اثر گلیکوزیدهای سیستانچ بر بیان پروتئین پیش ساز میتوکندری و کراتین نوع II اسکلت سلولی 6A در یک مدل موش از دمانس عروقی

اطلاعات بیشتر لطفا تماس بگیرید:Joanna.jia@wecistanche.com

خلاصه

مقدمه

عروقیزوال عقلدومین نوع شایع زوال عقل است (نلتنر و همکاران، 2014؛ ساچدف و همکاران، 2014؛ تاتلیسوماک و همکاران، 2014؛ سینکلر و همکاران، 2015؛ توماس و همکاران، 2015؛ رایمر و همکاران، 2016). ). آسیب بی وقفه و برگشت ناپذیر حافظه که در بیماران مبتلا به زوال عقل عروقی رخ می دهد منجر به بدتر شدن شدید کیفیت زندگی می شود و بار اقتصادی سنگینی را بر خانواده بیمار وارد می کند (بارکر و همکاران، 2014؛ بورک و همکاران، 2014؛ چن و همکاران همکاران، 2014؛ براندنبورگ و همکاران، 2016). پیشگیری و درمان این بیماری در کشورهای با جمعیت سالخورده اهمیت فزاینده ای دارد. بنابراین، علاقه تحقیقاتی فزاینده ای به جستجوی داروهای موثر برای درمان زوال عقل عروقی وجود دارد.

سیستانچگیاهی است که به عنوان یک نوتروپیک در نظریه پزشکی سنتی چینی استفاده می شود (چن و همکاران، 2014؛ زالاردی و همکاران، 2015؛ یو و همکاران، 2015). گلیکوزیدهایسیستانچ(GC) آماده سازی استخراج شده ازسیستانچ. شواهد قابل توجهی وجود دارد که از این ایده حمایت می کند که GC می تواند بازسازی آکسون را بهبود بخشد (Procaccio et al., 2014; Love et al., 2015; Brandenburg et al., 2016; Gu et al., 2016). مطالعات متعدد حیوانی نشان داده است که GC عملکرد شناختی را افزایش می دهد (Procaccio et al., 2014; Talarowska et al., 2014; Fischer and Maier, 2015).

ما قبلا از انسداد شریان کاروتید مشترک دو طرفه برای ایجاد مدل‌های موش استفاده کردیمعروقیزوال عقل. در این مدل، یادگیری و حافظه فضایی پس از مداخله با GC به طور قابل توجهی بهبود می یابد (چن و همکاران، 2015). GC همچنین می تواند تنظیم و بهبود یابدمصونیتاما بیشتر به عنوان تقویت کننده اعصاب و تقویت کننده حافظه شناخته می شود (چن و همکاران، 2014؛ پروکاچیو و همکاران، 2014؛ زالاردی و همکاران، 2015؛ یو و همکاران، 2015؛ براندنبورگ و همکاران، 2016).

با این حال، مطالعات کمی مکانیسم‌های مولکولی زیربنایی اثرات GC را بررسی کرده‌اندعروقیزوال عقل. در اینجا، ما از پروتئومیکس برای کشف رابطه بین پروتئین‌ها و زوال عقل عروقی استفاده می‌کنیم تا مکانیسم زیربنایی اثر محافظت عصبی GC را تعیین کنیم.

سیستانچdeserticola اثرات زیادی دارد، برای اطلاعات بیشتر اینجا را کلیک کنید

مواد و روش ها

حیوانات

موش‌های صحرایی نر بالغ شش هفته‌ای ویستار بدون پاتوژن خاص (n=37)، با وزن 230 تا 270 گرم، توسط مرکز حیوانات آزمایشی، استان هوبی، چین (شماره مجوز: SYXK (E) { {7}}). این آزمایش از دستورالعمل‌های ملی برای مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی و دستورالعمل‌های اجماع نویسنده درباره اخلاق و رفاه حیوانات که توسط انجمن بین‌المللی ویراستاران دامپزشکی تهیه شده بود، پیروی کرد. نسخه خطی مطابق با دستورالعمل Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments (ARRIVE) تهیه شد.

موش ها در گروه های سه نفری در هر قفس در دمای 25 درجه با چرخه نور/تاریکی 12 -ساعت و دسترسی آزاد به غذا و آب قرار گرفتند. موش‌های صحرایی (n=37) به‌طور تصادفی به یک گروه کنترل (n=10)، یک گروه دمانس عروقی (n=12)، و یک گروه دمانس عروقی به‌علاوه GC (درمان‌شده با GC)، تقسیم شدند. n=15).

ایجاد مدل های موش دمانس عروقی

تحت بیهوشی عمیق با 10 درصد کلرال هیدرات، شریان های کاروتید مشترک دو طرفه موش های صحرایی در گروه های زوال عقل عروقی و گروه های تحت درمان با GC با دقت از بافت های اطراف جدا شدند، سپس با استفاده از نخ بخیه در دو انتها و کاروتید مشترک محکم بسته شدند. عروق قطع شد موش‌های گروه کنترل تحت عمل جراحی مشابهی قرار گرفتند، با این تفاوت که شریان‌های کاروتید مشترک در معرض دید قرار گرفتند اما بسته نشدند. پیچ و خم آبی موریس طبق روش‌های توصیف‌شده قبلی انجام شد تا بررسی شود که آیا مدل حیوانی با موفقیت ایجاد شده است (چن و همکاران، 2015).

درمان دارویی

پودر سیستانچ(گواهی شماره Z20050216، Sinphar Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou, China) با آب فوق خالص مخلوط شد و توسط TF{2}}C Ultrasonicator (Tuofen، شانگهای، چین) (قدرت 100 درصد، 30) استخراج شد. درجه، 40 دقیقه). غلظت GC با سنجش گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید اندازه گیری شد. پس از آسیب، تمام موش‌های گروه تحت درمان با GC GC (10 میلی‌گرم بر کیلوگرم در روز، 1 میلی‌لیتر، داخل صفاقی، یک بار در روز) به مدت 14 روز متوالی دریافت کردند. موش های گروه کنترل و دمانس عروقی سالین (1 میلی لیتر، داخل صفاقی) دریافت کردند.

