اکیناکوساید آسیب کبد دیابتی را بهبود می بخشد

تماس:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساپ: 008618081934791

لو يانگ، شيانگ ژانگ، مين ليائو، يارونگ هائو *

چکيده

اهداف:Echinacoside (ECH) یک ترکیب طبیعی استخراج شده از ساقه گیاه سیستانچه بیابانیکولا، است خواص بیولوژیکی قابل توجهی، از جمله خواص آنتی اکسیدانی، ضد التهابی، محافظت عصبی، ضد تومور، هپاتوپروتکتیو، و خواص ایمونومودلاتوری. در این مطالعه با هدف بررسی اثرات حفاظتی و مکانیسم های ECH بر آسیب کبد دیابتی در موش های DB/DB.

روش های اصلی:به طور کلی موش های 6 هفته ای DB/DB (20= n) به طور تصادفی به 2 گروه مدل ديابتی اختصاص داده شدند. گروه (گروه DB/DB، با استفاده از روش داخل معده از نرمال سالین، n = 10) و گروه تحت درمان با ECH (DB/DB + ECH group, n = 10). علاوه بر این، گروه کنترل طبیعی شامل موش های 6 هفته ای db/m (گروه db/m، طبیعی saline intragastric administration, n = 10). ECH به مدت ۱۰ هفته یک بار در روز تجویز می شد. وزن و روزه قند خون دو هفته ای اندازه گيری شد. رنگ آمیزی او و رنگ آمیزی روغن O برای ارزیابی بافت کبد مورد استفاده قرار گرفت تغییرات پاتولوژیک و تجمع چربی به ترتیب. برای تشخیص بیان اجزای محور سیگنالینگ AMPK/SIRT1 از رنگ آمیزی ایمونوفلوورسانس، بلات غربی و RT-PCR استفاده شد.

یافته های کلیدی:نتایج نشان داد که اداره اکیناکوساید به مدت 10 هفته می تواند به طور قابل توجهی بهبود یابد آسیب کبدی و مقاومت به انسولین در موش های DB/DB (05/0p< 0.01).="" also,="" echinacoside="" treatment="" helped="" to="" reduce="" blood="" lipids="" and="" blood="" glucose="" (p="">< 0.01).="" moreover,="" ech="" activated="" ampk/sirt1="" signaling,="" upregulated="" peroxisome="" proliferator-activated="" receptor="" gamma="" co-activator="" 1="" alpha="" (pgc-1α),="" proliferator-activated="" receptor-α="" (pparα),="" carnitine="" palmitoyltransferase-1a="" (cpt1a)="" in="" db/db="" mice="" (p=""><>

اهمیت:اثر ECH ممکن است با فعال شدن مسیر AMPK/SIRT1 کبد و آن برانگیخته شود عوامل پایین دست برای بهبود چربی، مقاومت به انسولین، و دیس چربی خون.

سیستانچه ردیتبهبودadiposity, مقاومت به انسولین, و dyslipidemia.

