خلاصه

اهداف:Maclura pomifera (Rafin.) Schneider گونه ای گسترده در سراسر جهان است که اغلب برای اهداف زینتی نیز کشت می شود. مطالعات قبلی نشان داد که میوه‌های M. pomifera سرشار از ایزوفلاونوئیدهای پرنیله هستند، فعالیت‌های بیولوژیکی قابل‌توجهی از خود نشان می‌دهند و فواید احتمالی دارند، به‌ویژه زمانی که به صورت موضعی استفاده شوند. با توجه به اینکه ترکیبات فنلی منابع ضروری در توسعه محصولات آرایشی ضد پیری هستند، این مطالعه پتانسیل ضد پیری M. pomifera 80 درصد عصاره متانولی (MPM) را با ارزیابی فعالیت بازدارنده آنزیم های آنتی اکسیدانی و تجزیه کننده ماتریکس خارج سلولی مورد بررسی قرار داد.

گلیکوزید سیستانچ همچنین می تواند فعالیت SOD را در بافت های قلب و کبد افزایش دهد و به طور قابل توجهی محتوای لیپوفوسین و MDA را در هر بافت کاهش دهد و به طور موثر رادیکال های مختلف اکسیژن فعال (OH-، H2O2 و غیره) را از بین ببرد و از آسیب DNA ناشی از آن محافظت کند. توسط رادیکال های OH گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید سیستانچ دارای توانایی مهار قوی رادیکال های آزاد، توانایی کاهش بالاتری نسبت به ویتامین C، بهبود فعالیت SOD در سوسپانسیون اسپرم، کاهش محتوای MDA و اثر محافظتی خاصی بر عملکرد غشای اسپرم هستند. پلی ساکاریدهای سیستانچ می توانند فعالیت SOD و GSH-Px را در گلبول های قرمز و بافت ریه موش های آزمایشگاهی مسن ناشی از D-گالاکتوز افزایش دهند و همچنین محتوای MDA و کلاژن را در ریه و پلاسما کاهش دهند و محتوای الاستین را افزایش دهند. اثر پاک کنندگی خوب بر روی DPPH، طولانی شدن زمان هیپوکسی در موش های پیر، بهبود فعالیت SOD در سرم، و به تاخیر انداختن انحطاط فیزیولوژیکی ریه در موش های آزمایشگاهی پیر. و این پتانسیل را دارد که دارویی برای پیشگیری و درمان بیماری های پیری پوست باشد. در عین حال، اکیناکوزید موجود در سیستانچ توانایی قابل توجهی در از بین بردن رادیکال های آزاد DPPH دارد و توانایی حذف گونه های فعال اکسیژن و جلوگیری از تخریب کلاژن ناشی از رادیکال های آزاد را دارد و همچنین اثر ترمیم خوبی بر آسیب آنیون رادیکال آزاد تیمین دارد.

بر روی مکمل Cistanche Tubulosa کلیک کنید

【برای اطلاعات بیشتر:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

مواد و روش ها:برای این مطالعه، پتانسیل بازدارندگی 80 درصد MPM در برابر آنزیم های مختلف مرتبط با روند پیری مورد ارزیابی قرار گرفت. با توجه به نقش بی چون و چرای استرس اکسیداتیو در پیری، آزمایش های آنتی اکسیدانی آزمایشگاهی نیز به کار گرفته شد. علاوه بر این، osajin به عنوان ایزوفلاونوئید فعال زیستی اصلی نمونه با استفاده از تجزیه و تحلیل کروماتوگرافی لایه نازک با عملکرد بالا تعیین شد.

نتایج:نتایج سنجش‌های آنتی‌اکسیدانی متفاوت از نظر مکانیکی پتانسیل آنتی‌اکسیدانی قابل‌توجهی عصاره را نشان داد. پتانسیل مهار MPM در برابر آنزیم های هیالورونیداز، کلاژناز و الاستاز، که مستقیماً با تسریع روند پیری مرتبط هستند، بررسی شد و نتایج نشان داد که MPM به صراحت آنزیم های فوق را مهار می کند. MPM دارای محتوای فنولیک و فلاونوئید منحصر به فرد بود. به ترتیب 2.26 ± 113.92 میلی گرم اسید گالیک معادل در گرم و 66.41 ± 0.74 میلی گرم QE/g. هنگامی که سنجش ظرفیت آنتی اکسیدانی کل در نظر گرفته شد، می توان پیشنهاد کرد که MPM یک عامل ضد پیری امیدوارکننده است.

نتیجه:در نتیجه، این مطالعه نشان می دهد که عصاره میوه های M. pomifera دارای پتانسیل ضد پیری قابل توجهی است و ممکن است برای این منظور استفاده شود.

کلید واژه ها:Maclura pomifera، ضد پیری، آنتی اکسیدان، HPTLC، osajin

معرفی

به همین ترتیب، همه اندام‌ها از جمله پوست انسان با افزایش سن دچار تغییرات فیزیولوژیکی مختلفی می‌شوند. دو دسته از پیری وجود دارد: پیری ذاتی توسط ژنتیک کنترل می‌شود و پیری بیرونی نتیجه طبیعی تغییرات فیزیولوژیکی به دلیل اثرات مخرب عوامل محیطی مانند اشعه ماوراء بنفش (UV) است. تشعشعات، سموم شیمیایی و سیگار کشیدن. 1،2 تخریب ساختار عروقی و غددی، از دست دادن بافت فیبری و کاهش بازسازی سلولی عوامل اساسی پیری هستند که منجر به افزایش انحطاط بافت، چین و چروک و کاهش ماتریکس خارج سلولی (ECM) می شود. ).4

پوست به عنوان بزرگ‌ترین عضو، نقش‌های مختلفی از جمله محافظت، تنظیم دمای بدن و تشخیص حواس را بر عهده دارد. پوست از اپیدرم، درم و بافت زیر جلدی تشکیل شده و اولین مانع بین بدن انسان و بیرونی است. محیط.6،7 ECM بزرگترین واحد درم است و با ارائه یک داربست ساختاری از رشد و الاستیسیته حمایت می کند. یک پروتئین پایه که تقریباً 25-35 درصد از کل محتوای پروتئین بدن را تشکیل می‌دهد و در فضای خارج سلولی انواع مختلف بافت‌های همبند حیوانی یافت می‌شود. یکی از دلایل اصلی پیری پوست و ایجاد چین و چروک، تغییر کلاژن است. ساختار. 1 الاستین پروتئینی است که خاصیت ارتجاعی فیزیولوژیکی منحصر به فردی به پوست می دهد و در چندین بافت همبند وجود دارد. 6 هیدراتاسیون پوست و صاف، مرطوب و روان نگه داشتن پوست از عوامل مهمی هستند که از پیری پوست جلوگیری می کنند. گلیکوزآمینوگلیکان (GAG)، اسید هیالورونیک، نقش حیاتی در این فعالیت ها ایفا می کند. این ترکیبات اصلی توسط آنزیم های هیالورونیداز، کلاژناز و الاستاز تجزیه می شوند، بنابراین منجر به تسریع پیری پوست می شود. علاوه بر این، قرار گرفتن در معرض میکروارگانیسم‌ها، آلودگی، پرتوهای یونیزان، مواد شیمیایی و سموم منجر به تشکیل گونه‌های فعال اکسیژن (ROS) می‌شود و پیامدهای مضر آن، پیری پوست را تسریع می‌کند.9 ROS می‌تواند مسیرهای مولکولی پیچیده و در نتیجه کلاژناز، الاستاز را آغاز کند. و فعالیت هیالورونیداز ممکن است افزایش یابد، که منجر به شکست قابل تشخیص ECM و تغییرات بافت پوست شود.

