همه ویپینگ ها یکسان نیستند: اثرات ریوی متفاوت کانابیدیول در مقابل نیکوتین

 خلاصه

منطق ویپینگ به روشی محبوب برای استنشاق مواد روانگردان مختلف تبدیل شده است. در حالی که ارزیابی اثرات تنفسی بخارپز عمدتاً بر روی محصولات حاوی نیکوتین متمرکز شده است، ویپینگ کانابیدیول (CBD) به طور فزاینده ای محبوب می شود. در حال حاضر ناشناخته باقی مانده است که آیا اثرات سلامتی ناشی از نیکوتین و کانابینوئیدها مشابه است یا خیر.

اهداف

این مطالعه در کنار هم اثرات ریوی استنشاق حاد CBD تبخیر شده را در مقابل نیکوتین مقایسه می‌کند.

مواد و روش ها

مطالعات استنشاق داخل بدن در موش‌ها و آزمایش‌های سمیت سلولی آزمایشگاهی با سلول‌های انسانی برای ارزیابی اثرات ناشی از آسیب ریوی CBD یا آئروسل‌های نیکوتین ساطع شده از دستگاه‌های بخار انجام شد.

مزایای مکمل سیستانچ - افزایش ایمنی

اندازه گیری ها و نتایج اصلی

التهاب ریوی در موش ها با استفاده از بافت شناسی، فلوسیتومتری، و تعیین سطح سیتوکین های پیش التهابی و کموکاین ها ارزیابی شد. آسیب ریه توسط بافت شناسی، اندازه گیری فعالیت میلوپراکسیداز، و سطوح نوتروفیل الاستاز در مایع لاواژ برونش آلوئولار و بافت ریه ارزیابی شد. یکپارچگی اپیتلیال / اندوتلیال ریه با کمی کردن سطح پروتئین BAL، نشت آلبومین و نشت FITC-دکستران ریوی ارزیابی شد. استرس اکسیداتیو با اندازه گیری پتانسیل آنتی اکسیدانی در BAL و ریه ها تعیین شد. اثرات سیتوتوکسیک CBD و آئروسل‌های نیکوتین بر نوتروفیل‌های انسانی و سلول‌های اپیتلیال راه هوایی کوچک انسان با استفاده از سیستم رابط هوا-مایع آزمایشگاهی مورد ارزیابی قرار گرفت. استنشاق آئروسل CBD منجر به تغییرات التهابی بیشتر، آسیب شدید ریوی و استرس اکسیداتیو بالاتر در مقایسه با نیکوتین شد. آئروسل CBD همچنین در مقایسه با نیکوتین سمیت بیشتری برای سلول های انسانی نشان داد.

نتیجه گیری

ویپینگ CBD یک پاسخ التهابی قوی را القا می کند و منجر به تغییرات پاتولوژیک بیشتر مرتبط با آسیب ریه نسبت به نیکوتین بخار می شود.

معرفی

دهه 1990 به عنوان یک روش جایگزین برای استفاده از شاهدانه. بخارسازهای شاهدانه معمولاً وسایل بزرگی بودند که گیاهان خشک شده شاهدانه را تا حد تبخیر کانابینوئید گرم می کردند. در اوایل دهه 2000، بخارسازهای قابل حمل کوچکتر به عنوان "سیگارهای الکترونیکی" ظاهر شدند و به روشی محبوب برای تجویز نیکوتین تبدیل شدند. اخیراً، بخارسازها در بازار شاهدانه با استفاده بیشتر از عصاره‌های حشیش مایع، انتقال مشابهی را دنبال کرده‌اند. ۲ تا ۷ آئروسل‌های ساطع شده از محصولات بخارپز، نه تنها حاوی مواد روان‌گردان مانند نیکوتین و کانابینوئیدها (عمدتاً تتراهیدروکانابینول (THC) و کانابیدیول (CBD) هستند. اما همچنین سموم تنفسی (مانند فرمالدئید، آکرولئین، بنزآلدئید). بخار کردن هر دو ماده به عنوان مثال، حلال‌های مورد استفاده در محصولات بخارپز حاوی نیکوتین و کانابینوئید می‌توانند متفاوت باشند، به دلیل خواص چربی دوست کانابینوئیدها.12 ویتامین E استات به عنوان یک افزودنی در محصولات ویپینگ حاوی THC شناسایی شد و نقش مهمی در شیوع سال 2019 داشت. از سیگار الکترونیکی و آسیب ریه مرتبط با بخار (VALI). تعداد محدودی از مطالعات در مورد اثرات تنفسی ویپینگ عمدتاً بر روی محصولات حاوی نیکوتین متمرکز شده‌اند. مطالعات آزمایشگاهی نشان می‌دهد که بخار کردن نیکوتین می‌تواند سلول‌های ایمنی را فعال کرده و برخی از عملکردهای کلیدی آن‌ها را مختل کند.15 مطالعات حیوانی نشان داد که قرار گرفتن در معرض نیکوتین سیگارهای الکترونیکی بر پاسخ‌های ایمنی تأثیر منفی می‌گذارد.{19}} مطالعات مشاهده‌ای انسانی نشان داده‌اند که بخار کردن نیکوتین باعث سرکوب آن می‌شود. جنبه‌های سیستم ایمنی ذاتی در سلول‌های اپیتلیال بینی.{20}} مطالعات اپیدمیولوژیک ارتباط بین بخار نیکوتین و شرایط مزمن تنفسی (سرفه مزمن، برونشیت، آسم) را گزارش کرده‌اند. با استفاده از حشیش، به طور انحصاری بر حشیش دودی متمرکز شده است، 25-31 در حال حاضر مشخص نیست که آیا اثرات سلامتی نیکوتین و کانابینوئیدها مشابه هستند یا خیر. این مطالعه با هدف مقایسه تأثیر استنشاق حاد کانابینوئیدهای تبخیر شده در مقابل نیکوتین در قالب کنار هم انجام شد.

جدول 1 مقایسه مواد شیمیایی شناسایی شده در محصولات بخارپز (مایعات گرم نشده) مورد استفاده در آزمایشات قرار گرفتن در معرض in vivo و in vitro

مواد و روش ها

روش های استفاده شده با جزئیات بیشتر در فایل تکمیلی آنلاین توضیح داده شده است.

محصولات ویپینگ

ما از دو محصول تجاری تبخیر کننده استفاده کردیم، یکی حاوی CBD و دیگری حاوی نیکوتین (به اختصار CBD-vape و Nic-vape). غلاف حاوی CBD CalmVape از The Kind Group LLC و غلاف حاوی نیکوتین Juul by Juul Labs بود. هر دو محصول در 2 نوامبر در ایالات متحده آمریکا به صورت آنلاین خریداری شدند020. غلاف های CalmVape حاوی 50 میلی گرم در میلی لیتر CBD محلول در مخلوطی از تری گلیسیریدهای زنجیره متوسط ​​(MCT) و دارای طعم طبیعی بودند. Juul حاوی 5.0٪ نیکوتین محلول در مخلوطی از پروپیلن گلیکول (PG) گلیسیرین گیاهی (VG) و طعم تنباکو ویرجینیا بود. ما مایعات گرم نشده و گرم شده و همچنین انتشارات تولید شده از هر دو محصول را با استفاده از روش‌های کروماتوگرافی-طیف‌سنجی جرمی کاملاً تأیید شده و قبلاً منتشر شده آزمایش کردیم.32 مواد اولیه شناسایی‌شده در مایعات این دو محصول در جدول 1 فهرست شده‌اند. فهرست دقیقی از مواد شیمیایی شناسایی شده در محلول های گرم شده، از جمله بازده چهار ترکیب کربونیل بالقوه سمی (فرمالدئید، استالدئید، استون، و آکرولئین) در ذرات معلق در هوا در شکل های تکمیلی آنلاین E1-E4 و جداول تکمیلی آنلاین E1 و E2 ارائه شده است.

مزایای مکمل سیستانچ-چگونه سیستم ایمنی بدن را تقویت کنیم

موش

موش‌های نر و ماده شش هفته‌ای C57BL/6NCr از آزمایشگاه چارلز ریور (ویلمینگتون، ماساچوست، ایالات متحده آمریکا) تهیه و تحت شرایط خاص عاری از بیماری‌زا با چرخه‌های نور/تاریکی 12/12 ساعت قرار گرفتند. تعداد حیوانات در هر گروه در معرض n=10 بود (5 نر و 5 ماده، به جز Nic-vape که شامل 5 نر و 4 ماده بود؛ یک موش ماده از نظر اندازه بسیار کوچک بود و قبل از اتمام مطالعه باید معدوم شود. ). همه آزمایش‌ها مطابق با دستورالعمل‌های تعیین‌شده توسط کمیته مراقبت و استفاده از حیوانات سازمانی و مطابق با قوانین ایالتی، فدرال و NIH انجام شد.

شرایط قرار گرفتن در معرض حیوانات

آئروسل‌ها از محصولات بخارپز با استفاده از یک ژنراتور آئروسل سیگار الکترونیکی که قبلاً توضیح داده شد، تولید شدند.14 33 دستگاه Juul برای آئروسل کردن هر دو محصول استفاده شد. حیوانات در یک محفظه القایی اصلاح شده 15 لیتری هر روز در مجموع 20 پف تولید شده در طی 1 ساعت (1 پف در هر 3 دقیقه)، 5 روز در هفته به مدت 2 هفته قرار گرفتند. حجم هر پاف 55 میلی‌لیتر بود و در مدت 3 ثانیه آئروسل شد. آئروسل‌ها از هر محصول بخار با استفاده از یک پروتکل پف‌کردن یکسان با هدف تقلید از رفتار بخار کردن بخار‌کننده‌های نیکوتینی با تجربه تولید شدند. به دلیل کمبود انتشاراتی که رفتار بخار در میان بخار‌کننده‌های CBD را توصیف می‌کند، ما از پروتکل‌های پف کردن یکسانی برای هر دو محصول پیروی کردیم. اگرچه ما CBD و نیکوتین موجود در هوا را در اتاق‌های قرار گرفتن در معرض حیوانات اندازه‌گیری نکردیم، اما بر اساس حجم مایع تبخیر شده در روز، غلظت CBD و نیکوتین در مایعات، آئروسل و سرعت جریان هوا که حیوانات در معرض قرار گرفتند به طور متوسط ​​20.5 میلی‌گرم در روز تخمین زدیم. m3 CBD و 22.8 mg/m3 نیکوتین. حیوانات کنترل با استفاده از همان پروتکل قرار گرفتن در معرض هوای فیلتر شده قرار گرفتند.

