تولید لیپاز توسط Yarrowia Lipolytica در تخمیر حالت جامد با استفاده از محصولات جانبی میوه آمازون و کنجاله سویا به عنوان سوبسترا قسمت 2

2.5. هیدرولیز روغن ماهی

لیپازها در هیدرولیز اسیدهای چرب برای تغلیظ اسیدهای چرب غیراشباع چندگانه (PUFAs) استفاده شده اند [44،45]. مزیت اصلی کاربرد لیپازها در تولید اسیدهای چرب غیراشباع، ویژگی آنزیم و واکنش‌هایی است که در شرایط دمایی متوسط ​​رخ می‌دهند که به حفظ ساختار PUFA ها کمک می‌کند [44]. استفاده از لیپازها به روش های شیمیایی ترجیح داده می شود زیرا گلیسریدهایی با بازده و خلوص پایین ارائه می کنند [46]. نقش لیپازها در هیدرولیز انتخابی اسیدهای چرب اشباع (SFAs) و اسیدهای چرب تک غیراشباع (MUFA) از تری گلیسرول (TAGs) تولید گلیسریدهای غنی از PUFA است. اصل این روش، مانع فضایی ناشی از پیکربندی مولکولی پیوندهای دوگانه کربن-سیس در PUFA است که باعث تا شدن زنجیره‌های اسید چرب می‌شود. بنابراین، مکان‌های فعال آنزیمی به پیوندهای استری این اسیدهای چرب با اسکلت‌های گلیسرولی خود دسترسی ندارند [47،48]. افزودن اسیدهای چرب در رژیم غذایی فواید زیادی مانند رشد کودک، پیشگیری از بیماری های قلبی عروقی، سرطان و اختلالات روانی مختلف (افسردگی، اختلال کمبود توجه، بیش فعالی)، علاوه بر پتانسیل ضد التهابی و فشار خون بالقوه دارد. کنترل [49].

گلیکوزید سیستانچ همچنین می تواند فعالیت SOD را در بافت های قلب و کبد افزایش دهد و به طور قابل توجهی محتوای لیپوفوسین و MDA را در هر بافت کاهش دهد و به طور موثر رادیکال های مختلف اکسیژن فعال (OH-، H2O2 و غیره) را از بین ببرد و از آسیب DNA ناشی از آن محافظت کند. توسط رادیکال های OH گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید سیستانچ دارای توانایی مهار قوی رادیکال های آزاد، توانایی کاهش بالاتری نسبت به ویتامین C، بهبود فعالیت SOD در سوسپانسیون اسپرم، کاهش محتوای MDA و اثر محافظتی خاصی بر عملکرد غشای اسپرم هستند. پلی ساکاریدهای سیستانچ می توانند فعالیت SOD و GSH-Px را در گلبول های قرمز و بافت ریه موش های آزمایشگاهی مسن ناشی از D-گالاکتوز افزایش دهند و همچنین محتوای MDA و کلاژن را در ریه و پلاسما کاهش دهند و محتوای الاستین را افزایش دهند. اثر پاک کنندگی خوب بر روی DPPH، طولانی شدن زمان هیپوکسی در موش های پیر، بهبود فعالیت SOD در سرم، و به تاخیر انداختن انحطاط فیزیولوژیکی ریه در موش های آزمایشگاهی پیر. و این پتانسیل را دارد که دارویی برای پیشگیری و درمان بیماری های پیری پوست باشد. در عین حال، اکیناکوزید موجود در سیستانچ توانایی قابل توجهی در از بین بردن رادیکال های آزاد DPPH دارد و توانایی حذف گونه های فعال اکسیژن و جلوگیری از تخریب کلاژن ناشی از رادیکال های آزاد را دارد و همچنین اثر ترمیم خوبی بر آسیب آنیون رادیکال آزاد تیمین دارد.

روی Cistanche Tubulosa کلیک کنید

【برای اطلاعات بیشتر:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

تولید عصاره های آنزیمی برای استفاده در فرآیندهایی مانند هیدرولیز می تواند یک کار گران باشد. بنابراین، تحقیق در مورد مواد اولیه ای که هزینه تولید را کاهش می دهد، می تواند جایگزین جالبی باشد. استفاده از یک بیوکاتالیست جامد مطلوب است زیرا این بیوکاتالیست جامد می تواند در واکنش های آنزیمی مورد استفاده مجدد قرار گیرد، علاوه بر این که دارای پایداری عالی در نگهداری در دمای اتاق، بدون هزینه های تبرید و سهولت حمل و نقل است [41]. هیچ گزارشی در مورد استفاده از یک بیوکاتالیست جامد از Yarrowia lipolytica برای تولید PUFAS توسط هیدرولیز آنزیمی روغن ماهی وجود ندارد. بنابراین، کاربرد عصاره آنزیمی خام و بیوکاتالیست جامد تولید شده با استفاده از کیک روغنی آندروبا و کنجاله سویا (50:50) برای ارزیابی کاربرد بالقوه آنزیم ها در هیدرولیز روغن ماهی برای تولید بیشتر اسیدهای چرب چند غیراشباع در یک فرآیند مناسب مورد مطالعه قرار گرفت. (شکل 6). مشاهده درجه بالایی از هیدرولیز (DH) در زمان‌های واکنش کوتاه‌تر با استفاده از بیوکاتالیست جامد (63، 70.8، 72.5، و 74.7 درصد) نسبت به عصاره آنزیمی (47.5، 61.5، 66.5 و 74.8 درصد) پس از 24، به ترتیب 48، 72 و 144 ساعت.