Maclura pomifera (Rafin.) Schneider متعلق به Moraceae یا خانواده توت است و به نام درخت پرتقال osage نیز شناخته می شود که تقریباً در سراسر جهان کشت می شود. و ضد مالاریا13 به دلیل ایزوفلاون های پرنیله شده آن، یعنی اوزاجین و پومیفرین، که متابولیت های اصلی میوه ها محسوب می شوند.14 در تولید لوازم آرایشی ضد پیری، ترکیبات فنلی منابع طبیعی قابل توجهی هستند. بنابراین، علاقه فزاینده ای به مطالعه گیاهان غنی از ترکیبات فنلی مانند M. pomifera برای چنین فعالیت هایی وجود دارد. مطالعات قبلی نشان داد که ایزوفلاون‌های Maclura سطوح بیان کلاژن، الاستین و فیبریلین را نسبت به غلظت‌های معادل رتینول افزایش می‌دهند. از این رو، ممکن است فرض شود که ایزوفلاون‌های Maclura محرک‌های قوی پروتئین ECM هستند. با توجه به این داده‌ها، هدف این مطالعه بررسی پتانسیل ضد پیری عصاره متانولی 80 درصدی M. pomifera با بررسی پتانسیل آن برای فعالیت زیستی آنتی‌اکسیدانی و مهار آن است. آنزیم های تجزیه کننده ECM علاوه بر این، تجزیه و تحلیل کمی جزء فعال زیستی اصلی عصاره، اوساجین با کروماتوگرافی لایه نازک با کارایی بالا (HPTLC) اندازه‌گیری شد، و سنجش محتوای فنلی کل و محتوای فلاونوئید کل برای درک دقیق‌تر مشخصات فنلی انجام شد. نتایج نشان می دهد که M. pomifera ممکن است منبع ارزشمندی از محصولات ضد پیری باشد.

مواد و روش ها

مواد شیمیایی

Sigma Chemical Co. (سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا) تمام آنزیم‌ها، مواد شیمیایی و مراجع مورد استفاده در آزمایش‌ها را ارائه می‌کرد. کیفیت تمام مواد شیمیایی از درجه تحلیلی بود.

ماده ی گیاهی

میوه های M. pomifera در ماه می 2020 از Uşak، ترکیه جمع آوری شد. دکتر هلال برداکچی روش شناسایی گیاه شناسی نمونه های گیاهی را انجام داد. نمونه کوپن گیاه در دانشگاه Acıbadem، هرباریوم دانشکده داروسازی (ACUPH 00002) سپرده شد.

تهیه عصاره

میوه ها را به قطعات کوچک تقسیم کرده و از مخلوط کن عبور می دهند. میوه ها (6.45 کیلوگرم) با 3125 میلی لیتر متانول 80 درصد (MeOH) با استفاده از دستگاه تکان دهنده به مدت سه روز در دمای اتاق در یک مکان تاریک خیس شدند. ماسرات صاف شد و این روش دو بار تکرار شد. فیلترهای به‌دست‌آمده با هم جمع‌آوری شدند و متانول در اواپراتور چرخشی تبخیر شد. عصاره متانولی خام لیوفیلیز شد (بازده 204.37 گرم، 3.16 درصد) و در -20 درجه (MPM) نگهداری شد.

روش کمی سازی ترکیبات فعال زیستی اصلی توسط HPTLC

تمام مواد شیمیایی و معرف های مورد استفاده از درجه تجزیه ای بودند. کلروفرم (CHCl3) و اتیل استات (EtOAc) از سیگما آلدریچ خریداری شد. یک استاندارد تجاری موجود از osajin از Sigma-Aldrich خریداری شد (SMB {{1{14}}}}0092). آنالیزهای HPTLC بر روی صفحات 60 F254 سیلیکاژل HPTLC شیشه ای 20 × 10 سانتی متر (Merck, Darmstadt, Germany) انجام شد. محتوای Osajin در MPM توسط یک سیستم تحلیلی CAMAG HPTLC تعیین شد. فاز متحرک مورد استفاده در مطالعه حاضر قبلاً توسط بوزکورت و همکاران 16 در طی جداسازی اصول فعال M. pomifera شرح داده شده است. 10 میلی گرم در میلی لیتر عصاره MeOH به عنوان محلول تست آنالیز استفاده شد. یک محلول استوک استاندارد (0.5 میلی‌گرم در میلی‌لیتر) اوزاجین با استفاده از 2 میلی‌لیتر استون تهیه شد. محلول کاری با غلظت 50 میکروگرم بر میلی لیتر از ترکیب استاندارد با رقیق سازی با استون از محلول استوک تهیه شد. هر نمونه از طریق فیلتر سرنگ 0.45 میکرومتر فیلتر شد. 10 میکرولیتر از عصاره به همراه حداقل پنج غلظت مختلف از محلول استاندارد (3.{18}}.7 میکرولیتر) به صورت نوارهایی به طول 8 میلی‌متر بر روی صفحات HPTLC شیشه سیلیکاژل 60 F254 با CAMAG Automatic اعمال شد. TLC Sampler IV. توسعه‌ها در اتاق توسعه خودکار CAMAG{23}} (ADC- 2) انجام شد و فاز متحرک CHCl3: EtOAc [8:2 (v/v)] بود. محفظه به مدت 10 دقیقه اشباع شد و صفحه به مدت 5 دقیقه قبل از توسعه آماده شد. رطوبت با ADC{30}} با استفاده از MgCl2 (33 درصد RH) به مدت 10 دقیقه کنترل شد. ارزیابی چگالی سنجی با استفاده از یک اسکنر CAMAG TLC IV در حالت فلورسانس انجام شد. ابعاد شکاف در 5×0.2 میلی متر، میکرو و سرعت اسکن روی 20 میلی متر بر ثانیه تنظیم شد. محتویات استاندارد با مقایسه مساحت زیر منحنی های مشخصه عملکرد گیرنده (AUC) با منحنی کالیبراسیون استانداردها در 280 نانومتر به دست آمد. وجود استانداردها در عصاره با مقایسه هر دو فاکتور حفظ (Rf) و پوشش طیف UV هر عصاره و استاندارد تضمین شد. مقدار osajin با مقایسه شدت نور منتشر شده از عصاره و فراکسیون با ترکیب استاندارد تعیین شد.

