HydroZitLa تشکیل سنگ اگزالات کلسیم را در موش های صحرایی نفرولیتیک مهار می کند و باعث افزایش طول عمر در نماتد Caenorhabditis Elegans می شود.

گلیکوزید سیستانچ همچنین می تواند فعالیت SOD را در بافت های قلب و کبد افزایش دهد و به طور قابل توجهی محتوای لیپوفوسین و MDA را در هر بافت کاهش دهد و به طور موثر رادیکال های مختلف اکسیژن فعال (OH-، H2O2 و غیره) را از بین ببرد و از آسیب DNA ناشی از آن محافظت کند. توسط رادیکال های OH گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید سیستانچ دارای توانایی مهار قوی رادیکال های آزاد، توانایی کاهش بالاتری نسبت به ویتامین C، بهبود فعالیت SOD در سوسپانسیون اسپرم، کاهش محتوای MDA و اثر محافظتی خاصی بر عملکرد غشای اسپرم هستند. پلی ساکاریدهای سیستانچ می توانند فعالیت SOD و GSH-Px را در گلبول های قرمز و بافت ریه موش های آزمایشگاهی مسن ناشی از D-گالاکتوز افزایش دهند و همچنین محتوای MDA و کلاژن را در ریه و پلاسما کاهش دهند و محتوای الاستین را افزایش دهند. اثر پاک کنندگی خوب بر روی DPPH، طولانی شدن زمان هیپوکسی در موش های پیر، بهبود فعالیت SOD در سرم، و به تاخیر انداختن انحطاط فیزیولوژیکی ریه در موش های آزمایشگاهی پیر. و این پتانسیل را دارد که دارویی برای پیشگیری و درمان بیماری های پیری پوست باشد. در عین حال، اکیناکوزید موجود در سیستانچ توانایی قابل توجهی در از بین بردن رادیکال های آزاد DPPH دارد و توانایی حذف گونه های فعال اکسیژن و جلوگیری از تخریب کلاژن ناشی از رادیکال های آزاد را دارد و همچنین اثر ترمیم خوبی بر آسیب آنیون رادیکال آزاد تیمین دارد.

روی Cistanche Norge کلیک کنید

【برای اطلاعات بیشتر:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】

بر اساس یافته های فعلی ما، HydroZitLa عملکرد ضد بیماری زایی را حداقل از طریق دو مسیر اعمال می کند. اول، دفع اگزالات ادراری را کاهش داد، ظرفیت تبلور CaOx ادرار را کاهش داد و سیترات را تامین کرد. دوم، حاوی پلی فنل‌های گیاهی بود که قادر به کاهش استرس اکسیداتیو و التهاب بودند و از این رو لیتوژنز CaOx را مهار می‌کردند. اساساً اگزالات به طور درون زا در کبد با استفاده از گلیوکسیلات به عنوان یک پیش ساز برجسته سنتز می شود. گلیوکسیلات توسط آنزیم گلیکولات اکسیداز (GO) از گلیکولات سنتز می شود و بیشتر توسط لاکتات دهیدروژناز (LDH) به اگزالات تبدیل می شود. ما دریافتیم که HydroZitLa به طور قابل توجهی دفع اگزالات ادرار را در موش‌های تحت درمان با EG کاهش می‌دهد. ما حدس زدیم که HydroZitLa از طریق کاهش آنزیم های کبدی درگیر در متابولیسم گلیوکسیلات، به ویژه LDH و GO، مسیر مصنوعی اگزالات در کبد را مهار می کند. مطالعه قبلی توسط Kailash و Varalakshmi نشان داد که عصاره ساقه موز سطوح GO و LDH کبدی را در موش‌های هیپراکسالوریک ناشی از سدیم گلیکولات کاهش می‌دهد. Poonguzhali و Chegu همچنین گزارش دادند که عصاره خام ساقه موز باعث کاهش اگزالات ادرار، اسید گلیکولیک و اسید گلیوکسیلیک در موش‌های هیپراکسالوریک ناشی از گلیکولات می‌شود. اخیراً پاتانکار و همکاران. نشان دادند که فرمول گیاهی آنها به نام Herbmed Plus (حاوی ساقه موز)، سطح فعالیت LDH را در بافت های کبد و کلیه کاهش می دهد. برای تأیید حدس و گمان ما، بیان آنزیم های کبدی و کلیوی درگیر در سنتز اگزالات در موش های EG تحت درمان با HydroZitLa باید بیشتر مورد بررسی قرار گیرد.

چندین خط شواهد قویاً تأیید می کنند که استرس اکسیداتیو، التهاب، و آسیب لوله های کلیوی به طور جدی در لیتوژنز CaOx دخیل هستند3،4،15،43-45. استرس اکسیداتیو ناشی از اگزالات و/یا کریستال‌های CaOx باعث آسیب لوله‌های کلیوی می‌شود که مکان‌هایی را برای هسته‌زایی کریستال، چسبندگی، احتباس، تجمع و در نهایت تشکیل نیدوس ایجاد می‌کند. علاوه بر این، استرس اکسیداتیو واکنش التهابی را فعال می کند که به نوبه خود فرآیند لیتوژنیک را تسریع می کند4،47،48. بنابراین، گیاه دارویی که دارای خواص آنتی اکسیدانی و ضد التهابی است، یک اقدام امیدوارکننده برای پیشگیری از تشکیل سنگ کلیه است. آگاروال و همکاران در مدل موش نفرولیتیک القا شده با EG نشان داده شد که برژنین (ترکیب فنلی فعال زیست فعال جدا شده از Bergenia ligulata) یک اثر ضد بیماریزای قوی برای کاهش استرس اکسیداتیو، بهبود اختلال عملکرد میتوکندری و کاهش آسیب و التهاب لوله‌ها دارد. روتین و کورکومین (مواد شیمیایی گیاهی شناخته شده بومی با خواص آنتی اکسیدانی و ضد التهابی) نشان داده شد که از آسیب توبولو بینابینی و رسوبات کریستالی در موش‌های نفرولیتیک ناشی از EG جلوگیری می‌کنند. همچنین نشان داده شد که پلی فنول‌های حاصل از دانه‌های انگور رسوبات کریستال CaOx داخل کلیه را در موش‌های صحرایی لیتیازیس ناشی از EG مهار می‌کنند، به طور قابل قبولی از طریق فعالیت آنتی اکسیدانی آنها. یک فرمول گیاهی آیورودا Herbmed برای کاهش آسیب التهابی و رسوبات کریستالی در کلیه موش‌های نفرولیتیک ناشی از EG نشان داده شد. در این مطالعه، ما نشان دادیم که HydroZitLa استرس اکسیداتیو داخل کلیوی، التهاب و رسوبات کریستالی CaOx را کاهش می‌دهد، که نشان می‌دهد که HydroZitLa برای جلوگیری از تشکیل سنگ کلیه، اثرات آنتی‌اکسیدانی و ضد التهابی دارد.

