تأثیر رژیم غذایی پلی ساکارید جلبک دریایی بر رشد، فراوانی میکروبی، و رشد و بیان ژن‌های مرتبط با ایمنی میگوی ساق سفید اقیانوس آرام (Litopenaeus Vannamei)

خلاصه:

هدف این کار تعیین تاثیر مکمل غذایی پلی ساکارید استخراج شده از جلبک های دریایی قهوه ای Sargassum dentifolium بر شاخص های رشد، استفاده از خوراک، ترکیبات بیوشیمیایی، فراوانی میکروبی، بیان ژن های مربوط به رشد و ایمنی، و ژن های استرس میگوی سفید اقیانوس آرام Litopenaeus است. وانامی در مجموع 360 پس لارو L. vannamei به طور تصادفی در یک 12-آکواریوم شیشه ای (40 L از هر) با تراکم 30 میگو با وزن اولیه توزیع شدند. از (0.0017 ± 0.001 گرم).

در طول آزمایش آزمایشی {{0}}روزه، همه لاروهای میگو با رژیم غذایی مربوطه خود با ۱۰ درصد وزن کل بدن، سه بار در روز تغذیه شدند. سه جیره آزمایشی با سطوح مختلف پلی ساکارید جلبک دریایی (SWP) تهیه شد. جیره کنترل پایه هیچ سطح پلی ساکارید (SWP0) نداشت، در حالی که SWP1، SWP2 و SWP3 به ترتیب حاوی پلی ساکاریدها در غلظت های 1، 2 و 3 گرم در کیلوگرم جیره بودند. جیره های مکمل شده با سطوح پلی ساکارید بهبود قابل توجهی در افزایش وزن و میزان بقا در مقایسه با جیره شاهد نشان دادند. ترکیب بیوشیمیایی کل بدن و فراوانی میکروبی (تعداد کل باکتری‌های هتروتروف و گونه‌های ویبریو) L. vannamei تفاوت معنی‌داری را بین جیره‌های تیمار شده با پلی‌ساکارید در مقایسه با شاهد نشان داد.

در پایان آزمایش تغذیه، مکمل‌های غذایی سطوح پلی‌ساکارید بیان ژن‌های مرتبط با رشد (فاکتورهای رشد شبه انسولین (IGF-I، IGF-II)، ژن‌های مرتبط با ایمنی (پروتئین اتصال به گلوکان) را افزایش داد. Bgp)، پروفنولاکسیداز (ProPO)، لیزوزیم (Lys) و Crustin) و ژن‌های استرس (Superoxide dismutase (SOD) و GPx) در بافت عضلانی L. vannamei. میزان 2 گرم در کیلوگرم پلی ساکارید به عنوان یک افزودنی غذایی باعث افزایش وزن و میزان بقای L. vannamei شد، در حالی که سطح ترکیبی 3 گرم در کیلوگرم در کیلوگرم فراوانی میکروب های بیماری زا را کاهش می دهد و رشد و ایمنی را افزایش می دهد. و بیان ژن مرتبط با استرس L. vannamei.

واژه‌های کلیدی: دنتی‌فولیوم Sargassum; افزودنی های خوراک؛ صنعت میگو؛ عملکردهای رشد؛ ژن های مرتبط با رشد؛ ژن های مرتبط با ایمنی؛ ژن های استرس

سوپراکسید دیسموتاز (سوپراکسید دیسموتاز، SOD) یک آنزیم آنتی اکسیدانی درون سلولی است که می تواند رادیکال های مضر سوپراکسید را به اکسیژن و یون های هیدروکسید تبدیل کند که برای سلول ها بی ضرر هستند. ایمنی توانایی بدن برای شناسایی و حمله به پاتوژن های خارجی و سلول های غیر طبیعی است.

مطالعات نشان داده اند که هر دو سلول T و B در سیستم ایمنی به فرآیندهای متابولیک اکسیداتیو خاصی برای حفظ عملکرد طبیعی خود نیاز دارند. با این حال، متابولیسم اکسیداتیو بیش از حد، تعداد زیادی رادیکال‌های آزاد را تولید می‌کند که منجر به آسیب اکسیداتیو سلولی و کاهش عملکرد سیستم ایمنی می‌شود. SOD می تواند رادیکال های آزاد سوپراکسید اضافی را حذف کند، از سلول ها در برابر آسیب اکسیداتیو محافظت کند و ایمنی را بهبود بخشد. علاوه بر این، این مطالعه همچنین نشان داد که SOD همچنین می تواند به عنوان یک مولکول سیگنال برای انتقال اطلاعات بین سلول ها و تنظیم فرآیندهای بیولوژیکی مهم مانند رشد، تمایز و عملکرد سلول های ایمنی عمل کند. بنابراین، رابطه نزدیکی بین SOD و ایمنی وجود دارد.

از این منظر باید به بهبود ایمنی در زندگی خود توجه کنیم. در کشف ما، سیستانچ می تواند به طور قابل توجهی ایمنی را بهبود بخشد. سیستانچ حاوی انواع ترکیبات فعال بیولوژیکی مانند پلی ساکاریدها، دو قارچ، هوانگ لی و غیره است، این مواد می توانند سلول های مختلف سیستم ایمنی را تحریک کرده و فعالیت ایمنی آنها را افزایش دهند.

روی فواید سلامتی سیستانچ کلیک کنید

1. معرفی

صنعت آبزی پروری میگو رشد سریعی را تجربه کرده و به مهم ترین و پیشروترین بخش آبزی پروری تبدیل شده است [1،2]. اگرچه صنعت میگو به سرعت توسعه یافته است، چالش هایی که کشاورزان با آن مواجه هستند افزایش نرخ رشد، رژیم های غذایی با قیمت پایین و کاهش شیوع بیماری است [3،4]. علاوه بر این، مصرف میگو در جهان طی ده سال گذشته افزایش یافته است و متخصصان تغذیه را مجبور کرده است تا بسیاری از مواد حاصل از کشاورزی را در رژیم غذایی حیوانات آبزی بگنجانند [1،5،6]. میگوی سفید پا در اقیانوس آرام (Litopenaeus vannamei) اغلب در سرتاسر جهان رشد می کند و بیش از 70 درصد از کل کشت میگو در سراسر جهان را به دست می آورد [7،8]. برای حفظ صنعت میگو در سرتاسر جهان، بسیاری از مسائل مانند کیفیت پایین آب، ماندگاری پایین و بهبود صنعت رژیم غذایی باید حل شوند [9-14]. علاوه بر این، تغییرات آب و هوا و تأثیر منفی آلودگی محیطی مشکلات مهمی هستند که پایداری آبزی پروری، شیلات، اکوسیستم های آبی و حیوانات آبزی را تا کنون محدود کرده اند [15-20].

از این رو، رژیم غذایی میگو با استفاده از چندین استراتژی برای مقابله با چنین توسعه جهانی در بخش پرورش میگو گسترش یافته است [10،21]. یکی از اساسی‌ترین استراتژی‌ها، مکمل‌های افزودنی خوراک است که برای بسیاری از گونه‌های میگو به‌عنوان محرک رشد، تقویت‌کننده ایمنی و رویکرد مقاومت به بیماری جایگزین بسیار مهم است [22،23]. گیاهان آبزی (ریزجلبک ها و جلبک های دریایی) هنوز به طور گسترده در بسیاری از بخش های مهم مانند افزودنی های خوراک آبی [24]، تقویت کننده های رشد گیاه [25]، گیاه پالایی [26-30]، مکمل های غذایی انسان [31،32]، داروسازی استفاده می شوند. [33،34]، مواد آرایشی [35،36]، فعالیت های ضد میکروبی [37،38]، و انرژی زیستی [39،40].