محتوای اوساجین در عصاره گیاه خام با استفاده از روش HPTLC-densitometry اندازه گیری شد. مقدار Rf استاندارد osajin برابر با 0.556 بود. وجود اوزاجین در نمونه های آزمایشی با مقایسه مقادیر Rf آنها و همپوشانی طیف UV آنها تأیید شد (شکل 1). کمی سازی با مقایسه AUC نمونه ها با منحنی کالیبراسیون به دست آمده با استفاده از ترکیب استاندارد osajin انجام شد. تابع کالیبراسیون y{4}}.268*10-8x بود. ضریب همبستگی (R) و ضریب تغییرات تابع کالیبراسیون به ترتیب 0.998 درصد و 1.06 درصد بود. تجزیه و تحلیل HPTLC نشان داد که MPM حاوی 0.22 درصد (وزنی/وزنی) اوزاجین است. نتایج مطالعه HPTLC در جدول 1 آورده شده است.

سنجش پروفایل فنلی

سنجش محتوای فنلی کل

این روش برای ارزیابی محتوای فنلی کل نمونه‌ها به روش Folin-Ciocalteu، همانطور که قبلاً توسط Kurt-Celep و همکاران استفاده شده بود، انجام شد.17 20 میکرولیتر از محلول‌های نمونه تازه رقیق شده با 75 میکرولیتر Na2 CO3 (20 درصد) مخلوط شد. و 100 میکرولیتر FCR (معرف Folin-Ciocalteu) رقیق شده با H2O (1:9). پس از انکوباسیون به مدت 30 دقیقه در دمای 45 درجه، میزان جذب مخلوط ها به روش اسپکتروفتومتری در طول موج 765 نانومتر خوانده شد. نتایج به صورت میلی گرم معادل اسید گالیک (GAE) در هر گرم عصاره بیان شد.

سنجش محتوای فلاونوئید کل

اندازه گیری محتویات فلاونوئید کل فراکسیون ها به روشی که قبلا توسط Bardakci و همکاران گزارش شده بود انجام شد. سپس 30 دقیقه انکوباسیون مخلوط ها در دمای اتاق و در تاریکی انجام شد. پس از فرآیند انکوباسیون، جذب در طول موج 415 نانومتر محاسبه شد. نتایج به صورت میلی گرم معادل کوئرستین (QE) در 1 گرم نمونه بیان شد.

تعیین فعالیت آنتی اکسیدانی آزمایشگاهی

2،2-دی فنیل-1-پیکریل هیدرازیل (DPPH) آزمایش فعالیت مهار رادیکال

برای تعیین فعالیت مهار رادیکال DPPH، ترکیبی از محلول های نمونه تازه رقیق شده (غلظت های مختلف تهیه شده از محلول ذخیره 1 میلی گرم در میلی لیتر) و محلول DPPH متانولی (100 میلی مولار) انجام شد. پس از فاصله انکوباسیون در دمای اتاق به مدت 45 دقیقه، جذب در طول موج 517 نانومتر خوانده شد. هیدروکسی تولوئن بوتیله (BHT) به عنوان یک ترکیب مرجع برای به دست آوردن یک منحنی کالیبراسیون استفاده شد. مقادیر IC50 نتایج به صورت میکروگرم بر میلی لیتر 19 بیان شد

تست قدرت آنتی اکسیدانی کاهش دهنده آهن (FRAP).

برای به دست آوردن معرف FRAP، 25 میلی‌لیتر بافر استات 0 میلی‌مولار (pH 3.6)، 2.5 میلی‌لیتر TPTZ [2،4،{8}}تریس (2-پیریدیل)-s-تریازین] و 2.5 میلی لیتر FeCl3 0.6H2 O (20 میلی مولار) مخلوط شدند. پس از آن، 10 میلی‌لیتر از نمونه به 260 میلی‌لیتر معرف FRAP اضافه شد و در یک بشقاب چاهک 96 تا 300 میلی‌لیتر با آب مقطر رقیق شد. پس از انکوباسیون به مدت 30 دقیقه در دمای 37 درجه، اندازه گیری جذب در طول موج 593 نانومتر انجام شد. BHT به عنوان یک ترکیب مرجع استفاده شد. برای به دست آوردن منحنی استاندارد از محلول کلرید آهن (252/0 میلی مولار) استفاده شد و نتایج به صورت میلی مولار FeSO4 در 1 گرم عصاره خشک ارائه شد.

تست ظرفیت آنتی اکسیدانی کاهنده مس (CUPRAC).

آزمایش CUPRAC بر اساس روشی که قبلا توسط Barak و همکارانش توضیح داده شد، تخمین زده شد. 21 حجم مساوی 10 میلی مولار CuSO4، نئوکوپراین و بافر استات آمونیوم (85 میلی لیتر) در یک صفحه چاهی مخلوط شد. پس از آن به ترتیب 51 میلی لیتر آب مقطر و 43 میلی لیتر محلول نمونه به مخلوط اضافه شد. پس از انکوباسیون به مدت 20 دقیقه، جذب در 450 نانومتر خوانده شد. نتایج به صورت میلی گرم معادل اسید اسکوربیک در 1 گرم عصاره خشک بیان شد.

تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی تام (TOAC).

آزمایش ظرفیت آنتی اکسیدانی کل بر اساس روش فسفومولیبدنیوم که قبلاً توسط باراک و همکاران توضیح داده شد، محاسبه شد. 28 میلی‌مولار سدیم فسفات مونوبازیک، 4 میلی‌مولار مولیبدات آمونیوم و 600 میلی‌مولار H2 SO4 مخلوط شدند. سپس 300 میکرولیتر محلول TOAC با 30 میکرولیتر محلول نمونه در یک صفحه 96 سالم مخلوط شد. پس از دوره انکوباسیون در دمای 95 درجه به مدت 90 دقیقه، جذب در 695 نانومتر خوانده شد. برای به دست آوردن منحنی استاندارد از اسید اسکوربیک استفاده شد و نتایج به صورت میلی گرم معادل ترولاکس در 1 گرم عصاره خشک محاسبه شد.

فعالیت بازدارنده بر روی آنزیم های مرتبط با پیری پوست

فعالیت ضد کلاژناز

برای اندازه گیری فعالیت ضد کلاژناز MPM، محلول بافر تریسین 5{13}} میلی مولار (pH: 7.5) (4{25}}0 میلی مولار NaCl و 10 میلی مولار CaCl2) تهیه شد. از کلستریدیوم هیستولیتیکوم (ChC - EC. 3.4.23.3) به عنوان منبع کلاژناز استفاده شد که در محلول بافر 50 میلی مولار تریسین برای دستیابی به غلظت اولیه 0.8 U/mL حل شد. 2 میلی مولار N-[3-(2-فوریل) آکریلول]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) محلول در بافر تریسین به عنوان سوبسترا استفاده شد. عصاره ها با آنزیم کلاژناز در محلول بافر به مدت 15 دقیقه قبل از افزودن سوبسترا برای شروع واکنش انکوبه شدند. مخلوط واکنش نهایی شامل حجم کل 150 میکرولیتر بود. بافر تریسین، 0.8 میلی مولار FALGPA، 0.1 واحد ChC، و 25 میکرولیتر MPM. برای نتایج خالی از آب استفاده شد. پس از افزودن بستر، اندازه گیری جذب بلافاصله انجام شد. کنترل های مثبت اپی گالوکاتچین گالات (EGCG) را انجام دادند