شرایط قرار گرفتن در شرایط آزمایشگاهی

سلول‌های مورد استفاده در آزمایش‌های آزمایشگاهی مستقیماً در معرض پفک‌های تازه تولید شده در یک سیستم نوردهی بسته قرار گرفتند که در آن اتاق‌های رابط هوا-مایع (ALI) در داخل یک انکوباتور 37 درجه نگهداری می‌شدند. برای آزمایش‌های ALI، ما از همان دستگاه‌های بخار سیستم بسته و فرمول‌های مایع پر کردن مجدد استفاده کردیم که برای آزمایش‌های قرار گرفتن در معرض in vivo که در بالا توضیح داده شد استفاده شد. جزئیات روش در یک فایل تکمیلی آنلاین ارائه شده است.

فواید سیستانچ برای مردان - تقویت سیستم ایمنی بدن

برای مشاهده محصولات Cistanche Enhance Immunity اینجا را کلیک کنید

【بیشتر بخواهید】 ایمیل:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

ارزیابی التهاب ریه

التهاب ریوی با فلوسیتومتری، هیستوشیمی، و با کمی کردن سطوح سیتوکین ها و کموکاین ها (شکل مکمل آنلاین E5)، 14 35 36 نمره گذاری شد و جزئیات کامل در یک فایل تکمیلی آنلاین ارائه شده است.

ارزیابی آسیب ریه

یکپارچگی اپیتلیال/اندوتلیال ریه با کمی سازی سطح پروتئین توسط BCA و نشت آلبومین فضایی سیستمیک به برونکوآلوئولار توسط ELISA با استفاده از نمونه‌های BAL و نشت برونش آلوئولی به سیستمیک با اندازه‌گیری فلورسانس پلاسما 1 ساعت پس از القای داخل تراشه‌ای فلورسانت بررسی شد. سطوح نوتروفیل الاستاز (NE) در BAL و بافت ریه با استفاده از کیت NE ELISA از سیستم‌های R&D (Cat. #DY4517-05) طبق پروتکل سازنده اندازه‌گیری شد. فعالیت میلوپراکسیداز (MPO) با استفاده از روش کالریمتری در BAL و بافت ریه39 با استفاده از کیت سنجش MPO از Abcam (Cat. #ab105136) با استفاده از دستورالعمل‌های سازنده اندازه‌گیری شد. از رنگ Oil Red O برای تجسم ماکروفاژهای آلوئولی مملو از چربی استفاده شد. جزئیات آزمایش در فایل تکمیلی آنلاین آورده شده است. ارزیابی‌های بافت‌شناسی در بخش‌های ریه توسط پاتولوژیست دامپزشکی همانطور که قبلاً توضیح داده شد درجه‌بندی شد.{7}}

اندازه گیری استرس اکسیداتیو در موش BAL و ریه

پاسخ‌های التهابی حاد به سرعت سیستم‌های آنتی اکسیدانی را تحت تأثیر قرار می‌دهند تا آسیب ریه را افزایش دهند. استرس اکسیداتیو با اندازه‌گیری پتانسیل آنتی‌اکسیدانی در BAL و لیزهای ریه همانطور که در فایل تکمیلی آنلاین توضیح داده شده است، تعیین شد.

تست های سمیت سلولی در شرایط آزمایشگاهی

سلول‌های اپیتلیال راه هوایی کوچک انسان (hSAECs) از LONZA و نوتروفیل‌های انسانی خالص شده مستقیماً در معرض آئروسل‌های CBD و نیکوتین تازه تولید شده در فرهنگ‌های رابط هوا-مایع قرار گرفتند. پروتکل قرار گرفتن در معرض و جزئیات روش شناختی در مطالب تکمیلی آنلاین موجود است. سمیت سلولی با استفاده از حذف رنگ آبی تریپان، جذب رنگ قرمز خنثی، و سنجش آپوپتوز Annexin V-FITC اندازه‌گیری شد که در فایل تکمیلی آنلاین توضیح داده شده است.

اندازه گیری سطوح NE در محیط کشت PMN

سطوح NE در محیط کشت سلولی PMN در معرض آئروسل پس از دوره بهبودی با کیت ELISA از سیستم‌های تحقیق و توسعه (گربه #DY4517-05) به دنبال دستورالعمل‌های سازنده اندازه‌گیری شد.

سنجش نفوذپذیری FITC-دکستران

نفوذپذیری پاراسلولی، در سراسر یک لایه از SAEC های انسانی در معرض آئروسل از فرهنگ های ALI، برای ارزیابی یکپارچگی مانع انجام شد و جزئیات در فایل تکمیلی آنلاین توضیح داده شده است.

تحلیل آماری

با انجام آزمون ناپارامتریک کروسکال والیس تفاوت آماری معنی‌داری بین مقادیر میانگین رتبه‌بندی گروه‌های مختلف مواجهه (CBD، نیکوتین و کنترل هوا) مشخص شد. مقادیر P برای آزمایش های چندگانه با استفاده از روش «گام به گام خطی دو مرحله ای از روش نرخ کشف کاذب بنجامینی، کریگر و یکوتیلی» (FDR) تصحیح شد و تفاوت بین دو گروه از نظر آماری معنی دار در p در نظر گرفته شد.<0.05when FDR was set at Q<0.1. We also evaluated if there were differences between male versus female mice in the responses to inhalation of CBD and nicotine aerosols in comparison with air. All statistical analyses were carried out using GraphPad Prism V.9.3.1 software (GraphPad; La Jolla, California, USA).

cistanche tubulosa - بهبود سیستم ایمنی

نتایج

قرار گرفتن در معرض آئروسل CBD منجر به تجمع بیشتر سلول های ایمنی ذاتی و سازگار در ریه ها در مقایسه با قرار گرفتن در معرض نیکوتین شد.

کل نفوذ سلول های ایمنی در ریه های موش به دنبال استنشاق آئروسل های CBD به طور قابل توجهی بیشتر از نیکوتین یا هوای فیلتر شده بود (شکل 1A). هفت زیرمجموعه از 10 زیر مجموعه سلول های ایمنی مورد مطالعه در مقایسه با نیکوتین به طور قابل توجهی تحت تاثیر قرار گرفتن در معرض CBD قرار گرفتند. تجزیه و تحلیل ایمونوفنوتیپی، نفوذ آماری معنی‌داری از نوتروفیل‌های CD11b+Ly6G+ در ریه‌های موش به دنبال استنشاق CBDaerosols (14488 در مقابل 3674 نوتروفیل در هوا، p<0.05) as well as following nicotine aerosol exposure (15410 vs 3674 neutrophils in air, p<0.001) (figure 1B). Total numbers of CD11bCD- 11c+Siglec-F+ alveolar macrophages were significantly reduced following CBD-Vape or Nic-Vape inhalation as compared with air-exposed mice (15965 cells in CBD and 18834 cells in NicVape vs 43465 cells in air (p<0.05)) (figure 1C). Inhalation of both CBD and nicotine aerosols resulted in significantly lower numbers of pulmonary interstitial CD11bCD11c+CD206+ macrophages as compared with air-exposed control mice (11460 vs 47319 cells for CBD-Vape, p<0.0001) and 27727 vs 47319 cells for Nic-Vape, p<0.05). The reduction in the numbers of pulmonary interstitial macrophages was significantly greater following inhalation of CBD aerosols compared with nicotine (11460 cells in CBD-vape vs 27727 cells in Nic-Vape, p<0.05) (figure 1D). CD11bCD11c+arginase-1+ macrophages were significantly reduced following inhalation of both CBD-Vape and Nic-Vape compared with air-exposed control (13450 vs 44009 for CBD-Vape (p<0.001), and 24280 vs 44009 for Nic-Vape (p<0.05)) (figure 1E). However, the reduction in the numbers of CD11bD11c+arginase-1+ macrophages was significantly more following inhalation of CBD aerosols compared with Nic-Vape (13450 cells in CBD-vape vs 24280 cells in Nic-Vape (p<0.05). The number of CD19+ B cells was not statistically different (figure 1F). Following inhalation of CBD aerosols, the numbers of CD8+ and CD4+ T cells in the lungs were, respectively, 3.3-fold (p<0.001) and 5.6-fold (p<0.0001) higher than following nicotine inhalation (figure 1G, H). CD4+IL-17A+ T cells were not altered in the lungs following CBD-Vape or Nic-Vape exposures as compared with air control (figure 1I). CD4+RORγt + T cells, expressing the master transcription factor essential for the differentiation into proinflammatory Th17 cells, were significantly increased following inhalation of CBD aerosols as compared with both nicotine (11983 vs. 2015; p<0.001) and air exposure (11983 vs. 5887; p<0.05) (figure 1J). Furthermore, CBD aerosols resulted in markedly increased infiltration of CD4+Foxp3+ regulatory T cells into the lungs compared with nicotine (4401 cells in CBD-Vape vs 1688 cells in Nic-Vape; p<0.001) (figure 1K). There were no statistically significant differences observed between male and female mice concerning the infiltration of any of the innate and adaptive immune cells, regardless of the different exposure conditions (online supplemental figure E6A–K). Relatively more Oil Red O-positive lipid-laden macrophages were detected in BAL following CBD-aerosol inhalation compared with nicotine aerosol (0.66 vs 0.32; p<0.05) or air-exposure (0.66 vs 0.15; p<0.001) (figure 2A). Lung tissue sections of air-breathing mice contained rare (typically 1–2 positive cells in the entire lung lobe) lipid-containing, Oil Red O-positive intra-alveolar macrophages (online supplemental figure E7A). In contrast, lungs from CBD and nicotine-exposed animals regionally contained one or more Oil Red O-positive macrophages within multiple alveolar lumina that were often adjacent to one another (online supplemental figure E7B, C), with no obvious differences found in males versus females. Histological examination of H&E-stained lung tissue sections from filtered air-breathing control mice showed air-filled alveolar lumina bounded by thin alveolar walls (figure 2B). In contrast, peribronchiolar and/or intrabronchiolar, perivascular, alveolar infiltrates, and interstitial infiltrates of lymphocytes, macrophages, and granulocytes were the predominant findings in the CBD and nicotine-exposed mouse lungs (figure 2C–E). Small focal lesions and occasionally larger and more regionally extensive focal lesions were noted. Lesions were found primarily near terminal bronchioles and often subpleural. The frequency and severity of lesions were greater following CBD aerosol inhalation compared with nicotine. The male mice showed a greater frequency of most lesions as compared with female mice following inhalation of both CBD and nicotine.

