اثرات گلیکوزیدهای سیستانچ بر یادگیری شناختی و انعطاف پذیری سیناپسی در موش های مدل محروم از خواب Ⅱ

2 نتیجه

2. 1 اثر GCs بر یادگیری و حافظه در موش صحرایی

2. 1. 1 آزمایش ناوبری موقعیت یابی

با افزایش تعداد روزهای آموزش موقعیت یابی و ناوبری، تأخیر فرار موش ها در هر گروه کاهش یافت و این کاهش در 2 تا 3 روز بیشتر مشهود بود. با گذشت زمان، تأخیر فرار موش‌ها در گروه مدل حالت پایداری داشت، در حالی که گروه کنترل و PC تأخیر فرار موش‌ها در گروه، گروه GCs و گروه Est به تدریج کاهش یافت. شکل 1 را ببینید.

مکمل های سیستانش با گلیکوزید بالا برای بهبود حافظه

2. 1. 2 آزمایشات اکتشاف فضایی

در مقایسه با گروه کنترل، تعداد دفعاتی که موش‌ها در گروه مدل از پلت‌فرم عبور کردند و درصد زمان سپری شده در ربع هدف به‌طور معنی‌داری کاهش یافت (01.0 < {{0}}}). تفاوت آماری معنی داری بین گروه PC و گروه مدل وجود نداشت که نشان دهنده موفقیت آمیز بودن مدل محرومیت از خواب است. در مقایسه با گروه مدل، تعداد دفعاتی که موش‌ها در گروه GCs از پلتفرم عبور کردند و درصد زمان صرف شده در ربع هدف به طور قابل‌توجهی افزایش یافت (01/0 > P)، در حالی که تفاوت در گروه Est از نظر آماری نبود. قابل توجه؛ در مقایسه باگروه GCs،تعداد دفعاتی که موش‌ها در گروه Est از پلت‌فرم عبور کردند به طور قابل‌توجهی افزایش یافت (P < 0. 01). ودرصد سکونتزمان در ربع هدف به طور قابل توجهی کاهش یافت (P < 0. 01). شکل 2 را ببینید.

2. 2. تأثیر GCs بر رفتار اضطرابی در موش صحرایی

نتایج آزمایش میدان باز نشان داد کهاین نشان می دهد که در مقایسه با گروه شاهد، تعداد ایستادن و حرکت موش ها در گروه مدل برابر بودفاصله به طور قابل توجهی افزایش یافت (P ＜ {{0}}. 05)، زمان استراحت به طور قابل توجهی کاهش یافت (P ＞ 0. 01)، و وجود داشت تفاوت آماری معناداری بین گروه رایانه شخصی و گروه کنترل وجود ندارد (P ＞ 0. 05). در مقایسه با گروه مدل، درمان GCs می‌تواند به طور قابل‌توجهی فرکانس ایستادن و فاصله حرکت موش‌ها را در گروه مدل کاهش دهد (05/0 ＜ P)، و زمان بی‌حرکتی را به طور قابل‌توجهی افزایش دهد (05/0 ＜ P). پس از درمان با Est، تفاوت بین مقایسه گروه el تفاوت از نظر آماری معنی دار نبود (05/0 P>). جدول 2 را ببینید.

شکل 2 نتایج آزمایش اکتشاف فضایی

توجه: الف: تعداد گذرگاه های سکوی. ب: درصد زمان صرف شده در ربع هدف. در مقایسه با گروه کنترل، ∗P < {{0}}.05، ∗∗P <0.01; در مقایسه با گروه مدل، ＃＃P <0.01

جدول 2 اثرات GCs بر رفتار اضطرابی در موش صحرایی (x ± s)

جدول 3 اثرات GCها بر سطوح سرمی MT در موش صحرایی (x ± s)

