چرا هربا سیستانچ می تواند برای درمان سندرم کمبود کلیه استفاده شود؟

پروفایل متابولیک اثرات درمانی گیاه گیاهی را در مدل حیوانی «سندرم کمبود کلیه» ناشی از هیدروکورتیزون نشان می دهد.

تماس: emily.li@wecistanche.com

یونپینگ کیو، مینجون چن، مینگ مینگ سو، گوکسیانگ شی، شین لی، مینگمی ژو، آیهوا ژائو، جیان جیانگ و وی جیا

خلاصه

زمینه

هربا سیستانچ(Roucongrong) در درمان Shenxu Zheng مؤثر است ('سندرم کمبود کلیه'). با این حال، مکانیسم ها و پاسخ های متابولیک سیستمیک به مداخله گیاهی نامشخص است.

مواد و روش ها

با استفاده از پروفایل متابولیک مبتنی بر GC-MS، ما پاسخ های متابولیکی را بررسی کردیمهربا سیستانچمداخله در مدل موش ناشی از هیدروکورتیزونسندرم کمبود کلیه'.

نتایج

پروفایل متابولیک موش‌ها پس از تزریق هیدروکورتیزون از حالت متابولیک قبل از دوز در مقاطع زمانی مختلف، از روز 1 تا 10 منحرف شد، در حالی که پروفایل‌های متابولیک موش‌های تحت درمان با هیدروکورتیزون و عصاره آبیهربا سیستانچدر روز 10 به حالت قبل از دوز بازگشت.

نتیجه

مداخله ازهربا سیستانچباعث بهبود سیستمیک از اختلال متابولیک ناشی از هیدروکورتیزون در موش صحرایی شد. این مطالعه همچنین نشان می دهد که پروفایل متابولیک در مطالعه مکانیسم های درمانی داروهای گیاهی مفید است.

زمینه

از طریق تعدیل واکنش‌های بیوشیمیایی، مکانیسم‌های کنترل و فعالیت‌های آنزیمی، بسیاری از داروها یا مواد شیمیایی باعث نوسان متابولیت‌های موجود در سلول‌ها، بافت‌ها یا مایعات بدن می‌شوند [1]. پروفایل متابولیک، یعنی کاوش متابولیت‌های با وزن مولکولی پایین (MW < 1000="" da)="" با="" استفاده="" از="" ابزار="" تحلیلی="" پیشرفته="" همراه="" با="" آمار="" چند="" متغیره،="" می‌تواند="" پاسخ‌های="" سیستمیک="" سیستم‌های="" زنده="" به="" بیگانه‌بیوتیک‌ها="" را="" نشان="" دهد.="" همچنین="" از="" نظر="" فنی="" فهرست‌بندی="" تمام="" پروفایل‌های="" متابولیکی="" چندعاملی="" و="" متابولیک="" تحت="" تأثیر="" محیط‌زیست="" یک="" ارگانیسم،="" از="" جمله="" پیامدهای="" فیزیوپاتولوژیک="" اختلالات="" یا="" عدم="" تعادل="" ناشی="" از="" سم="" و/یا="" بیماری="" در="" شبکه="" تنظیم‌کننده="" متابولیک="" در="" سطح="" سیستمیک="" امکان‌پذیر="" است.="" تا="" به="" امروز،="" پروفایل="" متابولیک="" در="" غربالگری،="" تشخیص،="" پیش="" آگهی="" بیماری="" ها="" [2-4]،="" و="" ارزیابی="" ایمنی="" برخی="" داروها="" و="" مواد="" شیمیایی="" [5-11]="" ایجاد="" شده="">

رزونانس مغناطیسی هسته ای (NMR) [12] و طیف سنجی جرمی (MS) [13]، به تنهایی یا در ترکیب، در پروفایل و مشخص کردن پیامدهای متابولیکی سموم و/یا اختلالات ناشی از بیماری استفاده شده است. NMR، که نیازی به پیش پردازش نمونه خسته کننده ندارد، یک روش سریع و ساده برای به دست آوردن اطلاعات ذاتی از نمونه های بیولوژیکی پیچیده و دست نخورده است. از سوی دیگر، کاربرد گسترده MS در پروفایل متابولیک به دلیل حساسیت و در دسترس بودن بالای آن است [14، 15]. مشخصاً، پروفایل متابولیک مبتنی بر GC-MS در کشف مکانیسم‌های داروها و علف‌کش‌ها در داخل بدن، نشانگرهای زیستی بیماری‌ها [16] و اثرات تغییر بیان ژن بر متابولیسم، و نظارت بر عملکرد ارگانیسم‌ها در کاربردهای بیوتکنولوژیکی استفاده شده است [17-20] .