1. مقدمه

دیابت نوع 2 (T2DM) یک بیماری متابولیک مزمن و a تهدید جدی برای سلامت جسمی و روانی انسان. این می تواند آسیب عضو متعدد، از جمله آسیب کبدی ایجاد کند. کبد چرب غیر الکلی بیماری (NAFLD) شایع ترین آسیب کبد [1,2]. بیش تجمع چربی ها در هپاتوسیت ها فرایند متابولیک را مختل می کند و باعث التهاب, فیبروز کبد, و حتی سرطان کبد [3,4]. The بیماری بیماری زا هنوز مشخص نیست. اگرچه شیوع بالایی از عوارض کبدی قابل توجه بالینی در بیماران مبتلا به T2DM وجود دارد، آنها اغلب در محیط درمان نادیده گرفته شده است. در حال حاضر استفاده می شود عوامل درمان دیابت شامل متفورمین، سولفونیل اوره، تیازولیدیندیون (TZDs)، و مهارکننده های دیپتیدیل پپتیداز-۴ (DPP-4) هستند. با این حال، بیشتر این عوامل باعث اختلال در عملکرد کبد می شوند و نیستند توصیه می شود در بیماران مبتلا به نارسایی کبد, دلالت بر نیاز به بررسی عوامل با کارایی درمانی و یک رویداد نامطلوب پایین مشخصات. مطالعات نشان داده اند خواص آنتی اکسیدانی، ضد التهابی، ضد تومور، هپاتوپروتکتیو، و ایمونوموداولاتوری اکیناکوساید (ECH)، جزء اصلی سیستانچه بیابانیکولا [5]. همچنین مسیر پروتئین کیناز فعال آمپر (AMPK) بوده است شناخته شده به عنوان سوئیچ سوخت و ساز انرژی سلولی اصلی مرتبط با تنظیم چربی در کبد و هدف درمانی برای NAFLD. AMPK باعث افزایش خاموشی پستانداران پروتئین نظارتی-1(SIRT1) فعالیت با افزایش سطح سلولی NAD + و در نتیجه deacetylation و مدولاسیون فعالیت اهداف SIRT1 پایین دست است که شامل پراکسیزوم تکثیر کننده فعال گیرنده فعال γ coactivator 1α (PGC-1α) [6]. به دلیل بسیاری از توابع مثبت در هر دو چرب الکلی بیماری کبد (AFLD) و NAFLD، SIRT1 به طور گسترده ای در میان مورد مطالعه قرار گرفته است خانواده SIRT. پروتئین یک تنظیم کننده کلیدی چربی و گلوکز است سوخت و ساز بدن و می تواند حساسیت به انسولین کبد و بافت های دیگر را بهبود بخشد و کاهش استئاتوز کبدی [7]. PPAR-α متعلق به PPARs، زیر خانواده ای از گیرنده های هورمون هسته ای، PPAR-α کند متابولیسم چربی از طریق میتوکندری و پراکسیداز اسید چرب بتا اکسیداسیون، میانجی گری از طریق CPT1A. موش های Db/DB چاق خود به خود هستند موش های دیابتی نوع 2. با بزرگتر شدن این موش ها، ممکن است تدریجی وجود داشته باشد تجلی شرایط دیابتی مانند پرخوری، چاقی، آشکار هیپرگلیسمی، هیپرلیپیدمی، و مقاومت به انسولین [8]. بیماری زا مشابه آن است که در بیماران مبتلا به T2DM مشاهده می شود. این مطالعه اثر درمانی ECH فرض شده بر آسيب کبدی ناشی از T2DM و میانجی گری این اثر از طریق فعال سازی مسیر AMPK/SIRT1 و جلوه های پایین دستی آن. موش های DB/DB به عنوان T2DM مورد استفاده قرار گرفت مدل آسیب کبدی و ECH به صورت داخل کبدی تجویز شد.

2. مواد و روش ها

2.1. حیوانات تجربی

کبد موش های ديابتی DB/DB نوع 2 به عنوان مدل در نظر گرفته شد برای آسیب کبدی T2DM خود به خود، موش های db/m به عنوان کنترل مورد استفاده قرار گرفتند گروه مورد استفاده قرار گرفت و موش های ديابتی به عنوان گروه مدل و گروه ECHtreated (نر، 6 هفته ای، درجه SPF) با 10 موش در هر يک از موش ها مورد استفاده قرار گرفت. گروه. تمام موش ها از دانشگاه نانجینگ (نانجینگ) خریداری شدند موسسه زیست پزشکی، چین؛ گواهی تولید حیوانات شماره: SCKK (Su) 2015–0001). حیوانات (n = 5 در هر قفس) در خانه اتاق حیوانات آزمایشگاه مرکزی بیمارستان دانشگاه ووهان (SPF) تحت شرایط استاندارد دما (22 درجه ± 2 درجه C)، رطوبت نسبی (60٪), و نور / تاریک (12 h/12 ساعت) چرخه, با آگهی دسترسی libitum به آب آشامیدنی و تغذیه در طول تجربی مدت 10 هفته. آزمایش ها با توجه به دستورالعمل های تجربی اخلاق حیوانات توصیه شده توسط بیمارستان ووهان.

