تأثیر عصاره آبی گیاه سیستانچ بر تحلیل استخوان در موش صحرایی تخمدان برداشته شده
Mar 04, 2022
تماس: آدری هوaudrey.hu@wecistanche.com
هایدونگ لیانگ 1،*، فانگ یو 2، ژی هانگ تونگ 1 و زایگو هوانگ 3
1 Hands and feet microsurgery, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: tongzhih37@sina.cn
2 School of Medicine, Dalian University, Dalian 116033, China; E-Mail: yufangk7@sina.cn
3 Orthopedics Department, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: huangzg41@sina.com
خلاصه:برای ارزیابی توانایی عصاره گیاه سیستانچس هربا طب سنتی چینی (CHE) برای جلوگیری از از دست دادن استخوان در موش صحرایی تخمدان برداشته شده (OVX)، عصاره گیاه سیستانچس (CHE) به صورت داخل معده به موش ها تجویز شد. موشهای ماده با پنتوباربیتال سدیم (40 میلیگرم در کیلوگرم در داخل صفاقی) بیهوش شدند و تخمدانهای آنها به صورت دوطرفه برداشته شد. موشهای گروه تحت عمل شم بیهوش، لاپاراتومی شدند و بدون برداشتن تخمدانها بخیه شدند. پس از 1 هفته بهبودی پس از جراحی، موشهای OVX بهطور تصادفی به سه گروه تقسیم شدند و بهمدت 3 ماه با H2O (گروه OVX) یا CHE (100 یا 200 میلیگرم در کیلوگرم در روز) بهصورت خوراکی تحت درمان قرار گرفتند. گروه تحت عمل شم (n=8) به صورت خوراکی با H2O تحت درمان قرار گرفتند. پس از 3 ماه، تراکم استخوان کل بدن (BMD)، محتوای معدنی استخوان (BMC)، شاخص بیومکانیکی استخوان، سطوح مواد معدنی خون، و فعالیت آنزیمهای آنتیاکسیدانی خون در موشهای صحرایی تحت درمان، تخمدانبرداری و عصاره گیاه Cistanches مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که تیمار عصاره گیاه سیستانچ به طور قابل توجهی وابسته به دوز تراکم استخوان (BMD)، محتوای معدنی استخوان (BMC)، حداکثر بار، جابجایی در حداکثر بار، تنش در حداکثر بار، بار در شکست خودکار، جابجایی در شکست خودکار را افزایش داد. و استرس در شکست خودکار و فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی خون، سطوح کلسیم، روی و مس خون را در مقایسه با گروه OVX کاهش داد. این آزمایش نشان می دهد که تجویز عصاره گیاه سیستانچس به موش های تخمدان برداشته شده، از دست دادن استخوان را معکوس کرده و از پوکی استخوان جلوگیری می کند.
کلید واژه ها:تخمدان برداری؛ موش صحرایی استخوان؛ آنتی اکسیدان؛ Cistanches Herba

1. مقدمه
پوکی استخوان یک بیماری پیری همراه با از دست دادن استخوان است که اغلب بدون علائم رخ می دهد تا زمانی که زوال ریزمعماری آنقدر مهم شود که شکستگی استخوان همیشه در نقطه ای رخ می دهد که کاهش توده استخوان کمتر از آنچه برای یکپارچگی استخوان لازم است رخ می دهد. پوکی استخوان در مراقبت های بهداشتی از اهمیت بالایی برخوردار است. اگر چه از نظر جرم کاهش می یابد، اما استخوان ها از نظر معدنی طبیعی هستند، اما از نظر بافت شناسی، کاهش ضخامت قشر و تعداد و اندازه ترابکول های استخوان اسفنجی درشت وجود دارد [1-3].
در سال های اخیر مطالعات زیادی در مورد این بیماری انجام شده است. دادههای انباشته نشان دادهاند که از دست دادن استروژن در یائسگی نقش مهمی در پاتوژنز بیماری دارد زیرا این هورمون تنظیمکننده منفی اصلی فعالیت استئوکلاستها است [4-6] و استئوکلاستها سلولهای اصلی مسئول بازسازی استخوان در پوکی استخوان هستند. [7].