ایمونوهیستوشیمی

پس از 14 روز تجویز GC (یا سالین)، هفت موش از هر گروه سر بریده و مغز آنها استخراج شد. قشر مغز برداشته شد و بافت هیپوکامپ با دقت جدا شد و با استفاده از میکروتوم انجمادی به بخش‌هایی با ضخامت 3- میکرومتر برش داده شد. بخش‌های بافت هیپوکامپ با 4 درصد پارافورمالدئید به مدت 30 تا 60 دقیقه ثابت شد، با PBS شسته شد و در 3 درصد H2O2 به مدت 10 دقیقه و سپس سرم بز به مدت 15 دقیقه، همه در دمای اتاق انکوبه شد.

سپس بخش ها در آنتی بادی اولیه p-tau فسفریله شده خرگوش ضد موش انکوبه شدند.

(1:1،000 در PBS؛ Bioworld Technology, Inc., TX, USA) و آنتی بادی اولیه ضد آمیلوئید بتا خرگوش (A) (1:1،000؛ Bioworld Technology, Inc.) در جعبه مرطوب در دمای 37 درجه به مدت 2 تا 3 ساعت، قبل از انکوباسیون در آنتی بادی ثانویه (IgG ضد موش بز؛ فناوری Bioworld، Inc.) به مدت 15 دقیقه در دمای اتاق. نمونه ها با تتراهیدروکلراید 3،3'-diaminobenzidine (داکو، توکیو، ژاپن) مشاهده شدند. تصاویر با استفاده از میکروسکوپ نوری (Olympus، توکیو، ژاپن) گرفته شد و با استفاده از Photoshop پردازش شد (نسخه 7.{17}}؛ Adobe, San Jose, CA, USA).

ذرات ایمنی مثبت قهوه ای بودند، بنابراین رنگ آمیزی قهوه ای در سیتوپلاسم به عنوان یک واکنش مثبت انتخاب شد و نیمه کمی با استفاده از یک سیستم تجزیه و تحلیل تصویر HMIAS{1}} (شرکت Qianpin، ووهان، چین) انجام شد. در هر نمونه، پنج میدان دید به طور تصادفی و پنج سلول مثبت در هر نما انتخاب شد و میانگین مقدار خاکستری به عنوان مجموعه ای از مقادیر نسبی اندازه گیری شد.

سیستانچمی تواند افزایش دهدمصونیتو جلوگیری کنیدقلبی عروقیومغزی عروقیبیماری ها

الکتروفورز ژل دو بعدی (2-DE)

پس از 14 روز تجویز GC یا سالین، هشت موش از هر گروه بیهوش و سر بریده شدند و بافت‌های هیپوکامپ به سرعت برداشت و بلافاصله در نیتروژن مایع منجمد شدند. تمام بافت ها با استفاده از هاون و هاون در نیتروژن مایع همگن شدند و در بافر لیز (7 مولار اوره، 2 مولار تیوره، 2 درصد CHAPS، 20 میلی مولار تریس) جمع آوری شدند. ذرات نامحلول با سانتریفیوژ در دمای 13 × گرم به مدت 20 دقیقه در دمای 4 درجه حذف شدند. اسید نوکلئیک آلوده با نوسان صوتی متناوب به مدت 5 دقیقه مختل شد. نمونه ها مجدداً در همان شرایط سانتریفیوژ شدند و مایع رویی جمع آوری شد. غلظت پروتئین با استفاده از روش برادفورد (Beyotime Inc.، چین) اندازه‌گیری شد و نمونه‌ها تا زمان استفاده در دمای 80- درجه نگهداری شدند.

برای بررسی نمایه بیان پروتئین در هیپوکامپ، 2-DE طبق دستورالعمل سازنده (GE Healthcare، Pittsburgh، PA، USA) انجام شد. محلول پروتئین (120 میکروگرم در نمونه) با بافر هیدراتاسیون برای حجم نهایی 350 میکرولیتر تنظیم شد. فوکوس ایزوالکتریک با استفاده از نوارهای IPG (pH 4-7، اندازه 22 سانتی متر) روی یک سیستم Ettan IPG یا II (همه از GE Ettan IPGphor3، GE Healthcare) انجام شد. سپس نوارها به مدت 15 دقیقه متعادل شدند.

{0}}DE با استفاده از ژل‌های پلی آکریل آمید 12.5 درصد دودسیل سولفات سدیم (SDS) (24 سانتی‌متر × 19.5 سانتی‌متر × 1.{8}} میلی‌متر) با چسب آب‌بندی آگارز 0.5 درصد در الکتروفورز Ettan DALTSix انجام شد. سیستم (GE، Ettan DALTSix، GE Healthcare).

الکتروفورز در 2 وات به مدت 45 دقیقه انجام شد و سپس در 17 وات به مدت 4 ساعت جداسازی شد تا زمانی که بروموفنل آبی تقریباً به انتهای ژل 2-DE رسید.

ژل ها با استفاده از نیترات نقره (کارخانه واکنشگر شیمیایی دامائو، تیانجین، چین) رنگ آمیزی شدند و تصاویر بر روی یک سیستم اسکن تصویر 2-DE (VT، ایالات متحده آمریکا) گرفته شد.

برای اسکن و تجزیه و تحلیل تصویر 2-DE از نرم افزار Image Master 2D Platinum 5.0 (GE, Inc., PA, USA) استفاده شد.

اطلاعات با استفاده از طیف سنج جرمی 4700 MALDI TOF/TOF (GE, Inc.) به دست آمد.

