تأثیر وضعیت ABH-Secretor اهداکننده و گیرنده بر پیوند کلیه اهداکننده زنده ناسازگار با ABO

برای اطلاعات بیشتر. مخاطبtina.xiang@wecistanche.com

مقدمهآنتی ژن های گروه خونی ABO در گرافت ها به طور مداوم در معرض آنتی بادی های ضد AB در سرم گیرندگان پس از ناسازگاری با ABO (ABOi) قرار می گیرند.پیوند کلیهو در رد پادتن با واسطه نقش دارند. برخی از افراد آنتی ژن های گروه خونی محلول را در مایعات بدن ترشح می کنند. در این مطالعه، ما تأثیر وضعیت ترشح کننده دهنده و گیرنده را بر پیامدهای پیوند کلیه ABOi بررسی کردیم.

مواد و روش هاداده‌های 32 بیمار با پیوند کلیه اهداکننده زنده ABOi به صورت گذشته‌نگر بین سال‌های 2014 و 2020 در بیمارستان غرب چین جمع‌آوری شد. ژنوتیپ و فنوتیپ اهداکنندگان و گیرندگان با تغییرات تیتر ضد A/B پس از پیوند، عملکرد پیوند و رد مورد بررسی و ارزیابی قرار گرفت.

نتایج: از 32 گیرنده و 32 اهداکننده، 23 (71.9 درصد) گیرنده و 27 (84.4 درصد) اهداکننده دارای ژنوتیپ ترشح کننده بودند، در حالی که 9 (28.1 درصد) گیرنده و 5 (15.6 درصد) اهداکننده فاقد ژنوتیپ بودند. تیتر Anti-AB پس از پیوند کلیه ABOi به طور قابل توجهی تحت تأثیر وضعیت ترشح کننده اهداکنندگان یا گیرندگان قرار نگرفت. سطح کراتینین سرم (Scr) پس از پیوند و نرخ فیلتراسیون گلومرولی تخمینی (eGFR) در گیرندگان ضعیف یا غیر ترشح کننده در روز 30 بهتر بود (Scr P{19}}.047, eGFR P{21}}). 008)، روز 90 (Scr P= 0.010، eGFR P=0.005)، و ماه 9 (eGFR P=0.008)، و دریافت‌کنندگان از اهداکنندگان ترشح‌کننده کمتر بودند بروز رد پیوند در سال اول پس از پیوند ABOi (P {31}}.004).

نتیجه گیری: یک فنوتیپ وضعیت ترشحی ضعیف در هر دو ژنوتیپ یافت شد، یعنی افرادی که آنتی ژن های محلول ترشح می کردند و همچنین افرادی که ترشح نمی کردند. وضعیت ترشح کننده ABH گیرنده ممکن است بر عملکرد کلیوی اولیه پس از پیوند تأثیر داشته باشد و وضعیت ترشح کننده ABH اهداکننده ممکن است بر بروز رد پیوند تأثیر بگذارد.

کلید واژه ها: پیوند کلیه، سیستم گروه خونی ABO، ناسازگاری گروه خونی، عملکرد پیوند، تطبیق

برای اطلاع از مزایای عصاره سیستانچ توبولوزا و فروش سیستانچ کلیک کنید

Cistanche tubulosaیک ماده دارویی رایج چینی در زندگی ما است که به نام جینسنگ صحرایی شناخته می شود و دارای ارزش تقویتی بسیار مهمی برای بدن است. سیستانچ علاوه بر ارزش دارویی، یک ماده بسیار خوشمزه نیز می باشد. استفاده طولانی مدت نه تنها می تواند به طور موثر مقاومت بدن را افزایش دهد ومصونیت، بلکه در تقویت کلیه و تقویت یانگ نیز تأثیر خوبی دارد که می تواند عملکرد جنسی را بهبود بخشد. راپلی ساکاریدهاموجود در سیستانچ می تواند تکثیر سلول ها را افزایش دهد، به طور موثر طول عمر را افزایش دهد و احتمال مرگ را کاهش دهد. بنابراین مصرف سیستانچ سیستانچ می تواند عملکرد سیستم ایمنی را به خوبی بهبود بخشد، احتمال ابتلا به بیماری را کاهش دهد و همچنین اثر طولانی مدت داشته باشد.