فعالیت ضد الاستاز

ارزیابی MPM برای فعالیت ضد الاستاز با استفاده از محلول بافر تریس-HCl 0.2 میلی مولار (pH: 8.{5}}) انجام شد. محلول انباری از الاستاز (PE, EC 3.4.21.36) به دست آمده از پانکراس خوک با آب مقطر با غلظت 3.33 میلی گرم بر میلی لیتر تهیه شد. N-Succinyl-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN) برای استفاده به عنوان سوبسترا در یک محلول بافر (1.6 میلی مولار) حل شد. عصاره MPM با 1 میکروگرم در میلی لیتر PE به مدت 15 دقیقه در دمای 37 درجه قبل از افزودن سوبسترا انکوبه شد. در پایان 15 دقیقه قبل از جوجه کشی، سوبسترای AAAPVN 8/8 میلی مولار به مخلوط آنزیمی حاوی 1 میلی گرم در میلی لیتر عصاره گیاهی اضافه شد و دوباره به مدت 15 دقیقه در دمای 37 درجه انکوباسیون انجام شد. در حالی که از EGCG 25/ پس از دوره‌های نهفتگی، اندازه‌گیری‌ها در 4 نقطه زمانی مختلف به مدت 5 تا 30 دقیقه توسط طیف‌سنجی میکروپلیتی Thermo Scientific Multiskan SkyHigh در تحریک 365 نانومتر و گسیل 410 نانومتر انجام شد.24، 25

فعالیت ضد هیالورونیداز

فعالیت ضد هیالورونیداز با اصلاح روش توصیف شده توسط Kolayli و همکاران 26 و لی و همکاران انجام شد. ابتدا هیالورونیداز تجاری خریداری شده (EC 3.2.1.35، Sigma-Aldrich) در 0 حل شد. 0 بافر فسفات 2 مولار (pH: 3.5) حاوی نمک طعام و آلبومین سرم گاوی. سپس هیالورونیک اسید، سوبسترای مناسب آنزیم، در بافر استات (0}.1 M، pH: 3.5) تهیه و آماده استفاده شد. مخلوط سنجش شامل 20 میکرولیتر MPM در غلظت 1 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر، 10 میکرولیتر هیالورونیداز و 60 میکرولیتر بافر استات 1/0 مولار به مدت 20 دقیقه در دمای 37 درجه از قبل انکوبه شد. پس از زمان انکوباسیون، 10 میکرولیتر اسید هیالورونیک به مخلوط اضافه شد و مجدداً در دمای 37 درجه به مدت 20 دقیقه انکوبه شد. در پایان کل زمان انکوباسیون، اندازه‌گیری‌ها در نقاط زمانی مختلف توسط طیف‌سنجی میکروپلیت Thermo Scientific Multiskan SkyHigh در 600 نانومتر انجام شد. گروه خالی در مجموعه آزمایشی فاقد آنزیم بود، در حالی که گروه کنترل فاقد عصاره بود. درصد فعالیت آنتی هیالورونیداز با استفاده از رابطه زیر محاسبه شد:

فعالیت‌های ضد پیری (درصد )= [(قابلیت کنترل - شکم نمونه)/ قاعدگی کنترل] × 100

تحلیل آماری

آزمایش‌های ضد الاستاز، ضد کلاژناز و فعالیت ضد هیالورونیداز موجود در این مطالعه سه بار به طور مستقل تکرار شدند. اختلاف آماری با استفاده از آزمون t نرم افزار GraphPad Prism 8 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت (p کمتر یا مساوی 0.05).

نتایج و بحث

تعیین پتانسیل ضد پیری

الاستین، کلاژن و اسید هیالورونیک از محتویات شناخته شده ECM هستند که نقش اساسی در ظاهر جوان پوست دارند. الاستین یک پروتئین حیاتی برای حفظ خواص ارتجاعی پوست است، در نتیجه، کاهش الاستین در ECM منجر به تسریع در روند پیری می شود.27 ادبیات قبلی ارتباط مستقیم بین چین و چروک و پیری پوست با مقادیر کمتر الاستین را نشان می دهد. هیالورونیک اسید یک مولکول آبگریز GAG است که از طریق هیالورونیداز دپلیمریزه می شود. اسید هیالورونیک برای حفظ صافی و رطوبت پوست بسیار مهم است. از این رو، نشان داده شده است که تجزیه بیش از حد منجر به خشکی و چروک شدن پوست می شود. از طریق فرآیند پیری با گذشت زمان، کاهش سطح کلاژن باعث نازک شدن درم می شود که در معاینه میکروسکوپی نشانه ای متمایز در نظر گرفته می شود. }} دقیقاً نشان داده شد که تأخیر در تجزیه کلاژن از طریق مهارکننده‌های کلاژناز، در نتیجه چروک شدن و پیری ساختار پوست را کاهش می‌دهد. با در نظر گرفتن این اطلاعات، موادی که الاستاز، کلاژناز و هیالورونیداز را مهار می‌کنند پتانسیل قابل توجهی برای محصولات ضد پیری دارند. مطالعات قبلی نشان داده اند که ایزوفلاونوئیدهای مختلف زیست فعالی مهاری قابل توجهی در برابر آنزیم های فوق الذکر نشان می دهند. Addotey و همکاران 31 نشان دادند که چهار ایزوفلاونوئید مختلف هیالورونیداز را تا 61.2 درصد مهار می کنند. کیم و همکاران 32 نشان داده اند که یک ایزوفلاونوئید جدا شده از Glycyrrhiza uralensis Fisch.، لیکوریسیدین، دارای فعالیت مهاری الاستاز قابل توجهی است. مقدار IC50 شیرین بیان 2/4 ± 2/61 میکرومولار در حالی که اسید اولئانولیک 4/11 ± 4/131 به عنوان ترکیب مرجع محاسبه شد. نتایج نشان داد که ایزوفلاونوئیدها ممکن است آنزیم های الاستاز را مهار کنند. مطابق با مطالعه فوق الذکر، کیم و همکاران 33 9 ایزوفلاونوئیدهای پرنیله شده مختلف، ساختارهای بسیار مرتبط با اوزاجین، جدا شده از ریشه Flemingia philippinensis Merr را مورد مطالعه قرار دادند. & رولف. محققان گزارش کردند که پنج ایزوفلاون پرنیله شده دارای فعالیت مهاری قوی در برابر نوتروفیل الاستاز بودند، مقادیر IC50 بین 1.{22}}.0 میکرومولار متفاوت بود، در حالی که مقدار IC50 اسید اولئانولیک 28.4 میکرومولار بود. در مطالعه دیگری، Ergene Öz و همکاران. 34 فعالیت مهاری پنج ایزوفلاونوئید جدا شده از ریشه Ononis spinoza L. را در برابر هیالورونیداز، کلاژناز و الاستاز بررسی کردند. فعالیت بازدارندگی هیالورونیداز ایزوفلاون ها بین 22.{29}}.58 درصد گزارش شد، در حالی که در همان غلظت، تانیک اسید 88.32 درصد مهار را نشان داد. نتایج مهار کلاژناز بین 20.{34}}.49 درصد و مهار الاستاز 20.{37}}.88 درصد محاسبه شد. EGCG به عنوان مرجع برای هر دو سنجش مورد استفاده قرار گرفت و فعالیت های بازداری در همان غلظت به ترتیب 18/41 درصد و 64/84 درصد اندازه گیری شد. مطالعه دیگری به بررسی درمان های موضعی پومیفرین جدا شده مستقیم از M. pomifera پرداخت. 15 پومیفرین یک ایزوفلاونوئید پرنیله شده است که در میوه های M. pomifera یافت می شود و ساختار مولکولی آن بسیار شبیه به osajin است. محققان گزارش کردند که پومیفرین با افزایش کلاژن و الاستین که برتر یا معادل ترکیب مرجع، رتینول است، فعالیت تحریک کننده پروتئین ECM قوی را نشان داد. تمام مطالعات ذکر شده نشان داد که ایزوفلاون ها مهارکننده های متوسط ​​تا قوی این آنزیم ها هستند و پتانسیل قابل توجهی به عنوان مواد طبیعی ضد پیری دارند.