طیف سنجی جرمی دفعی/یونیزاسیون لیزری به کمک ماتریس در زمان پرواز

برای انگشت نگاری توده پپتیدی و تجزیه و تحلیل بعدی، ژل ها برش داده شدند و تحت یک پروتکل اندکی اصلاح شده درون ژل همانطور که در دستورالعمل های سازنده توضیح داده شده است، قرار گرفتند. متانول (Fisher M/4056/17)، استونیتریل (Fisher A/0626/17)، تریپسین (Promega V5280)، محلول تفکیک تریپسین (Promega V530)، بی کربنات آمونیوم (Sigma A6141)، C{8}} ZipTip وجود داشت. (Millipor ZTC18M096) و تری فلورواستیک اسید (GE HealthCare).

به طور خلاصه، لکه‌های پروتئینی با محلول رنگ‌زدایی (30 میلی‌مولار K3Fe(CN) 6:100 میلی‌مولار NaS2O3=1:1) رنگ‌آمیزی شدند و با 100 میلی‌متر بی‌کربنات آمونیوم و استونیتریل، با تری کلرومتیل فسفات به مدت 20 دقیقه در دمای اتاق کاهش یافتند. و سپس در تاریکی به مدت 30 دقیقه در اسید یدوستیک آلکیله می شود. ژل در 50 میکرولیتر از محلول تریپسین اصلاح شده 12 نانوگرم بر میکرولیتر در 25 میلی مولار بی کربنات آمونیوم، pH 8.6، در دمای 37 درجه یک شبه انکوبه شد. پپتیدها از پلاگین ژل با 1 درصد اسید فرمیک / 2 درصد استونیتریل استخراج و با استفاده از C{18}} Zip-Tips تغلیظ شدند. پس از آن، نمونه‌ها با استفاده از یک هدف انکرچیپ از پیش نقطه‌ای (PAC96) با ماتریس آلفا سیانو{22}}هیدروکسی سینامیک اسید برای 96 نقطه نمونه و 24 نقطه کالیبراسیون آماده شدند. اطلاعات پپتیدی طیف جرمی با استفاده از طیف سنج جرمی 4700 MALDI TOF/TOF به دست آمد. داده های به دست آمده با استفاده از یک GPS Explorer (Applied Biosystems Inc., NY, USA) تجزیه و تحلیل شدند که از جستجوی پایگاه داده MASCOT (Matrix Science، لندن، انگلستان) با استفاده از زیرمجموعه ماوس پایگاه داده مرکز ملی اطلاعات بیوتکنولوژی استفاده کرد.

سیستانچمی تواند آنتی باکتریال باشد و از آن جلوگیری کندعروقیزوال عقل

سنجش وسترن بلات

هیپوکامپ آماده شد و غلظت پروتئین طبق توضیحات بالا اندازه گیری شد. نمونه های پروتئین بر روی ژل پلی آکریل آمید SDS بارگذاری شدند، الکتروفورز شدند و به غشای پلی وینیلیدین دی فلوراید منتقل شدند. غشا در سالین بافر Tris و Tween 2 شسته شد، در شیر 10 درصد بدون چربی و 0.05 درصد توئین در سالین بافر فسفات مسدود شد. غشاها یک شبه در 4 درجه با آنتی بادی پلی کلونال پروتئین پیش ساز ضد میتوکندری خرگوش (1:2،{11}}؛ Proteintech Inc.، شیکاگو، IL، ایالات متحده آمریکا) و اسکلت سلولی خرگوش ضد کراتین نوع II 6A (KRT6A) انکوبه شدند. آنتی بادی پلی کلونال (1:1،{17}}؛ Proteintech Inc.) در شیر بدون چربی 10 درصد. آنتی بادی ثانویه، ضد خرگوش بز کونژوگه با پراکسیداز ترب کوهی (Google Biotechnology Inc.، ووهان، استان هوبی، چین) (1:2،{24}}) در 10 درصد شیر بدون چربی رقیق شد و در دمای 25 درجه انکوبه شد. به مدت 1 ساعت. آنتی بادی مونوکلونال ضد موش-اکتین موش (1:2،{33}}؛ Google Biotechnology Inc.) به عنوان مرجع داخلی استفاده شد. یک سیستم اسکن وسترن بلات (V300؛ EPSON، Nagano-ken، ژاپن)، و AlphaEaseFC Adobe PhotoShop (Alpha Innotech، CA، USA) برای تعیین پروتئین پیش ساز میتوکندری و سطوح بیان KRT6A که به عنوان چگالی نوری یکپارچه نرمال شده به اکتین بیان می شود، استفاده شد.

تحلیل آماری

داده های کمی به عنوان میانگین ± انحراف معیار بیان شد. نرم افزار ImageMaster 2D Platinum 5.0 (GE, Inc.) برای اسکن و تجزیه و تحلیل اطلاعات 2-DE استفاده شد. تجزیه و تحلیل واریانس دو طرفه با استفاده از GraphPad Prism 6 انجام شد.{6}} (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA). P < 0.05="" از="" نظر="" آماری="" معنی="" دار="" در="" نظر="" گرفته="">

نتایج

اثرات GC بر واکنش‌پذیری p-tau و A در هیپوکامپ مدل‌های موش دمانس عروقی

ایمونوهیستوشیمی نشان داد که بیان p-tau و A پس از 14 روز درمان با GC نسبت به گروه کنترل بیشتر بود. با این حال، بیان این پروتئین ها در گروه تحت درمان با GC به طور قابل توجهی کمتر از آن در گروه دمانس عروقی بود (P < 0.05؛="" شکل="">

GC بیان پروتئین پیش ساز میتوکندری و KRT6A را در هیپوکامپ مدل های موش زوال عقل عروقی تنظیم کرد.