مقدمه

پیوند کلیه از اهداکنندگان زنده مشکل کمبود اعضا را تا حدودی حل کرده است (1،2). با این حال، تقریباً یک سوم اهداکنندگان و گیرندگان بالقوه زنده با ABO ناسازگار هستند (ABOi) (3). پیوند کلیه ABOi یک جایگزین برای مواردی است که هیچ اهداکننده سازگار با ABO (ABOc) در دسترس نیست. توسعه اولیه پیوند کلیه ABOi با نرخ بالای رد با واسطه آنتی بادی (AMR) پس از پیوند مانع شد (4). در حال حاضر، ABOi به دلیل پروتکل‌های آماده‌سازی برای حذف آنتی‌بادی‌های ABO ضد اهداکننده، دیگر منع مصرف پیوند کلیه در نظر گرفته نمی‌شود. نتایج بلندمدت میزان بقا و عملکرد اندام یکسانی را بین پیوند کلیه ABOi و ABOc نشان می‌دهد (6).

برای جلوگیری از AMR، تیترهای آنتی A/B موجود در گیرندگان باید به محدوده ایمن کاهش یابد (به عنوان مثال، کمتر یا مساوی 1:16 در اکثر مراکز پیوند) قبل از پیوند ABOi (7-9). دو هفته پس از پیوند کلیه ABOi، علیرغم وجود آنتی ژن A/B بر روی پیوند و وجود آنتی بادی های متناظر در خون گیرنده، واکنش آنتی ژن-آنتی بادی ABO وجود نداشت و آلوگرافت ABOi عملکرد طبیعی داشت. این تلورانس به عنوان اقامت (10) شناخته می شود. با این حال، زمانی که تیترهای ضد A/B در روز پیوند در محدوده ایمن قرار داشتند، برخی از پیوندها هنوز شکست خوردند، در حالی که برخی دیگر از پیوند ABOi جان سالم به در بردند. بنابراین، مکانیسم اساسی باید روشن شود (1 لیتر).

در پیوند کلیه ABOi، آنتی ژن‌های A و B عمدتاً در اندوتلیوم عروقی، لوله‌های پیچیده دیستال و مجاری جمع‌آوری کلیه اهداکننده وجود دارند. -گالاکتوزید -1،2-فوکوزیل ترانسفراز، کدگذاری شده توسط ژن FUT2، آنزیمی است که برای مرحله نهایی در مسیر سنتز آنتی ژن A و B محلول مورد نیاز است (12، 13). افراد مبتلا به FUT2 می توانند آنتی ژن های محلول گروه خونی ABH را در مایعات بدن از جمله بزاق (فراوان ترین)، ادرار، اشک، شیره معده، صفرا، مایع آمنیوتیک، سرم، مایع منی، عرق و شیر مادر ترشح کنند (14). برای گیرنده هایی که گروه خونی آنها گروه خونی O است، آنتی ژن های H به جای آنتی ژن های A یا B در مایع بدن ترشح می شود که به ترتیب در مایع بدن افراد دارای گروه های خونی A و B قابل تشخیص است. پس از پیوند کلیه ABOi، پیوند کلیه می تواند آنتی ژن های محلول A/B/H را با توجه به وضعیت ترشح کننده اهداکننده در خون گیرندگان ترشح کند (15). با این حال، تأثیر وضعیت ترشح اهداکنندگان / گیرندگان بر محل اقامت گیرنده بحث برانگیز است (16، 17). در این مطالعه، ما ارتباط بین وضعیت ترشح اهداکنندگان/گیرنده‌ها و پیش آگهی پیوند ABOi را بررسی کردیم.

مواد و روش ها

جمعیت مطالعه

بیمارانی که بین سپتامبر 2014 و آگوست 2020 در موسسه ما تحت پیوند کلیه ABOi قرار گرفتند، به طور داوطلبانه در این مطالعه شرکت کردند. هم اهداکنندگان و هم گیرندگان از نظر ژنوتیپ و فنوتیپ وضعیت ترشح کننده مورد آزمایش قرار گرفتند. ما به صورت گذشته‌نگر داده‌های بالینی جفت‌های اهداکننده و گیرنده را جمع‌آوری و تجزیه و تحلیل کردیم. هر روش پیوند کلیه توسط هیئت بازبینی سازمانی بیمارستان غرب چین و کمیسیون بهداشت استان سیچوان تأیید شد (18). دریافت‌کنندگان با آنتی‌بادی‌های ضد HLA اختصاصی اهداکننده قبل از پیوند (DSA) از مطالعه حذف شدند. پروتکل مطالعه توسط کمیته اخلاق محلی (شماره 2019SHEN418) تایید شد.