همانطور که در سال 2018 گزارش شد، تولید جهانی جلبک دریایی (صید و پرورش وحشی) حدود 34.4 میلیون تن، با ارزش صنعتی حدود 13.3 میلیارد دلار بود [41]. این تولید از حدود 35 کشور می آید، در حالی که بزرگترین تولید کننده که بیش از 99 درصد تولید می کند، چین است [42]. جلبک های دریایی دارای سطوح بالایی از پروتئین ها، فیبرها، ویتامین ها، اسیدهای چرب، مواد معدنی، رنگدانه ها و چندین ترکیب زیست فعال هستند [43-46].

در میان خانواده جلبک‌های دریایی، جلبک‌های دریایی قهوه‌ای به‌عنوان منبع بالایی از قند شناخته می‌شوند که می‌توانند موجودات آبزی را از چندین اثر مضر محافظت کنند، در حالی که پلی‌ساکارید آن‌ها به‌طور متوالی به عنوان افزودنی خوراک برای تیلاپیا نیل [47] و تیلاپیا قرمز [2] استفاده شده است. ادبیات موجود نشان داده است که پلی ساکارید استخراج شده از جلبک دریایی به دلیل ترکیب و ساختار پلی ساکاریدی (درجه انشعاب، جانشین ها، سولفاته شدن و نوع پیوندها) می تواند ایمنی ذاتی را تقویت کرده و مقاومت در برابر عفونت پاتوژن میگو را تقویت کند [48-50]. ) که کاملاً با گیاهان زمینی متفاوت هستند [51،52] جلبک دریایی قهوه ای دنتی فرم Sargassum حاوی پلی ساکارید فراوان است که یک منبع غنی در مصر است، تأیید شده است که خواص دارویی متعددی مانند ضد تومور، آنتی اکسیداسیون، خون سازی، تعدیل ایمنی دارد. و محافظت از دستگاه گوارش، در حالی که گزارش شده است که تجویز رژیم غذایی باعث بهبود پاسخ های ایمنی غیر اختصاصی در ماهی ها می شود [2].

علی‌رغم اهمیت افزودنی‌های خوراکی که برای میگوی سفید پا در اقیانوس آرام استفاده می‌شود، اطلاعات کمی در مورد کاربرد پلی‌ساکاریدهای تهیه‌شده از جلبک‌های دریایی قهوه‌ای در صنعت افزودنی خوراک میگو وجود دارد [53،54]. محرک‌های ایمنی به‌عنوان مواد مصنوعی اهمیت دارند که با تحریک پاسخ‌های ایمنی، ظرفیت سیستم ایمنی را برای مبارزه با عفونت‌ها و بیماری‌ها افزایش می‌دهند. باکتری ها و محصولات باکتریایی، کربوهیدرات های پیچیده، عوامل غذایی، عصاره های حیوانی، سیتوکین ها، لکتین ها، عصاره های گیاهی، و داروهای مصنوعی مانند لوامیزول همگی نمونه هایی از محرک های ایمنی هستند که در حال حاضر در دسترس هستند [55]. آنتی بیوتیک ها در رژیم غذایی ماهی های پرورشی و سخت پوستان معمولاً برای کنترل عفونت بیماری و همچنین برای بهبود بقا و رشد استفاده می شود. با این حال، به دلیل مقاومت دارویی و تجمع مواد شیمیایی در بافت‌های آبزیان، که احتمالاً می‌تواند برای سلامت عمومی خطرناک باشد، به طور گسترده مورد انتقاد قرار گرفته است. از طرف دیگر، محرک‌های طبیعی ایمنی مانند پروبیوتیک‌ها و پری‌بیوتیک‌ها معمولاً برای استفاده در خوراک‌ها برای تقویت مؤثر رشد و پاسخ ایمنی و کنترل بیماری‌های مختلف در حیوانات آبزی پیشنهاد می‌شوند [56].

اثرات تحریکی محرک های ایمنی مانند گلوکان، کیتوزان، نوکلئوتیدها، لیپوپلی ساکارید (LPS)، آلژینات سدیم و سایر پلی ساکاریدها موضوع چندین کار بر روی ماهی و سخت پوستان بوده است [55،57].

اخیراً توجه ویژه ای به استفاده از پری بیوتیک ها به عنوان جایگزین طبیعی آنتی بیوتیک ها و محرک های ایمنی در آبزی پروری شده است. پلی ساکاریدهای عملکردی به دلیل پیوندهای -1، 3 یا -1، مواد غیر قابل هضم هستند. طبق گزارش ها، مصرف پلی ساکاریدهای کاربردی می تواند عملکرد رشد را بهبود بخشد و پاسخ ایمنی و مقاومت در برابر بیماری را در حیوانات آبزی افزایش دهد [58]. طبق مطالعات قبلی، رژیم های غذایی حاوی پلی ساکاریدهای خاص، از جمله گیاهان دارویی و پلی ساکاریدهای مشتق شده از دریا، ممکن است سرعت رشد را از نظر سیستم ایمنی و وضعیت گوارشی در ماهی و میگو بهبود بخشد [59-61].

مقاومت به بیماری با افزایش پاسخ‌های سلولی و هومورال، از جمله فاگوسیتوز، فعالیت باکتری‌کشی، فعالیت فنل اکسیداز (PO)، انفجار تنفسی، سوپراکسید دیسموتاز (SOD) و فعالیت‌های لیزوزیم در سخت‌پوستان مرتبط است [62]. اطلاعات ضروری در مورد فعال سازی و تنظیم سیستم ایمنی با بیان ژن های مرتبط با ایمنی در میگو آشکار می شود [63]. پروتئین‌های تشخیص الگو (PRPs)، که به مولکول‌های روی سطح میکروبی متصل می‌شوند، واسطه‌ی تشخیص ارگانیسم‌های مهاجم به‌عنوان گام مهمی در پاسخ ایمنی میگو هستند [64].

تشخیص PRP پاتوژن های مهاجم یک مرحله میانی مهم در فعال سازی سیستم سیستم فعال کننده پروفنولاکسیداز (ProPO) است [65]. پروتئین‌های شناسایی پپتیدوگلیکان [66]، لکتین‌های نوع C [67]، پروتئین‌های متصل شونده به گلوکان (-Bgps) [68]، و لیپوپلی‌ساکارید (LPS) و 1،{9}}پروتئین‌های اتصال به گلوکان (1،{11) }}Lgp) [69] همه به عنوان PRP در سیستم ProPO توصیف شده اند. مکانیسم فعال کننده پروفنولاکسیداز (ProPO) که با اتصال PRP به اجزای دیواره سلولی میکروارگانیسم ایجاد می شود، به عنوان فعال کننده سیستم ایمنی میزبان شناخته شده است [70]. استرس واکنش های گلیکولیتیک را فعال می کند که به نوبه خود مصرف O2 را افزایش می دهد و آزادسازی گونه های فعال اکسیژن (ROS) (به عنوان رادیکال هیدروکسیل، پراکسید هیدروژن و آنیون های سوپراکسید) را افزایش می دهد [71]. با این حال، ROS می تواند عامل استرس زا را از بین ببرد. افزایش ROS باعث تخریب شدید می شود.

