مونوترپن گلیکوزیدهای ایریدوئید و غیر حلقوی، کانکانوزیدهای L، M، N، O و P از Cistanche Tubulosa

سیستانچ توبولوزا(SCHRENK) R. WIGHT(Orobanchaceae) یک گیاه انگلی چند ساله است که بر روی ریشه می رویدسالوادورایاکالوتروپیسگونه ای که در شمال آفریقا، عربستان و کشورهای آسیایی پراکنده شده است.1) از ساقه های این گیاه (به ژاپنی Kanka-nikujuyou) به طور سنتی برای این گیاه استفاده می شده استدرمان ناتوانی جنسی، عقیمی، کمر و ضعف بدنو همچنین یک عامل تقویت کننده گردش خون.1,2) در طول مطالعات ما بر روی ترکیبات زیست فعال از ساقهC. tubulosa, 3-6) ما قبلاً بیست و چهار آمینوگلیکوزید فنیل اتانوئید از جمله کانکانوزید H را گزارش کردیم.1, H2, I, J1, J2, K1، و K2و دو الیگوشکر اسیله شده از ساقه های تازهC. tubulosa. 5,6) علاوه بر این، اصلیگلیکوزیدهای فنیل اتانوئید، اکیناکوزید، آکتئوزید و ایزواکتئوزیدمشخص شد که از افزایش سطح سرمی آسپارتات آمینوترانسفراز (AST) و آلانین آمینوترانسفراز (نمک) در کبد آسیب دیده موش ناشی ازD-گالاکتوزامین (D-GalN)/ لیپوپلی ساکارید در دوزهای 25-100 mg/kgبرای سیستم عامل(p.o.). الزامات ساختاری گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید برای فعالیت محافظتی کبدی نیز مشخص شد.5) در این مطالعه مستمر بر روی ترکیبات موجود در ساقه های تازهC. tubulosa، ما یازده گلیکوزید ایریدوئید از جمله کانکانوزید L را جدا کردیم.1), M (2و N (3هفت گلیکوزید مونوترپن غیر حلقوی از جمله کانکانوزید O (4) و P (5)، سه فنیل پروپانوئید، و چهار لیگنان. این مقاله به جداسازی و توضیح ساختار پنج ترکیب جدید می پردازد.1-5).

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای رفع اختلالات جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ساقه های تازه C. tubulosa (کشت شده در ارومچی، استان سین کیانگ، چین) با متانول تحت رفلاکس استخراج شدند تا عصاره متانولی (8.36٪ از ساقه های تازه) بدست آید. از عصاره متانولی، فراکسیون شسته شده با H2O- و MeOH (به ترتیب 63/5 و 73/2 درصد) با روش کروماتوگرافی ستونی Diaion HP-20 (H2O→MeOH) همانطور که قبلاً توضیح داده شد به دست آمد. تحت کروماتوگرافی ستونی SiO2 و ODS و در نهایت HPLC برای ارائه کانکانوزیدهای L (1, 0.{18}}026%), M (2, 0.{27}. }}001%)، N (3، 0.00{{60}}7%)، O (4، 0.0{{90}}2{{{105}}%)، و P (5، 0 .{121}}002%), 6-deoxycatalpol3,7) (6, 0.197%), bartsioside3,7) (7, { {147}}.0583%)، گلوروزید3،7) (8، 0.0443%)، kankanoiside A3) (9، 22.3 میلی گرم، 0.0010%)، موسائنوزیدیک اسید3،7) ( 10، 0.0056%)، 8- اپیلوگانیک اسید3،8) (11، 0.0023%)، 8-اپیداکسی لوگانیک اسید3،7) (12، 0.0004%)، ژنیپوزیدیک اسید3،7) (13، 0.0040% کانکانوزید E3) (14، 0.0026%)، (2E,6Z)-8-bD-glucopyranosyloxy-2،6-دی متیل-2،6-octadienoic acid3 ,9) (15، 31.0 میلی گرم، 0.0014%)، (2E،6E){95}}،7-دی متیل-8-هیدروکسی اکتادین-1-yl-ObD-glucopyranoside10) (16، 0.0082٪، 8-hydroxygeraniol 8-O-bD-glucopyranoside11) (17، 0.0044%)، betulalbuside A12) (18، 0.0004%)، coniferin13) (19، 0.0002٪)، (19، 0.0002٪) 20، 0.0015%)، سیناپیک آلدئید 4-ObD-glucopyranoside14) (21، 0.0001%)، ()-pinoresinol ObD-glucopyranoside4،8،15) (22، 0.0010%)، eucommin A1، 2032 %)، isoeucommin A17) (24، 0.0010%)، و ()-syringaresinol ObD-glucopyranoside4،8،18) (25، 0.0044%).