اندازه گیری برای ژنوتیپ و فنوتیپ وضعیت ترشح کننده

قبل از پیوند کلیه از هر جفت دهنده و گیرنده خون محیطی گرفته شد. سپس سرم جدا شد و در آزمایشات آزمایشگاهی برای ارزیابی وضعیت ترشح استفاده شد. ژنوتیپ اهداکنندگان/گیرندگان با استفاده از توالی یابی مستقیم مبتنی بر PCR تعیین شد. اگزون دوم FUT2 که پروتئین را کد می کند، با استفاده از پرایمرهای تقویتی FUT2-F(5'-AGCGCCCCGGGCCT CCATCTCC-3') و FUT2-R(5') توسط PCR تکثیر شد. -GGAACCATGTGCTT CTCATGCCCG-3'). حجم نهایی مخلوط PCR 2{17}} ul بود که حاوی 10 ul GoTaqGreenMasterMix (Promega، USA)، 6.8 ul از آب بدون هسته و 2 ul از DNA نمونه (تقریباً 50-100) نانوگرم بود. ). غلظت نهایی پرایمرها 0.3 umol/L بود. مخلوط واکنش تحت دناتوراسیون اولیه در دمای 94 درجه به مدت 5 دقیقه قرار گرفت و به دنبال آن 32 سیکل تقویت (94 درجه برای 30 ثانیه، 59 درجه سانتیگراد برای 30 ثانیه، 72 درجه برای 90 ثانیه) قرار گرفت. سپس ژنوتیپ های FUT2 با واکنش توالی یابی دو طرفه روی یک توالی یابی ژن ABI 3130 با کیت توالی یابی BigDye Terminator v3.1 (ABI, USA) تعیین شدند. پرایمرهای توالی یابی مورد استفاده FUT{33}}F و FUT{34}}R بودند و از روش اتانول/استات سدیم برای خالص سازی محصولات تقویت شده واکنش توالی یابی استفاده شد.

وضعیت ترشح کننده فنوتیپ با استفاده از آزمون آگلوتیناسیون وینر تعیین شد (19). در مجموع 5 تا 10 میلی لیتر بزاق از اهدا کننده / گیرنده جمع آوری و در یک لوله آزمایش استریل نگهداری شد. سپس بزاق به مدت 10 دقیقه در حمام آب جوش قرار داده شد و سپس در سانتریفیوژ با سرعت 2500 دور در دقیقه به مدت 10 دقیقه استخراج شد. نمونه های زیر به چهار لوله مختلف اضافه شد: یک قطره بزاق و یک قطره سرم آنتی A به لوله اول، یک قطره بزاق و یک قطره سرم آنتی B به لوله دوم اضافه شد قطره نرمال سالین و یک قطره سرم آنتی A به لوله سوم و یک قطره نرمال سالین و یک قطره سرم آنتی B به لوله چهارم اضافه شد. پس از 20 دقیقه در دمای اتاق ({11}} درجه)، یک قطره 5 درصد سوسپانسیون A گلبول قرمز به لوله اول و سوم و یک قطره 5 درصد سوسپانسیون بریتروسیت به لوله دوم و چهارم اضافه شد. پس از انکوباسیون به مدت 20 دقیقه در دمای اتاق ({15}} درجه)، همه لوله‌ها از نظر وجود یا عدم وجود هماگلوتیناسیون بررسی شدند. عدم وجود آگلوتیناسیون در لوله های اول و دوم نشان دهنده فنوتیپ ترشح کننده بود. همان قدرت آگلوتیناسیون بین دو لوله اول و دو لوله آخر نشان دهنده فنوتیپ غیر ترشح کننده است، در حالی که آگلوتیناسیون ضعیف تر در دو لوله اول به عنوان فنوتیپ ترشح کننده ضعیف در نظر گرفته می شود.

سرکوب سیستم ایمنی و اصول پیش شرطی

درمان سه گانه سرکوب کننده ایمنی خوراکی شامل تاکرولیموس (Tac؛ 3 میلی گرم در روز)، مایکوفنولات موفتیل (MMF؛ 1500 میلی گرم در روز) یا مایکوفنولات سدیم پوشش داده شده با روده (EC-MPS؛ 1080 میلی گرم در روز)،

