قسمت 1 اثرات ضد دیابتی و آنتی اکسیدانی اکتئوزید از خانواده Jacaranda Mimosifolia Biognoniaceae در دیابت ناشی از استرپتوزوتوسین-نیکوتینامید در موش صحرایی

اثرات ضد قندی و آنتی اکسیدانی گلیکوزیدهای Verbascum چگونه منعکس می شود؟

Salma A. El-Marasy1، Siham M. El-Shenawy1، Fatma A. Moharram2، Nagla A. El-Sherbeeny3* 1 گروه فارماکولوژی، مرکز تحقیقات ملی، جیزه، مصر. 2 گروه فارماکوگنوزی، دانشکده داروسازی، دانشگاه حلوان، حلوان، مصر; 3 گروه فارماکولوژی بالینی، دانشکده پزشکی، دانشگاه کانال سوئز، اسماعیلیه، مصر

خلاصه

زمینه: اکتئوزیدیک ترکیب فنیل اتانوئیدی است که ازجاکاراندا میموسیفولیا D. برگ های دان با اثر ضد دیابتی بالقوه.

اهداف:این مطالعه با هدف بررسی اثرات ضد دیابتی و آنتی اکسیدانی این گیاه انجام شداکتئوزیددر دیابت نوع 2 ناشی از استرپتوزوتوسین نیکوتین آمید (STZ-NA) در موش صحرایی

مواد و روش ها:دیابت با تزریق داخل صفاقی (IP) تک دوز STZ (52.5 mg/kg)، 15 دقیقه پس از تزریق داخل صفاقی NA (25 mg/kg) القا شد. موش ها به شش گروه تقسیم شدند. گروه اول: گروه موش‌های معمولی وسیله نقلیه را دریافت کردند، گروه دوم: گروه کنترل دیابتی، و گروه‌های III-IV: گروه‌های موش‌های دیابتی به صورت خوراکی تحت درمان قرار گرفتند.اکتئوزید(10، 20 و 40 mg/kg) یا پیوگلیتازون (30 mg/kg) به مدت 21 روز متوالی. پارامترهای بیوشیمیایی در هموژنات سرم و کبد بررسی شد. بررسی مقاطع کبدی از نظر هیستوپاتولوژی نیز انجام شد.

نتایج:اکتئوزیدموش‌های تحت درمان در مقایسه با موش‌های دیابتی کنترل، سطوح گلوکز خون، هموگلوبین گلیکوزیله، کلسترول تام، تری گلیسیرید و افزایش انسولین سرم را به‌طور معنی‌داری پایین‌تر نشان دادند. علاوه بر این،اکتئوزیدموش های تحت درمان، در مقایسه با گروه کنترل دیابتی، کاهش قابل توجهی مالون دی آلدئید، افزایش محتوای کبدی گلوتاتیون و کاهش تغییرات پاتولوژیک در کبد را نشان دادند. این اثرات با اثرات ناشی از داروی استاندارد ضد دیابت، پیوگلیتازون، قابل مقایسه بود.درونکشتگاهی, اکتئوزیدرادیکال آزاد پایدار پاک شده 1،1-دی فنیل-2-پیکریل هیدرازیل.

نتیجه:اکتئوزیدمی تواند به عنوان یک عامل درمانی بالقوه برای دیابت نوع 2 در نظر گرفته شود. با این حال، مطالعه مکانیسم های بیشتر در زمینه اثر ضد دیابتی آن توصیه می شود.

برای اطلاعات بیشتر لطفا تماس بگیرید:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche deserticola اثرات زیادی دارد، برای اطلاعات بیشتر اینجا را کلیک کنید