هربا سیستانچ(Roucongrong)، یک گیاه تونیک رایج چینی که در صحرا رشد می کند، فعالیت های مشخصی را برای بهبود حافظه [21] و/یا قدرت جنسی [22]، مهار رادیکال های آزاد، ضد پیری [23-26] و محافظت عصبی [27] نشان می دهد. ، 28]. برای قرن ها،هربا سیستانچبه طور موثر در درمان Shenxu Zheng ('سندرم کمبود کلیه') [29]. به تازگیهربا سیستانچنشان داده شد که اختلالات کلیوی ناشی از هیدروکورتیزون را بهبود می بخشد [30]. با این حال، عواقب متابولیکی آن مشخص نیست. مطالعه قبلی ما [31] نشان داد که پروفایل های متابولیک موش های صحرایی در معرض هیدروکورتیزون با دوز بالا (یعنی یک مدل حیوانی برایسندرم کمبود کلیه') [32]، یک الگوی بیوشیمیایی منحصر به فرد از متابولیت های درون زا در ادرار را نشان داد. این نتایج ما را برانگیخت تا مکانیسم‌های تغییرات بیوشیمیایی ثابت را پس از اصلاح هیدروکورتیزون مطالعه کنیم، با استفاده از پروفایل متابولیک مبتنی بر GC-MS برای بررسی اینکه آیا گیاه گیاه دارویی می‌تواند اثرات متابولیکی ناهنجار هیدروکورتیزون را معکوس یا خنثی کند.

سیستانچ می تواند عملکرد کلیه را بهبود بخشد

مواد و روش ها

مواد و ابزار

هربا سیستانچاز Shanghai Leiyunshang Pharmaceutical Co Ltd (چین) خریداری شد و طبق یک پروتکل استاندارد توسط دکتر Mengyue Wang (آزمایشگاه فارماکوژنتیک، دانشکده داروسازی، دانشگاه شانگهای Jiao Tong) به عنوان Cistanche deserticola YC Ma شناسایی شد [33]. محلول تزریقی هیدروکورتیزون ({1}}.5 درصد) از شرکت دارویی Shanghai Xinyi (چین) خریداری شد. معرف های مشتق کننده N-methyl-N-trimethylsilyl tri fluoroacetamide (MSTFA) (Sigma-Aldrich Inc, USA) و Trimethyliodosilane (TMSI) (Sigma-Aldrich Inc, USA) مخلوط شده در نسبت 1000:1 بودند. تمام معرف های مورد استفاده در آزمایش از درجه تحلیلی بودند. آب فوق خالص با یک سیستم تصفیه Millipore (18.2 MΩ، ایالات متحده آمریکا) تهیه شد. قفس متابولیک از Suzhou Fengshi Laboratory Animal Experiment Co Ltd (چین) خریداری شد.

تهیه عصاره گیاه گیاه سیستانچ

پانصد گرم از مواد گیاهی درشت پودر شده با 2 لیتر آب فوق خالص به مدت 2 ساعت رفلاکس شد. پس از فیلتراسیون، عصاره تا حدود یک دهم حجم اولیه روی اواپراتور چرخشی بوچی تبخیر شد و در یک فلاسک حجمی با آب فوق خالص تا 250 میلی لیتر رقیق شد. غلظت نهایی نفت خامهربا سیستانچعصاره 2 گرم در میلی لیتر بود.