و پردنیزون (پیش از 5 میلی گرم در روز) 2 تا 4 هفته قبل از پیوند ABOi شروع شد. با توجه به خطر ایمنی درک شده، که به آنتی‌بادی‌های واکنش‌گر پانل (PRA)، باسیلیکسیماب (2{4}} میلی‌گرم در روزهای 0 و 4) یا گلوبولین ضد تیموسیت (ATG؛ 1 میلی‌گرم بر کیلوگرم در روزها بستگی دارد) 0 تا 3 یا 0 تا 4) استفاده شد. پروتکل‌های پیش شرطی مورد استفاده برای پیوند کلیه اهداکننده زنده ABOi بر اساس سطح اولیه آنتی‌بادی گروه خونی فردی شدند. دریافت‌کنندگانی که تیتر آنتی‌بادی اولیه گروه خونی (IgG و IgM) آنها کمتر از 1:8 بود، با عوامل سرکوب‌کننده سیستم ایمنی به تنهایی تحت درمان قرار گرفتند. دریافت‌کنندگانی که تیتر آنتی‌بادی اولیه گروه خونی آنها برابر با 1:16 بود، سرکوب‌کننده‌های ایمنی خوراکی دریافت کردند و تحت پلاسمافرزیس تبادل پلاسما/دبل فیلتراسیون (PE/DFPP) قرار گرفتند. دریافت کنندگان با تیتر آنتی بادی اولیه گروه خونی بیشتر یا مساوی 1:32 داروهای سرکوب کننده ایمنی خوراکی، ریتوکسیماب داخل وریدی، و PE/DFPP دریافت کردند تا اطمینان حاصل شود که تیتر ABOi در روز عمل کمتر یا مساوی 1:8 است. Oral Tac و Pred در روز پیوند متوقف شدند و دوز MMF به 2000 میلی گرم در روز (MMF) یا 1440 میلی گرم در روز (EC-MPS) افزایش یافت. متیل پردنیزولون داخل وریدی در حین عمل با دوز 500 میلی‌گرم و 200 میلی‌گرم در روز در روزهای 1 تا 3 پس از پیوند و به دنبال آن Pred خوراکی (60 میلی‌گرم در روز، کاهش یافته به 5 میلی‌گرم در روز در عرض 2 هفته) تجویز شد. Tac در روز 2 پس از پیوند مجدداً شروع شد. سطح پایین هدف Tac 5 تا 10 نانوگرم در میلی لیتر برای 3 ماه اول، 4 تا 8 نانوگرم در میلی لیتر برای ماه های 4 تا 12 و 4 تا 6 نانوگرم در میلی لیتر بود. بعد از آن.

تعریف پارامترهای بالینی

سطح اولیه تیتر آنتی بادی ضد A/B به عنوان تیتر آنتی بادی ضد A/B گیرندگان قبل از هر گونه درمان تعدیل کننده ایمنی تعریف شد. تیتر آنتی بادی ضد A/B قبل از پیوند به عنوان سطح تیتر آنتی بادی ضد A/B بلافاصله قبل از پیوند کلیه تعریف شد. تیترهای پس از پیوند در روزهای 1،3،7، 14 و همچنین در ماه های 1،3،6،9،12،18، و 24 پس از پیوند بررسی شد. ما در طول دوره مطالعه از تکنیک کارت ژل برای اندازه گیری آنتی بیوتیک استفاده کردیم. تیترهای IgM و IgG اهداکننده

برای بررسی نوسانات آنتی بادی های گروه خونی پس از پیوند کلیه ABOi آلوژنیک، ما بر روی سطح پیوسته و اولین تغییر تیتر آنتی بادی ضد A/B تمرکز کردیم. تعریف افزایش تیتر اولین بار بود که یک یا چند تیتر سرمی log2 از سطوح آنتی بادی گروه خونی پس از پیوند ارتقا یافت. به طور مشابه، کاهش تیتر به عنوان اولین بار یک یا چند کاهش تیتر سرم log2 سطح آنتی بادی گروه خونی تعریف شد. زمان از روز پیوند تا افزایش/کاهش تیتر نیز تعیین شد.

عملکرد کلیه با سطوح کراتینین (Scr) سرم و میزان فیلتراسیون گلومرولی (eGFR) تخمین زده شد، طبق فرمول CKD-EPI (20)، که در روز پیوند و در روزهای 1،3،7،14 اندازه‌گیری شد. و همچنین در ماه های 1،3،6،9،12،18 و 24 پس از پیوند. Scr قبل از پیوند و eGFR قبل از پیوند به عنوان سطوح Scr و eGFR در روز پیوند تعریف شدند. رد پیوند به عنوان تشخیص بالینی رد پیوند توسط علائم بالینی، مانند اولیگوری یا ادم، یا افزایش قابل توجه Scr بیش از 50 درصد در عرض 3 روز تعریف شد که با دلایل دیگر توضیح داده نشد. سپس بیوپسی بر روی تمام بیمارانی که از نظر بالینی رد پیوند تشخیص داده شده بود انجام شد.