2.2. ابزار اصلی و reagents

OneTouch فوق العاده قند خون متر و نوار تست قند خون (LifeScan Inc., Johnson & Johnson); خرگوش ضد انسان مونوکلونی آنتی بادی SIRT-1 (#9475; CST Company of the United States); AMPK (Ab80039), p-AMPK (Ab23875), PGC-1α (Ab54481), PPAR-α (Ab8934), and GAPDH (Ab37168; all from Abcam Company); CPT1A (15184-1-AP; ووهان سانینگ شرکت بیوتکنولوژی، با مسئولیت محدود)؛ غلظت پروتئین BCA کیت تشخیص (شرکت بیوتکنولوژی Biyuntian، Ltd.); SDS صفحه ژل کیت آماده سازی (گوگل بیوتکنولوژی شرکت ، Ltd.); و از کیت رونویسی معکوس RT-PCR (تاکارا، ژاپن) برای آزمایش ها استفاده شد.

2.3. گروه بندی حیوانات و اداره

قبل از شروع آزمایش، موش های ۶ هفته ای قرنطینه شدند به مدت 1 هفته و تغذیه تطبیقی به مدت 1 هفته. موش های Db/DB به طور تصادفی بودند شماره و اختصاص داده شده به هر دو گروه مدل دیابتی (db / db group, n = 10) or echinacoside-treated group (db/db + ECH group, n = 10 و 10 موش db/m به گروه کنترل نرمال (DB/ m group, n = 10). در 8 هفته سن، کنترل طبیعی و دیابتی موش های گروه مدل از نظر داخل معده ای سالین نرمال را مدیریت کردند (05/0 میلی L/10 گرم) و موش های گروه تحت درمان با ECH به صورت داخل معده ای بودند تجویز 300 میلی گرم در کیلوگرم در د ECH. در این مدت موش ها بودند اجازه دسترسی libitum آگهی به غذا و آب به مدت 10 هفته.

2.4. وضعیت عمومی و قند خون روزه

شرایط بهداشتی، مصرف غذا و آب آشامیدنی، و براق بودن از کت در طول آزمایش مشاهده شد. آغاز از هفته اول آزمایش، وزن بدن موش ها اندازه گیری شد هر 2 هفته یک بار. نمونه خون برای تست قند خون روزه دار بود از ورین دم به دست آمده است. پس از درمان ECH 10 هفته ای، آزمون تحمل گلوکز شفاهی (OGTT) انجام شد. بعد از روزه یک شبه به موش ها داده شد گلوکز (2 گرم بر کیلوگرم وزن بدن)، و غلظت قند خون بود. قبل از (0 دقیقه) و 15، 30، 60، و 120 دقیقه پس از انجام گلوکز ارزیابی شد. مساحت زیر منحنی (AUC) با استفاده از تعیین شد GraphPad Prism 7.0.

2.5. مجموعه نمونه

پس از 10 هفته مداخله، غذا اما نه آب برای محروم شد 12 ساعت، حیوانات برای به دست آوردن نمونه های خون از بی اشتهایی شدند شبکه یکپارچهسازی با سیستمعامل مداری. سرم از خون جمع آوری شده به سرعت جدا شد و در − 80 و C برای تعیین شاخص بیوشیمیایی ذخیره شد. پس به دست آوردن نمونه خون، موش ها کشته و با نرمال پرفوس شدند شور. کبد از هم می شد و وزن می کرد. شاخص کبد (LI) بود محاسبه شده با استفاده از فرمول زیر: LI = [وزن کبد (g)/ بدن وزن (گرم)] × 100٪. بخشی از بافت کبد تازه برای حفظ شد تجزیه و تحلیل پاتولوژیک، و باقی مانده بافت کبد در قرار داده شد نیتروژن مایع به مدت 1 ساعت و سپس ذخیره شده در − 80 −C برای پیگیری پروتئین تشخیص و کمی بی درنگ واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR).