شکل 1 تأثیر مواجهه حاد با CBD یا آئروسل های نیکوتین بر نفوذ سلول های ایمنی ریوی. تعداد کل لکوسیت ها (A)، CD11b+ Ly6G+ نوتروفیل (B)، CD11b-CD11c+ Siglec-F + ماکروفاژها (C)، CD11b- CD11c+ CD{16}} ماکروفاژها (D)، CD11b- CD11c+ آرژیناز+ ماکروفاژها (E) تعداد سلول‌های CD{22}} B (F)، سلول‌های CD8+ T (G)، CD{24}} سلول‌های T (H)، CD4+ IL17A+ (I) و CD 4+ ROR t + سلول‌های T التهابی (J) و سلول‌های CD{30}} FOXP{31}} T (K) در ریه‌های موش‌هایی که در معرض هوا، نیکوتین یا آئروسل CBD قرار داشتند توسط جریان تعیین شد. سیتومتری با استفاده از نشانگرهای خاص و پیروی از یک استراتژی دروازه‌ای همانطور که قبلا توضیح داده شد و در شکل تکمیلی آنلاین 1 نشان داده شده است. تفاوت بین دو گروه در p. معنی دار در نظر گرفته می شود<0.05, the statistical significance of the difference between the two groups is indicated with symbols *p<0.05; ***p<0.001; ****p<0.0001after performing non-parametric Kruskal-Wallis test with false discovery rate (FDR) correction for multiple comparisons by GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each exposure condition, n=10 mice (5 males+5 females) (n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape) were used. CBD, cannabidiol.

آئروسل CBD نسبت به آئروسل نیکوتین اثر تعدیلی قوی تری بر سطوح سیتوکین داشت.

ما دریافتیم که استنشاق آئروسل CBD به طور قابل توجهی سطوح سیتوکین های IL-5، IL-6 و G-CSF را در BAL در مقایسه با قرار گرفتن در معرض نیکوتین و هوا افزایش داد (p<0.01) and enhanced the levels of chemokine KC compared with air-control only (p<0.001) (figure 3A–D). Levels of IL-2 were significantly lower following CBD and Nic-vape aerosol exposures compared with air (p<0.05) (figure 3E). IL-10 and IFN-γ levels were significantly reduced only after CBD aerosol exposure compared with air (p<0.05) (figure 3F, G). IL-1α levels were not significantly different, though there was a trend for the values to be lower following exposure to CBD-Vape aerosols (figure 3H). There were no statistically significant differences observed between male and female mice in the levels of these cytokines or chemokines (online supplemental figure E8A–H and online supplemental table E3).

قرار گرفتن در معرض آئروسل های CBD باعث آسیب بیشتر به اندوتلیال ریه نسبت به قرار گرفتن در معرض آئروسل نیکوتین می شود.

سطح پروتئین کل در BAL پس از استنشاق آئروسل های CBD در مقایسه با کنترل های هوا افزایش یافت (435 میکروگرم در میلی لیتر در مقابل 287 میکروگرم در میلی لیتر؛ p.<0.01) (figure 4A, left panel). Additionally, serum albumin levels leaking into the BAL were markedly increased following CBD aerosol inhalation when compared with both nicotine aerosol (70303ng/mL vs 32741ng/mL in NicVape; p<0.01) and air inhalation (70303ng/mL vs 26042ng/ mL in air control; p<0.0001) (figure 4B, left panel). The systemic leak of FITC-dextran from the lungs into the plasma was markedly higher following CBD aerosol inhalation than Nic-vape aerosol (469.9ng/mL vs 227.6ng/mL in Nic-Vape; p<0.01) or air exposures (469.9ng/mL vs 157.5ng/mL in air control; p<0.0001) (figure 4C, left panel). Furthermore, the FITC-dextran leak following Nic-vape aerosol exposure was not significantly different when compared with air control (227.6ng/mL vs 157.5ng/mL). There were no statistically significant differences observed in the levels of these markers when comparing male with female mice following any of the exposures (figure 4A–C, right panels and online supplemental table E3). It is known that elastase activity in inflammatory diseases increases and correlates with the levels of elastase proteins and neutrophil infiltrates as the disease progresses.45 46 NE levels in the BAL were markedly augmented following inhalation of CBD aerosols (1.8-fold vs air; p<0.001) and Nic-Vape aerosols (1.42-fold vs air; p<0.01) (figure 5A, left panel). The levels of NE measured in lung tissue were significantly increased following CBD-Vape as compared with both Nic-Vape (1.3-fold; p<0.01) and air (1.41-fold; p<0.001) (figure 5B, left panel). There were no statistically significant differences observed in NE levels between male and female mice, measured either in the BAL or lung tissues (figure 5A, B, right panels and online supplemental table E3). We detected higher MPO activity in lung tissues following inhalation of CBD aerosols compared with nicotine aerosols (~2fold; p<0.05) and air (~8.44fold; p<0.0001) (figure 6A). BAL MPO activity following CBD and nicotine aerosol-inhalation was equivalent, but greater than air controls (p<0.01) (online supplemental figure E9A). There were no statistically significant differences observed in MPO activity between male and female mice, either in lung tissue or in the BAL (figure 6B; online supplemental figure E9B and online supplemental table E3).

شکل 2 تغییرات التهابی در ریه ها به دنبال قرار گرفتن در معرض استنشاق CBD و آئروسل های نیکوتین. در پایان مواجهه‌ها، موش‌ها معدوم شدند، نای برای جمع‌آوری BAL در 1% FBS در PBS کانوله شد و ریه‌ها برداشت شدند. (الف) سیتوسپین سلول‌های BAL روی لام‌های شیشه‌ای با محلول Oil Red O. 5% 0 رنگ‌آمیزی شد و سلول‌های O-Red O-مثبت طبق روش‌ها شمارش شدند. نتایج به صورت نمودارهای جعبه با سبیل در حداقل و حداکثر به تصویر کشیده می شوند. تفاوت بین دو گروه در ص<0.05 and indicated with the symbols *p<0.05; ***p<0.001 by performing non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons using GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each experiment n=10 (5 males+5 females) for CBD-vape and air exposure and n=9 (5 males+4 females) for Nic-vape). (B–E) Left lung lobes from all mice were embedded, sectioned and H&E stained as described in the methods. (B) (Air): Image of the histologically unremarkable lung from air-breathing control mouse showing air-filled alveolar lumina bounded by thin alveolar walls (arrows). H&E, ×20. (C) Nic-vape: Peribronchiolar lymphocytic, macrophagic (arrowhead) granulocytic infiltrate (circle). H&E, ×20 magnification. B=bronchiolar lumen. (D, E) CBD-vape: Perivascular infiltrates composed of mononuclear (lymphocytes and macrophages) and granulocytic infiltrates (arrows). Intra-alveolar granulocytes (circles) and macrophages (arrowheads) were also present. H&E, ×20 magnification. BD, cannabidiol; B, bronchiolar lumen; FDR, false discovery rate; PBS, phosphate-buffered saline; V, vessel lumen.

قرار گرفتن در معرض CBD و آئروسل های نیکوتین پتانسیل آنتی اکسیدانی ریوی را کاهش داد

ظرفیت کل آنتی اکسیدانی به طور قابل توجهی در هر دو بافت ریه کاهش یافت (ص<0.01vs air) and BAL (p=0.001vs air) following inhalation of CBD aerosols (figure 7A; online supplemental figure E10A). However, following nicotine aerosol exposure it was significantly reduced only in the BAL (p<0.01vs air) compared with air (online supplemental figure E10A). We did not observe any statistically significant differences in the antioxidant potential between male and female mice for each exposure group, either in lung tissue or in the BAL (figure 7B; online supplemental figure E10B and online supplemental table E3).

شکل 3 تعدیل محیط سیتوکین/کموکاین التهابی در مایع BAL به دنبال استنشاق آئروسل های CBD و نیکوتین. سطوح مختلف سایتوکاین‌ها و کموکاین‌های مرتبط با التهاب در BAL (A-H) موش‌ها پس از 2 هفته قرار گرفتن در معرض هوا، آئروسل‌های Nic-Vape یا ذرات معلق در هوا CBD-Vape با استفاده از کیت MULTIPLEX MAP همانطور که در مواد و روش‌ها توضیح داده شد، اندازه‌گیری شد. داده ها به صورت نمودارهای جعبه با سبیل در حداقل و حداکثر نشان داده می شوند. آزمون ناپارامتریک کروسکال-والیس با تصحیح FDR برای مقایسه‌های چندگانه برای بررسی اینکه آیا تفاوت‌های آماری معنی‌داری بین دو گروه با استفاده از نرم‌افزار GraphPad Prism V.9 (GraphPad؛ La Jolla، کالیفرنیا، ایالات متحده آمریکا) وجود دارد یا خیر، انجام شد. تفاوت بین دو گروه در p. معنی دار در نظر گرفته می شود<0.05 and is indicated with symbols *p<0.05; **p<0.01; ***p<0.001; ****p<0.0001. In each experiment n=10 for CBD-vape and air exposure (5 males+5 females) and n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape). CBD, cannabidiol.

آئروسل CBD برای hSAEC ها سمی تر از آئروسل نیکوتین بود و یکپارچگی سد اپیتلیال آنها را مختل کرد.

مشاهده کردیم که وقتی SAECهای انسانی به مدت 1 ساعت در شرایط آزمایشگاهی در معرض آئروسل های CBD قرار گرفتند، مورفولوژی سلول های اپیتلیال به طور قابل توجهی مختل شد (شکل 8A، B در مقابل 8C). مرگ سلولی در hSAEC ها تنها پس از قرار گرفتن در معرض آئروسل CBD در مقایسه با هوا به طور قابل توجهی افزایش یافت (41٪ در مقابل 12.5٪ در کنترل هوا؛ p.<0.05) (figure 8D, E). Even though the cell death following CBD-Vape exposure was higher compared with exposure to nicotine aerosols, it, however, did not reach statistical significance (41% vs. 16% in Nic-Vape). Additionally, exposure to CBD aerosols diminished the epithelial barrier integrity of human SAECs compared with air by 2.1-fold (p<0.05) and while the exposure to nicotine aerosols also showed an increased trend, it was not significantly different compared with air-control (1.7-fold decrease in Nic-Vape vs air control) (figure 8F).