چندین پلی فنل گیاهی به طور تجربی ثابت شده است که برای افزایش طول عمر و به تاخیر انداختن پیری مفید هستند. رسوراترول شناخته شده ترین ترکیب پلی فنلی است که طول عمر را افزایش می دهد. در درجه اول از طریق فعال سازی سیرتوئین و کاهش استرس اکسیداتیو عمل می کند. اثر طول عمر رسوراترول آزمایش شده در مدل C. elegans در بین مطالعات با افزایش طول عمر متوسط ​​از 10 تا 65 درصد متفاوت است. 54،55. HydroZitLa به طور قابل توجهی طول عمر C. elegans نوع وحشی را تا 34 درصد بدون هیچ نشانه ای از سمیت افزایش داد، که نشان می دهد اثر افزایش طول عمر HydroZitLa با اثر رسوراترول قابل مقایسه است. محدودیت غذایی یک مکانیسم کلیدی شناخته شده در طول عمر است. نرخ پمپاژ حلق در مقایسه بین کرم‌های HydroZitLa و کرم‌های کنترل قابل مقایسه بود، که نشان می‌دهد افزایش طول عمر توسط HydroZitLa در نتیجه محدودیت‌های غذایی نبوده است.

HydroZitLa به طور قابل توجهی تجمع لیپوفوسسین رنگدانه سن اتوفلورسنت را در C. elegans کاهش داد که نشان دهنده اثر ضد پیری است. ROS و استرس اکسیداتیو القا کننده های شناخته شده SIPS هستند و استرس اکسیداتیو کوتاه شدن تلومرها را تسریع می کند. ما اخیراً نشان دادیم که اگزالات، COM و ادرار بیماران مبتلا به سنگ‌های CaOx باعث پیری زودرس، تنظیم مثبت p16 و ساییدگی تلومر در سلول‌های لوله‌ای کلیه از طریق استرس اکسیداتیو می‌شوند. پیری زودرس در سلول‌های HK{6}} در معرض H2O2، اگزالات و COM. اگرچه مکانیسم مولکولی برای این اثر ضد پیری توضیح داده نشده است، HydroZitLa برای جلوگیری مکانیکی از پیری زودرس از طریق مهار کوتاه شدن تلومر و کاهش بیان p16 پیشنهاد شده است.

اگرچه داروهای گیاهی و داروهای گیاهی به تدریج محبوب و در سطح جهانی پذیرفته می شوند، شواهد علمی در مورد اثربخشی و ایمنی آن باید ارائه شود و نباید به خطر بیفتد. اثر متقابل گیاه و دارو به سختی قابل پیش‌بینی است زیرا بسته به عوامل متعددی مانند پلی‌مورفیسم آنزیم سیتوکروم P450 و ناقل‌های دارو و شرایط پزشکی موجود، در بین افراد بسیار متفاوت است. اثرات نامطلوب مصرف همزمان گیاه و دارو باید به دقت بررسی شود تا تداخلات بالقوه گیاه دارویی شناسایی شود. شناخته شده ترین گیاهانی که به طور جدی با داروها تداخل داشته اند عبارتند از: سیر، بایجی، دانگوی، جینسنگ، جینکو، شیرین بیان، خار مریم، کاوا، فلفل سیاه و بلند، دانشن، هوانگکین، و خار مریم59. طبق اطلاعات ما، هیچ عارضه جانبی جدی یا تداخل دارویی برای ساقه موز، گل نخود آبی پروانه ای و چوب ساپان گزارش نشده است. در تایلند ساقه موز به عنوان یک ماده غذایی مصرف می شود. نوشیدن بیش از حد (مصرف بیش از حد) آب ساقه موز ممکن است باعث آلرژی، درد شکم و استفراغ شود، بنابراین مصرف متوسط ​​آن توصیه می شود. گل نخود آبی معمولاً در غذا به عنوان رنگ طبیعی استفاده می شود و همچنین از آن برای تهیه چای استفاده می شود. اثرات نامطلوب مصرف بیش از حد چای گل نخود پروانه ای، به عنوان مثال، ناراحتی معده، حالت تهوع، و واکنش های آلرژیک، به ندرت گزارش شده است. چوب ساپان نیز اغلب به عنوان یک رنگ خوراکی طبیعی استفاده می شود و در جوامع (از جمله جوامع در تایلند) معمولاً به عنوان یک نوشیدنی سالم مصرف می شود. با این حال، عملکرد ضد بارداری (ضد باروری در نرها) عصاره چوب ساپان در مدل موش نشان داده شده است، زیرا در اسپرم سازی اختلال ایجاد می کند. از طرف دیگر، چوب قلب Caesalpinia sappan L. به عنوان یک درمان دارویی برای علائم زنان از جمله اولیگومنوره و آمنوره استفاده می شود. بنابراین، ایمنی مصرف طولانی مدت HydroZitLa در انسان باید در کارآزمایی بالینی مشخص شود.

این مطالعه محدودیت هایی دارد. ترکیبات فعال دقیق مسئول عملکرد مهاری سنگ CaOx شناسایی و مشخص نشدند. مکانیسم های دقیق HydroZitLa برای مهار تشکیل سنگ CaOx در موش به طور گسترده مورد بررسی قرار نگرفت. اثر ضد بیماری زایی وابسته به دوز HydroZitLa مورد بررسی قرار نگرفت. دوز HydroZitLa که می تواند به طور قابل توجهی سطح سیترات ادرار را در موش های صحرایی نفرولیتیک افزایش دهد، مورد بررسی قرار نگرفت. مشخصات فنلی HydroZitLa باید بیشتر مورد بررسی قرار گیرد. مکانیسم ارتقاء طول عمر توسط HydroZitLa در C. elegans به طور فشرده مورد بررسی قرار نگرفت. در نهایت، ترکیبات خاصی در HydroZitLa که مسئول طول عمر و ضد پیری هستند، شناسایی و مشخص نشدند.

در نتیجه، HydroZitLa برای عادی سازی همزمان عوامل خطر تشکیل سنگ CaOx با تامین مایع، سیترات و آنتی اکسیدان های طبیعی توسعه داده شد. به طور تجربی، HydroZitLa رسوب CaOx داخل کلیه را در موش‌های نفرولیتیک مهار کرد. اثر مهاری سنگ CaOx HydroZitLa معادل سیترات پتاسیم مورد استفاده در حال حاضر (Uralyt-U) بود. HydroZitLa به طور موثر استرس اکسیداتیو را هم در شرایط in vitro و هم in vivo کاهش می دهد. به طور قابل توجهی، HydroZitLa طول عمر را افزایش داد و شروع پیری را در C. elegans به تاخیر انداخت. علاوه بر این، HydroZitLa به طور قابل توجهی از کوتاه شدن تلومر، بیان p16 و پیری زودرس در سلول های کلیه انسان جلوگیری کرد. این یافته‌های بالینی نشان می‌دهد که HydroZitLa یک جایگزین امیدوارکننده بالینی برای درمان نفرولیتیازیس CaOx است که با افزایش طول عمر و مزایای ضد پیری همراه است. آزمایشات بالینی برای تضمین اثربخشی درمانی HydroZitLa در انسان ضروری است.

