین به عنوان یک مهار کننده NOX شناخته می شود [45].

در مطالعات آسیب بیضه ناشی از MSG، سطوح MDA در بافت بیضه افزایش و سطوح SOD با تجویز MSG کاهش یافت [4،46]. در مطالعه دیگری، مصرف MSG همچنین باعث کاهش سطح GSH در بافت بیضه شد [4]. در مطالعه ای که در آن از آپوسینین به عنوان یک عامل شفابخش استفاده شد، نشان داده شد که آپوسینین باعث کاهش سطح MDA می شود که به دلیل آسیب بافتی افزایش یافته و باعث افزایش سطوح GSH و SOD در گروه آسیب بیضه می شود [27]. در یک مطالعه تجربی دیگر در مورد مدل انحطاط بیضه ناشی از هیپوکسی، فعالیت NOX{6}} و سطوح MDA افزایش و سطوح GSH به دلیل اثر هیپوکسی کاهش یافت. با این حال، نشان داده شد که آسیب بافت بیضه با استفاده از APO کاهش می یابد [47].

مطالعه حاضر ما به افزایش سطح MDA با کاهش سطوح GSH و SOD در گروه MSG نتیجه گرفت. می‌توانیم پیشنهاد کنیم که APO این پارامترها را در گروه MSG + APO از طریق مهار NOX-2 بهبود بخشد. برخی از مطالعات پیش بالینی اثرات سمی MSG را بر بسیاری از سیستم های اندام مانند کبد، کلیه ها و سیستم تولید مثل نشان داده اند [3]. یک مطالعه تجربی بیان می کند که MSG به دلیل اثرات مضر آن بر تخمدان ها و تخمک ها می تواند باعث ناباروری شود [48]. اثر سمی MSG بر روی بیضه ها با عدم تعادل هورمون های جنسی مورد توجه قرار گرفته است [34]. در یک مطالعه مشابه، سطح نشانگرهای استرس اکسیداتیو در بافت‌های بیضه موش‌هایی که MSG دریافت کردند، افزایش یافت و مورفولوژی بیضه و مورفولوژی اسپرم نیز تحت تأثیر منفی MSG قرار گرفتند [41].

مشاهده شده است که MSG منجر به دژنراسیون در مورفولوژی بیضه با تأثیر منفی بر تستوسترون می شود [4،49]. در مدل های آسیب بیضه، کاهش ضخامت اپیتلیوم ژرمینال لوله اسپرم ساز نشان داده شد [50،51]. در یک مدل آسیب بیضه ناشی از MSG، ضخامت اپیتلیوم لوله منی ساز کاهش یافت [52]. در مطالعه ما، ضخامت اپیتلیوم ژرمینال لوله منی ساز گروه MSG نسبت به سایر گروه های تجربی کاهش یافت. افزایش ضخامت اپیتلیال ژرمینال گروه MSG به علاوه APO در مقایسه با گروه MSG وجود داشت. گفته می شود که MSG به عنوان یک پیش غذا منجر به چاقی می شود [53]. در مورد اینکه آیا مصرف MSG می تواند یک عامل خطر در افزایش سریع چاقی همه گیر باشد، علامت سوال وجود دارد.

در یک مطالعه همگروهی باز در میان بزرگسالان چینی، نشان داده شد که افرادی که از MSG استفاده می کردند در مقایسه با کسانی که از MSG استفاده نمی کردند، شاخص توده بدنی بالاتری داشتند [54]. در سایر مطالعات تجربی، مشاهده شده است که وزن موش‌هایی که MSG داده شده افزایش یافته و آنها را مستعد چاقی کرده است [55،56]. با این حال، در مطالعه ما، تفاوت آماری معنی‌داری در وزن بدن بین گروه‌های آزمایشی که هر هفته در طول آزمایش وزن می‌کردند، وجود نداشت. در یک مطالعه مرتبط که در آن MSG روی موش ها تجویز شده است، کاهش وزن بیضه در گروه MSG در مقایسه با گروه کنترل مشاهده شد [4،52]. با این حال، نسبت وزن بیضه به وزن بدن در مطالعه فعلی ما، کاهش در گروه MSG را در مقایسه با سایر گروه‌های تجربی نشان داد که از نظر آماری ناچیز بود. در مطالعاتی که اثرات MSG را بر غلظت اسپرم بررسی کردند، مشخص شد که MSG باعث کاهش قابلیت حیات اسپرم می شود [4،49،52].