پوکی استخوان پس از یائسگی شایع ترین بیماری متابولیک استخوان است که با از دست دادن سریع بافت استخوانی معدنی، اختلال در ساختار ترابکولار استخوان و تغییر در خواص کریستالی رسوبات معدنی مشخص می شود که منجر به شکست ساختاری (شکستگی) می شود. مکان های غنی از استخوان اسفنجی مانند مهره ها، لگن و ساعد دیستال [8-11]. کمبود استروژن مهمترین عامل تعیین کننده از دست دادن استخوان در زنان یائسه در نظر گرفته می شود. موش های صحرایی و سگ های برداشته شده تخمدان به طور گسترده در مدل های پوکی استخوان استفاده شده اند. در سال 1996، اثرات ایباندرونات بر روی سگ های تخمدان برداشته شده [12] گزارش شد.
Cistanches Herba (CH)، گیاه هولوپارازیت Cistanche deserticola YC Ma، به عنوان یک عامل تقویت کننده در طب سنتی شرقی طبقه بندی می شود و معمولا برای درمان فراموشی، از دست دادن شنوایی، ناباروری و یبوست مزمن استفاده می شود. CH دارای فعالیت های دارویی مختلفی از جمله اثرات ضد درد، ضد التهابی و تقویت کننده سیستم ایمنی است [13،14]. یک مطالعه قبلی گزارش داده است که Cistanches Herba می تواند سلول های بنیادی مزانشیمی استخوان (BMSCs) را برای تمایز به استئوبلاست ها هدایت کند، که نویدبخش چشم انداز مطلوبی برای درمان پوکی استخوان و گسستگی شکستگی استخوان است [15]. چن و همکاران [16] گزارش داد که پلی ساکاریدهای Cistanches Herba ممکن است انتقال چرخه سلولی مغز استخوان و بهبود عملکرد خون ساز را در موش های کم خون مبتلا به مغز استخوان تسریع کنند، هماتوژنز را در سویه rubrum و ماکرونوکلئوس تسریع کنند.
در این مطالعه، تراکم معدنی استخوان (BMD)، محتوای مواد معدنی استخوان (BMC)، شاخص بیومکانیکی استخوان، سطوح مواد معدنی خون و فعالیت آنزیمهای آنتیاکسیدانی خون در موشهای صحرایی تحت درمان با شم، تخمدان برداشته شده و تیمار شده با Cistanches Herba مورد بررسی قرار گرفت تا اثرات درمان بررسی شود. با عصاره گیاه سیستانچس بر کیفیت استخوان.
طب سنتی چینی عصاره گیاه سیستانچس (CHE)
2. مواد و روشها
2.1. تهیه عصاره آبی گیاه سیستانچ
Cistanches Herba از صحرا در لیگ alxa منطقه خودمختار نی مونگول (مغولستان داخلی) در سال 2010 جمع آوری شد.
ساقه خشک شده سیستانچ هربا با آب مقطر در دمای 100 درجه به مدت 2 ساعت استخراج شد. محلول با سرعت 4000 r/min به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ شد. باقیمانده ها با فیلتراسیون حذف شدند و فیلتر ترکیب شده با حرارت دادن تبخیر شد تا غلظت مورد نظر (2.1 گرم عصاره معادل خشک گیاه در میلی لیتر) به دست آید. بازده استخراج 7/13 درصد (وزنی) بود. عصاره آبی در دمای 8-2 درجه نگهداری شد.
2.2. حیوانات
32 موش صحرایی ماده 3 ماهه ویستار با وزن بین 240 تا 270 گرم در ابتدای آزمایش برای مطالعه استفاده شدند. آنها تحت شرایط آزمایشگاهی استاندارد با چرخه نور و تاریکی 12 ساعت، با دسترسی آزاد به غذای استاندارد موش آزمایشگاهی و آب شیر نگهداری شدند.
2.3. آزمایش های حیوانی
موشهای ماده با پنتوباربیتال سدیم (40 میلیگرم در کیلوگرم در داخل صفاقی) بیهوش شدند و تخمدانهای آنها به صورت دوطرفه برداشته شد. موشهای گروه تحت عمل شم بیهوش، لاپاراتومی شدند و بدون برداشتن تخمدانها بخیه شدند. پس از 1 هفته بهبودی پس از جراحی، موشهای OVX بهطور تصادفی به سه گروه (n=8 در هر گروه) تقسیم شدند و تحت درمان داخل معدهای با H2O (گروه OVX)، عصاره گیاه Cistanches Herba (CHE) (100 یا 200 میلیگرم در کیلوگرم) قرار گرفتند. -1 روزانه) به مدت 3 ماه. گروه تحت عمل شم (n=8) به صورت خوراکی با H2O تحت درمان قرار گرفتند.
در روز آخر مطالعه، حیوانات وزن و قربانی شدند و نمونه خون به طور همزمان جمع آوری شد. فمورها تشریح و از بافت نرم برای اندازه گیری تست بیومکانیکی جدا شدند.