در این مطالعه، فعالیت های مهاری هیالورونیداز، کلاژناز و الاستاز MPM در شرایط آزمایشگاهی برای تعیین پتانسیل ضد پیری مورد بررسی قرار گرفت. یک سنجش مقایسه ای برای سنجش مهار کلاژناز در دو نقطه، به عنوان مثال 2{32}} و 4{36}} دقیقه، برای MPM و ترکیب مرجع، EGCG، انجام شد. نتایج نشان داد که فعالیت مهاری کلاژناز با گذشت زمان افزایش می‌یابد. 1 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر MPM 99/1 ± 55/84 درصد مهار را نشان داد، در حالی که 25{4{44}}}} میکروگرم بر میلی‌لیتر EGCG پس از 20 دقیقه انکوباسیون، 83/1 ± 84.66 درصد را نشان داد. فعالیت زیستی مهاری در طول زمان، پس از 40 دقیقه تقویت شد. مطابق با ادبیات، MPM فعالیت مهاری قابل توجهی در برابر الاستاز نشان داد. نتایج برای نقاط چهار زمانه (5، 10، 20 و 30 دقیقه) اندازه گیری شد و افزایش در طول زمان را نشان داد (شکل 2). EGCG (250 μg/mL) به عنوان مرجع استفاده شد و فعالیت بازدارندگی در هر نقطه زمانی افزایش یافت (0.{33}} ± 44.07 درصد , 0 ± 52.19.{37}} درصد , 0 ± 64.69.{41 }} درصد و به ترتیب 86.21 ± 0.00 درصد). در همین حال، MPM در غلظت 1 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر افزایش و فعالیت بازدارندگی بالاتری از خود نشان داد که از 0.57 ± 34.70 درصد به 1.04 ± 97.40 درصد از 5 دقیقه به 30 دقیقه افزایش یافت. به طور مشابه، 1 میلی گرم بر میلی لیتر MPM آنزیم هیالورونیداز را به طور قابل توجهی پس از 40 دقیقه انکوباسیون مهار کرد. 83.91 ± 2.36 درصد پس از 40 دقیقه اندازه گیری شد و پس از 80 دقیقه انکوباسیون، نرخ مهار به 0.45 ± 97.19 درصد افزایش یافت. هنگامی که کل سنجش های مهار آنزیم در نظر گرفته شد، نتایج به طور قابل توجهی نشان داد که MPM ممکن است یک عامل ضد پیری طبیعی ارزشمند باشد و ممکن است در محتویات محصولات ضد پیری مختلف استفاده شود. بنابراین، M. pomifera ممکن است اهمیت اقتصادی بیشتری به دست آورد.

تعیین پتانسیل آنتی اکسیدانی

عوامل متعدد برون زا و درون زا از طریق مکانیسم های مختلف منجر به پیری پوست می شوند. اکثر این عوامل به طور مستقیم یا غیرمستقیم تحت تأثیر تشکیل ROS در ECM پوست قرار می گیرند. از آنجایی که پوست قسمت بیرونی بدن ما را می پوشاند، در زندگی روزمره با مقادیر قابل توجهی از اشعه UV مواجه می شود. بنابراین، اکثر مشکلات پوستی مانند آفتاب سوختگی، هایپرپیگمانتاسیون و سرطان زایی پوست منشأ و یا مربوط به اثرات مستقیم اشعه ماوراء بنفش است. به همین ترتیب، پیری نوری یک پیامد اضافی از خواص خطرناک آن است.36 علاوه بر این، نور UV باعث تشکیل ROS و در نتیجه، استرس اکسیداتیو در بافت پوست می‌شود که یکی از مهم‌ترین مکانیسم‌هایی است که منجر به پیری نوری می‌شود. تشکیل ROS باعث پیری زودرس پوست می شود، عواملی با ظرفیت آنتی اکسیدانی قابل توجه ممکن است ابزار ارزشمندی در برابر اثرات خطرناک اشعه UV باشند. بر این اساس، مطالعات بالینی نشان می‌دهد که مصرف موضعی آنتی‌اکسیدان اثر محافظتی بر روی پوست دارد

پس از ارتباط متقابل بین استفاده موضعی از آنتی اکسیدان و به تعویق انداختن پیری پوست، که در ادبیات قبلی به خوبی ثابت شده است، بررسی پتانسیل آنتی اکسیدانی در شرایط آزمایشگاهی MPM اطلاعات ارزشمندی را برای پتانسیل ضد پیری آن در صورت استفاده موضعی ارائه می دهد. ادبیات قبلی نشان داده است که عصاره‌هایی با تعداد زیادی ایزوفلاونوئید ممکن است آنتی اکسیدان‌های ارزشمندی باشند. در یک مطالعه قبلی، یک عصاره غنی از ایزوفلاوونوئید از عصاره F. macrophylla با از بین بردن ROS آسیب پوستی ناشی از UVB را کاهش داد. 39 Santos و Silva4{{10}} نشان دادند که ایزوفلاونوئیدهای پرنیله شده دارای پتانسیل آنتی اکسیدانی مهمی هستند. بخش فلاونوئید و اثر افزایشی زنجیره جانبی پرنیل. پتانسیل آنتی اکسیدانی عصاره ها و ایزوفلاونوئیدهای M. pomifera در مطالعه قبلی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که عصاره هیدروالکلی و اوساجین خالص فعالیت قابل توجهی در سنجش DPPH، FRAP و TOAC نشان دادند، حتی اگر فراکسیون های پومیفرین و اتیل استات فعالیت بالاتری را نشان دادند. برای تعیین جامع پتانسیل آنتی اکسیدانی در شرایط آزمایشگاهی MPM انجام شده است (جدول 2). MPM فعالیت مهار رادیکال DPPH قابل توجهی را نشان داد، جایی که مقدار IC5{15}} در سال 1998 اندازه‌گیری شد. سنجش FRAP و TOAC همچنین منجر به فعالیت کاهش قابل توجه فلز، 0.01 ± 0.191 میلی مولار FeSO4 / DE و 0.02 ± 114.43 AAE / g DE، به ترتیب. این یافته‌ها با مطالعه قبلی منتشر شده توسط اورهان و همکاران مطابقت داشت. 41 سنجش CUPRAC برای اولین بار تا آنجا که دانش ما بر روی عصاره‌های میوه M. pomifera انجام شد. به همین ترتیب، MPM فعالیت کاهش قابل توجه مس را در روش CUPRAC نشان داد، که در آن نتایج به عنوان 0.01 ± 73.928 AAE / g DE اندازه گیری شد. هنگامی که سنجش ظرفیت آنتی اکسیدانی کل در نظر گرفته شد، می توان پیشنهاد کرد که MPM یک عامل ضد پیری امیدوارکننده است.