ساختارهای Kankanosides L (1)، M (2)، و N (3)

Kankanoside L (1) به عنوان یک پودر سفید با چرخش نوری منفی ([a]D 26 - 45.7 در MeOH) به دست آمد. طیف مادون قرمز آن یک باند جذب قوی در 3433 و 1{{2{{{{{0}}}80 سانتی‌متر- 1 نشان داد که نشان دهنده یک نیمه گلیکوزید است. بمباران اتمی سریع (FAB) -MS 1 اجرا در حالت های یون مثبت و منفی پیک های یون شبه مولکولی را به ترتیب در m/z 371 [M Na] و 347 [M-H]- نشان داد و فرمول مولکولی با اندازه گیری FABMS با وضوح بالا به عنوان C15H24O9 تعیین می شود. هیدرولیز اسید 1 با اسید کلریدریک 1.0 مولار D-گلوکز را آزاد کرد که با تجزیه و تحلیل HPLC با استفاده از آشکارساز چرخش نوری شناسایی شد.{22}} 1، 2)، که توسط آزمایش های مختلف NMR اختصاص داده شد، 19) سیگنال های قابل انتساب به چهار متیلن را نشان داد [d 1.43 (1H, br dd, J= ca. 5, 13 Hz, 4a-H), 1.73 ( 1H، br dd، J= حدود 12، 14 هرتز، 6a-H)، 1.85 (1H، m، 4b-H)، 1.93 (1H، br dd، J= ca. , 14 Hz, 6b-H), 3.50 (1H, ddd, J{= 2.4, 12.5, 13.0 Hz, 3a-H), 3.83 (1H, br dd, J=

حدود 5، 13 هرتز، 3b-H)، 3.78، 4.12 (هر کدام 1H، هر دو d، J= 13.1 هرتز، 10-H2)]، دو متین [d 2.15 (1H، dd، J=7.2, 8.9 Hz, 9-H) and 2.23 (1H, m, 5-H)], and an acetal group [d 4.81 (1H, d, J{28 }}.9 هرتز، 1-H)] همراه با یک قسمت b-glucopyranosyl [d 4.70 (d, J= 7.9 Hz، 1 -H)]. همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است، آزمایش طیف سنجی همبستگی 1H-1H (1H-1H COSY) روی 1 وجود ساختارهای جزئی را نشان می دهد که با خطوط پررنگ نوشته شده اند. در آزمایش همبستگی چند پیوندی هترونهسته ای (HMBC) روی 1، همبستگی های دوربرد بین پروتون ها و کربن های زیر مشاهده شد ({46}}H و 3-C، 8-C؛ {{ 49}}H و 7-C و 10-C; }}H2 و 8-C، 1 -H و 1-C) همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است. آزمایش طیف‌سنجی افزایش Overhauser هسته‌ای (NOESY حساس به فاز)، که همبستگی NOE را بین جفت‌های پروتون زیر نشان داد (1-}H و 3aH؛ 3a-H و 4a-H؛ 3b-H و 4b-H؛ 4b-H و 9-H، 5- H و 6b-H، 7-H; و 10-H2)، همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است. طیف 1H- و 13C-NMR 1 بر روی اجزای اصلی iridoid 6-deoxycatalpol (6) سوار شدند، به جز سیگنال های ناشی به قسمت اشباع d-لاکتول. در نهایت، هیدروژناسیون 6 به 1 داد، بنابراین ساختار کلیشه کانکانوزید L به 3،{101}} دی هیدرو{102}}دئوکسی کاتالپول (1) مشخص شد.

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای تسکین اختلال برانگیختگی پست PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Kankanoside M (2) به عنوان یک پودر سفید با چرخش نوری منفی ([a]D 26 - 18.7 در MeOH) به دست آمد. طیف مادون قرمز 2 نوارهای جذبی را در 3433، 1736، 1655، و 1{22}}76 سانتی متر{8}} نشان داد که به بخش های هیدروکسیل، d-لاکتون، الفین و اتر قابل انتساب است. طیف یون مثبت FAB-MS 2 پیک یون شبه مولکولی را در m/z 353 [M Na] نشان داد و فرمول مولکولی با اندازه‌گیری FAB-MS یون مثبت با وضوح بالا به عنوان C15H22O8 تعیین شد. هیدرولیز اسید 2 با 1.0 مولار هیدروکلراید D-گلوکز آزاد شده است. طیف‌های 1H- و 13CNMR 2 (CD3OD، جداول 1، 2) سیگنال‌های قابل انتساب به چهار متیلن را نشان دادند [d 1.66، 2.11 (هر کدام 1H، هر دو m، 4-H2)، 2.15، 2.75 (هر کدام 1H، هر دو m, 6-H2), 4.29 (1H, ddd, J= 2.8, 8.4, 14.3 Hz, 3b-H), 4.32, 4.51 (هر 1H, هر دو d, J{{{61} }}.1 هرتز، 10-H2)، 4.35 (1H، ddd، J{= 3.1، 6.7، 14.3 هرتز، 3a-H)]، دو متین [d 2.97 (1H، m، 5-H)، 3.82 (1H, br s, 9-H)]، یک الفین [d 5.94 (1H, m, 7-}H)]، و یک گروه لاکتون اشباع (d C 174.9) همراه با یک قسمت bD-glucopyranosyl [d 4.32 (1H, d, J{95}}.9 Hz, 1 -H)]. همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است، آزمایش 1 H-1 H COZY در 2 وجود ساختارهای جزئی نوشته شده با خطوط پررنگ را نشان داد و در آزمایش HMBC، همبستگی های دوربرد بین جفت های پروتون و کربن زیر مشاهده شد ({{{ 103}H و 7-C و 9-C; }}H2 و 7-C، 8-C، 9-}H و 10-C). ساختار نسبی 2 با آزمایش NOESY حساس به فاز مشخص شد، که همبستگی NOE را بین جفت‌های پروتون زیر نشان داد (3a-H و 4a-H؛ 3b-H و 4b-H؛ 4b-H و 5- H; 5-H and 6b-H, 9-H) همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است.