گیاه سیستانچ سیستم ایمنی را افزایش می دهد

آئروسل های CBD اما نه ذرات نیکوتین باعث مرگ سلولی آپوپتوز در نوتروفیل های خالص شده انسانی شدند، اما هر دو باعث افزایش آزادسازی NE شدند.

قرار گرفتن حاد در معرض آئروسل های CBD باعث مرگ سلولی قابل توجه در نوتروفیل های انسانی خالص شد (44.5٪ مرگ سلولی به دنبال CBDVape در مقابل 14٪ در کنترل هوا؛ p.<0.0001) and (44.5% vs 21%cell death in Nic-Vape; p<0.001) (figure 9A). CBD aerosol-induced neutrophil cell death was mainly due to increased apoptosis compared with air (29% vs. 10% in air control; p<0.0001) and compared with Nic-Vape (29% vs. 12% in Nic-Vape; p<0.001) (figure 9B). Furthermore, both CBD and nicotine aerosols lead to enhanced accumulation of NE levels in the neutrophil cell culture media as compared with air control (2-fold increase in CBD-Vape; p<0.001and 1.45-fold increase in Nic-Vape; p<0.05) (figure 9C). However, the levels were significantly higher following CBD versus nicotine exposure (CBD-Vape 1.4-fold higher than Nic-Vape; p<0.05) (figure 9C). Pictures of human neutrophils after ALI exposures and the 24-hour recovery period are provided in online supplemental figure E12. Importantly, an aliquot of purified neutrophils that were incubated in media (unexposed) for the duration of the experiment showed low cell death (~11%) that was equivalent to values noted in neutrophils exposed to air (~14%) in the ALI chambers (figure 9A), nor was apoptosis or increased NE levels induced (figure 9B, C).

شکل 4 نشانگرهای آسیب ریه ناشی از قرار گرفتن در معرض CBD و آئروسل های نیکوتین استنشاقی. در پایان مواجهه‌ها، موش‌ها معدوم شدند، BAL برداشت شد و سطوح (A) پروتئین کل و (B) آلبومین در BAL همانطور که در بخش مواد و روش‌ها توضیح داده شد اندازه‌گیری شد. (C) سطوح نشت FITC-دکستران به پلاسما اندازه گیری شد. پانل های سمت چپ در هر شکل داده های مردان و زنان را به صورت ترکیبی نشان می دهد، در حالی که پانل های سمت راست داده ها را به صورت مردانه در مقابل زنان نشان می دهد. نتایج به صورت نمودارهای جعبه با سبیل در حداقل و حداکثر نشان داده می شوند. تفاوت بین گروه ها در p قابل توجه در نظر گرفته می شود<0.05 and are indicated as symbols **p<0.01, ****p<0.0001, calculated after performing non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by employing GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each experiment n=10 (5 males+5 females) for air and CBD-vape exposures and n=9 (5 males+4 females) for the Nic-Vape group. CBD, cannabidiol.

شکل 5 سطوح نوتروفیل الاستاز در ریه ها پس از قرار گرفتن در معرض CBD و آئروسل های نیکوتین اندازه گیری شد. در پایان مواجهه‌های 2-هفته‌ای، موش‌ها معدوم شدند، BAL و ریه‌ها برداشت شدند و لیزات بافتی تهیه شد. (A، B) سطوح NE در BAL و لیز بافت ریه توسط ELISA اندازه‌گیری شد. پانل های سمت چپ در هر شکل داده ها را به صورت ترکیبی از مردان نشان می دهد، در حالی که پانل های سمت راست داده ها را به صورت مردانه در مقابل زنان نشان می دهند. نتایج به صورت نمودارهای جعبه با سبیل در حداقل و حداکثر نشان داده می شوند. آزمون ناپارامتریک کروسکال-والیس با تصحیح FDR برای مقایسه های چندگانه برای بررسی اینکه آیا تفاوت های آماری معنی داری بین دو گروه با استفاده از نرم افزار GraphPad Prism V.9 (GraphPad؛ La Jolla، کالیفرنیا، ایالات متحده آمریکا) وجود دارد یا خیر، استفاده شد. تفاوت بین دو گروه در p. معنی دار در نظر گرفته شد<0.05 and is indicated with symbols **p<0.01, ***p<0.001. In each experiment n=10 (5 males+5 females) for air and CBD-vape exposures each and n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape. CBD, cannabidiol; NE, neutrophil elastase.

بحث

یافته‌های ما نشان داد که اثرات مضر بر سیستم ایمنی و آسیب ریه پس از قرار گرفتن در معرض استنشاق محصولات ویپینگ حاوی کانابینوئید شدیدتر از قرار گرفتن در معرض آئروسل‌های یک دستگاه بخارپز حاوی نیکوتین بود. ما اثر مضر CBD تبخیر شده بر هموستاز ایمنی ریوی را با استفاده از یک مدل موش از بخار و آزمایش‌های آزمایشگاهی با سلول‌های انسانی کشف کرده‌ایم. مطالعات ما نشان داد که تبخیر CBD یک ریزمحیط ریوی پیش‌التهابی ایجاد می‌کند، که منجر به تجمع مشخص سلول‌های ایمنی التهابی می‌شود که فعالیت افزایش یافته عوامل آسیب‌رسان بافت مانند MPO و NE را نشان می‌دهند و منجر به القای آسیب ریه از طریق فرآیندهایی می‌شود که ممکن است شامل استرس اکسیداتیو باشد. اگرچه مطالعات متعددی اثرات تنفسی نیکوتین بخار را بررسی کرده‌اند، اما طبق اطلاعات ما، این اولین گزارشی است که نشان می‌دهد حتی قرار گرفتن کوتاه‌مدت در معرض CBD تبخیر شده، محیط التهابی ریه را تغییر می‌دهد و منجر به آسیب ریه می‌شود. توجه به این نکته مهم است که ما از محصولات ویپینگ حاوی CBD بدون THC استفاده کردیم تا هرگونه تأثیر بالقوه THC بر اثرات ریوی را از بین ببریم. به دلیل محدودیت‌های قانونی در دسترسی به محصولات ویپینگ حاوی THC، ما نتوانستیم آزمایش‌هایی انجام دهیم که اثرات بخار THC را نیز مقایسه کند. یک مطالعه اخیر گزارش داد که CBD در محصولات بخارپز می تواند به عنوان پیش ساز THC در نظر گرفته شود، بنابراین با ایجاد اثرات مستقل از CBD و واسطه THC مربوط به استفاده عمومی از محصولات بخارپز شاهدانه، مشکل را بیشتر می کند.