مواد و روش ها

تولید HydroZitLa، محتوای آنتی اکسیدانی و واقعیت تغذیه. HydroZitLa یک کنسانتره نوشیدنی مشتق شده از گیاهان دارویی است که به صورت محلی در تایلند موجود است. این نوشیدنی با رقیق کردن کنسانتره HydroZitLa (55 میلی لیتر در یک کیسه در بسته) با آب آشامیدنی (تا حجم نهایی 500 میلی لیتر) تهیه می شود. دارای رنگ صورتی مایل به بنفش با طعم ترش و شیرین خوشمزه است. ترکیبات اصلی HydroZitLa عصاره آب ساقه موز (Musa sapientum L.) و اسید سیتریک (16 میلی اکیوالان در کیسه) بود. از گیاهان دارویی سنتی تای شامل Clitoria ternatea L. (پودر گل نخود آبی پروانه ای) و Caesalpinia sappan L. (پودر چوب ساپان) به عنوان رنگ دهنده طبیعی استفاده شد. استویا و سوکرالوز شیرین کننده بودند. این محصول در 10 آوریل 2019 توسط سازمان غذا و داروی تای در دسته نوشیدنی در ظرف در بسته تأیید شد (شماره سریال غذا 10–1-02,244–5-0005).

ظرفیت آنتی اکسیدانی کل (TAC) HydroZitLa 21.87±7.96 میلی گرم ظرفیت آنتی اکسیدانی معادل ویتامین C در هر کیسه بود (شکل تکمیلی 8). محتوای فنلی کل (TPC) 19.99 ± 0.83 میلی گرم معادل اسید گالیک / 1 0 0 گرم بود. محتوای کل فاونوئید (TFC) 4.59±0.31 میلی گرم معادل کاتچین در 100 گرم بود. برای کنترل کیفیت، TAC، TPC و TFC به عنوان پارامترهای کنترل کیفیت استفاده شد. سطوح TAC، TPC و TFC در عصاره‌های ساقه موز، گل نخود آبی پروانه‌ای و عصاره‌های چوب ساپان بین لات‌ها و زمان‌های نگهداری تفاوت معنی‌داری نداشتند. در تولید HydroZitLa، TAC، TPC، TFC و مقدار brix (2±17) به عنوان پارامترهای کنترل کیفیت برای حفظ سازگاری بین دسته‌ها استفاده شد.

کل انرژی HydroZitLa در هر کیسه (سرویس) 25 کیلو کالری بود. هیچ محتوای پروتئین، چربی و کلسترول شناسایی نشد. کل کربوهیدرات 6 گرم، شکر بود<1 g, and sodium was 10 mg. The potassium content was 240 mg/100 g. Soluble and insoluble dietary fibers were 0.74 and 0.43 g/100 g, respectively. Te pH of  HydroZitLa was 3.4.

ارزیابی سمیتحضور اشریشیا کلی، کلستریدیوم، گونه‌های سالمونلا، و استافیلوکوکوس اورئوس در HydroZitLa توسط دفتر کیفیت و ایمنی مواد غذایی، وزارت بهداشت عمومی، تایلند مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. مشخصات فلزی HydroZitLa توسط ICP-OES آنالیز شد.

سمیت حاد در داخل بدن HydroZitLa در موش توسط موسسه تحقیقات گیاهان دارویی، وزارت بهداشت عمومی، تایلند آزمایش شد. HydroZitLa یا آب (شاهد) به صورت خوراکی با دوز 20 میلی لیتر بر کیلوگرم (n=10 در هر گروه) به موش ها تجویز شد. موش ها به مدت 14 روز قبل از کالبدگشایی مشاهده شدند. ضایعات درشت در اندام های احشایی بین HydroZitLa و گروه کنترل مورد بررسی و مقایسه قرار گرفت.

سنجش تجمع CaOxکریستال‌های COM بذر تهیه شدند62 و به 5{2}} میلی‌گرم در میلی‌لیتر در 0 رقیق شدند.05 M Tris/{17}}. HydroZitLa، یا BSA، یا آب مقطر (خالی) (200 میکرولیتر) به سوسپانسیون COM دانه کار تازه (2 میلی لیتر) اضافه شد. پس از اختلاط، جذب در 620 نانومتر به عنوان پایه (AT0) اندازه گیری شد. پس از انکوباسیون در دمای 37 درجه به مدت 10 دقیقه، جذب مجدد در 620 نانومتر اندازه گیری شد (AT10). ضریب تجمع (AC) به صورت زیر محاسبه شد: AC{16}}((AT0- AT10)/10)×1000. مقدار AC بالاتر نشان دهنده تجمع COM بالاتر است.

خط سلولی، سمیت سلولی و تعیین ROS داخل سلولی.سلول‌های HK{{0}} (ATCC، VA، USA) در DMEM حاوی 10 درصد سرم جنین گاوی و 1 درصد Pen-Strep در دمای 37 درجه، 5 درصد CO2 و 95 درصد رطوبت نگهداری شدند. سمیت سلولی HydroZitLa در سلول‌های HK{8}} با روش MTT63 ارزیابی شد. سلول‌های HK{10}} (200 سلول در چاهک) کاشته شدند، یک شبه در یک صفحه چاهک رشد کردند و با غلظت‌های مختلف HydroZitLa (0 به عنوان شاهد، 1.25 درصد، 2.5 درصد، 5 درصد، 10) تیمار شدند. درصد، 20 درصد، 40 درصد، 50 درصد، 80 درصد و 100 درصد حجم / حجم) به مدت 24 ساعت. پس از شستشو، محلول MTT اضافه شد، به مدت 1 ساعت انکوبه شد و سپس دور انداخته شد. دی متیل سولفوکسید برای حل شدن کریستال های فورمازان اضافه شد. جذب در طول موج 570 نانومتر اندازه گیری شد. زنده ماندن سلولی (درصد) با استفاده از سلول های تیمار نشده به عنوان شاهد (100 درصد زنده ماندن) محاسبه شد.

مهار تولید ROS داخل سلولی توسط HydroZitLa با روش دی کلرو-دی هیدرو-فلورسین دی استات (DCFH-DA) در صفحه چاه 64،65 تعیین شد. سلول های HK{6}} با محلول 0.1 M DCFH-DA ترکیب شدند و در دمای 37 درجه به مدت 3{17}} دقیقه انکوبه شدند. پس از شستشو، سلول ها با H2O2 یا COM (با و بدون 10 درصد v/v HydroZitLa) به چالش کشیده شدند. شدت فلورسنت (تحریک شده در 485 نانومتر و گسیل در 535 نانومتر) در ابتدا (T0) و 60 دقیقه (T60) اندازه‌گیری شد. واحد فلورسنت دلخواه (AFU)، که سطح تولید ROS را نشان می‌دهد، به صورت زیر محاسبه شد: AFU= T60/T0.