بنابراین، حذف سریع ROS بیش از حد برای عملکرد مناسب سلول حیاتی است. این امر با افزایش بیان آنزیم های آنتی اکسیدانی [72] به دست می آید. سوپراکسید دیسموتاز (SOD) آنزیم آنتی اکسیدانی است که به آنیون های سوپراکسید متکی است. رادیکال های سوپراکسید با تبدیل شدن به اکسیژن و پراکسید هیدروژن توسط SOD سم زدایی می شوند که متعاقباً توسط کاتالاز به H2O و O2 تبدیل شده و به عنوان کامپوزیت های ایمن به سلول عرضه می شوند [73،74].

ژن CuZnSOD سوپراکسید دیسموتاز مس-روی و سایر ژن های ایمنی نیز در ایمنی غیرمستقیم کراستین شبیه میگو نقش دارند که برای ایمنی در برابر عفونت ها ضروری است [75،76]. در L.vannamei، عصاره پلی ساکارید جینسنگ Panax رژیمی التهاب را کاهش می دهد، فعالیت آنزیم ایمنی را تقویت می کند و بیان ژن ایمنی را اصلاح می کند [77]. تعداد زیادی از ژن ها ویژگی های رشد را تنظیم می کنند، از جمله هورمون رشد (GH) و فاکتورهای رشد شبه انسولین (IGF-I و IGF-II) [78]. رشد سریع آبزی پروری L. vannamei مستلزم ایجاد خطوط ژنتیکی سریع است [79]. با بهترین دانش ما، اطلاعات کمی در مورد تأثیر مکمل های پلی ساکاریدهای غذایی Sargassum dentifolium بر رشد، ایمنی و بیان ژن های مرتبط با استرس میگو وجود دارد. بنابراین، این مطالعه به منظور بررسی اثر تجویز جیره ای پلی ساکارید حاصل از جلبک دریایی قهوه ای (S. centifolia) بر عملکرد رشد، استفاده از خوراک، ترکیب بدن، جوامع میکروبی و بیان ژن های رشد، ایمنی و استرس پای سفید انجام شد. میگو Litopenaeus vannamei.

2. مواد و روشها

2.1. جلبک دریایی قهوه ای، Sargassum centifolia

جلبک دریایی قهوه ای، S. dentiform، از خلیج ابوقیر، اسکندریه، مصر (31.3000 N و 30.1667 E) جمع آوری شد [2]. همانطور که قبلاً توضیح داده شد، اپی‌فیت‌ها از نمونه‌های به‌دست‌آمده حذف شدند. نمونه‌ها قبل از استفاده، شسته، تمیز، خشک شده، پودر شده و در کیسه‌های پلاستیکی در دمای اتاق نگهداری می‌شوند [29]. روش‌های مشخص شده توسط [81] برای استخراج پلی ساکارید از جلبک دریایی قهوه‌ای S. dentifolium استفاده شد.

2.2. بررسی کیفیت آب

در طول آزمایش تغذیه، ما مطمئن شدیم که سطوح NH3- (mg L-1)، NO2- (mg L-1)، NO3- (mg L-1)، قلیائیت (mg L-1)، و PO4- (mg L-1) در محدوده پیشنهادی برای میگو [82] و دستورالعمل های APHA [83] قرار داشتند. علاوه بر این، اندازه‌گیری‌های روزانه دما (◦C)، شوری (ppt) و pH در ساعت 13:00 اندازه‌گیری شد. یک دماسنج آویزان در عمق 30 سانتی‌متری برای اندازه‌گیری دقیق دمای آب و یک pH متر و یک انکسارسنج (Orion, Ipswich, MA, USA) برای بدست آوردن خوانش دقیق اسیدیته و قلیایی بودن آب روزانه در ساعت 9.{14}} استفاده شد.

2.3. میگوی ساق سفید اقیانوس آرام (Litopenaeus vannamei)

2.3.1. آزمایش حیوانات

یک کارخانه جوجه کشی خصوصی لاروهای پستی (PLs) میگوی سفید پا در اقیانوس آرام L. vannamei را به آزمایشگاه بی مهرگان، بخش آبزی پروری، شعبه سوئز NIOF، مصر عرضه کرد. سپس PL ها به مدت 15 روز در دو مخزن 500-لیتر فایبرگلاس تحت شرایط کنترل شده (28.{4}} ± 1.0 ◦C و شوری 3±29.0 ppt) سازگار شدند. ) کمیته تحقیقات NIOF، مصر، طراحی آزمایشی و رعایت استانداردهای اخلاقی حمل و نقل میگو را تایید کرد.

2.3.2. طراحی تجربی و امکانات

آزمایش تغذیه فعلی با استفاده از طرح کاملا تصادفی با سه تکرار انجام شد. در مجموع 360 PL (با وزن اولیه 0.0017 ± 0.001 گرم) با تراکم 30 میگو در 12 لیوان ذخیره شد. آکواریوم (هر کدام با ظرفیت 40 لیتر). برای 90-آزمایی تغذیه روزانه، PLها 10 درصد از وزن کل بدن میگو را سه بار در روز (در ساعت 6:{15}} صبح، 12:00 و 6:00 بعد از ظهر) دریافت کردند. هر آکواریوم هر روز صبح از مواد زائد و نخورده خالی می شد و با سیفون تمیز می شد و روزانه 10 درصد حجم آب با آب تازه، اکسیژن دار و تصفیه شده دریا جایگزین می شد [82].

2.3.3. رژیم غذایی آزمایشی

چهار رژیم غذایی برای میگو ارائه شد: SWP{{{0}}: رژیم غذایی تجاری میگو (Aller-Aqua، مصر، به عنوان یک رژیم غذایی پایه کنترل، پروتئین خام 40 درصد و چربی خام 9 درصد). سه جیره آزمایشی باقی‌مانده (SWP1، SWP2، و SWP3) جیره‌های تجاری میگو هستند که به ترتیب با 1، 2 و 3 گرم در کیلوگرم پلی‌ساکارید S. dentifolium تکمیل شده‌اند. همانطور که قبلاً توسط Abdelrhman و همکاران توضیح داده شد، سطوح پلی ساکارید اضافه شد. [2]. به طور خلاصه، رژیم غذایی تجاری میگو ابتدا آسیاب شد و به سه قسمت مساوی تقسیم شد. هر سطح پلی ساکارید (1، 2 و 3 گرم در کیلوگرم در کیلوگرم) در آب مقطر حل شد و سپس تا جذب کامل روی سطح جیره اسپری شد و همان حجم کافی آب مقطر روی جیره شاهد (SWP0) بدون پلی ساکارید اسپری شد. [84]. سپس روغن آفتابگردان (5 میلی لیتر کیلوگرم-1) روی جیره ها اسپری شد تا محلول پلی ساکارید را بپوشاند [85]. در نهایت، جیره ها همگن شده و مجدداً به گلوله تبدیل شدند، در هوا خشک شدند، در کیسه های سلفون قرار گرفتند و تا زمان استفاده در دمای 4 درجه سانتیگراد در یخچال نگهداری شدند.