در مدل آسیب بیضه دیگری، اثر درمانی آپوسینین بر پارامترهای اسپرم مورد بررسی قرار گرفت و افزایش غلظت اسپرم در گروه درمان کننده آپوسینین نسبت به گروه آسیب مشاهده شد [27]. در مطالعه ما، هنگام مقایسه تعداد اسپرم بین گروه های تجربی، مشخص شد که تعداد اسپرم در گروه MSG کمترین است، در حالی که تعداد اسپرم در گروه MSG به علاوه APO از نظر آماری بیشتر از گروه MSG بود. بیان شده است که استفاده از آپوسینین در مطالعات حیوانی بی خطر است. علاوه بر این، APO دارای اثرات آنتی اکسیدانی و ضد التهابی قوی در بسیاری از مدل های تجربی است [57]. مدل های تجربی آسیب بیضه، اثر آپوسینین را بر کاهش استرس اکسیداتیو گزارش کردند [58،59].

در مطالعات تجربی مبتنی بر شیمی درمانی، اثر درمانی آپوسینین نیز بر روی بافت بیضه برجسته شد. در این مطالعات مشاهده شد که آپوسینین منجر به کاهش تعداد سلول های آپوپتوز و افزایش سطح تستوسترون می شود [27،60]. استرس اکسیداتیو به عنوان یکی از عوامل ناباروری مردان منجر به اختلال عملکرد اسپرم می شود. آسیب اسپرم ناشی از استرس اکسیداتیو 30 تا 80 درصد از مردان نابارور را تحت تأثیر قرار می دهد [61]. آنزیم های خانواده NOX مسئول سنتز ROS سلولی هستند و آپوسینین یک مهارکننده NOX است [45]. در یک مدل تجربی آسیب بیضه که در آن از آپوسینین به عنوان یک عامل التیام‌دهنده استفاده شد، بالاترین واکنش‌پذیری NOX-2 در گروه آسیب بیضه مشاهده شد. درمان APO در کاهش تعداد سلول‌های NOX{9}} ایمنی مثبت نتیجه گرفت [27].

داده‌های ادبیات تعداد محدودی از مطالعات تجربی آسیب بیضه را نشان داد که مقدار و توزیع NOX را ارزیابی می‌کنند-2. در مطالعه ما، رنگ‌پذیری NOX{1}} در گروه MSG بالاترین بود، با کاهش ایمنی در گروه MSG به علاوه APO در مقایسه با گروه MSG. تفاوت معنی داری بین گروه APO و گروه کنترل وجود نداشت و کمترین رنگپذیری NOX را نشان داد. آپوپتوز مرگ برنامه ریزی شده سلولی است که برای هموستاز بافت ضروری است [62]. تنظیم آپوپتوز یک عامل حیاتی در توسعه، تمایز و عملکرد سلول‌های زایا است [61]. قرار گرفتن در معرض عواملی که منجر به استرس اکسیداتیو می شود، با تأثیر منفی بر ساختار کروماتین در اسپرم، بر اسپرماتوژنز تأثیر منفی می گذارد [63].

مشخص شده است که مردان نابارور در مقایسه با مردان بارور دارای استرس اکسیداتیو و سلول های آپوپتوز بالاتری در مایع منی خود هستند. در مدل‌های تجربی آسیب بیضه، افزایش تعداد سلول‌های آپوپتوز در بافت آسیب‌دیده بیضه با تجویز APO به عنوان یک ماده درمانی معکوس شد [23،51]. در یک مطالعه تجربی آسیب بیضه، آپوسینین اثر شفابخشی بر آسیب DNA ناشی از استرس اکسیداتیو ناشی از NOX دارد [64]. به طور مشابه، در مطالعه ما، شاخص تکثیر در گروه MSG با افزایش شاخص آپوپتوز کاهش یافت.

در گروه MSG به علاوه APO، کاهش در شاخص آپوپتوز و افزایش شاخص پرولیفراتیو مورد ارزیابی قرار گرفت. سد خونی بیضه از سلول‌های زایای در حال رشد در برابر محیط خارجی محافظت می‌کند و برای تقسیم و توسعه سلول‌های زایا پشتیبانی می‌کند، که برای باروری بسیار مهم است [65]. سلول‌های سرتولی که سلول‌های اپیتلیال تخصصی هستند که در لوله‌های منی‌ساز یافت می‌شوند، اساس سد خونی بیضه را با اتصالات محکم تشکیل می‌دهند. Occludin، ZO-1، ZO-2 و ZO-3 مولکول‌هایی هستند که در اتصالات محکم سد خونی بیضه یافت می‌شوند. پروتئین های ZO در اتصال پروتئین های اکلودین به اکتین موجود در اسکلت سلولی نقش دارند [66،67]. مشاهده شد که اسپرماتوژنز تحت تأثیر منفی قرار گرفت و لوله‌های اسپرم ساز آتروفیک در مدل موش ناک اوت اکلودین تشکیل شد.