روش های گروه بندی

با توجه به تنوع نتایج با ژنوتیپ ها و فنوتیپ های وضعیت ترشح کننده، تیترهای ضد A/B گیرنده پس از پیوند وعملکرد کلیهبر اساس روش‌های گروه‌بندی زیر با علامت‌گذاری I-IV مقایسه شد: (الف) I، دریافت‌کنندگان از ترشح‌کننده‌های ژنوتیپ در مقابل دریافت‌کنندگان از ژنوتیپ‌های غیر ترشح‌کننده؛ (ب) دریافت‌کننده‌ها از ترشح‌کننده‌های فنوتیپ در مقابل دریافت‌کنندگان از فنوتیپ ضعیف یا غیر ترشح کننده ها؛ (ج) III، گیرندگان ژنوتیپ در مقابل گیرندگان غیر ترشح کننده ژنوتیپ. و (د) IV، گیرندگان فنوتیپ در مقابل گیرندگان فنوتیپ ضعیف یا غیر ترشح کننده. از آنجایی که متوجه شدیم که دو گروه تقسیم شده با روش III دقیقاً مشابه آنهایی هستند که با روش IV تقسیم می شوند، نتایج بین دو روش نیز یکسان بود.

تحلیل آماری

تمامی تحلیل ها با استفاده از نرم افزار R (نسخه 3.4.4) انجام شد. نتایج تحقیق به صورت میانگین ± انحراف معیار (SD) یا میانه (محدوده) ارائه شده است. مقادير ميانگين گروه‌هاي داده‌هاي توزيع شده نرمال با استفاده از آزمون t استيودنت مقايسه شد، در حالي كه براي مقايسه داده‌هاي غيرعادي از آزمون جمع‌آوري رتبه‌اي Wilcoxon استفاده شد. علاوه بر این، از آزمون‌های مجذور کای یا آزمون دقیق فیشر برای مقایسه متغیرهای طبقه‌بندی استفاده شد. منحنی‌های بقا با استفاده از آنالیز کاپلان مایر محاسبه شد و مقایسه بین گروه‌ها با استفاده از آزمون log-rank انجام شد. معنی داری آماری P قرار گرفت<>

نتایج

از 98 بیمار متوالی که از سپتامبر 2014 تا آگوست 2020 در بیمارستان چین غربی، دانشگاه سیچوان، چین، تحت پیوند کلیه ABOi از اهداکننده زنده قرار گرفتند، 32 بیمار و اهداکنندگان مربوطه آنها در این مطالعه شرکت کردند و آزمایش‌هایی را برای ژنوتیپ‌ها و فنوتیپ‌های وضعیت ترشحی قبل از آن انجام دادند. پیوند کلیه توزیع ژنوتیپ ها یا فنوتیپ های ترشح کننده در جدول 1 خلاصه شده است. از 32 گیرنده و 32 اهداکننده که معیارهای ورود را داشتند، 23 (71.9 درصد) گیرنده ژنوتیپ ترشح کننده بودند و 9 (28.1 درصد) فاقد، در حالی که 27 (84 درصد) بودند. اهداکنندگان ژنوتیپ های ترشح کننده بودند و 5 (6/15 درصد) فاقد ژنوتیپ بودند. همه 9 گیرنده ژنوتیپ غیر ترشح کننده و پنج اهداکننده ژنوتیپ غیر ترشح کننده یک فنوتیپ ترشح کننده یا غیر ترشح کننده را نشان دادند، در حالی که 49/50 افراد ژنوتیپ ترشح کننده یک فنوتیپ ترشح کننده را ارائه کردند (شکل 3). با این حال، یک اهداکننده با ژنوتیپ ترشح کننده یک فنوتیپ ترشح ضعیف ارائه کرد.

مشخصات بالینی 64 فرد (32 گیرنده و 32 اهداکننده) در جدول 2 ارائه شده است. گیرندگان عمدتاً مرد بودند (n=23، 71.9 درصد) و اهداکنندگان عمدتاً زن بودند (n=26). 81.3 درصد). میانگین سنی 50 (32-67) برای اهداکنندگان و 30.5 (20-43) برای گیرندگان بود. 23 نفر (71.9 درصد) تحت تزریق پلاسما قرار گرفتند. میانگین زمان پیگیری در این مطالعه 331.5 (محدوده،{21}}لیتر) روز بود. هیچ یک از 32 بیمار قبلاً تحت پیوند قرار نگرفته بودند. علاوه بر این، 5 بیمار از 32 بیمار PRA قبل از پیوند مثبت داشتند و درمان ATG دریافت کردند.