فرآیند هیدرولیز آنزیمی به طور مداوم برای به دست آوردن اسیدهای چرب چند غیر اشباع غلیظ اعمال می شود. گائو و همکاران [50] از لیپاز در هیدرولیز روغن ماهی ماهی استفاده کرد و محتویات EPA و DHA به ترتیب 3.{2} برابر و 1.{4}} برابر بهبود یافت. آرثی و همکاران [20] از لیپاز غلیظ (1000 واحد بر میلی لیتر) در هیدرولیز روغن ماهی استفاده کرد و همچنین نرخ هیدرولیز بالای 60 درصد را پس از 72 ساعت یافت. در این کار، درجات هیدرولیز بهتر با استفاده از عصاره آنزیمی خام لیپاز (به عنوان مثال، بدون خالص سازی) هنگام مقایسه همان زمان هیدرولیز به دست آمد. سایر نویسندگان هیدرولیز روغن کبد Musteleus Mustelus و روغن بلوبر فوک را بررسی کرده اند که به ترتیب 75 درصد و 70 درصد هیدرولیز را پس از 24 و 9 ساعت واکنش گزارش کرده اند [25،26].

مارتینز و همکاران [51] از یک لیپاز تجاری از Burkholderia cepacia (Amano) برای هیدرولیز روغن ماهی استفاده کرد و پس از 48 ساعت واکنش، 55.6 درصد DHA را در مقایسه با حداکثر محتوای محاسبه شده به دست آورد. در کار ما، در یک مطالعه اولیه، 70.8 درصد هیدرولیز را پس از 48 ساعت واکنش با استفاده از بیوکاتالیست جامد به دست آوردیم.

تاکنون، چنین یافته‌هایی امکان استفاده از محصولات جانبی برای تولید لیپاز در تخمیر حالت جامد را به عنوان راهی برای کاهش آسیب‌های محیطی، ارزیابی محصولات جانبی و مقرون‌به‌صرفه بودن پیشنهاد کرده‌اند. علاوه بر این، نتایج نشان دهنده کاربرد بالقوه آنزیم لیپاز در هیدرولیز روغن ماهی برای تولید بیشتر اسیدهای چرب چند غیراشباع در یک فرآیند مناسب است.

علیرغم وجود فراوان در محصولات جانبی کشاورزی و صنعتی ارزان قیمت، تعیین و استانداردسازی ترکیب، علاوه بر برآورد هزینه برای به دست آوردن عصاره آنزیمی و بیوکاتالیست جامد از محصولات جانبی کشاورزی و صنعتی ارزان قیمت، همچنان یک چالش است، اما به شدت به نوع محصول فرعی، فصلی بودن و کمیت تولید شده و همچنین فرآیند مورد استفاده و موقعیت جغرافیایی و سایر عوامل بستگی دارد. بنابراین، مسائلی مانند پیچیدگی زنجیره و هزینه های لجستیکی آن، استفاده از فرآیندهای پیچیده و پرهزینه، مصرف بالای انرژی و مسائل نظارتی و سایر موارد باید برطرف شود. از این نظر، فرآوری محصولات جانبی باید قبل از اینکه از نظر اقتصادی مقرون به صرفه شود، بر موانع متعددی غلبه کند، از جمله نیاز به پردازش مقادیر زیادی مواد خام، ظرفیت پردازش مواد خام ناهمگن، لجستیک یکپارچه با صنایع تبدیلی مختلف، و امکان ادغام. فرآیند در واحد پردازش برای اجازه تولید مواد با ارزش بالا، در میان سایر موارد [52-55].

3. مواد و روشها

3.1. مواد

کنجاله سویا از Caramuru Alimentos (گویاس، برزیل) خریداری شد. کیک روغنی Andiroba تولید شده از استخراج روغن توسط Beraca Ingredientes Naturais (پارا، برزیل) تهیه شده است. هر دو بستر در مورد گرانولومتری استاندارد شده بودند (<1.18 mm) and properly stored under refrigeration in polypropylene packages until use. The fish oil was purchased from Mundo dos Óleos, and according to the manufacturer, it is extracted by cold pressing and filtration, obtained from raw material with guaranteed origin. All other chemicals used were of analytical grade and used as received without any further purification, being obtained from Tedia (acetone), Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA, glucose, azocasein, agar, yeast extract, ethanol, methanol), Vetec (Tween 80), Oxoid (peptone), Isofar (sodium hydroxide, gum Arabic), and Precision Plus Protein Kaleidoscope—Bio-rad (molecular mass markers, kDa).

3.2. شرایط کشت میکروارگانیسم و ​​تلقیح

Yarrowia lipolytica IMUFRJ50682، جدا شده از مصب خلیج گوانابارا، ریودوژانیرو، برزیل [56] در دمای 28 درجه سانتیگراد در محیط YPD-آگار کشت شد (وزن / حجم: عصاره مخمر 1 درصد، پپتون، 2 درصد، گلوکز، 2 درصد، ؛ آگار، 3 درصد). سلول ها در یک محیط مایع حاوی عصاره مخمر 1 درصد (وزن / حجم)، پپتون، 2 درصد (وزن / حجم) و گلوکز 2 درصد (وزن / حجم) به مدت 72 ساعت، 160 دور در دقیقه در دمای 28 درجه سانتی گراد رشد کردند.