علاوه بر این، هر گونه اثرات سمی تنفسی بخارپز به طور بالقوه می‌تواند با حضور سایر اجزای محصولات بخارپز، از جمله حلال‌های مختلف (MCT در محصول CBD و PG: VG در محصولات نیکوتین)، طعم‌های مختلف و ترپن‌های موجود در هر دو محصول تشدید شود. تجزیه و تحلیل محصول محصولات جانبی تخریب بالقوه متعددی در هر دو محلول گرم شده شناسایی شد، که نشان می‌دهد هر دو محصول به دماهای بالا حساس هستند. با این حال، سطوح بالاتری از ترکیبات کربونیل در آئروسل حاوی CBD شناسایی شد، که نشان می‌دهد که محصول تبخیر CBD مورد استفاده در مطالعه ما ممکن است در مقایسه با محصولات نیکوتین، مستعد تخریب حرارتی باشد. این ممکن است به دلیل تفاوت در ترکیب شیمیایی دو محلول و / یا تفاوت در شرایط تبخیر در دستگاه های بخار باشد. نشانگرهای متعدد التهاب و آسیب ریوی که در مطالعه ما اندازه‌گیری شد، پس از قرار گرفتن در معرض محصولات ویپینگ حاوی CBD نسبت به دستگاه‌های ویپینگ حاوی نیکوتین به طور مداوم بالاتر بود. به عنوان مثال، ما گزارش می‌دهیم که استنشاق روغن ویپ CBD باعث افزایش بسیار قوی‌تر در تعداد سلول‌های CD4+ و CD{4}} و تعداد بالای نوتروفیل‌ها در ریه‌ها می‌شود. نمایه مشابهی از افزایش نوتروفیل‌ها و مدولاسیون سلول‌های CD{5}} و CD8+ در ریه بیمار مشاهده شد که روغن شاهدانه را بخار کرده و باعث آسیب ریه و نارسایی تنفسی شده بود. سلول های T التهابی، عوامل بسیج کننده نوتروفیل، و جذب نوتروفیل در اختلالات التهابی ریوی.48 افزایش محیط التهابی در ریه ها پس از قرار گرفتن در معرض ذرات معلق CBD می تواند تجمع و/یا فعال شدن نوتروفیل ها را در فضای برونش آلوئولار مستقیماً از طریق آزادسازی خاص تنظیم کند. عوامل بسیج کننده نوتروفیل مانند IL{10}}، G-CSF و KC (CXCL1) یا به طور غیرمستقیم از طریق فعال سازی ماکروفاژهای ریه ساکن و سلول های اپیتلیال. در واقع، ما نشان می‌دهیم که آئروسل‌های CBD به یکپارچگی اپیتلیال آسیب می‌رسانند و باعث مرگ سلولی در hSAEC‌ها می‌شوند، که نشان می‌دهد آئروسل‌های CBD می‌توانند مستقیماً آسیب بافت ریه را القاء کنند و DAMPs را برای واسطه‌گری فعال کنند. . نفوذ نوتروفیل و تخریب بافت ریه ناشی از NE به عنوان واسطه آسیب ریوی ناشی از دود سیگار و به خطر افتادن یکپارچگی سد اپیتلیال شناخته شده است. افزایش تعداد نوتروفیل‌های انباشته شده در ریه‌های موش‌هایی که در معرض آئروسل‌های CBD قرار گرفته‌اند (14488 در مقابل 3674 در هوا) ممکن است به دلیل وضعیت فعال‌سازی آنها عواقب بیولوژیکی داشته باشد. این سلول های گرانولوسیتی منبع دو عامل مهم میلوپراکسیداز و NE هستند که در فعالیت میکروب کشی و بازسازی ریوی نقش دارند. سطوح افزایش یافته MPO، همانطور که در مطالعه ما مشاهده شد، یک نشانگر استرس التهابی و اکسیداتیو قابل توجه در چندین بیماری از جمله آسیب ریه در نظر گرفته می شود.{24}} پروتئین MPO آزاد شده از نوتروفیل های فعال به عنوان یک تعدیل کننده اتوکرین عمل می کند و شبیه سیتوکین های پیش التهابی را نشان می دهد. خواص برای القای فعال‌سازی PMN، به شیوه‌ای که مستقل از فعالیت کاتالیزوری MPO است. بنابراین، با توجه به این گزارش‌ها و یافته‌های فعلی ما، فرض می‌کنیم که استنشاق آئروسل CBD مزمن می‌تواند یک ریزمحیط پیش التهابی قوی ایجاد کند که می‌تواند برای ریوی مضرتر باشد. هموستاز و ممکن است بیماری های ریوی موجود را تشدید کند. نفوذ نوتروفیل ها به ریه ها پس از استنشاق آئروسل CBD احتمالاً ممکن است با تنظیم مثبت کموکاین های محلول مانند KC ایجاد شود و بنابراین می تواند مسئول افزایش سطوح NE موجود در BAL و بافت ریه باشد. از آنجایی که قرار گرفتن در معرض آئروسل CBD باعث آزاد شدن NE از نوتروفیل های انسانی در شرایط آزمایشگاهی می شود، این نتیجه گیری را تایید می کند که آئروسل های CBD پتانسیل این را دارند که به طور مستقیم نوتروفیل ها را در داخل بدن فعال کنند و التهاب ریوی را در کاربران تقویت کنند. همانطور که سطوح NE و فعالیت مرتبط با آن در طول پاسخ های التهابی با واسطه نوتروفیل افزایش می یابد، بنابراین ما فقط سطوح NE را به عنوان شاخصی از فعالیت آن اندازه گیری کردیم. به‌علاوه، همانطور که مشاهده کردیم، تأثیر مخرب تبخیر CBD احتمالاً می‌تواند توسط سیستم‌های آنتی‌اکسیدان مختل تشدید شود، جایی که عواملی مانند MPO ناشی از CBD-Vape می‌توانند نقش مهمی ایفا کنند.{31}} سلول‌های CD{32}}ROR t + T. که بیانگر فاکتور اصلی رونویسی ضروری برای تمایز به سلول های Th17 پیش التهابی است، تقویت شد و یک ریزمحیط پیش التهابی القا شده توسط آئروسل های CBD را پیش بینی کرد. افزایش القای سلول‌های تنظیم‌کننده CD{35}FoxP{36}} T (Tregs) ممکن است مکانیزمی باشد که بوسیله آن بخار کردن CBD می‌تواند سرکوب سیستم ایمنی را القا کند. Tregs فعال‌سازی، تکثیر و تولید سیتوکین سلول‌های CD{37}} و CD{38}} را سرکوب می‌کنند و در سرکوب سلول‌های دندریتیک از طریق کاهش مولکول‌های تحریک‌کننده نقش دارند.60 Tregs زنجیره گیرنده IL{40} را بیان می‌کنند. که مصرف IL{42}} را تسهیل می‌کند و بنابراین می‌تواند سلول‌های فاکتور T را از در دسترس بودن IL-2 محروم کند، که به سرکوب سلول‌های مؤثر T کمک می‌کند. تقویت Tregs ناشی از آئروسل می‌تواند اختلال عملکرد سلول‌های T و سرکوب ایمنی تطبیقی ​​در ریه‌ها را واسطه کند، حساسیت به عفونت‌های تنفسی را افزایش دهد و نتایج ضعیفی را برای واکسیناسیون پیشگیرانه ایجاد کند. ما کاهش قابل توجهی در تعداد ماکروفاژهای بینابینی ریه پس از قرار گرفتن در معرض CBD مشاهده کردیم. Siglec-F+ که معمولاً به عنوان نشانگر ائوزینوفیل در نظر گرفته می شود، در ماکروفاژهای آلوئولی موش به شدت بیان می شود و هنگامی که در ترکیب با CD11c استفاده می شود، دقیق ترین شناسایی ماکروفاژهای آلوئولی را در ریه موش ارائه می دهد. کاهش قابل توجه در تعداد ماکروفاژهای آلوئولی CD11bCD11c+Siglec-F+ مشاهده شده در موش هایی که در معرض CBD قرار گرفته بودند، توسط مطالعات قبلی تأیید شده است.62 مطالعه قبلی گزارش داد که قرار گرفتن در معرض EC در موش ها باعث اختلال عملکرد ماکروفاژ آلوئولی مرتبط با جذب ضعیف پاتوژن، با افزایش همزمان می شود. بار پاتوژن ریوی که با تاخیر در زمان بهبودی و افزایش مرگ و میر پس از عفونت مرتبط است. کاهش قابل توجه در تعداد ماکروفاژهای ضد التهابی آرژیناز ریوی M2 به دنبال استنشاق آئروسل CBD می‌تواند منجر به اختلال در هموستاز ایمنی ریوی و آسیب شود. .63 افزایش ریزمحیط پیش التهابی که در ریه ها به دنبال استنشاق CBD تشخیص داده می شود تا حدودی به کاهش تعداد ماکروفاژهای ریوی ضد التهابی M2 نسبت داده می شود. کاهش تعداد ماکروفاژها می تواند به طور قابل توجهی بر پاسخ های ریوی به عفونت های تنفسی تأثیر بگذارد که می تواند با فاگوسیتوز ناکارآمد ماکروفاژها ترکیب شود. بنابراین، قرار گرفتن در معرض آئروسل‌های سیگارهای الکترونیکی حاوی نیکوتین باعث کاهش فاگوسیتوز هموفیلوس آنفولانزای غیرقابل تایپ (NTHI) توسط ماکروفاژها شد که عمدتاً به دلیل وجود طعم‌دهنده‌های سیگار الکترونیکی بود. این احتمال را افزایش می دهد که اختلال عملکرد ماکروفاژ ناشی از آئروسل CBD می تواند با افزودن مواد شیمیایی طعم دهنده مختلف تشدید شود.

شکل 6 افزایش فعالیت میلوپراکسیداز (MPO) در ریه ها پس از قرار گرفتن در معرض CBD و آئروسل های نیکوتین. (A، B) ما فعالیت MPO را در لیزهای بافت ریه حیوانات در معرض نیکوتین یا آئروسل CBD با استفاده از کیت سنجش MPO از Abcam اندازه‌گیری کردیم، همانطور که در بخش مواد تکمیلی به تفصیل توضیح داده شد. پانل سمت چپ داده ها را به صورت مرد نشان می دهد، در حالی که پانل سمت راست داده ها را به صورت مرد در مقابل زن نشان می دهد. داده ها به صورت نمودارهای جعبه با سبیل در حداقل و حداکثر نشان داده می شوند. آزمون ناپارامتریک کروسکال-والیس با تصحیح FDR برای مقایسه‌های چندگانه برای بررسی اینکه آیا تفاوت‌های آماری معنی‌داری بین دو گروه با استفاده از نرم‌افزار GraphPad Prism V.9 (GraphPad؛ La Jolla، کالیفرنیا، ایالات متحده آمریکا) وجود دارد یا خیر، انجام شد. تفاوت بین دو گروه در p. معنی دار در نظر گرفته شد<0.05 and is indicated with the symbols *p<0.05, ****p<0.0001. In each experiment n=10 mice for air and CBD-vape exposures each (5 males+5 females) and n=9 for Nic-Vape group (5 males+4 females). CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate

شکل 7 تغییرات پتانسیل آنتی اکسیدانی در ریه به دنبال قرار گرفتن در معرض CBD و آئروسل های نیکوتین. در پایان قرار گرفتن در معرض نیکوتین یا آئروسل های CBD، موش ها کشته شدند و لیز بافت ریه تهیه شد. (A, B) سطح کل آنتی اکسیدان در لیزهای بافت ریه با استفاده از کیت سنجش آنتی اکسیدانی Cayman (Cat# 709001) همانطور که در بخش مواد تکمیلی آنلاین به تفصیل توضیح داده شده است، کمی سازی شد. پانل سمت چپ داده ها را به صورت ترکیبی نر و ماده به تصویر می کشد، در حالی که پانل سمت راست داده ها را به صورت مرد در مقابل زن نشان می دهد. داده ها به صورت نمودارهای جعبه با سبیل در حداقل و حداکثر نشان داده می شوند. آزمون ناپارامتریک کروسکال-والیس با تصحیح FDR برای مقایسه های چندگانه برای بررسی اینکه آیا تفاوت های آماری معنی داری بین دو گروه با استفاده از نرم افزار GraphPad Prism V.9 (GraphPad؛ La Jolla، کالیفرنیا، ایالات متحده آمریکا) وجود دارد یا خیر، استفاده شد. تفاوت بین دو گروه در p. معنی دار در نظر گرفته شد<0.05 and is indicated by the symbol **p<0.01. In each experiment, n=10 mice for air and CBD-vape exposures each (5 males+5 females) and n=9 for the Nic-Vape group (5 males+4 females). CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate.

