پتانسیل رنگزدایی عصارههای گلسنگ توسط تستهای in vitro و in vivo ارزیابی شده قسمت 2
Apr 11, 2023
طبق مطالعات مربوطه،سیستانچگیاهی رایج است که به عنوان "علف معجزه آسا طولانی کننده عمر" شناخته می شود. جزء اصلی آن استسیستانوزید، که دارای اثرات مختلفی از جملهآنتی اکسیدان, ضد التهابو ارتقاء عملکرد سیستم ایمنی بدن مکانیسم بین سیستانچ و سفید شدن پوست در اثر آنتی اکسیدانی سیستانچ نهفته استگلیکوزیدها. ملانین در پوست انسان از اکسیداسیون تیروزین که توسط آن کاتالیز می شود تولید می شودتیروزینازو واکنش اکسیداسیون نیاز به مشارکت اکسیژن دارد، بنابراین رادیکال های آزاد اکسیژن در بدن به عامل مهمی در تولید ملانین تبدیل می شوند. سیستانچ حاوی سیستانوزید است که یک آنتی اکسیدان است و می تواند تولید رادیکال های آزاد را در بدن کاهش دهد.مهار تولید ملانین.

علاوه بر این، سیستانچ همچنین عملکرد تولید کلاژن را افزایش می دهد که می تواند خاصیت ارتجاعی و درخشندگی پوست را افزایش دهد و به ترمیم سلول های آسیب دیده پوست کمک کند. سیستانچفنیل اتانول گلیکوزیدهااثر کاهش قابل توجهی بر روی فعالیت تیروزیناز دارند و اثر آن بر تیروزیناز به عنوان یک مهار رقابتی و برگشت پذیر نشان داده شده است که می تواند پایه ای علمی برای توسعه و استفاده از مواد سفید کننده در سیستانچ فراهم کند. بنابراین، سیستانچ نقش کلیدی درسفید شدن پوست. می تواند تولید ملانین را برای کاهش تغییر رنگ و تیرگی مهار کند. و تولید کلاژن را برای بهبود خاصیت ارتجاعی و درخشندگی پوست تقویت می کند. با توجه به شناخت گسترده این اثرات سیستانچ، بسیاری از پوست هاسفید کردنمحصولات شروع به تزریق مواد گیاهی مانند سیستانچ برای پاسخگویی به تقاضای مصرف کنندگان کرده اند، بنابراین ارزش تجاری سیستانچ در محصولات سفید کننده پوست افزایش می یابد. به طور خلاصه، نقش سیستانچ در سفید شدن پوست بسیار مهم است. اثر آنتی اکسیدانی و اثر کلاژن سازی آن می تواند تغییر رنگ و تیرگی را کاهش دهد، خاصیت ارتجاعی و درخشندگی پوست را بهبود بخشد و در نتیجه به یک اثر سفید کننده دست یابد. همچنین، کاربرد وسیع سیستانچ در محصولات سفید کننده پوست نشان می دهد که نقش آن در ارزش تجاری را نمی توان دست کم گرفت.

روی What to eat for whitening کلیک کنید
برای اطلاعات بیشتر:
david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501
تشخیص مهار تیروزیناز توسط بیواتوگرافی TLC
نمایه TLC امکان نمایش مواد اصلی موجود در هر عصاره را فراهم می کند. شناسایی این مواد هدف این کار نیست، اما، به عنوان مثال، لکه اسید ولپینیک (زرد زیر نور مرئی) در عصاره متانولی L. vulpina مشهود است (Huneck & Yoshimura, 1996) (شکل 2). دادههای بیواتوگرافی نشان داد که چندین ترکیب اثرات مهاری بر فعالیت تیروزیناز دارند. مهمتر از همه، فعالیت بازدارندگی عصاره کلروفرم متانولی C. islandica در بین نوارهای مختلف توزیع شده است که طیف گسترده ای از قطبیت را پوشش می دهد (شکل 2A). برعکس، فعالیت مهاری تیروزیناز عصاره متانولی L. vulpina در یک نوار متمرکز شده است که نزدیک به نوار بزرگ زرد مربوط به ولپینیک اسید (شکل 2B) مهاجرت می کند.
