تعیین محتوای کل ساپونین در Boschniakia Rossica و Herba Cistanches با استفاده از اسپکتروفتومتری Ⅰ

خلاصه:

هدف: این روش کمی از کل ساپونین در Boschniakia rossica وگیاه گیاهیو محتوایساپونین کل تعیین می شود. روش ها: سالیدروساید به عنوان ماده مرجع انتخاب شد و از واکنش رنگی با وانیلین و اسید پرکلریک استفاده شد. سپس محتوای ساپونین کل در بوشنیاکیا روسیکا و هربا سیستانچ در طول موج 523 نانومتر با اسپکتروفتومتری تعیین شد. Ｒنتایج منحنی سالیدروساید در محدوده 0 خطی بود. 05133 - 0. 2567mg·ml－ 1با همبستگی 0. 9992، و معادله رگرسیون خطی Y=1 بود. 611X + 0. 0573. برای بوشنیاکیا روزیکا، میانگین بهبود سالیدروسید 99 بود. 68٪ با ＲSD از 1. 68% (n=6)؛ و برای فواصل هربا، میانگین بازیابی سالیدروسید 101 بود. 18٪ با یک SD 0. 94٪ (n=6)). نتیجه گیری روش دقیق، ساده و قابل اعتماد است. بنابراین می توان از آن برای تعیین محتوای کل ساپونین در Boschniakia rossica و Herba cistanches استفاده کرد.

کلید واژه ها:بوشنیاکیا روسیکا;گیاه گیاهی; کل ساپونین ها; عزم; اسپکتروفتومتری; سالیدروساید

چه مدت طول می کشد تا سیستانچ کار کند؟

Cistanche deserticola Y. C. Ma و Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov گیاهان دارویی انگلی از خانواده Orobanchiaceae هستند. Cistanche deserticola یک گیاه انگلی است که روی ریشه درخت بیابانی Haloxylon ammodendron زندگی می کند. این عمدتا در سین کیانگ و لیگ آلکسا، مغولستان داخلی تولید می شود. به دلیل بازدهی کم و ارزش دارویی بالا به جینسنگ صحرایی معروف است. ملخ [1] در شمال شرقی کشور من تولید می شود [2]. بر اساس افسانه های عامیانه، اثر جاودانگی دارد، از این رو آن را شمال شرقی «علف عصر ابدی» نامیده اند. برای ناتوانی جنسی ناشی از کمبود کلیه، سردرد در ناحیه کمر و زانو، خشکی روده و یبوست استفاده می شود. می تواند بدن را تغذیه و تقویت کند، پیری را به تاخیر بیندازد و یک منبع دارویی معتبر در شمال شرق است [3]. این دو اثرات مشابهی دارند و هر دو دارای اثرات مقوی کلیه، تقویت یانگ، مرطوب کننده روده و ملین هستند [4]. با توجه به سوابق مربوط به Cistanche deserticola در "مجموعه مواد دارویی" لی شیژن از سلسله مینگ، "این ماده مقوی است اما خشن نیست، بنابراین به آن آرام می گویند. به ندرت می توان آن را از Congrong دریافت کرد، بنابراین با آن پر می شود. Cistanche deserticola." به این معنا که گیاه سیستانچ دسرتیکولا زمانی به عنوان یک ماده دارویی جایگزین برای سیستانچ دسرتیکولا استفاده می شد. تحقیقات مدرن نشان داده است که هم Cistanche deserticola و هم Estuary deserticola دارای اثرات دارویی مانند ضد پیری [5، 6]، ضد خستگی [7، 8]، بهبود عملکرد سیستم ایمنی [9، 10] و تقویت حافظه [{{ 12}}].

محتوای کل گلیکوزیدها در Grasshopper و Cistanche deserticola ارزش یک مطالعه عمیق را دارد. هر دو حاوی ساپونین ها، روغن های فرار، قندها، اسیدهای آمینه و سایر اجزا هستند. محققان مطالعات مقایسه‌ای را در مورد اجزای روغن‌های فرار، قندها، اسیدهای آمینه و سایر اجزای این دو گزارش کرده‌اند [4، 14، 15]، اما تعیین محتوای کل گلیکوزید این دو گزارش در ادبیات وجود ندارد. . اجزای اصلی Cistanche deserticola گلیکوزیدهای فنیل پروپانوئید (سری گلوکوزیدهای A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K) [16] و Cistanche deserticola گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی است (سری از Cistanche deserticola. )[17،18]، ساپونین های این دو مشابه هستند، و آنها یک جزء مشابه، سالیدروسید را به اشتراک می گذارند. ما معتقدیم که گلیکوزیدها مواد فعال مهم هر دو هستند، و استفاده از اسپکتروفتومتری را برای تعیین محتوای گلیکوزید کل بررسی می کنیم. ، برای ارائه یک مبنای نظری برای توسعه و استفاده بیشتر از منابع اکیناسه deserticola و Cistanche deserticola.