پروفایل فنلی و تجزیه و تحلیل HPTLC

ایزوفلاونوئیدها مواد فنلی هستند که به عنوان ترکیبات گیاهی مسئول فعالیت های بیولوژیکی مختلف مانند آنتی اکسیدان، ضد سرطان و در برابر مشکلات زنانه شناخته می شوند. و پومیفرین به عنوان اجزای اصلی میوه های M. pomifera که در درجه اول مسئول فعالیت های بیولوژیکی آن هستند. 12 اوساجین و پومیفرین ایزوفلاونوئیدهای پرنیله شده بسیار مشابهی هستند که تنها با یک گروه هیدروکسیل متفاوت هستند. از میوه های M. pomifera. Kartal و همکاران 45 یک روش LC-MS را برای تعیین osajin و pomiferin در M. pomifera، که از استان ترکیه آنکارا جمع‌آوری شده بود، توسعه دادند. نتایج نشان داد که مقدار پومیفرین در قسمت‌های مختلف نمونه‌های میوه کمی بیشتر از مقدار اوزاجین بود. در مطالعه دیگری، نمونه‌های میوه M. pomifera از مناطق مختلف غرب میانه و جنوب ایالات متحده جمع‌آوری شد و محتوای اوزاجین و پومیفرین با استفاده از روش جدید آنالیز HPLC اندازه‌گیری شد. نتایج نشان داد که تفاوت‌های جغرافیایی منجر به تغییرات قابل‌توجه مقادیر ایزوفلاونوئید در نمونه‌ها می‌شود. 46 Tsao و همکاران، محتوای اوزاجین و پومیفرین میوه‌های جمع‌آوری‌شده از کانادا را تعیین کردند و دریافتند که محتوای پومیفرین کمی بیشتر از محتوای اوزاجین است. در مقابل، هوانگ و همکاران 48 چندین مطالعه را خلاصه کردند که مقادیر اوزاجین را در عصاره های مختلف بالاتر از مقدار پومیفرین نشان دادند. می توان ادعا کرد که محتوای اوزاجین و پومیفرین میوه های M. pomifera با تفاوت های جغرافیایی و تکنیک های استخراج به دلیل ساختار شیمیایی کاملا مشابه آن ها به طور استثنایی متغیر است. برای این مطالعه، مقدار MPM از طریق آنالیز HPTLC، برای اولین بار تا آنجا که ما اطلاع داریم، اندازه‌گیری شد. نتایج تجزیه و تحلیل نشان داد که osajin عنصر غالب MPM است که از استان Uşak جمع آوری شده است. 22 درصد از نمونه را اوساجین تشکیل می دهد (جدول 1). علاوه بر این، برای دستیابی به ارزیابی بیشتر از مشخصات فنلی MPM، سنجش محتوای فنل کل و فلاونوئید کل انجام شد. نتایج نشان داد که MPM دارای محتوای فنلی و فلاونوئیدی قابل توجهی به شرح زیر است. 2.26 ± 113.92 mg GAE/g و 66.41 ± 0.74 mg QE/g به ترتیب. نتایج ارزیابی پروفایل فنلی نشان داد که MPM ممکن است یک کاندیدای برجسته به عنوان یک عامل طبیعی ضد پیری جدید باشد.

نتیجه

اگرچه مطالعاتی که به بررسی اجرای موضعی میوه‌های M. pomifera می‌پردازند نسبتاً جدید هستند، توجه به این روش با گزارش‌های دلگرم‌کننده در حال افزایش است. بنابراین، این مطالعه با هدف توصیف یک ارزیابی جامع از پتانسیل ضد پیری احتمالی عصاره میوه M. pomifera انجام شد. تجزیه و تحلیل HPTLC برای میوه های M. pomifera برای تعیین محتوای ایزوفلاونوئید برای اولین بار تا دانش ما، همراه با مطالعات آزمایشگاهی برای تعیین مشخصات کل فنلی استفاده شد. نتایج نشان داد که osajin جزء اصلی نمونه ها می باشد. علاوه بر این، پتانسیل آنتی اکسیدانی در شرایط آزمایشگاهی عصاره با چهار روش مختلف ارزیابی شد و نتایج پتانسیل آنتی اکسیدانی قابل توجهی از MPM را نشان داد. علاوه بر این، فعالیت بازدارنده در برابر آنزیم‌هایی که مربوط به فرآیند پیری هستند، اندازه‌گیری شد و مشاهده شد که MPM دارای فعالیت مهاری قابل‌توجهی است. در نتیجه، این مطالعه اطلاعاتی را ارائه می دهد که ممکن است منجر به تولید محصولات جدید مراقبت از پوست شود.

اخلاق

تایید کمیته اخلاق:تایید کمیته اخلاق برای مطالعه الزامی نیست.

رضایت آگاهانه:لازم نیست.

بررسی دقیق:بررسی خارجی.

مشارکت های نویسندگی

مفهوم: THB، TBŞ.، HB، طراحی: THB، İ.KC، EC، جمع آوری یا پردازش داده ها: THB، İ.KC، HB، تجزیه و تحلیل یا تفسیر: THB، İ.KC، جستجوی ادبیات: THB، TBŞ.، نوشتن: THB، EC

تضاد منافع:هیچ تضاد منافع توسط نویسندگان اعلام نشده است.

افشای مالی:این مطالعه توسط کمیسیون پروژه های علمی دانشگاه Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar (شماره: 2020/02/07) پشتیبانی شد.

منابع

1. Hwang E، Park SY، Yin CS، Kim HT، Kim YM، Yi TH. اثرات ضد پیری مخلوط Panax ginseng و Crataegus pinnatifida در فیبروبلاست های پوستی انسان و پوست سالم انسان. J Ginseng Res. 2017؛ 41: 69-77.

2. Ganceviciene R، Liakou AI، Theodoridis A، Makrantonaki E، Zoubulis CC. راهکارهای ضد پیری پوست درماتوآندوکرینول. 2012؛ 4: 308-319.

3. Lee H، Hong Y، Tran Q، Cho H، Kim M، Kim C، Kwon SH، Park S، Park J، Park J. نقش جدیدی برای جین سنوزید RG3 در ضد پیری از طریق عملکرد میتوکندری در پوست انسان تحت تابش اشعه ماوراء بنفش فیبروبلاست ها J Ginseng Res. 2019؛ 43: 431-441.