اثرات رنگزدایی عصاره گلسنگ بر روی سلولهای MeWO
رده سلولی ملانوم انسانی MeWo به عنوان یک مدل آزمایشگاهی برای بررسی اثرات رنگزدایی گلسنگ مورد استفاده قرار گرفت. به عنوان اولین گام، سلولها پس از قرار گرفتن در معرض غلظتهای فزاینده متانول L. vulpina و عصارههای کلروفرم متانولی C. islandica به مدت 48 ساعت تحت سنجش زندهمانی قرار گرفتند. منحنیهای دوز-پاسخ زندهمانی سلولی اجازه میدهد تا مقادیر IC50 88 میکروگرم بر میلیلیتر (95 درصد فاصله اطمینان (CI) [68-113 میکروگرم در میلیلیتر]) برای L. vulpina و 264 میکروگرم بر میلیلیتر (95 درصد فاصله اطمینان (CI) [213-328 میکروگرم در میلیلیتر] باشد. ) برای C. islandica. مقادیر آستانه IC05 به ترتیب 19 میکروگرم بر میلی لیتر (95 درصد CI [9-40 میکروگرم بر میلی لیتر]) و 51 میکروگرم بر میلی لیتر (95 درصد CI [31-85 میکروگرم بر میلی لیتر]) بود.

پس از آن، سنجش ملانین بر روی سلولهای MeWo، پس از 72 ساعت قرار گرفتن در معرض غلظتهای مختلف عصاره گلسنگ، کاهش شدیدی را در مورد کنترلهای القا شده توسط هر دو عصاره نشان داد. در این آزمایشها، آربوتین (8 میلیمولار) بهعنوان کنترل مثبت مورد استفاده قرار گرفت و میزان ملانین سلولها را به حدود 50 درصد از گروه شاهد کاهش داد. عصاره متانولی L. vulpina باعث کاهش ملانین مشابه با آربوتین شد که قبلاً در غلظت کمتر از 10 میکروگرم بر میلی لیتر رخ داده بود (شکل 3). این غلظت کمتر از آستانه اثرات سیتوتوکسیک اندازهگیری شده برای این عصاره است که امکان رد احتمال اثرات مضر خاص روی سلولها را فراهم میکند. اثر مشابهی بر روی محتوای ملانین سلولها نیز برای عصاره کلروفرم متانولی C. islandica مشاهده شد، اما تنها در غلظت 50 میکروگرم بر میلیلیتر (شکل 3). با این حال، همچنین غلظت موثر این عصاره کمتر از آستانه اثرات سیتوتوکسیک بود.
ارزیابی بر اساس فنوتیپ اثرات رنگزدایی عصارههای گلسنگ با استفاده از گورخرماهی
مدلهای گورخرماهی برای اثبات بیشتر در داخل بدن اثرات مهار ملانوژنز توسط C. islandica و L. vulpina مورد استفاده قرار گرفتند. برای تعریف غلظت بهینه برای استفاده، اولین جنینها پس از قرار گرفتن در معرض غلظتهای فزاینده متانول L. vulpina و عصارههای کلروفرم متانولی C. islandica به مدت 48 ساعت در معرض سنجش سمیت قرار گرفتند.

پس از آن، مشاهده کردیم که هنگام درمان با دوزهای زیر سمی C. islandica و L. vulpina، لاروهای گورخرماهی کاهش رنگدانه داشتند (شکل 4 و 5). عصاره L. vulpina فعالیت بازدارندگی بالاتری نسبت به C. islandica نشان داد، همانطور که با داده های تجزیه و تحلیل تصویر نشان داد. منحنیهای رگرسیون لجستیک مقادیر IC50 44 میکروگرم در میلیلیتر (42-47 میکروگرم بر میلیلیتر) را برای عصاره کلروفرم متانولی C. islandica و 30 میکروگرم بر میلیلیتر (25-36 میکروگرم بر میلیلیتر) برای عصاره متانولی L را به دست دادند. vulpina (شکل 6). در نهایت، فعالیت رنگزدایی عصارههای C. islandica و L. vulpina نیز در جنینهای گورخرماهی با سنجش ملانین مورد بررسی قرار گرفت (اطلاعات تکمیلی).