بیان این دو پروتئین در گروه تحت درمان با GC نسبت به گروه دمانس عروقی به طور قابل توجهی متفاوت بود: پروتئین پیش ساز میتوکندری (همچنین به عنوان پروتئین شوک حرارتی (HSP) 75 کیلو دالتون شناخته می شود) تنظیم مثبت شد، و KRT6A کاهش یافت (شکل های 22، 33). ). اطلاعات پروتئین در جدول 1 آمده است.

بحث

زوال عقل عروقی یک سندرم است که با اختلال در حافظه، رفتار و شناخت مشخص می شود و عمدتاً ناشی از بیماری های عروق مغزی است (بارکر و همکاران، 2014؛ بورک و همکاران، 2014؛ اولیویرا و همکاران، 2014؛ زالاردی و همکاران، 2015). آسیب شناسی مشترک در همه انواع زوال عقل و مسئول پیشرفت آن، تخریب عصبی است (فاستر و همکاران، 2014؛ فیشر و مایر، 2015؛ کالاریا و همکاران، 2015؛

سیستانچمی تواند ایمنی را تقویت کند وجلوگیری کردنعروقیزوال عقل

چن و همکاران، 2016; پرز - هرناندز و همکاران، 2016). بسیاری از عصاره های گیاهی دارای خواص درمانی هستند. زیست فعالی این ترکیبات در برابر تخریب عصبی عمدتاً به دلیل اثرات آنتی اکسیدانی و ضد آمیلوئیدوژنیک آنها است (فیشر و مایر، 2015؛ یو و همکاران، 2015؛ پرز - هرناندز و همکاران، 2016).

سیستانچیک گیاه چینی است که به عنوان یک نوتروپیک در طب سنتی چینی استفاده می شود. تحقیقات در حال ظهور نشان می دهد کهسیستانچدر فراموشی، به ویژه در مهار پیشرفت از دست دادن حافظه مفید است (Procaccio و همکاران، 2014؛ شما و همکاران، 2015؛ پرز - هرناندز و همکاران، 2016). شواهد قابل توجهی وجود دارد مبنی بر اینکه GC می تواند بازسازی آکسون را تقویت کند و به عنوان تعدیل کننده رشد عصبی عمل کند (تالاروسکا و همکاران، 2014؛ گو و همکاران، 2016؛ ژو و همکاران، 2016). در کار قبلی ما با استفاده از پیچ و خم آبی موریس، متوجه شدیم که تاخیر فرار مدل‌های موش دمانس عروقی پس از درمان با GC کاهش می‌یابد، که نشان می‌دهد GC توانایی یادگیری فضایی را بهبود می‌بخشد. اگرچه GC به طور گسترده برای اثر محافظتی عصبی آن استفاده شده است (چن و همکاران، 2015)، مکانیسم زیربنایی این اثر نامشخص است.

به خوبی شناخته شده است که پپتیدهای A و p-tau در پلاک‌های پیری و درهم‌تنیدگی‌های نوروفیبریلاری به شدت بیان می‌شوند. پروتئین‌های A و tau نقش‌های کلیدی در مورفوژنز نورون‌ها دارند، اما در موقعیت‌های پاتولوژیک خاص، تجمع‌های نابجا تولید می‌کنند که نوروتوکسیک هستند (Love et al., 2015; Sadigh-Eteghad et al., 2015; Sinclair et al., 2015; توماس و همکاران، 2015؛ وانگ و همکاران، 2015؛ رایمر و همکاران، 2016). نتایج ایمونوهیستوشیمی حاضر نشان می‌دهد که بیان پروتئین p-tau و A در مدل‌های زوال عقل عروقی موش‌های تحت درمان با GC به طور قابل‌توجهی بیشتر از موش‌های کنترل اما کمتر از آن در موش‌های مدل درمان‌نشده بود. بنابراین، اثر محافظت عصبی GC ممکن است با کاهش سمیت A و p-tau رخ دهد.

مطالعه پروتئومی ما در هیپوکامپ موش، تفاوت های زیادی را در بیان پروتئین پیش ساز میتوکندری، کراتین و KRT6A نشان داد. از نظر عملکرد، ما حدس می زنیم که اثر محافظت عصبی GC ممکن است با بازسازی ساختار ستون فقرات دندریتیک مرتبط باشد.

پروتئین پیش ساز میتوکندری متعلق به خانواده HSP70 است (رائو و همکاران، 2014؛ گوتیرز - آگیلار و بینز، 2015؛ مک گیر و مک گیر، 2015). HSP75 در فعال سازی و بلوغ چپرون مولکولی نقش دارد و ثبات و عملکرد طبیعی سلول ها را حفظ می کند (بوث و همکاران، 2014، 2016؛ تاوالایی و همکاران، 2015).

تصور می شود که پروتئین پیش ساز میتوکندری نقش مهمی در انتقال برخی مسیرهای سیگنالینگ ایفا می کند (Reid et al., 2014; Booth et al., 2015a, b). مطالعات اخیر نشان داده است که خانواده HSP90 محیط عملیاتی تا شدن پروتئین میتوکندری را تنظیم می کند (آن و همکاران، 2014؛ لیو و لندگراف، 2015؛ رابرتز و همکاران، 2015؛ استاری و گیفارد، 2015). HSP75 در میتوکندری محلی است و تولید رادیکال های آزاد اکسیژن را مهار می کند (رادو و همکاران، 2014؛ هالووی و همکاران، 2016). نتایج ما نشان می‌دهد که بیان HSP75 در گروه تحت درمان با GC 2.{13} برابر افزایش یافته است، که نشان می‌دهد GC نقش آنتی‌اکسیدانی بازی می‌کند، تعادل اکسیداتیو سلولی را بهبود می‌بخشد و آپوپتوز را به تاخیر می‌اندازد. این یافته سرنخ های جالبی در مورد تعاملات پروتئین چپرون میتوکندری با سایر پروتئین ها ارائه می دهد.