2.4. پارامترهای تست شده

2.4.1. عملکردهای رشد

2.4.2. تجزیه و تحلیل ترکیب بیوشیمیایی

هر دو رژیم غذایی آزمایشی و میگو برای تخمین محتوای بیوشیمیایی آنها طبق دستورالعمل های AOAC [{0}}] که به طور مفصل در مقاله قبلی [87] تهیه شده بود، تحت تجزیه و تحلیل تقریبی قرار گرفتند. برای تخمین ترکیب کل بدن (ماده خشک، چربی خام، پروتئین خام و خاکستر خام)، پس از اتمام جلسه تغذیه، 5 میگو به طور تصادفی از هر تکرار به دست آمد. سپس میگوها پودر شدند، مخلوط شدند تا صاف شوند و برای بررسی بیشتر در دمای 20- درجه سانتیگراد نگهداری شدند.

2.4.3. جوامع میکروبی

رویکرد APHA [83] برای تعیین غنای جوامع میکروبی استفاده شد. پس از اتمام آزمایش، از هر تکرار (3 میگو در هر تکرار، n=9) نمونه آب (1 میلی لیتر) و روده میگو (1 گرم) گرفته شد. هر نمونه (روده و آب) با 9 میلی لیتر آب مقطر استریل روی صفحات Trypticase سویا آگار (TSA) و نمک های تیو سولفات- سیترات-صفرا (TCBS) تلقیح شد [88]. صفحات TSA و TCBS در دمای 37 درجه سانتیگراد، در حالی که صفحات TCBS در دمای 28 درجه سانتیگراد انکوبه شدند. واحدهای تشکیل دهنده کلنی در هر میلی لیتر برای تعیین مقدار باکتری های هتروتروفیک و کلنی های ویبریو موجود پس از 24 ساعت (CFU mL-1) استفاده شد [89].

2.4.4. استخراج RNA و سنتز cDNA برای بیان ژن

نمونه‌های سه‌گانه ماهیچه‌های شکمی میگو از هر تکرار به‌طور مستقیم با ابزار تشریح کاملاً استریل در شرایط سرد جدا شد. قبل از انجام مطالعه بیان ژن، بخشی از عضلات در دمای 80- درجه سانتیگراد منجمد شدند. از معرف TRIZol (easyRED، iNtRON Biotechnology) برای استخراج RNA کل از ناحیه شکم میگو در پایان آزمایش، طبق دستور سازنده استفاده شد. با استفاده از یک سیستم NanoDrop (Bio-Drop)، نسبت چگالی نوری (OD) خلوص RNA تعیین شد و 1 نانوگرم L-1 RNA برای سنتز cDNA در هر واکنش استفاده شد، زمانی که نسبت ایده‌آل بود (A260/A{{{{{ 5}}.8).

برای تعیین کیفیت RNA از نسبت OD 26{20}}/280 نانومتر استفاده شد. RNA کل که با DNase I (NEB، ایالات متحده آمریکا) پردازش شده بود به عنوان یک الگو در یک کیت رونوشت معکوس (دانه‌های RT-PCR، Enzynomics، Daejeon، کره) برای تولید cDNA رشته اول استفاده شد. واکنش با استفاده از تقویت PCR (با استفاده از یک محصول آمریکایی، Applied Biosystems Veriti 96-Well Thermal Cycler) انجام شد و طبق دستورالعمل سازنده انجام شد. Real-Time PCR (Bico، Thermo-Fisher) تحت شرایط cDNA زیر برای شناسایی محصولات منحصر به فرد و متمایز انجام شد: پس از دناتوراسیون اولیه در دمای 95 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه، پروتئین تحت 40 چرخه در شرایط زیر قرار گرفت: 95 ◦C برای 10 ثانیه، 58-62 ◦C برای 20 ثانیه و 72 ◦C برای 30 ثانیه. و در نهایت، پس از چرخه نهایی، دما از 58-62 درجه سانتیگراد به 95 درجه سانتیگراد با افزایش 0.5 درجه سانتیگراد افزایش یافت. پرایمرهای مورد استفاده برای بررسی ژن های مشابه در جدول 1 فهرست شده اند.

ژن خانه داری (-اکتین) برای ارزیابی بیان ژن هدف یا تغییر برابری مورد استفاده قرار گرفت [90]. هنگامی که از روش 2∆∆Ct برای نرمال کردن مقادیر آستانه بحرانی (Ct) ژن‌های هدف با مقادیر -اکتین استفاده می‌شود، مقادیر تفاوت n برابری را در مقایسه با شاهد نشان می‌دهند [91].

2.5. تحلیل آماری

برای ارزیابی کیفیت آب، عملکرد رشد شاخص‌های استفاده از خوراک، تجزیه و تحلیل ترکیب بدن، جوامع میکروبی، ایمنی و بیان ژن مرتبط با رشد، از ANOVA یک طرفه برای شناسایی تفاوت‌های معنی‌دار استفاده شد (p < 0). }}5) در میانگین برای هر متغیر بین تیمارهای پلی ساکارید (SWP1، SWP2، و SWP0) و کنترل (SWP0). تجزیه و تحلیل آماری با استفاده از GraphPad Prism نسخه 9 انجام شد. برای بررسی هر گونه همبستگی بین تیمارها از آزمون توکی استفاده شد. قبل از انجام تجزیه و تحلیل آماری، کلیه داده ها از نظر نرمال بودن توزیع و همگن بودن واریانس بررسی شده اند. قبل از تجزیه و تحلیل، تمام داده ها (درصد) تبدیل به قوس سین شدند [92]. با این حال، برای تسهیل مقایسه، داده‌ها به عنوان تغییر شکل نیافته ارائه شدند.

3.2. عملکرد رشد و شاخص های استفاده از مواد مغذی

جدول 3 تأثیر مکمل های غذایی پلی ساکارید را بر رشد، بقا و استفاده از خوراک میگو نشان می دهد. در مقایسه با SWP0، جدول 3 نشان داد که SWP1، SWP2 و SWP3 افزایش قابل توجهی (p < 0.{{10}}5) در WG نشان دادند. علاوه بر این، SWP1 و SWP2 افزایش معنی‌دار (p < 0.05) در SR نشان دادند، در حالی که SWP3 در مقایسه با SWP0 کاهش معنی‌داری نشان داد (p < {0.05). از سوی دیگر، همانطور که در جدول 3 ارائه شده است، تفاوت معنی داری (05/0p<) در SGR یا FCR در بین جیره های مکمل (SWP0، SWP1، SWP2 و SWP3) وجود نداشت.

3.4. جوامع میکروبی

جدول 5 تأثیر جیره های آزمایشی مکمل شده با غلظت های مختلف پلی ساکارید (SWP1، SWP2، و SWP3) را در مقایسه با SWP{4}} بر تعداد کل THB و TVC در آب و روده میگو نشان می دهد. داده ها نشان داد که فراوانی میکروب ها (THB و TVC) در روده بیشتر از آب است. در مقایسه با SWP{5}} تعداد THB و TVC در آب و روده به تدریج با افزایش سطح پلی ساکارید کاهش یافت (جدول 5).