همه آزمایش ها مطابق با پروتکل های تحقیقاتی ایجاد شده توسط کمیته مراقبت از حیوانات چین انجام شد.
2.4. تراکم سنجی استخوان
محتوای معدنی استخوان فمور (BMC) و تراکم استخوان (BMD) با استفاده از QDR هولوژیک{{0}}}W DXA تعیین شد. این ابزار برای حالت با وضوح فوق العاده بالا با فاصله خطوط 0 تطبیق داده شد.0254 سانتی متر، وضوح 0.0127 سانتی متر، و کولیماتور با قطر 0.9 سانتی متر. استخوان ها در یک ظرف پتری قرار داده شدند. برای شبیه سازی تراکم بافت نرم اطراف استخوان ها، آب لوله کشی در اطراف استخوان ها ریخته شد تا به عمق 1 سانتی متر برسد. نتایج برای BMC و برای منطقه اندازه گیری شده داده شده است. BMD این ناحیه به صورت BMC تقسیم بر مساحت محاسبه می شود. علاوه بر نتایج برای کل استخوان ران، ناحیه دیستال و میانی استخوان ران به عنوان زیر منطقه مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت [17].
2.5. تست بیومکانیک استخوان
استخوان های فمور تا زمان تعیین استحکام شکستگی با استفاده از فیکسچر خمشی 5-kN، پیکربندی شده برای تست خمش سه نقطه و متصل به دستگاه تست جهانی Instron مدل 4502 مجهز به 10- در 4 درجه نگه داشته شدند. لودسل kN (Instron، Canton، MA، USA)، همانطور که قبلاً توضیح داده شد [18]. سرعت کراس هد 50 میلی متر در دقیقه و سرعت نمونه برداری داده ها 10 نمونه بر ثانیه بود. با استفاده از نرم افزار Series IX, v 8.08.{11}} (Instron)، حداکثر بار، تنش در حداکثر بار، بار در هنگام شکست و تنش در شکست در استخوان ران تعیین شد.
2.6. تجزیه و تحلیل بیوشیمیایی
سطوح کلسیم، روی و مس خون با روش اسپکتروفتومتری جذب اتمی اندازه گیری شد.
بر اساس روش کینگ و آرمسترانگ [19]، فعالیت آلکالین فسفاتاز (ALP) با استفاده از دی سدیم فنیل فسفات به عنوان سوبسترا مورد سنجش قرار گرفت. رنگ ایجاد شده در طول موج 510 نانومتر در یک اسپکتروفتومتر UV-vis پس از 10 دقیقه خوانده شد. فعالیت های ALP به صورت IU/L بیان شد.
غلظت malondialchehyche خون (MDA) با استفاده از روش توصیف شده توسط Jain و همکاران تعیین شد. [20]، بر اساس واکنش TBA. به طور خلاصه، 0.2 میلی لیتر گلوله گلبول قرمز یا مایع رویی به دست آمده از بافت ها، 0.8 میلی لیتر بافر فسفات (pH 7.4)، 0.025 میلی لیتر BHT، و { {19}}.5 میلی لیتر TCA 30 درصد به لوله ها اضافه شد و مخلوط شد. پس از 2 ساعت انکوباسیون در دمای 20- درجه، مخلوط به مدت 15 دقیقه (4000 × گرم) سانتریفیوژ شد. پس از این، 1 میلی لیتر مایع رویی گرفته شد و به هر لوله اضافه شد و سپس 0.075 میلی لیتر EDTA 0.1 مولار و
0.25 میلی لیتر TBA 1 درصد اضافه شد. این لولهها با درپوشهای پیچدار تفلون در دمای 90 درجه در حمام آب به مدت 15 دقیقه انکوبه شدند و تا دمای اتاق خنک شدند. دانسیته نوری برای غلظت MDA خون 532 اندازه گیری شد.
فعالیت گلوتاتیون پراکسیداز (GSH-Px) بر اساس روش لارنس و بورک [21] تعیین شد. مخلوط سنجش شامل 2.0 میلیلیتر بافر فسفات 75 میلیمولار (pH 7.0)، 50 میکرولیتر از 60 میلیمولار گلوتاتیون، {{15} }.1 میلیلیتر از 3{19}} واحد در میلیلیتر گلوتاتیون ردوکتاز، 0.1 میلیلیتر از 15 میلیمولار EDTA، 0.1 میلیلیتر از 3 میلیمولار NADPH و مقدار مناسب مایع رویی بافت تا حجم نهایی 3 میلیلیتر . واکنش با افزودن 0.1 میلی لیتر 7.5 میلی مولار H2O2 آغاز شد. سرعت تغییر جذب در طول تبدیل NADPH به NADP plus به صورت اسپکتروفتومتری در طول موج 340 نانومتر به مدت 3 دقیقه ثبت شد. فعالیت GSH-Px برای بافت ها به صورت میکرومول NADPH اکسید شده به NADP به اضافه پروتئین min-1 mg-1 بیان شد.