4. Rouvrais C، Bacqueville D، Patrick B، Haure MJ، Duprat L، Coutanceau C، Castex-Rizzi N، Duplan H، Mengeaud V، Bessou-Touya S. ارزیابی خواص ضد پیری رتین آلدئید، گلوکوزید دلتا توکوفرول، و گلیسیل گلیسین ترکیب اولامید J Invest Dermatol. 2017; 137 (ضمیمه 2): S303.

5. Bravo K, Alzate F, Osorio E. میوه های منتخب گیاهان وحشی و کشت شده آند به عنوان منابع ترکیبات بالقوه با فعالیت آنتی اکسیدانی و ضد پیری. محصولات Ind Crops Prod. 2016؛ 85: ​​341-352.

6. Yepes A، Ochoa-Bautista D، Murillo-Arango W، Quintero-Saumeth J، Bravo K، Osorio E. دانه های میوه شور بنفش (Passiflora edulis f. edulis Sims) به عنوان یک منبع امیدوارکننده از عوامل ضد پیری پوست: آنزیمی ، آنتی اکسیدان و مطالعات محاسباتی چند سطحی. عرب ج شیمی. 2021؛ 14:102905.

7. ریتی ال، فیشر جی. سیگنال های ناشی از اشعه ماوراء بنفش و پیری پوست. Aging Res Rev. 2002;1:705-720.

8. Duque L, Bravo K, Osorio E. یک رویکرد ضد پیری جامع که در گیاهان دارویی منتخب کشت شده اعمال می شود: نمایی از محافظت از پوست با مکانیسم های مختلف. محصولات Ind Crops Prod. 2017؛ 97: 431-439.

9. Manjia NJ، Njayou NF، Joshi A، Upadhyay K، Shirsath K، Devkar VR، Moundipa FP. پتانسیل ضد پیری گیاهان دارویی در کامرونHarungana madagascariensis Lam. و Psorospermum aurantiacum Engl. جلوگیری از آسیب پوستی ناشی از اشعه ماوراء بنفش B در شرایط آزمایشگاهی. Eur J Integr Med. 2019؛ 29:100925.

10. Pujimulyani D، Suryani CL، Setyowati A، Handayani RAS، Arumwardana S، Widowati W، Maruf A. پتانسیل های آرایشی Curcuma mangga Val. عصاره در فیبروبلاست های BJ انسانی علیه MMP1، MMP3 و MMP13. هلیون. 2020؛ 6:e04921.

11. Stavropoulou MI، Stathopoulou K، Cheilari A، Benaki D، Gardikis K، Chinou I، Aligiannis N. NMR پروفایل متابولیکی نمونه های بره موم یونانی: ارزیابی مقایسه ای ترکیبات فیتوشیمیایی آنها و بررسی خواص ضد پیری و آنتی اکسیدانی آنها. J Pharm Biomed Anal. 2021؛ 194:113814.

12. فیلیپ اس، جارماتی ز، لیسیچکوف ک، سیسانادی جی، جانکوف آر.ام. جداسازی و شناسایی عصاره‌های Maclura (Maclura pomifera) به‌دست‌آمده از استخراج سیال فوق بحرانی. محصولات Ind Crops Prod. 2015؛ 76: 995-1000.

13. Saloua F, Eddine NI, Hedi Z. ترکیب شیمیایی و مشخصات مشخصات پرتقال osage Maclura pomifera (Rafin.) دانه و روغن دانه اشنایدر. محصولات Ind Crops Prod. 2009؛ 29: 1-8.

14. Veselá D، Kubínová R، Muselík J، Zemlicka M، Suchý V. فعالیت های آنتی اکسیدانی و EROD اوساجین و پومیفرین. فیتوتراپی. 2004؛ 75: 209-211.

15. Gruber JV، Holtz R، Sikkink SK، Tobin DJ. بررسی in vitro و ex vivo درمان های موضعی پومیفرین. فیتوتراپی. 2014؛ 94: 164-171.

16. Bozkurt İ، Dilek E، Erol HS، Çakir A، Hamzaoğlu E، Koç M، Keleş ON، Halici MB. بررسی اثرات پومیفرین از Maclura pomifera بر زخم معده ناشی از ایندومتاسین: یک مطالعه تجربی در موش صحرایی. Med Chem Res. 2017؛ 26: 2048-2056.

17. Kurt-Celep İ، Celep E، Akyüz S، İnan Y، Barak TH، Akaydın G، Telci D، Yesilada E. Hypericum Olympic L. آسیب DNA را بازیابی می کند و از فعال شدن MMP-9 ناشی از UVB در پوست انسان جلوگیری می کند. فیبروبلاست ها جی اتنوفارماکول. 2020؛ 246:112202.

18. Bardakci H، Cevik D، Barak TH، Gozet T، Kan Y، Kirmizibekmez H. متابولیت های ثانویه، خصوصیات فیتوشیمیایی و فعالیت های آنتی اکسیدانی عصاره های مختلف Sideritis congesta PH Davis et Hub.- Mor. Biochem Syst Ecol. 2020؛ 92:104120.

19. Celep E, Seven M, Akyüz S, İnan Y, Yesilada E. تأثیر روش استخراج بر مهار آنزیم، مشخصات فنلی و ظرفیت آنتی اکسیدانی Sideritis trojan Bornm. جی بات آفریقای جنوبی. 2019؛ 121:360–365.

20. Bardakcı H, Barak TH, Özdemir K, Celep E. اثر مواد دم‌آوری و افزودنی‌های مختلف بر ترکیب پلی‌فنولی و زیست‌فعالیت آنتی‌اکسیدانی Tilia platyphyllos Scop تجاری. تزریقات جی رس فارم. 2020؛ 24: 133-141.

21. Barak TH، Celep E، İnan Y، Yesilada E. تأثیر هضم آزمایشگاهی انسان بر فراهمی زیستی محتوای فنلی و فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره میوه Viburnum opulus L. (زغال اخته اروپایی). محصولات Ind Crops Prod. 2019؛ 131: 62-69.

22. Barak TH، Celep E، İnan Y، Yeşilada E. شبیه‌سازی هضم آزمایشگاهی انسان از فراهمی زیستی و فعالیت آنتی‌اکسیدانی فنولیک‌ها از عصاره میوه Sambucus ebulus L.. مواد غذایی بیوسی. 2020؛ 37:100711.

23. Ersoy E, Eroglu Ozkan E, Boga M, Yilmaz MA, Mat A. پتانسیل ضد پیری و فعالیت ضد تیروزیناز سه گونه Hypericum با تمرکز بر ترکیب فیتوشیمیایی توسط LC-MS/MS. محصولات Ind Crops Prod. 2019؛ 141:111735.

24. لی کی کی، کیم جی اچ، چو جی جی، چوی جی دی. اثرات مهاری 150 عصاره گیاهی بر فعالیت الاستاز و اثرات ضد التهابی آنها Int J Cosmet Sci. 1999؛ 21: 71-82.