3.3. خصوصیات محصول جانبی کشاورزی و صنعتی

ترکیب فیزیکی و شیمیایی کنجاله سویا و کیک روغن آندروبا از نظر رطوبت، پروتئین، کربوهیدرات، خاکستر، عصاره اتر، فیبر نامحلول و محتوای فیبر محلول، بر اساس روش گزارش شده توسط انجمن شیمی‌دانان رسمی تحلیلی (AOAC) تعیین شد. ) [57]. علاوه بر این، از آنجایی که تولید لیپاز توسط Y. lipolytica تحت تأثیر هوادهی قرار می گیرد [58]، تخلخل بستر در SSF مطابق با رابطه (1) ارزیابی شد، که در آن ε تخلخل است (بیان شده در m3 air·m-3 bed). ρdrysolid چگالی ظاهری نمونه خشک است (kg·m-3). و ρwetsolid چگالی نمونه پس از افزودن آب (kg·m-3) است [58].

3.4. تولید لیپاز توسط SSF

ماتریکس جامد حاوی کنجاله سویا و کیک روغن آندروبا قبل از تلقیح در راکتور نوع سینی با نسبت های مختلف بستر تهیه شد و در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 2{4}} دقیقه اتوکلاو شد. پارامترهای فرآیند ثابت مورد استفاده برای تولید لیپاز رطوبت 55 درصد و غلظت تلقیح 0.71 میلی گرم بیوماس خشک در گرم بستر [24] بود. راکتورها در یک محفظه تقاضای اکسیژن بیوشیمیایی (BOD) در دمای 28 درجه سانتیگراد انکوبه شدند و نمونه های قربانی (یعنی یک راکتور نوع سینی برای زمان نمونه برداری) در طول تخمیر برای تجزیه و تحلیل گرفته شد.

SSF با استفاده از ترکیبات مختلف کیک روغن آندروبا و کنجاله سویا ارزیابی شد ({{0}}:1{{1{19}}}}0؛ 25:75; 50:50; 75 :25 و 100:0) در زمان های مختلف (0، 12، 24، 32 و 48 ساعت). پس از آن، مکمل ماتریکس جامد حاوی کیک روغن آندروبا و کنجاله سویا (50:50) با افزودن 1.5 (درصد وزنی بر حجم) روغن سویا در طول زمان (0، 12، 14، 20، 24، 28، 48، و 72 ساعت) برای به دست آوردن افزایش در فعالیت لیپولیتیک. علاوه بر این، وجود Tween 80 (0.001 درصد وزنی بر حجم) در محیط تخمیر حاوی 1.5 (درصد وزنی بر حجم) روغن سویا مورد آزمایش قرار گرفت. تخمیر با تعیین فعالیت لیپاز و پروتئاز و همچنین رطوبت و pH (شرح شده در بخش فرعی "3.6. تعیین های تحلیلی") بررسی شد.

3.5. استخراج آنزیمی و تولید بیوکاتالیست جامد

استخراج آنزیمی با افزودن 5{3}} میلی‌لیتر بافر فسفات پتاسیم 50 میلی‌مولار با pH 7.0 در بیورآکتورها و سپس انکوباسیون در دمای 37 درجه سانتی‌گراد، 200 دور در دقیقه، به مدت 20 دقیقه انجام شد. پس از آن، مواد تخمیر شده معلق در بافر با استفاده از یک ماشین خراش دار با نگاه پرس شده و در 3000 دور در دقیقه به مدت 5 دقیقه سانتریفیوژ شد. بیوکاتالیست جامد از خشک کردن انجمادی کل جرم بدست آمده در پایان فرآیند تخمیر به مدت 72 ساعت به دست آمد و به مدت 7 ماه در دمای اتاق نگهداری شد تا پایداری آنزیمی تأیید شود.

3.6. تعیین های تحلیلی

3.6.1. فعالیت لیپاز

فعالیت لیپاز با استفاده از روش پیشنهادی توسط Freire و همکاران انجام شد. [59]. محیط واکنش در هموژنایزر Ultra Turrax (IKA) با استفاده از روغن زیتون 5 درصد (w/v) و صمغ عربی 5 درصد (w/v) در بافر فسفات 100 میلی مولار (pH) امولسیون شد. 7.{16}}). عصاره آنزیمی (1 میلی لیتر) یا 0.5 گرم از بیوکاتالیست جامد به 19 میلی لیتر از مخلوط واکنش اضافه شد و به مدت 20 دقیقه، 200 دور در دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه شد. واکنش با افزودن 20 میلی لیتر محلول استون-اتانول قطع شد و اسیدهای چرب آزاد در یک تیتراتور خودکار (Metrohm 916-Ti-Touch) با استفاده از محلول 0.04 mol/L NaOH تیتر شدند. یک واحد فعالیت لیپاز (U) به عنوان مقدار آنزیمی که 1 میکرومول اسید چرب در دقیقه تولید می‌کند، در شرایط سنجش تعریف شد.

3.6.2. فعالیت پروتئاز

فعالیت پروتئاز بر اساس روش چارنی و تومارلی [6{1}}] کمی سازی شد. عصاره آنزیمی ({3}}.5 میلی‌لیتر) به 0.5 میلی‌لیتر محلول آزوکازئین 0.5 درصد (w/v) تهیه شده با بافر استات 50 میلی‌مولار (pH) اضافه شد و انکوبه شد. در دمای 32 ◦C به مدت 40 دقیقه. واکنش با افزودن 0.5 میلی لیتر محلول تری کلرواستیک اسید 15 درصد (وزنی/حجمی) متوقف شد و نمونه ها با سرعت 3000 دور در دقیقه به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شدند. مایع رویی (100 میکرولیتر) در یک صفحه میکروتیتر حاوی 100 میکرولیتر هیدروکسید پتاسیم 5 مولار اضافه شد و جذب در 428 نانومتر در دستگاه صفحه‌خوان میکروتیتر (SpectraMax، Molecular Devices) اندازه‌گیری شد. یک واحد فعالیت به عنوان مقدار آنزیمی که قادر به افزایش واحد در جذب در دقیقه است تعریف شد.