بحث
مطالعه ما مجموعهای از اثرات رنگزدایی in vitro و in vivo را به دلیل گلسنگهای خاص و حلالهای استخراج برجسته کرد. استراتژی برای انتخاب استخراجهای جداگانه با انواع قطبیتهای حلال، به جای استخراج متوالی با حلالهایی با قطبیتهای فزاینده، توسط جنبه پیشگام این تحقیق دیکته شد. هدف از این مطالعه افشای گونههای گلسنگ بهطور گستردهای در دسترس بود که میتوان از آنها برای اثرات رنگزداییشان استفاده کرد، با دانش بسیار محدود در مورد حضور احتمالی اصول فعال و تعاملات آنها. بنابراین، ما یک روش شکنش عصاره را اتخاذ کردیم که میتواند شامل برخی از همپوشانیهای ترکیبی در بین فراکسیونها باشد، اما عملکرد رنگزدایی آنها را به حداکثر میرساند، احتمالاً به دلیل اثرات هم افزایی.
در مورد مهار تیروزیناز در آزمایشهای بدون سلول، نتایج ما دادههای هیگوچی و همکاران را تأیید میکند. (1993)، نرخ مهار تیروزیناز را 40.4 درصد برای L. vulpina و 13.8 درصد برای C. islandica نشان می دهد که به ترتیب مربوط به 86.2 درصد و 42.6 درصد است که احتمالاً به دلیل استفاده از گلسنگ های کشت شده و استخراج مختلف است. حلال. ما قوی ترین فعالیت را برای عصاره متانولی L. vulpina، به دنبال عصاره کلروفرم متانولی C. islandica نشان دادیم. بنابراین، از این عصاره ها برای کشف فعالیت ضد ملانوژنیک سلول های ملانوما و لارو گورخرماهی استفاده شد. دادههای بهدستآمده از این آزمایشها آزمایشهای بدون سلول را تأیید کردند و در همه موارد، عصاره متانولی L. vulpina قویترین اثر را القا کرد.
علاوه بر این، سنجش بیواتوگرافی نشان می دهد که مواد مختلف موجود در این گلسنگ ها مهار تیروزیناز را اعمال می کنند. اگرچه ما توصیف کاملی از عصاره ها انجام ندادیم، اما از ادبیات مواد گلسنگ اصلی مشخص کننده این گلسنگ ها را می دانیم: L. vulpina حاوی آترانورین و اسید ولپینیک است، در حالی که C. islandica حاوی اسید لیچسترینیک، پروتولیچسترینیک و فومارپروتوسترریک است (Culberson, 1969). . با این حال، اطلاعات مربوط به فعالیت های آنتی تیروزیناز مواد گلسنگ در ادبیات نسبتا ضعیف است، در حالی که تنها در موارد معدودی می توان مکانیسم های مهار را روشن کرد. اخیراً Brandão و همکاران. (2{3}}17) فومارپروتوسترریک اسید را از گلسنگ Cladonia verticillate جدا کرد و مهار غیررقابتی و ترکیبی بر فعالیت تیروزیناز نشان داد که با افزایش غلظت افزایش یافت، در 0.6 میلی مولار اسید فعالیت تیروزیناز را 39.8 درصد مهار کرد.

عنصری که مقایسه بین گونههای مختلف گلسنگ را به یک کار دشوار تبدیل میکند، تنوع بالای ترکیب شیمیایی است که همچنین در معرض تغییرات پارامترهای محیطی، زیستگاه و ویژگیهای ریزاقلیمی (مانند در دسترس بودن آب و نور) است (Matteucci et al. ، 2017). این تفاوتها ممکن است زمینهساز تفاوتهای قابلتوجهی در فعالیت بیولوژیکی مجتمعهای گیاهی گلسنگ باشد که در آن ترکیب از نظر کمی مشخص نشده است. بنابراین، کار بیشتر برای جداسازی و تعیین کمیت ترکیبات فعال از عصاره ها برای تعریف بهتر اجزای دارای فعالیت آنتی تیروزیناز ضروری است. تاکنون، چندین کار فعالیت آنتی تیروزیناز احتمالی ترکیبات گلسنگ را بررسی کرده اند (به عنوان مثال، Kwong و همکاران، 2020؛ هوندا و همکاران، 2016؛ Lopes، Coelho & Honda، 2018). به عنوان مثال، کیم و چو (2007) تعیین کردند که عصاره های متانولی Usnea longissima و Usnea esculent مستقل از اثر آنتی اکسیدانی خود بر تشکیل ملانین تأثیر می گذارند. در مورد ساختار فنلی آنها، ترکیبات مختلف احتمالاً مهارکننده های تیروزیناز قوی هستند، با IC50 بسیار پایین تر نسبت به کل عصاره.