تجربه سیستانچهعصاره

2.6. معاینه هيستوپاتولوژيک کبد

بافت کبد تازه به سرعت از هم جدا شد، و یک بخش ثابت شد در ۴٪ پارافورمالدهید به مدت ۲۴ ساعت و به دنبال آن کم آبی و جاسازی در پارافین. بخش ها با xylene dewaxed شدند و از طریق اتانول گرادیان به آب دوباره آب داده می شود. هسته و سیتوپلاسم با هماتوکسیلین و ئوسین (HE) رنگ آمیزی شد و با مهر و موم شد آدامس خنثی پس از کم آبی بدن. بخش دیگری از بافت از بهینه استفاده کرد برش ترکیب درجه حرارت (OTC) برش تعبیه شده برای نفت قرمز - O رنگ آمیزی.

7-2. تشخیص شاخص های بیوشیمیایی بافت سرم و کبد

نمونه های سرم به بخش آزمایشگاه چینگ یانگ ارسال شد بیمارستان دانشگاه ووهان برای تجزیه و تحلیل خودکار بیوشیمیایی. The شاخص های چربی خون شامل تری گلیسرید (TG)، کلسترول کل (TC)، کلسترول لیپوپروتین با چگالی بالا (HDL–C)، لیپوپروتین با چگالی پایین کلسترول (LDL-C). شاخص های عملکرد کبد شامل گلوتامیک پروویچ بود transaminase (ALT) and glutamic oxaloacetic transaminase (AST). سطح انسولین روزه دار (FINS) با استفاده از کیت الیزا تعیین شد (Meimian Biological Inc. China). یک منحنی استاندارد ساخته شد بر اساس غلظت نمونه استاندارد و چگالی نوری (OD)؛ سپس غلظت نمونه از منحنی استاندارد محاسبه شد. در نهایت شاخص حساسیت به انسولین (ISI) و شاخص مقاومت به انسولین (HOMA-IR) به صورت زیر محاسبه شد: ISI = 1/(FPG × FINS)؛ هما-ای آر = FPG × FINS/22.5.

2.8. AMPK، p-AMPK، SIRT-1، PGC-1 α، PPAR-α، و عبارات CPT1A در بافت کبد با استفاده از بلات غربی تشخیص داده شد

بافت کبد یخ زده به بخش هایی بریده شد. برای پروتئین کل استخراج، 1 میلی ال RIPA lysate به یک بخش 50 گرم اضافه شد و ارسال شد به centrifugation در 13،000 rpm در 4 ، C برای 5 دقیقه ، و به دنبال آن مجموعه ای از ابرناته. غلظت پروتئین تعیین شد با استفاده از کیت تعیین غلظت پروتئین BCA. حدود 40 میکروگرم پروتئین از هر گروه نمونه برداری شد و به غشای پلی وینیلید (PVDF) منتقل شد. غشاها با برچسب آنتی بادی های ثانویه نشان داده شده در دمای اتاق به مدت 1 ساعت و توسعه یافته. مقادیر خاکستری هر باند پروتئینی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت و GAPDH به عنوان مرجع داخلی برای تجزیه و تحلیل نیمه کمی مورد استفاده قرار گرفت.

2.9. عبارات p-AMPK و SIRT1 در بافت کبد توسط تشخیص داده شد رنگ آمیزی ایمونوفلوورسانس

بافت های کبدی در پارافورمالدهید 4 درصد ثابت شدند که در آن تعبیه شده بود پارافین، و سپس به برش کبد به ضخامت 10 میکرومتر بخش. اضافه کردن 3٪ BSA به مدت 30 دقیقه. جوجه کشی اسلاید با آنتی بادی اولیه یک شبه در 4 پوشش بافت هدف با آنتی بادی ثانویه، انکوبات در دمای اتاق به مدت 50 دقیقه در شرایط تاریک است. سپس با محلول DAPI انکوبات کنید در دمای اتاق به مدت 10 دقیقه، در مکان تاریک نگه داشته شده است. اضافه کردن خود به خود فلورسانس quenching reagent به مدت 5 دقیقه انکوبات. میکروسکوپ تشخیص و جمع آوری تصاویر توسط میکروسکوپ فلورسنت.