3.6.3. محتوای رطوبت و pH

میزان رطوبت با استفاده از تعادل آنالیزگر رطوبت (AND MX{0}}) پایش شد. pH بر روی pH متر (TECNAL، مدل TR{1}} PT100، برزیل) اندازه گیری شد.

3.7. SDS-PAGE

الکتروفورز طبق روش گزارش شده توسط Laemmli [61] در ژل پلی آکریل آمید (5 درصد روی هم چیدن، 15 درصد جداسازی، ضخامت 0.75 میلی متر) انجام شد. نمونه ها به نسبت (1:4) از ترکیب کیک روغن آندروبا و سویا (50:50) با بافر نمونه حاوی مرکاپتواتانول مخلوط شدند، در دمای 95 درجه سانتیگراد به مدت 5 دقیقه حرارت داده شدند و روی ژل اعمال شدند. الکتروفورز در ولتاژ 150 ولت به مدت 30 دقیقه (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) انجام شد و ژل با استفاده از Coomassie Blue R{15}} آشکار شد. یک نشانگر پروتئین استاندارد (Bio-rad، Hercules، CA، USA) با وزن مولکولی بین 10 تا 250 کیلو دالتون استفاده شد.

3.8. هیدرولیز روغن ماهی: یک کاربرد بالقوه

درجه هیدرولیز (DH) روغن ماهی با وزن 1 گرم روغن ماهی و افزودن 25 میلی لیتر بافر فسفات pH 7 اندازه گیری شد.{3}} برای تأیید کاربرد بالقوه آنزیم در هیدرولیز روغن ماهی. سپس 5 میلی لیتر از عصاره آنزیمی (37 U) در فلاسک های کهربایی به مدت 168 ساعت به هم زده شد. واکنش با 20 میلی لیتر استون متوقف شد و اسیدهای چرب آزاد در تیتراتور خودکار با 0.1 مولار متانولی KOH تیتر شدند. خالی واکنش تنها با افزودن آنزیم در پایان واکنش به دست آمد.

درجه هیدرولیز (DH) طبق رابطه (2) محاسبه شد:

که در آن اسیدیته نمونه است. Aa اسیدیته حاصل از اتوهیدرولیز است. Si شاخص صابونی شدن است.

3.9. تحلیل آماری

تمام آزمایش ها سه بار تکرار شد. در هر تکرار، آنالیزها در سه تکرار انجام شد. نتایج با میانگین ± انحراف معیار مطابقت داشت. داده ها با استفاده از آنالیز واریانس یک طرفه (ANOVA) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت، در حالی که آزمون Tukey (p < 0.05) برای آزمون تفاوت بین میانگین ها با استفاده از Sisvar 5.6 استفاده شد.

4. نتیجه گیری

محیط تخمیر به دست آمده پس از مخلوط کردن کیک روغن آندروبا و کنجاله سویا در تولید لیپاز بسیار موثر بود. ماتریس تخمیر انتخابی مخلوطی از کیک روغن آندروبا و کنجاله سویا در نسبت 50:50 بود که 63.70 U·g-1 فعالیت لیپولیتیک تولید کرد. حداکثر فعالیت لیپولیتیک (82.52 U·g-1) پس از استفاده از کیک روغن آندروبا و نسبت کنجاله سویا 50:50 پس از تکمیل با Tween 80 (0.001 درصد) و روغن سویا (1.5 درصد) به دست آمد. در تجزیه و تحلیل الکتروفورتیک، نوارهای پروتئینی که قبلاً در ادبیات به عنوان YL Lip2 (37 و 40 کیلو دالتون) گزارش شده بود، شناسایی شدند. کاربرد قبلی لیپاز در هیدرولیز روغن تا 63 درصد هیدرولیز را پس از 24 ساعت فراهم کرد. این مطالعه نشان داد که امکان تولید لیپاز با استفاده از محصولات جانبی منطقه آمازون همراه با کنجاله سویا و اعمال آن در هیدرولیز روغن ماهی برای تولید بیشتر اسیدهای چرب غیراشباع در یک فرآیند مناسب وجود دارد.

مشارکت نویسنده:مفهوم سازی، BDR، ACL و MAZC. متدولوژی، ASSC، JCSS، FVdN، CECdS، BDR، ACL و MAZC. تجزیه و تحلیل رسمی، ASSC، JCSS و FVdN. بررسی، ASSC، JCSS و FVdN. منابع، ASSC، JCSS و FVdN. مدیریت داده، ASSC، JCSS و FVdN. نوشتن – آماده سازی پیش نویس اصلی، ASSC، JCSS، FVdN و CECdS. نوشتن - بررسی و ویرایش، BDR، CECdS، ACL و MAZC. نظارت، BDR، CECdSACL و MAZC. مدیریت پروژه، BDR، ACL و MAZC؛ جذب سرمایه، BDR، ACL و MAZC همه نویسندگان نسخه منتشر شده نسخه خطی را خوانده و با آن موافقت کرده اند.