دوز و نمونه برداری

دست زدن به همه حیوانات در این مطالعه مطابق با دستورالعمل های ملی بود و در مرکز حیوانات آزمایشگاهی، دانشگاه طب سنتی چینی شانگهای، شانگهای، چین انجام شد. در مجموع 19 موش نر 9 هفته ای ویستار از شرکت حیوانات آزمایشگاهی شانگهای (چین) خریداری شد. همه حیوانات در یک سیستم مانع با دمای تنظیم شده (22-20 درجه) و رطوبت (10 ± 60 درصد) و در یک چرخه تاریک/نور 12 ساعته با چراغ‌های روشن در ساعت 8:{9}} نگهداری شدند. به موش ها به طور آزاد غذا و آب داده شد. پس از دو هفته سازگاری، حیوانات به قفس‌های متابولیک منفرد منتقل شدند و به‌طور تصادفی به سه گروه تقسیم شدند: (1) گروه درمان (n=7) که در آن‌ها هیدروکورتیزون (5 درصد) به صورت داخل صفاقی 1.5 میلی‌گرم در 100 گرم تزریق شد. وزن بدن و سپس تجویز خوراکیهربا سیستانچاستخراج برای 10 روز؛ (2) گروه مدل (n=7) که در آن هیدروکورتیزون (5 درصد) به صورت داخل صفاقی 1.5 میلی گرم در 100 گرم یک بار در روز به مدت 10 روز تزریق شد. و (3) گروه کنترل (n=5) که در آن وسیله نقلیه در حدود 0.6 میلی لیتر به مدت 10 روز ip تزریق شد [31].هربا سیستانچبه دنبال توصیه شن و همکاران با دوز 20 گرم بر کیلوگرم به گروه درمان داده شد. [30]. نمونه‌های ادرار بیست و چهار ساعته در فواصل زمانی مشخص جمع‌آوری شد: قبل از دوز (-24 - 0 ساعت)، روز 1 (0 تا 24 ساعت)، روز 3، روز 7 و روز 10. تمام ادرار نمونه‌ها (6383 × گرم، LG 16-W، Beijing Jingli Centrifuge Co Ltd، چین) به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ شدند تا زباله‌های معلق را حذف کنند و بلافاصله در درجه -80 برای تجزیه و تحلیل GC-MS بعدی ذخیره شدند.

آماده سازی نمونه و GC-MS

GC-MS طبق مطالعه قبلی ما با تغییرات جزئی [31] انجام شد. به طور خلاصه، هر مقدار 0.5 میکرولیتر از آنالیت مشتق شده تری متیل سیلیل (TMS) به یک ستون مویین سیلیس ذوب شده (17 متر × 22{7}} میکرومتر قطر داخلی، ضخامت فیلم 0.11 میکرومتر؛ HP Ultra{) تزریق شد. {9}}، Agilent J&W Scientific، ایالات متحده). GC-MS بر روی کروماتوگرافی گازی پرکین المر و طیف‌سنج جرمی سیستم TurboMass-Auto XL (PerkinElmer Inc، ایالات متحده آمریکا) انجام شد.

پردازش داده ها و تحلیل چند متغیره

داده های GC-MS از طریق DataBridge (PerkinElmer Inc، ایالات متحده آمریکا) به فرمت NetCDF تبدیل شدند. اسکریپت‌های سفارشی در MATLAB 7 اجرا شدند.0 (The MathWorks Inc, USA) برای انجام تصحیح خط پایه، دکانولوشن و تراز اوج، حذف استاندارد داخلی، و عادی‌سازی به مجموع کل کروماتوگرام. ماتریس بعدی 3-شامل شاخص پیک دلخواه (زمان نگهداری زوج-m/z)، نمونه‌ها (مشاهدات) و نواحی پیک نرمال شده (متغیرها) به نرم‌افزار SIMCA-P 11 وارد شد.0 بسته (Umetrics، سوئد) برای تجزیه و تحلیل چند متغیره.

میانگین-مرکزی به صورت ستونی انجام شد تا جابجایی ها حذف شوند. همه متابولیت‌های اندازه‌گیری‌شده در یک سطح مساوی با مقیاس خودکار (مقیاس‌شده به واریانس واحد) قبل از تجزیه و تحلیل چند متغیره تحت درمان قرار گرفتند. تجزیه و تحلیل مؤلفه اصلی (PCA) با استفاده از نرم افزار SIMCA-P 11.{5}} انجام شد تا خوشه‌بندی، گروه‌بندی و روندهای کلی در بین آزمودنی‌ها بدون اطلاع قبلی آشکار شود. اولین جزء اصلی (PC1) بیشترین واریانس را در داده ها نشان می دهد. جزء اصلی دوم (PC2) متعامد به PC1 است و نشان دهنده حداکثر مقدار واریانس است که توسط PC1 توضیح داده نشده است. اجزای اصلی باقیمانده به همین روش ساخته شدند. در همین حال، میانگین مسیرهای نمرات PCA برای ارائه یک نشانه پویا برای شروع، پیشرفت، و/یا بهبودی سندرم در طول زمان مورد استفاده قرار گرفت. ضرایب همبستگی از حداقل مربعات جزئی - تجزیه و تحلیل متمایز (PLS-DA) برای رتبه‌بندی اهمیت هر متغیر برای بدست آوردن بیشتر متابولیت‌های متفاوت بیان شده مسئول جداسازی بین گروه‌ها استفاده شد. PLS-DA از روش حداقل مربعات جزئی (PLS) مشتق شده است که یک روش رگرسیون چندگانه تعمیم یافته است که با چندین پیش بینی کننده خطی و متغیرهای پاسخ سروکار دارد [34]. PLS-DA با استفاده از نرم افزار SIMCA-P 11.{16}} [35] انجام شد. یک اعتبارسنجی متقابل دور معمولی 7- انجام شد. یک هفتم نمونه ها در هر دور از مدل حذف شدند تا اعتبار مدل را تایید کنند. این روش به صورت تکراری برای اعتبارسنجی متقابل تکرار شد تا زمانی که هر نمونه یک بار حذف شود.