همبستگی بین نوسان تیتر آنتی بادی ضد A/B و وضعیت ترشح کننده دهنده یا گیرنده به ترتیب در جدول 3 و مواد تکمیلی 1 نشان داده شده است. به طور کلی، هفت اهدا کننده تحت افزایش تیتر آنتی بادی IgG و 13 اهدا کننده تحت افزایش تیتر آنتی بادی IgM پس از پیوند قرار گرفتند، در حالی که کاهش تیتر آنتی بادی IgG و IgM پس از پیوند به ترتیب در 23 و 22 اهدا کننده مشاهده شد. با این حال، تفاوت معنی داری در فرکانس افزایش و کاهش تیتر وجود نداشت. تفاوت معنی داری در زمان لازم برای کاهش تیتر log2 IgM در گیرندگان بین دو گروه دهنده ژنوتیپ مشاهده شد (از اهداکنندگان ژنوتیپ ترشحی در مقابل اهداکنندگان ژنوتیپ غیر ترشحی، P{8}}.023). تعداد روزهای مورد نیاز برای کاهش یک log2 تیتر IgM بین دو گروه اهداکننده فنوتیپ (از اهداکنندگان فنوتیپ ترشح کننده مثبت در مقابل اهداکنندگان فنوتیپ ترشح کننده ضعیف یا منفی) روند مشابهی را نشان داد اما از نظر آماری تفاوتی نداشت (p{11}}). 053). با این حال، روزهای مورد نیاز برای یک افزایش log2 در IgG و IgM یا کاهش IgG بین گروه های گروه بندی شده توسط چهار روش تفاوت معنی داری نداشت (جدول 3).

شکل 1 تغییرات eGFR و Scr را پس از پیوند کلیه نشان می دهد، و "مواد تکمیلی 2 مقادیر P متناظر eGFR یا Scr را بین گروه ها با توجه به روش های مختلف گروه بندی نشان می دهد. هیچ تفاوت آماری در eGFR و Scr قبل از پیوند بین روش های مختلف گروه بندی وجود نداشت. با این حال، گیرندگان با وضعیت ضعیف یا غیر ترشح کننده تمایل به داشتن eGFR بهتری در روز 30 (P{4}}.008)، روز 90 (P=0.005)، و ماه 9 (P{{{{{ 10}}.008) در مقایسه با افرادی که وضعیت ترشح کننده داشتند. Scr کمتری نیز در روز 30 (P{13}}.047) و روز 90 (P{16}}.010) در گیرندگان با ضعیف مشاهده شد. جالب توجه است که گیرندگان دارای غیر ترشح کننده تمایل داشتند زمان بیشتری را صرف کنند (P{20}}.053) تا به حداقل سطح پایین تر Scr (P{22}}.080) برسند، اما نتایج حاصل نشد. از نظر آماری متفاوت است (مواد تکمیلی 1). علاوه بر این، دریافت‌کنندگان از ترشح‌کننده‌های فنوتیپ در مقایسه با دریافت‌کنندگان از فنوتیپ ضعیف یا غیر ترشح‌کننده، روزهای کوتاه‌تری را برای رسیدن به حداقل سطح Scr سپری کردند. ys در مقابل 7 روز، P{28}}.024)، همانطور که در جدول 3 نشان داده شده است.

بیوپسی بر روی 5 گیرنده انجام شد که از نظر بالینی رد پیوند تشخیص داده شد و سپس 3 گیرنده بیوپسی به اثبات رسید. در میان آن 5 گیرنده که دچار رد شدند، تنها 1 گیرنده با PRA قبل از پیوند مثبت بود. رد با واسطه آنتی بادی (ABMR) و رد سلول T (TCMR) به ترتیب در 2 و 1 گیرنده مشاهده شد. 2 بیمار باقیمانده علائم بالینی معمولی و افزایش قابل توجه Scr داشتند اما نتایج بیوپسی رد نشان نداد. آنها هنوز به عنوان دریافت کنندگان با تشخیص بالینی رد پیوند در نظر گرفته می شدند، به دلیل علائم بالینی معمولی که نمی توان با دلایل دیگر توضیح داد و این واقعیت که آنها برای رد قبل از بیوپسی تحت درمان قرار گرفتند. جدول 4 تعداد دریافت‌کنندگان با رد پیوند را بر اساس روش‌های مختلف گروه‌بندی نشان می‌دهد و تفاوت بین گیرندگان اهداکنندگان ترشح کننده و دریافت‌کنندگان اهداکنندگان غیر ترشحی از نظر آماری معنی‌دار بود (P{13}}.018 و P{15}} 0.034،

آزمون Chi-Square). شکل 2 منحنی‌های بقای رد پیوند را با توجه به وضعیت‌های ترشحی مختلف اهداکنندگان و گیرندگان نشان می‌دهد (منحنی‌های بقای سه رد پیوند ثابت شده با بیوپسی در مکمل 3 ارائه شده است). دریافت کنندگان ژنوتیپ و اهداکنندگان ترشح کننده فنوتیپ تمایل آماری به بقای بهتر بدون رد دارند. با این حال، زمان پیگیری 2 گیرنده‌ای که از اهداکنندگان ژنوتیپ غیرترشح رد نشدند، نسبتاً کوتاه است و 0 درصد بقا دارند.