قدردانی: نویسندگان Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior—Brasil (CAPES— کد مالی 001) را تأیید می کنند. Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico (CNPq)؛ و Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ).

منابع

1. Serra, JL; رودریگز، AMdC؛ فریتاس، RA; Meirelles، AJdA; دارنت، SH; سیلوا، LHMd منابع جایگزین روغن و چربی از گیاهان آمازون: اسیدهای چرب، ابزار متیل، کاروتنوئیدهای کل، و ترکیب شیمیایی. مواد غذایی Res. بین المللی 2019، 116، 12-19. [CrossRef] [PubMed]

2. پنیدو، سی. کونته، FP; شاگاس، ام اس؛ رودریگز، کالیفرنیا؛ پریرا، جی اف. Henriques، MG اثرات ضد التهابی تترانوترترپنوئیدهای طبیعی جدا شده از Carapa guianensis Aublet بر آرتریت ناشی از zymosan در موش. التهاب Res. 2006، 55، 457-464. [CrossRef] [PubMed]

3. پنیدو، سی. کاستا، کالیفرنیا؛ پنافورته، RJ; کاستا، ام.اف. پریرا، جی اف. سیانی، AC; Henriques، MG اثرات ضد آلرژیک تترانوترترپنوئیدهای طبیعی جدا شده از Carapa guianensis Aublet بر نفوذپذیری عروقی و پردردی ناشی از آلرژن. التهاب Res. 2005، 54، 295-303. [CrossRef]

4. سانتوس، KIP; بنجامیم، JKF; کاستا، KAD؛ ریس، ع. سوزا پینیرو، WB; تکنیک‌های سانتوس، AS Metabolomics در بررسی اسیدهای فنولیک از محصول جانبی کشاورزی و صنعتی Carapa guianensis Aubl. عرب جی. شیمی. 2021, 14, 103421. [CrossRef]

5. Lourenço, JNP; فریرا، LMM؛ مارتینز، جی سی. Nascimento, DG Produção, Biometria de Frutos e Sementes e Extração do Óleo de Andiroba (Carapa Guianensis Aublet; Sob Manejo Comunitário em Parintins, AM: Brasília, Brazil, 2017؛ ص 36.

6. ارگانیک، S. Óleo de Andiroba.

7. کوناب. Boletim da Sociobiodiversidade; Conab: برازیلیا، برزیل، 2017; جلد 1، ص. 67.

8. سوزا، CR; لیما، RMB؛ Azevedo، CP; Rossi، LMB Andiroba (Carapa guianensis Aubl.); Embrapa Amazônia Ocidental: برازیلیا، برزیل، 2006; 21 p.

9. اولیویرا، اف. سوزا، م. Peclat، VROL؛ سالگادو، جی.ام. ریبیرو، بی دی؛ کوئیلو، MAZ؛ ونسیو، آ. Belo, I. بهینه سازی تولید لیپاز توسط Aspergillus ibericus از کیک های روغنی و کاربرد آن در واکنش های استریفیکاسیون. Food Bioprod. روند. 2017، 102، 268-277. [CrossRef]

10. Pandey، A. تخمیر حالت جامد. بیوشیمی. مهندس J. 2003, 13, 81-84. [CrossRef]

11. مارتینز، او. سانچز، آ. فونت، X. Barrena، R. افزایش تولید زیستی ترکیبات معطر با ارزش افزوده از طریق تخمیر حالت جامد باگاس نیشکر و ملاس چغندرقند: استراتژی‌های عملیاتی و افزایش مقیاس فرآیند. بیورسور. تکنولوژی 2018، 263، 136-144. [CrossRef] [PubMed]

12. آنو، ت. جین، جی. میزوموتو، اس. رحمان، ام اس; اوکونو، ک. شدا، ام. تخمیر حالت جامد آنتی بیوتیک لیپوپپتیدی ایتورین A با استفاده از یک سیستم راکتور تخمیر جدید حالت جامد. جی. محیط زیست. علمی 2009، 21 (Suppl. S1)، S162–S165. [CrossRef]

13. Vandenberghe, LPS; Karp، SG; اولیویرا، پی.زی. کاروالیو، جی سی. رودریگز، سی. Soccol، CR فصل 18 - تخمیر حالت جامد برای تولید اسیدهای آلی. در تحولات جاری در بیوتکنولوژی و مهندسی زیستی؛ Pandey, A., Larroche, C., Soccol, CR, Eds.; الزویر: آمستردام، هلند، 2018; ص 415-434.

14. سالا، ع. ویتون، اس. بارنا، آر. سانچز، آ. Artola، A. اسکن ضایعات کشاورزی و صنعتی به عنوان بسترهای تولید آفت کش های قارچی: استفاده از Beauveria bassiana و Trichoderma harzianum در تخمیر حالت جامد. جی. محیط زیست. مدیریت 2021, 295, 113113. [CrossRef] [PubMed]

15. بنات، IM; Carboué، Q. Saucedo-Castañeda، G. de Jesús Cázares-Marinero, J. Biosurfactants: نسل سبز مواد شیمیایی ویژه و تولید بالقوه با استفاده از فناوری تخمیر حالت جامد (SSF). بیورسور. تکنولوژی 2021, 320, 124222. [CrossRef] [PubMed]

16. پریرا، ع. Sant'Ana، GCF; ضایعات کشت و صنعت Amaral، PFF انبه برای تولید لیپاز از Yarrowia lipolytica و پتانسیل جامد تخمیر شده به عنوان یک بیوکاتالیست. Food Bioprod. روند. 2019، 115، 68-77. [CrossRef]