فعالیت سوپراکسید دیسموتاز (SOD) در خون طبق روش Sun و همکاران تعیین شد. [22]. اصل روش مبتنی بر مهار کاهش نیتروبلو تترازولیوم (NBT) با استفاده از سیستم گزانتین-گزانتین اکسیداز به عنوان یک مولد سوپراکسید است. فعالیت در مایع رویی 10000 گرم عصاره متانول/کلروفرم (5/3، V/V) هموژنه های بافتی (10 درصد) بررسی شد. یک واحد SOD به عنوان مقدار آنزیمی که باعث مهار 50 درصدی نرخ کاهش NBT می شود، تعریف شد.
فعالیت کاتالاز (CAT) با استفاده از روش ابئی [23] اندازه گیری شد. سرم به یک کووت حاوی 2.89 میلی لیتر از بافر فسفات 5 0 میلی مول در لیتر (pH 7.{6}}) اضافه شد. واکنش با افزودن 0.1 میلیلیتر 30 میلیمول در لیتر H2O2 تازه آمادهشده برای ایجاد حجم نهایی 3 میلیلیتر در دمای 25 درجه آغاز شد. سرعت تجزیه H2O2 در طول موج 240 نانومتر به مدت 5 دقیقه بر روی دستگاه اسپکتروفتومتر اندازه گیری شد. یک واحد (U) از CAT به عنوان مقدار آنزیم مورد نیاز برای تجزیه 1 نانومول H2O2 در دقیقه، در 25 درجه و pH 7.8 تعریف شد.
2.7. تحلیل آماری
نتایج تجربی به عنوان میانگین ± انحراف معیار برای هشت حیوان در هر گروه بیان شد. پارامترهای بیوشیمیایی با استفاده از آنالیز واریانس یک طرفه آنالیز واریانس و به دنبال آن آزمون مقایسه چندگانه Dunnett (DMCT) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. P-value of<0.05 was="" considered="" statistically="">0.05>

3. نتایج
دو حیوان در طول مطالعه منقضی شدند. در نتیجه، اعداد برای گروهها در پایان مطالعه عبارت بودند از: 8 در گروه شاهد. 7 در گروه OVX؛ 7 در گروه درمان با CHE (100 میلی گرم در کیلوگرم در روز)، و 8 در گروه درمان با CHE (200 میلی گرم در کیلوگرم-1 در روز). دو روز بعد از عمل، مصرف غذا و آب موشها کمی کمتر از قبل از عمل بود. هیچ حیوانی از عفونت و آنابیوز رنج نبرد. هیچ عوارض جانبی مشهود بالینی در موش مشاهده نشد.
قبل از عمل، تفاوت معنیداری (p > {{0}}.01) در وزن بدن موشها بین گروهها وجود نداشت. وزن بدن گروه OVX به طور قابل توجهی (p < 0.01)="" کمتر="" از="" گروه="" شم="" بود="" (جدول="" 1).="" تجویز="" عصاره="" گیاه="" سیستانچ="" با="" دوزهای="" 1{18}}="" 0="" و="" 200="" میلیگرم="" بر="" کیلوگرم="" روزانه="" به="" طور="" قابلتوجهی="" (05/0p=""><) وزن="" بدن="" موشها="" را="" در="" گروه="" تحت="" درمان="" با="" che="" (100="" و="" 200="" میلیگرم="" بر="" کیلوگرم="" روزانه)="" افزایش="" داد.="" دادههای="" بهدستآمده="" از="" حیوانات="" نشان="" داد="" که="" تفاوتهای="" آماری="" معنیداری="" بین="" bmd="" و="" bmc="" گروه="" ovx="" و="" شاهد="" شم="" وجود="" دارد="">)><). همانطور="" که="" انتظار="" می="" رفت،="" تجویز="" عصاره="" گیاه="" cistanches="" در="" دوز="" 200="" میلی="" گرم="" بر="" کیلوگرم="" منجر="" به="" افزایش="" قابل="" توجهی="" در="" bmd="" و="" bmc="" گروه="" تحت="" درمان="" با="" che="" شد="">).><؛>؛><>

4. بحث
پوکی استخوان یکی از شایع ترین اختلالات مرتبط با کمبود استروژن و افزایش سن است. یائسگی منجر به افزایش گردش استخوان، عدم تعادل بین تشکیل استخوان و تحلیل استخوان و از دست دادن خالص استخوان می شود. از دست دادن استخوان ناشی از کمبود استروژن در درجه اول به دلیل افزایش تحلیل استخوان استئوکلاستیک هم در انسان و هم در حیوانات آزمایشگاهی است [24].