Kankanoside N (3) به عنوان یک پودر سفید با چرخش نوری منفی ([a]D 25 - 24.6 در MeOH) جدا شد. در FAB-MS یون مثبت 3، یک پیک یون شبه مولکولی در m/z 371 [M Na] مشاهده شد. فرمول مولکولی C16H28O8 با اندازه گیری با وضوح بالا FAB-MS تعیین شد. هیدرولیز اسیدی 3 با 1.{14}} M HCl D-گلوکز آزاد شده. داده‌های 1H- و 13C-NMR (CD3OD، جداول 1، 2) سیگنال‌های قابل انتساب به متیل [d 1 را نشان دادند. 28}}H3)]، چهار متیلن {d 1.37، 1.87 (هر 1H، هر دو m، 7-H2)، 1.65، 1.81 (هر کدام 1H، هر دو m، 6-H2)، [3.65 ( 1H، dd، J= 9.1، 9.8 هرتز)، 3.90 (1H، dd، J= 5.9، 9.8 Hz)، 11-H2]، و [3.70 (1H، dd، J= 3.3، 12.0 هرتز)، 3.88 (1H، m)، 3-H2]}، four methines [d 1.69 (1H, m, 4-H), 1.75 (1H، m، 9-H)، 2.06 (1H، m، 8-H)، 2.16 (1H، m، 5-}H)]، و یک گروه همی استال [d 4.67 ( 1H, d, J= 7.4 Hz, 1-H)] together with a bD-glucopyranosyl moiety [d 4.26 (1H, d, J{99}}.9 Hz, {{101} }}H)]. ساختار iridoid 3 با آزمایش 1H-1H COZY و HMBC مشخص شد و ساختار نسبی با آزمایش NOESY حساس به فاز همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است مشخص شد. در نتیجه، ساختار استری 3 همانطور که نشان داده شده است روشن شد.

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای حل مشکلات جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ساختارهای Kankanosides O (4) و P (5)

Kankanosides O (4) و P (5)، C16H26O8، نیز به عنوان پودرهای سفید با چرخش نوری منفی (4: [a]D 23 - 26.1؛ 5: [a]D 21 - 32 به دست آمدند. 7 هر دو در MeOH). طیف IR 4 و 5 باندهای جذبی را در 3433، 1696، 1647، و 1076 سانتی متر{17}} برای 4، و 3434، 1701، 1647، و 1 نشان داد. {95}}76 سانتی متر{23}} برای 5، قابل انتساب به عملکردهای گلیکوزیدی، کربوکسیل، و الفین. طیف UV آنها حداکثر جذب مشترک را در 217 نانومتر نشان داد که نشان‌دهنده وجود یک نصفه اسید کربوکسیلیک غیراشباع a، b در هر دوی آنها بود. هیدرولیز اسیدی 4 و 5 D-گلوکز را آزاد کرد، در حالی که با هیدرولیز آنزیمی با گلوکوزیداز، 4 و 5 (2E,6E)-8-هیدروکسی-2،6-دی متیل{37} داد. }، 6-octadienoic acid20) (4a) و (2E,6E)-8-هیدروکسی-3،7- دی متیل-2،{{ 47}}octadienoic acid21) (5a)، به ترتیب. داده های 1H- و 13C-NMR از 4 (CD3OD، جداول 2، 3) سیگنال های قابل انتساب به دو متیل را نشان دادند [d 1.71 (3H, br s, 10-H3), 1.81 (3H, d, J{{{ 66}}.0 هرتز، 9-H3)]، سه متیلن {d 2.19 (2H، br t، J= حدوداً 7 هرتز، 5-}H2)، 2.36 (2H، m، 4-H2)، [4.24 (1H، dd، J= 7.6، 12.0 Hz)، 4.33 (1H، dd، J= 6}.2، 12.0 Hz)، { {96}}H2]}، و دو الفین سه‌جانشین شده [d 5.41 (1H, ddd, J{101}}.2, 6.2, 7.6 Hz, 7- H), 6.75 (1H, tq, J{ {111}}.2، 1.0 هرتز، 3-H)] همراه با یک قطعه b-Dglucopyranosyl [d 4.34 (d, J= 7.8 هرتز، 1 -H)]. با مقایسه سیگنال های کربن در طیف 13C-NMR 4