17. برگیدا، AIS; آمارال، PFF؛ کوئیلو، MAZ؛ Gonçalves، LRB Lipase از Yarrowia lipolytica: تولید، شناسایی و کاربرد به عنوان یک بیوکاتالیست صنعتی. جی. مول. کاتال. آنزیم B 2014، 101، 148-158. [CrossRef]

18. تریشل، اچ. اولیویرا، دی. مازوتی، MA; دی لوچیو، ام. Oliveira, JV مروری بر تولید لیپازهای میکروبی. فناوری بیوپروسس مواد غذایی 2010، 3، 182-196. [CrossRef]

19. مهتا، ع. گلریا، س. شارما، آر. گوپتا، R. 6 - لیپازها و کاربردهای آنها با تاکید بر صنایع غذایی. در بیوتکنولوژی میکروبی در غذا و سلامت؛ Ray, RC, Ed. مطبوعات دانشگاهی: کمبریج، MA، ایالات متحده آمریکا، 2021; صص 143-164.

20. آرتی، م. سراوانان، پ. ایادورایی، ن. Gowthaman، MK; Kamini، NR یک فرآیند دو مرحله‌ای برای تولید کنسانتره اسیدهای چرب غیراشباع امگا 3-از روغن ساردین با استفاده از Cryptococcus sp. لیپاز MTCC 5455. جی. مول. کاتال. آنزیم B 2016، 125، 25-33. [CrossRef]

21. Nascimento، FV; کاسترو، AM; Secchi، AR؛ بینش کوئلیو، MAZ در مورد مکمل های رسانه ای در تخمیر حالت جامد پوسته سویا توسط Yarrowia lipolytica: تاثیر بر تولید لیپاز در سینی و بیوراکتورهای بستر بسته بندی شده عایق شده. بیوشیمی. مهندس J. 2021, 166, 107866. [CrossRef]

22. فروش، JCS; کاسترو، AM; ریبیرو، بی دی؛ Coelho، MAZ مکمل پوست هندوانه به عنوان تقویت کننده تولید لیپاز و استراز توسط Yarrowia lipolytica در تخمیر حالت جامد و استفاده بالقوه آنها به عنوان بیوکاتالیست در واکنش های پلیمریزاسیون پلی (اتیلن ترفتالات) (PET). بیوکاتال. تبدیل زیستی 2020، 38، 457-468. [CrossRef]

23. Aguieiras، ECG; د باروس، DSN; فرناندز-لافونته، آر. Freire، DMG تولید لیپاز در کنجاله پنبه دانه و استفاده از جامد تخمیری به عنوان بیوکاتالیست در واکنش‌های استری و ترانس استریفیکاسیون. تمدید کنید. انرژی 2019، 130، 574–581. [CrossRef]

24. سوزا، CEC; Farias، MA; ریبیرو، بی دی؛ کوئلیو، MAZ افزودن ارزش به محصولات مشترک کشاورزی-صنعتی از استخراج روغن کلزا و سویا از طریق تولید لیپاز با استفاده از Yarrowia lipolytica در تخمیر حالت جامد. ارزش گذاری زیست توده زباله 2017، 8، 1163-1176. [CrossRef]

25. او، ح. لی، ی. ژانگ، ال. دینگ، ز. Shi، G. درک و کاربرد تنظیم نیتروژن باسیلوس: دیدگاه زیست شناسی مصنوعی. J. Adv. Res. 2022; در مطبوعات. [CrossRef]

26. Almeida، AF; Taulk-Tornisielo، SM; کارمونا، EC تأثیر منابع کربن و نیتروژن بر تولید لیپاز توسط سویه تازه جدا شده Candida Viswanathan. ان میکروبیول. 2013، 63، 1225-1234. [CrossRef]

27. صالحو، ع. علم، MZ; عبدالکریم، MI; تولید سله، HM لیپاز: بینشی در استفاده از بقایای کشاورزی تجدیدپذیر. منبع. حفظ کنید. بازیافت. 2012، 58، 36-44. [CrossRef]

28. لیو، ایکس. یو، ایکس. او، ا. شیا، جی. او، جی. دنگ، ی. خو، ن. کیو، ز. وانگ، ایکس. Zhao, P. تخمیر یک گلدانی برای تولید اریتریتول از غلات دستگاه تقطیر با کشت مشترک Yarrowia lipolytica و Trichoderma reesei. بیورسور. تکنولوژی 2022, 351, 127053. [CrossRef] [PubMed]

29. وانگ، دبلیو. وی، اچ. الهوهتا، م. چن، ایکس. هیمن، دی. جانسون، DK; ژانگ، ام. Himmel، ME بیان هترولوگ آنزیم های زایلاناز در مخمر لیپوژنیک Yarrowia lipolytica. PLoS ONE 2014, 9, e111443. [CrossRef] [PubMed]

30. Nascimento, FVd; Lemes، AC; کاسترو، AMd; Secchi، AR؛ زارور کوئلیو، کارشناسی ارشد دیدگاه تکامل زمانی تولید لیپاز توسط Yarrowia lipolytica در تخمیر حالت جامد. Processes 2022, 10, 381. [CrossRef]

31. مانداری، و. نما، ع. Devarai، SK بهینه سازی متوالی و تولید لیپاز در مقیاس بزرگ با استفاده از مخلوط سه سوبسترا از Aspergillus niger MTCC 872 توسط تخمیر حالت جامد. بیوشیمی فرآیند. 2020، 89، 46-54. [CrossRef]

32. مالا، ج.گ. Edwinoliver، NG; کمینی، NR; Puvanakrishnan، R. تخمیر حالت جامد با بستر مخلوط برای تولید و استخراج لیپاز از Aspergillus niger MTCC 2594. J. Gen. Appl. میکروبیول. 2007، 53، 247-253. [CrossRef]

33. بارت، جی. Gaillardin، C. Yarrowia lipolytica. در مخمرهای غیر متعارف در بیوتکنولوژی؛ ولف، ک.، اد. Springer: نیویورک، نیویورک، ایالات متحده آمریکا، 1996; صص 313-388.