اگرچه پوکی استخوان هم مردان و هم زنان مسن را تحت تأثیر قرار می دهد، زنان یائسه کانون اصلی پوکی استخوان بوده اند [25،26]. کمبود شدید هورمون های زنانه مهم ترین عامل پوکی استخوان در زنان یائسه است. مدل موش OVX بیشتر در تحقیقات در مورد پوکی استخوان پس از یائسگی استفاده می شود [27،28]، که در آن اوارکتومی منجر به تحلیل بیش از حد استخوان نسبت به تشکیل استخوان در ابتدا می شود و باعث تحلیل استخوان می شود. عمل OVX باعث افزایش قابل توجه وزن بدن می شود که می تواند راهنمای ارزیابی موفقیت عمل باشد [29]. در پایان مطالعه حاضر، وزن بدن گروه OVX به طور قابل توجهی در مقایسه با گروه شم کاهش یافت و درمان با عصاره گیاه سیستانچس به طور کامل از این کاهش ها جلوگیری کرد. ما فرض می کنیم که OVX باعث ناراحتی شدید فیزیولوژیکی می شود که بر مصرف غذای موش ها تأثیر می گذارد. پس از آن، وزن بدن گروه OVX به طور قابل توجهی کاهش یافت.
تراکم معدنی استخوان صرفاً به عنوان معیاری جایگزین برای استحکام استخوان توصیف شده است [30]. با این حال، ویژگی های ریزمعماری یک نشانگر جدید برای ارزیابی تاثیر واقعی درمان بر کیفیت استخوان ترابکولار است. اگرچه توده کم استخوان یک عامل خطر اصلی برای شکستگی است [31]، حفظ ساختار استخوان ترابکولار به طور قابل توجهی به استحکام استخوان کمک می کند و ممکن است خطر شکستگی را فراتر از BMD و BMC کاهش دهد، همانطور که توسط تعدادی از مطالعات نشان داده شده است که همبستگی نزدیک بین ریزساختاری را گزارش کرده اند. خواص و استحکام بیومکانیکی استخوان ها [32،33]. در این کار، BMD و BMC به طور قابل توجهی بین گروه های شم و تخمدان برداشته شده تفاوت داشتند. درمان با عصاره گیاه Cistanches به طور قابل توجهی BMD و BMC را در موش های OVX افزایش داد. علاوه بر این، تجویز عصاره گیاه Cistanches هنوز هم به طور قابل توجهی بسته به دوز حداکثر بار، جابجایی در حداکثر بار، تنش در حداکثر بار، بار در شکست خودکار، جابجایی در شکست خودکار، و استرس در گروههای تحت درمان با شکست خودکار را افزایش میدهد. در مقایسه با گروه OVX. این نتایج نشان داد که استخوانهای فمور موشهای تغذیهشده با عصاره گیاه Cistanches Herba بار بیشتری در هنگام شکست دارند و در نتیجه میتوانند در برابر شکستگیهای استرسی مقاومتر باشند. علاوه بر این، موشهای گروه OVX سطوح کلسیم، روی و مس خون بالاتری نسبت به گروه شم داشتند. تجویز عصاره گیاه گیاه سیستانچ باعث کاهش سطوح کلسیم، روی و مس خون در موشهای صحرایی OVX شد.
این تصور که وضعیت اکسیداتیو در پوکی استخوان مهم است، با ارتباط اپیدمیولوژیک قوی بین پوکی استخوان و آترواسکلروز، بیماری که استرس اکسیدان نقش عمده ای در آن دارد، سازگار است. علاوه بر این، اخیراً مشاهده شد که در زنان بین استرس اکسیدانی (اندازهگیری شده توسط نشانگر زیستی استرس اکسیداتیو، 8-iso-PGF2-) [34]، سطوح آنتیاکسیدانی [35] و تراکم مواد معدنی استخوان مطالعات بالینی که رابطه بین رژیم غذایی و/یا مکمل آسکوربات و توده استخوانی را در انسان مورد بررسی قرار داده اند نیز ارتباطی را با افزایش توده استخوانی نشان می دهند [36].