پروتئین دیگری که بیان متفاوتی داشت KRT6A بود. کراتین‌ها که سیتوکراتین‌ها نیز نامیده می‌شوند، پروتئین‌های رشته‌ای میانی هستند که یک شبکه متراکم نامحلول را از طریق سیتوپلاسم ایجاد می‌کنند و از سلول‌های اپیتلیال حمایت ساختاری می‌کنند (Haricharan و همکاران، 2014؛ رورک و همکاران، 2015؛ Szymanski و همکاران، 2). . با این حال، سیتوکراتین ها همچنین نقش فعالی در فرآیندهای مختلف بقای سلولی (تکثیر و آپوپتوز) دارند (Zhu و همکاران، 2013؛ Schwingshackl و همکاران، 2015؛ Popov and Komianos، 2016). این پروتئین ها ممکن است تحت فسفوریلاسیون قرار گیرند و همچنین بخشی از تماس پل زدن بین سلول اپیتلیال و ریزمحیط آن هستند (لسارد و همکاران، 2013؛ گیل لورنزو و همکاران، 2014؛ ژو و همکاران، 2014؛ چاکرابارتی و همکاران، 2015). . CK6a ایزوفرم غالب در غده پستانی است (Bramanti et al., 2015a, b, 2016) و در بهبود لبه های زخم پوست تنظیم مثبتی دارد، که نشان می دهد سیتوکراتین در تکثیر سلولی و مهاجرت نقش دارد. با این حال، ما اولین کسی هستیم که کاهش KRT6A را در هیپوکامپ نشان می‌دهیم. بیان KRT6A در گروه تحت درمان با GC در مقایسه با گروه دمانس عروقی 1.{17} برابر کاهش یافت.

بنابراین، اثر محافظت عصبی GC ممکن است با مهار هیپرپلازی نوروگلیال در طول ایسکمی عروق مغزی همراه باشد.

با هم، نتایج مطالعه ما نشان می دهد که GC با کاهش بیان A و P-tau، اثرات یادگیری و تقویت حافظه خود را در مدل های موش های زوال عقل عروقی اعمال می کند، بنابراین تجمع این دو پروتئین سمی را تضعیف می کند و به نوبه خود کاهش می دهد. سمیت عصبی علاوه بر این، GC ممکن است بیان پروتئین پیش ساز میتوکندری و KRT6A را که با مورفوژنز اسکلت سلولی سیناپسی و متابولیسم انرژی میتوکندری مرتبط است، تنظیم کند. بنابراین، داده‌های ما بینش جدیدی را در مورد مکانیسم‌های زیربنایی GCها ارائه می‌کند، و احتمال وجود چندین هدف GCها را برجسته می‌کند، که یک گزینه درمانی جدید امیدوارکننده برای درمان زوال عقل عروقی ارائه می‌دهد.

پانویسها و منابع

منابع مالی:این مطالعه توسط بنیاد ملی علوم طبیعی چین، شماره 30960520 پشتیبانی شد. بنیاد علوم طبیعی منطقه خودمختار مغولستان داخلی چین، شماره 2016MS0837.

تضاد منافع: اعلام نشده است.

اخلاق تحقیق:پروتکل مطالعه توسط کمیته اخلاق حیوانات اولین بیمارستان ووهان تایید شد. روش آزمایشی از راهنمای مؤسسه ملی بهداشت برای مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی (انتشارات NIH شماره 8023، بازبینی شده در سال 1978) و «دستورالعمل‌های اجماع نویسنده در مورد اخلاق و رفاه حیوانات» که توسط انجمن بین‌المللی ویراستاران دامپزشکی (IAVE) تهیه شده بود، پیروی کرد. ). تمام تلاش ها برای به حداقل رساندن تعداد و رنج حیوانات مورد استفاده در آزمایش ها انجام شد. این مقاله مطابق با "تحقیقات حیوانی: گزارش دستورالعمل‌های آزمایش‌های درون تنی" (راهنمای ARRIVE) تهیه شده است.

موافقت نامه مشارکت کننده: بیانیه "قرارداد انتشار" توسط یک نویسنده مجاز به نمایندگی از همه نویسندگان قبل از انتشار امضا شده است.

بررسی سرقت ادبی: این مقاله دو بار با نرم افزار بررسی تکراری iThenticate بررسی شده است.

بررسی دقیق:برای اطمینان از یکپارچگی، کیفیت و اهمیت این مقاله، یک فرآیند بررسی دوسوکور و دقیق توسط همتایان انجام شده است.

کپی شده توسط Slone-Murphy J، Frenchman B، Yu J، Li CH، Qiu Y، Song LP، Zhao M

منابع

1. یک J، Haile WB، Wu F، Torre E، Yepes M. فعال کننده پلاسمینوژن نوع بافتی جفت نوروگلیال را در سیستم عصبی مرکزی واسطه می کند. علوم اعصاب. 2014؛ 257:41-48.

2. Barker R، Ashby EL، Wellington D، Barrow VM، Palmer JC، Kehoe PG، Esiri MM، Love S. پاتوفیزیولوژی پرفیوژن ماده سفید در بیماری آلزایمر و دمانس عروقی. مغز. 2014؛ 137: 1524-1532.

3. Booth L، Roberts JL، Cruickshanks N، Grant S، Poklepovic A، Dent P. تنظیم سمیت OSU{1}} توسط پروتئین های استرس ER و داروهای استرس زا ER. مول سرطان وجود دارد. 2014؛ 13:2384-2398.

4. درمان Booth L، Roberts JL، Tavallai M، نوربخش A، Chuckalovcak J، Carter J، Poklepovic A، Dent P. OSU-03012 و درمان با ویاگرا فعالیت چندین پروتئین چاپرون را مهار می کند و سد خونی مغزی را مختل می کند. : پیامدهای درمان های ضد سرطان J Cell Physiol. 2015a؛ 230:1982-1998.