اندازه گیری کربونیلاسیون پروتئینمحتوای کربونیل پروتئین، به عنوان شاخص اکسیداسیون پروتئین، طبق گزارش های قبلی ما 64-66 اندازه گیری شد. سلول‌های HK-2 تیمار شده (در ظرف 100- میلی‌متری) توسط بافر سنجش رادیوایمونو رسوب حاوی یک کوکتل بازدارنده پروتئاز لیز شدند. غلظت کل پروتئین با استفاده از روش برادفورد اندازه گیری شد. لیزات سلولی با محلول 10 میلی مولار دی‌نی‌تروفنیل هیدرازین (DNPH) یا هیدروکلراید 2 نیتروژن به مدت 1 ساعت در تاریکی انکوبه شد. اسید تری کلرواستیک 20 درصد سرد اضافه شد و به مدت 10 دقیقه روی یخ انکوبه شد. گلوله ها با سانتریفیوژ جمع آوری شدند، با اتیل استات: اتانول (1:1) شسته شدند و دوباره با 6 مولار گوانیدین HCl حل شدند. جذب (A) در 375 نانومتر اندازه‌گیری شد. محتوای کربونیل پروتئین نرمال شده توسط غلظت پروتئین کل به شرح زیر محاسبه شد: ((ADNPH - AHCl) × 45.45) / غلظت پروتئین.

مدل موش برای نفرولیتیازیس CaOx.EG (1 درصد v/v) مکمل در آب آشامیدنی (دسترسی آزاد به صورت آزاد، به مدت 35 روز) برای القای نفرولیتیازیس CaOx در موش‌ها استفاده شد. موش های صحرایی نر نژاد ویستار (6 تا 8 هفته، 180 تا 300 گرم) به چهار گروه تقسیم شدند، EG (n=6)، EG به علاوه HydroZitLa (n=6)، EG به علاوه Uralyt-U (n=6)، و گروه های کنترل عادی (n=2). همه موش ها در قفس های فولادی ضد زنگ در دمای 25 درجه تحت یک چرخه نور تا تاریکی 12:12 ساعت قرار گرفتند. دو موش کنترل عمدا فقط برای مقایسه رسوبات CaOx در کلیه موش ها و ایمونوهیستوشیمی استفاده شد، نه برای شیمی ادرار. HydroZitLa و Uralyt-U دو بار در روز (صبح و عصر) با دوز کل سیترات 2 میلی اکی والان در روز به اجبار تغذیه شدند. این دوز تجویز شده سیترات معادل 60.8 mEq سیترات در انسان بود که بر اساس تبدیل دوز پیشنهاد شده توسط ریگان-شاو و همکاران 67 محاسبه شد. در پایان مداخله (روز 35) نمونه‌های ادرار ساعت با استفاده از تیمول به عنوان نگهدارنده جمع‌آوری شد. موش ها با ایزوفلوران بیهوش و قربانی شدند. هر دو کلیه برداشته، بریده و در بافر فرمالین خنثی 10 درصد برای مطالعه بافت شناسی تثبیت شدند.

همه موش‌ها از مرکز حیوانات آزمایشگاهی ملی، دانشگاه ماهیدول پردیس سالایا، ناخونپاتوم، تایلند خریداری شدند. روش‌های آزمایشی توسط دستورالعمل‌های مربوط به حیوانات آزمایشی توسط شورای تحقیقات ملی تایلند انجام شد و توسط کمیته مراقبت و استفاده از حیوانات، دانشکده پزشکی، دانشگاه چولالانگکورن (شماره 022/2560) تأیید شد. مطالعه ما مطابق با دستورالعمل ARRIVE انجام شد.

رسوب CaOx در مقاطع کلیه توسط میکروسکوپ پلاریزه.بخش کلیه موش صحرایی تعبیه شده با پارافین ثابت شده با فرمالین توسط یک پردازشگر بافت خودکار تهیه شد. رنگ آمیزی H&E طبق روش استاندارد انجام شد. رسوبات کریستالی CaOx دوشکست در مقاطع رنگ آمیزی شده با H&E با استفاده از میکروسکوپ نور پلاریزه (OLYMPUS BX50، ژاپن) مشاهده شد.

رنگ آمیزی یاسو برای هیستوشیمی CaOx.مقاطع بافت کلیه پارافین زدایی شدند، هیدراته شدند، برای حذف فسفات کلسیم و کربنات کلسیم در اسید استیک 5 درصد به مدت 30 دقیقه غوطه ور شدند و با آب مقطر شسته شدند. اسید در آمونیوم 10 درصد به مدت 1 دقیقه. مقاطع رنگ آمیزی شده با اتانول 50 درصد شسته شده، با آب مقطر شسته شده، آبگیری، پاکسازی و سوار شدند. رسوبات CaOx سیاه زیر یک میکروسکوپ نوری مشاهده شدند.

رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمیپس از پارافینیزاسیون و آبگیری مجدد، بازیابی آنتی ژن با جوشاندن در بافر سیترات سدیم با استفاده از مایکروویو انجام شد. H2O2 درون زا با انکوباسیون با H2O2 0.3 درصد به مدت 30 دقیقه غیرفعال شد. اتصال غیر اختصاصی با انکوباسیون با سرم اسب طبیعی به مدت 20 دقیقه مسدود شد. سپس بخش‌ها با آنتی‌بادی اولیه 1:1،000 4-HNE (ab46545، Abcam، کمبریج، انگلستان) یا کاسپاز بریده شده{12}} (5A1E، Cell Signaling Technology، MA، USA) در دمای 4 درجه یک شبه انکوبه شدند. سپس با آنتی بادی ثانویه در دمای 37 درجه به مدت 30 دقیقه انکوباسیون شد. پس از شستشو، مقاطع با معرف ABC (کیت VECTASTAIN® ABC) به مدت 30 دقیقه انکوبه شدند، به مدت 5 دقیقه در معرف رنگ آمیزی دی آمینو بنزیدین 1 درصد خیسانده شدند و به مدت 5 دقیقه با هماتوکسیلین ضد رنگ آمیزی شدند. در نهایت، بخش‌ها آب‌گیری، پاک‌سازی، نصب و در زیر میکروسکوپ نوری مشاهده شدند.

اندازه گیری سیترات ادرار، اگزالات، اسید اوریک و iCOCI. سطح سیترات ادراری با استفاده از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (Varian Medical Systems، CA، USA) با استفاده از ستون ROAorganic Acid H plus (3{7}}0×7.8 mm) (Phenomenex، CA، USA) تعیین شد و شستشو داده شد. توسط 5 میلی مولار H2SO4 با سرعت جریان 0.5 میلی لیتر در دقیقه. سطح اگزالات و اسید اوریک ادرار با الکتروفورز مویرگی (Beckman Coulter, CA, USA) که در 25 درجه با ولتاژ 20- کیلوولت از هم جدا شده بود اندازه‌گیری شد. آزمایش iCOCI ادرار طبق گزارش قبلی ما 38 انجام شد.