هربا سیستانچ می تواند برای درمان سندرم کمبود کلیه استفاده شود

تحلیل تک متغیره

متابولیت‌های بیان شده متفاوت شناسایی‌شده از تجزیه و تحلیل چند متغیره نیز در نرم‌افزار MATLAB 7 (The MathWorks Inc, USA) با آزمون ناپارامتری Kruskal-Wallis با سطح معنی‌داری در P < 0.05 تأیید شدند. .

نتایج و بحث

تفسیر طیف های GC-MS

کروماتوگرام های معمولی GC-MS جریان یونی کل (TIC) ادرار موش صحرایی در روز 10 از گروه درمان، گروه مدل و گروه کنترل در شکل 1 نشان داده شده است. با استفاده از پروتکل تجزیه و تحلیل بهینه GC-MS ما در ارتباط با پیک مبتنی بر نرم افزار روش deconvolution، در مجموع 117 متابولیت منفرد به طور مداوم در حداقل 90 درصد نمونه‌های ادرار شناسایی شد. شناسایی ترکیبی پیک‌های مورد نظر با مقایسه قطعه طیف جرمی در برابر کتابخانه‌های مرجع NIST (موسسه ملی استانداردها و فناوری)، کتابخانه‌های Wiley و استانداردهای مرجع انجام شد. ما توانستیم 23 متابولیت از 117 متابولیت (20 درصد) را تأیید کنیم که اکثر آنها اسیدهای آمینه، پلی آمین ها، اسیدهای چرب، پورین ها و هورمون های آدرنال بودند که عمدتاً در متابولیسم انرژی، متابولیسم لیپیدها و متابولیسم اسیدهای آمینه نقش دارند.

شکل 1 کروماتوگرام معمولی GC-MS جریان یونی کل (TIC) ادرار در روز 10 از گروه درمان (A)، گروه مدل (B) و گروه کنترل (C).

تغییرات وابسته به زمان در نمونه ادرار

میانگین مسیرهای نمرات PCA به دست آمده از گروه مدل و گروه درمان در شکل 2 نشان داده شده است. تغییر گذرا در نمودار مسیر پیشرفت دینامیکی "سندرم کمبود کلیهتوسط هیدروکورتیزون به تنهایی یا در ترکیب باهربا سیستانچرفتار. در گروه مدل، الگوهای متابولیک در روز 1 و روز 3 با روز 7 و روز 10 متفاوت بود، که نشان می دهد شبکه تنظیم کننده متابولیک در روز 1 و روز 3 ممکن است تحت یک دوره گذرا با نوسانات زیاد قرار گرفته باشد و شبکه آشفته ممکن است در روز 7 و روز 10 ترمیم شده باشد که در نهایت به یک الگوی پایدار نزدیک به حالت قبل از دوز منجر شد. به طور مشابه، این واقعیت که الگوی متابولیک روز 1 و روز 3 به وضوح از الگوی قبل از دوز در گروه درمان انحراف داشت، نشان دهنده غالب بود.سندرم کمبود کلیه' حالت. در این دوره، اثرات هیدروکورتیزون احتمالا بر اثرات آن غالب بودهربا سیستانچاستخراج کردن. این یافته‌ها با مشاهدات کلی که موش‌های هر دو گروه در روز 1 و 3 فعالیت کمتری نشان دادند، مطابقت داشت.هربا سیستانچبرخی از اثرات خنثی کننده یا درمانی بر روی موش های در معرض هیدروکورتیزون بود. این نتایج از یافته های بالینی حمایت می کند کههربا سیستانچدر درمان " موثر استسندرم کمبود کلیه'. به طور کلی، هر دو مسیر یک تصویر بصری، کلی و پویا از شروع، پیشرفت و بهبودی ارائه می‌کنند.سندرم کمبود کلیه'.

شکل 2 میانگین مسیر نمرات PC1 در مقابل PC2 برای نمونه ادرار از گروه مدل (-●-) و گروه درمان (--●--). هر نقطه نشان‌دهنده میانگین امتیاز در مقاطع زمانی مختلف، یعنی قبل از دوز، روزهای 1، 3، 7 و 10 است. نوار خطا نشان‌دهنده انحراف استاندارد برای هر نقطه زمانی است که توسط اولین جزء اصلی به دست می‌آید.