1 مواد و ابزار

1. 1 ماده و معرف: تاج خروس، جمع آوری شده از اطراف کوه Changbai، به عنوان گیاهی از خانواده Orobanaceae شناسایی شده است.

گیاه کامل خشک شده Orobanche coerulescens، نمونه را بشویید و آب آن را تخلیه کنید.

جدا کرده، در جعبه خشک کن با دمای ثابت با دمای 40 درجه، خشک تا وزن ثابت، خرد کرده، از الک 40 مش عبور داده و آماده کنید.

[19]؛ Cistanche deserticola، Hohhot Enhe Trading Co., Ltd.، شناسایی شده در فهرست

Cistanche deserticola Y. ج. گوشت خشک ما

ساقه، شسته شده، خشک شده در هوا، خشک شده تا وزن ثابت، خرد شده، از یک الک مشبک عبور داده شده، کنار گذاشته شود. قرمز

ماده مرجع Crassuside (ارائه شده توسط موسسه دارویی و بیولوژیکی چین، شماره دسته 110818

- 200404، برای تعیین محتوا)؛ تمام معرف های آزمایشی مورد استفاده از درجه تجزیه و تحلیل داخلی هستند.

1. 2 دستگاه اسپکتروفتومتر مرئی UV 752N (شانگهای جینگکه); جفت Tu{4}}

اسپکتروفتومتر اشعه ماوراء بنفش (Beijing Puxi General Co., Ltd.); تراز تحلیلی الکترونیکی

AL104 1/100،000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.); FW{4}}

سنگ شکن جهانی با سرعت بالا (شرکت ابزار گرمایش الکتریکی شاندونگ هوالو، آموزشی ویبولیتین).

2 روش

2. 1 تهیه محلول مرجع

از یک ترازوی تحلیلی برای وزن دقیق سالیدروساید 15. 4 0 میلی گرم استفاده کنید، در انتقال متانول به یک فلاسک حجمی 25- حل کنید و حجم را با علامت تنظیم کنید. آماده کنید تا حاوی 0.0٪ سالیدروسید در هر میلی لیتر باشد. محلول 616 میلی گرمی به عنوان محلول مرجع استفاده می شود و برای استفاده بعدی در یخچال بسته می شود.

2. 2 آماده سازی محلول آزمایش

از یک ترازوی تحلیلی برای وزن کردن دقیق پودرهای دارویی ملخ و سیستانش دسرتیکولا استفاده کنید. 2. 0گرم، آن را در یک فلاسک ته گرد قرار دهید، 40 میلی‌لیتر اتانول 90 درصد، گرما و عصاره‌گیری رفلاکس Grasshopper را یک بار اضافه کنید و Cistanche deserticola را دو بار حرارت دهید و رفلاکس کنید، هر زمان استخراج 1. 5 ساعت بعد از آن است. صافی مکش، فیلتر را ترکیب کنید، در یک حمام آب غلیظ کنید تا خشک شود، 25 میلی لیتر آب اضافه کنید تا حل شود، 3 بار با اتر نفتی، هر بار 25 میلی لیتر استخراج کنید، مایع نفتی اتر را در لایه بالایی دور بریزید و سپس 3 بار به استخراج ادامه دهید. با n-بوتانول اشباع شده از آب. هر بار 25 میلی لیتر، سه عصاره n-بوتانول را ترکیب کنید، مایع n-بوتانول را در یک حمام آب در هود بخار تبخیر کنید، آن را با متانول در یک فلاسک حجمی 10 میلی لیتر رقیق کنید، خوب مخلوط کنید، سپس 1 میلی لیتر از محلول را به دقت اندازه گیری کنید و آن را با رقیق کنید. متانول به حجم 25 میلی لیتر. بطری، خوب مخلوط کنید و از آن به عنوان محلول آزمایشی برای استفاده بعدی استفاده کنید.