2.4 تأثیر GCها بر مورفولوژی و تعداد سلول‌ها در ناحیه CA1 هیپوکامپ موش‌ها در گروه کنترل و گروه PC، نورون‌ها در ناحیه CA1 هیپوکامپ به‌خوبی چیده شده‌اند، با هسته‌های شفاف، هسته‌های واقع در مرکز، و رنگ آمیزی یکنواخت؛ در مقایسه با گروه کنترل، بدن‌های Nissl موش‌های گروه مدل به‌صورت شل، با شکاف‌های بزرگ‌تر و تعداد کمتر (05/0 < 0) مرتب شده بودند و سلول‌ها با تعداد زیادی واکوئل آتروفی شدند. و برخی از اجسام Nissl دو هسته ای یا چند هسته ای بودند. در مقایسه با گروه مدل، پس از درمان GCs، بدنه‌های Nissl به طور مرتب چیده شدند و تعداد آنها افزایش یافت و واکوئل‌ها در تعداد کمی قابل مشاهده بودند. هیچ تغییر قابل توجهی در گروه Est در مقایسه با گروه مدل مشاهده نشد. شکل 3، جدول 4 را ببینید.

جدول 4. رنگ آمیزی Nissl و شمارش تعداد سلول های عصبی در ناحیه CA1 هیپوکامپ

2. 5 اثر GCها بر بیان نشانگرهای مولکولی مرتبط با سیناپس در موش صحرایی

2. 5. 1 تأثیر GCها بر بیان پروتئین BDNF، SYN و PSD{3}} در هیپوکامپ موش صحرایی. نتایج آزمایش وسترن بلات نشان داد که، با

در مقایسه با گروه کنترل، سطح بیان پروتئین BDNF، SYN و PSD{{0}} در گروه مدل به طور قابل توجهی کاهش یافت (P < 0. 01)، و گروه PC به طور قابل توجهی کاهش یافت. متفاوت از گروه C تفاوت بین گروه کنترل و گروه کنترل از نظر آماری معنی دار نبود. در مقایسه با گروه مدل، GCها می‌توانند به طور قابل‌توجهی بیان پروتئین BDNF، SYN و PSD{4}} را تنظیم کنند (01.0 < P)، در حالی که درمان مکمل Est بر BD تأثیری نداشت. تغییر معنی داری در بیان پروتئین های NF، SYN و PSD{7}} مشاهده نشد. شکل 4 را ببینید.

2. 5. 2. تأثیر GCها بر بیان mRNA BDNF، SYN و PSD-95 در هیپوکامپ موش صحرایی. نتایج تجربی RT-PCR نشان داد که در مقایسه با گروه کنترل، سطوح بیان BDNF، SYN و PSD-95 mR⁃ＮＡ در گروه مدل به طور معنی‌داری کاهش یافت (01/0 ≥ 0). و بین گروه PC و گروه کنترل تفاوت معنی داری وجود نداشت. در مقایسه با گروه مدل، GCها می توانند به طور قابل توجهی سطوح بیان mRNA ژن BDNF، SYN و PSD{9}} را تنظیم کنند (P<0. 01), while Est BDNF, SYN, and PSD - 95 mRNA table

هیچ تاثیر قابل توجهی در سطح وجود نداشت. شکل 5 را ببینید.

توجه: الف: بیان پروتئین BDNF. B: بیان پروتئین SYN. ج: بیان پروتئین PSD{{0}}. در مقایسه با گروه کنترل، ∗P < 0.05، ∗∗P < 0.01; در مقایسه با گروه مدل، ＃P <0.05، ＃#P <0.01; در مقایسه با گروه GCs، ※P <0.05

3 بحث

خواب خوب به رشد و تکامل بدن کمک می کند،کارایی یادگیری را بهبود می بخشد، وتقویت حافظه را تقویت می کند [7]. کمبود خوابمی تواند منجر شوداختلال حافظه, واکنش های آهسته، وزوال شناختی. Cistanche deserticolaیک داروی گیاهی سنتی و گرانبهای چینی است که به "جین سینگ صحرا" معروف است. ترکیبات شیمیایی آن عمدتاً شامل گلیکوزیدهای فنیل اتانول، ترپن های سیکلوپنتان اتر، پلی ساکاریدها و اجزای فرار است. در میان آنها، پلی ساکاریدها به دلیل فعالیت های بیولوژیکی خود مانند تنظیم فعالیت ایمنی، ضد پیری و ضد تومور توجه گسترده ای را به خود جلب کرده اند [8].