مقدمه

دیابت شیرین یک اختلال متابولیک مزمن است که حدود 450 میلیون بزرگسال را در سراسر جهان تحت تاثیر قرار می دهد. پیش بینی می شود که این تعداد تا سال 2045 به 629 میلیون نفر برسد [1]. این بیماری با هیپرگلیسمی ناشی از کاهش برون ده انسولین از سلول های بتای پانکراس و/یا مقاومت بافت ها در برابر عمل انسولین مشخص می شود. دیابت نوع 2 در 90 تا 95 درصد از تمام موارد دیابت یافت می شود. دیابت با خطر بالای عوارض ماکرو عروقی و میکروواسکولار (نفروپاتی، نوروپاتی و رتینوپاتی) مرتبط است [2]. اصلاح شیوه زندگی، درمان‌های دارویی و نظارت دقیق، پایه اصلی مدیریت دیابت هستند. دستیابی به کنترل گلیسمی هدف به پیشگیری یا حداقل به تاخیر انداختن عوارض دیابت کمک می کند [3]. علیرغم مزایای داروهای ضد دیابت فعلی، هر گروهی دارای اثرات نامطلوب است. بنابراین، جستجو برای درمان های جدید برای دیابت نوع 2 ضروری است. داروهای جدید باید با حداقل عوارض جانبی و هزینه مقرون به صرفه کارآمد باشند. بیماران دیابتی از داروهای طبیعی استفاده می کنند که تصور می شود کنترل قند خون را بهبود می بخشد، به ویژه در مناطقی که هزینه داروها یک چالش واقعی را تحمیل می کند [4]. جنس Jacaranda (Bignoniaceae) عمدتاً در مناطق جغرافیایی گرمسیری و نیمه گرمسیری یافت می شود. Jacaranda mimosifolia بومی برزیل است اما به عنوان یک درخت زینتی در مصر نیز کشت می شود. آکتئوزید (ورباسکوزید) از برگهای J. mimosifolia جدا شد [5]. انواع مختلفی از فعالیت های امیدوارکننده اکتئوزید در مطالعات قبلی گزارش شده است که شامل اثرات ضد التهابی [6]، [7]، محافظت از کبد [8]، آنتی اکسیدانی [9]، ضد نئوپلاستیک [10] و اثرات محافظتی عصبی [11] است. گزارش های قبلی اثر بالقوه ضد هیپرگلیسمی اکتئوزید را نشان داده اند. به عنوان مثال، اکتئوزید از گلیکاسیون پروتئین در شرایط آزمایشگاهی جلوگیری کرد، فعالیتی که با داروهای ضد دیابت مرتبط است [12]. علاوه بر این، عصاره های گیاهی حاوی اکتئوزید اثرات ضد قند خون را در دیابت نوع 2 تجربی نشان دادند [13]. علاوه بر این، آزمایش مستقیم تری از اثر بالقوه هیپوگلیسمی اکتئوزید در مطالعه توسط Morikawa و همکاران گزارش شده است. [14]؛ پس از 2 هفته مصرف روزانه آکتئوزید خوراکی همزمان با بار نشاسته در موش، تحمل گلوکز بدون تغییر قابل توجهی در وزن بهبود یافت. با این حال، اثر ضد دیابتی اکتئوزید هنوز در مدل های آزمایشی دیابت بررسی نشده است. بنابراین، این کار با هدف بررسی اثرات ضد دیابتی و آنتی اکسیدانی اکتئوزید در مدل موش دیابت نوع 2 ناشی از استرپتوزوتوسین-نیکوتینامید (STZ-NA) است.

اکتئوزیددر قوطی سیستانچضد پیری

مواد و روش ها

حیوانات

در مطالعه حاضر از موش‌های صحرایی نر آلبینو ویستار (وزن 180 تا 210 گرم) استفاده شد. موش ها از مرکز تحقیقاتی ملی (قاهره، مصر) خریداری شدند. حیوانات در شرایط استاندارد قرار گرفتند و قبل از شروع آزمایش به مدت 7 روز در آزمایشگاه اجازه داده شدند تا با آنها سازگار شوند. موش ها به طور آزاد به گلوله های غذایی استاندارد و آب دسترسی آزاد داشتند. پروتکل آزمایشی و تمام مراحل حیوانی توسط کمیته اخلاق مرکز تحقیقات ملی مصر (شماره تأیید: 18/042) تأیید شد. دستورالعمل های کمیته مطابق با راهنمای مؤسسه ملی بهداشت برای مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی است.

مواد

STZ از Sigma-Aldrich (میسوری، ایالات متحده آمریکا)، NA از Bayer Schering Pharma (سوئیس، اروپا)، و Pioglitazone از شرکت صنایع دارویی Amoun، (قاهره، مصر) تهیه شد. یک نمونه خالص از اکتئوزید توسط نویسنده چهارم ارائه شد. جداسازی اکتئوزید از برگهای J. mimosifolia همانطور که قبلا توسط محرم و مرزوق گزارش شده بود [5] انجام شد. تمام مواد شیمیایی و معرف های دیگر از درجه تجزیه ای بودند.