C. elegans کرنش و نگهداری.سویه C. elegans نوع وحشی Bristol N2 و منبع غذایی آزمایشگاهی آن E. coli OP50 از مرکز ژنتیک Caenorhabditis، دانشگاه مینه سوتا، ایالات متحده آمریکا به دست آمد. آنها در صفحات آگار محیط رشد نماتد با چمن E. coli OP50 در دمای 20 درجه 70 نگهداری و نگهداری شدند.

سنجش طول عمرتجزیه و تحلیل طول عمر در محیط مایع ۷۱ انجام شد. به طور خلاصه، 10 نماتد بالغ جوان هماهنگ شده با سن به یک 24-صفحه چاهی با بافر M9 همراه با E. coli OP50 و 5-fuoro-2'- deoxyuridine برای جلوگیری از تولید نتاج منتقل شدند. غلظت های مختلف HydroZitLa با استفاده از آب مقطر به عنوان کنترل وسیله نقلیه اضافه شد. نماتدهای زنده هر 24 ساعت شمارش شدند. نماتدها زمانی مرده در نظر گرفته می شدند که به تحریک ملایم با استفاده از حلقه پلاتین پاسخ نمی دادند.

سنجش پمپاژ حلقپمپاژ حلقی (شاخص توانایی دریافت غذا) در نماتدهای بالغ جوان (~1{4}}) در مقایسه بین کنترل و مکمل HydroZitLa، با نظارت بر انقباض حلق به مدت 30 ثانیه در هر 24 ساعت زیر استریومیکروسکوپ (SMZ{) اندازه‌گیری شد. {3}}، Motic، چین) در روزهای 0 (قبل از مکمل)، 5، 10، و 1572.

سنجش لیپوفوسینتجمع لیپوفوسین در نماتدهای نوع وحشی پس از مکمل‌سازی با غلظت‌های مختلف HydroZitLa (20 درصد، 30 درصد، 40 درصد v/v) به مدت 5 روز بررسی شد. E. coli OP{5}}کرم تغذیه شده به عنوان شاهد استفاده شد. پس از مداخله، کرم ها با استفاده از بافر M9 چندین بار شسته شدند و روی یک لام شیشه ای داخل یک قطره سدیم آزید قرار گرفتند. تصویربرداری فلورسنت با استفاده از میکروسکوپ کانفوکال ZEISS LSM 700 انجام شد. تصاویر بیشتر با استفاده از نرم افزار Image J تجزیه و تحلیل شدند و شدت فلورسانس به عنوان واحد دلخواه (AU)72 ارائه شد.

اندازه گیری طول نسبی تلومر طول تلومر نسبی (RTL) در سلول‌های HK{0}} تیمار شده با H2O2 (25 میکرومولار)، اگزالات سدیم (NaOx، 900 میکرومولار) و COM (25 میکروگرم بر سانتی‌متر مربع) با یا بدون HydroZitLa (10 درصد v) اندازه‌گیری شد. /v). RTL توسط واکنش زنجیره ای پلیمراز کمی (qPCR) در زمان واقعی تعیین شد. بر اساس نسبت تعداد کپی تکرارهای تلومر به تعداد کپی یک ژن تک کپی (ژن 36B4) که متناسب با میانگین طول تلومر است محاسبه می شود. پرایمرهای مورد استفاده به شرح زیر بودند: تلومر (به جلو) 5′-CGGTTTGTTTGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTT-3′، تلومر (معکوس) 5′-GGC TTGCCTTACCCTTACCTACCTGTTTGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGGTT-3′، تلومر (معکوس) 5′-GGC TTGCCTTACCCTTACCTACCTGTTTGGTTTGGGTTTGGGTTTGGTTGTGGGGTT-3'، TGGGAAGGTGT AATCC{{23 }}′، and 36B4 (reverse) 5′-CCCATTCTATCATCAACGGGTACAA-3′. PCR در دمای 95 درجه به مدت 10 دقیقه و سپس 40 سیکل 95 درجه به مدت 15 ثانیه و 54 درجه به مدت 1 دقیقه تقویت شد.

رنگ آمیزی مضاعف SA--gal و p16.سلول‌های HK{0}} رشد کرده روی پوشش‌ها با H2O2، NaOx، و COM با و بدون 10 درصد v/v HydroZitLa به مدت 72 ساعت برای القای SIPS تیمار شدند. پس از درمان، سلول‌ها ثابت شدند و با محلول تازه آماده‌شده X-gal (Vivantis، مالزی) به مدت 12 تا 16 ساعت رنگ‌آمیزی شدند، شسته شدند، با 0.1 درصد تریتون X{10}} (Amresco، TX، ایالات متحده آمریکا) به مدت 3 دقیقه نفوذپذیر شدند. و برای اتصال غیر اختصاصی با 1 درصد سرم اسب طبیعی (Gibco، MA، USA) در دمای 37 درجه به مدت 1 ساعت مسدود شد. سلول‌ها سپس با آنتی‌بادی اولیه p16 1:10 (ab108349، Abcam) در دمای 4 درجه یک شبه انکوبه شدند، سپس با آنتی‌بادی ثانویه کونژوگه 1:10،{23}} Alexa Fluor® 488- فناوری سیگنالینگ سلولی) در 37 درجه به مدت 30 دقیقه. پوشش لکه‌دار با محیط نصب فلوروشیلد با 4'،6-دیامیدینو{29}}فنیلندول (Abcam) سوار شد. سلول‌های سالخورده SA{30} gal مثبت (آبی) و سلول‌های بیانگر p{32} (سبز) با استفاده از سیستم تصویربرداری EVOS FL Auto 2 (Thermo Fisher Scientific, MA, USA) مشاهده و تصویربرداری شدند.

تحلیل آماری.همه داده‌ها در صورت لزوم به صورت میانگین ± انحراف استاندارد یا میانه (محدوده بین چارکی) ارائه شدند. برای بررسی تفاوت بین دو گروه از آزمون t دو نمونه ای یا آزمون من ویتنی استفاده شد. از آنالیز واریانس یک طرفه یا آزمون کروسکال-والیس و به دنبال آن آزمون مقایسه چندگانه برای آزمون تفاوت بین سه گروه یا بیشتر استفاده شد. نرم افزار GraphPad Prism نسخه 9 (GraphPad Sofware Inc., CA, USA) برای محاسبات و نمودارها استفاده شد. پ<0.05 was considered significant.

منابع

1. Michel, AR Urolithiasis - جنبه های تاریخی، مقایسه ای و پاتوفیزیولوژیکی: یک بررسی. JR Soc. پزشکی 82، 669-672 (1989).

2. شاه، جی و ویتفیلد، HN سنگ کلیه در طول اعصار. BJU Int. 89, 801-810 (2002).

3. بونلا، سی و همکاران. بیان RNA پیام‌رسان پروتئین شیمی‌جذب مونوسیتی-1 و اینترلوکین-6 در کلیه‌های حاوی سنگ. BJU Int. 101، 1170-1177 (2008).

4. بونلا، سی و همکاران. فیبروز و شواهدی برای انتقال اپیتلیال - مزانشیمی در کلیه بیماران مبتلا به سنگهای استاغورن. BJU Int. 108، 1336–1345 (2011).