مطالعات مرتبط گزارش کرده اند که GCها نقش محافظت کننده عصبی مانندآنتی اکسیدانوضد آپوپتوزو به طور موثر عملکرد عصبی را بهبود می بخشدموش های سکته مغزی ایسکمیک[9]. مطالعات بیشتر و بیشتر نشان داده اند که GCها دارای پتانسیل بسیار زیادی هستندمهار پیشرفت بیماری های عصبی[10]. مطالعات مرتبط گزارش کرده اند که گلیکوزیدهای فنیل اتانول Cistanche deserticola (PhGs) مسیرهای انتقال سیگنال TLR4/NF-kB را مهار می کنند، التهاب عصبی را کاهش می دهند، بیان p-CAMKII/CAMKII را تا حدی افزایش می دهند، سطح بیان پروتئین های مرتبط با سیناپسی را افزایش می دهند و بهبود توانایی یادگیری و حافظه موش های APP/PS1 [11].

مطالعات قبلی توسط گروه تحقیقاتی ما همچنین نشان داد که PhGها می‌توانند نقش آنتی‌اکسیدانی داشته باشند، سطح بیان پروتئین SYN و PSD{0}} را افزایش دهند، انعطاف‌پذیری سیناپسی را تنظیم کنند و در نتیجه نقص‌های یادگیری و شناختی موش‌های SAMP8 را بهبود بخشند [4].

این آزمایش یک مدل محرومیت از خواب موش را با بهبود روش محیط آبی چند پلتفرمی ساخت تا بررسی کند که آیا GCها با تنظیم بیان نشانگرهای مرتبط با سیناپسی بر انعطاف پذیری سیناپسی تأثیر می‌گذارند و بنابراین عملکرد یادگیری و شناختی موش‌ها را در مدل محرومیت از خواب بهبود می‌بخشند. ملاتونین (MT) یک هورمون غدد درون ریز است که در نور طبیعی و تاریکی در شب توسط غده صنوبری سنتز و ترشح می شود و ریتم شبانه روزی را تنظیم می کند. این یک عملکرد فیزیولوژیکی مهم در کنترل خواب و ریتم شبانه روزی ایفا می کند. اختلالات ریتم ملاتونین عامل اصلی اختلالات خواب و ریتم شبانه روزی است [12].

نتایج آزمایش الایزا سرم در این آزمایش نشان داد که محرومیت از خواب باعث کاهش سطح MT در موش‌های مدل شده و ریتم خواب موش‌ها را مختل کرده و مدل محرومیت از خواب با موفقیت ایجاد شد. این مطالعه نشان داد که GC ها می توانند به طور قابل توجهی زمان تاخیر فرار موش های مدل محرومیت از خواب را کوتاه کنند و تعداد عبور از سکو را افزایش دهند، که نشان می دهد GC ها می توانند به طور موثری عملکرد یادگیری و حافظه موش های مدل محرومیت از خواب را بهبود بخشند. مطالعات قبلی گزارش کرده‌اند که SD نه تنها باعث اختلال عملکرد شناختی می‌شود، بلکه ممکن است احساسات منفی مانند اضطراب و تحریک‌پذیری را در موش‌ها افزایش دهد [13].

نتایج این مطالعه نشان داد که کم خوابی می تواند تعداد دفعات ایستادن و فاصله حرکتی موش ها را افزایش دهد و تنش و اضطراب موش های مدل را تشدید کند که با گزارش های تحقیقاتی قبلی همخوانی دارد. پس از مداخله GC، تعداد زمان ایستادن موش‌ها کاهش یافت، زمان بی‌حرکتی افزایش یافت و فاصله حرکتی کاهش یافت، که نشان می‌دهد GCها می‌توانند به طور موثری اضطراب موش‌های مدل محرومیت از خواب را بهبود بخشند.