5. Booth L، Roberts JL، Cash DR، Tavallai S، Jean S، Fidanza A، Cruz-Luna T، Siembiba P، Cycon KA، Cornelissen CN، Dent P. GRP78/BiP/HSPA5/Dna K یک هدف درمانی جهانی است. برای بیماری انسان J Cell Physiol. 2015b؛ 230:1661-1676.

6. Booth L، Shuch B، Albers T، Roberts JL، Tavallai M، Proniuk S، Zukowski A، Wang D، Chen CS، Bottaro D، Ecroyd H، Lebedyeva IO، Dent P. مهارکننده های مولتی کیناز می توانند با شوک حرارتی مرتبط باشند. پروتئین‌ها از طریق انتهای NH{2} خود که توسط آن عملکرد چپرون را سرکوب می‌کنند. انکوتارگت. 2016؛ 7: 12975-12996.

7. Bramanti V، Grasso S، Tibullo D، Giallongo C، Raciti G، Viola M، Avola R. مدولاسیون کیناز مرتبط با سیگنال خارج سلولی، سیکلین D1، پروتئین اسیدی فیبریل گلیال، و بیان ویمنتین در کشت های آستروسیت پیش تیمار شده با استرادیول تحت درمان با

فاکتورهای رشد شایستگی و پیشرفت J Neurosci Res. 2015a؛ 93:1378– 1387.

8. Bramanti V، Grasso S، Tomassoni D، Traini E، Raciti G، Viola M، Li Volti G، Campisi A، Amenta F، Avola R. اثر عوامل رشد و هورمون های استروئیدی بر بیان هم اکسیژناز و سیکلین D1 در آستروگلیال اولیه کشت های سلولی. J Neurosci Res. 2015b؛ 93:521-529.

9. Bramanti V، Grasso S، Tibullo D، Giallongo C، Pappa R، Brundo MV، Tomassoni D، Viola M، Amenta F، Avola R. مولکول های عصبی و فاکتورهای رشد بیان پروتئین اسکلت سلولی را در طول تکثیر و تمایز سلول های آستروگلیال در کشت تعدیل می کنند. J Neurosci Res. 2016؛ 94:90-98.

10. Brandenburg S, Muller A, Turkowski K, Radev YT, Rot S, Schmidt C, Bungert AD, Acker G, Schorr A, Hippe A, Miller K, Heppner FL, Homey B, Vajkoczy P. میکروگلیاهای ساکن به جای ماکروفاژهای محیطی باعث افزایش عروق در تومورهای مغزی می شود و منبعی از عوامل جایگزین رگ زایی هستند. اکتا نوروپاتول. 2016؛ 131:365-378.

11. Burke MJ، Nelson L، Slade JY، Oakley AE، Khundakar AA، Kalaria RN. مورفومتری ریز عروق هیپوکامپ در زوال عقل پس از سکته و سن. Neuropathol Appl Neurobiol. 2014؛ 40:284-295.

12. Chakrabarti KR، Whipple RA، Boggs AE، Hessler LK، Bhandary L، Vitolo MI، Thompson K، Martin SS. تنظیم فارماکولوژیک AMPK در سرطان پستان بر ویژگی‌های اسکلت سلولی درگیر با تشکیل ریز شاخک‌ها و دوباره آن تأثیر می‌گذارد.

پیوست. انکوتارگت. 2015؛ 6: 36292-36307.

13. Chen A، Akinyemi RO، Hase Y، Firbank MJ، Ndung'u MN، Foster V، Craggs LJ، Washida K، Okamoto Y، Thomas AJ، Polvikoski TM، Allan LM، Oakley AE، O'Brien JT، Horsburgh K ، ایهارا ام، کالاریا RN. افزایش شدت ماده سفید پیشانی، کلاساتودندروز، و ناهنجاری های نئوواسکولار در پیری و زوال عقل پس از سکته مغزی. مغز. 2016؛ 139:242-258.

14. Chen J، Zhou SN، Zhang YM، Feng YL، Wang S. گلیکوزیدهای سیستانچ یادگیری و حافظه را در مدل موش دمانس عروقی بهبود می بخشند. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2015؛ 19:1234-1240.

15. Chen S، Yin ZJ، Jiang C، Ma ZQ، Fu Q، Qu R، Ma SP. آسیاتیکوزید از طریق یک مکانیسم ضد التهابی، اختلال حافظه ناشی از ایسکمی خونرسانی مجدد مغزی گذرا را در موش کاهش می دهد. Pharmacol Biochem Behav. 2014؛ 122:7-

16. Fischer R, Maier O. رابطه متقابل استرس اکسیداتیو و التهاب در بیماری عصبی: نقش TNF. Oxid Med Cell Longev. 2015؛ 2015: 610813.

17. Foster V، Oakley AE، Slade JY، Hall R، Polvikoski TM، Burke M، Thomas AJ، Khundakar A، Allan LM، Kalaria RN. نورون های هرمی قشر جلوی مغز در زوال عقل های پس از سکته، عروقی و سایر زوال عقل های مرتبط با افزایش سن. مغز. 2014؛ 137:2509-2521.

18. گیل لورنزو AF، بوکانگرا وی، بناردون ME، کاچیامانی وی، ولس پی جی. تنظیم Hsp70 بر Nox4/p22phox و یکپارچگی اسکلت سلولی به عنوان اثر لوزارتان در سلول‌های ماهیچه صاف عروق. عوامل استرس سلولی 2014؛ 19:115-134.

19. Gu C، Yang X، Huang L. Cistanches herba: بررسی نوروفارماکولوژی. فارماکول جلو. 2016؛ 7:289.

20. Gutiérrez -Aguilar M, Baines CP. مکانیسم‌های ساختاری کنترل وابسته به سیکلوفیلین D منافذ انتقال نفوذپذیری میتوکندری. Biochim Biophys Acta. 2015؛ 1850: 2041-2047.