در نتیجه، مطالعه ما شواهدی از اثرات رنگزدایی عصارههای گلسنگ خاص، از مهار تیروزیناز در آزمایشهای بدون سلول تا اثرات رنگزدایی در شرایط آزمایشگاهی روی سلولهای کشتشده و in vivo روی لاروهای گورخرماهی ارائه میدهد. این داده ها نشان می دهد که عصاره گلسنگ L. vulpina و C. islandica کاندیدهای بالقوه ای برای توسعه محصولات دارویی و آرایشی برای سفید کردن پوست هستند. علاوه بر این، دادهها همچنین نشان میدهند که L. vulpina میتواند منبع خوبی برای جداسازی ترکیبات با خواص رنگزدایی قوی باشد. اهداف آتی در این راستا، شناسایی شیمیایی عصاره گلسنگ و ارزیابی فعالیت امیدوارکننده ترین ترکیبات آنها خواهد بود.
اطلاعات و اعلامیه های اضافی
منابع مالی
این کار توسط دانشگاه جنوا (FRA2018) پشتیبانی شد. سرمایهگذاران هیچ نقشی در طراحی مطالعه، جمعآوری دادهها، تجزیه و تحلیل، تصمیمگیری برای انتشار، یا تهیه نسخه خطی نداشتند.
افشای گرانت
اطلاعات کمک مالی زیر توسط نویسندگان افشا شد: دانشگاه جنوا: FRA2018.
منافع رقابتی
پائولو جیوردانی ویرایشگر دانشگاهی PeerJ است.
مشارکت های نویسنده
اخلاق حیوانات
اطلاعات زیر در رابطه با تاییدیه های اخلاقی (به عنوان مثال، نهاد تایید کننده و هر شماره مرجع) ارائه شده است:
در دسترس بودن داده ها
اطلاعات زیر در رابطه با در دسترس بودن داده ها ارائه شد:
اندازهگیریهای خام مهار تیروزیناز در یک فایل تکمیلی موجود است.
اطلاعات تکمیلی
اطلاعات تکمیلی این مقاله را میتوانید به صورت آنلاین پیدا کنید.
منابع
1. Behera BC, Adawadkar B, Makhija U. 2004. ظرفیت برخی از گلسنگ های Graphidaceous برای حذف سوپراکسید و مهار فعالیت های تیروزیناز و گزانتین اکسیداز. علوم کنونی 87:83-87.
2. Boustie J، Tomasi S، Grube M. 2011. متابولیت های گلسنگ زیست فعال: زیستگاه های آلپی به عنوان یک منبع دست نخورده. Phytochemistry Reviews 10:287-307
3. Brandão LFG، Da Silva Santos NP، Pereira ECG، Da Silva NH، Matos M de FC، Bogo D، Honda NK. 2017. اثرات اسید فومارپروتوسترریک، یک دپسیدون از لیکن کلادونیا ورتیسلاریس، بر فعالیت تیروزیناز. Orbital - The Electronic Journal of Chemistry 9:256-260
4. Cheli Y، Ohanna M، Ballotti R، Bertolotto C. 2010. جستجوی پانزده ساله برای ژن های هدف فاکتور رونویسی مرتبط با میکروفتالمیا. تحقیقات سلول های رنگدانه و ملانوما 23:27-40.
5. Cornara L، Pastorino G، Borghesi B، Salis A، Clericuzio M، Marchetti C، Damonte G، Burlando B. 2018. عصاره اتانولی پاک کننده اقیانوسی Posidonia (L.) فعالیت های سلولی را با کاربردهای سلامت پوست تعدیل می کند. مواد مخدر دریایی 16:21.
6. کرافورد SD. 2015. گلسنگ های مورد استفاده در طب سنتی، در متابولیت های ثانویه گلسنگ: خواص زیست فعال و پتانسیل دارویی. در: برانیسلاو رانکویچ. بازل: انتشارات بین المللی اسپرینگر، 27–80.
7. کولبرسون سی اف. 1969. راهنمای شیمیایی و گیاه شناسی محصولات گلسنگ. چپل هیل: انتشارات دانشگاه کارولینای شمالی.