سیناپس ها از یادگیری و عملکردهای شناختی جدایی ناپذیر هستند. شکل پذیری ساختار و عملکرد سیناپسی یک مبنای بیولوژیکی مهم برای توانایی یادگیری و حافظه بدن است [14]. بیان پروتئین های مرتبط با سیناپس نقش مهمی در تنظیم شکل پذیری سیناپسی ایفا می کند. SYN یک گلیکوپروتئین ویژه غشای پیش سیناپسی است که می تواند گسترش سیناپس ها را تنظیم کرده و حرکت رو به جلو وزیکول های سیناپسی را تقویت کند. به عنوان یک پروتئین نشانگر برای توسعه و فعالیت غشای پیش سیناپسی در نظر گرفته می شود [15].

BDNF یکی از بارزترین عوامل نوروتروفیک است. رشد و تمایز نورون ها را تنظیم می کند و نقش مهمی در شکل گیری شکل پذیری سیناپسی دارد [16]. PSD نقش مهمی در حفظ ثبات ساختار سیناپسی و ارتقای کارایی انتقال سیناپسی دارد [17]. ادبیات قبلی گزارش می‌دهد که محرومیت از خواب می‌تواند باعث آسیب اکسیداتیو به نورون‌های هیپوکامپ و بیان غیرطبیعی پروتئین‌های مرتبط با سیناپسی شود که منجر به کاهش شکل‌پذیری سیناپسی و القای یادگیری و اختلال عملکرد شناختی می‌شود [18].

این مطالعه تجربی نشان داد که سطح بیان SYN، PSD{0}} و BDNF در هیپوکامپ موش‌های مدل محروم از خواب به طور قابل‌توجهی کاهش یافته است که با نتایج مطالعات قبلی مطابقت دارد. پس از تجویز GCها، سطوح بیان SYN، PSD{1}} و BDNF افزایش یافت، که نشان می‌دهد GCها می‌توانند سطح بیان پروتئین‌های مرتبط با سیناپسی را افزایش دهند و در نتیجه انعطاف‌پذیری سیناپسی و عملکرد حافظه موش‌های مدل را بهبود بخشند.

به طور خلاصه، GC ها ممکن است با تنظیم بیان نشانگرهای مرتبط با سیناپسی بر انعطاف پذیری سیناپسی تأثیر بگذارند، در نتیجه یادگیری و عملکرد شناختی ناشی از SD را بهبود می بخشند، که ایده ها و راه حل های درمانی جدیدی را برای GC ها برای درمان یادگیری و اختلالات شناختی ناشی از اختلالات خواب ارائه می دهد.

مراجع

[1] Liew SC، Aung T. محرومیت از خواب و ارتباط آن با بیماری ها - بررسی.J］. Sleep Med، 2021، 77: 192-204.

[2] Chellelappa SL، Aeschbach D. خواب و اضطراب: از مکانیک تا مداخلات ［J］． Sleep Med Rev, 2022, 61: 101583.

[3] وانگ لو، ژانگ شیبین، هوآ ژیپنگ، و همکاران. پیشرفت تحقیقات در مورد پاتوژنز آسیب ایسکمی-پرفیوژن مجدد مغزی [J]. مجله سکته مغزی و بیماری های عصبی، 2023، 40 (2) 168 تا 170.

[４] Jia ＪＸ, Yan ＸＳ, Song Ｗ, et al. مکانیسم حفاظتی زیربنایی اثرات فنیل اتانوئیک گلیکوزیدها (PHG) بر انعطاف پذیری سیناپسی در مدل بیماری آلزایمر موش صحرایی ناشی از بتا آمیلوئید 1 - 42[J]. J Toxicol En⁃ vvirionHealth A، 2018، 81 (21): 1098 - 1107.

［５］ Ye Mao، Zhang Ying، Wang Qiang و همکاران. اثرات دکسمدتومیدین بر توانایی حافظه و شکل پذیری سیناپسی در موش های محروم از خواب [J]. Journal of Clinical Anesthesiology, 2023, 39(5): 519-523.

[6] دیائو هواچیونگ، ژانگ جینگ، وانگ مین، و همکاران. کاربرد و ارزیابی روش بهبود یافته محیط آبی چند پلتفرمی در مدل حیوانی محروم از خواب [J]. Journal of Chinese Experimental Animal Science, 2023, 31(1): 120-128