5. چوانگ، تی اف و همکاران. خطر بیماری مزمن کلیوی در بیماران مبتلا به سنگ کلیه - یک مطالعه کوهورت در سراسر کشور. BMC Nephrol. 21, 292 (2020).

6. Dhondup، T. et al. خطر ESRD و مرگ و میر در تشکیل دهنده سنگ کلیه و مثانه. صبح. جی. کلیه دیس. 72، 790–797 (2018).

7. Kum, F. et al. آیا سنگ ها هنوز هم می کشند؟ تجزیه و تحلیل مرگ ناشی از بیماری سنگ 1999-2013 در انگلستان و ولز. BJU Int. 118، 140-144 (2016).

8. Geraghty، RM، Cook، P.، Walker، V. & Somani، BK ارزیابی بار اقتصادی بیماری سنگ کلیه در بریتانیا: یک مطالعه کوهورت گذشته نگر با میانگین پیگیری 19 سال. BJU Int. 125، 586-594 (2020).

9. C. Türk (رئیس)، AN، A. Petrik، C. Seitz، A. Skolarikos (نایب رئیس)، K. Tomas & Guidelines همکاران: NF Davis، JFD، R. Lombardo، N. Grivas، Y. روحیل. راهنمای انجمن اروپایی اورولوژی (EAU) در مورد سنگ کلیه.

10. Jendle-Bengten، C. & Tiselius، HG پیگیری طولانی مدت تشکیل دهنده های سنگ که با دوز پایین سیترات پتاسیم سدیم درمان شده اند. Scand. J. Urol. نفرول. 34، 36-41 (2000).

11. Schwille, PO, Herrmann, U., Wolf, C., Berger, I. & Meister, R. Citrate و سنگ ادراری کلسیم ایدیوپاتیک راجعه. یک مطالعه آزمایشی طولی بر روی اثرات متابولیک سیترات پتاسیم خوراکی تجویز شده بر روی داروهای کوتاه‌مدت، میان‌مدت و طولانی‌مدت بیماران سنگی مرد. Urol. Res. 20، 145-155 (1992).

12. Tracy, CR & Pearle, MS Update در مدیریت پزشکی بیماری سنگ. Curr. نظر. Urol. 19، 200-204 (2009).

13. Mechlin, C., Kalorin, C., Asplin, J. & White, M. Splenda(R) تحمل مکمل سیترات پتاسیم خوراکی را برای پیشگیری از تشکیل سنگ بهبود می بخشد: نتایج یک کارآزمایی تصادفی دوسوکور. جی. اندورول. 25، 1541-1545 (2011).

14. Boonla، C. استرس اکسیداتیو در سنگ کلیه، گونه های اکسیژن فعال (ROS) در سلول های زنده، Cristiana Filip و Elena Albu، IntechOpen.

15. Boonla, C., Wunsuwan, R., Tungsanga, K. & Tosukhowong, P. ادراری {{1}هیدروکسی دی اکسی گوانوزین در بیماران مبتلا به سنگ کلیه افزایش می یابد. Urol. Res. 35، 185-191 (2007).

16. Khan, SR استرس اکسیداتیو ناشی از هیپراکسالوریا و آنتی اکسیدان برای محافظت از کلیه. Urol. Res. 33، 349-357 (2005).

17. خان، SR گونه های اکسیژن فعال به عنوان تعدیل کننده های مولکولی تشکیل سنگ کلیه اگزالات کلسیم: شواهدی از تحقیقات بالینی و تجربی. J. Urol. 189, 803-811 (2013).

18. کیتیکوویت، دبلیو و همکاران. افزایش آسیب DNA اکسیداتیو که در بیوپسی کلیه سنگ های مجاور در بیماران مبتلا به سنگ کلیه دیده می شود. Urolithiasis 42، 387-394 (2014).

19. یاسویی، تی و همکاران. درمان سنگ کلیه مبتنی بر پاتوفیزیولوژی. بین المللی J. Urol. 24، 32-38 (2017).

20. Huang, HS, Ma, MC & Chen, J. رژیم غذایی کم ویتامین E تشکیل کریستال اگزالات کلسیم را از طریق افزایش استرس اکسیداتیو در کلیه هایپر اگزالوریک موش تشدید می کند. صبح. جی. فیزیول. کلیوی. فیزیول. 296، F{3}} (2009).

21. Huang, HS, Chen, J., Chen, CF & Ma, MC ویتامین E تشکیل کریستال در کلیه های موش صحرایی را تضعیف می کند: نقش مرگ سلولی لوله های کلیوی و مهارکننده های کریستالیزاسیون. کلیه بین المللی 70, 699-710 (2006).

22. Tamilselvan, S. & Menon, M. ویتامین E با بهبود وضعیت آنتی اکسیدانی بافت کلیه از رسوب کریستال اگزالات کلسیم ناشی از هیپراکسالوریا در کلیه جلوگیری می کند. BJU Int. 96، 117-126 (2005).

23. Tamilselvan, S. & Selvam, R. اثر ویتامین E و مانیتول بر احتباس اگزالات کلسیم کلیه در نفرولیتیازیس تجربی. هندی جی بیوشیم. بیوفیز. 34، 319-323 (1997).

24. Butterweck, V. & Khan, SR داروهای گیاهی در مدیریت سنگ کلیه: جایگزین یا مکمل؟ Planta Med. 75، 1095-1103 (2009).

25. Kasote, DM, Jagtap, SD, Tapa, D., Khyade, MS & Russell, WR داروهای گیاهی برای سنگهای ادراری مورد استفاده در هند و چین: بررسی. J. Ethnopharmacol. 203، 55-68 (2017).

26. Abu Zarin, M., Tan, JS, Murugan, P. & Ahmad, R. بررسی فعالیت بالقوه ضد سنگ کلیه از انواع مختلف عصاره شبه ساقه موسی در مهار تبلور اگزالات کلسیم. BMC Complement Med. تر. 20, 317 (2020).

27. Kailash, P. & Varalakshmi, P. اثر آب ساقه موز بر تغییرات بیوشیمیایی کبد موشهای صحرایی طبیعی و هیپراکسالوریک. هندی J. Exp. Biol. 30، 440-442 (1992).

28. Prasad, KV, Bharathi, K. & Srinivasan, KK ارزیابی موسا ( رقم بهشتی Linn.) – آب ساقه "Puttubale" برای فعالیت ضد سنگی در موش های صحرایی آلبینو. هندی جی فیزیول. فارماکول. 37, 337-341 (1993).

29. Panigrahi, PN, Dey, S., Sahoo, M. & Dan, A. اثر ضد سنگی و آنتی اکسیدانی Musa paradisiaca pseudostem بر نفرولیتیازیس ناشی از اتیلن گلیکول در موش صحرایی. هندی جی فارماکول. 49، 77-83 (2017).

30. Poonguzhali, PK & Chegu, H. Te تاثیر عصاره ساقه موز بر عوامل خطر ادراری سنگ در موشهای صحرایی نرمال و هایپر اگزالوریک. برادر J. Urol. 74، 23-25 ​​(1994).