2.10. SIRT-1, PGC-1 α, PPAR-α, و CPT1A mRNA عبارات در بافت کبدی با استفاده از RT-PCR شناسايی شد

حدود 100 میلی گرم از بافت کبد ذخیره شده در − 80 ،C از هر گروه مورد استفاده قرار گرفت. مجموع RNA با استفاده از کیت Trizol استخراج شد; ماورای بنفش برای تعيين کيفيت RNA از روش جذب UV استفاده شد و این RNA پس از آن معکوس به cDNA رونویسی شد. SYBR سبز qPCR اجرا شد در بیو راد CFX96 لمسی در زمان واقعی سیستم تشخیص PCR (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA). دنباله های آغازگر SIRT-1, PGC-1 α, PPAR-α, and CPT1A were designed by the Primer Premier5.0 نرم افزار و سنتز شده توسط ووهان سویل بیوتکنولوژی Co., Ltd., with the housekeeper gene GAPDH serving as the internal مرجع. شرایط تقویت به این قرار بود: predenaturation در 95 ،C ، denaturation در 95 ، C ، و بازنشستگی در 60 (30 s) ، با مجموع 40 چرخه. در پایان واکنش، ویژگی با استفاده از روش تجزيه منحنی انحلال، تجزيه و تحليل PCR تعيين شد. مقدار Ct خوانده شد و بيان نسبی ژن هدف mRNA بود. محاسبه شده توسط روش 2-ΔΔCt. توالی های آغازگر در نشان داده شده اند جدول 1.

2.11. روش های آماری

نرم افزار آماری SPSS22.0 برای پردازش داده ها مورد استفاده قرار گرفت و تجزیه و تحلیل آماری و گراف پد Prism7.0 برای نقاشی. معمولا داده های توزیع شده به عنوان میانگین انحراف ± ارائه می شوند (واریانس x ± s). مقايسه زوجی در گروه ها با استفاده از تک عاملی انجام شد. تجزیه و تحلیل واریانس. اهمیت تفاوت بین گروه ها بود شناسایی شده با هر دو کمترین تفاوت معنی دار (LSD) تست (همگنی واریانس) و یا آزمون t Dunnett (غیر همگن) برای مقایسه های متعدد. اگر داده ها با توزیع عادی، میانه و اختلاف کوارتیل و همچنین غیرپارمتریک مطابقت ندارند از آزمون کروسکل واليس استفاده شد. یک مقدار P از<0.05 was="" considered="" statistically="">

مزایای مرد cistancheبرایکلیه

3. نتایج

3.1. ECH بهبود وضعیت سلامت عمومی و LI از موش db / db

در طول آزمایش، موش های گروه db/m سالم بودند و براق بودن کت فعال و نمایش داده شده. موش های گروه db/db آب بیش از حد و مصرف خوراک، چاقی، بی حالی و دولا شدن را نشان دادند، و موهای خشن و تیره. در مقایسه با موش های گروه db/db، db/db + موش های گروه ECH شرایط بهبود یافته را در تمام مطالعات نشان دادند. همچنین شاخص وزن بدن و کبد آنها پایین تر از شاخص موش های گروه مدل ديابتی (P< 0.05)="" (table="">

جدول 1 RT فلورسانس کمی پریمرها PCR.

جدول شماره 2 وزن بدن، وزن مرطوب کبد و شاخص کبد در موش های هر گروه.