تجزیه و تحلیل متابولیک مقایسه ای نمونه های ادرار

برای درک بهتر اثرات متابولیک هیدروکورتیزون، پروفایل های متابولیک به دست آمده از گروه های کنترل، مدل و تیمار را مقایسه کردیم. خوشه بندی کلی سه گروه را می توان به راحتی در مقاطع زمانی مختلف مشاهده کرد، یعنی قبل از دوز، روز 3 و روز 10 (شکل 3). در حالی که هیچ تمایل جدایی در پروفایل های ادرار قبل از دوز وجود ندارد، پروفایل های متابولیک از پروفایل های گروه کنترل در روز 3 پس از مواجهه با هیدروکورتیزون منحرف شد. اختلال متابولیک توسط هیدروکورتیزون در هر دو گروه مدل و درمان ظاهر شد. با این حال، پس از یک 7-درمان متوالی باهربا سیستانچپروفایل متابولیک گروه درمان مجدداً با گروه کنترل قابل مقایسه شد که نشان می دهدهربا سیستانچبه طور موثر متابولیسم آشفته را بازیابی کرد.

شکل 3 مقایسه پروفایل های متابولیک از گروه کنترل (الماس سیاه)، گروه مدل (الماس قرمز) و گروه درمان (الماس آبی) در مقاطع زمانی مختلف: قبل از دوز (A)، روز 3 (B) و روز 10 (C). هر نقطه در نمودار امتیازات PCA نشان دهنده داده های به دست آمده از یک موش است.

شناسایی افتراقی پروفایل های متابولیک

یک مدل PLS-DA تایید شده متقاطع برای شناسایی متابولیت های کلیدی در پروفایل های متابولیک مختلف برای تمایز آسان تر بین موش های گروه کنترل و گروه مدل (یعنی القا شده با هیدروکورتیزون) با یا بدون استفاده شد.هربا سیستانچدرمان در روز 3 (جدول 1). تغییرات برابری در غلظت نسبی هر متابولیت کلیدی بین گروه‌ها مشخص شد و تجسم متناظر تغییرات بین گروه‌ها در قبل از دوز، روز 3 و روز 1{18}} تولید شد (شکل 4). همانطور که در شکل 4 و جدول 1 نشان داده شده است، در حالی که اکثر متابولیت های درون زا به طور قابل توجهی در گروه مدل افزایش یا کاهش یافتند، آنهایی که در گروه درمان بودند، تحت یک دوره گذرا همانطور که در روز 1 و روز 3 مشاهده شد و به تدریج به سطح کنترل (طبیعی) نزدیک شدند. . به عنوان مثال، در مقایسه با تغییرات جزئی (1.1-1.5 برابر) متابولیت ها در گروه درمان در روز 10، سطوح به شدت افزایش یافته (1.7-3.0 برابر) تیروزین ادرار، تیرامین، دوپامین و نورآدرنالین در ادرار مشاهده شد. گروه مدل در طول آزمایش مطالعه قبلی ما نشان داد که متابولیسم کاتکول آمین افزایش یافته ناشی از گلوکوکورتیکوئیدها منجر به مصرف بیش از حد عملکردهای ایمنی می شود و در نتیجه منجر به "سندرم کمبود کلیه' [31]. هربا سیستانچ، یک گیاه مقوی که سیستم ایمنی را بهبود می بخشد [36]، ممکن است برخی از اثرات هیدروکورتیزون را خنثی کند.هربا سیستانچهمچنین ممکن است بتواند یک شبکه تنظیم کننده متابولیک طبیعی را بازیابی کند. آزمایش‌های بیشتر با رویکردهای مختلف مانند زیست‌شناسی مولکولی، زیست‌شناسی سلولی و شیمی گیاهی برای تشریح اقدامات مورد نیاز است.هربا سیستانچ(و اجزای آن) درسندرم کمبود کلیه'.