از آنجایی که MDA واکنش پذیری بالایی نسبت به گروه های آمینه دارد، سنتز نوکلئیک اسیدها و پروتئین ها را مهار می کند و همچنین آنزیم ها را غیرفعال می کند [37،38]. بنابراین، کاهش آنزیم های آنتی اکسیدانی استخوان ران مشاهده شده پس از OVX ممکن است به دلیل پراکسیداسیون لیپیدی زیاد باشد. آنزیم های آنتی اکسیدان در سیستم دفاعی در برابر آسیب های بافتی یا سلولی با واسطه رادیکال های آزاد نقش دارند. آنها رادیکال های آزاد یا واسطه های اکسیژن فعال را به محصولات غیر رادیکال متابولیزه می کنند. این آنزیم ها شامل خانواده ای از آنزیم های وابسته به گلوتاتیون هستند [39]. در این مطالعه، ما کاهش قابل توجهی در سطح آنزیم های آنتی اکسیدانی به عنوان مثال گزارش می کنیم. SOD، GSH-Px، CAT در خون موشهای تخمدانبرداری شده این یافته ها نشان می دهد که کمبود هورمون های تخمدان با شکست در مبارزه با استرس اکسیداتیو ارتباط دارد. تجویز عصاره گیاه Cistanches به طور قابل توجهی وابسته به دوز فعالیت های SOD، GSH-Px و CAT خون را در موش های OVX افزایش داد. به نظر میرسد این نتایج نشاندهنده اثر محافظتی بهتر عصاره گیاه سیستانچس در برابر استرس اکسیداتیو ناشی از OVX است.
به طور خلاصه، عصاره گیاه Cistanches در جلوگیری از از دست دادن استخوان ناشی از کمبود هورمون تخمدان، همانطور که از BMD استخوان ران، مقادیر BMC و سطوح کلسیم، روی و مس خون مشاهده می شود، موثر است. از آنجایی که پوکی استخوان با استرس اکسیداتیو مرتبط است، مطالعات از این نوع اهمیت ارزش درمانی آنتی اکسیدان ها را تایید می کند. ما تصور میکنیم که عصاره گیاه سیستانچس کیفیت استخوان را احتمالاً تا حدی از طریق افزایش فعالیت آنزیمهای آنتی اکسیدانی موشهای صحرایی OVX و کاهش عناصر معدنی استخوان بهبود میبخشد.

عصاره گیاه سیستانچ: جلوگیری از تحلیل استخوان
منابع
1. کانالیس، ای. گیوستینا، ا. Bilezikian، JP مکانیسم های درمان های آنابولیک برای پوکی استخوان. N. Engl. جی. مد. 2007، 357، 905-916.
2. هینی، RP; Recker، RR; ساویل، PD تغییرات یائسگی در بازسازی استخوان. آزمایشگاه جی. کلین پزشکی 1978، 92، 964-970.
3. مک نامارا، LM; Ederveen, AGH; لیون، سی جی; قیمت، C. Schaffer, MB; وینانس، اچ. Prendergast، PJ استحکام بافت ترابکولار استخوان اسفنجی از موشهای نرمال، تخمدانبرداری شده و تحت درمان با دارو در طول دوره پیری. استخوان 2006، 39، 392-400.
4. Compston، JE هورمون درمانی جایگزین. کلین روماتول. 1997، 11، 583-596.
5. Meiner, SE یک چشم انداز در حال گسترش پوکی استخوان: گزینه های درمانی امروزه. Adv. Nurse Pract.1999, 7, 26-31.
6. اوبین، جی. Bonnelye، E. Osteoprotegerin، و لیگاند آن: یک الگوی جدید برای تنظیم استئوکلاستوژنز و تحلیل استخوان. پوکی استخوان بین المللی 2000، 11، 905-913.
7. رودمن، GD پیشرفت در زیست شناسی استخوان: استئوکلاست. غدد درون ریز Rev. 1996, 17, 308-332.
8. شاه بلوط، CH، III. درمان دارویی: کلسی تونین، بیس فسفونات ها و استروئیدهای آنابولیک. در پوکی استخوان: علت شناسی، تشخیص و مدیریت. Riggs, BL, Melton, LJ, III, Eds. Lippincott-Raven: فیلادلفیا، PA، ایالات متحده آمریکا، 1995.
9. Quan, Q.-M.; وو، دبلیو. لی، Y.-X. کای، Q.-R. تنوع در محتوای ایکاریین و فلاونوئید گونه Barrenwort. جی. مد. گیاهان Res. 2010، 4، 1176-1181.