القای دیابت

پس از 12 ساعت ناشتایی، دیابت در موش‌ها با یک دوز داخل صفاقی STZ (52.5 میلی‌گرم بر کیلوگرم) محلول در 0.1mol/L بافر سیترات (pH 4.5) القا شد [15]. STZ 15 دقیقه پس از تزریق داخل صفاقی NA (25 میلی گرم بر کیلوگرم) داده شد [16]. 24 ساعت بعد از تزریق STZ، یک محلول گلوکز 5 درصد به موش ها داده شد تا بر خطر مرگ ناشی از شوک هیپوگلیسمی غلبه کند. پس از 48 ساعت تزریق STZ، سطح گلوکز خون در نمونه های خونی که از ورید دم برداشته شده بود با استفاده از یک گلوکومتر قابل حمل تخمین زده شد. موش‌ها فقط در صورتی دیابتی در نظر گرفته می‌شوند که گلوکز خون ناشتا بیشتر یا مساوی 250 میلی‌گرم در دسی‌لیتر باشد.

طراحی تجربی

پس از وزن کردن موش ها، آنها به طور تصادفی به شش گروه (شش موش در هر گروه) تقسیم شدند: گروه I: به عنوان کنترل معمولی (فقط آب مقطر داده می شود). گروه دوم: گروه کنترل دیابت. گروه های III-V: موش های دیابتی تحت درمان با آکتئوزید خوراکی به مدت 3 هفته (به ترتیب mg/kg 10، 20 و 40). و گروه IV: موش های دیابتی تحت درمان با پیوگلیتازون خوراکی (30 میلی گرم بر کیلوگرم) به مدت 3 هفته. وسیله نقلیه به موش های سالم و کنترل دیابتی داده شد. درمان اکتئوزید یا پیوگلیتازون پس از تایید هیپرگلیسمی، 48 ساعت پس از تزریق STZ آغاز شد. دوزهای آکتئوزید و پیوگلیتازون با توجه به داده های منتشر شده قبلی توسط لیو و همکاران انتخاب شدند. [17] و توسط ویدال و همکاران. [18] به ترتیب.

تغییرات وزن بدن وزن اولیه بدن

با وزن کردن هر موش قبل از شروع آزمایش تعیین شد. علاوه بر این، وزن نهایی بدن برای هر موش 24 ساعت پس از آخرین دوز تجویز هر دو وسیله نقلیه یا درمان با توجه به طرح مطالعه برآورد شد. درصد تغییر وزن بدن به صورت زیر محاسبه شد:

تجزیه و تحلیل بیوشیمیایی

سطح گلوکز

سطح گلوکز (mg/dl) با استفاده از کیت های خریداری شده از (Biodiagnostic، مصر) بر اساس روش Trinder [19] به صورت رنگ سنجی اندازه گیری شد.

سطح انسولین سرم

سطح انسولین سرم (µIU/ml) با کیت ایمونوسوربنت متصل به آنزیم Rat Insulin (INS) ELISA (Cusabio Biotech Co., Ltd., Hubei, China) طبق پروتکل سازنده اندازه‌گیری شد. سطح هموگلوبین گلیکوزیله (HbA1c) سطح هموگلوبین گلیکوزیله (ng/ml) با استفاده از (Rat [HbA1c] ELISA) خریداری شده از Glory Science، طبق پروتکل سازنده تخمین زده شد. سطح سرمی تری گلیسیرید و کلسترول تام سطح تری گلیسیرید (mg/dl) و کلسترول تام (mg/dl) با استفاده از روش های آنزیمی تعیین شد. کیت های تشخیصی از Biodiagnostic، مصر، به روش Fossati و Prencipe [20] استفاده شد.

تهیه هموژن بافت

بافر فسفات 1 مولار (pH 7.4). سپس، هموژنه در 4000 دور در دقیقه به مدت 5 دقیقه در یک سانتریفیوژ خنک کننده (2k15؛ Sigma/Laborzentrifugen) سانتریفیوژ شد. سپس مایع رویی برای تعیین محتوای کبد مالون دی آلدئید (MDA) و گلوتاتیون احیا شده (GSH) استفاده شد. تمام موش‌ها با بریدن سر تحت بیهوشی قربانی شدند و سپس کبد آنها خارج شد. بخشی از کبد در (20 درصد وزنی بر وزن) همگن شد.