2. 3. انتخاب طول موج اندازه گیری

1. 25 میلی لیتر از محلول مرجع و محلول آزمایش را در لوله های آزمایش مدرج با درپوش قرار داده و حلال متانول را در حمام آب با دمای ثابت 60 درجه تبخیر کرده و 0 را اضافه کنید. 2 میلی لیتر محلول 5% وانیلین-اسید استیک یخچالی و 0.8 میلی لیتر محلول اسید پرکلریک در حمام آب 60 درجه به مدت 15 دقیقه واکنش داده شد. لوله آزمایش را خارج کرده و بلافاصله با آب یخ به مدت 5 دقیقه خنک کنید. 5 میلی لیتر اسید استیک گلاسیال اضافه کنید و خوب تکان دهید [20]. محلول مرجع را با استفاده از متانول به همین ترتیب تهیه کنید. محلول پس از توسعه رنگ تحت اسکن طول موج قرار گرفت و حداکثر طول موج جذب 523 نانومتر پس از واکنش رنگی سالیدروسید بین 400 و 800 نانومتر به عنوان طول موج اندازه‌گیری کل گلیکوزیدهای اشریشیا کلی و سیستانش دسرتیکولا انتخاب شد. الگوهای اسکن ماده کنترل و ماده آزمایش در شکل 1 نشان داده شده است.

2. 4. بررسی رابطه خطی: از یک پیپت برای رسم دقیق محلول مرجع 0 استفاده کنید. 5،1. 0،

1. 5،2. 0،2. 5 میلی‌لیتر در لوله‌های آزمایشی به شماره 1 تا 5 قرار داده شد و واکنش رنگ طبق مراحل «2.3» انجام شد. یک آزمایش خالی با متانول در شرایط موازی انجام شد و جذب در طول موج 523 نانومتر اندازه‌گیری شد. جذب A (Y ) ordinate است، غلظت mg·ml{11}}

(X) ابسیسا است، رگرسیون خطی انجام می شود و معادله رگرسیون Y {{0}} است. 611X +0. 0573 (r=0. 9992)، نتیجه نشان می‌دهد که غلظت جرمی سالیدروسید در 0 است. رابطه خطی در محدوده 05133-0.2567.mg·ml-1 خوب است. نتایج در شکل 2 نشان داده شده است.

2. 5 تست پایداری

مقدار مناسبی از محلول آزمایشی Grasshopper and Cistanche deserticola را دقیقا اندازه گیری کنید، رنگ را طبق روش زیر "2.3" ایجاد کنید و مقدار جذب را به طور مساوی در 6 بار در 30 دقیقه اندازه گیری کنید. این نشان می دهد که در عرض 30 دقیقه پس از توسعه رنگ، ملخ و Cistanche deserticola پایداری محلول آزمایشی نسبتاً خوب است. نتایج در جدول 1 نشان داده شده است.

2. 6 تست دقیق

مقدار مناسبی از محلول مرجع را دقیقا اندازه گیری کنید، رنگ را مطابق روش زیر "2.3" بالا ایجاد کنید، و جذب را 6 بار به طور مداوم اندازه گیری کنید. نتایج در جدول 2 نشان داده شده است. نتایج نشان می دهد که دقت این ابزار تجربی خوب است.

شکل 1 الگوهای اسکن لایه نازک ماده مرجع سالیدروسید (A)، محلول تست ملخ (B) و محلول تست cistanche deserticola (C)

2. 7. آزمون تکرارپذیری.

6 قسمت پودر دسرتیکولای ملخ و سیستانچ را به طور دقیق وزن کنید، هر قسمت حاوی 2. 0 گرم است، پس از حرارت دادن و عصاره گیری رفلاکس با استفاده از فرآیند استخراج بهینه تعیین شده، مراحل زیر "2.3" را دنبال کنید و اندازه گیری کنید. جذب در طول موج 523 نانومتر نتایج اندازه گیری در جدول 3 و جدول 4 نشان داده شده است.

2. 8. آزمون نرخ بازیابی نمونه.

6 نمونه صحرای ملخ و سیستانش با درصد جرمی مشخص از کل گلیکوزیدها را با دقت وزن کنید. هر نمونه 12 میلی گرم است. 2 میلی لیتر محلول مرجع سالیدروساید را با دقت اضافه کنید. از "2.2" پیروی کنید، نمونه را از زیر مورد استخراج کنید، محتوای کل گلیکوزید را پس از توسعه رنگ مطابق با آیتم "2.3" تعیین کنید، و میزان بازیابی نمونه را محاسبه کنید. نتایج در جدول 5 و جدول 6 نشان داده شده است.