جدول 1 فهرستی از متابولیت های موجود در پروفایل متابولیک مطالعه حاضر

از: پروفایل متابولیک اثرات درمانی را نشان می دهدهربا سیستانچدر مدل حیوانی ناشی از هیدروکورتیزونسندرم کمبود کلیه'

توجه: ضرایب همبستگی (ضرایب همبستگی) همه ترکیبات از یک مدل PLS-DA اعتبار متقابل (Q2Ycum=0.899، یک مدل رضایت‌بخش با استفاده از دو مؤلفه) در روز 3 بین گروه کنترل و گروه مدل محاسبه شد. با یا بدونهربا سیستانچرفتار. علاوه بر این، تغییرات چین با آزمون ناپارامتری کروسکال-والیس مورد آزمایش قرار گرفت. Kw (P) مقادیر P آزمون را نشان می دهد. گروه کنترل H =، گروه مدل M =، گروه درمانی D =. برای مثال، H/M/{4}} تغییرات نسبی برابری (مدل برای کنترل) را در حالت قبل از دوز نشان می‌دهد.

شکل 4 تغییرات متابولیت های کلیدی را تا کنید. رنگ قرمز نشان دهنده غلظت های نسبی بالا (تغییرات برابری > 1.5) است، در حالی که رنگ سبز نشان دهنده غلظت های نسبی کاهش یافته است (تغییرات برابری < -1.5).="" تغییرات="" فولد="" از="" -1.5="" تا="" 1.5="" به="" عنوان="" تغییرات="" فیزیولوژیکی="" در="" نظر="" گرفته="" می="" شود.="" تغییر="" برابری="" (m/h،="" d/h)="" نسبت="" غلظت="" گروه="" مدل="" یا="" گروه="" درمان="" به="" گروه="" کنترل="">

نتیجه

مطالعه پروفایل متابولیک حاضر با استفاده از GC-MS نشان داد کههربا سیستانچباعث بهبود سیستمیک از اختلال متابولیک ناشی از هیدروکورتیزون در موش صحرایی شد، یک مدل حیوانی برای 'سندرم کمبود کلیه'. این مطالعه همچنین نشان می دهد که پروفایل متابولیک روشی مفید برای مطالعه اثرات درمانی داروهای گیاهی است.

اختصارات

MS: طیف سنجی جرمی

GC-MS: کروماتوگرافی گازی - طیف سنجی جرمی

NMR: تشدید مغناطیسی هسته ای

PCA: تجزیه و تحلیل اجزای اصلی

PLS-DA: حداقل مربعات جزئی - تجزیه و تحلیل متمایز

منابع

1. Nicholson JK, Lindon JC, Holmes E: 'Metabonomics': درک پاسخ های متابولیک سیستم های زنده به محرک های پاتوفیزیولوژیک از طریق تجزیه و تحلیل آماری چند متغیره داده های طیف سنجی NMR بیولوژیکی. زنوبیوتیک. 1999، 29 (11): 1181-1189. 10.1080/004982599238047.

2. Brindle JT، Antti H، Holmes E، Tranter G، Nicholson JK، Bethell HWL، Clarke S، Schofield PM، McKilligin E، Mosedale DE، Grainger DJ: تشخیص سریع و غیرتهاجمی وجود و شدت بیماری عروق کرونر قلب با استفاده از 1H متابونومیک مبتنی بر NMR. نات مد. 2002، 8 (12): 1439-1444. 10.1038/nm802.

3. Constantinou MA، Papakonstantinou E، Benaki D، Spraul M، Shulpis K، Koupparis MA، Mikros E: کاربرد طیف‌سنجی تشدید مغناطیسی هسته‌ای همراه با تجزیه و تحلیل اجزای اصلی در تشخیص خطاهای ذاتی متابولیسم با استفاده از لکه‌های خون: یک رویکرد متابونومیک. مقعد Chim Acta. 2004، 511 (2): 303-312. 10.1016/j.aca.2004.02.012.

4. Beckonert O، Monnerjahn J، Bonk U، Leibfritz D: تجسم تغییرات متابولیک در بافت سرطان پستان با استفاده از طیف‌سنجی 1H-NMR و نقشه‌های خودسازماندهی. NMR Biomed. 2003، 16 (1): 1-11. 10.1002/nbm.797.

5. Mortishire-Smith RJ، Skiles GL، Lawrence JW، Spence S، Nicholls AW، Johnson BA، Nicholson JK: استفاده از متابونومیک برای شناسایی متابولیسم اسیدهای چرب مختل به عنوان مکانیسم سمیت ناشی از دارو. Chem Res Toxicol. 2004، 17 (2): 165-173. 10.1021/tx034123j.

6. Waters NJ، Holmes E، Williams A، Waterfield CJ، Duncan Farrant R، Nicholson JK: NMR و مطالعات تشخیص الگو در مورد اثرات متابولیک مرتبط با زمان نفتیلیزوتیوسیانات بر روی کبد، ادرار و پلاسما در موش: یک متابونومیک یکپارچه رویکرد. Chem Res Toxicol. 2001، 14 (10): 1401-1412. 10.1021/tx010067f.