3.5. بیان ژن های مربوط به رشد، ایمنی و استرس

در پایان آزمایش، مکمل غذایی پلی ساکاریدها بیان ژن های مربوط به ایمنی، مربوط به رشد و استرس را در بافت عضلانی L. vannamei افزایش داد. با توجه به بیان ژن‌های مرتبط با رشد (IGF-I و IGF-II)، بیان آن‌ها به طور قابل‌توجهی تنظیم‌شده (p <0.{8}}5) در تیمارهای با غلظت‌های مختلف پلی‌ساکارید در مقایسه بود. به کنترل (SWP{{10}}). بیان در SWP3 افزایش یافت و با تغییر تقریباً 12 و 11- برابری، بالاتر از SWP0 بود (شکل 1A، B). بیان ژن های مرتبط با ایمنی (Bgp، ProPO، Crustin و Lys) به طور قابل توجهی در تیمار SWP3 افزایش یافت که در آن تغییرات برابری به ترتیب 9.3، 12.4، 10.5 و 8.8 بود که بالاتر از SWP0 بود (شکل 1C). -F).

در مقایسه با گروه کنترل (SWPo)، ژن ProPO بالاترین سطح بیان را در تمام غلظت‌های تیمار نشان می‌دهد. برای ژن Crusfin، بین تیمار SWP3 و شاهد تفاوت معنی‌داری وجود دارد، در حالی که بین SWP و SWP و شاهد تفاوت معنی‌داری وجود نداشت. علاوه بر این، بیان ژن های استرس (SOD و GPx) در SWP. به طور قابل توجهی به ترتیب 5.2- و 6.{4}} برابر افزایش یافت. نسبت به کنترل (شکل 1G، H). با این حال، تفاوت معنی داری (p < 0.05) در بیان ژن SOD در بین تمام تیمارها نسبت به شاهد با افزایش بیشتر در SWP، تیمار وجود داشت. در همین حال، در بیان ژن GPx بین تیمارهای SWP و SWP، تفاوت معنی‌داری (05/0p<) نسبت به SWP شاهد وجود داشت، اما تفاوت معنی‌داری بین تیمارهای SWP و SWP مشاهده نشد.

4. بحث

پلی ساکاریدهای جلبک دریایی به‌عنوان مولکول‌های فعال با ارزش بالا شناخته می‌شوند که عملکرد رشد را بهبود می‌بخشند، پاسخ سیستم ایمنی را تقویت می‌کنند و مزایای سلامتی زیادی برای موجودات آبزی پروری دارند [2،54،93-97]. در مطالعه حاضر، ما فرض کردیم که تجویز رژیم غذایی پلی ساکارید مشتق شده از جلبک دریایی قهوه ای (Sargassum centifolia) عملکرد رشد، استفاده از خوراک، ترکیب بدن، جوامع میکروبی، و بیان ژن های رشد، ایمنی و استرس میگوی ساق پا سفید را بهبود می بخشد. وانامی آزمایش تغذیه فعلی نشان داد که افزایش وزن L. vannamei با افزایش سطح پلی ساکارید در جیره تجاری در مقایسه با جیره شاهد به طور قابل توجهی بهبود یافته است. یافته های حاضر موازی با مطالعات قبلی انجام شده بر روی گونه های مختلف میگو و ماهی است.

به عنوان مثال، لی و همکاران. [98] گزارش داد که عصاره آب گرم جلبک دریایی قهوه ای Sargassum horneri به طور قابل توجهی عملکرد رشد را بهبود می بخشد، ایمنی ذاتی را تحریک می کند و بیان ژن ایمنی میگو L. vannamei را تقویت می کند و توصیه می کند که سطح گنجاندن ایده آل 5 گرم در کیلوگرم در کیلوگرم باشد. علاوه بر این، مطالعه توسط لیو و همکاران. [99] تأثیر سطوح مختلف گنجاندن ({5}}، 1، 2 و 3 گرم در کیلوگرم) پلی ساکاریدهای استخراج شده از جلبک دریایی سبز (Enteromorpha) را در رژیم غذایی میگوی موزی F. merguiensis بررسی کردند و به این نتیجه رسیدند که 1 گرم در کیلوگرم به طور قابل توجهی عملکرد رشد را افزایش می دهد، ایمنی غیراختصاصی را بهبود می بخشد و عملکرد روده F. merguiensis را تعدیل می کند، در حالی که عبدالرحمن و همکاران. [2] تأثیر نرخ‌های مختلف گنجاندن جیره ({13}}، 10، 20 و 30 گرم در کیلوگرم) پلی‌ساکاریدهای به‌دست‌آمده از جلبک دریایی قهوه‌ای S. dentalium را بر روی ماهی تیلاپیا قرمز ترکیبی بررسی کرد و نتیجه گرفت که 30 گرم سطح کیلوگرم - 1 بالاترین عملکرد رشد قابل توجه، FCR و شاخص های خونی را به دست آورد. با این حال، ناهماهنگی در سطوح گنجاندن در بین این مطالعات ممکن است به دلیل وزن های اولیه مختلف، گونه های جلبک دریایی، گونه ها (گونه های ماهی و میگو)، سن و غیره باشد.

فراوانی میکروبیوتای روده به سرعت به تغییرات دریافتی، ترکیب و اجزای رژیم غذایی پاسخ می دهد. بنابراین، تأثیر زیادی بر مزایای سلامتی همه موجودات آبزی مانند مصرف غذا، هضم، استفاده از مواد مغذی، جذب و پاسخ های ایمنی دارد [22،87،100،101]. در حال حاضر، ارزیابی مقاومت به بیماری در صنعت آبزی پروری مهم است، آنتی اکسیدان خون و فعالیت فاکتور ایمنی یک شاخص وضعیت سلامت خوب برای بررسی پاسخ ایمنی و مقاومت به بیماری در L. vannamei مانند ویروس سندرم لکه سفید (WSSV) است. 49] و ویبریو آلژینولیتیکوس [102]. گونه‌های اکسیژن فعال (ROS) مولکول‌های واکنش‌پذیر شیمیایی حاوی اکسیژن، مانند یون‌های اکسیژن و پراکسیدها هستند. مقادیر بیش از حد ROS می تواند بر ساختار و پایداری پروتئین های عملکردی، اسیدهای چرب غیراشباع و اسیدهای نوکلئیک تأثیر بگذارد و باعث آسیب اکسیداتیو به سیستم ایمنی بدن و افزایش حساسیت به عوامل بیماری زا در میگو شود [73]. از این رو، سلامت موجودات آبزی به تعادل بین تولید ROS و آنزیم های آنتی اکسیدانی مانند SOD و GPx بستگی دارد که از سلول های حیوانی در برابر رادیکال های آزاد محافظت می کنند. یافته‌های کنونی نشان داد که پلی‌ساکاریدهای جیره‌ای مشتق‌شده از جلبک دریایی قهوه‌ای (S. centifolia) به طور موثری فعالیت آنزیم‌های آنتی‌اکسیدانی از جمله SOD و GPx را بهبود می‌بخشند. به طور مشابه، فعالیت های SOD و GPx سخت پوستان مختلف پس از تغذیه با جیره های مکمل با پلی ساکاریدهای گلپر سیننسیس در میگوی پا سفید [60] و گلوکان [103]، و پلی ساکاریدهای رودیولا رزاآ در خرچنگ باتلاق قرمز [104] افزایش یافت.