محتوای پراکسید لیپید کبدی

محتوای MDA کبدی (نانومول در گرم بافت کبد) همانطور که توسط Satoh [21] با استفاده از یک کیت تشخیصی خریداری شده از شرکت BioDiagnostic، مصر توصیف شد، به روش رنگ سنجی تعیین شد.

محتوای GSH کبدی

براساس Beutler و همکاران، محتوای کاهش یافته GSH کبدی (mmol/g بافت کبد) با روش رنگ سنجی برآورد شد. [22] با استفاده از کیت خریداری شده از شرکت BioDiagnostic، مصر

ارزیابی اثر آنتی اکسیدانی (In vitro)

1، 1-دی فنیل-2-پیکریل هیدرازیل (DPPH) فعالیت مهار رادیکال به دنبال روش توصیف شده توسط Peiwu و همکاران تعیین شد. [23]. اگر این ترکیب یک آنتی اکسیدان باشد که بتواند هیدروژن اهدا کند، با DPPH واکنش نشان می دهد. این واکنش باعث تغییر رنگ DPPH از بنفش عمیق به زرد می شود. این تغییر رنگ با استفاده از اسپکتروفتومتر در طول موج 517 نانومتر اندازه گیری شد. اسید اسکوربیک در غلظت 1.1 مولار 0 استاندارد بود [24]. فعالیت مهار رادیکال DPPH بر اساس این معادله محاسبه شد: درصد فعالیت مهار رادیکال=(Ac-At)/ Ac×100 (1) که در آن Ac و At به ترتیب جذب کنترل (DPPH) و اکتئوزید هستند.

بررسی هیستوپاتولوژیک

بافت کبد از موش ها گرفته شد و در فرمالدئید 10 درصد به مدت 24 ساعت ثابت شد. سپس بافت ها برای به دست آوردن مقاطع 4 میکرومتری پارافینی پردازش شدند. مقاطع بافتی با رنگ آمیزی هماتوکسیلین و ائوزین رنگ آمیزی شدند و با استفاده از میکروسکوپ نوری مورد بررسی قرار گرفتند [25].

تحلیل آماری

نتایج به عنوان میانگین ± SEM برای شش موش در هر گروه بیان می شود. مقایسه بین بیش از دو گروه با استفاده از آنالیز واریانس یک طرفه و سپس آزمون مقایسه چندگانه توکی انجام شد. همه تجزیه و تحلیل ها با استفاده از بسته آماری GraphPad Prism 6.{2}} برای ویندوز (GraphPad، San Diego، Calif.) انجام شد. معنی‌داری آماری در p < 0.05="" تنظیم="">

سیستانچعملکرد:اکتئوزیدمی توانضد پیری

نتایج

اثر اکتئوزید بر وزن بدن

شکل 1 نشان می دهد که دیابت ناشی از یک دوز IP STZ (52.5 میلی گرم بر کیلوگرم) 15 دقیقه پس از تزریق داخل صفاقی NA (25 میلی گرم بر کیلوگرم) منجر به کاهش وزن قابل توجه درصدی از وزن بدن تا 11 شد. {6}} 1.32 ± پس از 3 هفته از القای دیابت. در همین حال، موش های نرمال افزایش معنی داری در درصد وزن بدن با 1.85 ± 22.74 نشان دادند. آکتئوزید به صورت خوراکی در دوزهای 10، 20 و 40 میلی‌گرم بر کیلوگرم به مدت 21 روز متوالی به موش‌های دیابتی داده شد که منجر به افزایش معنی‌دار درصد وزن بدن به میزان 1.14 ± 19.05، 1 ± 16.92 شد.{25}} و به ترتیب 22.98 ± 1.21. به طور مشابه، پیوگلیتازون خوراکی با 30 میلی گرم بر کیلوگرم افزایش قابل توجهی در درصد وزن بدن 2.13 ± 25.59 نشان داد.