34. مفتح، او. Grbavˇci´c، S. زوژا، م. لوکوویچ، ن. بزبردیکا، دی. Kneževi´c-Jugovi´c، Z. افزودن ارزش به کیک روغنی به عنوان ضایعات صنایع فرآوری روغن: تولید لیپاز و پروتئاز توسط کاندیدا در تخمیر حالت جامد استفاده می شود. Appl. بیوشیمی. بیوتکنول. 2012، 166، 348-364. [CrossRef]

35. Contesini، FJ; دا سیلوا، وی سی. Maciel، RF; دی لیما، RJ; باروس، FF; de Oliveira Carvalho، P. تجزیه و تحلیل سطح پاسخ برای تولید یک لیپاز انانتیو انتخابی از Aspergillus niger توسط تخمیر حالت جامد. J. Microbiol. 2009، 47، 563-571. [CrossRef]

36. ریگو، ای. Ninow، JL; دی لوچیو، ام. اولیویرا، JV; پولونی، AE; رموناتو، دی. آربتر، اف. واردانگا، آر. اولیویرا، دی. تولید Treichel, H. Lipase با تخمیر جامد کنجاله سویا با مکمل های مختلف. LWT Food Sci. تکنولوژی 2010، 43، 1132-1137. [CrossRef]

37. Sun, SY; Xu, Y. تخمیر حالت جامد برای تولید "لیپاز مصنوعی تمام سلولی" از Rhizopus chinensis و شناسایی آنزیم عملکردی. بیوشیمی فرآیند. 2008، 43، 219-224. [CrossRef]

38. فاریاس، م. والونی، EA; کاسترو، AM; کوئلیو، تولید لیپاز MAZ توسط Yarrowia Lipolytica در تخمیر حالت جامد با استفاده از باقیمانده های مختلف کشاورزی و صنعتی. شیمی. مهندس ترانس. 2014، 38، 301-306.

39. سیدو، ص. شارما، آر. سونی، SK; گوپتا، JK تولید لیپاز قلیایی خارج سلولی توسط باسیلوس ترموفیل جدید. میکروبیول فولیا. 1998، 43، 51-54. [CrossRef]

40. کورزو، جی. Revah, S. تولید و خصوصیات لیپاز از Yarrowia lipolytica 681. Bioresour. تکنولوژی 1999، 70، 173-180. [CrossRef]

41. سوزا، CEC; ریبیرو، بی دی؛ کوئلیو، MAZ خصوصیات و کاربرد لیپاز Yarrowia lipolytica به دست آمده از تخمیر حالت جامد در سنتز استرهای مختلف مورد استفاده در صنایع غذایی. Appl. بیوشیمی. بیوتکنول. 2019، 189، 933–959. [CrossRef]

42. فیکرز، ص. فودالج، ف. دال، MTL؛ کازارگولا، اس. گیلاردین، سی. تونارت، پی. Nicaud، JM شناسایی و خصوصیات ژن های LIP7 و LIP8 کد کننده دو لیپاز تری اسیل گلیسرول خارج سلولی در مخمر Yarrowia lipolytica. ژنت قارچی. Biol. 2005، 42، 264-274. [CrossRef]

43. چنگ، Y.-H. Hsiao، FS-H. ون، سی.-م. وو، سی.-ای. دیبوس، ا. یو، ی.-اچ. تخمیر مخلوط کنجاله سویا توسط پروتئاز و پروبیوتیک ها و اثرات آن بر عملکرد رشد و پاسخ ایمنی در جوجه های گوشتی J. Appl. انیمیشن. Res. 2019، 47، 339-348. [CrossRef]

44. چاکرابورتی، ک. پال راج، R. غنی سازی انتخابی اسیدهای چرب غیراشباع n-3 با طول زنجیره آسیل C18-C20 از روغن ساردین با استفاده از Pseudomonas fluorescens MTCC 2421 لیپاز. مواد شیمیایی مواد غذایی 2009، 114، 142-150. [CrossRef]

45. زرایی، ز. اددهچ، ا. ریگانو، اف. اوتری، م. میکالیزی، جی. دوگو، پی. موندلو، ال. Cacciola، F. مشخصه مونوآسیل گلیسرول ها و دی آسیل گلیسرول های غنی از اسیدهای چرب غیراشباع چند تولید شده توسط هیدرولیز روغن کبد Musteleus Mustelus که توسط لیپاز باکتریایی تثبیت شده کاتالیز می شود. J. کروماتوگر. 2020, 1613, 460692. [CrossRef]

46. ​​یانگ، ج. آهنگ، X. وانگ، ال. Cui، Q. تجزیه و تحلیل جامع تغییرات متابولیک در Schizochytrium sp. سویه هایی با محتوای مختلف DHA J. کروماتوگر. B 2020, 1160, 122193. [CrossRef]