10. Du, XG; پان، HZ; ژانگ، سی. ژانگ، هی. لیو، اچ ام. چن، زی. عصاره Zeng، XY Zingiber officinale سرکوب سیستم ایمنی ناشی از اشعه g را در موش تعدیل می کند. جی. مد. گیاهان Res. 2010، 4، 1647-1655.
11. Paschalis، EP; بتز، اف. دی کارلو، ای. مندلسون، آر. Boskey، تجزیه و تحلیل میکروسپکتروسکوپی AL FTIR از بیوپسی های تاج ایلیاک انسانی از استخوان پوکی استخوان درمان نشده. کلسیف بافت داخلی. 1997، 61، 487-492.
12. موتوئی، اچ. کانوه، اچ. اوگاتا، اس. کاواموکی، ک. شیکاما، اچ. فوجیکورا، تی. پیشگیری از از دست دادن استخوان توسط بیس فسفونات YM175 در سگهای تخمدان برداشته شده با محدودیت کلسیم در رژیم غذایی. Jpn. J. Pharmacol. 1996، 71، 239-246.
13. Lin, LW; حسیه، MT; Tsai، FH; وانگ، WH; Wu, CR فعالیت ضد درد و ضد التهابی ناشی از Cistanche deserticola در جوندگان. J. Ethnopharmacol. 2002، 83، 177-182.
14. Wu، XM; گائو، XM؛ Tsim، KW; Tu, PF یک آرابینوگالاکتان جدا شده از ساقه Cistanche deserticola باعث تکثیر لنفوسیت های کشت شده می شود. بین المللی جی. بیول. ماکرومول. 2005، 37، 278-282.
15. Zeng, JC; فن، YG; لیو، جی آر. Zeng YR; یی، CZ; Liang Y. مطالعه تجربی تمایز جهت سلولهای بنیادی مزانشیمی استخوان (BMSCs) به استئوبلاستها که توسط cistanche deserticola حاوی سرم هدایت میشوند. Zhongguo Gu Shang 2010, 23, 606-608.
16. Chen, Z.-W.; زو، بی.-د. Xu H.-Y. مطالعه تجربی پلی ساکاریدهای سیستانش بیابانی بر روی هماتوژنز تنظیم شده در موش های کم خونی افسرده مغز استخوان. چانه. قوس. سنت. چانه. پزشکی 2007، 25، 1473-1474.
17. پراکاسام، جی. بله، JK; چن، م.-م. کاسترو-ماگانا، م. لیانگ، سی تی. آلویا، JF اثرات هورمون رشد و تستوسترون بر تشکیل استخوان قشر مغز و تراکم استخوان در موشهای صحرایی تخمدانبرداری شده سالخورده. استخوان 1999، 24، 491-497.
18. McClung، JP; استال، CH; Marchitelli، LJ; مورالس مارتینز، ن. Makin، KM; جوان، ای جی. Scrimgeour، AG اثرات فیتاز رژیم غذایی بر افزایش وزن بدن، ترکیب بدن، و بیومکانیک استخوان در موشهای در حال رشد تغذیه شده با رژیم غذایی کم روی. جی. نوتر. بیوشیمی. 2006، 170، 190-196.
19. King, EJ; آرمسترانگ، AR روشی مناسب برای تعیین فعالیت فسفاتاز سرم و صفرا. می توان. پزشکی دانشیار J. 1934, 31, 376-381.
20. جین، SK; مک وی، آر. دوئت، جی. Herbst، پراکسیداسیون لیپیدی غشای اریتروسیت JJ و هموگلوبین گلیکوزیله در دیابت. دیابت 1989، 38، 1539-1543.
21. لارنس، RA; فعالیت بورک، RF گلوتاتیون پراکسیداز در کبد موش صحرایی با کمبود سلنیوم بیوشیمی. بیوفیز. Res. اشتراک. 1976، 71، 952-958.
22. سان، ی. Oberley، LW; Ying, L. یک روش ساده برای سنجش بالینی سوپراکسید دیسموتاز. کلین شیمی. 1988، 34، 497-500.
23. ابئی، H. کاتالاز در شرایط آزمایشگاهی. روش ها آنزیمول. 1988، 10، 121-126.
24. مظفری، ز. آذرنیا، م. عبدالحمید انگجی، س. بررسی اثرات سمی عصاره آبی برگ Trigonella foenum-graecum بر رشد بافت استخوانی دراز جنین موش صحرایی. جی. مد. گیاهان Res. 2010، 4، 1148-1155.
25. Buencamino، MCA; Sikon، AL; جین، ا. Thacker، HL یک مطالعه مشاهده ای در مورد پایبندی به دستورالعمل های درمان استئوپنی. J. سلامت زنان 2009، 18، 873-881.