8. Culberson CF، کریستینسون HD. 1970. یک روش استاندارد برای شناسایی محصولات گلسنگ. مجله کروماتوگرافی A 46:85-93.
9. Devkota S, Chaudhary RP, Werth S, Scheidegger C. 2017. دانش بومی و استفاده از گلسنگ ها توسط جوامع فن دوست در هیمالیا نپال. مجله Ethnobiology and Ethnomedicine 13:15.
10. D'Mello SAN, Finlay GJ, Baguley BC, Askarian-Amiri ME. 2016. مسیرهای سیگنالینگ در ملانوژنز. مجله بین المللی علوم مولکولی 17(7):1144.
11. Einarsdóttir E، Groeneweg J، Björnsdóttir GG، Harethardottir G، Omarsdóttir S، Ingólfsdóttir K، Ogmundsdóttir HM. 2010. مکانیسم های سلولی اثرات ضد سرطانی ترکیب گلسنگ اسید اسنیک. Planta Medica 76:969-974.
12. Gül¸cin I، Oktay M، Küfrevioğlu OI، Aslan A. 2002. تعیین فعالیت آنتی اکسیدانی گلسنگ Cetraria islandica (L) Ach. مجله Ethnopharmacology 79:325-329.
13. Higuchi M، Miura Y، Boohene J، Kinoshita Y، Yamamoto Y، Yoshimura I، Yamada Y. 1993. مهار فعالیت تیروزین توسط بافت ها و بیت های گلسنگ کشت شده. پلانتا مدیکا 59:253-255.
14. Honda NK، Gon¸calves K، Brandão LFG، Coelho RG، Micheletti AC، Spielmann AA، Canêz LS. 1395. غربالگری عصاره گلسنگ با استفاده از مهار و سمیت تیروزیناز علیه آرتمیا سالینا. Orbital: The Electronic Journal of Chemistry 8:181-188-188.
15. Huneck S, Yoshimura I. 1996. شناسایی مواد گلسنگ. در: شناسایی مواد گلسنگ. برلین: اسپرینگر.
16. کیم ام اس، چو اچ بی. 1386. اثرات مهاری ملانوژنز عصاره های متانولی عصاره بند ناف و usnea longissima. مجله میکروبیولوژی 45:578-582.
17. کوندو تی، شنوایی وی جی. 2011. به روز رسانی در مورد تنظیم عملکرد ملانوسیت پستانداران و رنگدانه پوست. بررسی تخصصی پوست 6:97-108.
18. Kwong SP, Wang H, Shi L, Huang Z, Lu B, Cheng X, Chou G, Ji L, Wang C. 2020. شناسایی مشتقات تخریب شده نوری اسید اسنیک با مشخصات سمیت بهبود یافته و محافظت در برابر UVA/UVB در انسان عادی سلول های کبدی L02 و ملانوسیت های اپیدرمی. مجله فتوشیمی و فوتوبیولوژی ب: زیست شناسی 205:111814.
19. Leyden JJ، Shergill B، Micali G، Downie J، Wallo W. 2011. گزینه های طبیعی برای مدیریت هایپرپیگمانتاسیون. مجله آکادمی اروپایی درماتولوژی و ونورولوژی 25:1140-1145.
20. Li WJ، Lin YC، Wu PF، Wen ZH، Liu PL، Chen CY، Wang HM. 2013. ترکیبات زیست عملکردی از liriodendron tulipifera با آنتی اکسیدان ها و خواص ضد ملانوژنیک. مجله بین المللی علوم مولکولی 14:1698-1712.
21. Lin C-HV، Ding HY، Kuo SY، Chin LW، Wu JY، Chang TS. 2011. ارزیابی فعالیت in vitro و in vivo depigmenting کتون تمشک از Rheum officinale. مجله بین المللی علوم مولکولی 12:4819-4835.
22. Lo CY، Liu PL، Lin LC، Chen YT، Hseu YC، Wen ZH، Wang HM. 2013. آنتی ملانوما و آنتی تیروزیناز از ترکیبات آلپینیا گالانگال. مجله علمی جهان 2013: مقاله 186505.
23. Lopes TIB، Coelho RG، Honda NK. 2018. مهار فعالیت تیروزیناز قارچ توسط orsellinates. بولتن شیمیایی و دارویی 66:61-64.
24. Matteucci E، Occhipinti A، Piervittori R، Maffei ME، Favero-Longo SE. 2017. تنوع مورفولوژیکی، متابولیت ثانویه و ITS (rDNA) در تالی گلسنگ حاوی اسنیک اسید زانتوپارملیا در مقیاس محلی رخنمون سنگ در W-Alps بررسی شده است. Chemistry & Biodiversity 14:e1600483.