کار فعلی گزارش داد که، در مقایسه با SWP{{0}}، تعداد THB و TVC به طور قابل توجهی (p > 0.05) با افزایش سطح گنجاندن پلی ساکاریدها کاهش یافت (SWP1، SWP2 و SWP3). این نتایج با نتایج گزارش شده در مطالعه منصور و همکاران مطابقت دارد. [87] که دریافتند که افزایش سطوح آستاگزانتین استخراج شده از سویه سیانوباکتریوم، Arthrospira platensis NIOF17/003، در رژیم غذایی L.vannamei به طور قابل توجهی (p>0.05) تعداد THB و TVC را کاهش داد. با این حال، مکانیسم عمل چگونگی تأثیر جلبک دریایی-پلی ساکارید بر فراوانی میکروبیوتا هنوز مشخص نیست و به مطالعات بیشتری نیاز دارد [87،101].

چندین ژن درگیر در پاسخ ایمونولوژیک تمرکز تحقیقات فعلی بودند. در درمان SWP3، بیان ژن تنظیمی به طور قابل توجهی بالاتر بود. نتایج بیانگر افزایش بیان با تیمارها نسبت به شاهد (SWP{2}}) بود که نشان می‌دهد پلی ساکارید می‌تواند وضعیت ایمنی میگو را از طریق دیواره سلولی میکروبی متشکل از پپتیدوگلیکان، لیپوپلی ساکارید (LPS) و -1 بهبود بخشد. ، 3-گلوکان، که می تواند پاسخ ایمنی میگو را با فعال کردن مکانیسم دفاعی غیراختصاصی فعال کند [22,87,105,106].

پروفنول اکسیداز یک آنزیم حیاتی در ایمنی هومورال بی مهرگان است که ملانیزاسیون را برای خلاص شدن از شر پاتوژن های مهاجم ترویج می کند [107] و با اسکلروتیزاسیون کوتیکول و بهبود زخم مرتبط است [108]. بی مهرگان یک سیستم غیر خودشناسی به نام سیستم فعال سازی ProPO دارند که ممکن است مزاحمان را با استفاده از پپتیدوگلیکان یا لیپوپلی ساکاریدها از باکتری ها و -1، 3-گلوکان ها از قارچ ها شناسایی کرده و به آنها واکنش نشان دهد [109]. نشان داده شد که بیان mRNA ژن ProPO در تمام تیمارها در مقایسه با گروه کنترل به طور قابل توجهی بالاتر است، و این بیان در بین تمام ژن های مورد بررسی بیشترین میزان را نشان داد زیرا محتوای پلی ساکارید جلبک دریایی افزایش یافت (3 گرم در کیلوگرم جیره). . تغذیه میگوهای P. monodon با رژیم غذایی حاوی پلی ساکارید فوکویدان از جلبک دریایی قهوه ای S. wightii بیان ژن ProPO را افزایش داد [110]. برخی دیگر از مکمل های غذایی مشتق شده از ریزجلبک ها و جلبک های دریایی، سیستم ProPO میگو را افزایش داده و پاسخ ایمنی هومورال را بهبود می بخشد. یافته های ما با مطالعات قبلی انجام شده روی L. vannamei مطابقت دارد [22,87].

کراستین که به عنوان بخشی از سیستم ایمنی ذاتی [111] تعریف می شود، پروتئینی است که در گرانول های هموسیت سخت پوستان یافت می شود و در برابر چندین میکروارگانیسم موثر است. در این مطالعه، جیره های مکمل پلی ساکارید استخراج شده بیان ژن کراستین را افزایش داد و تفاوت واضحی بین سه تیمار مشاهده شد. افزایش قابل توجه سطوح mRNA کراستین در Marsupenaeus japonicus پس از تجویز پپتیدوگلیکان مشاهده شده است [112]. ژن کراستین در میگوی سفید اقیانوس آرام L. vannamei که آستاگزانتین مکمل را تجویز کرده بود، تنظیم مثبت شد (05/0 < 0). لیزوزیم به عنوان پروتئینی که در یوکاریوت‌ها و پروکاریوت‌ها یافت می‌شود، مدت زیادی است که وجود داشته است و به عنوان یکی از اولین پروتئین‌های ضد باکتری شناخته می‌شود [114]. ایمنی ذاتی غیراختصاصی به توانایی آن در شکستن پیوند گلیکوزیدی b-1،4 بین N-استیل مورامیک اسید و N-acetylglucosamine در پپتیدوگلیکان دیواره سلولی باکتری بستگی دارد [115].

در تحقیق حاضر، بیان ژن Ly's در گروه‌های تیمار (SWP1، SWP2 و SWP3) به طور قابل‌توجهی بیشتر از گروه کنترل (SWP{3}}) بود. یک تحقیق رونویسی دیگر با استفاده از گونه‌هایی که با چالش‌های زیست‌محیطی روبرو هستند نیز یافته‌های مشابهی را ایجاد کرد [116,117]. این یافته ها نشان داد که لیزوزیم بخش مهمی از مکانیسم دفاعی ضد باکتریایی میگو است و توسط انواع مختلفی از مواد محرک ایمنی برانگیخته می شود. آنزیم های آنتی اکسیدانی کاتالاز و گلوتاتیون پراکسیداز، پراکسید هیدروژن را به اکسیژن و آب تبدیل می کنند، در حالی که SOD، یکی از ژن های استرس، در از بین بردن آنیون های سوپراکسید با تبدیل آنها به پراکسید هیدروژن و آب نقش دارد [118]. در نتیجه، این آنزیم‌های آنتی‌اکسیدانی به هموسیت‌های حیوانات تنفس‌کننده اکسیژن پس از فاگوسیتوز محافظت می‌کنند و از این رو سلامت و زنده ماندن ارگانیسم‌ها را حفظ می‌کنند [119,120]. در مقایسه با شاهد، بیان ژن SOD در سه شرایط آزمایشی افزایش یافت و تحقیقات قبلی [22,87,113,116] نشان داد که افزودنی تغذیه بیان ژن SOD را که در سیستم آنزیم آنتی اکسیدانی در L دخیل است افزایش می دهد. وانامی

در سیستم دفاعی گلوتاتیون، GPx مسئول کاهش پراکسید هیدروژن به آب است [117,121]. در بررسی ما، بیان GPx در تیمار SWP3 که غلظت بالاتری از پلی ساکاریدهای جلبک دریایی استفاده شد، بالاتر بود. بنابراین، هر دو ژن استرس در این مطالعه در مقایسه با گروه کنترل به طور قابل‌توجهی تنظیم می‌شوند، و فعالیت‌های SOD و GPx همراه با افزایش آنیون سوپراکسید (O2-) و پراکسید هیدروژن (H2O2) افزایش می‌یابد، که ممکن است نشان دهنده افزایش در فعالیت NADPH-اکسیداز و تولید توده ای از گونه های فعال اکسیژن (ROS) که می تواند به عنوان یک مکانیسم دفاعی در برابر عفونت میکروبی نشان داده شود [73,122]. تحقیقات اخیر بیان ژن‌های دخیل در ایمنی را در میگو ارزیابی کرده است [123،124] و بر راه‌هایی برای تقویت دفاع طبیعی آن‌ها تمرکز کرده است.