47. یانگ، ز. جین، دبلیو. چنگ، ایکس. دونگ، ز. چانگ، ام. Wang, X. غنی‌سازی آنزیمی n-3 گلیسرید اسید چرب غیراشباع چندگانه با هیدرولیز انتخابی. مواد شیمیایی مواد غذایی 2021, 346, 128743. [CrossRef]

48. اوکادا، تی. موریسی، MT تولید n-3 کنسانتره اسیدهای چرب غیراشباع از روغن ساردین توسط لیپاز بی حرکت کاندیدا روگوزا. J. Food Sci. 2008، 73، C146–C150. [CrossRef]

49. Riediger، ND; عثمان، RA; سو، م. مقدسیان، MH مروری سیستمیک بر نقش n-3 اسیدهای چرب در سلامت و بیماری. مربا. رژیم غذایی. دانشیار 2009، 109، 668-679. [CrossRef] [PubMed]

50. گائو، ک. چو، دبلیو. سان، ج. Mao، X. شناسایی یک لیپاز قلیایی که قادر به غنی‌سازی بهتر EPA نسبت به DHA به دلیل انتخاب اسیدهای چرب و انتخاب منطقه است. مواد شیمیایی مواد غذایی 2020, 330, 127225. [CrossRef]

51. مارتینز، پی. Trobo-Maseda، L. لیما، FA; د مورایس جونیور، WG; دی مارکو، جی ال. سالوم، TFC؛ تولید Guisán، JM Omega-3 با هیدرولیز روغن ماهی با استفاده از لیپاز از Burkholderia gladioli BRM58833 با تکنیک‌های پس از بی‌حرکتی تثبیت و تثبیت شد. بیوشیمی. بیوفیز. شماره 2022، 29، 101193. [CrossRef] [PubMed]

52. Lemes, AC; Egea، مگابایت؛ اولیویرا فیلهو، جی جی دی؛ Gautério، GV; ریبیرو، بی دی؛ کوئلیو، رویکردهای بیولوژیکی MAZ برای استخراج ترکیبات فعال زیستی از محصولات جانبی کشاورزی و صنعتی: بررسی. جلو. Bioeng. بیوتکنول. 2022، 9، 1-18. [CrossRef] [PubMed]

53. Lemes, AC; سالا، ال. سنگ معدن، JDC; براگا، ARC؛ Egea، مگابایت؛ فرناندز، KF مروری بر آخرین پیشرفت ها در پپتیدهای زیست فعال رمزگذاری شده از زباله های غنی از پروتئین. بین المللی جی. مول. علمی 2016, 17, 950. [CrossRef]

54. Lemes, AC; کوئیلو، MAZ؛ Gautério، GV; پائولا، ال سی؛ فیلهو، JGdO؛ Egea، MB فصل 11- ضایعات صنعتی و محصولات جانبی: منبعی از مواد غذایی کاربردی، مواد مغذی و بیوپلیمرها. در بیوپلیمرها در مواد مغذی و مواد غذایی کاربردی؛ انجمن سلطنتی شیمی: لندن، بریتانیا، 2023؛ صص 329-360.

55. پینتادو، من; Teixeira، JA Valorização de subprodutos da Indústria alimentar: Obtenção de ingredientes de valor acrescentado. بول. بیوتکنول. 2015، 1، 10-12.

56. هاگلر، ع. Mendonça-Hagler، LC مخمرهای حاصل از آبهای دریایی و دهانه رودخانه با سطوح مختلف آلودگی در ایالت ریودوژانیرو، برزیل. Appl. محیط زیست میکروبیول. 1981، 41، 173-178. [CrossRef]

57. AOAC. روشهای رسمی تجزیه و تحلیل AOAC International; انجمن شیمیدانان رسمی تحلیلی: واشنگتن، دی سی، ایالات متحده آمریکا، 1995.

58. کاسترو، AMd; کاستیلیو، LdR; Freire، DMG خصوصیات کیک های باقیمانده باباسو، کلزا، دانه کرچک و آفتابگردان برای استفاده به عنوان مواد خام برای فرآیندهای تخمیر. محصولات تولیدی Ind. 2016، 83، 140-148. [CrossRef]

59. Freire, DM; Teles، EM; Bon، EP; تولید لیپاز Sant'Anna، GL، Jr. توسط Penicillium در یک تخمیر در مقیاس نیمکتی محدود شده است: تأثیر تغذیه، هم زدن و هوادهی کربن و نیتروژن. Appl. بیوشیمی. بیوتکنول. 1997، 63-65، 409-421. [CrossRef]

60. چارنی، ج. Tomarelli، RM یک روش رنگ سنجی برای تعیین فعالیت پروتئولیتیک آب دوازدهه. جی. بیول. شیمی. 1947، 171، 501-505. [CrossRef] [PubMed]

61. Laemmli، بریتانیا برش پروتئین های ساختاری در طول مجمع سر باکتریوفاژ T4. Nature 1970, 227, 680-685. [CrossRef] [PubMed]

سلب مسئولیت/یادداشت ناشر:اظهارات، نظرات، و داده های موجود در همه نشریات صرفاً متعلق به نویسنده(ها) و مشارکت کننده(ها) است و نه MDPI و/یا ویرایشگر(ها). MDPI و/یا ویرایشگر(های) مسئولیت هرگونه آسیب به افراد یا دارایی ناشی از هر ایده، روش، دستورالعمل، یا محصولاتی را که در محتوا ذکر شده است، سلب می‌کنند.

【برای اطلاعات بیشتر:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】