مطالعه ما بالاترین رنگ‌پذیری ZO-1 و اکلودین را در گروه کنترل و گروه APO نشان داد، در حالی که گروه MSG به طور قابل‌توجهی رنگ‌پذیری کمتری داشت. رنگ‌پذیری ZO-1 و اکلودین در گروه MSG به علاوه APO بیشتر از گروه MSG بود. بررسی‌های میکروسکوپی الکترونی عبوری از مطالعات تجربی، سلول‌های اپیتلیال ژرمینال بیضه و قطرات چربی [41،54] را با اتصالات سفت خراب شده در سد خونی بیضه نشان می‌دهند [68]. در مطالعه ما، بررسی های میکروسکوپی الکترونی عبوری، فراساختار طبیعی لوله منی ساز بیضه را در گروه کنترل و APO نشان داد. واکوئل شدن، قطرات چربی و دژنراسیون در اتصالات محکم سد خونی بیضه در گروه MSG مشهود بود. در گروه MSG به علاوه APO، آپوسینین دارای اثر شفابخش در سطح آسیب فراساختاری بود.

5. نتیجه گیریاستفاده ها

مطالعه ما با نقش تنظیم کننده APO، برای تشکیل مشتقات اکسیژن فعال و محور HPG در آسیب بیضه موش ناشی از MSG به پایان رسید. APO تعادل بین شاخص های پرولیفراتیو و آپوپتوز را حفظ کرد، یکپارچگی سد خونی بیضه را حفظ کرد و به بهبود آسیب بافت بیضه ناشی از آسیب اکسیداتیو کمک کرد. همچنین تصور می شود که تجویز آپوسینین ممکن است با معکوس کردن اثرات مضر MSG بر تحرک و تعداد اسپرم، اثر شفابخشی بر ناباروری داشته باشد.

سیستانچ چگونه تستوسترون را افزایش می دهد؟

سیستانچ گیاهی است که به طور سنتی در طب چینی برای تقویت انرژی، میل جنسی و نشاط کلی استفاده می شود. اعتقاد بر این است که سیستانچ ممکن است با مهار فعالیت آنزیمی به نام آروماتاز، که تستوسترون را به استروژن تبدیل می کند، سطح تستوسترون را افزایش دهد. سیستانچ همچنین تولید هورمون لوتئینیزه کننده (LH) را در بدن افزایش می دهد. LH نقش مهمی در تنظیم تولید تستوسترون در بیضه ها دارد. با افزایش سطح LH، سیستانچ ممکن است به طور غیر مستقیم تولید تستوسترون را افزایش دهد. علاوه بر این، سیستانچ همچنین حاوی چندین ماده شیمیایی گیاهی مانند اکیناکوزید و اکتئوزید است که دارای خواص آنتی اکسیدانی هستند. این ترکیبات ممکن است به محافظت از بیضه ها و سایر اندام های تولید مثل در برابر آسیب اکسیداتیو کمک کند، در نتیجه عملکرد آنها را بهبود بخشیده و تولید تستوسترون را افزایش می دهد. به طور کلی، مکانیسم‌های دقیقی که سیستانچ با آن سطوح تستوسترون را افزایش می‌دهد، به طور کامل شناخته نشده است، اما احتمالاً اثر متقابل مهار آروماتاز، افزایش تولید LH و ارائه حمایت آنتی‌اکسیدانی برای سیستم تولید مثل است.

Merve Acikel-Elmas 1,*, Salva Asma Algilani 1, Begum Sahin 1, Ozlem Bingol Ozakpinar 2, Mert Gecim 2, Kutay Koroglu 3 و Serap Arbak 1

1 گروه بافت شناسی و جنین شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه Acibadem Mehmet Ali Aydinlar، Icerenkoy Mah.، Kayisdagi Cad. ترکیه 34752 استانبول آتاشهیر پلاک 32

2 گروه بیوشیمی، دانشکده داروسازی، دانشگاه مرمره، Basibuyuk Yolu، 4/A، Basibuyuk، استانبول 34854، ترکیه

3 گروه بافت شناسی و جنین شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه مرمره، Basibuyuk Yolu شماره 9 D:2، Maltepe، استانبول 34854، ترکیه