دو نوع هورمون پپتیدی فاکتور رشد شبه انسولین (IGF) وجود دارد، IGF-I و IGF-II. همچنین گیرنده های سطح سلولی و پروتئین های اتصال دهنده در گردش وجود دارد. IGF-II مانند IGFI در متابولیسم پروتئین، تمایز سلولی، تکثیر سلولی و رشد جسمی نقش دارد. بر اساس یافته های مطالعه حاضر، به نظر می رسد که استخراج پلی ساکارید جلبک دریایی ممکن است بیان ژن های مرتبط با رشد را در سطح mRNA افزایش دهد و از این رو ظرفیت رشد را به طور غیر مستقیم افزایش دهد. مطالعات دیگری که تأثیر استفاده از منابع مختلف کربن را برای تقویت بیان ژن IGF-I و IGF-II بررسی می‌کنند، نتایج مشابهی را نشان می‌دهند [123]. علاوه بر این، استفاده از ریزجلبک سبز، نانوذرات T. suecica و A. platensis به عنوان خوراک مکمل برای L. vannamei به میزان زیادی بیان هر دو ژن را افزایش داد و رشد را بهبود بخشید [22,100].

5. نتیجه گیری ها

در سطح جهانی، رژیم غذایی میگو با استفاده از چندین استراتژی برای مقابله با توسعه پرورش میگوی سفید پا در اقیانوس آرام L. vannamei گسترش یافته است. علیرغم اهمیت افزودنی های خوراک برای L. vannamei، اطلاعات کمی در مورد کاربرد پلی ساکاریدهای تهیه شده از جلبک های دریایی قهوه ای در صنعت افزودنی خوراک L. vannamei وجود دارد. در کار فعلی، میزان گنجاندن 2 گرم در کیلوگرم در کیلوگرم پلی ساکاریدها، یک مولکول فعال با ارزش بالا تهیه شده از جلبک دریایی قهوه ای دنتی فرم Sargassum، به عنوان تجویز افزودنی در رژیم غذایی باعث افزایش وزن نهایی و میزان بقای میگوی سفید پا در اقیانوس آرام می شود. vannamei، در حالی که سطح ترکیب 3 گرم در کیلوگرم در 1 فراوانی میکروب های بیماری زا را کاهش می دهد، علاوه بر این، ایمنی و بیان ژن مرتبط با استرس L. vannamei را افزایش می دهد. با این حال، مطالعات بیشتری باید برای به حداکثر رساندن مزایای پلی‌ساکاریدهای تهیه‌شده از گونه‌های جلبک دریایی به‌عنوان تجویز افزودنی برای میگوی ساق سفید اقیانوس آرام L. vannamei انجام شود.

مشارکت نویسنده:

مفهوم سازی، EMA، ZZS و MA. روش، EMA، ZZS و MA. نرم افزار، EMA، ZZS و MA. اعتبارسنجی، EMA، ZZS، MA و EE-H. تجزیه و تحلیل رسمی، EMA، ZZS و MA. بررسی، EMA، ZZS، MA و EE-H. منابع، EMA، ZZS و MA. مدیریت داده، EMA، ZZS و MA. نوشتن - آماده سازی پیش نویس اصلی، EMA، ZZS و MA. نوشتن - بررسی و ویرایش، EMA، ZZS، MA، ASA-S. و EE-H. تجسم، EMA، ZZS، MA و EE-H. نظارت، ZZS، MA و EE-H. مدیریت پروژه، EMA؛ کسب بودجه، EMA، ZZS، MA و ASA-S. همه نویسندگان نسخه منتشر شده نسخه خطی را خوانده و با آن موافقت کرده اند.

منابع مالی:

این تحقیق هیچ بودجه خارجی دریافت نکرد.

بیانیه هیئت بررسی نهادی:

مطابقت با استانداردهای اخلاقی در راه اندازی آزمایشی و حمل میگو توسط کمیته تحقیقات NIOF، مصر با شماره تاییدیه: NIOF/AQ3/1/22/R/012 در 22 ژانویه 2021 تایید شد.

بیانیه رضایت آگاهانه: قابل اجرا نیست.

بیانیه در دسترس بودن داده ها: قابل اجرا نیست.

قدردانی: دسترسی آزاد به این کار تا حدی توسط واحد آبزی پروری AL Hail، گروه علوم دریایی و شیلات، دانشکده کشاورزی و علوم دریایی، دانشگاه سلطان قابوس، عمان پشتیبانی شد.

تضاد منافع: نویسندگان هیچ گونه تضاد منافع را اعلام نمی کنند.

منابع

1. عباس، ام. علی، ف.اس. دسوکی، ام جی; آشور، م. الشافعی، ع. Maaty، MM; Sharawy، ZZ، مطالعه جامع مولکولی و زیست محیطی رمان معرفی میگوی گلی ساحلی (Solenocera crassicornis) ضبط شده در خلیج سوئز، مصر. J. Mar. Sci. مهندس 2020، 9، 9. [CrossRef]

2. عبدالرحمن، ع.م. آشور، م. الذهبی، م. Sharawy، ZZ; نظمی، ح. زکی، م. احمد، NH; احمد، اس آر. الهارون، ای. Van Doan, H. اثر پلی ساکاریدهای مشتق شده از ماکرو جلبک قهوه ای Sargassum dentalium بر عملکرد رشد، بیوشیمیایی سرم، بافت شناسی گوارشی و فعالیت آنزیمی ماهی تیلاپیا قرمز هیبرید. آکواک. Rep. 2022, 25, 101212. [CrossRef]

3. گودا، ا. سعد، ع. حنفی، م. شاراوی، ز. El-Haroun، E. اثرات رژیم غذایی Azolla pinnata همراه با آنزیم گوارشی اگزوژن (Digestin™) بر رشد و استفاده از مواد مغذی میگوی آب شیرین، Macrobrachium rosenbergii (de Man 1879). J. Oceanol. لیمنول 2018، 36، 1434-1441. [CrossRef]

4. Sharawy، ZZ; عباس، EM; عبدالخالک، NK; اشری، OA; عبد الفتاح، LS; الساوی، MA; هلال، MF; El-Haroun, E. اثر منبع کربن آلی و تراکم ذخایر بر شاخص‌های رشد، میکرو فلور آب و بیان ژن‌های مرتبط با ایمنی لارو Litopenaeus vannamei در کشت فشرده. Aquaculture 2022, 546, 737397. [CrossRef]

5. Gillett, R. مطالعه جهانی ماهیگیری میگو. فناوری ماهی فائو پاپ 2008، 475، 25-29.

6. احمد، ن. تامپسون، اس. Glaser، M. بهره وری جهانی آبزی پروری، پایداری محیطی، و سازگاری با تغییرات آب و هوا. محیط زیست مدیریت 2019، 63، 159–172. [CrossRef] [PubMed]

7. لوکوامبه، بی. نیکلاس، آر. ژانگ، دی. یانگ، دبلیو. ژو، جی. ژنگ، ز. تغییرات متوالی جامعه ریزجلبک ها در پاسخ به پروبیوتیک های تجاری در سیستم های کشت فشرده میگو (Litopenaeus vannamei Boone). Aquaculture 2019, 511, 734257. [CrossRef]

8. لی، ای. خو، سی. وانگ، ایکس. وانگ، اس. ژائو، کیو. ژانگ، ام. Qin، JG; میکروبیوتای چن، ال. روده و مدولاسیون آن برای پرورش سالم میگوی سفید اقیانوس آرام Litopenaeus vannamei. ماهی کشیش. علمی آکواک. 2018، 26، 381-399. [CrossRef]