با موارد 4a، یک تغییر گلیکوزیلاسیون در موقعیت 8- مشاهده شد (d C 4: 65.5؛ 4a: 59.4). موقعیت پیوند گلوکزید نیز توسط آزمایش‌های HMBC همانطور که در شکل 2 نشان داده شده است تأیید شد. در نتیجه، ساختار فضایی 4 مشخص شد که (2E,6E){12}}bD-glucopyranosyloxy-2،{{{ 16}}دی متیل{17}}،6-اسید اکتادینوئیک. از سوی دیگر، داده‌های 1H- و 13C-NMR 5 (CD3OD، جداول 2، 3) وجود یک (2E,6E)-8-هیدروکسی{{3{0}} را نشان می‌دهند. ,7-دی متیل-2،6-نیمه اکتادینوئیک اسید [d 1.70 (3H, br s, 10-H3), 2,14 (3H, br s, 9- H3)، 2.24 (2H، m، 4-H2)، 2.27 (2H، m، 5-H2)، 4.05، 4.20 (هر کدام 1H، هر دو br d، J= حدوداً. 12 هرتز، 8-H2)، 5.47 (1H، tq، J= 7.1، 0.9 هرتز، 6-}H)، 5.67 (1H، br s، 1-H )] همراه با یک قطعه bD-glucopyranosyl [d 4.23 (d, J= 7.7 Hz, 1 -H)]. اتصال بخش bD-glucopyranosyl در 5 بر اساس آزمایش‌های HMBC همانطور که در شکل 2 نشان داده شده است، مشخص شد. 68.8). بر اساس شواهد فوق الذکر، ساختار فضایی 5 مشخص شد (2E,6E)-8-bD-glucopyranosyloxy{100}}،{101}}dimethyl{102}}،{103 }}اسید اکتادینوئیک.

اثرات ترکیبات بر سمیت سلولی ناشی از فاکتور نکروز تومور-a (TNF-a) در سلول های L929

TNF-a به عنوان واسطه انواع آسیب اندام از طریق القای آپوپتوز سلولی شناخته شده است. در مورد کبد، اثرات بیولوژیکی TNF-a در آسیب کبدی ناشی از سموم کبدی، ایسکمی/ریپرفیوژن مجدد، هپاتیت ویروسی و الکل دخیل است. یک هدف مهم برای کشف عوامل ضد التهابی و محافظ کبد. بر اساس مفهوم فوق الذکر، ما ترکیبات محافظ از محصولات طبیعی را بر روی مرگ سلولی ناشی از TNF-a در سلول های L929، یک رده سلولی حساس به TNF-a، بررسی کردیم.

که چندین ترکیب از Piper chaba، 26-29) Boesenbergia rotunda، 30،31) Punica granatum، 32) Helichrysum arenarium، 33-35) و Sapindus rarak، 36-38) اثرات بازدارندگی نشان دادند. سمیت سلولی ناشی از TNF-a در سلول های L929 از آنجایی که ترکیبات فنیل اتانوئیدی C. tubulosa (به عنوان مثالاکیناکوزید، آکتئوزید و ایزواکتئوزیدو غیره) 5) همچنین این سمیت سلولی را مهار کرد، ما بیشتر اجزای ایریدوئید، فنیل پروپانوئید و لیگنان را همانطور که در جدول 4 نشان داده شده است مورد بررسی قرار دادیم. 00 میلی‌مولار)، موسائنوزیدیک اسید (10، 8.7±44.7%)، 8-اسید اپیگامیک (11، 0.4±10.7%)، 8-هیدروکسی ژرانیول 8-ObD- گلوکوپیرانوزید (17، 2.4 ± 21.3٪)، و () -pinoresinol ObD-glucopyranoside (22، 1.6 ± 22.3٪)، فعالیت قابل توجهی نشان دادند. اگرچه فعالیت آن‌ها ضعیف‌تر از اکیناکوزید (IC{38}}.1 میلی‌مولار)، اکتئوزید (17.8 میلی‌مولار)، و ایزواستئوزید (22.7 میلی‌مولار)، اجزای اصلی فنیل اتانوئیدی بود.

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%