3.2. ECH کاهش قند خون روزه و مقاومت به انسولین و افزایش تحمل گلوکز و حساسیت به انسولین در موش db/db

با پیشرفت آزمایش، در مقایسه با گروه db/m، قند خون روزه دار در گروه db/db به طور معنی داری افزایش یافت (05/0P< 0.01)="" (fig.="" 1a).="" in="" contrast,="" blood="" glucose="" decreased,="" and="" glucose="" tolerance="" and="" insulin="" sensitivity="" improved="" in="" the="" db/db="" +="" ech="" group="" (p="">< 0.01)="" (fig.="" 1b,="">

3.3. ECH ameliorates اختلال ساختاری کبد و کاهش پاتولوژیک تغییراتی مانند تجمع چربی در موش های db/db

رنگ آمیزی او نشان داد که اندازه هپاتوسیت ها و ریولوژی در db/m گروه نرمال بودند، و ساختار لوبول های هپاتیک و سینوسوئیدها روشن بود. تخریب گسترده هپاتوسیت در db/db وجود داشت گروه, افزایش حجم هپاتوسیت, اندازه هسته ای مختلف, سلول کانونی نکروز، و نفوذ سلول های التهابی در منطقه پورتال. در db/db + گروه ECH، کاهش معنی دار قطره چربی و سلول های التهابی وجود داشت، آسیب سلول های نکروتیک کاهش یافت (تصویر 2A). تجزیه و تحلیل میکروسکوپی روغن قرمز O رنگ آمیزی بافت کبد نشان داد شسته و رفته آرایش سلول ها، بدون قطره چربی و یا تغییرات پاتولوژیک، در گروه db/m. در گروه db/db، سلول ها آرایش بی نظمی داشتند، و تعداد زیادی از ذرات چربی در اندازه های مختلف در وجود داشتند سيتوپلاسم . در مقایسه با گروه db/db، تعداد قطره های چربی در db / db + ECH گروه به طور قابل توجهی پایین تر بود ، نشان می دهد ممکن است اثر محافظتی ECH بر کبد (انجیر 2B, C).

انجیر ۱. ECH تحمل گلوکز و مقاومت به انسولین تشدید شده موش های db/db را بهبود بخشید.

3.4. ECH را بهبود می بخشد سوخت و ساز چربی و عملکرد کبد در موش db / db

در مقایسه با گروه db/m، سطح چربی خون TC، TG، و LDL به طور معنی داری افزایش یافت و HDL به طور معنی داری کاهش یافت در گروه db/db (P< 0.01).="" however,="" tc,="" tg,="" and="" ldl="" levels="" were="" decreased,="" and="" the="" hdl="" level="" was="" increased="" in="" the="" db/db="" +="" ech="" group="" compared="" with="" the="" db/db="" group="" (p="">< 0.05,="" p="">< 0.01)="" (fig.="" 3a).="" compared="" with="" the="" db/m="" group,="" alt="" and="" ast="" levels="" were="" significantly="" increased="" in="" the="" db/db="" group="" (p="">< 0.05,="" p="">< 0.01).="" the="" ast="" and="" alt="" levels="" were="" significantly="" lower="" in="" the="" db/db="" +="" ech="" group="" than="" in="" the="" db/="" db="" group="" (p="">< 0.05,="" p="">< 0.01)="" (fig.="" 3b,="">

انجیر ۲. ECH اختلال ساختاری بافت کبد و تجمع چربی در موش های دارای NAFLD را تشدید کرد.

3.5. اثر ECH بر فعال سازی مسیر AMPK/SIRT1 در موش های گروه های مختلف

با توجه به نتایج وسترن بلات، در مقایسه با گروه db/m، p-AMPK/AMPK، SIRT1، PGC-1α، PPAR-α، و سطح پروتئین CPT1A در بافت کبد به طور معنی داری در گروه db/db کمتر بود (05/0P< 0.01).="" however,="" the="" protein="" levels="" were="" significantly="" higher="" in="" db/db="" +="" ech="" group="" than="" in="" db/db="" group="" (p="">< 0.01)="" (fig.="" 4a,="" b).="" besides,="" immunofluorescence="" staining="" showed="" that="" the="" expression="" of="" p-ampk="" and="" sirt1="" was="" found="" obviously="" in="" the="" liver="" tissue="" of="" ech-treated="" mice="" than="" db/db="" group="" (fig.="">

6/3. اثر اکيناکوايد بر بيان MRNA مسير SIRT1 در کبد موش های گروه های مختلف

بر اساس نتايج RT-PCR، SIRT1، PGC-1α، PPAR-α CPT1A سطوح در گروه db/db در مقايسه با db/m به طور معنی داری کاهش يافت گروه. با این حال ، این سطوح به طور قابل توجهی در db / db + ECH افزایش یافته است گروه نسبت به گروه db/db (انجیر 5).