بحث

سد گروه خونی ABO با پروتکل های حساسیت زدایی مناسب قبل از پیوند کلیه با موفقیت شکسته شد. مطالعات قبلی از چندین مرکز، میزان بقای کلی و پیوند بین پیوند ABOi و ABOc را گزارش کرده‌اند (21-23). با این حال، توجه کمی به تأثیر وضعیت ترشح کننده شده است و نتایج قبلی هنوز بحث برانگیز هستند. در این مطالعه، ما تاثیر وضعیت ترشح کننده دهنده و گیرنده را بر نتایج پیوند کلیه بررسی کردیم. AMR پس از پیوند نه تنها توسط آنتی بادی های ABO بلکه توسط آنتی بادی های کلاس I و II HLA ایجاد می شود. برای کاهش تأثیر آنتی بادی های HLA، دریافت کنندگان مبتلا به DSA از مطالعه حذف شدند. جالب توجه است که ژنوتیپ و فنوتیپ ترشح کننده ها کاملاً سازگار نبودند (شکل 3). فنوتیپ ضعیف ترشح کننده در هر دو ترشح کننده و غیر ترشح کننده ژنوتیپ یافت شد که در جمعیت های انسانی جنوب آسیا رایج است (24). این نتیجه یک شکل ضعیف جهش یافته ترانسفراز ترشح کننده است.

گرافت های اهداکنندگان وضعیت ترشح کننده قادر به ترشح آنتی ژن های محلول گروه خونی A/B در خون گیرندگان هستند. بنابراین، این فرضیه وجود دارد که آنتی ژن های محلول گروه خونی A/B ممکن است به آنتی بادی های ضد A/B گیرندگان متصل شوند و تیترهای پس از پیوند را کاهش دهند و از بروز AMR جلوگیری کنند. علاوه بر گلبول‌های قرمز (گلبول‌های قرمز)، آنتی‌ژن‌های گروه خونی ABO نیز بر روی لنفوسیت‌ها، پلاکت‌ها و بیشتر سلول‌های اپیتلیال و اندوتلیال، از جمله اندوتلیوم عروقی، لوله‌های پیچ‌خورده دیستال و مجاری جمع‌آوری کلیه اهداکننده توزیع می‌شوند (25). تیترهای ضد A/B پس از پیوند، که منعکس کننده توانایی اتصال با آنتی ژن ها بر روی پیوند کلیه هستند، نقش مهمی در بروز AMR دارند (26).

اکثر گیرندگان تحت یک یا چند کاهش تیتر قرار گرفتند که حاکی از پیشرفت خوب پس از پیوند است. کاهش تیتر ممکن است به دلیل رقیق شدن ناشی از افزایش حجم خون پس از جراحی، خنثی شدن آنتی ژن ترشح شده یا اتصال و جذب پیوند باشد (27). افزایش تیتر نیز در برخی از گیرندگان مشاهده شد که با افزایش نرخ از دست دادن پیوند مرتبط بود (28). با این حال، افزایش یا کاهش تیتر پس از پیوند به طور قابل توجهی با وضعیت ترشح کننده اهداکنندگان مرتبط نبود، که با نتایج مطالعات قبلی همسو بود. علاوه بر این، کیم و همکاران. دریافت که تیتر آنتی بادی ضد A/B پس از پیوند نیز تحت تأثیر وضعیت ترشح کننده اهداکننده قرار نگرفت. با این حال، تیتر IgM کاهش سریع در گیرندگان از اهداکنندگان با غیر ترشح کننده را نشان داد (17). ما روند مشابهی را در کاهش سریع IgM در مطالعه خود مشاهده کردیم. این را می توان با عدم جذب آنتی ژن محلول از پیوند غیر ترشحی توضیح داد و متعاقباً اتصال آنتی بادی و آنتی ژن در آلوگرافت افزایش یافت. با این حال، این یافته ممکن است تحت تأثیر فراوانی بررسی های تیتر IgM در دوره پس از پیوند قرار گیرد و نیاز به مطالعه دیگری با موارد بیشتر و ارزیابی های مکرر تیتر دارد. علاوه بر این، کاهش IgG بین گروه های دهنده ترشح کننده و غیر ترشح کننده تفاوت معنی داری نداشت. این ممکن است به دلیل نوع غالب IgM در آنتی بادی های ضد A/B باشد و بنابراین، IgM ممکن است بیشتر تحت تأثیر جذب ABH محلول قرار گیرد (29).