21. Haricharan S، Hein SM، Dong J، Toneff MJ، Aina OH، Rao PH، Cardiff RD، Li Y. سهم یک سلول آلوئولی منشا در فنوتیپ بدخیم درجه بالا سرطان پستان مرتبط با بارداری. انکوژن. 2014؛ 33:5729-5739. [

22. Holloway KR، Sinha VC، Bu W، Toneff M، Dong J، Peng Y، Li Y. هدف قرار دادن انکوژن ها در زیر مجموعه مشخصی از سلول های پستانی نشان می دهد که جهش انکوژنیک آغازگر، فنوتیپ تومور حاصل را تعریف می کند. Int J Biol

علمی 2016؛ 12:381-388.

23. Kalaria RN، Ferrer I، Love S. بیماری عروقی، هیپوکسی و شرایط مرتبط. در: Love S، Perry A، Ironside J، Budka H، ویراستاران. آسیب شناسی عصبی گرینفیلد. لندن: CRC; 2015.

24. Lessard JC، Pina-Paz S، Rotty JD، Hickerson RP، Kaspar RL، Balmain A، Coulombe PA. کراتین 16 ایمنی ذاتی را در پاسخ به شکستن سد اپیدرمی تنظیم می کند. Proc Natl Acad Sci US A. 2013؛ 110:19537-19542.

25. لیو دبلیو، لندگراف آر. سرین 13 فسفریله شده و فسفریله نشده CDC37 برهمکنش های متمایز را بین حوزه های اتصال مشتری و HSP90 تثبیت می کند. بیوشیمی. 2015؛ 54: 1493-1504.

26. Love S، Chalmers K، Ince P، Esiri M، Attems J، Kalaria R، Jellinger K، Yamada M، McCarron M، Minett T، Matthews F، Greenberg S، Mann D، Kehoe PG. Erratum: توسعه، ارزیابی، اعتبار سنجی و اجرای یک پروتکل توافقی برای ارزیابی آنژیوپاتی آمیلوئید مغزی در بافت مغز پس از مرگ. Am J Neurodegener Dis. 2015؛ 4:49.

27. McGeer PL، McGeer EG. هدف قرار دادن میکروگلیا برای درمان بیماری آلزایمر. نظر کارشناسان در آنجا اهداف. 2015؛ 19:497-506.

28. Neltner JH، Abner EL، Baker S، Schmitt FA، Kryscio RJ، Jicha GA، Smith CD، Hammack E، Kukull WA، Brenowitz WD، Van Eldik LJ، Nelson PT. آرتریولواسکلروز که چندین نواحی مغز را تحت تاثیر قرار می دهد با اسکلروز هیپوکامپ در اثر پیری مرتبط است. مغز. 2014؛ 137:255-267.

29. Oliveira NR، Marques SO، Luciano TF، Pauli JR، Moura LP، Caperuto E، Pieri BL، Engelmann J، Scaini G، Streck EL، Lira FS، Pinho RA، Ropelle ER، Silva AS، De Souza CT. تمرین با تردمیل باعث افزایش سطح پروتئین آلفا SIRT-1 و PGC-1 و فسفوریلاسیون AMPK در عضله چهار سر موش های میانسال به روشی وابسته به شدت می شود. واسطه ها التهاب 2014؛ 2014: 987017. [مقاله رایگان PMC]

30. Pérez -Hernández J، Zaldívar -Machorro VJ، Villanueva-Porras D، Vega-Ávila E، Chavarría A. یک جایگزین بالقوه در برابر بیماری های عصبی: داروهای گیاهی. Oxid Med Cell Longev. 2016؛ 2016: 8378613. [بدون PMC

مقاله] [PubMed] [Google Scholar]

31. Popov K، Komianos J. MEDIAN: شبیه سازی مکانیکی شیمیایی انقباض و هم ترازی قطبیت در شبکه های اکتومیوزین. محاسبات PLoS

Biol. 2016؛ 12:e1004877. [مقاله رایگان PMC] [PubMed] [Google Scholar]

32. Procaccio V، Bris C، Chao de la Barca JM، Oca F، Chevallier A، Amati-Bonneau P، Bonneau D، Reynier P. دیدگاه های محافظت عصبی مبتنی بر دارو که میتوکندری را هدف قرار می دهد. Rev Neurol (پاریس) 2014؛ 170:390-400. [PubMed] [Google Scholar]

33. Radu M، Semenova G، Kosoff R، Chernoff J. PAK سیگنالینگ در طول توسعه و پیشرفت سرطان. Nat Rev سرطان. 2014؛ 14:13-25. [مقاله رایگان PMC] [PubMed] [Google Scholar]

34. Rao VK، Carlson EA، Yan SS. منافذ انتقال نفوذپذیری میتوکندری یک هدف دارویی بالقوه برای تخریب عصبی است. Biochim Biophys Acta. 2014؛ 1842: 1267- 1272. [مقاله رایگان PMC] [PubMed] [Google Scholar]

35. Reid SP، Shortleff AC، Costantino JA، Tritsch SR، Retterer C، Spurgers KB، Bavari S. HSPA5 یک عامل میزبان ضروری برای عفونت ویروس ابولا است. ضد ویروسی Res. 2014؛ 109:171-174. [PubMed] [Google Scholar]

36. Reijmer YD، van Veluw SJ، Greenberg SM. آسیب مغزی ایسکمیک در آنژیوپاتی آمیلوئید مغزی J Cereb Blood Flow Metab. 2016؛ 36:40-54. [مقاله رایگان PMC] [PubMed] [Google Scholar]

37. Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Fidanza A, Cruz-Luna T, Smith E, Siembida P, Plamondon P, Cycon KA, Doern CD, Booth L, Dent P. GRP78/Dna K هدف نکساور/ stivarga/votrient در درمان بدخیمی های انسانی، عفونت های ویروسی و بیماری های باکتریایی. J Cell Physiol. 2015؛ 230: 2552-2578. [مقاله رایگان PMC] [PubMed] [Google Scholar]