انجیر ۳. شاخص های مرتبط با سرم در موش های هر گروه.

4. بحث و گفتگو

دیابت یک نگرانی عمده پزشکی در جهان است، و تعداد انتظار می رود افراد مبتلا به دیابت به حدود 592 میلیون نفر افزایش یابد 2035 [9]. میزان شیوع دیابت، عمدتا T2DM، در چین، روند فزاینده قابل توجهی را نشان می دهد [10,11]. یک مجموعه وجود دارد رابطه بين T2DM و بيماری کبدی و NAFLD با مشخصه با رسوب بیش از حد چربی در کبد، شایع ترین آسیب کبد است ناشی از T2DM و شایع ترین بیماری مزمن کبد در جهان [12,13]. تحقیقات آزمایش ژنتیکی بالینی نشان می دهد که ژن مرتبط با T2DM با افزایش BMI، هیپرکلسترولمی، و کاهش HDL-C، که خطر بالاتر NAFLD را کنفرانس همراه است [14]. NAFLD ارتباط نزدیکی با مقاومت به انسولین و دیس چربی و بنابراین در بیماران مبتلا به T2DM و / یا چاقی بسیار شایع است. اگرچه عوامل سوخت و ساز متعددی به نظر می رسد مربوط به توسعه NAFLD، بیماری زا بودن آن تا حد زیادی نامشخص و پیچیده باقی مانده است [15]. سیستانچه بیابانیکولا یک گیاه انگلی چند ساله است که بر روی ریشه گیاهان شن و ماسه می روید. به گفته فارماکوپیای چینی، سیستانچه کویریکولا به عنوان یک طب سنتی برای درمان بیماری کلیوی و ناباروری استفاده می شود [16,17]. در سال های اخیر، مطالعات تایید کرده اند که Cistanche deserticola می تواند به طور قابل توجهی مانع افزایش روزه و پس از آن سطح قند خون در موش های دیابتی، بهبود مقاومت به انسولین و dyslipidemia، و کاهش وزن کمک [18]. به عنوان جزء اصلی Cistanche deserticola, ECH انتظار می رود برای کمک بیشتر به بهبود آسیب کبد مرتبط با DM. نتایج تجربی ما نشان داد که چاقی و دیابت می تواند باعث آسیب کبدی در موش ها شود که با افزایش قابل توجهی در سطح ALT و AST سرم و هیستوپاتولوژیک معمولی مشخص می شود تغییرات. ECH به طور معنی داری کاهش LI و قند خون، کاهش سطح TC، TG و LDL سطح HDL را افزایش داد و انسولین را بهبود بخشید حساسیت. بررسی هيستوپاتولوژيک کاهش هپاتوسيت را نشان داد دژنراتاسیون استاتوز و نفوذ سلول های التهابی در درمان ECH موش ها، تایید می کنند که عامل می تواند آسیب کبدی را در موش های چاق و دیابتی بهبود بخشد.

AMPK یک کیناز پروتئینی بسیار حفاظت شده است که به طور گسترده ای در ارگانیسم ها توزیع می شود و گیرنده سوخت و ساز انرژی نامیده می شود. در آن نقش دارد کاهش استرس اکسیداتیو، التهاب، تکثیر، و آپوپتوز [19]. فعال سازی آنزیم توسط فعال کننده های غیر مستقیم جذب علمی توجه به درمان دیابت, چاقی, سرطان, و دیگر متابولیک مرتبط اختلالات [20,21]. می تواند سوخت و ساز چربی را از طریق چندین رویکرد تنظیم کند، مانند مهار اسید چرب و سنتز تری گلیسرید، مهار سنتز کلسترول، و ترویج اکسیداسیون اسید چرب و تجزیه [22]. در کبد, AMPK تنظیم سوخت و ساز چربی توسط فسفريله کردن .