7. Coen M، Lenz EM، Nicholson JK، Wilson ID، Pognan F، Lindon JC: بررسی متابونومیک یکپارچه سمیت استامینوفن در موش با استفاده از طیف‌سنجی NMR. Chem Res Toxicol. 2003، 16 (3): 295-303. 10.1021/tx0256127.

8. Small-Howard A، Turner H: قرار گرفتن در معرض مواد مشتق شده از تنباکو باعث تولید بیش از حد پروتئینازهای ترشح شده در ماست سل ها می شود. Toxicol Appl Pharmacol. 2005، 204 (2): 152-163. 10.1016/j.taap.2004.09.003.

9. Waters NJ، Waterfield CJ، Farrant RD، Holmes E، Nicholson JK: دکانولوشن متابونومیک سمیت جاسازی شده: کاربرد برای سمیت کبدی و کلیوی تیواستامید. Chem Res Toxicol. 2005، 18 (4): 639-654. 10.1021/tx049869b.

10. Robertson DG: Metabonomics in toxicology: a review. Toxicol Sci. 2005، 85 (2): 809-822. 10.1093/toxic/kfi102.

11. Robertson DG، Bulera SJ: سم شناسی با توان عملیاتی بالا: ملاحظات عملی. Curr Opin Drug Discovery Dev. 2000، 3 (1): 42-47.

12. Nicholson JK, Connelly J, Lindon JC, Holmes E: Metabonomics: بستری برای مطالعه سمیت دارویی و عملکرد ژن. Nat Rev Drug Discov. 2002، 1 (2): 153-161. 10.1038/nrd728.

13. Taylor J, King RD, Altmann T, Fiehn O: کاربرد متابولومیک برای تمایز ژنوتیپ گیاهی با استفاده از آمار و یادگیری ماشین. بیوانفورماتیک. 2002، 18 (SUPPL 2): S{4}}S248.

14. Wilson ID، Nicholson JK، Castro-Perez J، Granger JH، Johnson KA، Smith BW، Plumb RS: کروماتوگرافی مایع "با عملکرد فوق العاده" با وضوح بالا همراه با طیف سنجی جرمی oa-TOF به عنوان ابزاری برای تعیین پروفایل مسیر متابولیک دیفرانسیل در مطالعات ژنومی عملکردی J Proteome Res. 2005، 4 (2): 591-598. 10.1021/pr049769r.

15. Jonsson P، Gullberg J، Nordstrom A، Kusano M، Kowalczyk M، Sjostrom M، Moritz T: یک استراتژی برای شناسایی تفاوت‌ها در سری‌های بزرگ نمونه‌های متابولومیک که توسط GC/MS آنالیز شده‌اند. مقعد شیمی. 2004، 76 (6): 1738-1745. 10.1021/ac0352427.

16. Ohdoi C، Nyhan WL، Kuhara T: تشخیص شیمیایی سندرم Lesch-Nyhan با استفاده از کروماتوگرافی گازی - تشخیص طیف سنجی جرمی. J Chromatogr، B: Anal Technol Biomed Life Sci. 2003، 792 (1): 123-130. 10.1016/S1570-0232(03){11}}.

17. Fiehn O، Kopka J، Dormann P، Altmann T، Trethewey RN، Willmitzer L: پروفایل متابولیت برای ژنومیک عملکردی گیاه. Nat Biotechnol. 2000، 18 (11): 1157-1161. 10.1038/81137.

18. Lafaye A، Junot C، Pereira Y، Daniel G، Tabet JC، Ezan E، Labarre J: تجزیه و تحلیل ترکیبی پروتئوم و پروفایل متابولیت، بینش های شگفت انگیزی را در مورد متابولیسم گوگرد مخمر نشان می دهد. جی بیول شیمی. 2005، 280 (26): 24723-24730. 10.1074/jbc.M502285200.

19. Schauer N، Steinhauser D، Strelkov S، Schomburg D، Allison G، Moritz T، Lundgren K، Roessner-Tunali U، Forbes MG، Willmitzer L، Fernie AR، Kopka J: کتابخانه های GC-MS برای شناسایی سریع متابولیت ها در نمونه های پیچیده بیولوژیکی FEBS Lett. 2005، 579 (6): 1332-1337. 10.1016/j.febslet.2005.01.029.

20. Willse A، Belcher AM، Preti G، Wahl JH، Thresher M، Yang P، Yamazaki K، Beauchamp GK: شناسایی بوهای بدن تنظیم شده با پیچیده سازگاری بافتی با تجزیه و تحلیل آماری یک آزمایش کروماتوگرافی گازی مقایسه ای / طیف سنجی جرمی. مقعد شیمی. 2005، 77 (8): 2348-2361. 10.1021/ac048711t.