25. Itoh S، Yamaguchi M، Shigeyama K، Sakaguchi I. پتانسیل ضد پیری عصاره Chaenomeles sinensis. لوازم آرایشی 2019؛ 6:21.

26. Kolayli S، Can Z، Yildiz O، Sahin H، Karaoglu SA. بررسی مقایسه ای خواص ضد هیالورونیداز، ضد یخ، آنتی اکسیدانی، ضد میکروبی و فیزیکوشیمیایی درجات مختلف تک گل عسل شاه بلوط (Castanea sativa Mill.) J Enzyme Inhib Med Chem. 2016; 31 (ضمیمه 3): 96-104.

27. Korkmaz B، Horwitz MS، Jenne DE، Gauthier F. نوتروفیل الاستاز، پروتئیناز 3 و کاتپسین G به عنوان اهداف درمانی در بیماری های انسانی. Pharmacol Rev. 2010; 62:726-759.

28. Akazaki S، Nakagawa H، Kazama H، Osanai O، Kawai M، Takema Y، Imokawa G. تغییرات مربوط به سن در چین و چروک های پوست با یک تحلیل مورفومتریک سه بعدی جدید ارزیابی شد. Br J Dermatol. 2002؛ 147: 689- 695.

29. Barla F، Higashijima H، Funai S، Sugimoto K، Harada N، Yamaji R، Fujita T، Nakano Y، Inui H. اثرات بازدارنده آلکیل گالات ها بر هیالورونیداز و کلاژناز. Biosci Biotechnol Biochem. 2019؛ 73: 2335-2337.

30. Chung JH، Kang S، Varani J، Lin J، Fisher GJ، Voorhees JJ. کاهش کیناز تنظیم‌شده با سیگنال خارج سلولی و افزایش فعالیت‌های MAP کیناز فعال شده با استرس در پوست انسان سالخورده در داخل بدن. J Invest Dermatol. 2000؛ 115: 177-182.

31. Addotey JN، Lenger's I، Jose J، Gampe N، Béni S، Petereit F، Hensel A. ایزوفلاونوئیدها با اثرات بازدارنده بر هیالورونیداز انسانی-1 و نورنئولینان کلیتورینولاکتون B از عصاره ریشه Ononis spinosa L.. فیتوتراپی. 2018؛ 130: 169-174.

32. Kim KJ، Xuan SH، Park SN. Licoricidin، یک ایزوفلاونوئید جدا شده از Glycyrrhiza uralensis Fisher، از پیری نوری فیبروبلاست های پوستی انسانی ناشی از UVA جلوگیری می کند. Int J Cosmet Sci. 2017؛ 39: 133-140.

33. Kim JY، Wang Y، Uddin Z، Song YH، Li ZP، Jenis J، Park KH. ایزوفلاون های بازدارنده نوتروفیل الاستاز رقابتی از ریشه Flemingia philippinensis. Bioorg Chem. 2018؛ 78: 249-257.

34. Ergene Öz B, Saltan İşcan G, Küpeli Akkol E, Süntar İ, Bahadır Acıkara Ö. ایزوفلاونوئیدها به عنوان عوامل ترمیم کننده زخم از Ononidis radix. جی اتنوفارماکول. 2018؛ 211: 384-393.

35. آزودو مارتینز تی ای، د اولیویرا پینتو CAS، د اولیویرا AC، روبلز ولاسکو ام وی، گوریتی گویتیرز آر آر، کوسکویو رافائل ام اف، هوامانی تارازونا جی پی، رتوئرتو فیگوئروا ام جی. بررسی نقش آنتی اکسیدان های موضعی برای حفظ سلامت پوست سای فارم. 2020؛ 88:27.

36. Krutmann J, Schroeder P. نقش میتوکندری در پیری پوست انسان: مدل نیروگاه معیوب. J Investig Dermatol Symp Proc. 2009؛ 14: 44-49.

37. دونگ کی‌کی، داماغی ن، پیکارت اس‌دی، مارکوا NG، اوبایاشی ک، اوکانو ی، ماساکی اچ، گرتر-بک اس، کروتمن جی، اسمایلز کا، یاروش دی‌بی. آسیب DNA ناشی از اشعه ماوراء بنفش باعث آزاد شدن MMP{3}} در پوست انسان می شود. Exp Dermatol. 2008؛ 17: 1037-1044.

38. Oresajo C، Pillai S، Manco M، Yatskayer M، McDaniel D. آنتی اکسیدان ها و پوست: درک فرمولاسیون و اثربخشی. Dermatol Ther. 2012؛ 25: 252-259.

39. Chiang HM، Chiu HH، Liao ST، Chen YT، Chang HC، Wen KC. عصاره ماکروفیلا فلمینگ ایزوفلاونوئیدی با از بین بردن گونه های فعال اکسیژن و مهار بیان MAP کیناز و MMP آسیب های پوستی ناشی از UVB را کاهش می دهد. Evid Based Complement Alternat Med. 2013؛ 2013: 696879.

40. سانتوس CMM، Silva AMS. فعالیت آنتی اکسیدانی پرنیل فلاونوئیدها مولکول ها. 2020؛ 25:696.

41. Orhan IE, Sezer Senol F, Demirci B, Dvorska M, Smejkal K, Zemlicka M. پتانسیل آنتی اکسیدانی برخی از مشتقات فلاونوئید طبیعی و نیمه مصنوعی و عصاره های Maclura pomifera (Rafin.) Schneider (پرتقال osage) و ضروری آن ترکیب روغن ترکی جی بیوشیم. 2016؛ 41: 403-411.

42. Křížová L، Dadáková K، Kašparovská J، Kašparovský T. Isoflavones. مولکول ها. 2019؛ 24:1076.

43. Su Z، Wang P، Yuan W، Grant G، Li S. فنولیک از میوه های Maclura pomifera. Nat Prod Commun. 2017؛ 12: 1743-1745.

44. Orazbekov Y، Ibrahim MA، Mombekov S، Srivedavyasasri R، Datkhayev U، Makhatov B، Chaurasiya ND، Tekwani BL، Ross SA. جداسازی و ارزیابی بیولوژیکی فلاونوئیدهای پرنیله شده از Maclura pomifera. Evid Based Complement Alternat Med. 2018; 2018:1370368.

45. Kartal M، Abu-Asaker M، Dvorska M، Orhan I، Zemlicka M. روش LC-DAD-MS برای تجزیه و تحلیل پومیفرین و اوزاجین، ایزوفلاون های اصلی در Maclura pomifera (Rafin.) Schneider. کروماتوگرافی 2009؛ 69: 325-329.

46. ​​دارجی ک، میگلیس سی، واردلو ع، ابورشد EA. تعیین سطوح ایزوفلاون با HPLC در پرتقال osage از غرب میانه و جنوب ایالات متحده J Agric Food Chem. 2013؛ 61: 6806-6811.

47. تسائو آر، یانگ آر، یانگ جی سی. ایزوفلاون های آنتی اکسیدانی موجود در پرتقال osage، Maclura pomifera (Raf.) Schneid. J Agric Food Chem. 2003؛ 51: 6445-6451.

48. هوانگ HS، Winkler-Moser JK، Tisserat B، Harry-O'kuru RE، Berhow MA، Liun SX. فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره پرتقال اوزاژ در روغن سویا و روغن ماهی در طی نگهداری J Am Oil Chem Soc. 2021؛ 98: 73-87.

【برای اطلاعات بیشتر:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】