اثر اکتئوزید بر گلوکز خون، سطح انسولین و HbA1c

همانطور که در جدول 1 نشان داده شده است، موش های دیابتی افزایش قابل توجهی در گلوکز خون به سطح 318.7 ± 13.8 میلی گرم در دسی لیتر نشان دادند در حالی که میانگین سطح موش های سالم 4.15 ± 81.51 میلی گرم در دسی لیتر بود. سه هفته درمان خوراکی با آکتئوزید (10، 20 و 4{{40}} mg/kg) باعث کاهش قابل توجه گلوکز خون به 111.3{{5} شد. 0}} ± 0.61، 74.88 ± 3.23، و 75.15 ± 8.45 mg/dl، در مقابل مقدار کنترل. علاوه بر این، پیوگلیتازون (30 میلی‌گرم/کیلوگرم) سطح گلوکز خون را به 103.{26}} ± 3.12 میلی‌گرم در دسی لیتر در مقابل مقدار کنترل موش‌های دیابتی کاهش داد. با توجه به سطوح سرمی انسولین، موش‌های دیابتی شاهد کاهش معنی‌داری سطح انسولین سرم 0.07 ± 1.25 میکروIU/ml را نشان دادند، در حالی که موش‌های سالم 0.27 ± 5.32 میکروIU/ml نشان دادند. درمان خوراکی با آکتئوزید (mg/kg 10) منجر به افزایش معنی‌دار سطح انسولین سرم به 0.06 ± 3.23 میکروIU/ml در مقایسه با گروه‌های دیابتی و عادی شد. آکتئوزید در دوز 20 میلی گرم بر کیلوگرم سطح انسولین سرم را به 21/0 ± 38/5 میکروIU/ml در مقایسه با کنترل موش های صحرایی دیابتی بازگرداند. درمان خوراکی با آکتئوزید 40 میلی گرم بر کیلوگرم به طور قابل توجهی سطح انسولین سرم را به 20/0 ± 80/6 میکروIU/ml نسبت به مقادیر دیابتی و نرمال کنترل کرد. درمان با پیوگلیتازون منجر به افزایش قابل توجهی در سطح انسولین سرم به 0.16 ± 8.{53}} در مقایسه با مقادیر دیابتی و عادی شد (جدول 1). همانطور که در جدول 1 نشان داده شده است، موش های دیابتی کنترل سطح HbA1c به طور قابل توجهی 3.39 ± 40.30 نانوگرم در میلی لیتر در مقایسه با میانگین مقادیر طبیعی 0.21 ± 3.36 نانوگرم در میلی لیتر داشتند. آکتئوزید در دوزهای 10 و 20 میلی گرم بر کیلوگرم افزایش معنی داری در سطوح HbA1c به ترتیب 1.88 ± 24.12 نانوگرم در میلی لیتر و 1.06 ± 16.72 ng / ml در مقایسه با مقادیر موش های دیابتی کنترل و موش های سالم نشان داد. Acteoside (40 mg/kg) به طور قابل توجهی سطح HbA1c را به 10.18 ± 0.92 نانوگرم در میلی لیتر در مقایسه با موش های دیابتی کنترل کاهش داد. به طور مشابه، پیوگلیتازون به طور قابل توجهی سطح HbA1c را به ng/ml 0.29 ± 6.42 در مقابل مقادیر موش های دیابتی کنترل کاهش داد.

اثر اکتئوزید بر سطح کلسترول تام و تری گلیسیرید

اثر اکتئوزید بر کلسترول تام و تری گلیسیرید در جدول 2 نشان داده شده است. موش های صحرایی دیابتی شاهد افزایش معنی داری در کلسترول تام را 28/4 ± 35/139 میلی گرم در دسی لیتر در مقایسه با مقادیر نرمال 38/2 ± 38/94 میلی گرم در دسی لیتر نشان دادند. تیمار خوراکی با آکتئوزید (10، 20 و 40 میلی‌گرم بر کیلوگرم) سطح کلسترول تام را به ترتیب به 1.08 ± 96.24، 1.60 ± 90.62 و 4.65 ± 95.14 میلی‌گرم در دسی لیتر کاهش داد. به همین ترتیب، پیوگلیتازون (30 میلی‌گرم بر کیلوگرم) سطح کلسترول تام را به 17/4 ± 80/96 میلی‌گرم در دسی‌لیتر در مقابل مقدار کنترل موش‌های دیابتی بازگرداند. در رابطه با سطح تری گلیسیرید، موش‌های دیابتی شاهد افزایش معنی‌داری در سطح تری‌گلیسرید 33/3 ± 90/153 میلی‌گرم در دسی‌لیتر در مقایسه با مقادیر طبیعی 2 ± 80/107 میلی‌گرم در دسی‌لیتر نشان دادند. تیمار خوراکی با آکتئوزید (10، 20 و 40 میلی‌گرم بر کیلوگرم) سطح کلسترول تام را به 46/6 ± 59/118، 19/4 ± 27/100 و 20/3 ± 89/91 میلی‌گرم بر دسی لیتر در مقایسه با مقدار کنترل موش‌های دیابتی بازگرداند. علاوه بر این، پیوگلیتازون سطح تری گلیسیرید را به 9.14 ± 108.98 میلی گرم در دسی لیتر در مقایسه با موش های دیابتی کنترل بازگرداند.