هنگامی که نسبت آمپر به ATP داخل سلولی افزایش می یابد، AMPK فعال می شود، افزایش p-AMPK/AMPK و تنظیم مجدد بیان SIRT1 با افزایش سطح سلولی NAD + [23,24]. SIRT1، وابسته به NAD deacetylase، به تازگی نشان داده شده است که مربوط به بیماری شناسی NAFLD [25]. آنزیم در فرایندهای مختلف فیزیولوژیک سلولی مانند هموستاز لیپید و گلوکز و انسولین نقش دارد حساسیت، و یک تنظیم کننده کلیدی سوخت و ساز بدن است [26]. بیماران چاق، به خصوص کسانی که با مقاومت به انسولین, دیابت, و NAFLD, سطوح پایین تر SIRT1 [27,28]. پرایس و همکارانش نقش را بررسی کرده اند SIRT1 در پیشگیری از استئاتوز کبدی و دریافت که بیان SIRT1 در بیماران مبتلا به NAFLD کاهش می یابد [29]. مطالعات دیگر نشان داده اند که حذفی خاص هپاتوسیت SIRT1 می تواند چرب را کاهش دهد اکسیداسیون اسید و القای استئاتوز و التهاب در کبد، در حالی که بیان بیش از حد SIRT1 می تواند سوخت و ساز چربی را از طریق بهبود مسیر PGC-1α [30]. SIRT1 فعالیت PGC-1α را تنظیم می کند، و هر دوی آنها برای حفظ هموستاسیس انرژی سلولی بسیار مهم هستند. بنابراین، SIRT1 و عوامل پایین دست PGC-1α ممکن است هدف کلیدی باشد از آسیب کبد. فعال کننده PGC پروتئینی است که می تواند به رونویسی متصل شود عوامل یا گیرنده های هسته ای برای افزایش فعالیت رونویسی [31]. اکثر عوامل رونویسی نیاز به coactivators، به خصوص PPAR-α، عمدتا در بافت های اکسید شده مانند کبد، میوکارد، و عضله اسکلتی. آن می تواند رونویسی ژن است که ترویج حمل و نقل اسید چرب فعال و اکسیداسیون، تولید کتون، و گلوکونئوژنز [32,33]. CPT1A یک آنزیم محدود کننده نرخ کلید در اکسیداسیون اسید چرب. بیان آن توسط مکانیسم های پیچیده رونویسی تنظیم می شود که شامل عوامل رونویسی و کوکتیواتورهای متعددی از جمله SIRT1، PGC-1α و PPARα [34]. در این مطالعه متوجه شدیم که تحت غلظت بالای قند خون در گروه db/db، تجمع چربی در هپاتوسیت ها افزایش با پایین تنظیم عوامل پایین دست AMPK / SIRT1 سیگنالینگ بیان مسیر؛ در گروه تحت درمان با ECH، عبارات pAMPK/AMPK، SIRT1 و PGC-1α به طور معنی داری افزایش، و عبارات عوامل پایین دستی PPAR α و CPT1A به طور معنی داری افزایش یافت که نشان می دهد AMPK/SIRT1 محور سیگنال و عوامل پایین دست آن نقش مفیدی در درمان آسیب کبد دیابتی(انجیر 6). با این حال، داده های ارائه شده در اینجا بر اساس آزمایش های in-vivo بودند؛ بنابراین ، اضافی در آزمایشگاهی مطالعات مورد نیاز برای تایید تاثیر ECH بر AMPK / SIRT1 مسیرهای سیگنالینگ و پروتئین های اثر دهنده.

به طور کلی، ECH می تواند قند خون و سوخت و ساز چربی توسط تنظیم تنظیم بیان AMPK/SIRT1 و عوامل پایین دستی آن، بنابراین بهبود آسیب کبد دیابتی.

ECH cistancheمی توانیدتنظیم قند خونوسوخت و ساز چربی.

برای کسب اطلاعات بیشتر، لطفا اینجا را کلیک کنید.