31. Pillai, RG هسته کاذب موسی در درمان سنگ های ادراری. Anc Sci Life. 15، 2-6 (1995).

32. Lordumrongkiat, N., Chotechuang, N., Madared, N., Jindatip, D. & Boonla, C. فنولیک کل، فلاونوئید کل و ظرفیت آنتی اکسیدانی کل نوشیدنی مشتق شده از گیاهان دارویی: HydroZitLa. چولا مد. J. 64, 381-388 (2020).

33. سخایی، ک. فارماکولوژی بیماری سنگ. Adv. دیس مزمن کلیه 16، 30-38 (2009).

34. Baumann, JM & Afolter, B. نقش متناقض ماکرومولکول های ادراری در تجمع اگزالات کلسیم: یک درخواست بیشتر برای افزایش دیورز در متافیلاکسی سنگ. Urolithiasis 44، 311-317 (2016).

35. ردی، ای جی و همکاران. اثرات ضد تشنجی و آنتی اکسیدانی عصاره ساقه موسی ساپینتوم بر مدل های تجربی حاد و مزمن صرع. Pharmacogn. Res. 10، 49-54 (2018).

36. Jaafar, NF, Ramli, ME & Mohd Salleh, R. شرایط استخراج بهینه Clitorea ternatea fower بر فعالیت های آنتی اکسیدانی، فنول کل، فلاونوئید کل و محتوای آنتوسیانین کل. تروپ زندگی علمی. Res. 31، 1-17 (2020).

37. Nirmal, NP, Rajput, MS, Prasad, RG & Ahmad, M. Brazilin از Caesalpinia sappan heartwood و فعالیتهای دارویی آن: بررسی. پیمان آسیایی جی تروپ. پزشکی 8, 421-430 (2015).

38. More-Krong، P. et al. اعتبار سنجی بالینی آزمایش شاخص تبلور اگزالات کلسیم (iCOCI) واکنش نشان داده شده با ایندول برای تشخیص سنگ ادراری اگزالات کلسیم. علمی Rep. 10, 8334 (2020).

39. یاسویی، تی و همکاران. اثرات سیترات بر تشکیل سنگ کلیه و بیان استئوپونتین در مدل سنگ کلیه موش صحرایی Urol. Res. 29، 50-56 (2001).

40. قائنی، ف.ال.، امین، ب.، حریری، ع.ت.، میبدی، NT و حسین زاده، ح. اثرات ضد سنگی کروسین بر لیتیازیس ناشی از اتیلن گلیکول در موش صحرایی. Urolithiasis 42، 549-558 (2014).

41. Holmes, RP & Assimos, DG Glyoxylate synthesis و مدولاسیون و تأثیر آن بر سنتز اگزالات. J. Urol. 160، 1617-1624 (1998).

42. Patankar, S., Fanthome, B. & Bhalerao, SS Efficacy of herbed plus در موشهای سنگی ادراری: یک مطالعه تجربی. J. آیورودا انتگرال. پزشکی 11، 250–255 (2020).

43. Chaiyarit, S. & Tongboonkerd, V. اختلال عملکرد میتوکندری و بیماری سنگ کلیه. فیزیول جلو. 11, 566506 (2020).

44. Holoch، PA & Tracy، CR آنتی اکسیدان ها و تاریخچه سنگ کلیه گزارش شده توسط خود: بررسی ملی سلامت و تغذیه. جی. اندورول. 25، 1903-1908 (2011).

45. خان، اس آر آیا استرس اکسیداتیو، ارتباطی بین نفرولیتیازیس و چاقی، فشار خون بالا، دیابت، بیماری مزمن کلیوی، سندرم متابولیک است؟ Urol. Res. 40، 95-112 (2012).

46. ​​هیروس، ام. و همکاران. آسیب سلول های اپیتلیال لوله های کلیوی و استرس اکسیداتیو باعث ایجاد کریستال اگزالات کلسیم در کلیه های موش می شود. بین المللی J. Urol. 17، 83-92 (2010).

47. خان، SR گونه های فعال اکسیژن، التهاب و نفرولیتیازیس اگزالات کلسیم. ترجمه آندرول. Urol. 3، 256-276 (2014).

48. بونلا، سی و همکاران. پروتئین‌های التهابی و فیبروتیک به عنوان ترکیبات پروتئینی کلیدی در ادرار و ماتریکس سنگ بیماران مبتلا به سنگ کلیه شناسایی شده‌اند. کلین. چیم. Acta 429, 81–89 (2014).

49. Aggarwal، D.، Gautam، D.، Sharma، M. & Singla، SK Bergenin با معکوس کردن اختلال عملکرد میتوکندری در مدل موش هایپراکسالوریک ناشی از اتیلن گلیکول، آسیب کلیوی را کاهش می دهد. یورو J. Pharmacol. 791, 611-621 (2016).

50. Ghodasara, J., Pawar, A., Deshmukh, C. & Kuchekar, B. اثر مهاری روتین و کورکومین بر سنگ ادراری ناشی از آزمایش اگزالات کلسیم در موش صحرایی. Pharmacogn. Res. 2, 388-392 (2010).

51. Grases، F. et al. اثرات پلی فنول های دانه انگور بر لیتیازیس کلیه. اکسید. پزشکی سلول. لانگف. 2015, 813737 (2015).

52. Cherniack، EP تأثیر بالقوه پلی فنل های گیاهی بر روند پیری. Forsch Complementmed. 17، 181-187 (2010).

53. Wood, JG et al. فعال کننده های سیرتوئین محدودیت کالری را تقلید می کنند و پیری را در متازوئن ها به تاخیر می اندازند. Nature 430, 686-689 (2004).

54. Bonkowski, MS & Sinclair, DA آهسته کردن پیری از طریق طراحی: ظهور NAD(+) و ترکیبات فعال کننده sirtuin. نات کشیش مول. سلول. Biol. 17، 679–690 (2016).

55. Bhullar، KS & Hubbard، BP طول عمر و افزایش طول عمر توسط رسوراترول. بیوشیم. بیوفیز. Acta. 1852، 1209-1218 (2015).

56. von Frieling, J. & Roeder, T. عواملی که بر ترجمه محدودیت غذایی به زندگی طولانی‌تر تأثیر می‌گذارند. IUBMB Life 72, 814–824 (2020).

57. von Zglinicki، T. استرس اکسیداتیو تلومرها را کوتاه می کند. Trends Biochem Sci. 27, 339-344 (2002).

58. Chuenwisad، K. et al. پیری زودرس و کوتاه شدن تلومر ناشی از استرس اکسیداتیو ناشی از اگزالات، اگزالات کلسیم مونوهیدرات و ادرار بیماران مبتلا به نفرولیتیازیس اگزالات کلسیم. جلو. ایمونول. 12, 696486 (2021).

59. Hu, Z. و همکاران. تداخلات گیاهی و دارویی: مروری بر ادبیات. Drugs 65, 1239-1282 (2005).

60. Susanti, S. & Imannura, P. اثر عصاره Secang Wood (Ceasalpinia Sappan L.) بر مورفولوژی اسپرم و فرآیند برگشت پذیر در موش های صحرایی نر. در جریان دومین کنفرانس بین المللی مشترک. شابک: 978-602-5842-03-0 (2018).