26. اشمیت، MN; اشمیت، جی. Dören, M. نقش فعالیت بدنی در پیشگیری از پوکی استخوان در زنان یائسه - به روز رسانی. Maturitas 2009, 63, 34-38.
27. Lelovas, PP; Xanthos، TT; توما، SE; متن ترانه، GP; Dontasi، IA موش آزمایشگاهی به عنوان یک مدل حیوانی برای تحقیقات پوکی استخوان. Comp. پزشکی 2008، 58، 424-430.
28. Ncango، DM; Pohl، CH; ون ویک، PWJ; Kock, JLF داروهای ضد التهابی غیر استروئیدی (NSAIDs) رشد پاتوژن های مخمری را مهار می کنند. افر. J. Microbiol. Res. 2011، 5، 1123-1125.
29. فضلیانا، م. نازایمون، WMW; Gu، HF; عصاره Ostenson، CG Labisia pumila وزن بدن و آدیپوکینها را در موشهای تخمدانبرداری شده تنظیم میکند. Maturitas 2009، 62، 91-97.
30. بورین، س. امان، پی. Bonjour، JP; Rizzoli، R. بازیابی تراکم و استحکام استخوان پروگزیمال استخوان درشت نی، اما نه ساختار استخوان اسفنجی، پس از درمان طولانی مدت بیس فسفونات یا تعدیل کننده گیرنده استروژن انتخابی در موش های صحرایی مسن. استخوان 2002، 30، 195-200.
31. بورا، بی. دوفرن، تی. Chmielewski، PA; ناخالص، GJ; پرنگر، ام سی؛ Phipps، RJ Risedronate معماری ترابکولار را حفظ می کند و استحکام استخوان را در مهره مینی خوک های تخمدان برداشته شده با اندازه گیری توموگرافی میکروکامپیوتری سه بعدی افزایش می دهد. جی. ماینر استخوان. Res. 2002، 17، 1139-1147.
32. مولر، آر. هانان، م. اسمیت، SY; Bauss, F. Ibandronate متناوب کیفیت استخوان و استحکام استخوان را در ستون فقرات کمری پس از 16 ماه درمان در میمون cynomolgus تخمدان برداری شده حفظ می کند. جی. ماینر استخوان. Res. 2004، 19، 1787-1796.
33. لین، NE; کومر، جی ال. مجومدار، س. خان، م. لوتز، جی. استیونز، RE; کلاین، آر. فلپس، KV اثرات استروژنهای کونژوگه مصنوعی، a (Cenestin) بر ساختار و استحکام استخوان ترابکولار در مدل موشهای تخمدان برداشته شده. Osteoporosis Int. 2002، 13، 816-823.
34. باسو، س. مایکلسون، ک. اولوفسون، اچ. جوهانسون، اس. ملهوس، اچ. ارتباط بین استرس اکسیداتیو و تراکم مواد معدنی استخوان. بیوشیمی. بیوفیز. Res. اشتراک. 2001، 288، 275-279.
35. Maggio، D. برابانی، م. پیراندری، م. کریستینا پولیدوری، م. کاتانی، م. مکوکی، پ. سنین، یو. پاسیفیچی، آر. Cherubini، A. کاهش قابل توجه آنتی اکسیدان های پلاسما در زنان مبتلا به پوکی استخوان سالمندان: نتایج یک مطالعه مقطعی. جی. کلین. اندوکرینول. متاب. 2003، 88، 1523-1527.
36. مورتون، دی جی; بارت-کانر، EL; استفاده از مکمل اشنایدر، DL ویتامین C و تراکم استخوان در زنان یائسه. جی. ماینر استخوان. Res. 2001، 16، 135-140.
37. پرنده، RP; دراپر، HH اثر مالون آلدئید و استالدئید بر سلولهای پستانداران کشتشده: مورفولوژی رشد و سنتز ماکرومولکولها. جی. محیط زیست. Health 1980, 6, 811-823.
38. Abdelhalim، MAK تأثیر بالقوه استرس اکسیداتیو ناشی از رژیم غذایی با کلسترول بالا بر ترکیب و خواص گلبول های قرمز خون در خرگوش. افر. J. Microbiol. Res. 2010، 4، 836-843.
39. Chaudiere, J. فراری-ایلیو، آر. آنتی اکسیدان های درون سلولی از مکانیسم های شیمیایی به بیوشیمیایی. مواد شیمیایی مواد غذایی سموم 1999، 37، 949-962.