در این مطالعه، ما دریافتیم که گیرندگان اهداکنندگان ترشح کننده تمایل به تجربه عملکرد کلیوی بهتر و بروز کمتر رد پیوند داشتند، اما نتایج در مورد بهبود عملکرد کلیه بین دو گروه از نظر آماری معنی‌دار نبود. با توجه به این نکته، نتایج مطالعات قبلی متناقض است. درکسلر و همکاران معتقد بودند که بیمارانی که پیوند کلیه را از یک اهداکننده ترشح کننده دریافت کرده بودند، پس از پیوند، در عملکرد اولیه کلیه بهبود قابل توجهی داشتند که تأثیر قابل توجهی بر رد هومورال داشت (16). با این حال، کیم و همکاران. دریافتند که آنتی ژن های محلول ABH تولید شده توسط پیوند از اهداکنندگان ترشح کننده بر عملکرد کلیوی و رد پیوند در گیرندگان تأثیر نمی گذارد (17). به نظر ما، حتی اگر تیترهای ضد A/B پس از پیوند تحت تأثیر وضعیت ترشح کننده دهنده قرار نگیرد، محلول است. آنتی ژن های ترشح شده توسط پیوند دهنده ترشح کننده ممکن است به طور مداوم آنتی بادی های گروه خونی در گردش را به هم متصل کرده و تأثیر محافظتی بر عملکرد کلیه داشته باشند و از رد پیوند جلوگیری کنند.

علاوه بر وضعیت ترشح دهنده اهداکنندگان، ما ارتباط بین وضعیت ترشح گیرنده و پیش آگهی پس از پیوند را بررسی کردیم. تا جایی که ما می دانیم، این اولین مطالعه ای است که تاثیر وضعیت ترشح کننده گیرنده را بر نتایج پیوند کلیه ABOi ارزیابی می کند. تیترهای ضد A/B پس از پیوند تحت تأثیر وضعیت ترشح گیرنده، مشابه وضعیت ترشح کننده دهنده، قرار نگرفت. با این حال، ما کشف کردیم که عملکرد کلیه به طور قابل توجهی تحت تأثیر وضعیت ترشح گیرندگان قرار دارد. این گیرندگان ضعیف یا غیر ترشح کننده عملکرد کلیوی بهتری را تجربه کردند و روندی به سمت نرخ پایین رد پیوند را تجربه کردند. سپس ما فرض کردیم که وضعیت ترشح گیرندگان ممکن است به نوعی منجر به تغییر در آنتی بادی های ضد A/B شود و بر عملکرد پیوند تأثیر بگذارد. به طور کلی، مکانیسم‌های دقیقی که دریافت‌کنندگان فنوتیپ غیر ترشح‌کننده عملکرد کلیوی بهتری را تجربه می‌کنند ناشناخته مانده و به تحقیقات بیشتری نیاز دارد.

محدودیت های اصلی مطالعه ما شامل طراحی گذشته نگر و زمان پیگیری نسبتا کوتاه است. علاوه بر این، با توجه به توسعه نسبتاً اخیر فناوری پیوند کلیه ABOi، مطالعه ما با تعداد نمونه محدود شد. مسائل فنی اندازه گیری تیتر نیز ممکن است بر نتایج تأثیر بگذارد. برای به حداقل رساندن این سوگیری، ما یک تکنیک کارت ژل نسبتا دقیق را به جای روش لوله معمولی انتخاب کردیم. مشاهدات و استنباط های بعدی را می توان تحت تأثیر همه این عوامل قرار داد. بنابراین، داده های بیشتری در مورد بیماران با دوره های پیگیری طولانی تر باید جمع آوری شود و ارزش زیادی خواهد داشت.

در نتیجه، ژنوتیپ و فنوتیپ وضعیت ترشح کننده تعیین شده کاملاً با یکدیگر مطابقت ندارند. تیتر Anti-A/B پس از پیوند کلیه ABOi تحت تأثیر وضعیت ترشح کننده اهداکنندگان و گیرندگان قرار نگرفت. با این حال، وضعیت ترشح کننده ABH گیرنده ممکن است بر عملکرد کلیوی اولیه پس از پیوند تأثیر داشته باشد و وضعیت ترشح کننده ABH اهداکننده ممکن است بر بروز رد پیوند تأثیر بگذارد.