61. کیم، بی اس و همکاران. Caesalpinia sappan با سرکوب بیان پیروات دهیدروژناز کیناز 1 باعث مرگ سلولی آپوپتوز در سلول‌های 12Z آندومتر نابجا می‌شود. انقضا تر. پزشکی 21, 357 (2021).

62. Boonla, C., Youngjermchan, P., Pumpaisanchai, S., Tungsanga, K. & Tosukhowong, P. فعالیت لیتوژنیک و ارتباط بالینی لیپیدهای استخراج شده از ادرار و سنگ بیماران نفرولیتیازیس. Urol. Res. 39، 9-19 (2011).

63. Kloypan, C., Srisa-art, M., Mutirangura, A. & Boonla, C. LINE{2}} هیپومتیلاسیون القا شده توسط گونه های فعال اکسیژن از طریق تخلیه S-adenosylmethionine واسطه می شود. بیوشیمی سلولی کارکرد. 33, 375-385 (2015).

64. Whongsiri, P., Phoyen, S. & Boonla, C. استرس اکسیداتیو در سرطان اوروتلیال: اندازه گیری کربونیلاسیون پروتئین و تولید درون سلولی گونه های اکسیژن فعال. روش ها مول. Biol. 1655، 109–117 (2018).

65. Whongsiri، P. et al. استرس اکسیداتیو و فعال شدن مجدد خط{1}} در سرطان مثانه از طریق تشکیل کروماتین فعال به طور اپی ژنتیکی مرتبط هستند. رادیک آزاد. Biol. پزشکی 134، 419-428 (2019).

66. Whongsiri، P. et al. LINE-1 پروتئین ORF1 توسط گونه‌های اکسیژن فعال تنظیم می‌شود و با پیشرفت کارسینوم یوروتلیال مثانه مرتبط است. ژنوم سرطان. پروتئوم 15، 143-151 (2018).

67. Reagan-Shaw, S., Nihal, M. & Ahmad, N. ترجمه دوز از مطالعات حیوانی به انسان مورد بازبینی مجدد قرار گرفت. FASEB J. 22, 659-661 (2008).

68. Yasue, T. شناسایی هیستوشیمیایی اگزالات کلسیم. Acta Histochem. سیتوشیم. 2, 83-95 (1969).

69. ایوان، AP و همکاران. پلاک راندال در بیماران مبتلا به سنگ کلیه در غشاهای پایه حلقه های نازک هنله شروع می شود. جی. کلین. سرمایه گذاری. 111, 607-616 (2003).

70. Prasanth, MI, Santoshram, GS, Bhaskar, JP & Balamurugan, K. Ultraviolet-A باعث ایجاد پیری در نماتد مدل Caenorhabditis elegans در یک مسیر وابسته به DAF-16 می شود. Age (Dordr) 38, 27 (2016).

71. Brimson، JM، Prasanth، MI، Plaingam، W. & Tencomnao، T. Bacopa monnieri (L.) wettst. عصاره در برابر سمیت گلوتامات محافظت می کند و طول عمر Caenorhabditis elegans را افزایش می دهد. جی. سنت. مجتمع. پزشکی 10، 460–470 (2020).

72. Prasanth، MI، Brimson، JM، Chuchawankul، S.، Sukprasansap، M. & Tencomnao، T. اثرات ضد پیری، مقاومت در برابر استرس و محافظت عصبی از Cleistocalyx nervosum var. عصاره میوه نوشدارویی با استفاده از مدل Caenorhabditis elegans. اکسید. پزشکی سلول. لانگف. 2019, 7024785 (2019).

73. اندازه گیری تلومر Cawthon، RM توسط PCR کمی. Nucleic Acids Res. 30, e47 (2002).

قدردانی

این مطالعه از نظر مالی توسط صندوق تحقیقاتی شکاف از وزارت علوم و فناوری، آژانس ملی توسعه علم و فناوری (NSTDA) و دانشگاه چولالانگکورن (GB-rgf_60_2905_0003 به CB) و توسط تحقیقات علمی تایلند و نوآوری، بخش صنعت (RDG6150088 به CB)، و دانشکده پزشکی، دانشگاه چولالانگکورن (صندوق تطبیق). NL 90مین سالگرد تأسیس صندوق دانشگاه چولالانگکورن (صندوق موقوفه Ratchadaphiseksomphot) را دریافت کرد. نویسندگان با سپاسگزاری از حمایت تحقیقاتی و نوآوری ارائه شده توسط مرکز فناوری دانشگاه چولالانگکورن و صندوق تحقیقات و نوآوری علوم تایلند (TSRI) (CU{4}}FRB640001_01_2) قدردانی می کنند. با تشکر از خانم ناچا مادرد برای کمک عالی آنها. از کارکنان مرکز حیوانات دانشکده پزشکی دانشگاه چولالانگکورن سپاسگزار باشید. با تشکر از دستیار پروفسور دکتر سیتیچای اوکریچون و پروفسور دکتر ماناتیپ اوزیری برای حمایت آنها از استفاده از میکروسکوپ پلاریزه.

مشارکت های نویسنده

NL: آزمایشات سلولی و موش را انجام داد و داده ها را جمع آوری کرد. NC: داده ها را جمع آوری کرد و به درک ایده تحقیق و تجزیه و تحلیل داده ها کمک کرد. MP: تصور و انجام آزمایش C. elegans، و انجام تجزیه و تحلیل داده های C. elegans. دی جی: در آزمایشات ایمونوهیستوشیمی و تصویربرداری کمک کرد. CM: در برش بافت کمک کرد. KC: آزمایش‌های کوتاه‌سازی و پیری تلومر را انجام داد. AL: برای آزمایش موش به امکانات حیوانات دسترسی پیدا کرد. TT: به تصور و طراحی آزمایش C. elegans کمک کرد. CB: مطالعه را تصور و طراحی کرد، تجزیه و تحلیل آماری را انجام داد و دستنوشته را نوشت. همه نویسندگان مقاله را بررسی کردند.

منافع رقابتی

CB، NC و NL مخترعان HydroZitLa هستند. دانشگاه Chulalongkorn و مخترعان مالکیت معنوی HydroZitLa را در اختیار دارند. هیچ یک از نویسندگان دیگر هیچ گونه تضاد منافعی برای اعلام در مورد اثر حاضر ندارند.

اطلاعات تکمیلی

اطلاعات تکمیلینسخه آنلاین حاوی مطالب تکمیلی موجود در وب سایت است.

مکاتبهو درخواست مواد باید به CB خطاب شود

اطلاعات مربوط به چاپ مجدد و مجوزهادر وب سایت موجود است.

یادداشت ناشرSpringer Nature در مورد ادعاهای قضایی در نقشه های منتشر شده و وابستگی های سازمانی بی طرف باقی می ماند.

【برای اطلاعات بیشتر:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】