شکل 8 مورفولوژی سلول های اپیتلیال، سمیت سلولی و یکپارچگی سد اپیتلیال سلول های اپیتلیال راه هوایی کوچک انسان (SAEC) به دنبال قرار گرفتن در معرض CBD و آئروسل های نیکوتین. SAECهای انسانی (0.5 میلیون سلول/درج در قالب 6-قالب چاه) در محیط رشد کامل یک شبه کشت داده شدند و روز بعد مستقیماً در سطح مشترک هوا-مایع (ALI) در معرض 110 پفک قرار گرفتند. هوا، نیکوتین (50 میلی گرم در میلی لیتر نیکوتین) یا آئروسل های حاوی CBD (50 میلی گرم در میلی لیتر) همانطور که در روش ها توضیح داده شده است. تمام ذرات معلق در هوا در یک حجم پف 55 میلی لیتری همانطور که در بخش روش ها توضیح داده شد تولید شدند. در پایان مواجهه ها، سلول ها از محفظه ALI خارج شدند و در محیط رشد کامل به مدت 24 ساعت در دمای 37 درجه انکوبه شدند. پس از پایان دوره نقاهت، سلول‌ها ابتدا در یک میکروسکوپ کنتراست فاز (Olympus IX73) و سپس سنجش سمیت سلولی با استفاده از روش تریپان بلو (D) (اندازه‌گیری شده به عنوان درصد مرگ سلولی) یا (E) در 200× تصویربرداری شدند. ) روش جذب قرمز خنثی (به عنوان درصد کنترل هوا) انجام شد. برای (F) سنجش نفوذپذیری FITC-دکستران، 1 میلیون SAEC/درج کشت انسانی یک شبه کشت داده شد و روز بعد مستقیماً در ALI در معرض 110 پف هوا، نیکوتین (50 میلی‌گرم در میلی‌لیتر نیکوتین) یا CBD (50 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر) قرار گرفتند. آئروسل ها پس از اتمام مواجهه ها، FITC-دکستران با غلظت 10 میلی گرم بر میلی لیتر به محفظه آپیکال اضافه شد و به مدت 2.5 ساعت انکوبه شد. نمونه ها از محفظه قاعده جانبی برداشت شدند و فلورسانس با استفاده از طول موج های Exci485/Emi528 در یک صفحه خوان هیبریدی H1 هم افزایی (BioTek) اندازه گیری شد. غلظت FITC-دکستران در محفظه قاعده جانبی با استفاده از یک منحنی استاندارد محاسبه شد. تفاوت بین دو گروه در p. معنی دار در نظر گرفته شد<0.05 and is indicated with the symbol *p<0.05, calculated using non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by GraphPad prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). Results are depicted as box plots with whiskers at min and max from three independent experiments each performed in triplicate as described in online supplemental methods. CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate; SAECs, small airway epithelial cells.

شکل 9 مرگ سلولی آپوپتوز در نوتروفیل های خالص انسانی و سطوح نوتروفیل الاستاز (NE) آزاد شده پس از قرار گرفتن در معرض CBD و آئروسل های نیکوتین. نوتروفیل‌های انسانی خالص‌شده از خون کامل در 0.8 میلیون سلول/کشت در قالب 6-چاه کاشته شدند و بلافاصله در معرض 110 پف هوا، نیکوتین (50 میلی‌گرم در میلی‌لیتر نیکوتین) یا CBD قرار گرفتند. آئروسل‌های حاوی 50 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر در سطح مشترک هوا-مایع در حجم پف 55 میلی‌لیتری همانطور که در بخش روش‌ها توضیح داده شد. در پایان مواجهه‌ها، سلول‌ها از محفظه ALI خارج شدند و به مدت 24 ساعت در محیط رشد کامل بازیابی شدند. سپس، مرگ سلولی با استفاده از (A) روش حذف رنگ تریپان بلو و (B) آپوپتوز انکسین V-FITC همانطور که در بخش روش‌ها به تفصیل ذکر شد اندازه‌گیری شد. بلافاصله پس از جداسازی، مقدار کمی از نوتروفیل های خالص شده در یک محیط کامل در یک انکوباتور CO2 به عنوان "کنترل بدون مواجهه" منفی برای کل مدت زمان سنجش نگهداری شد تا میزان مرگ سلولی، القای آپوپتوز یا سطوح NE در آن تخمین زده شود. عدم وجود هر گونه مواجهه (C) سطوح NE در محیط های شرطی برداشت شده پس از پایان دوره بهبود با انجام NE ELISA همانطور که در بخش روش ها مورد بحث قرار گرفت، اندازه گیری شد. داده‌ها به‌عنوان نمودارهای جعبه‌ای با سبیل در حداقل و حداکثر از آزمایش‌های مستقل که هر کدام در سه تکرار انجام شده‌اند، نشان داده می‌شوند. برای سنجش آپوپتوز: میانگین داده‌های n=5 اهداکننده در هر گروه. برای روش آبی تریپان: میانگین داده‌های کنترل نشده=6 اهداکننده، کنترل هوا و Nic-Vape n=7 اهداکننده، و CBD-Vape n=8 اهداکننده. میانگین داده‌های سنجش NE از n{19}} اهداکننده در هر گروه). تفاوت بین دو گروه در p. معنی دار در نظر گرفته شد<0.05 which is indicated by the symbols *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001 calculated using non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). ALI, air–liquid interface; CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate.

جدول 2 مقایسه نشانگرهای مختلف نتایج مطالعه پس از قرار گرفتن در معرض محصول ویپینگ حاوی CBD (CBD-vape) و محصول ویپینگ حاوی نیکوتین (Nic-vape)

وجود ماکروفاژهای درون آلوئولی مملو از چربی که در سلول‌های بازیابی شده از BAL موش‌ها پس از استنشاق آئروسل CBD در مطالعه ما مشاهده شد، با گزارش قبلی که شروع پنومونی لیپووئیدی برون‌زا را در بیماری که روغن شاهدانه را بخار می‌کرد و لیپید داشت، تأیید می‌کند. ماکروفاژهای ریه پر شده.65 از آنجایی که پنومونی لیپوییدی اگزوژن با ماکروفاژهای ریه مملو از چربی مشخصه EVALI است، بنابراین نشان می دهد که استنشاق روغن ویپ CBD ممکن است بدون خطر نباشد و می تواند منجر به آسیب ریه در ویپرهای شاهدانه شود. موارد ارائه‌شده در گزارش‌های بالینی EVALI، ارتباط علت‌شناختی قوی‌تری را بین ویپینگ حشیش و نارسایی تنفسی در مقایسه با بخار کردن نیکوتین نشان می‌دهند. برخلاف مطالعات قبلی ما روی موش‌هایی که VEA (علت احتمالی EVALI) را استنشاق کردند، در این مطالعه، ما وجود ماکروفاژهای کف آلود را مشاهده نکرد. 14 در حالی که خطرات کلی برای عوارض ریوی مرتبط با ویپینگ در مقایسه با سیگار کشیدن ممکن است کمتر باشد، به نظر می رسد که بخارپزی خطری برای سلامت تنفسی دارد، به خصوص در ویپرهای طولانی مدت شاهدانه. به طور خلاصه، مطالعه ما به وضوح نشان می‌دهد که محیط پیش‌التهابی در ریه‌ها ناشی از استنشاق آئروسل CBD بیشتر از محیط القا شده توسط آئروسل‌های نیکوتین بود، و این با اختلال یکپارچگی سد ریوی و آسیب ریه منعکس شد (خلاصه‌شده در جدول 2). این نشان می‌دهد که بخار کردن حشیش به طور بالقوه می‌تواند منجر به پیامدهای شدیدتر شود، از جمله افزایش حساسیت به عفونت‌های تنفسی، پاسخ‌های ضعیف به واکسیناسیون‌های پیشگیرانه، و بدتر شدن علائم در بیماران مبتلا به بیماری‌های التهابی زمینه‌ای ریوی.16–{14}} تغییرات قابل مشاهده در رفتار حیوان در طول یا بعد از قرار گرفتن در معرض، و نه تغییر وزن در مقایسه با کنترل هوا (شکل مکمل آنلاین E11). در این مطالعه، قرار گرفتن در معرض آئروسل نیکوتین در مقایسه با مطالعه قبلی، سطوح سیتوکین ها/کموکاین های مختلف را در BAL به همان میزان القا نکرد. به دنبال قرار گرفتن در معرض نیکوتین-آئروسل، و سطوح رونوشت گاهی اوقات هنگامی که در سطوح پروتئین اندازه گیری می شوند به تغییراتی تبدیل نمی شوند. علاوه بر این، مشخصات سیتوکین و مدولاسیون سیستم ایمنی به مایع الکترونیکی خاص، روش تولید آئروسل/مدت قرار گرفتن در معرض و مواد شیمیایی طعم‌دهنده اضافه شده بستگی دارد. در حالی که شاهدانه فواید سلامتی را در مدیریت درد، خواب، و تسکین علائم تهوع/استفراغ ناشی از شیمی درمانی در بیماران سرطانی و در بیمارانی که تشنج را تجربه می‌کنند، اثبات کرده است، 72-76 صرفاً فقدان شواهد محکمی در مورد ایمنی شاهدانه در هنگام تحویل از بخار وجود دارد. محصولات در این راستا، مطالعه ما جدید است و نقش استنشاق آئروسل CBD را در القای التهاب ریوی و آسیب ریه شناسایی می‌کند.

cistanche tubulosa - بهبود سیستم ایمنی

از آنجایی که مطالعه ما از مدل‌های قرار گرفتن در معرض حیوانات و آزمایشگاهی استفاده کرد، هنگام برون‌یابی نتایج ارائه‌شده به قرار گرفتن در معرض زندگی واقعی در انسان، باید چندین محدودیت در نظر گرفته شود. یکی از محدودیت های این مطالعه این است که تمرکز آن تنها بر مواجهه کوتاه مدت بوده است. نتیجه مواجهه طولانی مدت مزمن با آئروسل های CBD و تأثیر آنها بر پاسخ به عفونت تنفسی و/یا واکسیناسیون پیشگیری کننده از اهمیت بالایی برخوردار است. روش قرار گرفتن در معرض حیوانات ما بر اساس یک سیستم قرار گرفتن در معرض کل بدن است و قرار گرفتن در معرض فقط بینی ممکن است برای شبیه سازی قرار گرفتن در معرض بخارهای با تجربه مناسب تر باشد. با وجود استفاده از یک سیستم قرار گرفتن در معرض کل بدن، ما تأیید کردیم که رسوب روی خز حیوانات (و دیواره‌های قفس) به بلع ذرات توسط نظافت حیوانات کمک نمی‌کند و در نتیجه بر سمیت مشاهده‌شده تأثیر می‌گذارد. ما از تعداد محدودی موش در هر گروه مواجهه استفاده کردیم. این احتمال وجود دارد که تعداد بیشتری از موش ها می توانستند نتایج مطالعه ما را بیشتر تقویت کنند. اگرچه مدل ALI در شرایط آزمایشگاهی یک رویکرد خاص قرار گرفتن در معرض استنشاق را برای انجام مطالعه بیولوژیکی بر روی اثرات بهداشتی مرتبط با استفاده از محصولات بخارپز ارائه می‌کند، برون‌یابی داده‌های حاصل از مطالعات آزمایشگاهی به خطرات انسانی فرضی است. مطالعات مشاهده ای و تجربی آتی با استفاده کنندگان منظم CBD و محصولات ویپینگ حاوی نیکوتین برای تایید یافته های ما مورد نیاز است. در نهایت، در آزمایش‌های ما، حیوانات و سلول‌ها در معرض آئروسل‌های هر دو محصول تولید شده به روشی یکسان قرار گرفتند. با این حال، مصرف کنندگان محصولات ویپینگ مبتنی بر شاهدانه ممکن است از این محصولات به روشی بسیار متفاوت از ویپرهای نیکوتینی استفاده کنند (مثلاً کمتر). همانطور که داده‌های حاصل از مطالعات مشاهده‌ای در بین بخار‌کننده‌های شاهدانه به دست می‌آید، تفاوت‌های بالقوه در الگوهای استفاده از محصول مشاهده شده در شرایط واقعی باید هنگام شبیه‌سازی قرار گرفتن در معرض حیوانات و آزمایشگاهی در محیط‌های آزمایشگاهی در نظر گرفته شود. مطالعات آینده باید اثرات تنفسی محصولات ویپینگ حاوی طیف وسیعی از کانابینوئیدها از جمله THC را بررسی کند.