اثر اکتئوزید بر MDA و GSH در کبد

نتایج نشان داده شده در شکل 2a نشان می دهد که موش های دیابتی کنترل به طور قابل توجهی محتوای MDA کبدی را به 65.27 ± 2.63 نانومول بر گرم در مقایسه با موش های معمولی 38.94 ± 1.57 نانومول بر گرم افزایش دادند. درمان خوراکی با آکتئوزید (10، 20 و 40 میلی‌گرم بر کیلوگرم) محتوای MDA کبدی را به ترتیب به 2.14 ± 32.63، 2.75 ± 36.14 و 1.14 ± 39.40 نانومول بر گرم در مقایسه با مقدار MDA در موش‌های دیابتی کنترل بازگرداند.

به طور مشابه، پیوگلیتازون (30 میلی‌گرم/کیلوگرم) محتوای MDA کبدی را به 3.49 ± 39.3 nmol/g در مقایسه با موش‌های دیابتی کنترل برگرداند. با توجه به محتوای GSH کبدی، موش های دیابتی کنترل به طور قابل توجهی محتوای GSH کبدی را به 6.61 ± 0.17 mmol/g کاهش دادند در حالی که مقادیر نرمال 8.69 ± 0.16 mmol/g بود. Acteoside (10، 20، و 40 mg/kg) به طور قابل توجهی محتوای GSH کبدی را به 0.37 ± 8.99، 0.21 ± 8.30 و 0.39 ± 8.56 میلی مول در گرم در مقایسه با موش های دیابتی کنترل افزایش داد. . علاوه بر این، درمان خوراکی با پیوگلیتازون (30 میلی‌گرم/کیلوگرم) GSH کبدی را به 9. ± 0.30 mmol/g در مقایسه با مقدار موش‌های دیابتی کنترل (شکل 2b) بازگرداند.

فعالیت آنتی اکسیدانی آکتئوزید در شرایط آزمایشگاهی

فعالیت آنتی اکسیدانی در شرایط آزمایشگاهی اکتئوزید در مقابل اسید آسکوربیک (غلظت 0.1 مولار)، با استفاده از روش فعالیت مهار رادیکال DPPH در شکل 3 نشان داده شده است. 100 و 50 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر) حداکثر نرخ واکنش واکنشی را به ترتیب 74.4، 74، 73 و 72.3 درصد نشان دادند. به همین ترتیب، نرخ واکنش واکنشی اسید ال اسکوربیک 82.5 درصد بود.

اکتئوزیدکه درسیستانچتوابع زیادی دارند

تأثیر اکتئوزید بر بررسی هیستوپاتولوژیک کبد

در موش های سالم، هیچ گونه تغییرات هیستوپاتولوژیک مشاهده نشد. ساختار بافتی طبیعی ورید مرکزی و سلول های کبدی اطراف آن در پارانشیم در گروه نرمال ثبت شد (شکل 4a). تغییرات پاتولوژیک که در کبد موش‌های دیابتی کنترل ثبت شد، گشاد شدن شدید و احتقان ورید مرکزی و پورتال همراه با تکثیر کلاژن و نفوذ سلول‌های التهابی کمی در بافت پری مجرای اطراف مجاری صفراوی هیپرپلاستیک در ناحیه پورتال بود (شکل 4b و c). ). آپوپتوز در تعداد کمی از سلول های کبدی مرتبط با تکثیر سلول های منتشر شناسایی شد (شکل 4d). موش هایی که به ترتیب با آکتئوزید (10، 20 و 40 میلی گرم بر کیلوگرم) به صورت خوراکی تحت درمان قرار گرفتند، کاهش قابل توجهی در ضایعات هیستوپاتولوژیک ذکر شده قبلی نشان دادند (شکل 4e، f، و 5a-d) که در گروه دیابتی کنترل مشاهده شد. گروه دوم). گروه دیابتی تحت درمان با پیوگلیتازون (گروه IV) نفوذ سلول های التهابی کمی را در ناحیه پورتال نشان داد (شکل 5e). علاوه بر این، تکثیر سلول های کوپفر منتشر در بین سلول های کبدی وجود داشت (شکل 5f).