21. Wang XW، Wang XF، Wu LY: بهبود حافظه موش از گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی Cistanche deserticola. ریپ چین فارم. 2002، 19: 41-42.

22. Xie JH، Wu CF: اثر عصاره اتانولی گیاه سیستانش دسرتیکولا بر محتویات انتقال دهنده های عصبی مونوآمین در مغز موش صحرایی. ژونگ کائویا. 1993، 24: 417-419.

23. Li LL، Wang XW، Wang XF: پراکسیداسیون ضد چربی و عملکرد ضد تشعشع گلیکوزیدها درگیاه سیستانچ.چین جی چین ماتر مد. 1997، 22 (6): 364-367.

24. Shahat AA، Nazif NM، Abousetta LM، Ibrahim NA، Cos P، Van Miert S، Pieters L، Vlietinck AJ: بررسی فیتوشیمیایی و فعالیت آنتی اکسیدانی Duranta repens. Phytother Res. 2005، 19 (12): 1071-1073. 10.1002/ptr.1766.

25. Gao J، Igarashi K، Nukina M: سه گلیکوزید فنیل اتانوئید جدید از Caryopteris incana و فعالیت آنتی اکسیدانی آنها. شیمی فارم بول. 2000، 48 (7): 1075-1078.

26. Kyriakopoulou I، Magiatis P، Skaltsounis AL، Aligiannis N، Harvala C: Samioside، یک گلیکوزید فنیل اتانوئید جدید با مهار رادیکال های آزاد و فعالیت های ضد میکروبی از Phlomis samia. جی نات تولید 2001، 64 (8): 1095-1097. 10.1021/np010128 plus.

27. Deng M، Zhao JY، Ju XD، Tu PF، Jiang Y، Li ZB: اثر محافظتی توبولوزید B بر آپوپتوز ناشی از آلفا TNF در سلول های عصبی. Acta Pharmacol Sin. 2004، 25: 1276-1284.

28. Geng XC، Song LW، Pu XP، Tu PF: اثرات محافظتی عصبی گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید از Cistanches salsa در برابر 1-متیل-4-فنیل-1، 2، 3، 6- تتراهیدروپیریدین (MPTP) سمیت دوپامینرژیک در موش C57 ناشی از. بیول فارم بول. 2004، 27: 797-801. 10.1248/bpb.27.797.

29. He W، Shu X، Zong G، Shi M، Xiong Y، Chen M: تقویت کننده کلیه و یانگ که از عمل cistanche deserticola YC Ma قبل و بعد از آماده سازی حمایت می کند. ژونگگو ژونگ یائو زاژی. 1996، 21 (9): 534-537. 575

30. Shen LZ، Zhong XY، Wang SX: اثر سیستانچ کویر روی موش‌های صحرایی شن یانگ عادی و کم‌توان. ژونگ یائو یائولی یو لینچوانگ. 2001، 17 (1): 17-18.

31. Chen M، Zhao L، Jia W: مطالعه متابونومیک بر روی پروفایل های بیوشیمیایی یک مدل حیوانی ناشی از هیدروکورتیزون. J Proteome Res. 2005، 4 (6): 2391-2396. 10.1021/pr050158o.

32. چن کیو، یی نیویورک: مدل های حیوانی و داروهای کمبود یین و کمبود یانگ. روش شناسی تجربی تحقیقات فارماکولوژیک در طب سنتی چینی ویرایش شده توسط: Chen Q. 1993، Beijing: People's Health Publishing House، 982-984.

33. کمیته ملی فارماکوپه: فارماکوپه جمهوری خلق چین. 2005، Beijing: Press of Chemical Industry، 1: 90-

34. تجزیه و تحلیل داده های چند و مگا متغیری بخش اول: اصول و کاربردهای اساسی، ویرایش دوم اصلاح شده و بزرگ شده. [http://www.umetrics.com/default.asp/pagename/training_literature/c/5]

35. راهنمای کاربر SIMCA-P و SIMCA-P plus 11. [http://www.umetrics.com/default.asp/pagename/downloads{4}}userguide/c/3]

36. Chin HL, Su YC: مطالعه بر روی اثرات فارماکولوژیک Cistanche deserticola Ma. ژونگگو ژونگ یائو زاژی. 1993، 19: 143-146.

از: طب چینی جلد 3، شماره مقاله: 3 (2008)