منابع

1 وزارت بهداشت ایالات متحده و. استفاده از سیگار الکترونیکی در بین جوانان و بزرگسالان جوان: گزارشی از جراح عمومی [PDF–8.47 MB] نماد PDF. آتلانتا، GA: وزارت بهداشت و خدمات انسانی ایالات متحده، CDC، 2016.

2 Borodovsky JT، Crosier BS، Lee DC، و همکاران. سیگار کشیدن، استعمال دخانیات، خوردن: آیا قانونی شدن بر نحوه استفاده مردم از شاهدانه تأثیر می گذارد؟ سیاست دارویی Int J 2016؛ 36:141-7.

3 He T، Oks M، Esposito M، و همکاران. "درخت در شکوفه": آسیب شدید ریه حاد ناشی از بخار کردن روغن شاهدانه. Ann Am Thorac Soc 2017؛ 14:468–70.

4 Knapp AA، Lee DC، Borodovsky JT، و همکاران. روندهای نوظهور در مصرف حشیش در میان مصرف کنندگان حشیش. J Adolesc Health 2019؛ 64:487-93.

5 کریگل دی. ویپینگ ماری جوانا در مقابل سیگار کشیدن: آیا برنده ای وجود دارد؟ 2021. موجود: https://vaping360.com/learn/vaping-vs-smoking-weed/ [دسترسی در 15 سپتامبر 2021].

6 Volkow ND، Baler RD، Compton WM، و همکاران. اثرات نامطلوب مصرف ماری جوانا بر سلامتی N Engl J Med 2014؛ 370: 2219-27.

7 Pahr K، Carter A. راهنمای مبتدیان برای CBD. خط سلامت 2019. موجود: https://www. healthline.com/health/your-cbd-guide [دسترسی در 19 آگوست 2021].

8 سلیمان س. سمیت هیدروکربن نفت در شرایط آزمایشگاهی: اثر n-آلکان ها، بنزن و تولوئن بر ماکروفاژهای آلوئولی ریوی و آنزیم های لیزوزومی ریه Arch Toxicol 1987؛ 59:402-7.

9 Lachenmeier DW، Kuballa T، Reusch H، و همکاران. بنزن در آب هویج نوزاد: بینش بیشتر در مورد مکانیسم تشکیل و ارزیابی خطر از جمله داده های مصرف از مطالعه دونالد. Food Chem Toxicol 2010؛ 48:291-7.

10 Li YS، Li YF، Li QN، و همکاران. سمیت حاد ریوی در موش ناشی از نانولوله های کربنی چند دیواره، بنزن و ترکیب آنها Environ Toxicol 2010؛ 25:409-17.

11 Anderson RP، Zechar K. آسیب ریه ناشی از استنشاق روغن هش بوتان شبیه ذات الریه است. Respir Med Case Rep 2019؛ 26:171–3.

12 Holt AK، Poklis JL، Peace MR. تجزیه و تحلیل گذشته نگر از ترکیبات شیمیایی در مایعات سیگار الکترونیکی تنظیم شده و تنظیم نشده Front Chem 2021; 9:752342.

13 Blount BC، Karwowski MP، Shields PG، و همکاران. ویتامین E استات در مایع لاواژ برونکوآلوئولار مرتبط با EVALI. N Engl J Med 2020؛ 382:697-705.

14 Bhat TA، Kalathil SG، Bogner PN، و همکاران. مدل حیوانی استات ویتامین E استنشاقی و آسیب ریه شبیه EVALI. N Engl J Med 2020؛ 382: 1175-7.

15 Merecz-Sadowska A، Sitarek P، Zielinska-Blizniewska H، و همکاران. خلاصه ای از مطالعات in vitro و in vivo که تأثیر قرار گرفتن در معرض سیگار الکترونیکی را بر موجودات زنده و محیط زیست ارزیابی می کند. Int J Mol Sci 2020; 21:652.

16 Sussan TE، Gajghate S، Thimmulappa RK، و همکاران. قرار گرفتن در معرض سیگارهای الکترونیکی سیستم دفاعی ضد باکتریایی و ضد ویروسی ریوی را در مدل موش مختل می کند. PLoS One 2015؛ 10:e0116861.

17 هوانگ JH، Lyes M، Sladewski K، و همکاران. استنشاق سیگار الکترونیکی ایمنی ذاتی و سیتوکین های راه هوایی را تغییر می دهد و در عین حال قدرت بیماریزایی باکتری های کلون کننده را افزایش می دهد. جی مول مد (برل) 2016؛ 94:667–79.

18 مارتین EM، Clapp PW، Rebuli ME، و همکاران. استفاده از سیگار الکترونیکی منجر به سرکوب ژن های ایمنی و پاسخ التهابی در سلول های اپیتلیال بینی مشابه دود سیگار می شود. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2016؛ 311: L135-44.

19 Rebuli ME، Glista-Baker E، Hoffman JR، و همکاران. استفاده از سیگار الکترونیکی پاسخ ایمنی مخاط بینی به ویروس آنفلوانزای ضعیف شده زنده را تغییر می دهد. یک کارآزمایی بالینی Am J Respir Cell Mol Biol 2021؛ 64:126-37.

20 بلوم JW، Kaltenborn WT، Paoletti P، و همکاران. اثرات تنفسی سیگارهای غیر تنباکو Br Med J (Clin Res Ed) 1987؛ 295: 1516-8.

21 Wills TA، Pagano I، Williams RJ، و همکاران. استفاده از سیگار الکترونیکی و اختلال تنفسی در یک نمونه بالغ وابسته به الکل مواد مخدر 2019؛ 194:363-70.

22 Xie W، Kathuria H، Galiatsatos P، و همکاران. ارتباط استفاده از سیگار الکترونیکی با شرایط تنفسی اتفاقی در بین بزرگسالان ایالات متحده از سال 2013 تا 2018. JAMA Netw Open 2020;3:e2020816.

23 Bhatta DN، Glantz SA. ارتباط استفاده از سیگار الکترونیکی با بیماری های تنفسی در میان بزرگسالان: تجزیه و تحلیل طولی Am J Prev Med 2020؛ 58:182–90.

24 Li D، Sundar IK، McIntosh S، و همکاران. ارتباط سیگار کشیدن و استفاده از سیگار الکترونیکی با خس خس سینه و علائم تنفسی مرتبط در بزرگسالان: نتایج مقطعی از ارزیابی جمعیت مطالعه تنباکو و سلامت (مسیر)، موج 2. Tob Control 2020؛ 29:140-7.

25 Tashkin DP, Coulson AH, Clark VA, et al. علائم تنفسی و عملکرد ریه در مصرف کنندگان معمولی ماری جوانا به تنهایی، سیگاری های ماری جوانا و تنباکو، سیگاری های تنباکو به تنهایی و غیرسیگاری ها. Am Rev Respir Dis 1987؛ 135:209-16.

26 تاشکین DP. مصرف ماری جوانا به عنوان عامل آسیب ریه Monaldi Arch Chest Dis 2005؛ 63:93-100.

27 تاشکین DP. اثرات سیگار کشیدن ماری جوانا بر ریه Ann Am Thorac Soc 2013؛ 10:239-47.

28 Baldwin GC, Tashkin DP, Buckley DM, et al. ماری جوانا و کوکائین عملکرد ماکروفاژ آلوئولی و تولید سیتوکین را مختل می کنند. Am J Respir Crit Care Med 1997؛ 156:1606-13.

29 Taylor DR، Poulton R، Moffitt TE، و همکاران. اثرات تنفسی وابستگی به شاهدانه در بزرگسالان جوان اعتیاد 2000؛ 95: 1669-77.

30 آلدینگتون اس، ویلیامز ام، نویتز ام، و همکاران. اثرات شاهدانه بر ساختار، عملکرد و علائم ریوی. توراکس 2007؛ 62:1058-63.

31 مور BA، آگوستسون EM، موزر RP، و همکاران. اثرات تنفسی استفاده از ماری جوانا و تنباکو در یک نمونه ایالات متحده J Gen Intern Med 2005؛ 20:33-7.

32 Goniewicz ML، Knysak J، Gawron M، و همکاران. سطوح مواد سرطان زا و سمی انتخاب شده در بخار سیگارهای الکترونیکی Tob Control 2014؛ 23:133-9.

33 Bhat TA، Kalathil SG، Leigh N، و همکاران. اثرات حاد استنشاق آئروسل محصول تنباکو گرم شده (IQOS) بر آسیب بافت ریه و تغییرات التهابی در ریه ها. Nicotine Tob Res 2021؛ 23:1160-7.

34 Kosmider L, Jackson A, Leigh N, et al. رفتار پف کردن شبانه روزی و توپوگرافی در بین کاربران سیگار الکترونیکی Tob Regul Sci 2018؛ 4:41-9.