38. Rorke EA، Adhikary G، Young CA، Rice RH، Elias PM، Crumrine D، Meyer J، Blumenberg M، Eckert RL. تغییرات ساختاری و بیوشیمیایی زیربنایی یک فنوتیپ شبه کراتودرمی در موش‌های فاقد عملکرد فاکتور رونویسی AP1 فوق‌بازال. سلول مرگ دیس. 2015؛ 6: e1647. [مقاله رایگان PMC] [PubMed] [Google Scholar]

39. Sachdev P، Kalaria R، O'Brien J، Skoog I، Alladi S، Black SE، Blacker D، Blazer DG، Chen C، Chui H، Ganguli M، Jellinger K، Jeste DV، Pasquier F، Paulsen J، Prins N، Rockwood K، Roman G، Scheltens P. انجمن بین المللی اختلالات رفتاری و شناختی عروقی (2014) معیارهای تشخیصی برای اختلالات شناختی عروقی: بیانیه VASCOG. Alzheimer Dis Assoc Disord. 28:206-218.

40. صدیق اتحاد س، صابرمعروف ب، مجدی ع، طالبی م، فرهودی م، محمودی ج. آمیلوئید بتا: یک عامل مهم در بیماری آلزایمر. Med Princ Pract. 2015؛ 24:1-10.

41. Schwingshackl A, Roan E, Teng B, Waters CM. TREK{1}} ترشح سیتوکین را از سلول های اپیتلیال آلوئولی انسان کشت شده مستقل از بازآرایی اسکلت سلولی تنظیم می کند. PLoS One. 2015؛ 10:e0126781.

42. Sinclair LI، Tayler HM، Love S. سطوح پروتئین سیناپسی تغییر یافته در دمانس عروقی. Neuropathol Appl Neurobiol. 2015؛ 41:533-543.

43. Stary CM، Giffard RG. پیشرفت در رویکردهای هدفمند آستروسیت برای درمان سکته: نقش نوظهور برای میتوکندری ها و microRNA ها Neurochem Res. 2015؛ 40:301-307.

44. Szalárdy L، Z ádori D، Klivényi P، Toldi J، Vécsei L. اختلالات انتقال الکترون و تخریب عصبی: از مفهوم آلبرت اسنت گیورگی (Szeged) تا رویکردهای جدید برای تقویت بیوانرژیک میتوکندری. سلول داروی اکسید

لانگف. 2015؛ 2015: 498401.

45. Szymanski WG، Zauber H، Erban A، Gorka M، Wu XN، Schulze WX. اجزای اسکلت سلولی محل پروتئین را برای ریز دامنه های غشایی تعریف می کنند. پروتئومیکس سلول مول. 2015؛ 14:2493-2509.

46. ​​Talarowska M، Bobinska K، Zajaczkowska M، Su KP، Maes M، Galecki P. تاثیر استرس اکسیداتیو/نیتروزاتیو و التهاب بر عملکردهای شناختی در بیماران مبتلا به اختلالات افسردگی مکرر. Med Sci Monit. 2014؛ 20:110-115.

47. Tatlisumak T، Putaala J، Debette S. علل کمتر شایع سکته: تشخیص و مدیریت. در: نوروینگ بی، ویراستار. کتاب درسی آکسفورد سکته مغزی و بیماری عروق مغزی. آکسفورد: انتشارات دانشگاه آکسفورد; 2014. صفحات 153-162. [Google Scholar]

48. Tavallai M، Hamed HA، Roberts JL، Cruickshanks N، Chuckalovcak J، Poklepovic A، Booth L، Dent P. Nexavar/Stivarga و ویاگرا برای کشتن سلول های تومور تعامل دارند. J Cell Physiol. 2015؛ 230: 2281-2298. [مقاله رایگان PMC] [PubMed] [Google Scholar]

49. Thomas T, Miners S, Love S. ارزیابی پس از مرگ هیپوپرفیوژن قشر مغز در بیماری آلزایمر و دمانس عروقی. مغز. 2015؛ 138:1059– 1069. [PubMed] [Google Scholar]

50. Wang Y, Lin J, Chen QZ, Zhu N, Jiang DQ, Li MX, Wang Y. بیان بیش از حد Hsp75 میتوکندری از سلول های بنیادی عصبی در برابر سمیت عصبی ناشی از فاکتورهای محلول مشتق شده از میکروگلیا با تنظیم باز شدن منافذ انتقالی نفوذپذیری میتوکندری در شرایط آزمایشگاهی محافظت می کند. Int J Mol Med. 2015؛ 36: 1487-1496.

51. Xu Q، Fan W، Ye SF، Cong YB، Qin W، Chen SY، Cai J. Cistanche tubulosa از نورون های دوپامینرژیک از طریق تنظیم آپوپتوز و فاکتور نوروتروفیک مشتق از سلول گلیال محافظت می کند: in vivo و in vitro. پیری جلو

نوروسک. 2016؛ 8:295.

52. شما SP، Zhao J، Ma L، Tudimat M، Zhang SL، Liu T. اثرات پیشگیرانه گلیکوزیدهای فنیل اتانول از Cistanche tubulosa بر فیبروز کبدی ناشی از آلبومین سرم گاوی در موش صحرایی. دارو. 2015؛ 23:52.

53. Zhou Q, Anderson C, Zhang H, Li X, Inglis F, Jayagopal A, Wang S. Repression of choroidal neovascularization from actin cytoskeleton pathways by microRNA-24. Mol Ther. 2014؛ 22:378-389.

54. Zhu M, Lu C, Li W. قرار گرفتن در معرض گذرا با اکیناکوزید برای فعال کردن سیگنال دهی Trk و محافظت از سلول های عصبی در برابر روتنون کافی است. جی نوروشیم. 2013؛ 124:571-580.