25. Muggia L, Schmitt I, Grube M. 2009. گلسنگ ها به عنوان صندوقچه های گنج از محصولات طبیعی. سیم خبر 85–97.
26. Mukherjee PK، Biswas R، Sharma A، Banerjee S، Biswas S، Katiyar CK. 2018. اعتبار سنجی گیاهان دارویی برای پتانسیل ضد تیروزیناز. مجله طب گیاهی 14:1-16.
27. Nash III TH. 1385. زیست شناسی گلسنگ. کمبریج: انتشارات دانشگاه کمبریج.
28. Parvez S, Kang M, Chung HS, Bae H. 2007. مهارکننده های تیروزیناز طبیعی: مکانیسم و کاربردها در صنایع بهداشتی پوست، آرایشی و بهداشتی و کشاورزی. تحقیقات گیاه درمانی 21:805-816.
29. Pastorino G, Marchetti C, Borghesi B, Cornara L, Ribulla S, Burlando B. 2017. فعالیتهای بیولوژیکی گیاهان حبوبات Melilotus officinalis و Lespedeza capitata برای مراقبت از پوست و کاربردهای دارویی. محصولات و محصولات صنعتی 96:158-164.
30. Phinney NH، Solhaug KA، Gauslaa Y. 2018. رستاخیز سریع کلرولیکنها در هوای مرطوب: توده تالوس خاص سینتیکهای آبرسانی و فعالسازی مجدد را هدایت میکند. محیط زیست و گیاه شناسی تجربی 148:184-191.
31. تیم اصلی R. 2{3}}13. R: زبان و محیطی برای محاسبات آماری. بسته R نسخه 3.0.1. وین: بنیاد R برای محاسبات آماری.
32. Ranković B, Kosanić M. 2015. گلسنگ ها به عنوان منبع بالقوه متابولیت های ثانویه فعال زیستی. در: Ranković B, ed. متابولیت های ثانویه گلسنگ چم: انتشارات بین المللی اسپرینگر، 1-26.
33. Solano F. 2014. ملانین ها: رنگدانه های پوست و بسیاری موارد دیگر - انواع، مدل های ساختاری، عملکردهای بیولوژیکی، و مسیرهای تشکیل. مجله جدید علوم 2014: 1-28.
34. Souza LF, Caputo L, Inchausti De Barros IB, Fratianni F, Nazzaro F, De Feo V. 2016. Pereskia aculeata Muller (Cactaceae) برگ: ترکیب شیمیایی و فعالیت های بیولوژیکی. مجله بین المللی علوم مولکولی 17(7):1478.
35. Takayama A, Hata Y, Itakura K, Murase M, Shoji M, Ito M, Sasaki H. 2010. عوامل روشن کننده پوست، مهارکننده های تشکیل ملانین و لوازم آرایشی روشن کننده پوست حاوی فرهنگ یا عصاره گلسنگ های خاص. کد ثبت اختراع: JP 2010150173 A 20100708.
36. Wang HM، Chou YT، Hong ZL، Chen HA، Chang YC، Yang WL، Chang HC، Mai CT، Chen CY. 2011. ترکیبات زیستی از ساقه Synsepalum dulcificum Daniell (Sapotaceae) از تکثیر ملانوم انسانی جلوگیری می کند، فعالیت تیروزیناز قارچ را کاهش می دهد و دارای خواص آنتی اکسیدانی است. مجله موسسه مهندسین شیمی تایوان 2:204-211.
37. Wangthong S، Tonsiripakdee I، Monhaphol T، Nonthabenjawan R، Wanichwecharun-gruang SP. 2007. Post TLC در حال توسعه تکنیکی برای تشخیص مهارکننده تیروزیناز. کروماتوگرافی بیومدیکال 21:94-100.
38. وایت اف جی، جیمز پی دبلیو. 1985. راهنمای جدید برای تکنیک های میکروشیمیایی برای شناسایی مواد گلسنگ. در: بولتن انجمن گلسنگ بریتانیا. n 57 (ضمیمه). لندن: انجمن گلسنگ بریتانیا.
برای اطلاعات بیشتر: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501