35 Bhat TA، Kalathil SG، Bogner PN، و همکاران. دود دست دوم باعث التهاب و تضعیف ایمنی در برابر عفونت های تنفسی می شود. J Immunol 2018؛ 200:2927-40.

36 Bhat TA، Kalathil SG، Bogner PN، و همکاران. AT-rvd1 التهاب ریوی تشدید شده با دود سیگار را کاهش می دهد و ایمنی ضد باکتریایی سرکوب شده توسط دود سیگار را بازیابی می کند. J Immunol 2021؛ 206:1348-60.

37 Carden D، Xiao F، Moak C، و همکاران. نوتروفیل الاستاز باعث آسیب میکروواسکولار ریه و پروتئولیز کادرین های اندوتلیال می شود. مجله آمریکایی فیزیولوژی-قلب و فیزیولوژی گردش خون 1998؛ 275: H385-92.

38 Kawabata K، Hagio T، Matsuoka S. نقش نوتروفیل الاستاز در آسیب حاد ریه. Eur J Pharmacol 2002؛ 451:1-10.

39 خان ع.، م.ع. الصحلی، رحمانی ق. میلوپراکسیداز به عنوان یک بیومارکر بیماری فعال: دیدگاه های بیوشیمیایی و پاتولوژیک اخیر Med Sci (بازل) 2018؛ 6:33.

40 Dietert K، Gutbier B، Wienhold SM، و همکاران. طیف هیستوپاتولوژی های پاتوژن و مدل خاص در مدل های موش پنومونی حاد. PLoS One 2017؛ 12:e0188251.

41 Butt YM، Smith ML، Tazelaar HD، و همکاران. آسیب شناسی آسیب ریه مرتبط با بخار. N Engl J Med 2019؛ 381:1780–1.

42 لی دبلیو ال، داونی جی پی. فعال شدن نوتروفیل ها و آسیب حاد ریه. Curr Opin Crit Care 2001؛ 7:1-7.

43 Fink MP. نقش گونه های فعال اکسیژن و نیتروژن در سندرم دیسترس تنفسی حاد. Curr Opin Crit Care 2002؛ 8:6-11.

44 Abraham E. نوتروفیل ها و آسیب حاد ریه. Crit Care Med 2003؛ 31: S195-9.

45 فام CTN. نوتروفیل های سرین پروتئازها پاسخ التهابی را به خوبی تنظیم می کنند. Int J Biochem Cell Biol 2008؛ 40:1317-33.

46 Arecco N، Clarke CJ، Jones FK، و همکاران. سطح و فعالیت الاستاز در عضله دیستروفی افزایش می یابد و بقا، تکثیر و تمایز سلول های میوبلاست را مختل می کند. Sci Rep 2016; 6:24708.

47 Czégény Z، Nagy G، Babinszki B، و همکاران. CBD، پیش ساز THC در سیگارهای الکترونیکی است. Sci Rep 2021; 11:8951.

48 Lindén A، Laan M، Anderson GP. نوتروفیل ها، اینترلوکین-17 و بیماری ریوی. Eur Respir J 2005؛ 25:159-72.

49 Ma K، یانگ L، Shen R، و همکاران. سلول های Th17 تولید CXCL1 را در سرطان سینه تنظیم می کنند. Int Immunopharmacol 2018؛ 56:320-9.

50 Becker S، Quay J، Koren HS، و همکاران. بیان MCP{1}}، GRO آلفا، بتا و گاما را در اپیتلیوم راه هوایی انسان و ماکروفاژهای برونش آلوئولار ایجاد و تحریک کرده است. Am J Physiol 1994؛ 266: L278-86.

51 Potey PM، Rossi AG، Lucas CD، و همکاران. نوتروفیل ها در شروع و رفع التهاب حاد ریوی: درک عملکرد بیولوژیکی و پتانسیل درمانی J Pathol 2019؛ 247:672-85.

52 Heijink IH، Brandenburg SM، Postma DS، و همکاران. دود سیگار عملکرد سد اپیتلیال راه هوایی و بازیابی تماس سلولی را مختل می کند. Eur Respir J 2012؛ 39:419-28.

53 آقاپور م، راعی پی، مقدم سج، و همکاران. اختلال عملکرد سد اپیتلیال راه هوایی در بیماری مزمن انسدادی ریه: نقش قرار گرفتن در معرض دود سیگار Am J Respir Cell Mol Biol 2018؛ 58:157-69.

54 Shapiro SD، Goldstein NM، Houghton AM، و همکاران. نوتروفیل الاستاز به آمفیزم ناشی از دود سیگار در موش کمک می کند. Am J Pathol 2003؛ 163:2329-35.

55 Antunes MA، Rocco PRM. آمفیزم ریوی ناشی از الاستاز: بینش هایی از مدل های تجربی An Acad Bras Cienc 2011؛ ​​83:1385-96.

56 Ghosh A, Coakley RD, Ghio AJ, et al. استفاده مزمن از سیگار الکترونیکی سطوح نوتروفیل الاستاز و ماتریکس متالوپروتئاز را در ریه افزایش می دهد. Am J Respir Crit Care Med 2019؛ 200:1392–401.

57 Fortunati E، Kazemier KM، Grutters JC، و همکاران. نوتروفیل های انسانی پس از ورود به ریه صرف نظر از بیماری التهابی، به فنوتیپ فعال تغییر می کنند. Clin Exp Immunol 2009؛ 155:559-66.

58 Faith M, Sukumaran A, Pulimood AB, et al. فعالیت میلوپراکسیداز تا چه حد شاخص التهابی است؟ Clin Chim Acta 2008؛ 396:23-5.

59 Lau D, Mollnau H, Eiserich JP, et al. میلوپراکسیداز با ارتباط با اینتگرین های CD11b/CD18 باعث فعال شدن نوتروفیل ها می شود. Proc Natl Acad Sci USA 2005؛ 102:431-6.

60 Schmidt A، Oberle N، Krammer PH. مکانیسم‌های مولکولی سرکوب سلول T با واسطه treg. Front Immun 2012؛ 3:51.

61 تورنتون AM، شواچ EM. سلول های T تنظیم کننده سیستم ایمنی CD{1}}CD25+ با مهار تولید اینترلوکین 2، فعال سازی سلول های T پلی کلونال را در شرایط آزمایشگاهی سرکوب می کنند. J Exp Med 1998؛ 188:287-96.

62 Kalininskiy A, Kittel J, Nacca NE, et al. قرار گرفتن در معرض سیگار الکترونیکی، عفونت های دستگاه تنفسی، و نقص ایمنی ذاتی: مروری روایی Pediatr Med 2021؛ 4:5.

63 لوکاس R، Czikora I، Sridhar S، و همکاران. آرژیناز 1: یک واسطه غیرمنتظره اختلال عملکرد سد مویرگی ریوی در مدل‌های آسیب حاد ریه. Front Immunol 2013؛ 4:228.

64 Ween MP، Whittall JJ، Hamon R، و همکاران. فاگوسیتوز و التهاب: بررسی اثرات اجزای بخار سیگار الکترونیکی بر ماکروفاژها Physiol Rep 2017;5:e13370.

65 Gay B, Field Z, Patel S, et al. آسیب ریه ناشی از بخار: موردی از ذات الریه لیپوئیدی مرتبط با سیگارهای الکترونیکی حاوی حشیش. Case Rep Pulmonol 2020; 2020: 7151834.

66 Abeles M، Popofsky S، Wen A، و همکاران. آسیب ریه ناشی از استنشاق روغن شاهدانه. Pediatr Pulmonol 2020؛ 55:226-8.

67 Adapa S، Gayam V، Konala VM، و همکاران. سمیت حاد ریوی ناشی از بخار حشیش: سری موارد و بررسی ادبیات. J Investig Med High Impact Case Rep 2020; 8:2324709620947267.

68 Conuel EJ، Chieng HC، Fantauzzi J، و همکاران. آسیب ریه مرتبط با بخار کردن روغن کانابینوئید و ظاهر رادیوگرافی آن Am J Med 2020؛ 133: 865–7.

69 Lugade AA، Bogner PN، Thatcher TH، و همکاران. قرار گرفتن در معرض دود سیگار التهاب ریه را تشدید می کند و ایمنی را در برابر عفونت باکتریایی به خطر می اندازد. J Immunol 2014؛ 192: 5226-35.

70 Bhat TA، Kalathil SG، Miller A، و همکاران. واسطه‌های تخصصی حل‌کننده بر سرکوب سیستم ایمنی ناشی از قرار گرفتن در معرض دود سیگار غلبه می‌کنند. J Immunol 2020؛ 205:3205-17.

71 Garcia-Arcos I, Geraghty P, Baumlin N, et al. قرار گرفتن در معرض سیگار الکترونیکی مزمن در موش ها باعث ایجاد ویژگی های COPD به روشی وابسته به نیکوتین می شود. توراکس 2016؛ 71: 1119-29.

72 Booz GW. کانابیدیول یک استراتژی درمانی اضطراری برای کاهش تاثیر التهاب بر استرس اکسیداتیو است. Free Radic Biol Med 2011؛ ​​51:1054-61.

73 روزنبرگ EC، Tsien RW، Whalley BJ، و همکاران. کانابینوئیدها و صرع. Neurotherapeutics 2015؛ 12: 747-68.

74 آکادمی ملی علوم، مهندسی، پزشکی; بخش بهداشت و درمان. اثرات درمانی حشیش و کانابینوئیدها. در: اثرات حشیش و کانابینوئیدها بر سلامت: وضعیت کنونی شواهد و توصیه‌هایی برای تحقیق. انتشارات آکادمی های ملی، 2017.

75 Thiele EA، Marsh ED، French JA، و همکاران. کانابیدیول در بیماران مبتلا به تشنج مرتبط با سندرم لنوکس-گشتالت (GWPCARE4): یک کارآزمایی فاز 3 تصادفی، دوسوکور، کنترل شده با دارونما. Lancet 2018؛ 391:1085–96.

76 سازمان غذا و داروی ایالات متحده. FDA اولین داروی متشکل از یک ماده فعال مشتق شده از ماری جوانا را برای درمان اشکال نادر و شدید صرع تایید کرد. 2018. موجود: https://www.fda.gov/NewsEvents/Newsroom/PressAnnouncements/ ucm611046.htm [دسترسی در 15 سپتامبر 2021].