9. استیونز، سی. کرافت، دی. پاول، جی. تایلر، سی. استرس و رفاه در ماهیان زینتی: از آبزی پروری چه می توان آموخت؟ J. Fish Biol. 2017، 91، 409-428. [CrossRef]

10. السید، AFM استفاده از فناوری بیوفلوک در آبزی پروری میگو: بررسی جامع، با تاکید بر دهه گذشته. کشیش آکواک. 2021، 13، 676-705. [CrossRef]

11. Anh، NTN; شایو، FA; نویجان، ن. Van Hoa، N. اثرات تراکم و نرخ تغذیه بر کیفیت آب، راندمان خوراک، و عملکرد میگوی سفید پا Litopenaeus vannamei در یک سیستم یکپارچه با انگور دریایی Caulerpa lentillifera. J. Appl. فیکول. 2021، 33، 3331-3345. [CrossRef]

12. Emerenciano، MG; رومبنسو، AN; ویرا، FdN; مارتینز، MA; کومان، GJ; Truong، HH; نوبل، TH; Simon, CJ Intensification of Penaeid Shrimp Culture: An Applied Review of Advances in Production Systems, Nutrition and Breeding. Animals 2022, 12, 236. [CrossRef] [PubMed]

13. منصور، ع. اشری، OA; آشور، م. الصاقوفی، ع. رمضان، KM; Sharawy، ZZ بهینه‌سازی سطح پروتئین و منابع کربن در رژیم غذایی بر ارزش‌های غذایی لخته‌های زیستی، فراوانی باکتری‌ها و عملکردهای رشد میگوهای سفید پا (Litopenaeus vannamei). Life 2022, 12, 888. [CrossRef] [PubMed]

14. منصور، ع. اشری، OA; النیوشی، ام اس; الصاقوفی، ع. دیقیش، اچ اس; آشور، م. کلانی، ام اس؛ الساوی، MA; مبروك، م.م. عباس، اثر EM محصولات جانبی کشاورزی به عنوان منبع کربن در یک سیستم مبتنی بر بیوفلوک بر عملکرد رشد، فعالیت آنزیم های گوارشی، بافت شناسی هپاتوپانکراس و بار باکتریایی روده لارو پستی Litopenaeus vannamei. J. Mar. Sci. مهندس 2022، 10، 1333. [CrossRef]

15. ایبر، بی تی; Kasan، NA پیشرفت های اخیر در مدیریت فاضلاب آبزی پروری میگو. Heliyon 2021, 7, e08283. [CrossRef] [PubMed]

16. زکی، م. آشور، م. Heneash، AMM; مبروك، م.م. Alprol، AE; خیری، HM; نور، AM; منصور، AT; حسنین، HA; گابر، ع. و همکاران کاربردهای بالقوه ایزوله سیانوباکتریوم بومی (Arthrospira platensis NIOF17/003) برای تولید بیودیزل و استفاده از محصول جانبی آن در تولید روتیفر دریایی (Brachionus plicatilis). پایداری 2021، 13، 1769. [CrossRef]

17. ابیشا، ر. کریشانی، ک.ک. سوخدانه، ک. ورما، ا. برهمن، م. Chadha، N. توسعه پایدار آبزی پروری مقاوم به آب و هوا و شیلات مبتنی بر فرهنگ از طریق سازگاری با تنش های غیر زنده: یک بررسی. ج. آب و هوا. تغییر 2022، 13، 2671–2689. [CrossRef]

18. Alprol، AE; آشور، م. منصور، AT; الزهرانی، OM; محمود، اس.ف. قریب، SM ارزیابی کیفیت آب و ساختار فیتوپلانکتون هشت سواحل اسکندریه، دریای مدیترانه جنوب شرقی، مصر. J. Mar. Sci. مهندس 2021، 9، 1328. [CrossRef]

19. متوالی، ع. النگار، HA; الدمهوقی، کالیفرنیا؛ بشار، MAE; آشور، م. تجزیه و تحلیل Abo-Taleb، HAH GC-MS اجزای زیست فعال در شش عصاره خام مختلف از مرجان نرم (Sinularia maxim) جمع آوری شده از راس محمد، خلیج عقبه، دریای سرخ، مصر. مصر. جی. آکوات. Biol. ماهی. 2020، 24، 425-434. [CrossRef]

20. مگوز، فی. عیسی، MA; ماده، م. تگلدین منصور، ع. الکافی، م. آشور، ام. دینامیک جمعیت، هماوری و ترکیب اسیدهای چرب Oithona nana (Cyclopoida، Copepoda)، تغذیه شده بر روی جیره های مختلف. Animals 2021, 11, 1188. [CrossRef]

21. کسلرینگ، ج. گروبر، سی. استاندن، بی. Wein, S. اثر یک افزودنی خوراک گیاهی بر عملکرد رشد و ایمنی میگوی سفید پا در اقیانوس آرام، Litopenaeus vannamei، تغذیه شده با رژیم غذایی کم پودر ماهی. جی ورلد آکواک. Soc. 2021، 52، 303-315. [CrossRef]

22. شاراوی، ز. آشور، م. لبنا، ا. الصاقوفی، ع. منصور، AT; Abbas, E. اثرات نانوذرات رژیم غذایی Arthrospira platensis بر عملکرد رشد، استفاده از خوراک و بیان ژن مرتبط با رشد میگوی سفید اقیانوس آرام، Litopenaeus vannamei. Aquaculture 2022, 551, 737905. [CrossRef]

23. Ceseña، CE; جاسینتو، EC; گونزالس، آل. Villasante، FV; کاسترو، RMM؛ اوچوا، ن. مونتس، RE; رامیرز، دی.تی. Ortiz، ACS؛ Campa-Córdova، AI مکمل غذایی Debaryomyces hansenii بقا، آنتی اکسیدان و پاسخ ایمنی را در میگوی جوان Penaeus vannamei که با Vibrio parahaemolyticus به چالش کشیده شده بود، افزایش داد. تروپ Subtrop. آگرواکوسیست. 2021، 24، 2. [CrossRef]

24. منصور، ع. آشور، م. Alprol، AE; السقوفی، گیاهان آبزی و جانوران آبزی در زمینه پایداری: تکنیک های کشت، ادغام و انقلاب آبی. پایداری 2022، 14، 3257. [CrossRef]

25. حسن، س.م. آشور، م. سلیمان، AAF; حسنین، HA; آلسانی، WF; گابر، ع. Elshobary، ME پتانسیل یک عصاره جلبک دریایی تجاری جدید در تحریک خواص مورفو- زراعی و زیست فعال Eruca vesicaria (L.) Cav. پایداری 2021، 13، 4485. [CrossRef]

26. عیسی، د. ابوشادی، ع. خیری، ح. Abomohra، AE-F. Elshobary, M. کشت پتانسیل ریزجلبک های روغنی هالوفیل در فاضلاب صنعتی. مصر. جی. بات. 2018، 58، 205-216. [CrossRef]

27. منصور، ع. Alprol، AE; ابوالنجاء، ک.م. البلتاگی، اچ اس. رمضان، KMA; آشور، ام. پتانسیل گیاه پالایی جلبک دریایی قهوه ای خشک برای حذف رنگ متیلن آبی از محیط های آبی. پلیمرها 2022، 14، 1375. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com